REPORTE DE LA PRCTICA: CARACTERIZACIN DE CARBOHIDRATOS. Cuestionario de resultados. 1.

- coloque en la tabla 2 los resultados del anlisis de los componentes de la muestra realizado en la primera parte del curso (humedad, cenizas totales, protena cruda, grasa cruda y fibra diettica total) Tabla 2. Macro componentes en la muestra original. Componente Humedad Cenizas Grasa cruda Protena cruda Fidbra diettica total Carbohidratos digeribles. Muestra original (%) 6.5 1.5 14 8 3.6 66.4

Determinacin de carbohidratos solubles Mtodo fenol-sulfrico. Datos para la curva patrn. g/ml 0 10 30 50 70 100 absorbancia 0 0,092 0,253 0,456 0,69 0,965

curva patron de fenol- sulfurico

1.2 1 absorbancia 0.8 0.6 0.4 0.2 0 -0.2 0 20 40 60 g/ml 80 100 120 y = 0.0098x - 0.014 R = 0.9975

De la curva patrn se despeja x que es la concentracin. X= Valores de absorbancia experimentales para la galleta. determinacin 1 2 3 absorbancia 0.702 0.906 0.961 Valor de X 73.06 93.87 99.48 % Carbohidratos totales 36.38 46.74 49.54

calculos X= =73.06g/ml

)(

)(

)(

Mtodo DNS Datos para la curva patrn. mg/ml 0 0,2 0,2 0,6 0,6 1 1 1,6 1,6 2 2 absorbancia 0 0,085 0,06 0,242 0,25 0,506 0,49 0,788 0,822 1,01 1,04

curva patron DNS

1.2 1 0.8 absorbancia 0.6 0.4 0.2 0 -0.2 0 0.5 1 mg/ml 1.5 2 2.5 y = 0.5266x - 0.0358 R = 0.9964

Partiendo de la ecuacin de la recta y despejando X X=

Valores experimentales de DNS directo para la galleta determinacin absorbancia Valor de X % de carbohidratos reductores. 10.80 18.19 12.18

1 2 3

0.193 0.349 0.222

0.434 0.7307 .4895

X=

=0.434mg/ml ( )( )( )( )

Absorbancias DNS invertasa para la galleta. % de sacarosa determinacin 1 2 3 absorbancia 0.544 0.618 0.576 Valor de x 1.10 1.24 1.16

X=

=1.10mg/ml

)(

)(

)(

Considerando la extraccin de carbohidratos y reacciones en el sobrenadante. Encontr diferencia en la respuesta con el mtodo de DNS antes y despus del uso de la invertasa? Qu significa? Incluya clculos y concentraciones obtenidas. Si se encontr diferencia ya que el mtodo de DNS directo solo sirve para saber la cantidad de compuestos reductores que tiene la muestra por lo tanto el valor ser menor, mientras que al agregarle la enzima invertasa esta hace que podamos cuantificar adems de compuestos

reductores tambin sacrosa ya que esta enzima provoca que la sacarosa adquiera un carcter reductor por lo tanto el valor ser mayor. Pues que al tener un valor mayor esto nos indica que si hay presente sacarosa. Para DNS directo X= =0.434mg/ml ( )( )( )( )

Para DNS invertasa.

falta
Existe diferencia en los valores obtenidos por DNS despus de la hidrlisis enzimtica y los obtenidos en la reaccin de fenol sulfrico? Incluya clculos y concentraciones. Explique Si existe diferencia ya que el mtodo de fenol sulfrico nos sirvi para cuantificar a los carbohidratos totales mientras que el mtodo de DNS invertasa es tanto para carbohidratos reductores y sacarosa pero habr algunos carbohidratos no reductores que no podrn hidrolizarse y por lo tanto no se podrn cuantificar.

Carbohidratos insolubles.

Mtodo de reaccin con yodo Datos para la curva patrn mg/ml 0 0.02 0.06 0.10 0.14 0.20 Absorbancia 0 0.084 0.235 0.383 0.514 0.790

curva patron de yodo

0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 -0.1 0 y = 3.8617x - 0.0003 R = 0.9975

absorbancia

0.05

0.1 ml/ml

0.15

0.2

0.25

X= Valores experimentales de absorbancia para yodo determinacin 1 2 3 Abs. Experimentales 0.547 0.434 0.447 Valor de x 0.141 0.112 0.1158 % de almidon 35.60 28.28 29.24

Clculos

X=

=0.141mg/ml

)(

)(

)(

Reaccin con carbazol. Datos para la curva patrn. g/mL 0 4 10 20 30 40

Abs(600nm) 0 0.014 0.039 0.111 0.187 0.244

curva patron de carbazol

0.3 0.25 0.2 absorbancia 0.15 0.1 0.05 0 -0.05 0 10 20 g/ml 30 40 50 y = 0.0064x - 0.0112 R = 0.9922

X=

determinacin 1 2 3

Abs. Experimentales 0.161 0.114 0.178

Valor de x 26.90 19.56 29.56

% de pectinas 6.79 4.93 7.46

X=

=0.141g/ml

)(

)(

)(

Considerando solo el material insoluble en etanol y las determinaciones realizadas . Cul es la concentracin de los carbohidratos que reaccionan con yodo en el residuo de material insoluble en etanol? Incluya clculos X= =0.141mg/ml

)(

)(

)(

Cul es la concentracin de estos carbohidratos que reacciona con carbazol en el residuo de material insoluble en etanol? X= =0.141g/ml

)(

)(

)(

La suma del peso de los carbohidratos medidos en el material insoluble, las protenas y cenizas de este material insoluble corresponden al peso del material recuperado? Cmo se puede explicar este resultado?

De acuerdo con el valor obtenido en la primera parte del curso, existe diferencia entre el valor de la fibra diettica por el mtodo enzimtico-gravimetrico y el estimado en esta parte del curso?explique Si, por que Considerando todos lo resultados Realice un balance de materia para la fraccin de carbohidratos e incluya clculos. Existe discrepancia entre el valor obtenido de los carbohidratos calculados por diferencia en la primera parte del curso con respecto a los obtenidos en este modulo? Discuta ampliamente.

Tabla de tipo de carbohidratos y concentracin. Letra del diagrama Componentes y/o tipo de carbohidrato A B C D E F G OLIGOSACARIDOS Y MONOSACARIDOS H I AZUCARES REDUCTORES SACAROSA Y AZUCARES REDUCTORES J K SACAROSA POLISACARIDOS INSOLUBLES POLISACARIDOS SOLUBLES ALMIDON PECTINAS POLISACARIDOS TOTALES Concentracin en la muestra original