CAPTULO 6

METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS: DIGESTIN, ABSORCIN Y DISTRIBUCIN TISULAR

Dr. Valmor B rm!" # P$r la

INTRODUCCIN Los carbohidratos son sustancias qumicas orgnicas de muy amplia distribucin en la biosfera. En las plantas son producidos mediante el proceso de la fotosntesis e incluyen a la celulosa como ejemplo de un carbohidrato estructural y al almidn como ejemplo de carbohidrato de almacn. En las clulas animales, los carbohidratos -en forma de glucosa o de glucgeno sir!en como fuente importante de energa para las acti!idades !itales de la mayora de las especies !i!ientes que habitan el planeta. En realidad, la sntesis de carbohidratos forma parte de una larga cadena metablica que se inicia con la lu" solar, el #$% y agua tomadas por las plantas como elementos bsicos para la produccin de glucosa que posteriormente es usada para la sntesis de almidn y celulosa. &e esta manera, las plantas trabajan para sinteti"ar carbohidratos que sern incorporados dentro de nuestro organismo al alimentarnos de ellas. 'ara poder ser absorbidos todos los polisacridos, oligosacridos y disacridos deben ser escindidos a sus unidades estructurales bsicas, es decir, deben ser con!ertidos en monosacridos mediante un proceso denominado digestin, el cual es catali"ado por en"imas hidrolticas. &espus de este proceso, todos los monosacridos deben pasar desde la lu" intestinal al interior del enterocito, lo cual se conoce como absorcin. &ebe tomarse en cuenta que los monosacridos son molculas polares que son incapaces de atra!esar la membrana por lo que e(isten sistemas especiali"ados de transporte que lle!an a cabo esa importante funcin. )inalmente, no debe pensarse que la *nica fuente de carbohidratos en nuestro organismo es por medio de la dieta. La naturale"a a tra!s de millones de a+os de e!olucin ha pro!isto a los seres !i!os de !as alternas de produccin de glucosa ,para los momentos de ayuno- a partir de compuestos diferentes a los carbohidratos. Este proceso, denominado gluconeognesis es de !ital importancia ya que proporciona cantidades adecuadas de glucosa a aquellos tejidos como el ner!ioso y los eritrocitos que consumen de manera casi e(clusi!a este carbohidrato como fuente de energa.

EL TRACTO GASTRINTESTINAL ES UN CON%UNTO DE RGANOS ESPECIALI&ADOS EN LA DIGESTIN Y ABSORCIN DE NUTRIENTES El tracto gastrointestinal tiene funciones de digestin, absorcin, secrecin y de barrera, adems de ser un rgano endocrino de gran importancia y parte del sistema inmunolgico. El aparato digesti!o es un conjunto de rganos bsicamente tubulares que se e(tiende desde la boca hasta el ano y que permite el paso y transformacin de los alimentos haciendo posible la absorcin de nutrientes hasta la circulacin intestinal en forma de peque+as molculas ,monosacridos, aminocidos, !itaminas, etc.- y el transporte al e(terior del remanente no absorbido en forma de heces. &e esta forma, la digestin es el proceso por el cual el material alimenticio se transforma en estas sustancias simples que pueden absorberse a la circulacin !enosa. En lneas generales, el fenmeno de la digestin en su fase oral se relacionada con la disgregacin de los alimentos a partculas ms peque+as gracias a los dientes, la lengua y la sali!a formando el llamado .bolo alimenticio/ que ir progresando hacia ele estmago y despus al intestino delgado donde en"imas hidrolticas especficas para completar el fenmeno digesti!o. &esde un punto de !ista anatmico el aparato digesti!o se di!ide en 0 secciones bsicas1 a- La boca, que incluye la orofaringe, dientes, lengua y glndulas sali!ares. b- El sistema tubular, constituido por el esfago, estmago e intestino delgado y grueso. c- 2lndulas ane(as, representadas por el hgado y el pncreas. 3istolgicamente hablando, el aparato digesti!o tubular tiene la misma organi"acin bsica en toda su e(tensin disponindose en 4 capas bien definidas1 la mucosa, la sub-mucosa, la muscular y la serosa ,)igura 5-. a- La m'(o)a es una membrana de epitelio superficial, h*meda y lubricada por moco que se apoya sobre la membrana basal que a la !e" esta apoyada en otra capa de tejido conecti!o denominada .lmina propia/, que en algunas partes del tubo digesti!o se relaciona con una capa delgada muscular llamada .muscular de la mucosa/. En el intestino delgado esta capa es irregular mostrando proyecciones hacia la lu" que se conocen como !ellosidades intestinales y que hacia su fondo forman estructuras llamadas criptas. Es importante se+alar que en la lmina propia se sit*an numerosos capilares sanguneos y linfticos hacia los cuales pasan las biomolculas de bajo peso molecular absorbidas ,)igura 5-. b- La )'*m'(o)a se e(tiende desde la mucosa hasta la muscular y est formada por tejido conecti!o areolar grueso con algunas fibras elsticas. &entro de esta capa se encuentran ple(os de grandes !asos sanguneos y ner!ios parte del sistema ner!ioso autnomo que se denominan en conjunto ple(o submucoso de 6eissner. c- La m')('lar esta formada por % capas, una interna de m*sculo liso orientada circularmente y una e(terna orientada de forma longitudinal. Entre ambas se encuentra una red !ascular y un ple(o ner!ioso asociado a ganglios peque+os denominado ple(o mioentrico de 7uerbach de naturale"a parasimptico. Esta capa muscular permite la progresin del material alimenticio a lo largo del tubo digesti!o gracias a la generacin de ondas denominadas peristlticas. d- La ) ro)a es la capa ms e(terna y comprende tejido conecti!o areolar denso. En muchas regiones del tubo digesti!o esta recubierta por el peritoneo, esto es, por una capa *nica de clulas mesioteliales. Los !asos sanguneos, linfticos y ner!ios pasan a tra!s de sta hacia las otras capas.

&esde el punto de !ista embriolgico el epitelio del tubo digesti!o pro!iene del endodermo, con e(cepcin del ano y la boca que tienen origen ectodrmico. Los tejidos conecti!o y muscular pro!ienen del mesodermo !isceral. EL INTESTINO DELGADO POSEE UNA ORGANI&ACIN ESPECIALI&ADA PARA LA ABSORCIN DE NUTRIENTES ESTRUCTURAL

El intestino delgado se e(tiende desde el orificio pilrico ,en donde se une con el estmagohasta la unin leocecal, comprendiendo unos 8 metros de longitud y que para poder acomodarse dentro de la ca!idad abdominal se encuentra formando fle(iones denominadas asas intestinales. Esta porcin del tubo digesti!o se di!ide en tres partes, el duodeno, de unos %9 cm de longitud, el :eyuno que comprende de %;< partes del tama+o total y el =leon que representa las restantes 0;< partes de la longitud del intestino delgado. El intestino delgado es un rgano altamente especiali"ado para la digestin y absorcin de biomolculas, por lo que presenta una superficie muy amplia y una irrigacin sangunea abundante que permite recoger todos los solutos y lquido absorbido. 'ara poder lle!arse a cabo este cometido la organi"acin anatmica del intestino delgado adopta !arias formas estructurales que incrementan en gran medida la superficie absorti!a y que del orden macroscpico al microscpico estn representadas por1 a- Pl$ +' ) ($r('lar ) ,>l!ulas de ?er@ring o !l!ulas conni!entes-. Aon pliegues formados por la mucosa y sub-mucosa que se e(tienden %;0 o ms alrededor de la circunferencia intestinal. Estos comien"an en el duodeno a unos < cm del ploro y llegan a su desarrollo m(imo en el :eyuno pro(imal. Los pliegues entre s limitan un rea plana de epitelio intestinal que se denominan placas de Aeller ,)igura %-. b- V llo)$"a" ) $,- )-$,al ). Aon peque+as proyecciones de la mucosa en forma de dedos de unos 9,< 5,< mm de longitud y que se encuentran e(clusi!amente en el intestino delgado. Ae encuentran cubiertas en su totalidad por clulas epiteliales presentando un n*cleo de lmina propia sin submucosa ,)igura 0-. Las criptas o glndulas de Lieber@Bhn son estructuras tubulares que desembocan entre dos !ellosidades ,en su base- e(tendindose hasta lo profundo de la mucosa, a !eces incluso, hasta la muscular de la mucosa ,)igura 0-. c- M$(ro. llo)$"a" ). 'ara incrementar a*n ms la superficie de absorcin en el intestino delgado las clulas epiteliales ,el enterocito- que recubren las !ellosidades tienen una cara luminal rica de innumerables prolongaciones de la membrana plasmtica denominadas micro!ellosidades ,de 5.999 a %.999 por clula-. En la superficie de la membrana plasmtica de las micro!ellosidades se encuentra el glucocli( que est compuesto de filamentos irregulares de glicoprotenas. En el glucocli( se encuentran las en"imas lactasa, sacarasa, maltasa y !arias peptidasas ,)igura 4-. LA DIGESTIN DE LOS CARBOHIDRATOS SE LLEVA A CABO GRACIAS A EN&IMAS HIDROLTICAS Co e(iste un requerimiento nutricional mnimo para los carbohidratos tal como se establece para otros tipos de nutrientes como las !itaminas, sin embargo, los carbohidratos son la

fuente principal de caloras representando apro(imadamente el D9 E de los requerimientos energticos diarios en el ser humano. La mayor fuente de glucosa en la dieta es el almidn y tal como se describi en el capitulo anterior, es un carbohidrato ramificado de reser!a sinteti"ado por las plantas y que se encuentra organi"ado de dos maneras, una ramificada, llamada amilopectina ,'6 F 5.999.999 daltones-, la cual es la forma ms abundante y otra lineal constituida por la unin de muchas molculas de glucosa por enlaces G54H llamada amilosa ,'6 599.999 daltones-. $tro polisacrido importante en la dieta, aunque no hidroli"able y por lo tanto no absorbible es la celulosa ,otro polmero de glucosa formado por uniones G54Hrepresentando un componente fundamental de la pared celular de las plantas y que encarna la parte ms importante de la fibra diettica. 7 pesar que las en"imas intestinales no pueden hidroli"ar los enlaces tipo , la celulosa y otros tipo de carbohidratos no digeribles cumplen un papel fundamental en la regulacin del transito intestinal, la composicin hdrica de las heces y en la pre!encin de ciertos tipos de neoplasias como el cncer de colon. La sacarosa y la lactosa son los principales disacridos encontrados en la dieta normal y la glucosa y la fructosa son los monosacridos ms abundantes en la misma. La "$+ )-$/, " lo) (ar*o0$"ra-o) ) $,$($a , la *o(a 1 ('lm$,a , l $,- )-$,o " l+a"o La digestin de los carbohidratos se inicia en la boca gracias a la accin mecnica de la masticacin y los mo!imientos de la lengua que permiten la disgregacin de los alimentos y su me"cla con la sali!a, un fluido acuoso producido por las glndulas partidas, subma(ilares y sub-linguales, y que respecto a la digestin de los carbohidratos contiene una en"ima de particular inters1 la -amilasa sali!al, la cual es capa" de hidroli"ar enlaces G54H internos en el almidn generando como productos a la maltosa, maltotriosa, oligosacridos lineales formados por glucosa G54H, polisacridos grandes ,%9-09 unidades de glucosa- unidos por enlaces G54H y las de(trinas oligosacridos que contienen un punto de ramificacin G5DH y de cinco a nue!e unidades de glucosa ,)igura <-. La accin de la amilasa sali!al contin*a hasta que el alimento pasa al estmago y se pone en contacto con la secrecin cida de este rgano la cual desnaturali"a la en"ima poniendo final a su acti!idad cataltica. &urante la fase gstrica de la digestin, esto es, dentro del estmago, no inter!ienen

E,#$ma)
Com4l 5o Sa(ara)a6I)omal-a)a Sa(ara)a Mal-a)a I)omal-a)a 76Am$la)a La(-a)a T -rala)a

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E,la( 0$"rol$#a"o

Aacarosa 6altosa, 6altotriosa Ksomaltosa y de(trina lmite $ligosacridos, de(trinas Lactosa Ietralosa

)ructosa L 2lucosa 2lucosa L 2lucosa 2lucosa 2lucosa 2lucosa L 2alactosa 2lucosa

-G5%H -G54H -G5DH -G54H -G54H -G55H

Iabla 5. En"imas que participan en la digestin intestinal de los carbohidratos

en"imas capaces de digerir los carbohidratos, sin embargo, los mo!imientos peristlticos, el cido clorhdrico y en"imas proteolticas son capaces de lisar las clulas animales y !egetales que pueden contener en su interior carbohidratos complejos, de manera que facilitan la e(posicin de stos a las en"imas digesti!as del intestino delgado. Luego de ocurrido el !aciamiento gstrico el contenido del estmago pasa al duodeno donde se pone en contacto con las secreciones pro!enientes del pncreas ,rica en en"imas y bicarbonato- y que contiene la -amilasa pancretica, una en"ima que no se diferencia en especificidad, sustratos ni productos a la -amilasa sali!al, aunque su p3 ptimo, cercano a J es diferente al su pariente sali!al y por supuesto, el ideal para el ambiente alcalino del intestino delgado. El proceso de hidrlisis de las molculas de almidn y glucgeno remanentes se inicia rpidamente y como el tiempo no es una !ariable limitante en la digestin intestinal ,como s lo es en la boca- despus de unos 5< a %9 minutos la mayor parte de estos polisacridos han sido descompuestos a disacridos, trisacridos y de(trina lmite ,)igura <-, los cuales son el sustrato de la siguiente fase proceso digesti!o intestinal lle!ado a cabo por una serie de en"imas que de forma genrica se denominan oligosacaridasas y disacaridasas del borde en cepillo1 la sacarasa que degrada la sacarosa en glucosa y fructosa, la lactasa que degrada la lactosa en glucosa y galactosa, la glucoamilasa que hidroli"a las uniones terminales G54H y la isomaltasa ,o de(trinasaque desramifica las -de(trinas lmite al hidroli"ar las uniones G5DH. Es importante se+alar que la sacarasa y la isomaltasa se sinteti"an como una protena dimrica que despus de su

insercin en el borde en cepillo es escindida para con!ertirse en dos polipptidos separados, uno con acti!idad de isomaltasa y otro con acti!idad de sacarasa. Mna !e" concluido este proceso solo se encontrarn dentro del intestino delgado monosacridos como la glucosa, fructosa y galactosa, para los cuales e(isten sistemas especficos de transporte para lle!arlos a tra!s de la membrana de la clula epitelial intestinal hacia el interior del enterocito. LA ABSORCIN DE LOS CARBOHIDRATOS SE REALI&A GRACIAS A PROTENAS TRANSPORTADORAS DE MEMBRANA Mna !e" culminado el proceso digesti!o, la lu" intestinal contiene una cantidad apreciable de monosacridos que deben ser trasladados hacia interior de la clula epitelial intestinal, este proceso de transferencia a tra!s de la membrana del enterocito se denomina absorcin y ocurre gracias a la inter!encin de una serie de protenas de membrana que en conjunto se denominan .transportadores para la glucosa/ cada uno de los cuales presenta caractersticas especficas tanto en su estructura primaria, secundaria, terciaria as como en su afinidad y especificidad para la glucosa y para otras he(osas. En el epitelio intestinal la distribucin de las protenas transportadoras de he(osas es asimtrica, ya que en el polo luminal abundan dos transportadores1 El A2LI-5 , Sodium Glucose Transporter-8- y el 2lut-<, mientras que en el polo basal abunda el transportador 2lut-%. El transporte de la glucosa, manosa y galactosa hacia el interior del enterocito es mediado fundamentalmente por el A2LI-5, un #o-transportador constituido por 54 alfa-hlices que cru"an completamente la membrana plasmtica y que se organi"an para formar un poro por el cual penetran las estas he(osas junto con % tomos de Ca L ,)igura D-. En la actualidad se conoce que el proceso de absorcin de la glucosa ocurre en 4 fases1 5. Mnin de dos iones CaL a la cara e(terna del transportador que produce un cambio conformacional que permite el acoplamiento de 5 molcula de glucosa o galactosa. %. Iransferencia del CaL y el monosacrido hacia la cara citoplasmtica del transportador gracias a un segundo cambio conformacional ocasionado por la glucosa y que in!olucra la rotacin y el re-arreglo de la estructura N-helicoidal del A2LI-5. 0. Mna !e" en la cara interna del transportador, la glucosa se disocia del mismo y pasa al citosol para luego e(pulsar los % iones Ca L, restituyendo al transportador a su forma libre de ligando. La baja afinidad del sitio de unin intracelular a la glucosa y al sodio, junto con la baja concentracin de intracelular de Ca L en comparacin con la e(tracelular y luminal ,<-59 meq !s. 549-54< meq- promue!e esta disociacin, permitiendo que este proceso de transporte ocurra unas 5.999 !eces por segundo a 08 O#. 4. )inalmente ocurre un cambio de conformacin que permite la fijacin de otra molcula de glucosa y % iones de CaL en el lado e(tracelular ,)igura 8-. El gradiente electroqumico de Ca L entre la lu" intestinal y el citosol se mantiene gracias a la bomba de CaL;?L en la membrana basolateral, con lo que, 0 iones Ca L se intercambian

con % ?L, manteniendo un circuito de circulacin de sodio que impulsa la absorcin eficiente de la glucosa ,)igura J-. $tro aspecto importante de la absorcin de Ca L y glucosa es el co-transporte de agua desde la lu" intestinal al interior de la clula epitelial y de all hacia el compartimiento intra!ascular. &e hecho, el incremento en la concentracin de estos dos solutos en el citosol genera suficiente fuer"a osmtica para impulsar el mo!imiento de agua hacia la clula epitelial en una magnitud de unos P-59 litros de 3 %$ en %4 horas ,)igura J-. La absorcin de la fructosa hacia en interior del enterocito est mediado por el transportador 2lut-< ,)igura J- donde puede isomeri"arse a glucosa o entrar directamente a la gluclisis por accin de la he(ocinasa, en"ima que catali"a su con!ersin a fructosaD-fosfato. LA SALIDA DE LA GLUCOSA DEL ENTEROCITO OCURRE A TRAV9S DEL GLUT6: La glucosa absorbida no se queda en el interior de la clula epitelial intestinal, en realidad, este solo es el inicio de un gran !iaje que concluir dentro de cada clula de nuestro organismo. 'ara poder comprender adecuadamente el mo!imiento de la glucosa hacia todos los tejidos se debe saber que sta se mue!e siempre a fa!or del gradiente de concentracin, esto es, desde donde su concentracin es mayor hacia donde es menor. Esto e(plica por ejemplo, su transferencia desde la lu" intestinal hacia el interior del epitelio intestinal y desde ste hacia los capilares !enosos que recogen la sangre del intestino delgado ,)igura J-. Ain embargo, para que la glucosa pueda acceder a los capilares debe atra!esar la membrana plasmtica del enterocito y la *nica manera de hacerlo es gracias a la presencia de una protena transportadora denominada 2lut-% , Gl'cose Transporter-:-. El 2lut-% es una protena transportadora de membrana de baja afinidad por la glucosa, galactosa y manosa pero con una alta capacidad de transporte. Esto quiere decir que trasporta he(osas cuando solo su concentracin es muy alta, tal como ocurre en este momento el llamado perodo postprandial inmediato. 7 diferencia de los A2LI, los 2lutQs no transportan Ca junto con la glucosa y solo poseen 5% alfa-hlices trasmembrana ,!er ane(o 5 al final del captulo-. &e esta forma, el gradiente amplio de concentracin de glucosa entre el epitelio y la sangre capilar permite una rpida salida de la glucosa a los capilares y de all al sistema !enoso portal que se dirige directamente al hgado ,)igura J-. &e esta forma, todos los carbohidratos absorbidos ,representados casi en su totalidad por glucosa- son conducidos al hgado desde donde pueden tomar dos destinos1 5. Entrar al interior del hepatocito %. Aalir del hgado ,sin entrar a los hepatocitos- por las !enas supra-hepticas y de all hacia la !ena ca!a para finalmente alcan"ar la circulacin general ,)igura P-.
L

EL SISTEMA PORTA LLEVA LA SANGRE RICA EN GLUCOSA AL HGADO 7pro(imadamente un %< E de la glucosa absorbida entra al interior de la clula heptica a tra!s del transportador 2lut-% gracias al ele!ado gradiente de concentracin e(istente entre la sangre y el interior del hepatocito. :a en el citosol, la glucosa es rpidamente fosforilada a e(pensas del 7I' por la en"ima glucocinasa, con!irtindola en 2lucosa-D-)osfato, compuesto que representa la encrucijada de !arias !as metablicas cla!es en este momento metablico como la gluclisis, sntesis de glucgeno y !a de las pentosas que sern tratadas en profundidad ms adelante ,)igura 59-. Ain embargo, es importante se+alar que la mayor parte de la glucosa dentro del hepatocito se deri!a a la sntesis de glucgeno, el cual representa el 59 E del peso de este rgano en el perodo post-prandial inmediato. La glucosa que no entra al interior del hepatocito llega a las !enas supra-hepticas y desde all a la !ena ca!a por donde se dirige a la aurcula derecha y luego al !entrculo derecho y de all a la circulacin menor, para terminar en aurcula i"quierda y posteriormente en !entrculo i"quierdo desde donde sale a distribuirse por todo el organismo gracias a la aorta y sus ramas. &e esta forma, algunos minutos despus de iniciada la alimentacin ,unos %9 minutos, aunque esto !ara de persona a persona- se empie"a a incrementar la concentracin de glucosa plasmtica de forma e!idente como consecuencia de la digestin y la absorcin de los carbohidratos alimentarios ,)igura 55- por lo que, de una concentracin de D9 89 mg;dl en condiciones de ayuno, luego de comer se ele!a entre 549 5J9 mg;dl, aunque debe se+alarse que esta ele!acin tiene muchos determinantes tales como la cantidad y tipo de carbohidratos ingerido, la capacidad secretoria de insulina y la incorporacin de la glucosa a los tejidos perifricos. EL MECANISMO DE INCORPORACIN DE GLUCOSA AL INTERIOR CELULAR ES DI;ERENTE EN CADA UNO DE LOS TE%IDOS Mna !e" que la glucosa ha ganado la circulacin arterial deber distribuirse a todas las clulas del organismo, cada una con caractersticas particulares en lo que se refiere al tipo de transportador que la traslocar al citosol as como en la importancia de la glucosa como combustible para la generacin de 7I'. En este sentido, e(isten tejidos .nobles/ por la importancia de la glucosa para satisfacer sus demandas energticas, tal es el caso del tejido ner!ioso y los eritrocitos que se consideran como consumidores e(clusi!os de glucosa debido a caractersticas especiales y nunca estar de ms recalcar que un suministro de glucosa constante es !ital para mantener la !iabilidad de estas clulas. $tras clulas tienen la fortuna de poder obtener 7I' a partir de la o(idacin de una gran !ariedad de molculas como el m*sculo esqueltico, el tejido adiposo y los epiteliales.

'or todo esto es importante estudiar el mecanismo de incorporacin de la glucosa en el perodo post-prandial en !arios tejidos considerados como .clsicos/ en la bioqumica1 El tejido ner!ioso y el eritrocito, la clula beta del islote de Langerhans y el hgado y finalmente el tejido muscular y el adipocito. La ,-ra"a " la +l'(o)a a la , 'ro,a 1 l r$-ro($-o ) 0a( a -ra.<) " l Gl'-68 1 l Gl'-6= #omo se dijo antes, el tejido ner!ioso y el eritrocito son consumidores e(clusi!os de glucosa, cada uno por ra"ones diferentes. Las neuronas tienen un acceso bastante restringido a molculas energticas o(idables de alto peso molecular como los cidos grasos de cadena larga debido a la presencia de la .barrera hematoenceflica/, una estructura formada por las clulas endoteliales ensambladas entre s mediante uniones estrechas que crean poros endoteliales ms peque+os que los obser!ados en otros capilares del organismo y que est refor"ada por los pies terminales de los astrocitos, que son proyecciones que rodean los capilares y pro!een un refuer"o estructural adicional. Este arreglo permite la formacin de un conjunto de elementos que presentan una baja permeabilidad a molculas que sean de alto peso molecular o muy polares. La suma de las membranas endoteliales y astrocticas aumenta el contenido en fosfolpidos de la misma impidiendo el pasaje de sustancias que no sean liposolubles ,)igura 5%-. Ain embargo, en ella e(isten sistemas de transporte ,protenas transportadoras- que permiten el paso de sustancias como aminocidos y glucosa, pero no de otras de alto peso molecular como los cidos grasos de cadena larga, de all el origen de la incapacidad de la neurona de o(idar estos sustratos altamente energticos y de all tambin su dependencia para obtener energa de la glucosa y de los cuerpos cetnicos, los *nicos capaces de atra!esarla en condiciones normales ,)igura 5%-. La incapacidad de los eritrocitos de metaboli"ar combustibles diferentes a la glucosa a*n es mayor ya que estas clulas no poseen mitocondrias imposibilitando la o(idacin de cidos grasos o cuerpos cetnicos para generar 7I'R as, la *nica opcin de !ida para este tipo celular es la incorporacin eficiente de la glucosa %4 horas al da de forma de mantener un estatus energtico adecuado. &e esta manera, la naturale"a ha dotado a la neurona y al eritrocito de transportadores de glucosa de muy alta afinidad que permitan su traslocacin al citosol de forma independiente a su concentracin plasmtica. Los 2lutQs 5 y 0 son las molculas transportadoras de glucosa caractersticas de estos tejidos, as como de la placenta humana, de las clulas fetales y embrionarias ,que tambin consumidoras e(clusi!as de glucosa-. $tra caracterstica importante de estos 2lutQs es que siempre se encuentran posicionados en la membrana en altas cantidades y que junto a su fcil saturacin ,por su bajo ?m- garanti"a una transferencia ele!ada de glucosa al interior celular ,)igura 50-. La ,-ra"a " la +l'(o)a a la (<l'la m')('lar 1 al - 5$"o a"$4o)o ) 0a( a -ra.<) " l Gl'-6> , 4r ) ,($a " $,)'l$,a 7fortunadamente, otras clulas como el tejido muscular estriado, el cardiaco y el tejido adiposo no requieren glucosa como fuente *nica de energa ya que utili"an tambin cidos grasos de cadena larga y cuerpos cetnicos como sustratos energticos. Iodos estos comparten la caracterstica de ser incapaces de incorporar glucosa cuando sta se encuentra en una concentracin bajaR esto se logra gracias a las caractersticas particulares del

transportador de glucosa 2lut-4 en lo que se refiere a su locali"acin. 6ientras que el 2lut-5 y el 2lut-% se encuentran siempre en la membrana plasmtica, el 2lut-4 puede ubicarse bien en el citosol ,durante el ayuno, con ni!eles bajos de insulina- o en la membrana plasmtica ,despus de comer, en presencia de insulina-. &e esta forma, la mo!ili"acin del 2lut-4 y por ende la absorcin de la glucosa es un fenmeno altamente regulado por la insulina y es por esto que indi!iduos que no producen cantidades suficientes de esta hormona tales como aquellos aquejados por &iabetes tipo 5 presentan una concentracin ele!ada de glucosa plasmtica a menos que se les administre insulina de forma e(gena. Ai se quiere entonces estudiar el mecanismo de incorporacin de la glucosa al m*sculo durante el perodo post-prandial inmediato es mandatario anali"ar el mecanismo de secrecin de insulina en la clula lo cual nos proporcionar una abundante pro!isin de insulina capa" de estimular la traslocacin del 2lut-4. El Gl'-6: 4 rm$- la ,-ra"a " +l'(o)a a la (<l'la " l $)lo- " La,+ r0a,) "'ra,- l 4 r?o"o 4o)-64ra,"$al $,m "$a-o )-$m'la,"o la ) (r ($/, " $,)'l$,a. E(isten muchas sustancias capaces de estimular la secrecin de insulina tales como aminocidos ,lisina, arginina, tirosina-, cidos grasos ,poliinsaturados-, hormonas de origen gastrointestinal y medicamentos como las sulfonilureas y las meglitinidas. Ain embargo, el principal secretagogo de la insulina es la glucosa. La secrecin de insulina estimulada por glucosa se produce en un patrn denominado bifsico, representado por una primera fase rpida conocida como fase inica que dura apro(imadamente unos 5< minutos y que es seguida por una segunda fase llamada de .meseta/ o no inica cuya duracin es de alrededor de %-4 horas y cuyos mecanismos no se conocen a plenitud aunque se postula la inter!encin de mediadores como la '?7, '?#, malonil-#o7 y 26'c ,)igura 54-. ;a) $/,$(a " la ) (r ($/, " $,)'l$,a El primer e!ento in!olucrado en la estimulacin de las clulas es la incorporacin de la glucosa al interior de dichas clulas por difusin facilitada a tra!s del transportador 2lut% ,el mismo presente en la membrana basal del enterocito y en el hepatocito- para luego se fosforilada a e(pensas del 7I' por la en"ima glucocinasa. Es importante se+alar que tanto el 2lut-% como la glucocinasa tienen baja afinidad por la glucosa, decir, un ?m bajo, por lo que funcionan como una unidad glucosensora que permite la liberacin se insulina solo cuando ingresa una cantidad ele!ada de glucosa al interior de la clula , hecho que e(plica en parte, por que la insulina es secretada en periodos post-prandiales, conduciendo a la disminucin de los ni!eles de glucosa plasmtica. 'ara que la glucosa estimule la secrecin de insulina es necesario que sea metaboli"ada por la !a glucoltica para as generar 7I', molcula que juega un papel importantsimo en los mecanismos moleculares que inter!ienen en la secrecin de la insulina. Par-$($4a($/, " lo) (a,al ) " Ca @@ 1 A@ , la Ba) $/,$(a " la ) (r ($/, " $,)'l$,a Los canales inicos son macromolculas de naturale"a proteica ubicadas en la membrana celular que permiten el flujo de iones desde y hacia el interior de las clulas. Las clulas e(citables poseen un potencial de reposo trasmembrana que en el caso de la clula del pncreas es de -89 m>. Este potencial es generado por la bomba de Ca L;?L la cual e(trae 0 CaL hacia el medio e(tracelular donde se encuentra ms concentrado e

ingresa ?L hacia el citosol donde se encuentra en mayor concentracin. 'uede apreciarse que este proceso de mo!imientos de iones se reali"a en contra del gradiente de concentracin de ambos lo cual se logra gracias la energa libre pro!eniente de la hidrlisis de 7I'. #omo siempre salen ms cargas positi!as de las que entran ,salen 0 CaL y entran % de ?L- el interior pierde cargas positi!as, cargndose negati!amente. 6s a*n, debido a que la concentracin de ? L en el interior de la clula es %9 !eces mayor que en el e(terior, parte del ?L intracelular SgoteaS al medio e(tracelular a tra!s de los llamados Slea@ #hannels de ? L o canales de ?L regulados por 7I'S escapando peque+as cantidades de este in conduciendo a que el medio e(tracelular sea positi!o en condiciones de reposo con respecto al interior de la clula, originando un potencial de reposo muy negati!o de apro(imadamente unos -89m> ,)igura 5<-. Ial como se dijo con anterioridad cuando la glucosa entra a la clula es fosforilada y o(idada por lo !a glucoltica generando 7I' que se dirige de inmediato a la membrana y cierra los canales de ?L sensibles al 7I', impidiendo su salida al citosol y por lo tanto ocasionando la acumulacin de ? L en el interior de la clula hacindola menos negati!a, es decir, con un potencial trasmembrana de alrededor de -09 m>. Este cambio de potencial es el responsable de la apertura de los canales de #a LL !oltaje dependientes, fa!oreciendo la entrada de este in desde el medio e(tracelular ,donde est 59.999 !eces ms concentrado- al interior de la clula donde !a a actuar como segundo mensajero en la secrecin de insulina. Ain embargo, la duracin del periodo de estimulacin por el #aLL es corta, ya que este in adems de estimular la secrecin de insulina por e(ocitosis, contribuye a restablecer el potencial de reposo al acti!ar los canales de ?L acti!ados por #aLL, que permiten la salida de ? L para que la clula recupere su potencial de reposo, conduciendo finalmente al cierre de los canales de #a LL !oltaje dependiente y reapertura de canales de ? L 7I' sensibles ,)igura 5D-. C($"o araD'$"/,$(o (omo ) +',"o m ,)a5 ro , la (<l'la $bser!aciones recientes indican la posibilidad de que el cido araquidnico incremente la respuesta secretoria de insulina de la clula al aumento de #aLL estimulado por glucosa. El cido araquidnico es un importante constituyente de la membrana celular, desde donde es liberado por la en"ima fosfolipasa 7 % ,'L7%-, al hidroli"ar las lecitinas de la membrana en posicin %, generando lisolecitinas y cido araquidnico. La isoforma de la 'L7 % de las clulas ,7A#K-'L7%, ATP sensible and calcium independent PLA2- es acti!ada por 7I' generado a partir de la glucosa incrementando la concentracin de cido araquidnico intracelular. En la actualidad se conoce bien que una cantidad importante de #aLL adicional ingresa al interior de la clula en respuesta al cido araquidnico, lo cual puede e(plicarse por dos fenmenos1 Ae ha postulado que el cido araquidnico permanece en la membrana celular interactuando con los canales de #aLL !oltaje dependientes, hacindolos muy sensibles a un !oltaje cercano al del potencial de reposo permitindoles su apertura durante un periodo mayor ,)igura 58-. El segundo mecanismo propone la cooperacin del cido araquidnico con el 7I' en la inhibicin de los canales de ? L sensibles al 7I'. Tecientes obser!aciones inmunocitoqumicas sugieren que la inhibicin de estos canales no es reali"ada directamente por el cido araquidnico sino por medio de productos de la

5%-Lipoo(igenasa, uno de los cuales, el cido 5%-3idro(ieicosatetraenoico ,5%-3EIE- ejercera el efecto inhibitorio sobre los canales de potasio 7I' sensibles ya que inhibidores de la 5%-Lipoo(igenasa suprimen la sntesis de 5%-3EIE y la secrecin de insulina estimulada por la glucosa ,)igura 58-. ;o)Bol$4a)a C 2;LC3E Pro- $,($,a)a C 1 ) (r ($/, " $,)'l$,a. La acetilcolina y sus anlogos muscarnicos son potentes estimuladores de la secrecin de insulina. La estimulacin de los receptores colinrgicos muscarnicos conlle!a a la acti!acin de la protena 2 que por intermedio de la subunidad 2I' ,modulador alostrico positi!o- acti!a a la )osfolipasa # ,)L#-, una en"ima de la membrana celular que hidroli"a el fosfatidilinisitol liberando diacilglicerol ,&72- que estimula a la '?# capa" de modular de forma positi!a los canales de #a LL de la membrana plasmtica e Knositoltrifosfato ,K'0-, que se une a los canales de #a LL K'0 dependientes del retculo endoplsmico ,TE- liberando #aLL al citosol lo que estimula la secrecin de insulina ,)igura 5J-. Pro- ?,($,a)a A 1 ) (r ($/, " $,)'l$,a. &esde hace bastante tiempo se conoce que el 76'c es un potente estimulador de la secrecin de insulina as como ciertas hormonas como el pptido intestinal !asoacti!o ,>K'-, el pptido inhibitorio gstrico ,2K'- y el pptido similar al glucagn-5 ,2L'-5-. Iodas estas hormonas al unirse a su receptor estimulan a la adenilato ciclasa !a -2I' ,'rotena 2- con la subsiguiente sntesis de 76'c que modula positi!amente a la en"ima '?7 quien aparentemente media la secrecin de insulina por esta !a ,)igura 5J-. LA INSULINA LIBERADA ESTIMULA LA TRASLOCACIN DE LOS GLUT6> A LA MEMBRANA DE LA C9LULA MSCULAR Y EL ADIPOCITO Ial como se haba e(plicado, el s*bito incremento en la concentracin plasmtica de glucosa se traduce en el estmulo principal para la secrecin de insulina, la cual gana rpidamente la circulacin general y se distribuye por todos los tejidos. La participacin de la insulina es fundamental en la incorporacin de glucosa en tejidos como el muscular y el adiposo, ya que el transportador responsable de este proceso, el 2lut-4, puede encontrarse en % ubicaciones bien definidas1 a. &entro de !esculas en el citosol ,durante el ayuno-, b. #oncentrado en la membrana plasmtica durante el perodo post-prandial, gracias al estmulo insulnico ,)igura 5P-. Es importante recalcar que la presencia o no del 2lut-4 en la membrana de la clula muscular y adiposa depende fundamentalmente del estado alimentario, en otras palabras, si los ni!eles de glucosa en plasma son lo suficientemente ele!ados como para estimular la secrecin de insulina, lo cual ocurre fundamentalmente despus de comer, una gran cantidad de 2lutQs-4 sern reclutados y lle!ados desde el citosol a la membrana plasmtica, de all que el primer e!ento metablico mediado por la insulina sea la estimulacin de la incorporacin de glucosa a estos tejidos y que puede detectarse como una cada progresi!a de los ni!eles de glucosa plasmtica hasta la normalidad ,lo que sucede en indi!iduos normales unas % horas despus de comer-. &e forma in!ersa, durante el perodo de ayuno casi todos los 2lutQs-4 de estn en el citosol, lo que representa un mecanismo que impide

que el tejido muscular .robe/ la poca glucosa que durante el ayuno debera conducirse preferencialmente a los tejidos que la utili"an de forma casi e(clusi!a como eritrocito y cerebro. La -ra)lo(a($/, " lo) Gl'-F) > a la m m*ra,a o('rr , "o) Ba) ) *$ , " B$,$"a) La autofosforilacin del receptor de insulina y la posterior heterofosforilacin del KTA-5 genera sitios de interaccin para protenas efectoras con dominios A3 % como la en"ima fosfatidil-inositol-0-cinasa ,'K-0?-. Esta en"ima inter!iene en muchas respuestas celulares entre las cuales se encuentran la regulacin de la transcripcin de muchos genes, la mitognesis, fenmenos anti-apoptticos, sntesis de protenas, sntesis del glucgeno y muy particularmente el transporte de glucosa al interior de la clula muscular y del adipocito. Kn!estigaciones recientes recalcan igualmente la importancia de esta en"ima en la regulacin de la contractilidad de la actina del citoesqueleto a tra!s de 2I'asas de la familia Tho y Tac. &e esta forma, desde un punto de !ista didctico la traslocacin de las !esculas que contienen 2lut-4 puede considerarse que ocurre en % fases1 5. La migracin de las !esculas que contienen 2lut-4 a lo largo del citoesqueleto de actina. %. El proceso de unin y fusin de las !esculas con la membrana plasmtica que dependen en gran parte de protenas denominadas Anare. 8. M$+ra($/, " lo) Gl'-F) > a la m m*ra,a .?a ($-o )D' l -o " a(-$,a Migracin dependiente de la PI-3K La 'K-0? posee ms de 5< isoformas, sin embargo, solo la isoforma 5a ,K'-0? 5a- es la encargada de la regulacin de la traslocacin de los 2lutQs 4 a la membrana. Esta en"ima es un heterodmero constituida por una subunidad reguladora ,llamada pJ<- y una subunidad cataltica ,denominada p559-. La subunidad reguladora es capa" de formar un complejo binario con el KTA-5 gracias a su dominio A3 %, lo que incrementa mas de %9 !eces la capacidad de catlisis de la subunidad p559 ,)igura %9-. La K'-0? catali"a la fosforilacin de un fosfolpido de la membrana plasmtica, el fosfatidilinositol 4,< bifosfato G'K ,4,<- '%H en posicin 0 para generar fosfatidilinositol 0,4,< trifosfato G'K ,0,4,<- ' 0H ,)igura %9- y en la actualidad sabemos que la unin de la en"ima al KTA-5 tiene al menos dos funciones1 a- 7cti!ar a la en"ima y b- 6o!ili"arla hacia el sitio donde se encuentra su sustrato, es decir, a la membrana a manera de un mecanismo de bisagra. La acumulacin del producto de esta reaccin, el G'K ,0,4,<- ' 0H, a ni!el de la membrana plasmtica pro!ee de una .plataforma lipdica/ que sir!e de anclaje a las molculas se+ali"adoras que se encuentran corriente abajo y que pertenecen a un grupo de molculas denominadas protenas con dominios '3 ,del ingls Plec@trin Homology- de las cuales una de las mejor estudiadas es la 'rotencinasa U ,tambin conocida como 7?I-. En efecto, la cinasa 7?I se une al G'K ,0,4,<- ' 0H por su dominio '3 lo que hace que la en"ima se fije y finalmente se acumule en la membrana plasmtica, sitio donde es blanco de su acti!ador natural, una cinasa con dominios '3 y acti!ada por el 'K ,0,4,<- ' 0 llamada '&?-5 que fosforila a 7?I en los aminocidos treonina 09J y serina480. Mna !e" acti!ada, la 7?I ,'rotencinasa U- fosforila a la protena 7A-5D9 ,del ingls A?I Sustrate 86G@&- conduciendo a su inacti!acin. 7A-5D9 pertenece a un grupo de protenas reguladoras llamadas 27'Qs ,del ingls GI'ase Acti!ators Protein)- y que tal como su nombre indica son moduladores alostricos positi!os de 2I'asas que estimulan la

hidrlisis del 2I' unido a protenas 2 peque+as de la familia Tho y Tab inacti!ndolas ,)igura %9-. &e esta forma, la inhibicin de 7A-5D9 por fosforilacin !a 7?I incrementa la duracin del complejo acti!o Tab;Tho-2I' y por lo tanto, sus efectos biolgicos. Co resulta casual el hecho de que dentro de las !esculas que contienen a los 2lut-4 e(istan 2I'asas peque+as de la familia Tab y que en su forma acti!a Tab-2I' es capa" de promo!er la remodelacin y polimeri"acin de la actina que conducen a la migracin de las !esculas que contienen 2lut-4. &e esta manera, la inacti!acin por fosforilacin de protenas 27'Qs como la 7A-5D9 permite que la !ida media de la forma Tab-2I' dentro de las !esculas de secrecin de 2lut-4 sea mayor y permitan la acti!acin del remodelado de la actina y la migracin de las !esculas a la membrana ,)igura %9-. M$+ra($/, $," 4 ,"$ ,- " la PI6=A &esde hace alg*n tiempo se ha obser!ado que la inhibicin de la en"ima K'-0? no era capa" de bloquear de forma completa la traslocacin de los 2lutQs-4 mediada por el estmulo insulnico. &e esta forma, ha sido interesante el halla"go que el inicio de esta se+al pueda estar segregada en compartimientos discretos de la membrana plasmtica llamadas ca!eolas, peque+as in!aginaciones de la membrana plasmtica que contienen la protena ca!eolina y que se encuentran enriquecidas en protenas se+ali"adoras de naturale"a lipdica ,como por ejemplo fosfoinositsidos-, glicolpidos, esfingolpidos y colesterol y que la literatura inglesa reconoce con el nombre de .lipid raft microdomains/. Esta organi"acin muy particular de la membrana en microdominios puede representar una forma de organi"ar una gran cantidad de se+ales pro!enientes de una infinidad de cascadas de se+ali"acin y puede e(plicar el hecho de que muchas hormonas y factores de crecimiento que comparten los mismos sistemas de se+ali"acin puedan e(hibir respuestas biolgicas diferentes. 'or este moti!o, la compartamentali"acin espacial en la membrana plasmtica se ha sugerido como una manera posible de preser!ar la especificidad y fidelidad de este tipo de se+ales. Mna de estas hormonas con multiplicidad de !as de se+ali"acin es la insulina, cuyo receptor es capa" de ubicarse junto con la ca!eolina a la cual incluso es capa" de fosforilar. Tecientemente se ha demostrado que el receptor de insulina es capa" de fosforilar a otro sustrato diferente al KTA-5R se trata de la fosforilacin de la protena c-#bl en residuos de tirosina, que conlle!a a la formacin de complejos con protenas con dominios A3 0 como la protena #ap para formar un heterodmero que es relocali"ado hacia la membrana plasmtica donde se acumula y se une con la flotilina dentro de las ca!eolas. El complejo acti!o #ap;c#bl;flotilina recluta y acti!a a un heterodmero formado por la protena adaptadora #r?KK y el factor de intercambio de nucletidos de guanina #02 que transfiere 2I' a una 2I'asa de la familia Tho llamada I#59, la cual, en su forma acti!a I#592I' act*a como modulador alostrico positi!o que acti!a a la protena V7A' y que interact*an como complejo I#59-2I'-V7A' con las protenas reguladoras 7T'%;0 ,Actin Related Proteins- que catali"an cambios en la organi"acin de la actina caracteri"ados por la ramificacin y polimeri"acin de esta protena que permiten la mo!ili"acin de las !esculas de 2lut-4 hacia la membrana ,)iguras %5 y %%-. :. La) 4ro- ?,a) S,ar )o, la) r )4o,)a*l ) " (o,-$ , , Gl'-F) > (o, la m m*ra,a 4la)mH-$(a la B')$/, " la) . )?('la) D'

La reorgani"acin del esqueleto de actina conduce a la migracin progresi!a de las !esculas que contienen 2lut-4 desde su ubicacin citoslica ,bien perinuclear o bien del sistema trans 2olgi- hacia la !ecindad de la membrana plasmtica, sin embargo, este remodelado no es suficiente para conducir a la fusin de las !esculas con la membrana plasmtica. Los resultados de estudios clsicos sobre el trfico de !esculas desde el citosol hacia la membrana sugirieron que e(istan interacciones entre protenas e(presadas en la superficie de las !esculas de secrecin y en la membrana plasmtica y que controlaban los e!entos de fusin entre estas bicapas lipdicas. 6uchos de los componentes cla!es de los e!entos de fusin se identificaron inicialmente en e(perimentos in vitro en sistemas de transporte relacionados con el aparato de 2olgi identificando % grandes grupos de protenas1 5- Las de las !esculas, representadas por la protena soluble de anclaje al AC) ,AC7'- y %- las protenas de la membrana llamadas en conjunto . Target Membrane Snap Receptors/ o tAnare. 3istricamente hablando, el trmino Anare fue acu+ado a inicios de la dcada de los P9Ws del siglo !einte por X. Tothman y cols. para describir protenas que podan participar en la unin de factores solubles a la membrana plasmtica. Los primeros estudios que intentaron caracteri"ar la funcin de estas protenas fueron reali"ados en tejido ner!ioso, encontrndose que eran las responsables de la fusin de las !esculas de secrecin de neurotransmisores a la membrana plasmtica y de la posterior liberacin del mismo al espacio sinptico. #on el trmino Anare se conocen una gran familia de protenas asociadas a la membrana y a las !esculas secretoras que median su fusin en organismos eucariotes. Estas se encuentran !irtualmente en todas los e!entos de trfico de sustancias empaquetadas en grnulos de secrecin producidas por la clula desde el citosol hasta la membrana plsmtica1 hormonas, neurotransmisores, etc. La inter!encin de cada una de las diferentes isoformas de las protenas Anare permite que los mecanismos de secrecin de una amplia cantidad de productos generados y e(ternali"ados por las clulas ocurran con un alto grado de especificidad. En la actualidad, se generali"a que las protenas presentes en las !esculas se denominan !-Anare y las presentes en la membrana se denominan t-AC7TE. La gran familia de protenas Anare est formada por D miembros fundamentales1 5. 'rotenas del grupo de las Ainta(inas ,presentes en la membrana plasmtica%. 'rotenas del grupo de las AC7' ,presentes en la membrana plasmtica0. 'rotenas reguladoras Aynip ,presentes en la membrana plasmtica4. 'rotenas reguladoras 6unc ,presentes en la membrana plasmtica<. 'rotenas del grupo de las >76' ,presentes en la !escula secretoraD. 'rotenas 2 peque+as de la familia Tab ,presentes en la !escula secretoraPro- ?,a) S,ar " la m m*ra,a 4la)mH-$(a S1,-aI$,a6>: Esta protena se e(presa en la membrana plasmtica de las clulas musculares y adiposas, principales clulas blanco de la insulina. La perturbacin de la estructura de esta protena con anticuerpos genera una disminucin del <9 E de la incorporacin de la glucosa al interior de la clula. Esta es la principal t-Anare de la membrana plasmtica y es el rgano de acople con la >amp-% de las !esculas ,)igura %0 y %4-.

S,a46:= ,Sy,aptosome-Associated Protein de := @&a-: Esta protena es homloga en estructura y funcin a la protena Anap-%< presente en las !esculas de secrecin de neurotransmisores. Au homloga en ratones se denominada Ayndet y ambas se encuentran e(clusi!amente en la membrana plasmtica de las clulas que poseen 2lut-4. La ruptura en"imtica de esta protena por la to(ina botulnica es capa" de reducir la traslocacin de los 2lutQs-4 a la membrana de los adipocitos. Esta protena forma un heterodmero con la Aynta(ina-4 que permite la interaccin con la protena >76'-% de la !escula ,)igura %0 y %4-. S1,$4: ,S1,ta(in-4 Interacting Protein- Es una protena que interact*a con la Aynta(ina-4 a tra!s de su e(tremo carbo(ilo terminal regulando por inhibicin competiti!a la unin de la Aynta(ina-4 con la protena >amp-% de la !escula ,)igura %0 y %4-. M',(68J(: Es una protena que se une a la Ainta(ina-4 mantenindola en un estado conformacional inacti!o que pre!iene la fusin promiscua con cualquier !escula en ausencia de un estmulo endocrino adecuado. 'or definicin tambin impide la interaccin de la Aynta(ina-4 con la protena >amp-% de la !escula ,)igura %0 y %4-. Pro- ?,a) S,ar " la . )?('la Vam46:: Esta familia de protenas fue la primera en ser identificada como componente de las !esculas sinpticas y poco despus, como la protena que interact*a con la Aynta(ina-4 para producir la fusin de la !escula con la membrana ,)igura %0 y %4-. Ra*: Las protenas Tab representan la rama mas abundante de la superfamilia de protenas 2 peque+as. Tab se locali"a en las membranas de los organelos y en las !esculas de secrecin, regulando el transporte de solutos entre ellos. 7l igual que cualquier protena 2 puede encontrase en una de dos formas1 Tab-2&' o forma inacti!a y Tab-2I' o acti!a, la cual puede regular !arios pasos en el reclutamiento, migracin y fusin de las !esculas de secrecin. Luego de esto, su acti!idad de 2I'asa hidroli"a el 2I' con!irtindolo en 2&' y por lo tanto a su forma inacti!a. Au participacin en la fusin de las !esculas con la membrana a*n se desconoce. M (a,$)mo " 4la)mH-$(a B')$/, " la . )?('la " ) (r ($/, " Gl'-6> (o, la m m*ra,a

Mna !e" lograda la migracin de las !esculas con 2lut-4 hacia la pro(imidad de la membrana plasmtica debe ocurrir la fusin de ambas para lograr la incorporacin de los 2lutQs-4 a la membrana. Esto se logra gracias a la interaccin protena-protena entre las AnareQs de las !esculas y las AnareQs de la membrana pre!ia acti!acin por segundos mensajeros deri!ados de la acti!acin del receptor de insulina. En este sentido debe enfati"arse que la principal protena Anare de la membrana, la Aynta(ina-4, en ausencia de la se+al insulnica se encuentra de forma inacti!a, ya que forma un complejo con % protenas inhibidoras1 La Aynip y 6unc-5J, que impiden la unin entre la Aynta(ina-4 y la Anap-%0 la cual es necesaria para la unin con >amp-%. La unin de la insulina con su receptor produce una cascada de fosforilaciones que acti!an una serie de protenas citoplasmticas consideradas como segundos mensajeros de la

insulina capaces por mecanismos diferentes de .liberar/ la inhibicin producida por Aynip y 6unc-5J ,)iguras %<-. La a(-$.a($/, " la PI6=A l$* ra a la S1,-aI$,a6> " la $,0$*$($/, " S1,$4 " Borma "$r (-a &urante el perodo de ayuno, en el que e(iste un ni!el bajo de insulina la Aynta(ina-4 se encuentra formando un complejo inacti!o en la membrana plasmtica formado por 6unc-5JAynta(ina-4-Aynip incapa" de unirse con la protena >amp-% de la !escula y por lo tanto de fusionarla a la membrana plasmtica. La acti!acin del receptor de insulina y la generacin del KTA-5 fosforilado en residuos de tirosina conduce a la acti!acin de la en"ima 'K-0?, que tal como fue tratado con anterioridad catali"a la sntesis de G'K ,0,4,<- '0H capa" de reclutar y acti!ar una serie de en"imas que conducen a la acti!acin de la protencinasa U , 7?I- que a e(pensas de la hidrlisis del 7I' fosforila a la protena Aynip generando un cambio conformacional que acarrea una prdida de la afinidad de sta por la Aynta(ina-4, descubriendo as el sitio de unin para >amp-% ,)igura %<-. La a(-$.a($/, " la PI6=A l$* ra a la S1,-aI$,a6> " la $,0$*$($/, 4or M',(68J .?a Ra* La acti!acin de la 7?I por parte de la 'K-0? !a '&Y-5 inhibe por fosforilacin a la protena 7A-5D9 e!itando su acti!acin como 2I'asa manteniendo a protenas 2 peque+as de la familia Tab en su forma acti!a ,Tab-2I'- por lo que pueden como moduladores alostricos negati!os de 6unc-5J que ocasionan cambios en su conformacin y prdida de la afinidad por la Aynta(ina-4 ,)igura %<-, dejndola libre para interactuar con >amp-%. Es importante se+alar que las !esculas que contiene 2lut-4 poseen protena Tab, y aunque no es un hecho comprobado es tentadora la posibilidad que la presencia de Tab-2I' de la !escula sea el mecanismo que libere la inhibicin de 6unc sobre la Aynta(ina-4. La l$* ra($/, " S1,-aI$,a6> 4 rm$- )' ',$/, (o, S,a46:K 1 la Borma($/, " l (om4l 5o .6S,ar 1 -6S,ar Mna !e" liberada la Aynta(ina-4 es capa" de formar un complejo binario con la protena Anap-%< gracias a interacciones entre sus estructuras secundarias alfahelicoidales lo que genera un sustrato tridimensional capa" de alojar a su ligando natural, la protena >amp % de la !escula y finalmente su fusin con la membrana plasmtica ,)iguras %< y %D-. A, Io La *$oD'?m$(a , 4roB',"$"a": Tra,)4or-a"or ) " Gl'(o)a
Pro- ?,a) -ra,)4or-a"ora) " m m*ra,a 4ara lo) (ar*o0$"ra-o) Los carbohidratos son sustancias qumicas orgnicas de amplia distribucin en la naturale"a. En las plantas son producidos por el proceso de la fotosntesis e incluyen a la celulosa como ejemplo de un carbohidrato estructural y al almidn como carbohidrato de almacn. En las clulas animales los carbohidratos - en forma de glucosa o en su polmero de almacn, el glucgeno sir!en como fuente importante de energa para las acti!idades !itales de la mayora de las especies !i!ientes que habitan el planeta. 'ara poder lle!ar a cabo importantes funciones como la o(idacin y el almacenaje, la glucosa debe entrar al interior de la clula, para as incorporarse a la !a metablica que predomine seg*n las condiciones hormonales y energticas del momento. Mna clula puede sobre!i!ir si e!ita que su medio interno se me"cle y estable"ca el equilibrio con el medio ambiente. Este semi-aislamiento es proporcionado por la membrana celular, de naturale"a lipdica y relati!amente impermeable a molculas polares como la glucosa. &e esta manera, este tipo de molculas requieren alg*n elemento transportador que les permita cru"ar el escollo que significa la membranaR as, la naturale"a, a tra!s de millones de a+os de e!olucin biolgica desarroll molculas proteicas que cru"an completamente la membrana y que son capaces de formar .poros/ que comunican el e(terior con el interior celular, permitiendo el flujo de molculas como los aminocidos, !itaminas y carbohidratos en un sentido u otro. En este orden de ideas, los transportadores para glucosa trabajan de manera coordinada con factores hormonales, receptores, y segundos mensajeros para mantener el flujo de este metabolito en condiciones normales. Los transportadores de

glucosa presentes en las clulas de los organismos superiores se clasifican en dos grandes familias, la Familia de los Gluts y la familia de los Co-transportadores de Sodio y Glucosa (SGLT ! La familia de los 2luts ,aunque qui"s sea mejor referirlos como superfamilia- es muy e(tensa ya que hasta la fecha se conocen ms de 549 miembros distribuidos entre diferentes especies de animales, plantas, bacterias y hongos, por lo que sera un enfoque simplista circunscribir estas protenas solo a organismos superiores como nosotros. Iodos los transportadores de membrana que median la transferencia de solutos desde el espacio e(tracelular hacia el citosol ,o !ice!ersacomparten !arias caractersticas1 E)4 ($B$($"a": en general cada transportador es especfico para una sola sustancia o un grupo muy emparentado de stas. Sa-'ra($/,: La capacidad de transporte puede alcan"ar un m(imo cuando todos los sitios de unin para el soluto a transportar estn ocupados. Com4 -$($/,: ocurre cuando ms de una sustancia es capa" de ser transportada por el sistema transportador. En este caso, tal como ocurre en la inhibicin competiti!a de en"imas, el soluto que se encuentre a mayor concentracin ser preferentemente transportado. COTRANSPORTADORES DE Na@EGLUCOSA 2SGLT3 En el epitelio intestinal y de los t*mulos contorneados pro(imal y distal e(isten sistemas de co-transporte de glucosa acoplados a Ca L que permiten la absorcin rpida de esta molcula en el leo hacia el sistema portal y la reabsorcin de la glucosa filtrada en el glomrulo renal al torrente circulatorio. Este sistema se denomina A2LI , Sodium;Glucose Transporters-, del cual se conocen 4 isoformas ,A2IL5-4- que apro!echan el transporte del Ca L a fa!or de su gradiente de concentracin para generar una corriente electroqumica que produce los cambios conformacionales en el mismo que conducen a la traslocacin de la glucosa a tra!s de la membrana plasmtica. 7l comparar las estructuras primarias de estos transportadores se encuentra que el A2LI-%, A2LI-0 y A2LI-4 tienen un 89, <P y <4 E de homologa con el A2LI-5 respecti!amente. SGLT68 2SLCKA83 El gen del A2LI-5 se denomina AL#<-75 y fue aislado a partir de libreras de c&C7 de intestino delgado de conejo. #on una e(tensin de J9 ?b y 5< e(ones se ubica en el cromosoma %% en la regin q50.5, cuyo trascripto es una protena de DD4 aminocidos y 80?&a con una estructura secundaria formada por 54 N-hlices cuyos e(tremos amino y carbo(ilo terminales se encuentran en el espacio e(tracelular, el A2LI-5. En el ser humano este transportador se e(presa primariamente a ni!el del leon, el sitio fundamental de absorcin de monosacridos como la glucosa, galactosa, manosa y fructosa. Este transportador es especfico para la absorcin de glucosa y galactosa en las clulas epiteliales del ribete en cepillo. Las clulas absorti!as tienen una naturale"a polar, esto es, que la e(presin de las protenas transportadoras de membrana es diferente en el polo apical ,luminal- que en el polo basolateral. Este hecho permite la transferencia eficiente de los a"*cares simples ,monosacridos- desde la lu" intestinal hacia los capilares. Kgualmente, e(isten diferencias importantes entre las clulas que se ubican hacia las criptas, en la parte baja de la micro!ellosidad ,clulas muy j!enes- y aquellas que se ubican hacia el 5;0 superior de la misma ,clulas maduras-. Las clulas epiteliales intestinales tienen una !ida corta, originndose de clulas madre en las criptas, madurando en la medida que migran hacia el tope de la micro!ellosidad, de donde se e(folian de % < das despus de su nacimiento. 7s, los ni!eles mas altos de protenas transportadoras de membrana se encuentran en las clulas epiteliales maduras del 5;0 superior de la micro!ellosidad. E(iste a*n contro!ersia de cual es la !a ms importante que toma el agua para ingresar al epitelio intestinal, sin embargo, hay 4 !as posibles1 SGLT6: 2SLCKA:3 El gen de este co-transportador se aisl de libreras de tejido renal humano en el cromosoma 5D p55.% que se e(presa fundamentalmente en la corte"a renal y en mucho menor grado en el leo. Este transportador es una protena integral de membrana de D8% aminocidos con una estructura secundaria similar al resto de los miembros de esta familia que se encuentra en las clulas epiteliales del t*bulo contorneado pro(imal, de all, que la funcin principal de este co-transportador es la reabsorcin de CaL, glucosa y agua a ni!el renal bajo los mismos principios del A2LI-5. Ain embargo, el descubrimiento y la caracteri"acin de las acuaporina % en el t*bulo contorneado pro(imal y las acuaporinas % y D en los t*bulos colectores obligarn en un futuro pr(imo a la re!isin de los procesos de transporte de solutos y agua a tra!s del epitelio tubular renal. SGLT6= 2SLCKA> / SAAT83 El gen de este #o-transportador para CaL y glucosa se ubica en el cromosoma %%q5%.%-q5%.0 y se aisl por primera !e" de libreras de ri+ones de cerdo y posteriormente en ri+ones humanos, ubicndose solo a 9,59 mb corriente abajo del gen del 2lut-5 con una distribucin de e(ones e intrones similar, por lo que se cree que se origin de una duplicacin de ste *ltimo. Este gen codifica una protena de D<P aminocidos que se ha detectado en m*sculo esqueltico, sistema ner!ioso central y en neuronas de los ple(os ner!iosos sub-mucosos y mioentricos a ni!el de la placa motora. Este transportador tiene baja afinidad por la glucosa ,<9m6- as como una muy baja capacidad de transporte para la misma. E!idencia reciente indica que se comporta como glucosensor en la membrana plasmtica de las neuronas colinrgicas y del tejido muscular liso y estriado, regulando de una forma a*n desconocida la acti!idad muscular. SGLT6> 2SLCKAL3, SGLT6K 2SLCKA8G3 1 SGLT66 2SLCKA883 El A2LI-4 y el A2LI-< fueron aislados recientemente de libreras de 7&Cc de intestino delgado humano en los cromosomas 5p0% y 58p55.% respecti!amente, gracias a los esfuer"os de "obert L! Strausberg del 6ammalian 2ene #ollection ,62#- 'r o+ram T am " l Na($o,al Ca,( r I,)-$-'- en los EM7. El 7TCm del A2LI-4 se encuentra fundamentalmente en el intestino y ri+n y su transcipto posee acti!idad transportadora de glucosa con un ?m de %,D m6. La manosa tiene una potente acti!idad inhibidora del transporte de glucosa, por lo que se cree que es capa" de transportar casi todos los monosacridos presentes en la dieta a tra!s del epitelio intestinal o del epitelio tubular renal. El 7TCm del

A2LI-< se encuentra fundamentalmente en el intestino delgado y ri+n, a*n no se cuenta con datos sobre el ?m y sustratos a transportar. El gen del transportador A2LI-D se encuentra en el cromosoma humano 5Dp5%-p55, el cual est di!idido en 5D e(ones generando una proteina de D8< aminocidos con 54 dominios transmembrana, compartiendo gran homologa con el A2LI-5. &e forma interesante, la regin del genoma donde se encuentra este transportador se relaciona con el gen responsable del sndrome de discinesia y con!ulsiones infantiles as como el sndrome de con!ulsin infantil familiar benigna. TRANSPORTADORES DE DI;USIN ;ACILITADA PARA HEMOSAS 2GLUTS3 Ai se considera cualquier 2lut dentro del conte(to de una gran familia de protenas puede notarse de forma inmediata que todos poseen caractersticas comunes que en trminos bioqumicos se denominan NB$rma mol ('lar " lo) -ra,)4or-a"or ) " +l'(o)a/ y que no es ms que un conjunto de secuencias primarias aminoacdicas e(tremadamente conser!adas que determinan estructuras secundarias y terciarias ,dominios o motifs- en el 2lut que son responsables de las caractersticas funcionales de la protena1 especificidad por uno o ms carbohidratos, afinidad por el sustrato, distribucin tisular, ubicacin celular, regulacin de su acti!idad por hormonas, etc. Las primeras firmas en los 2luts pueden estudiarse histricamente con el descubrimiento del primer transportador de glucosa en 5P88 a partir de membranas de eritrocitos humanos por 6ichihiro ?asahara y 6eter 3in@le de la Mni!ersidad de #ornell y el trabajo clsico lle!ado a cabo ocho a+os despus en un proyecto conjunto dirigido por 6i@e 6uec@ler y 3ar!ey ). Lodish del instituto Vhitehead de in!estigaciones biomdicas, en el cual se dilucid la secuencia de aminocidos de este transportador. Los in!estigadores trabajaron en sentido in!erso mediante una sencilla estrategia que consisti en el aislamiento del 7&C que codificaba la proteina, secuenciacin el n*mero y orden de las bases que integraban ese 7&C y finalmente, la aplicacin del cdigo gentico con lo que se dedujo que codificaba una protena de 4P% aminocidos que poda organi"arse en %< segmentos, 5% de los cuales eran segmentos hidrofbicos que cru"an el espesor de la membrana plasmtica denominados segmentos I ,I Z trasmembrana- con una estructura secundaria helicoidal, y 50 segmentos muy hidroflicos, llamados asas ,intra o e(tracelulares- que unen o conectan a los segmentos trasmembrana. Este transportador caracterstico de los eritrocitos recibi el nombre de 2lut 5. Ae ha planteado la posibilidad que los 2luts emergieron e!oluti!amente por la duplicacin de una protena con seis dominios trasmembrana como lo sugiere la presencia de estructuras repetidas en ambas mitades del transportador. Estas secuencias son el motifs 2TT;? presente entre las asas transmembrana % y 0 ,I6% y I60- y entre las asas transmembrana J y P ,I6J y I6P- y el motif EYDT;? presentes entre I64 y I6< y entre I659 y I655. Tecientemente se han identificado otros motifs esenciales para la acti!idad del transportador como el [LA del asa I68 que determina la afinidad del transportador por su ligando. Knmediatamente despus de este motif se pueden apreciar dos residuos de glutamina altamente conser!ados. El primero ,2lu %J%- presente en el 2lut 5 se requiere para la unin del inhibidor 7IU-U6'7. &e igual importancia son dos residuos de triptfano ,Iry 00J,45%- en el 2lut 5 que tambin estn conser!ados en el 2lut %, 0 y 4, que participan en los cambios conformacionales requeridos para el transporte de la glucosa. &urante los *ltimos % a+os se han identificado nue!os genes que codifican protenas transportadoras tipo I&)3 para la glucosa pertenecen a la familia AL#%7 ,del ingls SoLute Carrier :A-. La comparacin de la secuencia de aminocidos de los 5< miembros de esta familia ha podido definir las siguientes caractersticas para este grupo de biomolculas ,)igura ane(a 5-1 1. 'resencia de 5% -hlices transmembrana ,2lutQs- y 54 -hlices trasmembrana ,A2LI-. 2. 8 residuos e(tremadamente conser!ados de glicina en estas -hlices 0. Mna gran cantidad de residuos de aminocidos bsicos y cidos en los dominios intracelulares de la protena. 4. % residuos altamente conser!ados del aminocido triptfano. Aobre la base de la homologa de la secuencia primaria, la familia de los 2lutQs se puede di!idir en tres subfamilias1 ;am$l$a " la Cla) I: [ue se encuentra formada por los 2lutQs 5, %, 0 y 4. ;am$l$a " la Cla) II: #onstituida por los 2lutQs <,8,P y 55 ;am$l$a " la Cla) III: )ormada por los 2lutQs D, J, 59, 5%, el 2lut-50 transportador para mioinositol ,36KI -5- y el 2lut54 , - 5$"o) D' '-$l$#a, a la +l'(o)a (omo (om*')-$*l 4r$,($4al

GLUT 8 2SLC:A83: U, Gl'- " al-a aB$,$"a" 4r ) ,-

Este 2lut tambin se conoce transportador de glucosa de eritrocito;cerebro ,antiguamente tambin era conocido como transportador de glucosa 3ep2%-type- cuya cintica de transporte se ha in!estigado por ms de 49 a+os principalmente en eritrocitos humanos cuando Viddas y colaboradores en 5P<% propusieron la e(istencia de un mecanismo de transporte de glucosa saturable en la placenta humana. Ain embargo, la !erdadera era moderna del estudio de este transportador comen" en 5P88 cuando ?asara y 3in@le en 5P88 lograron purificar el 2lut-5 a partir de las membranas de los eritrocitos, hecho que fue posible gracias a que este representa del < E del total en peso de la membrana plasmtica eritrocitaria, por lo que es por mucho, el transportador de glucosa ms abundante en cualquier clula. El 2lut-5 es una protena altamente hidrofbica ya el D9E de sus residuos de aminocidos son hidrofbicos, lo cual es consistente con el hecho de ser una protena trasmembrana que cuenta con la morfologa tpica primaria de todos los 2luts1 &oce alfa-hlices trasmembrana con asas e(tra e intracelulares que unen dichas alfa-hlices cuyos grupos amino y carbo(iloterminal se encuentran orientados hacia el citosol. Es importante se+alar que los aminocidos ms conser!ados entre los diferentes 2lutQs del humano se encuentran en las 5% alfa-hlices y las mayores di!ergencias se han encontrado en el asa intracelular que conecta las alfa hlices D y 8 as como en los dominios amino y carbo(ilo terminal. El gen del 2lut-5 se ha ubicado en el cromosoma 5p0<.05.0 y cuyo c&C7 codifica una protena de 4P% aminocidos con un peso molecular de <4,% @&a en el ser humano. En adicin a esto se han determinado las secuencias polinucleotdicas de este transportador en ratones, ratas, conejos y cerdos, lo que ha re!elado una muy remarcable similitud entre especies de alrededor del P8 E. El 2lut-5 parece ser el transportador de glucosa ms ampliamente distribuido del cuerpo humano. Este se e(presa en numerosos tejidos fetales y adultos como los eritrocitos, clulas endoteliales, clulas ner!iosas, placenta, glbulos blancos, ojos ,clulas de la retina-, ri+n ,mesangio-, tejido adiposo, etc. Este 2lut posee una alta afinidad ,?m Z 5-% m6- por lo que es capa" de transportarla al interior de las clulas prcticamente a cualquier concentracin, por lo que se considera como un transportador basal de glucosa que mantiene su concentracin intracelular

estable, hecho de gran importancia en aquellas clulas que requieren un suministro constante de glucosa para la produccin de energa, tal como sucede en tejido ner!ioso y eritrocito. 7dicionalmente, el 2lut-5 ha sido locali"ado en o!ocitos y en el trofoectodermo de embriones de ratn. El bloqueo de la e(presin usando oligodeso(inucletidos antisentido produce apoptosis de los blastocistos demostrando la importancia en el desarrollo embrionario de los mamferos. 7l anali"ar la posible estructura secundaria de este 2lut mediante programas de simulacin se ha predicho que este posee un J% E de su estructura como alfa-hlices, un 59 E como giros beta, y un J E de enrollamientos al a"ar. La orientacin de las 5% alfa-hlices dentro de la membrana plasmtica y la posicin relati!a de cada una de ellas entre s ha sido propuesta por 6uec@ler y cols, la cual presenta un canal acuoso central formado por la yu(taposicin de < de las 5% alfa hlices1 0,<,8,59 y 55, cada una de las cuales posee carcter antiptico. Uasndose en la obser!acin de que el transportador tiene !arias regiones altamente conser!adas presentes en las regiones amino y carbo(ilo terminal se ha sugerido que los 2lutQs han e!olucionado de la duplicacin de un transportador ancestral de D alfa hlices, lo que apoya la posibilidad que los 2lutQs tomen una conformacin dentro de la membrana de forma bipolar, cada una con D alfa-hlices. Ain embargo, en un modelo alternati!o deri!ado de estudios de mutagnesis de cistena en las alfa-hlices %, <, 59 y 55 ha demostrado que todas tienen residuos accesibles a molculas de agua capaces de formar un canal capa" de transportar glucosa y agua. Estudios posteriores han demostrado que la hlice 8 la ms sensible a los estudios de mutagnesis de cistena lo que sugiere que sta se encuentra mas centralmente posicionada a la hora de formar el poro de entrada de la glucosa. La confirmacin de este modelo requiere determinaciones ms directas en lo que concierne a las distancias inter-hlices. Las propiedades cinticas de este 2lut han sido e(tensamente estudiadas pero toda!a resulta un foco de polmica la manera de cmo este transportador maneja las molculas de glucosa de un lado a otro de la membrana. Aeg*n la propuesta ms aceptada, el transporte facilitado de glucosa ocurre mediante cambios conformacionales en la estructura terciaria de transportador inducidos por la unin de la molcula de glucosa a un sitio de unin para sta en la cara e(tracelular del transportador y su mo!imiento progresi!o hacia la cara intracelular del mismo donde e(iste otro sitio de unin para la glucosa. Aeg*n este modelo, ambos sitios no pueden estar ocupados al mismo tiempo, por lo que debe transportarse una sola molcula de glucosa a la !e". Knconsistente con este modelo es el hecho de que aparentemente ambos sitios de unin pueden estar ocupados al mismo tiempo, por lo que una propuesta alternati!a ha sido postulada por #arruthers y cols en el cual el 2lut 5 e(iste como un homotetrmero que presentan interacciones cooperati!as positi!as entre s formando dos dmeros funcionales1 dentro de cada dmero, un monmero posee su sitio de e(tracelular unin a la glucosa libre mientras que el otro monmero tiene su sitio de unin a la glucosa intracelular libre. 7l mismo tiempo, el otro dmero tiene una conformacin opuesta, lo que permite cambios recprocos que permiten la entra de glucosa al interior celular. Este modelo e(plica la mayora de los datos cinticos que se encuentran en conflicto con el modelo de transporte original. GLUT: 2SLC:A:3: U, Gl'- (o, B',($/, +l'(o) ,)ora El 2lut-% es un transportador de glucosa de baja afinidad ,?m Z 5< %9 m6- que se e(presa en el hgado humano adulto, ri+n, clulas beta de los islotes de Langerhans y en la membrana basolateral de las clulas epiteliales del intestino delgado. Ae ubica en el cromosoma 0q%D.5-%D.0 y posee una e(tensin de 5JD,P 6U. 2racias a su ele!ado ?m y por lo tanto baja afinidad, este 2lut transporta glucosa proporcionalmente a su concentracin por lo que se le atribuye la propiedad de glucosensor en las clulas que lo poseen, en especial en hgado y clula beta pancreticaR as, por ejemplo, con una baja concentracin de glucosa en plasma este 2lut no es capa" de transportarla al interior de la clula beta y por ende, la secrecin de insulina es muy baja. Ain embargo, despus de las comidas cuando se incrementa la concentracin plasmtica de glucosa lo suficiente para poder ser transportada al interior de la clula beta, la generacin de 7I' producto del metabolismo de la glucosa es capa" de estimular la liberacin de insulina ,!er mecanismos de secrecin de insulina-. En este caso, el 2lut-% act*a como un regulador que solo permite la entrada de glucosa cuando est lo suficiente ele!ada en plasma como para requerir la liberacin de una cantidad significati!amente importante de insulina que promue!a la disminucin de la concentracin plasmtica de glucosa. $tro caso interesante es la inter!encin del 2lut-% en el metabolismo heptico de la glucosa. &espus de las comidas, el hgado es capa" de incorporar la glucosa pro!eniente de los alimentos gracias al 2lut-% y que una !e" dentro del hepatocito es con!ertida rpidamente en glucgeno. Co obstante y de forma in!ersa, durante el perodo post-prandial tardo ,perodo comprendido de D a J horas despus de las comidas- el glucgeno sufre degradacin generando molculas de glucosa que salen de la clula heptica a la sangre, manteniendo as los ni!eles de glucosa plasmtica dentro de lmites normales. &e esta forma, es fcil notar que el 2lut-% es un transportador de tipo bidireccional pudiendo transportar glucosa desde la sangre al tejido o desde el tejido hacia la sangre, hecho particularmente cierto a ni!el heptico y renal funcionando como sensor de la concentracin plasmtica de glucosa y permitiendo su intercambio entre la sangre y el hepatocito dependiendo de la condicin alimentaria predominante en el momento. Tecientemente se ha descubierto que el 2lut-% tiene tambin la habilidad de transportar fructosa gracias a un motif denominado 3>7 en el alfa-hlice CO 8 que tambin est presente en el 2lut-< ,transportador de fructosa clsico- y sustituye al motif [LA que se obser!a normalmente en los 2luts de alta afinidad por la glucosa como el 2lut-5. GLUT = 2SLC:A=3: El Gl'- " mH) al-a aB$,$"a" 4or la +l'(o)a El 2lut-0 es un transportador de glucosa de alta afinidad ,?m Z 5-% m6- que fue caracteri"ado primariamente en cerebro. Uajos ni!eles de 2lut-0 se han detectado en miocardio fetal y adulto, placenta, hgado y m*sculo. La presencia de este transportador co-agregado con el 2lut-5 en tejido ner!ioso habla a fa!or de que este transportador tenga funciones de mantenimiento del ni!el basal de glucosa en neuronas y placenta. El gen de este 2lut se encuentra ubicado en el cromosoma 5%p50.0 y tiene una e(tensin de J.5 6U. E(iste relati!a poca informacin sobre esta isoforma y mucha de la data se ha deri!ado se su e(presin en lneas de tejido de culti!o como las LD musculares, lo que puede reflejar la e(presin normal de esta protena en tejidos fetales. Mn fenmeno interesante es la agregacin de este 2lut en la membrana y en el citosol dependiendo de la presencia o no de insulina, esto es, que en presencia de esta hormona o de K2)-5 se incrementa la densidad de 2lut-0 en la membrana y en su ausencia, la mayor parte se recluta hacia !esculas en el citosol, lo que representa un comportamiento similar al 2lut-4, al menos en clulas LD. El 2lut-0 fue clonado originalmente de libreras de c&C7 de m*sculo fetal humano y los reportes ms recientes sugiere una restriccin mayor a la que se report originalmente solo a tejido cerebral, testculo y espermato"oides. En roedores el patrn de transcripcin es a*n ms restringido solo al tejido cerebral. La e(presin del mTC7 del 2lut-0 ha sido establecida mediante hibridi"acin in situ lo que ha re!elado una amplia e(presin en neuronas del cerebelo, striatum, corte( e hipocampo. &e forma similar, estudios de inmunoblotting

determinaron que este transportador se e(presa como una protena de unos 4< @&a ubicada especialmente a ni!el de los a(ones y las dendritas y no as en los cuerpos neuronales donde se encuentra fundamentalmente el 2lut-5. Este patrn es especialmente e!idente en las clulas ner!iosas del hipocampo, donde las terminaciones ner!iosas emitieron se+ales inmunopositi!as para la tensin especfica para el 2lut-0. Este patrn ha sido confirmado por estudios de radioinmunohistoqumica usando antisuero anti 2lut-0. GLUT > 2SLC:A>3: U, Gl'- (o, +ra, mo.$l$"a" El 2lut-4 es un transportador de alta afinidad para la glucosa ,?m Z < m6- que se e(presa fundamentalmente en tejido muscular estriado, tejido muscular cardaco y adipocito. Au gen se ubica en el cromosoma 58p50 y tiene una e(tensin de J,4 6U. Este transportador no se e(presa en tejidos embrionarios ,ni pre ni post-implantacin- y es *nico en el sentido de la regulacin de su locali"acin en el citosol o en la membrana por la insulina1 En condiciones basales, es decir, durante el ayuno, la !asta mayora de las molculas de 2lut-4 se encuentran locali"adas dentro de !esculas en el citosol que forman dos tipos de compartimientos bien definidos por su comportamiento, ya que un grupo de estas !esculas responden a la se+al de la insulina y otro grupo responde fundamentalmente al estmulo que representa la acti!idad fsica. Este comportamiento representa un mecanismo muy fino de regulacin del metabolismo de la glucosa en organismos superiores que solo permite la entrada de glucosa al tejido muscular cuando es lo suficientemente ele!ada como para estimular la secrecin de insulina que en *ltima instancia fa!orecer la entrada del e(cedente de glucosa al interior muscular. #uando el ni!el de glucosa en plasma es bajo la liberacin de insulina tambin lo es, por lo que durante el ayuno la mayora de las molculas de glucosa son deri!adas a los tejidos que tienen 2lutQs de alta afinidad ,2lut-5 y 2lut-0- que no son sensibles a la presencia de la insulina. &e esta forma, durante el ayuno el m*sculo es incapa" de incorporar glucosa en cantidades significati!as ,a menos que se haga acti!idad fsica enrgica- preser!ndola para el tejido ner!ioso y eritrocito. Mno de los hitos ms importantes en la bioqumica moderna ha sido la dilucidacin de los mecanismos in!olucrados en la respuesta de las !esculas que contienen 2lut-4 a la se+al insulnica que finalmente conduce a la fusin de stas con la membrana plasmtica. Este intrincado sistema requiere el concurso de una serie de protenas de las !esculas y de la membrana que se denominan en conjunto .protenas Anare/ y que son anali"adas en profundidad ms adelante. La traslocacin del 2lut-4 a la membrana tambin requiere la acti!acin de la en"ima fosfatidilinisitol-0-cinasa ,'K-0?- por intermedio del KTA-5 fosforilado, que forma un complejo con dicha en"ima que produce un incremento de su acti!idad unas %9 !eces. Kgualmente, una segunda !a de acti!acin de la traslocacin ,por ejercicio- se lle!a a cabo gracias a la acti!acin de la en"ima 76'? por el incremento de la relacin 76';7I' y por alosterismo positi!o por el 76'. E(iste reciente e!idencia de que una tercera !a de traslocacin de 2lut4 a la membrana que in!olucra la sntesis de (ido ntrico ,C$- durante la contraccin muscular y acti!acin ulterior de la en"ima guanilato ciclasa, ya que en e(perimentos utili"ando Citroprusiato de Ca L,donador de C$- se obser! un incremento en el transporte de glucosa en clulas de m*sculo esqueltico aislado. GLUT K 2SLC:AK3: U, Gl'- )4 (?B$(o 4ara la ;r'(-o)a El 2lut-< es un transportador especfico para fructosa ,?m Z 59-50 m6- que se e(presa fundamentalmente en la clulas del ribete en cepillo del intestino delgado donde media el paso de la fructosa desde el lumen a la clula epitelial intestinal. Uajos ni!eles de este transportador tambin se encuentran en eritrocitos, ri+n, espermato"oides, m*sculo esqueltico y tejido adiposo de humanos y ratas. Au e(presin en el m*sculo esqueltico humano se relaciona a su capacidad de utili"ar la fructosa para la gluclisis y la sntesis de glucgeno de forma independiente de la incorporacin por medio del 2lut-5 y el 2lut-4. Tecientemente el 7TCm de este 2lut se ha detectado en el intestino delgado, ri+n y testculo de ratones y a diferencia de los humanos, no se detect en m*sculo de estos mamferos. Este 2lut no es capa" de fijar al inhibidor #itochalasina U por lo que es posible que la fructosa y la glucosa no compartan los mismos transportadores. 7dems de todo esto, el 2lut-< no posee uno de los dominios de reconocimiento de la glucosa, el dominio [LA, en la alfa hlice CO 8. 6s all del mecanismo de absorcin de fructosa en intestino, mucha polmica ha generado el mecanismo de obtencin de energa de los espermato"oides humanos. 7 pesar que los datos disponibles en la actualidad son consistentes con el concepto de que estas clulas usan fundamentalmente a la glucosa como fuente de energa, es un hecho cierto que la concentracin de glucosa en los t*bulos seminferos es muy bajo y que la concentracin de sta en el lquido seminal es muy !ariable, desde un ni!el muy cercano a cero hasta P9 mg;dl. La e(presin de !arios transportadores de he(osas con diferentes afinidades puede representar una adaptacin funcional para transportar diferentes sustratos energticos cuya concentracin !ara durante el ciclo de !ida de los espermato"oides, de hecho, estudios pre!ios han concluido que en el espermato"oide humano se e(presan tambin los 2lutQs 5,% y 0. GLUT 6 2SLC:A63: R " B$,$ ,"o la (la)$B$(a($/, Ioshia@i ?ayano y cols. del Knstituto 3o\ard 3ughes de la Mni!ersidad de #hicago aislaron y caracteri"aron en 5PP9 lo que pareci ser el se(to transportador de glucosa de la familia de los 2lutQs con un 8P,D E de homologa con el 2lut 0 y con una ubicacin en el bra"o largo del cromosoma <. Ain embargo, estos autores y otros confirmaron que este gen de 0,4 @b de e(tensin posea un gran n*mero de codones de interrupcin de la transcripcin por lo que en condiciones normales no era capa" de producir una protena. &e esta manera, el lugar del 2lut D permaneci !aco hasta el descubrimiento de una .primera !ersin del 2lut P/ que rpidamente fue reclasificado como 2lut D por el #omit de Comenclatura de 2enes 3M2$ ,Human Genome Organi#ation-. El anlisis de la estructura primaria re!ela la presencia de 5% hlices transmembrana adems de contener todos los dominios que son caractersticos de los transportadores de glucosa, en particular los dominios 'EA'T;'EI?2T ,despus de las hlices D y 5%-, el dominio 2TT es las asas % y J, residuos de glutamato y arginina en las asas intracelulares 4 y 59, % residuos de triptfano ,Irp 0JJ y 45%-, residuos de tirosina en las hlices 4 y 8 y 2lutaminas en las hlices < y 8 que tambin se encuentran en el 2lut 5. El gen de este transportador se encuentra en el cromosoma P ,Pq04- y tienen una longitud apro(imada de J@b y consiste en 59 e(ones separados por intrones cortos. 6ediante anlisis basados en la tcnica de Corthern blot el 7TCm del 2lut P se ha encontrado e(clusi!amente en cerebro y tejido linfoideo ,ba"o y leucocitos perifricos-. Iodos los blots mostraron la presencia de una sola clase de transcriptos de %,D ?b de longitud en esos tejidos. La protena con mayor similaridad con el 2lut D es el transportador 2lut J ,44,JE de homologa-. El 2lut D y el 2lut J se encuentran en una rama separada de la #lase KKK de la familia de los 2lutQs ,)ig. CO- y e(hiben marcadas diferencias con los 2lutQs 5 al <. &e hecho, %

residuos de 7rginina estn presentes en posicin 8 y J en el 2lut P, una regin que se asocia con la especificidad del transportador por su sustrato. &e manera interesante, los transportadores renales de aniones poseen estas argininas en la misma posicin del 2lut D, por lo que se ha especulado que esta protena es un co-transportador anin;glucosa. Los parientes mas cercanos son el 2lut 5 ,%J,<E de homologa-, el transportador de inositol de le!aduras ,%D,4E de homologa- y el transportador de arabinosa y (ilosa de E. colli ,%J,4 y %<,8 E de homologa respecti!amente-. Tespecto a la afinidad de este transportador por la glucosa se han reali"ado e(perimentos que han medido la acti!idad de transporte del 2lut P mediante transfeccin a clulas #$A-8 con la acti!idad de transporte constituti!a a una concentracin de glucosa de < m6 pero no con glucosa a una concentracin de 5 m6. Este halla"go sugiere que el 2lut P es un transportador con un alto ?m, hecho que sugiere una ree!aluacin en un sistema de e(presin diferente. El halla"go reciente de que el 2lut D liga a la #itochalacina U con baja afinidad es consistente con el planteamiento de que este es un 2lut de baja afinidad ,?m ele!ado- como en el caso del 2lut %. GLUT O 2SLC:AO3: U,a 0$)-or$a 4la+a"a " rror )

&esde hace tiempo se sabe que a ni!el de la fraccin microsomal de hgados de rata y humanos debe e(istir alg*n tipo de transportador para 3e(osas con un alto ?m que debera permitir que la glucosa generada de la acti!idad en"imtica de la 2lucosa-Dfosfatasa en el retculo endoplsmico liso pueda alcan"ar el citosol. &e esta manera, un grupo de in!estigadores de la Mni!ersidad de &undee, Escocia, se dieron a la tarea de anali"ar posibles secuencias gnicas capaces de codificar dicho transportador, logrndose finalmente el aislamiento de un nue!o c&C7 clone en hgado de rata que mostraba gran similaridad con las secuencias de los 2lutQs5D, pero hacindose notar que dicha homologa era mayor para el 2lut %. 'ara este momento se decidi que este c&C7 corresponda al elusi!o transportador 2lut 8. En los P9Qs este mismo grupo quiso ampliar los conocimientos iniciales que haban reportado en 5PP% orientando la in!estigacin hacia la regulacin de la e(presin del mismo en seres humanos. 'rimeramente, ensayaron clonar el equi!alente de este 2lut en humanos mediante el uso de libreras de c&C7 usando las sondas apropiadas preparadas seg*n la supuesta homologa con el 2lut 8 de rata. 6ediante este mtodo se aislaron m*ltiples clones, pero de los 2luts conocidos hasta ahora, pero se fall en aislar el 2lut 8 humano. 'osteriormente usaron el mtodo de la transcriptasa re!ersa-'#T para aislar porciones del gen del 2lut 8 usando las sondas apropiadas preparadas sobre las secuencias del 2lut 8 de ratas. Este mtodo tambin fall. Los in!estigadores concluyeron que a la lu" de sus *ltimas in!estigaciones que ni los hepatocitos de rata ni el del humano contienen 7TCm equi!alente al que se clon de los e(perimentos iniciales de este grupo Escocs, por lo que se infiere que el halla"go inicial se debe considerar el descubrimiento del 2lut 8 como un artefacto de las tcnicas de clonaje usadas en la poca. Ain embargo, in!estigaciones muy recientes del Knstituto de Cutricin 3umana de 7lemania ,&KfE- han detectado un gen con caractersticas similares a los de los 2luts adyacente al gen del 2lut < en el cromosoma 5p0D.% con el cual tiene gran similitud ,<JE de homologa-. Este gen se ha denominado pro!isionalmente AL#%a8, aunque a*n no se conoce el patrn de e(presin de este gen ni la especificidad de su transcripto por sustratos. GLUT J 2SLC:AJ3: La (arr ra 4or " )('*r$r ,' .o) Gl'-) ) 0a $,$($a"o &os lneas de e!idencia sugieren la posibilidad de la e(istencia de nue!os transportadores de glucosa. En primer lugar, en algunos tejidos se han encontrado muy bajos ni!eles de 7TCm de las isoformas conocidas de estos transportadores. En segundo lugar, e(perimentos lle!ados a cabo en ratones que no e(presan el 2lut 4 ,2lut-4 ?noc@out mice- han demostrado que la capacidad de transporte de glucosa en el m*sculo se conser!a casi normal sin obser!arse un incremento compensatorio en la e(presin del 2lut 5 2lut 0. Tecientemente se ha desarrollado un nue!o abordaje para la identificacin de nue!os 2luts mediante la utili"acin de regiones e(tremadamente conser!adas de los genes que los ,conocidas como firmas genticas de los 2luts- que sir!en como plantillas que pueden ser comparadas con regiones de todo el genoma humano e intentar locali"ar regiones que tengan secuencias parecidas a estas regiones conser!adas. Este abordaje lle! a la identificacin y caracteri"acin del 2lut J y el 2lut P ,actualmente reclasificado como 2lut D-. La b*squeda en las bases de datos genmicas lle! a la identificacin de una secuencia caracterstica a la de los 2luts en el a+o 5PPP cuyo c&C7 fue clonado y e(presado por dos grupos de in!estigadores en el a+o %9991 &oege y cols., en humanos e Kberson y cols., en ratones, y que en la actualidad se conoce como 2lut J. El hecho de que dos grupos de trabajo aislaran esta protena de forma simultnea caus cierta confusin, ya que inicialmente este transportador fue denominado como 2LMI Y5 por uno de estos grupos y 2lut J por el otro. En la actualidad de acuerdo al comit de nomenclatura de genes 3M2$. El c7&C del gen ,ubicado en el cromosoma P- del 2lut J humano y de ratn contiene franjas de lectura abierta que codifican una proteina de 488 aminocidos. Esta secuencia tiene una homologa del %P,4E con el 2lut 5 y 80 de los 50% ,<<E- residuos de aminocidos idnticos en todas las isoformas de 2luts de mamferos estn presentes en el 2lut J. La secuencia primaria de este transportador contiene todos los dominios caractersticos los 2luts, con la muy interesante carencia de los sitios de glicosilacin en el asa 5, el asa EP es mucho mas larga que en los otros 2luts y que adems contiene sitios de glicosilacin y finalmente que el dominio AIA ,dominio muy conser!ado en todos los 2luts- es reempla"ado por 7EI. El transportador mas parecido al 2lut J es el 2lut D con el cual comparte una homologa del 40,D E, de hecho, como se dijo anteriormente estos dos transportadores pertenecen a la familia KKK de los transportadores de glucosa y solo se encuentran separados por < 6U en el mismo cromosoma. $tros parientes cercanos son el 2lut 5 ,%P,4E-, el transportador de inositol del Aaccharomyces pombe ,09,%E- y los transportadores de (ilosa ,0%,JE- y 7rabinosa ,%P,5E- de la $! colli! El alineamiento de las secuencias aminoacdicas y su anlisis con el programa '7LKC2 ha indicado que la homologa del 2lut J con el transportador de 7rabinosa de E. colli ,5<9 aminocidos idnticos- es mayor que cuando se compara las secuencias del 2lut 5 con el mismo transportador de 7rabinosa ,549 aminocidos idnticos-, por lo que se cree que el 2lut J es el transportador mas primiti!o en mamferos hasta ahora descubierto. 6ediante anlisis de Corthern Ulot el transcripto del gen del 2lut J de %,4 ?b se ha encontrado de manera predominante en testculos, blastocisto y cerebro ,cerebelo e hipocampo- y en mucha menor cantidad en el ba"o, prstata, intestino delgado, cora"n, cerebro y m*sculo esqueltico. Estudios de afinidad de este transportador lle!ados a cabo para la %-deso(iglucosa arrojaron un ?m de %,4 m6, la cual es bastante similar a la del 2lut 0, la ms alta afinidad conocida para un 2lut. Ain embargo, en e(perimentos reali"ados en o!ocitos de %enopus laevis se encontr que el transporte de glucosa fue inhibido competiti!amente por fructosa.

GLUT L 2SLC:AL3: El . r"a" ro Gl'- L #uando qued !aco el espacio del 2lut D en la clasificacin ,por ser un pseudogen- el lugar fue cubierto por el primer 2lut-P en ser descrito, por lo que qued un puesto !acante para ser llenado por el que en definiti!a sera el !erdadero 2lut P. 'ara que este e!ento ocurriese no iba a pasar mucho tiempo, ya que en el a+o 5.PPP 'hay y cols. descubrieron una secuencia genmica con gran homologa con el 2lut <. 6s importante fue el hecho de que estos in!estigadores patentaron esta secuencia en los E.M.7. Aeg*n el alineamiento m*ltiple de la secuencia de aminocidos deducida del 7&Cc el 2lut P es un transportador perteneciente a la #lase KK con una homologa de un << E con el 2lut <, con el que comparte la prdida del aminocido Iriptfano en la hlice 59 ,el cual se conser!a en los transportadores de la #lase K-. $tra caracterstica particular de este transportador es la presencia de un asa aminoterminal larga de unos << aminocidos con un motif formado por dos Leucinas. El gen que codifica el 2lut P se encuentra ubicado en el cromosoma 4p5<.0 y se e(presa fuertemente en el ri+n y el hgado, con bajos ni!eles en intestino delgado, placenta, pulmn y leucocitos. GLUT 8G 2SLC:A8G3 Este nue!o miembro de la familia AL#%7 fue identificado en el a+o %999 por &a\son y cols. Es una protena de <45 aminocidos que comparte un 0<E de homologa con los 2lutQs humanos 5 y J. La secuencia de aminocidos del 2lut 59 es casi idntica en longitud al 2lut P, pero hasta la fecha es el miembro de mayor longitud de la familia. El 2lut 59 de ratn comparte un 88,0E de homologa con su contraparte humana. #uando este transportador se e(presa en o!ocitos de %enopus laevis e(hibe la capacidad de transportar la %deso(i-glucosa que puede ser inhibida por la droga 'hloricin. El ?m de este 2lut es de 9,0m6. El gen del transportador se locali"a en el cromosoma %9 ,%9q5%-50.5 y 5% 6U de e(tensin- una regin asociada fuertemente con posibles diabetogenes. La locali"acin del gen y sus propiedades funcionales sugieren que el 2lut 59 puede lle!ar a cabo funciones metablicas de gran importancia y ser un elemento cla!e en el desarrollo de diabetes mellitus tipo %. 6ediante la tcnica de Corthern blotting se ha determinado la distribucin tisular del 2lut-59. Este transportador se encuentra en mayor concentracin en el hgado ,adulto y fetal- y el pncreas, aunque el producto de la transcripcin del gen ,de 4,4 @b- se ha encontrado igualmente en m*sculo cardaco, pulmn, cerebro ,adulto y fetal-, m*sculo esqueltico, placenta y ri+n. GLUT 88 2SLC:A883: PO-ro -ra,)4or-a"or " Br'(-o)aQ Este es otro nue!o miembro de la )amilia AL#%7 aislado en el a+o %995 por Aasa@i y cols. Iiene una secuencia de aminocidos que predice una arquitectura secundaria de5% hlices trasmembrana al igual que todos los 2lutQs. Ae ha determinado que el 2lut < es el pariente ms cercano de este transportador con el que comparte un 45,8 E de homologa. El gen del 2lut 55 humano consta de 5% e(ones de %P ?b de e(tensin que se locali"a en el cromosoma %% ,%%q55.%, y %9 6U de e(tensin-. En seres humanos el transcripto de este gen es de 8,% ?b de longitud que se ha conseguido solo en m*sculo esqueltico y cardaco y del cual se han descrito 0 tipos de !ariantes1 La primera es causada por la e(istencia de tres e(ones de inicio diferentes ,AL#%7 a, b y c-. La segunda !ariacin se debe a un salto en la transcripcin del primer e(n D y la tercera debido a una secuencia prematura de terminacin entre los e(ones J y P. Las dos *ltimas !ariaciones representan formas truncadas de los transcriptos sin significado biolgico hasta el momento. La transfeccin de clulas #$A-8 con c7&C del 2lut 55 ha demostrado aumentar la capacidad de transporte de glucosa de estas clulas, sin embargo, un dato de inters, es que a diferencia del 2lut 4 la acti!idad del transporte de glucosa del 2lut 55 es inhibida en gran medida por la fructosa, lo que lle!a a pensar que este es un transportador para fructosa con baja afinidad para la glucosa. GLUT 8: 2SLC6:A8:3: 'ara el momento de finali"ar este resumen, un equipo de in!estigadores de la Mni!ersidad de 6elbourne, 7ustralia, report la identificacin de un nue!o transportador para glucosa, el 2lut 5%. Este transportador fue hallado en clulas de cncer de mama 6#)-8 mediante cotejo por homologa con el 2lut 4. El c7&C de este 2lut codifica una protena de D58 aminocidos que posee las caractersticas esenciales de los 2lut. Ai se logra confirmar este halla"go estaramos en presencia del 2lut de mayor tama+o. El grado de homologa de este transportador con el 2lut 4 es del %P E y con el 2lut 59 comparte alrededor del 49 E de homologa. 7l igual que este *ltimo, el 2lut 5% presenta un asa e(tracelular de gran tama+o entre las hlices transmembrana P y 59. Estudios recientes de inmunofluorescencia han sugerido que en ausencia de insulina el 2lut 5% se locali"a en la regin perinuclear de las clulas 6#)-8. El inmunobloting ha puesto en e!idencia la e(presin del 2lut 5% en m*sculo esqueltico, tejido adiposo e intestino delgado. Este hecho ha planteado la hiptesis que este transportador representa el elusi!o segundo sistema de transporte sensible a la insulina que se encuentra en clulas musculares, ya que su 7TCm se ha encontrado en m*sculo as como en prstata. GLUT 8= 2SLC6:A8=3: PU, -ra,)4or-a"or " m$o$,o)$-ol " ,-ro " la (la)$B$(a($/, " lo) Gl'-F)Q El glut 50 transportador de 3L;Knositol codifica una protena transportadora de membrana de D%P aminocidos y una analoga del 0< E con el 2lut D que se e(presa fuertemente en clulas de la gla y en algunas neuronas con la capacidad de transportar mioinositol y glucosa cuando se encuentra a una alta concentracin. El inositol y sus deri!ados fosforilados ,)osfoinositsidos- juegan funcin importante como osmolitos y como segundos mensajeros en la regulacin de la e(o y endocitosis de !esculas. La e(presin de este transportador en o!ocitos de %enopus laevis ha demostrado que la acti!idad de transporte es casi e(clusi!a para el mioinositol y algunos de sus ismeros con una ?m de 599 m6 y su e(presin preferencial en el A.C.# hace pensar que su principal papel est en la regulacin de estos metabolitos a ni!el cerebral. GLUT 8> 2SLC6:A8>3: La Bro,- ra ) 0a( (a"a "?a mH) l 5a,a En el a+o %99% Vu y cols. del instituto Uurnham en La Xolla, #alifornia, M.A.7 identificaron lo que representa el *ltimo miembro de transportadores de esta familia ubicado en el cromosoma 5%p50.0 ,con 58.5 6U de e(tensin-, y unas 59 6U corriente arriba del gen del 2lut 0 con el cual comparte un importante parecido. 3asta ahora se haba credo que el 2lut 54 era un 'seudogen ,igual que el 2lut D en sus principios- resultado de la duplicacin del gen del 2lut 0. El 2lut 54 posee dos formas1 una corta que consiste en 59 e(ones y produce un transcripto de 4P8 aminocidos que es similar al 2lut 0 en un P4,< E. La segunda forma, llamada forma larga codifica una

proteina de <%9 aminocidos que difiere de la anterior en el e(tremo amino-terminal. 7mbas forman poseen como todos los 2lutQs 5% Nhlices transmembrana y los dominios relacionados con el transporte de glucosa. Ain embargo, en contraste con el 2lut 0 este transportador se e(presa fundamentalmente en los testculos donde su 7TCm se encuentra en una concentracin 4 !eces mayor que el 2lut 0.

Nom*r " lG , SLC:A8

Nom*r S')-ra-o) D$)-r$*'($/, " la 4r$,($4al ) -$)'lar 4ro- ?,a

GLUT8 2lucosa, 2alactosa, 6anosa, glucosamina 2lucosa, 2alactosa, )ructosa, 6anosa, glucosamina 2lucosa, 2alactosa, 6anosa, Yilosa 2lucosa, glucosamina Eritrocitos, cerebro, placenta 3gado, Kslotes de Langerhans, intestino, Ti+n, #erebro Ceurona, Iestculos, placenta Iejido adiposo, tejido muscular estriado y cardiaco Kntestino delgado y Ti+n #erebro, Ua"o, Leucocitos Iestculos, cerebro, suprarrenales, 3gado, Ua"o, tejido adiposo pardo, pulmn Ti+n, 3gado, Kntestino delgado, placenta, pulmn y Leucocitos #ora"n, 'ulmn, cerebro, hgado, m*sculo esqueltico, pncreas, placenta y ri+n 6*sculo cardaco y esqueltico, #ora"n, 'rstata, 6*sculo esqueltico. #erebro y tejido adiposo Iestculos

E,B rm "a" ) r la($o,a"a)

U*$(a($/, " l + , , l) r 0'ma,o

SLC:A:

GLUT:

Androme 5p0<-05.0 con!ulsi!o con microcefalia adquirida y retardo del desarrollo Androme de 0q%D.%-%8 )anconi-Uic@el

SLC:A=

GLUT=

5%p50.0

SLC:A>

GLUT>

58p50

SLC:AK SLC:A6 SLC:AO SLC:AJ

GLUTK GLUT6 GLUTO GLUTJ

)ructosa 2lucosa 2lucosa 2lucosa, )ructosa, 2alactosa

5p0D.% Pq04 5p0D.% P

SLC:AL

GLUTL

2lucosa

4p5<.0-5D

SLC:A8G GLUT8G

2lucosa, 2alactosa

%9q5%-50.5

SLC:A88 GLUT88 SLC:A8: GLUT8:

2lucosa, )ructosa 2lucosa

%%q55.% Dq%0.%

SLC:A8= GLUT8=
/ HMIT

&io-inositol 2lucosa

5%q55.%0 5%p50.0

SLC:A8> GLUT8>

Iabla CO %. )amilia de los transportadores de 2lucosa tipo 2lut descubiertos en el ser humano hasta la fecha.
REGULACIN GEN9TICA DE LA DIGESTIN Y ABSORCIN DE LOS CARBOHIDRATOS

En el intestino delgado, un grupo de genes que estn asociados a la digestin y absorcin de nutrientes se e(presan de una forma tejidoespecfica. &e hecho, se ha reportado que la e(presin de muchos de estos genes est influenciada por la dieta, lo cual representa un fenmeno adaptati!o a los cambios en los patrones dietticos as como al momento de la ingesta de alimentos. &e esta manera, una creciente e!idencia apoya la nocin de que el control de la transcripcin y por ende, de la e(presin gentica in!olucrada en la adaptacin diettica, aunque se conoce muy poco sobre las molculas se+ali"adoras deri!adas de los nutrientes o e!ocadas por stos y de los e!entos nucleares relacionadas con estos procesos. 3asta la fecha se han e(aminado dos grupos de genes modulados por nutrientes relacionados con la digestin;absorcin de principios inmediatos1 el gen sacarasa;isomaltasa ,AK- y el gen de la lactasa-phlori"in hidrolasa ,L'3- que representan genes regulados por los carbohidratos de la dieta y los genes de la cellular-retinol-binding-protein tipo % ,#TU'-KK- y la li!er-type fatty acid-binding protein ,L-)7U'- que representan genes regulados por los cidos grasos de la dieta. La administracin de carbohidratos por !a oral causa un incremento en los ni!eles de 7TCm de la AK y L'3 dentro de las primeras 0 horas, en un patrn en el cual el tiempo y la e(tensin de la induccin de ambos genes son similares para ambos genes. Ain embargo, se han detectado ciertas diferencias relacionadas de acuerdo al sitio donde ocurre la induccin1 el incremento inicial en la transcripcin del gen AK ocurre en la base de las micro!ellosidades mientras que el gen L'3 se transcribe mayormente en la porcin apical de las !ellosidades. Kgualmente se ha determinado que de todos los monosacridos, la fructosa es el mayor estimulante de la transcripcin de los genes AK y L'3, el cual !a acompa+ado por un concomitante incremento de la tasa de transcripcin del gen del transportador de glucosa A2LI-5 y del transportador de fructosa 2lut <, todos stos encargados de codificar los transportadores de he(osas presentes en las membranas del borde en cepillo. En contraste con lo anterior, la administracin de glucosa aislada o un a"*car no metaboli"able ,metil-glucsidos, por ejemplo- no incrementa la tasa de transcripcin de stos genes, lo que sugiere que la fructosa o un metabolito de sta es la responsable de la regulacin de la transcripcin de estos genes. Estudios recientes han reportado los posibles mecanismos de regulacin de la e(presin de stos genes. 7parentemente, factores de transcripcin nucleares se unen al 7&C en sitios especficos actuando como co-acti!adores de estos genes en cuestin. Estudios reali"ados con &Casa y electromobilidad han determinado que los genes de la L'3 y AK estn asociados en forma #is a elementos reguladores muy conser!ados que muestran una secuencia de consenso III7I que es por lo dems idntica a la secuencia de unin del factor de transcripcin #d(-%. Estudios posteriores hechos en ratas sometidas a una dieta rica en fructosa comprobaron la unin de la protena #d(% a los sitios reguladores #is de los genes de la L'3 y AK, por lo que resulta probable que toda la maquinaria en"imtica y transportadora de membrana est sometida a regulacin a tra!s de la disminucin o aumento de la tasa de transcripcin del 7&C de estas protenas.

A(-$.$"a" " a'-o6 .al'a($/, 5. Uebidas como el 2atorade] y el suero oral poseen una combinacin bsica de Ca L y 2lucosa en cierta cantidad de agua. Kn!estigue la composicin qumica e(acta de estos preparados y e(plique molecularmente porque se prefieren estas alternati!as para la hidratacin en contraposicin de agua. %. En 5P4P 2uido )anconi y 3orst Uic@el describieron por primera !e" una condicin caracteri"ada por acumulacin de glucgeno en hgado y ri+n y problemas tubulares renales. Esta condicin se relaciona con las llamadas enfermedades por depsito de glucgeno y en la actualidad se le conoce como Aindrome de )anconi-Uic@el. Kn!estigue cual es el defecto a ni!el molecular de esta enfermedad y e(plique el origen de los halla"gos clnicos en estos pacientes. 0. &escriba la estructura de la barrera hemato-enceflica y e(plique molecularmente su importancia en la seleccin de combustibles para la obtencin de energa por parte de las neuronas. 4. El 7carbose y el >oglibose son medicamentos utili"ados en el manejo de pacientes con diabetes tipo %. Kn!estigue la estructura qumica y el mecanismo de accin de este grupo de medicamentos. E(plique cmo el uso de estos medicamentos pueden tener un impacto positi!o en el manejo de los pacientes con diabetes. ^Msted considera que estas drogas seran capaces de disminuir la glicemia en ayuno_ <. El ndice glicmico es un atributo que tiene cada alimento relacionado con la capacidad de ele!ar el ni!el de glucosa plasmtica una !e" suministrado dentro de la dieta. Kn!estigue el ndice glicmico de al menos %9 alimentos comunes y cmo el

conocimiento de ste puede ser de utilidad en el manejo de pacientes con diabetes mellitus e hipoglicemia ,e(plique molecularmente-. D. La intolerancia a la Lactosa es una enfermedad que se obser!a con cierta frecuencia en recin nacidos. E(plique molecularmente su causa y sugiera medidas para el manejo adecuado de ni+os aquejados con este problema. 8. El manejo clnico de los indi!iduos aquejados con &iabetes 6ellitus incluye un plan nutricional dise+ado para e!itar una ele!acin intensa de la glicemia post-prandial. 'ara lograr este objeti!o, las maniobras nutricionales se basan en la inclusin de carbohidratos complejos, fibra soluble e insoluble y alimentos con un ndice glicmico bajo, as como la e(clusin de a"*cares refinados. E(plique molecularmente la racionalidad de este tipo de plan nutricional. J. Las sulfonilureas son medicamentos hipoglicemiantes utili"ados en el manejo de pacientes con &iabetes tipo %. Kn!estigue cuantas sulfonilureas estn presentes en el mercado farmacutico !ene"olano y e(plique molecularmente su mecanismo de accin. ^#ree usted que estos medicamentos pueden ser *tiles en el manejo de indi!iduos con &iabetes 6ellitus tipo 5_ P. &urante la acti!idad fsica !igorosa se e!idencia un incremento en la concentracin de adrenalina y glucagn en sangre y una disminucin en la concentracin de la insulina, sin embargo, la incorporacin de glucosa al m*sculo aumenta a pesar de la caida en los ni!eles de insulina. Kn!estigue los mecanismos responsables de este efecto. 59. La glucosuria es un signo caracterstico de la &iabetes 6ellitus cuando e(iste un mal control metablico, es especial, cuando los ni!eles de glucosa sangunea se encuentran sobre los 5J9 mg;dl. E(plique molecularmente la presencia de glucosa en orina en estos pacientes. 55. En la actualidad durante la e!aluacin rutinaria del control metablico de los pacientes con &iabetes 6ellitus se solicitan e(menes de laboratorio con relati!a frecuencia. &os de estos e(menes son la glicemia en ayuno y la glicemia postprandial ,medicin de los ni!eles de glucosa en sangre % horas despus de la ingesta de una comida estndar-. E(plique metablicamente el origen de la glucosa plasmtica durante el ayuno y de la glucosa plasmtica en el perodo post-prandial inmediato. Kn!estigue la importancia del control estricto del ni!el de glucosa postprandial referido al control del riesgo de enfermedades cardio!asculares. 5%. La Aucralosa ,Aplenda]- es un compuesto ,edulcorante artificial- no calrico utili"ado para endul"ar bebidas y alimentos. Kn!estigue su frmula estructural y e(plique las !entajas que tiene sobre la sacarosa y la fructosa en el tratamiento de la diabetes y la obesidad. 50. La &iabetes tipo 5 se caracteri"a por un proceso auto-inmune que destruye de forma progresi!a las clulas beta de los Kslotes de Langerhans. #omo todos los tipos de diabetes sta cursa con hiperglicemia cuando no se controla de forma adecuada.

E(plique molecularmente cual es el determinante fundamental que e(plique la ele!acin de los ni!eles de glucosa plasmtica por encima de los !alores normales y dise+e estrategias que permitan su control. L$- ra-'ra r (om ,"a"a
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