CENTRO UNIVERSITRIO MOURA LACERDA CURSO DE AGRONOMIA

Comparao entre milhos transgnicos Bt no controle de lagartas em campo

MAURICIO BIANCHI MASSON

Ribeiro Preto, SP 2013

CENTRO UNIVERSITRIO MOURA LACERDA CURSO DE AGRONOMIA

Comparao entre milhos transgnicos Bt no controle de lagartas em campo

MAURICIO BIANCHI MASSON

Orientador: Prof. Dr. Alexandre de Sene Pinto

Trabalho apresentado ao Centro Universitrio Moura Lacerda, como exigncia para obteno do ttulo de Engenheiro Agrnomo.

Ribeiro Preto, SP 2013

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A Deus, por sempre estar ao meu lado, a minha famlia, ao meu pai Mrcio e minha me Luisa, pelo incansvel esforo de me apoiar, por me aconselharem e pela educao que me forneceram. A todo o grupo G.bio que esteve ao meu lado por todo o decorrer do trabalho. A vocs dedico este trabalho. DEDICO

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AGRADECIMENTOS

Agradeo primeiramente a toda minha famlia, que me apoiou e deu muita fora nesses quatro anos de faculdade. Agradeo ao meu orientador, Prof. Alexandre, pela ajuda, dedicao e pacincia que teve comigo durante o decorrer deste trabalho. Ao grupo G.bio, pelo apoio nos trabalhos de campo e pela amizade. Agradeo tambm aos meus amigos, em especial Bruno Marin Arroyo, Murilo Gaspar Litholdo, Jos Lucas Camacho, Vincius Loureno Lopes, Tas Lima da Silva, Eduardo Augusto Fonseca Ivan, Bruna Zanatto, Michele Adriani Berigo, Eduardo Lima Nunes, Jos Vitor dos Reis, Danilo Augusto Sanita, Abilio Jos Meiato Barrionuevo de Oliveira, Lucas Vincius Cantori, Paulo Renato Zanon, Pedro Gomes, Otvio Correa Lemos, Leonardo Henrique de Oliveira Gonalves, Pedro Antnio Bezerra, Gustavo Pedrazzi, Carolina Veluci Brondi, Vivian Bernascone Villela dos Reis, Renata Mastrantonio de Souza, Jhonathan Aparecido Vilela de Carvalho, Walter Mendes Neto, Mauricio Cardoso Picinato e Danilo Loboschi que me apoiaram durante o experimento. A Dow AgroSciences, em nome do Dr. Antonio Cesar dos Santos e Luiz Henrique da Silva Fagundes Marques, pela idealizao do projeto e pela cesso do material necessrio para sua execuo, alm da minha bolsa. Um agradecimento a todos os professores e funcionrios ligados ao curso de Agronomia do Centro Universitrio Moura Lacerda.

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SUMRIO

PGINA RESUMO ............................................................................................. SUMMARY .......................................................................................... 1 INTRODUO .................................................................................... 2 REVISO DE LITERATURA ............................................................... 2.1 Danos de Spodoptera frugiperda em milho ............................ 2.2 Danos das pragas de solo Agrotis ipsilon e Elasmopalpus lignosellus em milho ................................................................. 2.3 Danos das pragas da parte area Spodoptera cosmioides e S. eridania em milho .............................................................. 2.4 Uso de milho transgnico no controle de lagartas ................ 3 MATERIAL E MTODOS .................................................................... 3.1 Avaliaes da lagarta-elasmo, E. lignosellus, em plntulas de milho no solo ........................................................................ 3.2 Avaliaes da lagarta-rosca, A. ipsilon, em plntulas de milho no solo ............................................................................. 3.3 Avaliaes de S. cosmioides em plntulas de milho no solo ............................................................................................. 3.4 Avaliaes de S. cosmioides em plantas de milho, na parte area ........................................................................................... 24 22 22 20 13 16 19 10 vi vii 1 3 3

PGINA 3.5 Avaliaes da lagarta-do-cartucho na parte area ................. 4 RESULTADOS E DISCUSSO .......................................................... 4.1 Comparao entre milhos transgnicos Bt quanto aos danos causados pela lagarta-elasmo em plntulas ............... 4.2 Comparao entre milhos transgnicos Bt quanto aos danos causados pela lagarta-rosca em plntulas .................. 4.3 Comparao entre milhos transgnicos Bt quanto aos danos causados por Spodoptera cosmioides em plntulas . 4.4 Comparao entre milhos transgnicos Bt quanto aos danos causados por S. cosmioides em plantas (V4-5) 4.5 Comparao entre milhos transgnicos Bt quanto aos danos causados por Spodoptera frugiperda em plantas ...... 5 CONCLUSES ................................................................................... 6 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ................................................... 35 40 42 31 30 28 27 25 27

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RESUMO

Este trabalho teve por objetivo comparar o desempenho de milhos transgnicos Bt no controle de lagartas em plntulas e no perodo vegetativo da cultura do milho. O trabalho foi conduzido em Ribeiro Preto, SP. Os gentipos utilizados foram semeados em 23/11/2012 e 06/02/2013, sendo avaliados os danos de Elasmopalpus ligosellus (Zeller) e Agrotis ipsilon (Hufnagel) no primeiro ensaio, Spodoptera cosmioides (Walker), no segundo, e de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith), nos dois. Os tratamentos foram: (1) milho convencional 2B587 (testemunha, sem controle); (2) milho transgnico expressando os genes Cry1F + pat + Cry1A105 + Cry2Ab2 + EPSPS (2B587, PowerCore); (3) Cry1A105 + Cry2Ab2 (DKB 390, YieldGard VT PRO); (4) Vip3A + pmi (Status, Agrisure Viptera); (5) Vip3A + Cry1Ab + EPSPS + pmi (Maximus, Agrisure Viptera 3); (6) Cry1F + pat (2B587, Herculex); (7) Cry1Ab + Cry1F + EPSPS + pat (30F53, Optimum Intrasect). As parcelas foram formadas por uma linha espaada em 0,7 m de 2 m, com 10 plantas, com barreiras para impedir a sada dos insetos infestados artificialmente (exceto para S. frugiperda). Todos os milhos transgnicos Bt foram eficazes no controle de E. lignosellus, exceto Viptera, de S. cosmioides de 3 nstar, exceto VT Pro, e de S. frugiperda. Para lagartas de S. cosmioides de 4 nstar, somente na fase de plntula os demais transgnicos foram eficazes. Nenhum dos transgnicos testados foi eficaz no controle de A. ipsilon, mas a metodologia utilizada deve ter influenciado esse resultado. Palavras-chave: pragas agrcolas, Zea mays, Noctuidae, Pyralidae.

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SUMMARY

Comparison of transgenic Bt corn to control lepidopteran pests in the field. This study aimed to compare the performance of transgenic Bt corn to control lepidopteran pests on seedlings and growing season of maize. The study was conducted in Ribeiro Preto, SP, Brazil. The genotypes were sown on 2012, November 23rd and 2013, February 2nd and evaluated damage by Elasmopalpus ligosellus (Zeller) and Agrotis ipsilon (Hufnagel) in the first trial, Spodoptera cosmioides (Walker), in the second, and Spodoptera frugiperda (JE Smith) in both. The treatments were: (1) conventional corn 2B587 (no pest control), (2) transgenic corn expressing the Cry1F + pat + Cry1A105 + Cry2Ab2 + EPSPS genes (2B587, PowerCore), (3) Cry1A105 + Cry2Ab2 (DKB 390 , YieldGard VT PRO), (4) Vip3A + pmi (Status, Agrisure Viptera), (5) Vip3A + Cry1Ab + EPSPS + pmi (Maximus, Agrisure Viptera 3), (6) Cry1F + pat (2B587, Herculex), (7) Cry1Ab + Cry1F + EPSPS + pat (30F53, Intrasect Optimum). The plots were formed by a line spaced at 0.7 m x 2 m with 10 plants and barriers to prevent the departure of artificially infested insects (except for S. frugiperda). All transgenic Bt maize were effective in controlling E. lignosellus except Viptera, S. cosmioides 3rd instar, except VT Pro, and S. frugiperda. For larvae of S. cosmioides 4th instar, only at seedling stage the other transgenics were effective. None of the transgenic tested was effective in controlling A. ipsilon, but the methodology used must have influenced this result. Key words: crop pests, Zea mays, Noctuidae, Pyralidae.

1 INTRODUO

A lagarta-do-cartucho, Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera, Noctuidae) a principal praga do milho em todas as regies do Brasil e uma das principais pragas desta cultura na Amrica do Sul e Amrica Central (EMBRAPA, 1997). Ocorre durante todos os estdios de desenvolvimento da cultura, atacando as folhas do cartucho, diminuindo a rea fotossinttica da planta, podendo destru-las completamente, podendo causar perda de 15 a 37% na produtividade (EMBRAPA, 1997). Pode atacar espigas no final do ciclo da cultura ocasionando grandes prejuzos (PINTO; PARRA; OLIVEIRA, 2004). Existem outras lagartas que so prejudiciais cultura, atacando a cultura na fase de germinao, como a lagarta-elasmo, Elasmopalpus lignosellus (Zeller) (Lepidoptera: Pyralidae), Agrotis ipsilon (Hufnagel), S. eridania (Cramer) e S. cosmioides (Walker) (Lepidoptera: Noctuidae), destruindo colmos e espigas, como a broca-da-cana, Diatraea saccharalis (Fabr.) (Lepidoptera: Crambidae), e danificando espigas, como a lagarta-daespiga, Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera: Noctuidae) (GALLO et al., 2002; PINTO; PARRA; OLIVEIRA, 2004). O mtodo de controle da lagarta-do-cartucho mais utilizado no Brasil o qumico (GALLO et al., 2002), o qual possui uma ampla gama de inseticidas indicados para esta praga. Na concepo de manejo integrado, a meta no simplesmente aniquilar a praga, o mais importante a reduo da populao a um limite compatvel com a produo econmica da cultura e a consequente manuteno da qualidade ambiental (CRUZ, 1995). Por isso, o controle biolgico de pragas tem aumentado sua importncia no Brasil para o milho,

sendo o uso de bactrias, como Bacillus thuringiensis (Berliner) (SILVAWERNECK et al., 2000), bastante promissor. Como bioinseticida, a bactria B. thuringiensis, estirpe HD1, vem sendo usada h dcadas (FEITELSON; PAYNE; KIM, 1992) e est registrada sem limitao de uso para o controle de vrias espcies-praga de Lepidoptera. Uma das fraes ativas produzidas pelo Bt so protenas acumuladas em forma de cristal no interior das clulas, denominadas Cry, que podem constituir mais de 30% do total de protenas da clula (HERMSTADT et al., 1986). Com o advento da biotecnologia, foi desenvolvida uma nova ttica de controle de pragas que consiste nas plantas geneticamente modificadas (transgnicas) resistentes a insetos. Por meio de apuradas tcnicas de laboratrio um gene de B. thuringiensis (Bt) foi introduzido em plantas de milho, dando origem ao milho geneticamente modificado, conferindo alto padro de resistncia da planta a algumas espcies de lepidpteros-praga (ARMSTRONG et al., 1995). O gene introduzido codifica a expresso de protenas Bt, com ao inseticida, efetiva no controle de lepidpteros como S. frugiperda (HUANG et al., 2002). As lagartas, ao se alimentarem do tecido foliar do milho geneticamente modificado, ingerem esta protena, que atua nas clulas epiteliais do tubo digestivo dos insetos. A protena promove a ruptura osmtica destas clulas, determinando a morte dos insetos, antes que os mesmos consigam causar danos cultura (GILL; COWLES; PIETRANTONIO, 1992; PIETRANTONIO; FEDERICI; GILL, 1993; GILL, 1995; MEYERS et al., 1997). Este trabalho teve por objetivo comparar o desempenho de milhos transgnicos Bt no controle de lagartas em plntulas e no perodo vegetativo da cultura do milho.

REVISO DE LITERATURA

2.1 Danos de Spodoptera frugiperda em milho

A lagarta-do-cartucho, Spodoptera frugiperda, pode ser encontrada nas Amricas e em algumas ilhas a oeste da ndia (CRUZ, 1995). Cerca de 26 espcies do gnero Spodoptera eram conhecidas no mundo todo at a reviso de Mochida e Okada (1974), sendo que S. frugiperda era encontrada apenas nas Amricas. Ashley et al. (1980) consideraram essa espcie como a responsvel pela maior parte do dano causado em milho, em razo de sua ocorrncia em maior nmero nessa lavoura. A lagarta-do-cartucho uma das mais importantes pragas da cultura do milho no Brasil e atualmente pode ser considerada a praga mais importante do pas, pois tem causado prejuzos srios a diversas outras culturas, tais como algodo, arroz, cana-de-acar, gramneas em geral etc. (PINTO; PARRA; OLIVEIRA, 2004). Alimenta-se de plantas de milho em todos os estdios fenolgicos da cultura, mostrando preferncia pelas folhas do cartucho de plantas novas. Os prejuzos podem chegar a 34% na produo, caso esta praga no seja controlada (CRUZ, 1995). Com a intensificao do plantio do tipo safrinha no Brasil, a lagarta do-cartucho passou a atacar plantas novas, cortando-as rente ao solo, como faz a lagarta-rosca, Agrotis spp. Tambm ataca espigas novas, perfurando-as

na regio mediana ou entrando pela regio apical, como a lagarta-da-espiga, Helicoverpa zea (Boddie) (GALLO et al., 2002). Em algumas regies do estado da Bahia, a lagarta-do-cartucho tem atacado espigas granadas, prximas ao perodo da colheita (PINTO; PARRA; OLIVEIRA, 2004). Foott e Timmins (1982) encontraram at 71% das espigas amostradas com danos nos gros, provocados por S. frugiperda. As lagartas recm-eclodidas de S. frugiperda se alimentam das folhas mais novas do milho, raspando-as. Nessa fase, atacam todas as folhas centrais, destruindo-as completamente, e medem aproximadamente 50 mm de comprimento. Sua colorao varia de pardo escura, verde at quase preta. Apresentam trs finssimas linhas longitudinais branco-amareladas na parte dorsal do corpo. Na parte lateral logo abaixo da linha branco amarelada, existe uma linha escura mais larga e, inferiormente a esta, uma listra amarela irregular marcada com vermelho. Findo o perodo larval, as lagartas penetram no solo, onde se transformam em pupas de colorao avermelhada, medindo cerca de 15 mm de comprimento. A mariposa mede cerca de 35 mm de envergadura, sendo as asas anteriores pardo escuras e as posteriores brancoacinzentadas (GALLO et al., 2002; PINTO; PARRA; OLIVEIRA, 2004). Segundo Gallo et al. (2002), essa lagarta ataca o cartucho do milho chegando a destru-lo completamente e, nesse caso, chama a ateno a quantidade de excrees existentes na planta. Essa praga pode reduzir, atravs da destruio das folhas, a produo do milho em at 20%, sendo o perodo crtico de seu ataque na poca prxima do florescimento. Portillo et al. (1991) verificaram em milho e sorgo no sul de Honduras que dentre vrias espcies de lepidpteros que ocorreram nas culturas em 1988/89, S. frugiperda era a espcie predominante e suas populaes foram maiores em parcelas livres de plantas daninhas. Um levantamento realizado na cultura do milho em Minas Gerais, em 1993/94, por Matrangolo, Cruz e Della Lucia (1997), mostrou predominncia alternada de S. frugiperda e H. zea em estilos-estigmas da planta.

Rizzo e La Rossa (1992) estudaram alguns aspectos da biologia de S. frugiperda em laboratrio (27-30C, 65-70% de UR e fotoperodo de 13L:11E). A durao das fases de desenvolvimento foi de 2-3, 18-24, 11-12 e 31-39 dias, respectivamente para ovo, seis nstares larvais, pupa e ciclo total, com longevidade de 9-12 dias. Sabe-se que os fatores climticos interferem nas diferentes fases de desenvolvimento da S. frugiperda, por isso, Ramirez Garcia, Bravo Mojica e Llanderal Cazares (1987) determinaram que a temperatura ideal para o desenvolvimento dos ovos desta praga de 28C. Neste mesmo trabalho os autores verificaram que as fmeas mostraram uma maior fecundidade 25C, e que machos criados 30C apresentavam deformao em suas asas. A partir de infestaes artificiais de plantas de milho, no Mxico, com lagartas de S. frugiperda, Vzquez et al. (1975) observaram que o nvel de 12 lagartas por planta foi o que mais prejudicou a cultura. Em Ontrio, no Canad, Foott e Timmins (1982) comentaram que as infestaes de S. frugiperda (que migra dos EUA) em milho causaram uma reduo na produo de mais de 200 kg/ha, em 1977, e que em 1978-1980 as perdas foram menores e em 1981, no ocorreram. Durante 1978/1979, Cruz e Turpin (1983) infestaram diferentes quantidades de plantas de milho no estgio de cartucho, em Indiana, EUA, para posterior avaliao dos danos causados, que foi realizada pela avaliao visual de danos nas folhas e avaliao da produo. Observaram perdas de 17% quando 20 ou 100% das plantas das parcelas foram infestadas com massas de ovos, existindo uma relao inversamente proporcional e linear entre os danos nas folhas e a produo, a qual foi prejudicada pela reduo no nmero de gros na espiga de plantas infestadas. Na Gergia, EUA, durante 1979-1981, Wiseman e Widstrom (1984) observaram que a infestao artificial com larvas de S. frugiperda em milho doce e para gro, no estgio de seis folhas e nas razes de 10, 20 ou 40 lagartas/planta, causou um dano significativamente maior que as infestaes realizadas no estgio de 12 folhas. Tambm verificaram que duas infestaes

com lagartas causaram maior dano que apenas uma e a avaliao de 10 plantas por parcela foi mais preciso que a avaliao visual de danos. Harrison (1986) estudou o efeito imediato da oviposio de S. frugiperda em plantas de milho em Maryland, EUA, e determinou que logo aps a ecloso as lagartas se alimentaram das folhas do cartucho e os danos tornaram-se visveis logo que as folhas cresceram, saindo do cartucho, cerca de 13 dias aps a oviposio. O nmero de plantas infestadas pelas lagartas de cada massa de ovos dependeu parcialmente da densidade de ovos, sendo que de 5 a 20 massas de ovos por 100 plantas causou um dano de 5,16 a 3,06 plantas, respectivamente para cada densidade. O milho colhido em campos comerciais do oeste do Estado de Nova Iorque, EUA, foi classificado quanto aos danos causados e presena de lagartas de S. frugiperda, por Shelton (1986), durante 1982/1983. Nos dois anos, os danos causados pelo noctudeo em folhas novas foram grandes e progressivos, ficando ao redor de 6,43 e 6,94%, respectivamente para os anos de 1982 e 1983. Ainda em Maryland, Harrison e Harrison (1987) correlacionaram as perdas na produo de milho com os danos causados pelas lagartas de S. frugiperda e observaram que em 1983 e 1985 mais de 31% das perdas foram correlacionadas com o ataque desta praga no estgio de cartucho. Na Nicargua, Hruska e Gladstone (1988) estudaram o efeito do perodo e do nvel de infestao pelo noctudeo na produo de milho irrigado, em 1987, determinando que infestaes de 100% causaram 45% de reduo na produo e chegando ao clculo do nvel de dano econmico de 2%, valor este baixo devido aos subsdios oferecidos aos agrotxicos naquele pas. Hruska (1989) estudou, durante 1987 na Nicargua, os perodos crticos de infestao de S. frugiperda em milho irrigado e verificou que no existiram diferenas significativas entre os mesmos na produo, necessitando de mais estudos para uma concluso definitiva. Com uma infestao artificial das plantas de 10%, aos 25 dias da germinao, obteve-se uma reduo na

produo de 4,5%, e quando 100% das plantas foram infestadas, aos 23 dias aps a germinao, 45% de reduo na produo foi obtida. Em Nova Jersey, EUA, Ghidiu e Drake (1989) estudaram os danos do noctudeo em cinco estgios de desenvolvimento de milho doce e em cinco nveis de infestao larval. As lagartas se alimentaram de folhas e tecidos e se desenvolveram dentro dos cartuchos da fase inicial at o meio deste estgio. O dano no cabelo do milho ocorreu principalmente durante o meio at o incio do estgio de cartucho e cessou aps o embonecamento iniciar e tornar-se exposto. Logo que iniciou o embonecamento, as lagartas atacaram as espigas em desenvolvimento, perfurando as mais novas, causando perda de qualidade para o consumo do produto fresco. As plantas infestadas durante o incio do estgio de embonecamento tiveram menos espigas comercializveis que aquelas que foram infestadas em estgios inferiores. Os danos nas folhas, a porcentagem de estilos-estigmas danificada e a porcentagem de espigas perfuradas aumentaram com o aumento no nmero de lagartas por planta. Os nveis de danos econmicos para infestaes de S. frugiperda foram determinados por Evans e Stansly (1990), em milho, durante 1986, no Equador. A metodologia adotada foi o controle de lagartas a partir de pulverizaes semanais com inseticida, para determinar o efeito dos danos da praga, em cada estgio de desenvolvimento, na perda de produo. Os autores observaram que as maiores perdas na produo foram obtidas quando o ataque ocorreu na segunda semana aps a germinao do milho, ocorrendo queda nestas perdas aps o embonecamento do milho. Os nveis de danos econmicos obtidos a partir de anlise de regresso dos dados aumentaram de 11 a 42% de infestao durante as primeiras seis semanas aps a emergncia das plntulas. A utilizao de nveis de danos variveis com o estgio da cultura pode resultar em menores custos de controle que quando se utilizado um nvel fixo. Williams e Davis (1990) estudaram o efeito da infestao artificial de milho com lagartas de S. frugiperda. Os autores verificaram que 30 lagartas por

planta resultou em um grande dano foliar, 13% de reduo na produo e nenhum dano no comprimento das espigas. Na Flrida, EUA, Marenco, Foster e Sanchez (1992) estudaram a resposta do milho doce ao ataque de S. frugiperda, durante 1988-1989. Os danos de alimentao da praga durante o incio at o meio do estgio de cartucho (V1-V9) reduziram significativamente a altura da planta, o dimetro do caule, a rea foliar e o peso seco e fresco da parte area das plantas. Protegendo as plantas durante o final do estgio de cartucho (V 9-R1) resultou em maiores produes e baixas porcentagens de espigas danificadas, enquanto que a proteo no meio do estgio de cartucho (V 6-V9) no foi to importante quanto a anterior, mas foi mais importante que durante o incio do estgio (V1-V6). As densidades de pragas to baixas quanto 0,2-0,8 lagartas/planta durante o final do estgio de cartucho podem ser suficientes para reduzir a produo em 5-20%. Em Tucumn, na Argentina, Willink, Osores e Costilla (1994) constataram que o noctudeo preferiu os estgios vegetativos mais novos do milho. Hruska e Gould (1997) estudaram o efeito de infestaes no estgio de cartucho na produo de gros de milho, separando e efeito do perodo de infestao do nvel de infestao. Os resultados mostraram que o milho mais tolerante s infestaes do noctudeo durante os primeiros estgios de crescimento. As infestaes que ocorreram durante a segunda metade do estgio de cartucho causaram perdas na produo de 15-73% quando 55100% das plantas foram infestadas com o noctudeo. O nvel de dano econmico variou de 23 a 63% das plantas infestadas. Algumas pesquisas foram realizadas no Brasil. Carvalho (1970) estudou os danos causados por lagartas de S. frugiperda em milho, utilizandose de um escala visual de notas, em diferentes estgios de desenvolvimento. Pode-se observar que no hbrido simples macho estril da Agroceres a reduo na produtividade chegou a 34%. Alm disso, pode-se determinar que plantas com cartuchos bastante danificados sofreram perdas na produo de 15 a

35%, para plantas com 35 dias, 29 a 60%, para plantas com 49 dias, e, 34,1%, para plantas com 60 dias aps a semeadura. Sales e Montenegro (1981) estudaram a interferncia de S. frugiperda na produo de milho em Fortaleza, CE, e observaram que as plantas so atacadas desde plntulas at a colheita. Cruz e Turpin (1982) avaliaram o efeito de S. frugiperda em diferentes estgios de crescimento da cultura de milho. Cerca de 50 ovos foram confinados em cada planta. O estgio mais suscetvel a lagarta-do-cartucho foi o de 8-10 folhas, ou seja, aproximadamente 40 dias aps o plantio. A reduo da produtividade, para infestaes neste estgio, foi de 18,7%. Quando a infestao ocorreu nos estgios de 4-6 folhas, pendoamento e 12-14 folhas, a reduo foi de 6,6; 7,6 e 8,6%, respectivamente. Nenhuma reduo foi observada no estgio de embonecamento. Uma anlise dos danos produzidos por S. frugiperda na cultura do milho foi realizada por Boia Jr. et al. (1992), utilizando-se, para as avaliaes a escala de notas proposta por Cruz e Turpin (1982). O trabalho mostrou que a proteo da cultura quando esta atingiu a nota 3 (plantas com folhas furadas) e nos perodos de proteo aos 35 e 45 dias da emergncia, proporcionou maior peso de gros e maior peso de espigas de milho. Grtzmacher, Martins e Cunha (2000) determinaram que para plantas de milho, 30 dias aps a semeadura, o nvel de controle de 20% das plantas atacadas pela lagarta. Cardoso (2010), estudando os danos causados por S. frugiperda em diferentes gentipos de milho, determinou que o nvel de controle da lagartado-cartucho de 20% das plantas com folhas com pontuaes e de uma a trs leses circulares pequenas (at 1,5 cm). Uma avaliao dos danos causados por S. frugiperda, em milho, foi realizada por Silva (1995). Os resultados mostraram que as lagartas reduzem maior rea foliar nas infestaes ocorridas nos estgios de 4 e 8 folhas, enquanto que no estgio de 12 folhas, as lagartas atacam os pendes e migram para outras plantas ou para o solo. As infestaes que ocorreram no

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estgio de 4 folhas promoveram os menores rendimentos de gros, entretanto, a poca de infestao no afetou a produo das plantas no adubadas, que por si s produziram mais que as no adubadas. Foram obtidas as seguintes equaes de regresso entre poca de infestao (x) e produo (y), sendo y = 743,70 + 31,75x, para infestaes nos estgios de 4, 8 e 12 folhas em plantas adubadas e y = 506,02 + 21,86x, para plantas no adubadas. Os danos causados por S. frugiperda foram estudados por Cruz et al. (1996) em solos com diferentes nveis de saturao de alumnio, em Sete Lagoas, MG, que no afetaram o ataque do noctudeo. Entretanto, a perda mdia causada na produo foi de 848 kg/ha em todos os tratamentos e a maior produo foi obtida na parcela sem infestao, que foi de 4.792kg/ha. Em Sete Lagoas, MG, Matrangolo, Cruz e Della Lucia (1997) determinaram os danos causados por insetos presentes em estilos-estigmas e espiga de milho. Lagartas de S. frugiperda e de H. zea alternaram-se na predominncia nos estilos-estigma. Os autores observaram que cerca de 80% da espigas com gros na fase leitosa se apresentaram infestadas por lagartas, especialmente por S. frugiperda.

2.2 Danos das pragas de solo Agrotis ipsilon e Elasmopalpus lignosellus em milho

Para a lagarta-rosca, poucos estudos foram conduzidos no mundo e no Brasil os ensaios avaliando os danos da praga no milho so escassos. Showers, von Kaster e Mulder (1983) avaliaram que A. ipsilon mais prejudicial cultura do milho quando o ataque ocorre da fase de emisso do coleptilo pela semente at o estdio de uma folha, podendo causar diminuio no stand de 27% e perdas na produo de 2,9 t ha -1 se apenas uma lagarta de 4 nstar ou mais por metro linear estiver presente. Os autores verificaram que a diminuio do stand de plantas e da produo diretamente proporcional ao

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aumento na densidade de lagartas, mas as perdas causadas por uma ou duas lagartas por metro so similares, devido a compensao na produo que as plantas sobreviventes fazem. A infestao da lagarta-rosca ocorrendo no estdio de 2 a 3 folhas no afeta a produo at que seja atingida a densidade de 3 lagartas por metro. As infestaes aps o estdio de 4 folhas geralmente no causam prejuzos. Mais tarde, Whitford, Showers e von Kaster (1989) verificaram que parte das plantas danificadas pela lagarta-rosca conseguem se recuperar, valor esse entre 34 e 54%, mas a perda na produo ocorre na maioria das plantas, especialmente se a infestao ocorreu antes do estdio de 4 folhas (84% das plantas sobreviventes diminuem a produo). A recuperao das plantas cai sensivelmente quando os danos causados pela lagarta ocorrem abaixo da superfcie do solo. Santos e Shields (1998) simularam danos da lagarta-rosca em dois hbridos de milho, em dois anos de cultivo diferentes e em dois estdios fenolgicos da cultura. Os autores verificaram que as perdas na produo variaram de 0 a 24% e 0 a 81%, quando os danos foram simulados nos estdio de 3 ou 5 folhas, respectivamente. No ocorreram perdas em matria seca para ensilagem. No Brasil, Bento, Magro e Parra (2004) avaliaram os danos de A. ipsilon em plntulas de couve. Constatou-se que no 3 nstar, os danos incidiram sobre as folhas e pecolos, e no 4, 5 e 6 nstares, verificou-se corte do caule, sendo que durante o perodo quarto-sexto nstares as lagartas cortaram e consumiram oito plntulas de couve. Foi verificado que, em mdia, as lagartas de 4, 5 e 6 nstares cortaram, respectivamente, 1,5 plntulas (18,75% do total de plantas cortadas por lagarta), 1,6 plntulas (20,0% do total de plntulas cortadas por lagarta) e 4,9 plntulas (61,25% de plntulas cortadas por lagarta). Para milho, Gallo et al. (2002) e Pinto, Parra e Oliveira (2004) comentam que uma lagarta consegue destruir de quatro a oito plantas.

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Silva, Lovato e Lcio (2002), que testaram a reduo do estande de trs variedades de milho, verificaram boa capacidade de compensao de componentes de produtividade das plantas de milho que sobreviveram em at 45% na reduo do estande, valor esse superior aos 30% de compensao observado anteriormente por Zuber (1942). Vencovsky e Cruz (1991) criticaram o valor obtido por Zuber (1942) com metodologia que os autores consideraram no ser a mais adequada para esse tipo de estudo, pois Moraes et al. (1986) j haviam registrado capacidade compensatria de plantas vizinhas quelas eliminadas variando entre 24,5 e 32,2%, para diferentes variedades, e entre 15,6 e 35,8% para a mesma variedade plantada em anos agrcolas diferentes. Dessa forma, considerando que a capacidade compensatria de produtividade do milho reduo no estande est, em geral, ao redor de 30%, Gomes (2013) concluiu que o nvel de dano de lagartas de 2 nstar de A. ipsilon est entre 1,5 a duas lagartas por metro linear e, dessa forma, o nvel de controle deve ser de uma lagarta por metro linear. O nvel de dano de lagartas de 3 nstar de 0,5 lagartas por metro linear, devendo o nvel de controle ser ao redor de 0,7 lagartas m-2. Existem outras pragas que atacam as plntulas de milho,

especialmente na segunda safra (safrinha), sendo uma das mais importantes a lagarta-elasmo ou elasmo, E. lignosellus. Essa lagarta ataca plantas com at 30 cm de altura, causando a morte da gema apical, sintoma conhecido como corao morto. Ocorre com maior frequncia em solos arenosos e em perodos secos, logo aps as primeiras chuvas (GALLO et al., 2002; PINTO et al., 2004). A lagarta-elasmo ocorre nas regies temperadas e tropicais do continente americano. uma praga polfaga que ataca mais de 60 espcies de plantas, causando srios danos a vrias culturas de importncia econmica, como milho, cana-de-acar, trigo, soja, arroz, feijo, sorgo, amendoim e algodo. Perdas atribudas ao ataque de elasmo no milho variam de 20% at a destruio total da lavoura em condio de alta infestao (VIANA, 2004).

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A lavoura somente atacada pela lagarta at atingir uma altura mdia de 35 cm, causando inmeras falhas na lavoura. O dano causado pela lagarta na regio do colo, penetrando em seguida no colmo e fazendo galerias no seu interior, provocando o perfilhamento e/ou a morte da planta. O ataque pode ser visualizado pelo murchamento e pela seca das folhas centrais, que se destacam com facilidade ao serem puxadas. As perdas ocasionadas esto relacionadas com a reduo no estande, resultando no baixo rendimento da cultura. O ataque da lagarta causa a destruio da regio de crescimento, quando este se encontra abaixo do nvel do solo ou destri total ou parcialmente os tecidos meristemticos responsveis pela conduo de gua e nutrientes (VIANA et al., 2000; VIANA, 2004; VIANA, 2009).

2.3 Danos das pragas da parte area Spodoptera cosmioides e S. eridania em milho

As outras espcies de Spodoptera, que ocorrem tambm em milho, so polfagas, atacando diversas culturas e plantas daninhas. Apesar do grande nmero de hospedeiros, Spodoptera cosmioides e S. eridania geralmente esto associadas desequilbrios provocados pelo uso excessivo de inseticidas (ARAJO, 2009). Habib, Paleari e Amaral (1983) relataram que S. cosmioides causou danos severos s culturas do algodo e soja em alguns estados brasileiros. Das lagartas que atacam soja, S. cosmioides tem distribuio restrita a Amrica do Sul. Trata-se de uma espcie polfaga que se alimenta de um grande nmero de plantas cultivadas e espontneas. No Brasil, seus hospedeiros so as culturas do amendoim, alfafa, algodo, arroz, aveia, batatainglesa, berinjela, ervilha, feijo, girassol, fumo, milho, soja, sorgo, tomate e trigo (BAVARESCO et al., 2004).

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S. cosmioides era at pouco tempo considerada sinonmia de Spodoptera latifascia (Walker). Entretanto, diferenas moleculares,

morfolgicas, fisiolgicas e comportamentais fazem com que devam ser consideradas espcies distintas (SILVAIN; LALANNE-CASSOU, 1997;

LALANNE-CASSOU et al., 1999). Ambas so membros de um complexo de espcies neotropicais, sendo que S. latifascia encontra-se estabelecida na Amrica Central, Antilhas e Sul do Estados Unidos, enquanto S. cosmioides encontrada na Amrica do Sul. De acordo com Bavaresco et al. (2004), as fmeas de S. cosmioides podem ovipositar mais de 1000 ovos. Habib, Paleari e Amaral (1983) observaram diferenas no perodo de oviposio e na fecundidade de S. cosmioides quando alimentada com soja e algodo na fase larval, sendo o algodo mais adequado para desenvolvimento do inseto, com 5 e 6 nstares quando alimentada com folhas de algodoeiro e soja, respectivamente. Bavaresco et al. (2004), em laboratrio verificaram que S. cosmioides apresentara durao da fase larval de 19 dias e do perodo lagart a-adulto de 36 dias. A fase pupal de S. cosmioides significativamente maior para os machos do que para as fmeas (BAVARESCO et al., 2004). Esse fenmeno denominado de protoginia, que um mecanismo que reduz a probabilidade de acasalamento entre indivduos descendentes da mesma postura, permitindo que as fmeas ao emergir antes dos machos voem para outros locais ou, se permanecerem na rea, acasale com machos provenientes de outras posturas (CROCOMO; PARRA, 1985). Bavaresco et al. (2003) estudaram, em laboratrio, o desenvolvimento de S. cosmioides em diferentes hospedeiros e verificaram que a fecundidade foi maior em cebola e mamona, quando comparados com soja, sendo bem prejudicado em feijo, por causa da pilosidade das folhas. S. eridania uma espcie polfaga, a qual se alimenta de um grande nmero de plantas cultivadas e de hospedeiros alternativos. No Brasil, S. eridania citada atacando algodo, soja, amendoim, alface, tomate, couve,

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mamona, pimento e aboboreira (SILVA et al., 1968). uma praga em expanso pela frequncia crescente e intensidade de danos em diversas regies produtoras de algodo e soja no Cerrado, onde tradicionalmente no era considerada importante para essas culturas (SANTOS; MENEGUIM; NEVES, 2005). S. eridania possui alto potencial reprodutivo com capacidade de ovipositar de 600 a 900 ovos. Em laboratrio, S. eridania apresenta de 6 a 7 nstares larvais quando alimentadas com folhas de soja e algodo, respectivamente (SANTOS; MENEGUIM; NEVES, 2005). A durao da fase larval varia de 12 a 18 dias, sendo que, as lagartas criadas em folhas de algodoeiro apresentam desenvolvimento mais rpido e maior peso de pupas, comparativamente quelas criadas em folhas de soja. Desse modo, a reduo no peso das pupas de lagartas alimentadas com folhas de soja pode afetar a oviposio, diminuindo a quantidade de ovos (LYNCH; PAIR; JOHNSON, 1983). No Cerrado brasileiro, S. eridania demonstra comportamento migratrio ao passarem das plantas de soja em final de ciclo para plantas invasoras como a corda-de-viola, onde causam desfolhamento e completam seu

desenvolvimento. Nessa regio, a planta invasora corda-de-viola ocorre na maioria das reas cultivadas com algodoeiro, soja e adjacncias e permanece vegetando por um perodo maior que as plantas cultivadas. Por essa razo, acredita-se que a disponibilidade sequencial de hospedeiros alternativos possa viabilizar o desenvolvimento e a permanncia de S. eridania em reas de cultivo de algodo e soja. A diminuio ou se possvel a eliminao de plantas de corda-de-viola e o distanciamento espacial entre talhes cultivados com soja e algodo podem ser, entre outras, estratgias para o MIP da praga (SANTOS; MENEGUIM; NEVES, 2005). Vinha (2013) verificaram que as lagartas de 2 nstar de S. cosmioides causam prejuzos cultura milho, sendo que o nvel de dano superior a uma lagarta por planta ou 5 lagartas por metro linear, sendo esse o nvel de controle determinado. S. eridania de 3 nstar no prejudicial cultura do milho,

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quando infesta plntulas, mas a densidade que causa a maior desfolha de 0,5 lagarta por planta ou 2,5 lagartas por metro linear.

2.4

Uso de milho transgnico no controle de lagartas

So escassos os trabalhos que avaliam a eficincia de milho transgnico em laboratrio ou campo. Como bioinseticida, a bactria Bacillus thuringiensis (Bt), estirpe HD1, vem sendo usada h dcadas (FEITELSON; PAYNE; KIM , 1992) e est registrado sem limitao de uso, para o controle de vrias espcies-praga de Lepidoptera. Uma das fraes ativas produzidas pelo Bt so protenas acumuladas em forma de cristal no interior das clulas, denominadas Cry, que podem constituir mais de 30% do total de protenas da clula (HERMSTADT et al., 1986). Waquil et al. (2004) comentam que at 2004 haviam duas diferentes toxinas do B. thuringiensis disponveis em milho transgnico para a lagarta-docartucho do milho: Cry 1A(b) e Cry 1F. Os bioensaios foram conduzidos usando larvas recm-eclodidas por 10 dias se alimentando das protenas. As CL50 estimadas para Cry1A(b) e Cry1F foram, respectivamente, 689,81 ng/cm 2 e 36,46 ng/cm2. A CL50 foi suficiente para inibir o acmulo de biomassa das larvas em 91,61% e 89,81% para Cry1Ab e Cry1F, respectivamente. As larvas que sobreviveram por dez dias nas dietas tratadas com o Cry 1A(b) foram transferidas para dieta no tratada e observadas at a emergncia dos adultos. Das larvas sobreviventes, 62,8% recuperaram seu desenvolvimento,

acumulando a biomassa de uma pupa normal. Portanto, a atividade biolgica da toxina do Bt vai alm da simples toxicidade, incluindo uma significativa inibio de alimentao. Nos EUA, Waquil, Vilella e Foster (2002) estudaram a eficincia de nove hbridos de milho geneticamente modificado com expresso das toxinas

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Cry 1A(b), Cry 1A(c), Cry 9C, Cry 1F. Os autores observaram diferentes nveis de resistncia dos hbridos a S. frugiperda e os que expressavam as toxinas Cry 1F, Cry 1A(b), Cry 1A(c) e Cry 9C foram considerados altamente resistente, resistente, moderadamente resistente e suscetvel, respectivamente. Buntin (2008) avaliou a eficincia de dois hbridos transgnicos de milho expressando as endotoxinas inseticidas Cry1Ab (evento MON810) ou Cry 1F (evento TC1507) de B. thuringiensis e verificaram que ambas foram eficientes no controle de S. frugiperda, mas MON810 no apresentou a mesma performance em altas infestaes do inseto. Alm disso, o evento TC1507 no diminuiu a infestao de lagartas na espiga e nenhum deles diminuiu os danos. O milho transgnico, expressando a toxina Cry 1A(b), tem apresentado nveis razoveis de resistncia (WILLIAMS et al., 1998a). Adicionando-se palha de milho transgnico, liofilizada, em dieta artificial, notou-se reduo de 40% na sobrevivncia e de 94% na biomassa das larvas S. frugiperda (WILLIAMS et al., 1998a). Nas dietas contendo apenas estilo-estigma no se observou mortalidade, mas notou-se reduo significativa no desenvolvimento dos insetos (WILLIAMS et al., 1998b). Avaliando o milho Bt, expressando a toxina Cry 1A(b) em condies de campo durante dois anos e em diferentes locais, foi observado um controle eficiente da lagarta-do-cartucho (FERNANDES et al., 2003). Siebert et al. (2008) constataram grande eficincia no controle de lagartas de S. frugiperda em milho transgnico contendo a protena inseticida Cry1F. Mendes et al. (2011) estudaram parmetros biolgicos da lagarta-docartucho do milho alimentada com hbridos de milho Bt, que expressam a toxina Cry 1A(b), e com seus respectivos isognicos no Bt. Os autores verificaram que larvas de S. frugiperda apresentam menor sobrevivncia nas primeiras 48 horas de alimentao e durante toda a fase larval, na maioria dos hbridos de milho Bt, em comparao ao milho no Bt. A biomassa de larvas e pupas foi sempre menor no milho Bt, e o perodo larval e o pr-imaginal, maior. Larvas recm-eclodidas de S. frugiperda apresentam preferncia pela alimentao em milho no Bt.

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Blundi (2011), estudando o efeito de milho Bt expressando a protena Cry1F sobre S. frugiperda verificou, em laboratrio, que as lagartas mais novas que se alimentaram sobre folhas de milho Bt morreram em poucos dias e no trocaram de nstar ou tiveram seu desenvolvimento bastante prejudicado. No campo, o milho Bt apresentou os menores valores de nota mdia de danos. Vilella et al. (2002) verificaram resistncia de milhos transgnicos Bt que expressam as toxinas Cry1Ab, Cry1Ac, Cry1F e Cry9C lagarta-elasmo, em laboratrio. Em campo, Ivan et al. (2012) compararam milhos transgnicos (que expressavam os genes Cry1F + pat + Cry1A105 + Cry2Ab2 + cp4 + EPSPS, Cry1Ab, Cry1F + pat e Cry1A105 + Cry2Ab2) e convencional quanto ocorrncia do sintoma corao morto causado pela elasmo (infestao artificial de plntulas) e verificaram que apenas o milho convencional, com ou sem aplicaes de inseticidas, foram danificados pela praga. Santos et al. (2009) avaliaram, em laboratrio, a toxicidade de vrias linhagens de B. thuringiensis ao complexo Spodoptera, determinando que Cry1Aa e Cry1Ab foram os mais txicos para S. cosmioides, Cry2Aa para S. eridania e Cry1Aa, Cry1Ab e Cry2Aa para S. frugiperda. Bergamasco et al. (2013) verificaram efeito letal de Vip3Aa e Cry1Ia10 para S. cosmioides, S. frugiperda e S. albula, especialmente para o primeiro e a combinao dos dois genes. Entretanto, para S. eridania, os autores verificaram um efeito antagnico quando os dois genes so combinados em uma mesma planta, sendo que Cry1Ia10 foi mais letal para essa espcie.

3 MATERIAL E MTODOS

Os trabalhos foram realizados no Campus do Centro Universitrio Moura Lacerda, localizado na cidade de Ribeiro Preto, SP, situado a 620 metros de altitude, e localizado a 211243 de latitude sul e 474623 de longitude oeste. As lagartas de Elasmopalpus lignosellus, Agrotis ipsilon e Spodoptera cosmioides utilizadas no ensaio para infestaes artificiais foram fornecidas pela Bug agentes biolgicos S/A, de Piracicaba, SP. As lagartas foram criadas em dietas artificiais adequadas espcie. Para E.lignosellus a dieta fornecida a formulada por Chalfant, 1975, para A. ipsilon, Bento et al., 2007 e para S.cosmioides e S.frugiperda a dieta fornecida foi a formulao de Kasten et al.,1978. O experimento de campo teve as semeaduras realizadas nos dias 23/11/2012 e 06/02/2013, com espaamento de 0,7 m entre linhas e mantendo cinco plantas por metro, aps desbaste realizado em 02/12/2012 e 16/02/2013, respectivamente. O delineamento do experimento foi em blocos casualizados, onde sete tratamentos foram repetidos quatro
2

vezes,

em

parcelas

experimentais de 4,2 (6 linhas) x 6,0 m (25,2 m ), sendo mantidas bordaduras de 0,70 m mantidas no limpo (Figura 1). Foi realizada uma adubao de cobertura com sulfato de amnio do equivalente a 500 Kg ha-1 (06/01/2013) na primeira data de plantio e as plantas daninhas foram controladas com o herbicida 2,4-diclorofenoxiactico (2,4-D) em ambas as datas de plantio. Os gentipos utilizados foram: (1) milho convencional 2B587 (testemunha, sem controle); (2) milho transgnico expressando os genes Cry1F

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+ pat + Cry1A105 + Cry2Ab2 + EPSPS (2B587, PowerCore); (3) Cry1A105 + Cry2Ab2 (DKB 390, YieldGard VT PRO); (4) Vip3A + pmi (Status, Agrisure Viptera); (5) Vip3A + Cry1Ab + EPSPS + pmi (Maximus, Agrisure Viptera 3); (6) Cry1F + pat (2B587, Herculex); (7) Cry1Ab + Cry1F + EPSPS + pat (30F53, Optimum Intrasect).

Figura 1. Viso geral do ensaio, aps a instalao das barreiras de conteno das lagartas infestadas artificialmente nas plantas individuais ou em grupos. Ribeiro Preto, SP, 2013.

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3.1 Avaliaes da lagarta-elasmo, E. lignosellus, em plntulas de milho no solo

O ensaio foi conduzido no experimento com semeadura em 23/11/2012. Aps a germinao, 10 plntulas consecutivas de cada parcela foram envolvidas individualmente por um tubo de PVC de 9 cm de dimetro e 20 cm de altura (Figura 2). O tubo foi pressionado levemente para que fosse enterrado 2 cm no solo, formando assim uma barreira ao redor de cada plntula.

Figura 2. Barreira ao redor da plntula de milho para a conteno das lagartas de Elasmopalpus lignosellus junto planta aps a infestao artificial, com detalhe da fina camada de areia sobre o solo. Ribeiro Preto, SP, 2013.

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O solo ao redor da plntula foi coberto com uma fina camada de areia (menos de 1 cm) (Figura 2) e aos 10 dias aps a semeadura foi realizada uma infestao artificial com duas lagartas de E. lignosellus de 3 nstar por plntula. As infestaes foram realizadas no perodo da manh, colocando-se as lagartas na base das plntulas. Foram realizadas avaliaes aos 7 (09/12), 10, 15, 20 e 28 dias aps a infestao artificial. Nas cinco avaliaes, observaram-se as plantas anotando se apresentavam os sintomas de corao morto, emisso de perfilho sem afetar o desenvolvimento da planta e emisso de perfilho afetando o crescimento da planta.

3.2 Avaliaes da lagarta-rosca, A. ipsilon, em plntulas de milho no solo

O ensaio foi conduzido no experimento com semeadura em 06/02/2013. Aps a germinao, 10 plntulas consecutivas de cada parcela foram envolvidas conjuntamente com placas de PVC de 0,2 m de altura, 0,2 m de largura e 2,1 m de comprimento (Figura 3). As placas foram pressionadas levemente para que fosse enterrado 2 cm no solo, formando assim uma barreira ao redor das plntulas seguindo a metodologia de Masson (2012). O solo ao redor das plntulas foi coberto com uma fina camada de vermiculita (menos de 1 cm) (Figura 3) e aos 11 dias aps a semeadura foi realizada uma infestao artificial com uma lagarta de A. ipsilon de 4 nstar por plntula. As infestaes foram realizadas no perodo da manh colocando-se as lagartas no colo das plntulas. As avaliaes foram realizadas ao 1 (18/02), 3, 7, 10 e 14 dias aps infestao, quantificando o nmero de plantas cortadas.

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3.3 Avaliaes de S. cosmioides em plntulas de milho no solo

O ensaio foi conduzido no experimento com semeadura em 06/02/2013. Aps a germinao, 10 plntulas consecutivas de cada parcela foram envolvidas individualmente por um tubo de PVC de 15 cm de dimetro e 20 cm de altura. O tubo foi pressionado levemente para que fosse enterrado 2 cm no solo, formando assim uma barreira ao redor de cada plntula seguindo a metodologia de Masson (2012). O solo ao redor da plntula foi coberto com uma fina camada de vermiculita (menos de 1 cm) e aos 11 dias aps a semeadura foi realizada uma infestao artificial com duas lagartas de S. cosmioides de 3 nstar por plntula e outras 10 plantas de linha diferente com duas lagartas de S. cosmioides de 4 nstar por plntula. As infestaes foram realizadas no perodo da manh, colocando-se as lagartas na base das plntulas. Aos 1 (18/02), 3, 5, 7 e 14 dias aps a infestao, as plantas foram avaliadas quanto porcentagem de danos nas folhas.

Figura 3. Barreira de conteno das lagartas de Agrotis ipsilon junto s plantas aps a infestao artificial, com detalhe da fina camada de vermiculita sobre o solo. Ribeiro Preto, SP, 2013.

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3.4 Avaliaes de S. cosmioides em plantas de milho, na parte area

O ensaio foi conduzido no experimento com semeadura em 06/02/2013. Aps 31 dias de semeadura (estdio V4-5), 10 plantas consecutivas de cada parcela foram envolvidas individualmente por um saco de tecido de voil de 50 cm de comprimento e 35 cm de dimetro, sendo esses amarrados na base da planta, formando assim uma barreira ao redor de cada uma (Figura 4).

Figura 4. Gaiolas de voil de conteno das lagartas de Spodoptera cosmioides junto planta, aps a infestao artificial da parte area. Ribeiro Preto, SP, 2013.

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Foi realizada uma infestao artificial com duas lagartas de S. cosmioides de 3 nstar por planta e outras 10 plantas de linha diferente com duas lagartas de S. cosmioides de 4 instar por planta. As infestaes foram realizadas no perodo da manh, colocando-se as lagartas na superfcie foliar das plantas. Ao 1 (10/03), 4, 7 e 9 dias aps a infestao, as plantas foram avaliadas quanto porcentagem de danos nas folhas.

3.5 Avaliaes da lagarta-do-cartucho na parte area

Os dois ensaios foram conduzidos nos experimentos com semeaduras em 23/11/2012 e 06/02/2013. Aps 28 dias da semeadura foram iniciadas as avaliaes dos danos causados por lagartas de S. frugiperda, de ocorrncia natural, em folhas. Uma linha de plantio foi selecionada para essas avaliaes, onde 25 plantas consecutivas eram vistoriadas para serem atribudas notas de danos nas folhas causados pela alimentao de lagartas de S. frugiperda, de uma escala visual proposta por Davis e Williams (1989), de 0 a 9 (Tabela 1). Aos 35 dias da semeadura foram coletadas 10 plantas dentre as 25 avaliadas, realizando a destruio destas e anotando-se a quantidade de lagartas neonatas, pequenas e grandes presentes no cartucho. Todos os dados obtidos foram submetidos a anlise de varincia (ANOVA). Quando o teste F da ANOVA indicou significncia de 5% de probabilidade de erro, procederam-se as anlises complementares por meio do teste de Tukey a 5% de probabilidade, onde as mdias foram comparadas. Todos os clculos estatsticos foram realizados pelo programa Statistica for Windows (STATSOFT, 1996).

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Tabela 1. Escala visual de notas atribudas aos danos na planta causados pela alimentao de S. frugiperda em milho (DAVIS; WILLIAMS, 1989). Nota 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Descrio Planta sem dano; Planta com pontuaes (mais que uma pontuao por planta); Planta com pontuaes; 1 a 3 leses circulares pequenas (at 1,5 cm); Planta com 1 a 5 leses circulares pequenas (at 1,5 cm); mais 1 a 3 leses alongadas (at 1,5 cm); Planta com 1 a 5 leses circulares pequenas (at 1,5 cm); mais 1 a 3 leses alongadas (maiores que 1,5 cm e menores que 3,0 cm); Planta com 1 a 5 leses alongadas grandes (maior que 3,0 cm); em 1 a 2 folhas, mais 1 a 5 furos ou leses alongadas at 1,5 cm; Planta com 1 a 5 leses alongadas grandes (maior que 3,0 cm); em 2 ou mais folhas, mais 1 a 5 furos grandes (maiores que 1,5 cm); Planta com 3 a 5 leses alongadas grandes (maiores que 3,5 cm); em 2 ou mais folhas, mais 1 a 3 furos grandes (maiores que 1,5 cm); Planta com muitas leses alongadas (mais que 5) de todos os tamanhos na maioria das folhas. Muitos furos mdios a grandes (mais que 5) maiores que 3,0 cm em muitas folhas; Plantas com muitas folhas, na quase totalidade, destrudas.

4 RESULTADOS E DISCUSSO

4.1 Comparao entre milhos transgnicos Bt quanto aos danos causados pela lagarta-elasmo em plntulas

Aps 7 dias da infestao somente os tratamentos convencional e transgnico Viptera apresentaram sintomas de corao morto, diferindo significativamente dos demais tratamentos (Tabela 2). Nas demais datas de avaliao os resultados se repetiram, sendo que os tratamentos convencional e Viptera apresentaram, respectivamente, 40,0 17,3 e 32,5 12,5% de plantas com sintoma de corao morto, aos 28 dias aps a infestao (Tabela 2). Houve perfilhamento prejudicial planta somente aos 15 dias aps a infestao no tratamento Viptera 3, de 2,5 2,5%, sem ocorrer diferena significativa entre os tratamentos. Ivan et al. (2012) tambm compararam milhos transgnicos [que expressavam os genes Cry1F + pat + Cry1A105 + Cry2Ab2 + cp4 + EPSPS (PowerCore), Cry1Ab (Yieldgard), Cry1F + pat (Herculex) e Cry1A105 + Cry2Ab2 (YieldGard VT PRO)] e convencional quanto ao ataque de elasmo e verificaram que apenas o milho convencional, com ou sem aplicaes de inseticidas, foram danificados pela praga.

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Tabela 2. Porcentagem mdia de plantas com sintoma de corao morto devido alimentao de Elasmopalpus lignosellus em plantas de milho transgnico Bt ou convencional. Ribeiro Preto, SP, 2013. Dias aps a infestao Tratamento 7 Convencional Herculex Optimum PowerCore Viptera Viptera 3 VT PRO
1

10
1

15
40,017,3 b 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a 32,512,5 b 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a

21
40,017,3 b 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a 32,512,5 b 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a

28
40,017,3 b 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a 32,512,5 b 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a

32,510,3 b 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a 30,012,9 b 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a

37,514,9 b 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a 32,512,5 b 0,0 0,0 a 0,0 0,0 a

Mdias seguidas pela mesma letra na coluna no diferem entre si pelo teste de Tukey (P0,05).

Vilella et al. (2002) verificaram resistncia de milhos transgnicos Bt que expressam as toxinas Cry1Ab, Cry1Ac, Cry1F e Cry9C lagarta-elasmo, em laboratrio. Portanto, quase todos os milhos transgnicos testados no foram danificados pela lagarta elasmo, exceto Viptera.

4.2 Comparao entre milhos transgnicos Bt quanto aos danos causados pela lagarta-rosca em plntulas

Todos os milhos, transgnicos ou no, foram danificados pela alimentao de lagartas de A. ipsilon. No houve diferenas significativas entre

29

os tratamentos quanto porcentagem mdia de plantas cortadas rente ao solo pela lagarta (Tabela 3).

Tabela 3. Porcentagem mdia de plantas cortadas rente ao solo devido alimentao de Agrotis ipsilon em plntulas de milho transgnico Bt ou convencional. Ribeiro Preto, SP, 2013. Dias aps a infestao Tratamento 1 Convencional Herculex Optimum PowerCore Viptera Viptera3 VT Pro
1

3
1

7
60,010,8 a 35,015,5 a 35,0 9,6 a 42,514,9 a 50,0 5,8 a 30,012,2 a 60,0 4,1 a

10
62,512,5 a 35,015,5 a 35,0 9,6 a 45,014,4 a 52,5 4,8 a 30,012,2 a 60,0 4,1 a

14
62,512,5 a 37,514,9 a 40,011,5 a 45,014,4 a 57,5 2,5 a 30,012,2 a 60,0 4,1 a

45,0 6,4 a 25,015,0 a 22,511,1 a 35,010,4 a 42,5 6,3 a 30,0 9,1 a 55,0 6,4 a

60,010,8 a 27,514,4 a 30,012,9 a 40,014,7 a 50,0 5,8 a 30,012,2 a 60,0 4,1 a

Mdias seguidas pela mesma letra na coluna no diferem entre si pelo teste de Tukey (P0,05).

Acredita-se que a metodologia adotada para esse ensaio, onde cada planta recebeu uma lagarta, no foi a mais adequada para avaliar a ao de transgnicos. A lagarta-rosca, para entrar em contato com a(s) protena(s) produzida(s) pelos genes expressos em cada transgnico, precisaria cortar rente ao solo ao menos uma planta, sendo que o efeito do transgnico seria percebido nas plantas seguintes. Mas se cada planta foi infestada com uma lagarta, teoricamente todas as plantas seriam cortadas e o efeito do transgnico no seria percebido. Lembrando que as plantas do milho podem compensar a diminuio do estande na produtividade final (ZUBER, 1942; MORAES et al., 1986;

30

VENCOVSKY; CRUZ, 1991; SILVA; LOVATO; LCIO, 2002), se os transgnicos impedirem que a lagarta-rosca danifique muitas plantas, isso poderia ser considerada uma vantagem. Portanto, em futuros ensaios, cada 10 plantas devero ser infestadas com uma a duas lagartas de 3 nstar, pois esse seria o valor determinado por Gomes (2013) como sendo o nvel de dano da praga.

4.3 Comparao entre milhos transgnicos Bt quanto aos danos causados por Spodoptera cosmioides em plntulas

A porcentagem mdia de desfolha, causada por lagartas de S. cosmioides de 3 nstar, foi alta no milho convencional e VT Pro, no existindo diferenas significativas entre ambos nas diferentes datas de avaliao. De 1 aos 5 dias aps a infestao, o tratamento Herculex tambm no diferiu do tratamento convencional, ocorrendo diferenas apenas aos 7 dias aps a infestao, onde o tratamento Viptera apresentou o menor valor, no diferindo de Viptera 3, PowerCore e Optimum, e os tratamentos convencional e VT Pro apresentaram oa maiores valores, no diferindo entre si. At os 5 dias no houve diferenas significativas entre os demais tratamentos (Figura 5). Quanto s lagartas de 4 instar, no houve diferenas significativas entre os tratamentos aos 1 e 5 dias aps a infestao, mas a partir dos 7 dias todos os tratamentos diferiram das testemunha, que apresentou o maior valor mdio de desfolha (Figura 6). Os resultados concordam com Santos et al. (2009), que verificaram que os genes Cry1Aa e Cry1Ab foram os mais txicos para S. cosmioides, estando Cry1Ab presente em alguns dos milhos transgnicos Bt testados no atual ensaio. Tambm concordam com Bergamasco et al. (2013), que verificaram efeito letal de Vip3Aa, presente no Viptera e Viptera 3, e Cry1Ia10

31

para S. cosmioides, especialmente para o primeiro e a combinao dos dois genes.

100 80

ab ab ab b a ab a

Desfolha (%)

60 40

a 20 0
18/fev 19/fev 20/fev 21/fev 22/fev 23/fev 24/fev 25/fev 26/fev 27/fev Convencional Viptera Herculex Viptera3 Optimum VT Pro PowerCore a

Figura 5. Porcentagem

mdia

de

desfolha

de

plntulas

de

milhos

transgnicos Bt ou convencional aps a infestao artificial com lagartas de 3 nstar de S. cosmioides. Ribeiro Preto, SP, 2013.
Pontos seguidos pelas mesmas letras no diferem entre si pelo teste de Tukey (P0,05).

4.4 Comparao entre milhos transgnicos Bt quanto aos danos causados por S. cosmioides em plantas (V4-5)

As lagartas de 3 nstar de S. cosmioides causaram desfolha significativa em milho transgnico Bt e convencional. Quanto porcentagem mdia de desfolha, pde-se verificar que o tratamento VT Pro apresentou os maiores valores em todas as datas, no diferindo significativamente da

32

testemunha convencional e diferindo dos demais tratamentos dos 4 aos 9 dias aps a infestao (Figura 7).

100 80 a
Desfolha (%)

60 40

20
a

0 18/fev 19/fev 20/fev 21/fev 22/fev 23/fev 24/fev 25/fev 26/fev 27/fev
Convencional Herculex Optimum PowerCore

Viptera

Viptera3

VT Pro

Figura 6. Porcentagem

mdia

de

desfolha

de

plntulas

de

milhos

transgnicos Bt ou convencional aps a infestao artificial com lagartas de 4 nstar de S. cosmioides. Ribeiro Preto, SP, 2013.
Pontos seguidos pelas mesmas letras no diferem entre si pelo teste de Tukey (P0,05).

Os transgnicos Viptera e Viptera 3 apresentaram os menores valores de desfolha em todas as datas (exceto Viptera na 1 data), mas no diferindo estatisticamente dos transgnicos Herculex, PowerCore e Optimum (Figura 7).

33

40 35 30 a a ab bc b ab a

Desfolha (%)

25 a

20
15 10

bc

c 5 0 10/mar 11/mar 12/mar 13/mar 14/mar 15/mar 16/mar 17/mar 18/mar

Convencional Viptera Herculex Viptera3 Optimum VT Pro PowerCore

Figura 7. Porcentagem mdia de desfolha de plantas (V4-5) de milhos transgnicos Bt ou convencional aps a infestao artificial com lagartas de 3 nstar de S. cosmioides. Ribeiro Preto, SP, 2013.
Pontos seguidos pelas mesmas letras no diferem entre si pelo teste de Tukey (P0,05).

Por outro lado, a infestao com lagartas de 4 nstar de S. cosmioides em plantas V4-5 foram mais danosas para os milhos transgnicos Bt, de uma forma geral. At os 3 e aos 9 dias aps a infestao, todos os gentipos foram danificados igualmente. Aos 7 dias aps, os tratamentos Viptera, Viptera 3, PowerCore, Herculex e Optimum diferiram significativamente da testemunha e no diferiram do transgnico VT Pro (Figura 8).

34

40 35 30

Desfolha (%)

25
20 15

a a ab

b 10
5 0 10/mar 11/mar 12/mar 13/mar 14/mar 15/mar 16/mar 17/mar 18/mar
Convencional Viptera Herculex Viptera3 Optimum VT Pro PowerCore

Figura 8. Porcentagem mdia de desfolha de plantas (V4-5) de milhos transgnicos Bt ou convencional aps a infestao artificial com lagartas de 4 nstar de S. cosmioides. Ribeiro Preto, SP, 2013.
Pontos seguidos pelas mesmas letras no diferem entre si pelo teste de Tukey (P0,05).

Os milhos transgnicos Bt Herculex, PowerCore, Optimum, Viptera e Viptera 3, especialmente esses dois ltimos, foram menos afetados por lagartas de 3 nstar de S. cosmioides, o mesmo no ocorrendo para lagartas de 4 nstar, em campo.

35

4.5 Comparao entre milhos transgnicos Bt quanto aos danos causados por Spodoptera frugiperda em plantas

No primeiro ensaio, semeado em novembro de 2012, ocorreu uma alta infestao natural de S. frugiperda no campus do C.U. Moura Lacerda. Na testemunha (milho convencional), a nota mdia atribuda aos danos causados nas folhas, devido alimentao das lagartas, foi de 6,20 0,15. O maior valor mdio foi observado no tratamento testemunha (convencional), que diferiu significativamente dos demais tratamentos aos 28 dias aps a germinao. Os tratamentos Herculex e Optimum diferiram dos demais tratamentos e apresentaram valores intermedirios (3,06 0,38 e 3,31 0,19, respectivamente) e no diferiram entre si. Os demais tratamentos apresentaram valor abaixo de 2 e no diferiram entre si (Figura 9).

9
8
Nota de danos nas folhas

7 6 5 4

b c c

3
2 1 0
Convencional Herculex Optimum PowerCore Viptera

c c

Viptera3

VT Pro

Figura 9. Nota mdia atribuda aos danos causados em folhas pela alimentao de lagartas de Spodoptera frugiperda aos 28 dias aps a emergncia das plntulas do primeiro ensaio. Ribeiro Preto, SP,

36

2013. Colunas seguidas pelas mesmas letras no diferem entre si pelo teste de
Tukey (P0,05).

Aps 35 dias da germinao, os tratamentos se comportaram como na avaliao anterior (Figura 10).

9 8
Nota de danos nas folhas

7
6 5 4 3 2

b
c

1
0
Convencional Herculex Optimum PowerCore Viptera Viptera3 VT Pro

Figura 10. Nota mdia atribuda aos danos causados em folhas pela alimentao de lagartas de Spodoptera frugiperda aos 35 dias aps a emergncia das plntulas do primeiro ensaio. Ribeiro Preto, SP, 2013. Colunas seguidas pelas mesmas letras no diferem entre si pelo teste de
Tukey (P0,05).

No segundo ensaio, semeado em fevereiro de 2013, a infestao de S. frugiperda foi baixa, sendo que na testemunha (convencional) a nota mdia aos 28 dias aps a germinao foi de 2,69 0,19, sendo esse que apresentou o maior valor na data, diferindo dos demais tratamentos, exceto do tratamento Herculex, que no diferiu dos demais (Figura 11).

37

9 8
Nota de danos nas folhas

7 6 5 4
3 2 1 0
Convencional Herculex Optimum PowerCore Viptera Viptera3 VT Pro

a
ab b b b b b

Figura 11. Nota mdia atribuda aos danos causados em folhas pela alimentao de lagartas de Spodoptera frugiperda aos 28 dias aps a emergncia das plntulas do segundo ensaio. Ribeiro Preto, SP, 2013. Colunas seguidas pelas mesmas letras no diferem entre si pelo teste de
Tukey (P0,05).

Aos 35 dias da germinao, novamente o tratamento convencional apresentou o maior valor de nota mdia, diferindo significativamente dos demais tratamentos. O tratamento Herculex apresentou o segundo maior valor, diferindo apenas do tratamento Viptera 3, que apresentou o menor valor (0,66 0,12) (Figura 12).

38

9 8 7
Desfolha (%)

6 5
4 a 3 2 1 0
Convencional Herculex Optimum PowerCore Viptera Viptera3 VT Pro

bc

bc

bc

bc

Figura 12. Nota mdia atribuda aos danos causados em folhas pela alimentao de lagartas de Spodoptera frugiperda aos 35 dias aps a emergncia das plntulas do segundo ensaio. Ribeiro Preto, SP, 2013. Colunas seguidas pelas mesmas letras no diferem entre si pelo teste de
Tukey (P0,05).

Sob forte presso de infestao de S. frugiperda, os milhos transgnicos Bt sofreram menos danos nas folhas do que o milho convencional, no transgnico. Entretanto, os milhos Herculex e Optimum sofreram mais danos da lagarta-do-cartucho do que os demais transgnicos testados. Em baixas infestaes de S. frugiperda, os milhos transgnicos tambm so menos afetados pela praga, mas a diferena entre eles e o milho convencional menor. Os resultados obtidos concordam com aqueles de Silva (2012), que verificou que todos os transgnicos testados foram pouco danificados por S. frugiperda, incluindo Herculex, PowerCore, VT Pro e Viptera e Viptera 3, que so chamados, no trabalho, de OGM1 e OGM2.

39

Esses resultados tambm concordam com Blundi (2011), que verificaram menores danos nas folhas causados por S. frugiperda em milho transgnico Bt que expressava a toxina Cry1F. Tambm concordam com Siebert et al. (2008) e Waquil et al. (2002), para transgnicos que expressam a toxina Cry1F, e com Waquil et al. (2002) e Fernandes et al. (2003), para a toxina Cry1Ab. Os milhos transgnicos so boas opes para o controle E. lignosellus, S. cosmioides e S. frugiperda, mas na condio em que o ensaio foi conduzido, no eficaz no controle de A. ipsilon.

5 CONCLUSES

Baseado nas condies em que o experimento foi conduzido, pode-se concluir que: os milhos transgnicos Bt que expressam as toxinas Cry1F + pat + Cry1A105 + Cry2Ab2 + EPSPS (PowerCore), Cry1A105 + Cry2Ab2 (YieldGard VT PRO), Vip3A + Cry1Ab + EPSPS + pmi (Agrisure Viptera 3), Cry1F + pat (Herculex) e Cry1Ab + Cry1F + EPSPS + pat (Optimum Intrasect) so eficazes no controle de Elasmopalpus lignosellus na fase de plntula, exceto Vip3A + pmi (Agrisure Viptera); os milhos transgnicos testados no so eficazes no controle de Agrotis ipsilon na fase de plntula; os milhos transgnicos Bt testados so eficazes no controle de lagartas de 3 nstar de Spodoptera cosmioides na fase de plntula e planta no estdio V4-5, exceto aquele que expressa os genes Cry1A105 + Cry2Ab2; os milhos transgnicos Bt testados so eficazes no controle de lagartas de 4 nstar de S. cosmioides na fase de plntula e pouco eficazes em plantas no estdio V4-5, sendo que Cry1F + pat + Cry1A105 + Cry2Ab2 + EPSPS e os transgnicos que expressam as toxinas Vip3A so os menos danificados; os milhos transgnicos testados so eficazes no controle de lagartas de Spodoptera frugiperda, em baixa e alta infestao, mas nessa

41

ltima situao aqueles que expressa as toxinas Cry1F + pat e Cry1Ab + Cry1F + EPSPS + pat so menos eficazes.

6 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

ARAJO, C.R. de. Aspectos biologicos de Spodoptera cosmioides Walker, 1858 (Lepidoptera: Noctuidae) nas cultivares de algodoeiro DeltaOPAL e NuOPAL (Bollgard I). 2009. 42f. Dissertao (Mestrado) Faculdade de Cincias Agrrias e Veterinrias/Unesp, Jaboticabal. ARMSTRONG, C.L. et al. Field evaluation of European corn borer control in progeny of 173 transgenic corn events expressing an insecticidal protein from Bacillus thuringiensis. Crop Science, v.35, p.550-557, 1995. ASHLEY, T.R.; MITCHELL, E.R.; LEPPLA, N.C.; GRISSELL, E.E. Parasites attacking fall armyworm larvae, Spodoptera frugiperda, in late planted field corn. Florida Entomologist, v.63, n.1, p.136-143, 1980. BAVARESCO, A. et al. Biologia comparada de Spodoptera cosmioides (Walk.) (Lepidoptera: Noctuidae) em cebola, mamona, soja e feijo. Cincia Rural, v.33, n.6, p.993-998, 2003. BAVARESCO, A.; GARCIA, M.S.; GRTZMACHER, A.D.; RINGENBERG, R.; FORESTI, J. Adequao de uma dieta artificial para a criao de Spodoptera cosmioides (Walk.) (Lepidoptera: Noctuidae) em laboratrio. Neotropical Entomology, v.33, n.2, p.155-161, 2004. BERGAMASCO, V.B. et al. Bacillus thuringiensis Cry1Ia10 and Vip3Aa protein interactions and their toxicity in Spodoptera spp. (Lepidoptera). Journal of Invertebrate Pathology, v.112, n.2, p.152-158, 2013. BENTO, F. de M.M.; MAGRO, S.R.; PARRA, J.R.P. Danos e local de oviposio de Agrotis ipsilon em plntulas de couve (Brassica oleracea var.

43

acephala).

In:

CONGRESSO

BRASILEIRO

DE

ENTOMOLOGIA,

20.,

Gramado, 2004. Resumos... Bento Gonalves: Embrapa Uva e Vinho, 2004. (CD-ROM) BLUNDI, D. dos S. Controle de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) utilizando o milho transgnico Herculex* I em laboratrio e campo. 2011. 28f. Monografia (Trabalho de Graduao em Agronomia) Centro Universitrio Moura Lacerda, Ribeiro Preto, 2011. BOIA JUNIOR, A.L. et al. Anlise de danos produzidos por Spodoptera frugiperda (J. E. Smith, 1797) (Lepidoptera, Noctuidae) em cultivo de milho. Revista de Agricultura, v.67, n.2, p.145-66, 1992. BUENO, R.C.; BUENO, A. de .F.; MOSCARDI, F.; PARRA, J.R.P.; HOFFMANN-CAMPO, C.B. Lepidopteran larva consumption of soybean foliage: basis for developing multiple-species economic thresholds for pest

management decisions. Pest Managment Science, v.67, n.2, p.170-174, 2011. BUNTIN, G.D. Corn expressing Cry1ab or Cry1f endotoxin for Fall Armyworm and Corn Earworm (Lepidoptera: Noctuidae) management in field corn for grain production. Florida Entomologist, v.91, n.4, p.523-530, 2008. CARDOSO, R.T. Nvel de controle da lagarta-do-cartucho, Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae), em trs gentipos de milho. 2010. 28f. Monografia (Trabalho de Concluso de Curso em Agronomia) Centro Universitrio Moura Lacerda, Ribeiro Preto. CARVALHO, R.P.L. de Danos, flutuao da populao, (J.E. controle 1797) e e

comportamento

Spodoptera

frugiperda

Smith,

susceptibilidade de diferentes gentipos de milho, em condies de campo. 1970. 170f. Tese de Doutorado Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Universidade de So Paulo, Piracicaba. CROCOMO, W.B.; PARRA, J.R.P. Desenvolvimento de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) sobre milho, trigo e sorgo. Revista Brasileira de Entomologia, v.29, n.2, p.363-368, 1985.

44

CRUZ, I. A lagarta-do-cartucho na cultura do milho. Sete Lagoas: Embrapa/CNPMS, 1995. 45p. (Circular Tcnica, 21) CRUZ, I. A lagarta-do-cartucho na cultura do milho. Sete Lagoas: Embrapa/CNPMS, 1995. 45p. (Circular Tcnica, 21) CRUZ, I. et al. Efeito do nvel de saturao de alumnio em solo acido sobre os danos de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) em milho. Anais da Sociedade Entomolgica do Brasil, v.25, n.2, p.293-297, 1996. CRUZ, I.; TURPIN, F.T. Efeito da Spodoptera frugiperda em diferentes estgios de crescimento da cultura de milho. Pesquisa Agropecuria Brasileira, v.17, n.3, p.355-359, 1982. CRUZ, I.; TURPIN, F.T. Yield impact of larval infestations of the fall armyworm (Lepidoptera:Noctuidae) to midwhorl growth stage of corn. Journal of Economic Entomology, v.76, n.5, p.1052-1054, 1983. EMBRAPA. Centro Nacional de Pesquisa de Milho e Sorgo (Sete Lagoas, MG). Recomendaes Tcnicas para o cultivo do milho. 2 ed. Braslia: Embrapa SPI, 1997. 204p. EMBRAPA. Centro Nacional de Pesquisa de Milho e Sorgo (Sete Lagoas, MG). Recomendaes Tcnicas para o cultivo do milho. 2 ed. Braslia: Embrapa SPI, 1997. 204p. EVANS, D.C.; STANSLY, P.A. Weekly economic injury levels for fall armyworm (Lepidoptera: Noctuidae) infestation of corn in lowland Ecuador. Journal of Economic Entomology. v.83, n.6, p.2452-2454, 1990. FEITELSON, J.S.; PAINE, J.; KIM, L. Bacillus thuringiensis: insects and beyond. Biotechnology, v.10, p.271-275, 1992. FERNANDES, O.D. et al. Efeito do milho geneticamente modificado MON 810 sobre a lagarta-do-cartucho Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae). Revista Brasileira de Milho e Sorgo, v.2, n.2, p.2535, 2003.

45

FOOTT, W.H.; TIMMINS, P.R. Injury to grain corn by the fall armyworm, Spodoptera frugiperda in Southwestern Ontario, 1977 to 1981. Proceedings of the Entomological Society of Ontario, v.113, n.1, p.17-20, 1982. GALLO, D. et al. Entomologia Agrcola. Piracicaba: Fealq, 2002. 920p. (Biblioteca de Cincias Agrrias Luiz de Queiroz, 10) GALLO, D. et al. Entomologia Agrcola. Piracicaba: Fealq, 2002. 920p. (Biblioteca de Cincias Agrrias Luiz de Queiroz, 10). GHIDIU, G.M.; DRAKE, G.E. Fall armyworm (Lepidoptera: Noctuidae) damage relative to infestation level and stage of sweet corn development. Journal of Economic Entomology, v.82, n.4, p.1197-1200, 1989. GILL, S.S. Mechanism of action of Bacillus thuringiensis toxins. Memrias do Instituto Oswaldo Cruz, v.90, n.1, p.69-74. 1995. GILL, S.S.; COWLES, E.A.; PIETRANTONIO, P.V. The mode of action of Bacillus thuringiensis endotoxins. Annual Review of Entomology, v.37, p.615636. 1992. GOMES, P. Nvel de dano de Agrotis ipsilon (Hufnagel) (Lepidoptera: Noctuidae) em plntulas de milho. 2013. 27f. Monografia (Trabalho de Concluso de Curso em Agronomia) Centro Universitrio Moura Lacerda, Ribeiro Preto. GRTZMACHER, A.D.; MARTINS, J.F.S.; CUNHA, U.S. Insetos-pragas das culturas do milho e sorgo no agroecossistema de vrzea. In: PARFITT, J.M.B. Produo de milho e sorgo em vrzea. Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2000. p.87-101. (Embrapa Clima Temperado: Documentos, 74) HABIB, M.E.M.; PALEARI, L.M.; AMARAL, M.E.C. Effect of three larval diets on the development of the armyworm, Spodoptera latifascia Walker, 1856 (Noctuidae, Lepidoptera). Revista Brasileira de Zoologia, v.1, p.177-182, 1983. HARRISON, F.P. Oviposition and subsequent infestation of corn by fall armyworm (Lepidoptera: Noctuidae). Florida Entomologist, v.69, n.3, p.588592, 1986.

46

HARRISON, F.P.; HARRISON, T.S. Yield losses to field corn from foliar feeding by fall armyworm (Lepidoptera: Noctuidae). Journal of Entomological Science, v.22, n.3, p.270-274, 1987. HERMSTADT, C.; SOARES, G.G.; WILCOX, E.R.; EDWARDS, D.L. New strain of Bacillus thuringiensis with activity against Coleopteran insects.

Biotechnology, v.4, p.305-308, 1986. HRUSKA, A.J. Periodos criticos de proteccion y el efecto de infestacion del gusano cogollero, Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) en maiz bajo riego en Nicaragua. Manejo Integrado de Plagas, n.12, p.37-47, 1989. HRUSKA, A.J.; GLADSTONE, S.M. Effect of period and level of infestation of the fall armyworm Spodoptera frugiperda, on irrigated maize yield. Florida Entomologist, v.71, n.3, 249-254, 1988. HRUSKA, A.J.; GOULD, F. Fall armyworm (Lepidoptera: Noctuidae) and Diatraea lineolata (Lepidoptera: Pyralidae): impact of larval population level and temporal occurrence on maize yield in Nicaragua. Journal of Economic Entomology, v.90, n.2, p.611-622, 1997. HUANG, F.; BUSCHMAN, L.L.; HIGGINS, R.A.; LI, H. Survival of Kansas dipelresistant European corn borer (Lepidoptera: Crambidae) on Bt and non-Bt corn hybrids. Journal of Economic Entomology, v.95, n.3, p.614-621, 2002. IVAN, E.A.F.; SILVA, B.F.B. da; ARROYO, B.M.; MASSON, M.B.; LITHOLDO, M.G.; LOPES, V.L.; PINTO, A. de S.; SANTOS, A.C. dos; MARQUES, L.H. da S.F. Comparao entre milhos transgnicos Bt e convencional quanto aos danos causados por Elasmopalpus lignosellus (Lepidoptera: Pyralidae) em plntulas. In: CONGRESSO NACIONAL DE MILHO E SORGO, 24., guas de Lindoia, SP, 2012. Resumo expandido... Belo Horizonte: ABMS, 2012. (CDROM) LALANNE-CASSOU, B. et al. Mecanismes d.isolement reproducteur chez les especes du complexe neotropical Spodoptera latifascia, S. cosmioides, S. descoinsi (Lepidoptera: Noctuidae). Annales de la Societe Entomologique de France, v.35, supl., p.109-116, 1999.

47

LYNCH, R.E.;

PAIR,

S.D.;

JOHNSON, R. Fall armyworm fecundity:

relationships of egg mass weight to number of eggs. Journal of the Georgia Entomological Society, v.18, n.4, p.507-513, 1983. MARENCO, R.J.; FOSTER, R.E.; SANCHEZ, C.A. Sweet corn response to fall armyworm (Lepidoptera: Noctuidae) damage during vegetative growth. Journal of Economic Entomology, v.85, n.4, p.1285-1292, 1992. MATRANGOLO, W.J.R; CRUZ, I.; DELLA LUCIA, T.M.C. Insetos fitfagos presentes em estilos-estigma e espigas de milho e avaliao de dano. Pesquisa Agropecuria Brasileira, v.32, n.8, p.773-779, 1997. MENDES, S.M.; BOREGAS, K.G.B.; LOPES, M.E.; WAQUIL, M.S.; WAQUIL, J.M. Respostas da lagarta-do-cartucho a milho geneticamente modificado expressando a toxina Cry 1A(b). Pesquisa Agropecuria Brasileira, v.46, n.3, p.239-244, 2011. MEYERS, H.B., JOHNSON, D.R.; SINGER, T.L.; PAGE, L.M. Survival of Helicoverpa zea Boddie on Bollgard cotton. In: BELTWIDE COTTON

CONFERENCE, 2., Memphis, 1997. Proceedings... Memphis: National Cotton Council, 1997. p.1269-1271. MOCHIDA, O.; OKADA, T. A bibliography of Spodoptera spp. (Lepidoptera, Noctuidae). Miscellaneous Bulletin of Kyushu National Agricultural Experiment Estation, n.49, p.1-110, 1974. MORAES, A.R.; OLIVEIRA, A.C.; CRUZ, J.C. Comparao de mtodos de correo de produes de milho em parcelas experimentais. Sete Lagoas: Embrapa/Centro Nacional de Pesquisa de Milho e Sorgo, 1986. 130p. (Relatrio Tcnico Anual: 1980-1984, CNPMS) PIETRANTONIO, P.V.; FEDERICI, B.A.; GILL, S.S. Interaction of Bacillus thuringiensis endotoxins with the insect midgut epithelium, cap.3. In: THOMPSON, S.N.; FEDERICI, B.A. (eds.). Parasites and pathogens of insects. New York: Academic Press, v.2, 1993. p.55-79.

48

PINTO, A. de S.; PARRA, J.R.P.; OLIVEIRA, H. N. de. Guia ilustrado de pragas e insetos benficos do milho e sorgo. Ribeiro Preto: A. S. Pinto, 2004. 108p. PINTO, A. de S.; PARRA, J.R.P.; OLIVEIRA, H.N. de. Guia ilustrado de pragas e insetos benficos do milho e sorgo. Ribeiro Preto: A. S. Pinto, 2004. 108p. PORTILLO, H.E. et al. Langosta: a lepidopterous pest complex on sorghum and maize in Honduras. Florida Entomologist, v.74, n.2, p.287-296, 1991. RAMIREZ GARCIA, L.; BRAVO MOJICA, H.; LLANDERAL CAZARES, C. Development of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) under different conditions of temperature and humidity. Agrociencia, n.67, p.161-171, 1987. RIZZO, H.F.; LA ROSSA, F.R. Aspectos morfolgicos y biolgicos de la 'oruga militar tarda' (Spodoptera frugiperda J. E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae). Revista de la Facultad de Agronoma, Universidad de Buenos Aires , v.13, n.2/3, p.193-199, 1992. SALES, F.J.M.; MONTENEGRO, F.J. Interferncia da lagarta da folha do milho na produo do milho. Nota previa. Fitossanidade, v.5, n.1, p.57-58, 1981. SANTOS, K.B. dos; MENEGUIM, A.M.; NEVES, P.M.O.J. Biologia de Spodoptera eridania (Cramer) (Lepidoptera: Noctuidae) em diferentes

hospedeiros. Neotropical Entomology, v.34, n.6, p.903-910, 2005. SANTOS, K.B. dos et al. Selection and characterization of the Bacillus thuringiensis strains toxic to Spodoptera eridania (Cramer), Spodoptera cosmioides (Walker) and Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera:

Noctuidae). Biological Control, v.50, n.2, p.157-163, 2009. SANTOS, L.; SHIELDS, E.J. Yield responses of corn to simulated black cutworm (Lepidoptera: Noctuidae) damage. Journal of Economic

Entomology, v.91, n.3, p.748-758, 1998.

49

SHELTON, A.M. Management of Lepidoptera on processing sweet corn in western New York. Journal of Economic Entomology, v.79, n.6, p.16581661, 1986. SHOWERS, W.B.; von KASTER, L.; MULDER, P.G. Corn Seedling Growth Stage and Black Cutworm (Lepidoptera: Noctuidae) Damage. Environmental Entomology, v.12, n.1, p.241-244, 1983. SIEBERT, S.W. et al. Efficacy of Cry1f insecticidal protein in maize and cotton for control of Fall Armyworm (Lepidoptera: Noctuidae). Florida Entomologist, v.91, n.4, p.555-565, 2008. SILVA, A.G.DA.; GONALVES, C.R.; GALVO, D.M.; GONALVES , A.J.L.; GOMES, J.; SILVA, M.N.; SIMONI, L. Lab. In: CENTRAL PATOLOGIA VEGETAL, MA. Quarto catlogo dos insetos que vivem nas plantas do Brasil. Seus parasitos e predadores. (Ed.) Rio de Janeiro: Ministrio da Agricultura, 1968, v.1, pt.2, 622 p. SILVA, B.F.B. da. Comparao entre milhos transgnicos Bt no controle de Spodoptera frugiperda e Elasmopalpus lignosellus em campo. 2012. 38f. Monografia (Trabalho de Concluso de Curso em Agronomia) Centro Universitrio Moura Lacerda, Ribeiro Preto. SILVA, P.C.S. da; LOVATO, C.; LCIO, A.D. redues iniciais de populaes em trs hbridos de milho e sua relao com variveis componentes do rendimento de gros. Revista da FZVA, v.9, n.1, p.56-64, 2002. SILVA, P.H.S. Avaliao de danos de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) no milho cultivado com dois nveis de fertilidade. 1995. 84f. Dissertao (Mestrado em Entomologia) Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Universidade de So Paulo, Piracicaba. SILVAIN, J.F.; LALANNE-CASSOU, B. Distinction entre Spodoptera latifascia (Walk.) et Spodoptera cosmioides (Walk.), bona species (Lepidoptera: Noctuidae). Revue Franaise d.Entomologie, v.19, p.95-97, 1997.

50

SILVA-WERNECK, J.O. et al. Novo isolado de Bacillus thuringiensis efetivo contra a lagarta-do-cartucho. Pesquisa Agropecuria Brasileira, v.35, n.1, p.221-227, 2000. STATSOFT. Statistica for Windows: computer program manual. Tulsa, OK: StatSoft Inc., 1996. VAZQUEZ, G.M. et al. Cria masiva del guisano cogollero, Spodoptera

frugiperda (J.E. Smith) y evaluacion de infestaciones artificiales sobre maiz en el campo. Agrociencia, n.22, p.3-13, 1975. VENCOVSKY, R.; CRUZ, C.D. Comparao de mtodos de correo do rendimento de parcelas com estandes variados. I. Dados simulados. Pesquisa Agropecuria Brasileira, v.25, n.5, p.647-657, 1991. VIANA, P.A. Lagarta-elasmo. In: SALVADORI, J.R.; VILA, C.J.; SILVA, M.T.B. Pragas de solo no Brasil. Passo Fundo: Embrapa Trigo; Dourados: Embrapa Agropecuria Oeste; Cruz Alta: Fundacep Fecotrigo, 2004. p.379-408. VIANA, P.A. Manejo de elasmo na cultura do milho. Sete Lagoas: Embrapa Milho e Sorgo, 2009. 8p. (Embrapa Milho e Sorgo. Circular Tcnica, 118) VIANA, P.A.; CRUZ, I.; WAQUIL, J.M. Danos da lagarta-elasmo cultura do milho e medidas para o seu controle. Sete Lagoas: Embrapa Milho e Sorgo, 2000. 3p. (Embrapa Milho e Sorgo. Comunicado Tcnico, 20) VILELLA, F.M.F. et al. Selection of the fall armyworm, Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) for survival on Cry 1A(b) Bt. toxin. Revista Brasileira de Milho e Sorgo, v.1, p.12-17, 2002. VINHA, F.B. Nvel de dano de Spodoptera cosmioides (Walker) e S. eridania (Cramer) (Lepidoptera: Noctuidae) em plntulas de milho. 2013. 31f. Monografia (Trabalho de Concluso de Curso em Agronomia) Centro Universitrio Moura Lacerda, Ribeiro Preto. WAQUIL, J.M.; VILELLA, F.M.F.; FOSTER, J.E. Resistncia de milho (Zea mays L.) transgnico lagarta-do-cartucho, Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera: Noctuidae). Revista Brasileira de Milho e Sorgo, v.1, p.1-11, 2002.

51

WAQUIL, J.M.; VILELLA, F.M.F.; SIEGDRIED, B.D.; FOSTER, J.E. Atividade biolgica das toxinas do Bt, Cry 1A(b) E Cry 1F em Spodoptera frugiperda (Smith) (Lepidoptera: Noctuidae). Revista Brasileira de Milho e Sorgo, v.3, n.2, p.161-171, 2004. WILLIAMS, W.P. et al. Factors associated with resistance to fall armyworm (Lepidoptera: Noctuidae), and southwestern corn borer (Lepidoptera:

Crambidae) in corn at different vegetative stage. Journal of Economic Entomology, v.91, p.1471-1480, 1998a. WILLIAMS, W.P.; BUCKLEY, P.M.; SAGERS, J.B.; HANTEN, J.A. Evaluation of transgenic corn for resistance to corn earworm (Lepidoptera: Noctuidae), fall armyworm (Lepidoptera: Noctuidae), and southwestern corn borer (Lepidoptera: Crambidae) in a laboratory bioassay. Journal of Agricultural Entomology, v.15, p.105-112, 1998b. WHITFORD, F.; SHOWERS, W.B.; von KASTER, L. Influence of Actual and Manual Black Cutworm (Lepidoptera: Noctuidae) Damage on Recovery and Grain Yield of Field Corn. Journal of Economic Entomology, v.82, n.6, p.1773-1778, 1989. WILLIAMS, W.P.; DAVIS, F.M. Response of corn to artificial infestation with fall armyworm and southwestern corn borer larvae. Southwestern Entomologist, v.15, n.2, p.163-166, 1990. WILLINK, E.; OSORES, V.M.; COSTILLA, M.A. Ataque de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) en diferentes fechas de siembra del maiz en Tucuman. Revista Industrial y Agricola de Tucuman, v.71, n.1-2, p,69-72, 1994. WISEMAN, B.R.; WIDSTROM, N.W. Fall armyworm damage ratings on corn at various infestation levels and plant development stages. Journal of Agricultural Entomology, v.1, n.2, p.115-119, 1984. ZUBER, M.S. Relative efficiency of incomplete block designs using corn uniform trial data. Journal of the American Society of Agronomy, v.34, n.1, p.30-47, 1942.