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Notas sobre equilbrio qumico e termodinmica, catlise enzimtica e

nomenclatura das enzimas
ndice
1 Conceitos de termodinmica e de equilbrio aplicados a enzimas e a processos de transporte
transmembranar ............................................................................................................................................... 2
1.1 Conceitos de processo endergnico, exergnico e energia livre de Gibbs. O sentido em que um
processo reativo ou de transporte tende a evoluir indicado pelo sinal da energia de Gibbs associada a esse
processo. ........................................................................................................................................................ 2
1.2 Conceito de acoplamento entre processos endergnico e exergnicos. O sentido em que os processos
acoplados tendem a evoluir indicado pelo sinal da energia de Gibbs associada ao processo global.
Transporte ativo e transporte passivo. ........................................................................................................... 3
1.3 Distino entre G e H, entre reao exergnica e exotrmica e entre reao endergnica e
endotrmica. .................................................................................................................................................. 6
1.4 Conceitos de variao de energia de Gibbs padro. Conceitos de G, K
eq
e Q
R
usados em
Bioqumica. ................................................................................................................................................... 7
1.5 Relao entre diferena de potencial redox (E) e funo de Gibbs (G). ........................................... 10
1.6 Conceitos de reao ou processo de transporte fisiologicamente reversvel e irreversvel. ................... 11
1.7 Conceito de ligao rica em energia usado em bioqumica. ............................................................... 12
2 - Conceito gerais do funcionamento das enzimas e sua nomenclatura ................................................... 14
2.1 As enzimas aumentam a velocidade das reaes porque diminuem a energia livre de ativao, o G
relativo formao do estado de transio. ................................................................................................. 14
2.2 A presena de uma enzima no afeta o sentido em que a reao que ela catalisa vai evoluir................ 15
2.3 Significado das expresses cofator, grupo prosttico e coenzima. ........................................................ 15
2.3.a O FAD o grupo prosttico da protena de transferncia de eletres e mutaes nesta protena
podem diminuir a ligao ao FAD ......................................................................................................... 16
2.4 Os nomes das enzimas descrevem as suas atividades catalticas. .......................................................... 17
2.4.a As oxi-redtases (EC 1.x.y.z) catalisam reaes redox. ................................................................ 17
2.4.b As transfrases (EC 2.x.y.z) catalisam reaes de transferncia de grupos qumicos ou resduos
entre os substratos. ................................................................................................................................. 20
2.4.c As hidrlases (EC 3.x.y.z) catalisam reaes de hidrlise. ............................................................ 21
2.4.d As lases (EC 4.x.y.z) catalisam reaes em que um reagente A=B que contm uma dupla ligao
deixa de a ter quando se liga a um reagente C. ...................................................................................... 22
2.4.e As isomrases (EC 5.x.y.z) catalisam reaes em que um ismero se converte noutro. ................ 23
2.4.f As lgases (ou sinttases; EC 6,x,y,z) catalisam reaes que podem ser lidas como o somatrio de
duas reaes sendo uma de hidrlise do ATP e outra de combinao de duas substncias. ................. 23
2.4.g Por tradio algumas enzimas chamam-se vulgarmente sntases. ................................................ 24
3 Bibliografia................................................................................................................................................... 24


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1 Conceitos de termodinmica e de equilbrio aplicados a enzimas e a
processos de transporte transmembranar
1.1 Conceitos de processo endergnico, exergnico e energia livre de Gibbs. O
sentido em que um processo reativo ou de transporte tende a evoluir
indicado pelo sinal da energia de Gibbs associada a esse processo.
A equao de Gibbs (Equao 1) relaciona a variao da energia livre de Gibbs associada a
um processo reativo com a razo K
eq
/Q
R
mostrando que h uma proporcionalidade direta entre o
valor da variao da energia de Gibbs (G) e o simtrico do ln dessa razo. R e T so constantes de
proporcionalidade correspondendo, respetivamente, constante dos gases (8,314 J K
-1
mol
-1
) e
temperatura (em graus Kelvin).

Equao 1 u = RTln_
K
cq

R
_ _
O valor da constante de equilbrio (K
eq
) uma razo em que no numerador se multiplicam
as concentraes dos produtos no equilbrio (elevadas aos respetivos coeficientes estequiomtricos)
e no denominador se multiplicam as concentraes dos reagentes no equilbrio (tambm elevadas
aos respetivos coeficientes estequiomtricos). O quociente de reao (Q
R
) uma expresso anloga
mas em que as concentraes dos reagentes e dos produtos so as que existem no estado em que o
G est a ser determinado.
A relao entre os valores da K
eq
de uma determinada reao e o do Q
R
que se observa em
circunstncias especificadas determina o sentido (direto ou inverso) em que a reao tende a
evoluir. Numa qualquer reao AB, quando a K
eq
>Q
R
a reao diz-se exergnica no sentido em
que foi expressa e endergnica no sentido contrrio. Os adjetivos endergnico e exergnico
classificam reaes e relacionam-se com o valor da variao da energia livre de Gibbs (G)
associada que tem valor positivo ou negativo, respetivamente. Quando K
eq
>Q
R
o valor de G
negativo: o ln de um nmero superior a 1 um nmero positivo e portanto, dado o sinal na
Equao 1, o valor do G um nmero negativo. O contrrio acontece no caso de K
eq
<Q
R
.
Quando Q
R
=K
eq
o valor de G nulo (ln 1 = 0) e a reao est em equilbrio qumico:
embora ao nvel molecular se processe em ambos os sentidos a velocidades iguais, no h
converso lquida dos reagentes nos produtos nem dos produtos nos reagentes.
No caso mais simples de transporte transmembranar, quando a substncia que atravessa a
membrana no tem carga, o processo est em equilbrio quando as concentraes em ambos os
lados da membrana so iguais. Neste caso a equao de Gibbs pode aplicar-se se admitirmos que o
valor da K
eq
1 e que Q
R
a razo entre a concentrao da substncia do lado da membrana
para onde a substncia difunde e a sua concentrao do lado da membrana de onde a substncia
provem. Se, num determinado momento, a concentrao de glicose no plasma sanguneo 5 mM e
dentro de uma clula 0,1 mM, a glicose tende a entrar para dentro da clula e o valor de G
associado a esse processo de transporte de cerca de -10 kJ por mole de glicose que atravessa a
membrana (ver Equao 2).

Equao 2 G = - RT ln (1 / (0,1 mM/5 mM)) = - RT ln (5 mM / 0,1 mM) = -10 kJ/mol

Se considerarmos um qualquer transporte de uma substncia neutra a favor do gradiente
uma equao equivalente enunciada acima a Equao 3 onde [S] representa o lado com maior
concentrao e [s] o lado onde a concentrao menor. Assim, o transporte de uma substncia
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neutra a favor do gradiente um processo exergnico (G<0) e, no sentido contrrio, seria
endergnico (G>0).

Equao 3 u = RTln_
|S]
|s]
_ _

No caso do transporte de substncias inicas deve ter-se em conta a diferena de cargas
entre a face exterior e a interior da membrana e que se traduz numa diferena de potencial eltrico.
No caso da membrana citoplasmtica no excitada (em potencial de repouso) e da membrana da
mitocndria a carga eltrica negativa no interior (da clula e da mitocndria, respetivamente) e a
diferena de potencial favorece a entrada de ies positivos (e a sada de negativos). O valor da
energia de Gibbs associado ao gradiente eltrico quando um io de carga Z atravessa uma
membrana em que a diferena de potencial (psi) dado pela Equao 4.

Equao 4 G = Z F

Nesta equao F o Faraday (96500 Coulomb mol
-1
). tem o sinal (positivo ou negativo)
do interior da membrana. Se o gradiente de concentraes for nulo e, portanto, no contribuir para a
termodinmica do processo de transporte, o valor de G associado ao movimento de um io de
carga positiva (Z>0) do exterior para o interior de uma membrana onde o interior tem carga
negativa tem sinal negativo e , portanto, um processo exergnico. Quando existe tambm um
gradiente qumico (concentraes), o valor da energia de Gibbs associada ao gradiente
eletroqumico a soma dos valores obtidos na Equao 3 e na Equao 4.
Exemplificando com o caso do io Na
+
que atravessa a membrana citoplasmtica de uma
clula. Se admitirmos que, na membrana citoplasmtica de uma determinada clula, = -0,086 V
(interior negativo) e que as concentraes de Na
+
no exterior e no interior so, respetivamente, 145
mM e 10 mM, quer o gradiente eltrico (Equao 4), quer o gradiente qumico (concentraes; ver
Equao 3) tm G negativo. O G associado ao gradiente eltrico ser de -8,3 kJ mol
-1
e o
associado ao gradiente qumico de -6,6 kJ mol
-1
; a soma -14,9 kJ /mol de Na
+
transportado. O
valor negativo desta soma indica que o Na
+
tende a mover-se a favor do seu gradiente
eletroqumico: de fora para dentro da clula. De facto, em ambas as parcelas o G era negativo:
quer o gradiente eltrico, quer o qumico empurram o Na
+
na mesma direo.
Um resultado semelhante (-17,9 kJ) podia ser obtido se usssemos como exemplo o
gradiente eletroqumico dos protes na membrana mitocondrial interna e admitssemos um valor de
= -0,150 V (negativo no interior) e valores de 10
-7
M e 10
-7,6
M para a concentrao de protes no
exterior e no interior, respetivamente. O valor negativo do G indica que, tambm neste caso, o io
(neste caso o proto) tem tendncia a mover-se para o interior da mitocndria e que ambas as
parcelas (as que resultam da aplicao das equaes 3 e 4) so negativas.
1.2 Conceito de acoplamento entre processos endergnico e exergnicos. O
sentido em que os processos acoplados tendem a evoluir indicado pelo
sinal da energia de Gibbs associada ao processo global. Transporte ativo e
transporte passivo.
As reaes qumicas e os processos de transporte tendem a evoluir no sentido em o G
negativo. Se, numa qualquer reao AB, a razo K
eq
/Q
R
>1, esta tende a evoluir no sentido em que
foi escrita. A Equao 1 mostra que esta condio suficiente para afirmar que na reao AB, o
valor de G negativo ( exergnica no sentido AB) e que ela s pode evoluir no sentido em que
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A consumido e se forma B. Ou seja, na ausncia de acoplamento (ver frente) todas as reaes
so exergnicas; a reao em anlise no pode evoluir no sentido em que endergnica (BA).
As reaes endergnicas (G>0) no existem, mas frequente que uma determinada reao
enzmica (ou um processo de transporte) possa ser, conceptualmente, fracionado numa componente
exergnica e noutra endergnica. A componente endergnica s pode ocorrer acoplada com uma
componente exergnica em que o valor absoluto da variao da energia livre de Gibbs que lhe est
associada superior. Ou seja, entendido no seu todo, o processo catalisado por uma enzima ou por
um transportador (ou transportador/enzima) que efetivamente ocorre ter sempre G negativo e ser
sempre globalmente exergnico.
A equao que descreve a reao catalisada pela cnase da glicose (Equao 5) pode servir
como exemplo para ilustrar o que se escreve acima. Esta reao pode ser conceptualmente
entendida como o somatrio de duas reaes complementares expressas pela Equao 6 e pela
Equao 7.

Equao 5 ATP + glicose glicose-6-fofato + ADP
Equao 6 ATP + H
2
O ADP + Pi
Equao 7 glicose + Pi glicose-6-fosfato + H
2
O

No caso da reao 6 a razo K
eq
6/Q
R
6 [(2,7 10
5
) / (4,5 10
-4
)] , no citoplasma das
clulas, cerca de 6 10
8
. Porque nas clulas vivas as concentraes das substncias variam em
torno de valores muito estreitos (diz-se que as suas concentraes so estacionrias
1
), no deve
surpreender-nos o facto de o Q
R
de uma qualquer reao ter, nas clulas vivas, um valor que varia
pouco ao longo do tempo. Uma razo K
eq
/Q
R
de 6 10
8
equivale (ver Equao 1) a um valor de
G6 de -50 kJ mol
-1
: a reao de hidrlise do ATP em ADP e Pi (fosfato inorgnico; ver Equao
6) , no citoplasma das clulas, exergnica.
No caso da reao 7, a razo K
eq
7/Q
R
7 [(3,5 10
-3
) / 5] cerca de 7 10
-4
: o G7 +18 kJ
mol
-1
e, no sentido em que est expressa, endergnica no podendo ocorrer no citoplasma das
clulas. O inverso da reao de hidrlise da glicose-6-fosfato no pode ocorrer nas clulas.
A razo K
eq
/Q
R
do somatrio das duas reaes discutidas acima (Equao 5) o produto
(K
eq
6/Q
R
6) (K
eq
7/Q
R
7) cujo valor cerca de 4,2 10
5
e a partir deste valor, usando a Equao 1,
podemos determinar o G da reao catalisada pela cnase da glicose. O valor de G5 pode ser
calculado de forma mais simples porque quando se somam duas reaes o valor do G da reao
soma o somatrio dos G das reaes parcelares: G5 = G6 + G7 = -32 kJ (-50 kJ +18 kJ = -
32 kJ). O valor negativo do G da reao 5 indica-nos que esta reao exergnica e que pode
ocorrer no sentido em que est expressa.
Como referido acima o Na
+
tem tendncia a entrar para as clulas movendo-se a favor do
seu gradiente eletroqumico do espao extracelular para o citoplasma. No caso do io K
+
o G
associado ao seu transporte na membrana citoplasmtica em repouso , em muitas clulas, prximo
de zero e existe um estado prximo do equilbrio entre as duas faces da membrana. Embora a
concentrao de K
+
(maior no interior que no exterior) favorea a sua sada, o gradiente eltrico
favorece a sua entrada; porque os valores de G tm sinais contrrios e os valores absolutos so
semelhantes, o G associado ao gradiente eletroqumico do K
+
, frequentemente, prximo de zero.
A existncia dos gradientes de concentrao nos casos dos ies Na
+
e K
+
, em grande parte, uma
consequncia da ao da ATPase do Na
+
/K
+
que catalisa o transporte de 2 ies K
+
do exterior para o
interior e de 3 ies Na
+
do interior para o exterior. Dado que o processo de entrada de Na
+

exergnico (ver Captulo 1.1; penltimo pargrafo) o transporte na direo contrria seria

1
Nos sistemas biolgicos, em consequncia da existncia de mecanismos homeostticos, as concentraes de
intermedirios das vias metablicas mantm-se em torno de valores estacionrios pelo que os QR tm tambm valores
estacionrios. Assim, de esperar que a razo Keq/Q
R
relativa a um determinado processo tenha, num determinado
sistema biolgico, valores estacionrios.
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endergnico e portanto impossvel. No entanto, o facto de o processo ocorrer acoplado com a
hidrlise de ATP permite compreender que acontea (ver Equao 8).

Equao 8 ATP + H
2
O + 3 Na
+
(citoplasma) + 2 K
+
(extracelular)
ADP + Pi + 3 Na
+
(extracelular) + 2 K
+
(citoplasma)

Se usarmos os nmeros obtidos acima podemos mesmo calcular o G para o processo
global como sendo de -5,3 kJ por mol de ATP hidrolisado (-5,3 = -50 + 14,9 3). Para obter este
valor, o G estimado para o transporte de 1 io Na
+
contragradiente eletroqumico foi multiplicado
por 3 porque a ATPase catalisa a sada de 3 ies Na
+
por mol de ATP hidrolisado. O transporte de
K
+
foi ignorado nestes clculos porque se considerou que o transporte de K
+
foi feito em condies
prximas do equilbrio eletroqumico e que o G associado ao seu transporte nulo.
Quando uma reao qumica o componente exergnico de um processo de transporte que
endergnico diz-se que o transporte ativo primrio. o caso do transporte de Na
+
por ao da
ATPase do Na
+
/K
+
.
Os casos dos complexos I, III e IV da cadeia respiratria so exemplos do mesmo tipo.
Neste caso o processo de transporte dos protes de dentro da mitocndria para fora da mitocndria
um processo endergnico (ocorre contra gradiente eletroqumico) que s pode evoluir nesse sentido
porque est acoplado com um outro que exergnico: as reaes de oxirreduo catalisadas por
esses complexos. Os complexos I, III e IV podem ser comparados a motores eltricos de uma
bomba hidrulica em que a transferncia de eletres (neste caso entre o redutor e o oxidante
envolvidos na atividade de cada complexo) fornece a energia para que um processo mecnico (neste
caso a transferncia de protes da matriz mitocondrial para o citoplasma) possa ter lugar. A
analogia to bvia que s enzimas/transportadores que acoplam reaes qumicas (sendo este o
processo exergnico) com o movimento contragradiente de substncias atravs de membranas
(sendo este o processo endergnico) se d o nome de bombas. Quando a reao qumica envolvida
no uma reao de oxirreduo, mas a reao de hidrlise do ATP o nome bomba tambm
aplicado o caso da bomba de sdio-potssio em que a hidrlise do ATP est acoplada com o
movimento dos ies Na
+
(e K
+
) contragradiente (ver Equao 8).
Em alguns casos quer o componente exergnico, quer o endergnico so processos de
transporte: o caso da atividade da SGLT1 (da expresso inglesa Sodium dependent Glucose
Transporter 1) que catalisa o transporte de glicose do lmen do intestino (e do nefrnio) para os
entercitos (e clulas tubulares renais) acoplado com o transporte de Na
+
no mesmo sentido. O
movimento do Na
+
exergnico e a absoro (e a reabsoro, no caso do rim) de glicose pode
ocorrer contra o gradiente da glicose. Quando o transporte de uma qualquer substncia (neste caso a
glicose) ocorre contra gradiente diz-se que existe transporte ativo; neste caso, porque o gradiente
eletroqumico do Na
+
(o componente exergnico) foi criado por uma protena (ATPase do Na
+
/K
+
)
que desenvolve transporte ativo primrio, o transporte da glicose diz-se ativo secundrio.
No caso da atividade da sntase do ATP mitocondrial um processo reativo endergnico
(ADP + Pi ATP + H
2
O; a mesma reao descrita pela Equao 6, mas em sentido inverso) est
acoplado com um processo de transporte exergnico, o transporte de protes do espao
extramitocondrial para a matriz da mitocndria a favor do gradiente eletroqumico. O acoplamento
possvel porque a sntase do ATP funciona de forma semelhante a um dnamo em que um
movimento mecnico (neste caso o movimento dos protes que induzem alteraes cclicas na
conformao das subunidades da protena) fornece a energia necessria para que o processo
endergnico de sntese de ATP tenha lugar. A equao que descreve a atividade da sntase do ATP
(os dois componentes) a Equao 9.

Equao 9 ADP + Pi + 3? protes (citoplasma)
ATP + H
2
O + 3? protes (matriz mitocondrial)

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O antnimo de transporte ativo transporte passivo (outra palavra que se costuma usar
com um significado idntico difuso) mas, quando esto em causa substncias com carga
eltrica, a sua definio no absolutamente consensual. A maioria das vezes quando se diz que o
transporte de um determinado io passivo quer-se dizer que ocorre a favor do gradiente
eletroqumico; ou seja que o G correspondente ao somatrio dos Gs determinados pelas
Equaes 3 e 4 negativo. Quando, como no caso do Na
+
referido no Captulo 1.1, em ambas as
Equaes o sinal negativo no h nenhum tipo de conflito: o transporte inequivocamente
passivo. No entanto, pode dar-se o caso de o somatrio ser negativo, mas que o G correspondente
ao gradiente de concentraes (o que calculado pela Equao 3) seja positivo. Para isso basta que
o G corresponde ao gradiente eltrico (o que calculado pela Equao 4) seja negativo e que o seu
valor absoluto seja superior ao valor absoluto do G correspondente ao gradiente de concentraes.
Neste caso uma substncia move-se contra o seu gradiente qumico (do lado em que a concentrao
mais baixa para o lado em que mais elevada) porque, por exemplo, tem carga positiva e o
compartimento para onde se est a mover tem carga suficientemente negativa para contrabalanar o
efeito que seria de esperar do gradiente de concentraes. Porque a carga eltrica existente nas
membranas biolgicas uma consequncia da atividade da ATPase do Na
+
/K
+
, na opinio do autor
destas linhas, seria adequado pensar que, apesar de o movimento ocorrer a favor do gradiente
eletroqumico (o somatrio das Equaes 3 e 4 negativo), porque ocorre contra gradiente de
concentraes e o motor ltimo do processo uma reao qumica (a hidrlise do ATP) este tipo de
transporte deveria ser classificado como transporte ativo secundrio.
1.3 Distino entre G e H, entre reao exergnica e exotrmica e entre
reao endergnica e endotrmica.
de notar que as palavras exergnica e exotrmica no so sinnimas: quando numa
reao A B a entalpia de A > entalpia de B a reao ser exotrmica (libertando calor) quando
evolui no sentido AB e, ser endotrmica (consumindo calor), quando evolui no sentido BA.
No entanto, a reao s pode evoluir no sentido determinado pela razo K
eq
/Q
R
e ser sempre
exergnica.
Os termos exotrmico (H<0) e endotrmico (H>0) referem-se diferena entre as
entalpias dos reagentes e dos produtos num processo reativo. Em geral, reaes muito exotrmicas
tm valores de K
eq
muito elevadas. Embora muitas reaes evoluam no sentido em que so
exotrmicas o sinal de H no chega para prever o sentido em que uma reao vai evoluir. Se numa
reao AB a K
eq
for 10 e tivermos num tubo de ensaio 10 moles de A e 1 mole de B a reao
evoluir no sentido AB at que 9 moles de A se transformem em 9 moles de B e se atinja o
equilbrio qumico. Se a entalpia molar de A for maior que a de B e a diferena for 1 kJ mol
-1
a
reao vai libertar calor no valor de 9 kJ (reao exotrmica). Mas se tivermos partida 11 moles
de B e zero de A, a reao vai evoluir no sentido BA e o equilbrio qumico ser atingido quando
1 mole de B se transformar num mole de A. Neste caso haveria consumo de calor no valor de 1 kJ
(o frasco onde decorria arrefeceria) e a reao seria endotrmica. O sinal do valor do H (negativo
no primeiro caso e positivo no segundo), ao contrrio do sinal do valor de G, no nos indica o
sentido em que a reao tende a evoluir.
Porque as concentraes das substncias existentes nas clulas (embora estacionrias)
variam no tempo pode acontecer que o valor do Q
R
de uma determinada reao possa situar-se, num
determinado momento, abaixo da K
eq
e, noutro momento, possa situar-se acima. Neste caso a reao
evoluir em sentidos opostos nesses dois momentos diferentes; porque evolui sempre no sentido em
que K
eq
>Q
R
a reao ser sempre exergnica. Se o valor das entalpias dos reagentes e dos produtos
no forem iguais (como acontece quase sempre) o valor de H ser positivo num dos casos (reao
endotrmica) e negativo no outro (reao exotrmica).
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Embora seja comum o uso do termo energia quando nos referimos energia livre de
Gibbs e o seu valor seja expresso em unidades de energia (J ou calorias) j foi proposto que, neste
contexto, se abandonasse o termo energia e se passasse a dizer funo de Gibbs. A ideia de que a
energia total do universo se conserva (primeiro princpio da termodinmica) no se aplica
energia de Gibbs. Na reao AB e na reao BA quando as reaes evoluem no sentido do
equilbrio a variao da energia de Gibbs negativa e h diminuio da energia de Gibbs. No
caso do H o facto de ser negativo ou positivo quer dizer que se liberta ou se consome calor,
respetivamente; neste caso a energia no se perde apenas ocorre troca de energia entre o sistema e o
meio exterior. De notar que o sistema AB analisado acima era um sistema in vitro e que a reao
acabaria por parar (atingir o equilbrio qumico) apenas evoluindo num determinado sentido
enquanto o G fosse diferente de zero. Ao atingir o equilbrio (10 moles de B e 1 mole de A) o G
seria zero. Nos seres vivos, com muito poucas excees, as reaes nunca atingem verdadeiramente
o equilbrio qumico e, no sentido em que esto a evoluir, o G , obviamente, negativo. Uma das
excees so as reaes cido base que sero objeto de anlise sumria frente neste texto.
O conceito de energia livre de Gibbs est associado ao 2 princpio da termodinmica, o
princpio que permite prever o sentido em que uma transformao tende a evoluir. Quando o G de
uma transformao tem sinal negativo significa que a entropia do universo tende a aumentar quando
essa transformao ocorre. De acordo com 2 princpio da termodinmica esta a condio para se
poder afirmar que ela tender a evoluir no sentido em que foi formulada.
1.4 Conceitos de variao de energia de Gibbs padro. Conceitos de G, K
eq
e
Q
R
usados em Bioqumica.
O valor de G (variao da energia livre de Gibbs padro) est intimamente relacionado
com o da K
eq
(Equao 10) e , apenas, uma outra forma de expressar este valor, no dando, por si
s, qualquer indicao acerca do carter endergnico ou exergnico do processo em sistemas
biolgicos.

Equao 10 G = -RT ln K
eq


, por isso, errado dizer que um determinado processo reativo endergnico apenas porque
o valor de G positivo: G positivo apenas significa que a K
eq
<1. O valor de G s coincide
com o do G quando o valor do Q
R
1 (ou seja, quando as condies so padro: quer os produtos
quer os reagentes se encontram em concentraes unitrias; 1M se so solutos slidos e 1 atm se
so gazes) e s por improvvel coincidncia que as condies definidas como padro coincidiro
com as condies da clula ou as de um qualquer sistema reativo real.
Na esmagadora maioria das reaes que ocorrem em meio aquoso, quando um dos
reagentes ou um dos produtos a gua a sua concentrao no varia ao longo do processo. Se
expressarmos a hidrlise dum composto AB usando a Equao 11 e decidirmos escrever a equao
que traduz a K
eq
podemos, eventualmente, ser tentados a escrever a Equao 12.

Equao 11 AB + H
2
O A + B

Equao 12 K
cq
1 =
|A]
(eq)
|B]
(cq)
|AB]
(eq)
|H
2
O]
(cq)


Nesta equao todos os termos se referem s concentraes quando o equilbrio qumico foi
atingido mas, no caso da gua, a questo irrelevante porque a concentrao de gua invariante.
Se multiplicarmos ambos os termos da equao por [H
2
O] obtermos K
eq
1 [H
2
O] = [A]
(eq)
[B]
(eq)
/
[AB]
(eq)
. De facto, em meio aquoso, quando a gua um dos reagentes ou um dos produtos, a
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equao que expressa a K
eq
no inclui a gua e o valor da sua concentrao (55,5 M) est includo
no valor da K
eq
. (Um exemplo bem conhecido deste tipo de constantes de equilbrio o do produto
inico da gua. Neste caso Kw = [H
+
] [OH
-
] mas a reao a que diz respeito a de protlise da
gua: H
2
O H
+
+ OH
-
.) Assim, no caso da reao de hidrlise de AB a K
eq
, de facto, a que pode
ser obtida dividindo a concentrao dos produtos pelos reagentes no estado de equilbrio com
excluso da gua (ver Equao 13).

Equao 13 K
cq
=
|A]
(eq)
|B]
(cq)
|AB]
(eq)


Nos sistemas reativos que interessam aos bioqumicos o pH tambm fixo porque os meios
reativos (quer in vitro, quer in vivo) so tamponados. Admitamos que um cido AH se dissocia de
acordo com a equao: AH A
-
+ H
+
. A sua constante de acidez expressa pela Equao 14.

Equao 14 K
a
=
|A
-
]
(eq)
|H
+
]
(cq)
|AH]
(eq)


Se, como admitimos, o sistema est tamponado o valor de [H
+
] invariante. Se, por
exemplo, o pH for 7, o valor de [H
+
] 10
-7
M e, nestas condies, podemos definir uma constante
K
a
que resulta da diviso de ambos os termos da Equao 14 por [H
+
]: ver Equao 15. Para um
determinado pH fixo a razo entre as concentraes das formas dissociada e no dissociada de um
cido constante e K
a
.

Equao 15 K
a
i
=
K
a
|B
+
]
=
|A
-
]
|AH]


Na Equao 15, para simplificar, deixamos de escrever que as concentraes so de
equilbrio, mas, de facto, so: na escala de tempo da maioria das reaes, incluindo as reaes
enzmicas, sensato admitir que as reaes de protlise (ou a reao inversa, a ligao de protes)
atingem o equilbrio instantaneamente.
Muitas substncias orgnicas existem, em soluo, como misturas das suas formas
dissociada e no dissociada sendo a razo determinada pelo pH do meio e pelo K
a
da forma cida (a
forma no dissociada), ou seja, pelo K
a
.
Consideremos um processo reativo que ocorre a pH constante e definido que pode ser
descrito como ocorrendo em duas etapas discretas. Na primeira etapa duas substncias aprtidas (A
e B) reagem formando o cido CH (ver Equao 16) e na segunda etapa CH sofre protlise
dissociando-se em C
-
+ H
+
(ver Equao 17).

Equao 16 A + B CH
Equao 17 CH C
-
+ H
+


A constante de equilbrio relativamente formao de CH a partir de A e B a K
eq
expressa
pela Equao 18. Por sua vez protlise de CH est associada uma constante K
a
de tipo semelhante
expressa acima pela Equao 15; neste caso concreto ser a Equao 19. A constante de equilbrio
corresponde ao processo reativo completo ser o que se obtm multiplicando a Equao 18 pela
Equao 19, ou seja, a Equao 20.

Equao 18 K
cq
=
|CB]
|A]|B]


Equao 19 K
a
i
=
jC
-
[
|CH]

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Equao 20 K
cq
K
a
i
=
jC
-
[
|A]|B]


Se o valor do pH do meio for muito baixo (ou seja, muito mais baixo que o pK
a
do cido
CH) poder-se- ignorar a reao de protlise do CH e pensar que a Equao 18 expressa de forma
adequada a constante de equilbrio corresponde ao processo. Por outro lado, se admitirmos que o
pH muito mais alto que o pK
a
do cido CH, podemos pensar que a dissociao de CH completa
e que a Equao 20 a que melhor exprime o equilbrio atingido.
Entre esses dois extremos de pH existe uma situao em que quer a Equao 18, quer a
Equao 20 retratam uma parte da realidade. Neste caso de considerar que a soma da Equao 18
e da Equao 20 exprime a razo entre a soma das concentraes de equilbrio dos produtos CH e
C
-
relativamente ao produto das concentraes dos reagentes A e B no estado de equilbrio. A soma
de duas constantes e tambm uma constante a que podemos chamar K
eq
.

Equao 21 K
cq
i
= K
cq
+K
cq
K
a
i
=
|CB]+jC
-
[
|A]|B]


A maioria das vezes quando, em Bioqumica, se escreve uma equao que tambm envolve
processos de dissociao protnica a equao no est acertada relativamente aos protes e s
cargas porque os componentes ionizveis so misturas das formas cida e dissociada. Se, por
exemplo, se escrever que, na gliclise anaerbia, uma mole de glicose (C
6
H
12
O
6
) se desdobra em
duas de lactato (ver Equao 22) est-se a querer dizer que o produto final uma mistura das
formas no dissociada (cido lctico; C
3
H
6
O
3
) e dissociada (lactato
-
; C
3
H
5
O
3
-
) e que o grau de
dissociao um assunto que, de momento, no nos interessa trazer para a discusso.

Equao 22 glicose 2 lactato

Esta forma de escrever equaes (ignorando a carga do lactato e a formao de protes)
simplifica a notao e a apreciao da constante de equilbrio aparente (K
eq
) para o processo de
formao do lactato (a mistura das formas dissociada e no dissociada), mas tem a desvantagem de
mascarar o processo de formao de protes que, de facto, tambm acontece durante o processo.
A converso de glicose em cido lctico um processo catalisado por enzimas que
regulado e nunca est em equilbrio. No entanto, o valor da K
eq
associado ao processo descrito pela
Equao 22 (cerca de 10
19
M) permite prever que tende a evoluir no sentido da formao do lactato.
O estudo da formao dos protes pode ser apreciado em separado. O cido lctico e o io lactato
-

esto em equilbrio e o pK
a
do cido lctico (cerca de 4) permite prever que, a pH= 7 (ver nota
2
),
apenas uma em cada 1000 molculas de cido lctico se encontra na forma no dissociada. Ou seja,
quase todas as molculas de cido lctico formadas na gliclise anaerbia sofrem protlise e os
produtos desse processo so ies lactato
-
e protes. De facto, no caso em anlise, o valor da K
eq

praticamente coincide com a constante de equilbrio correspondente converso de glicose em
lactato ionizado, mas nem sempre isso acontece.
Se, por exemplo, considerarmos a reao de hidrlise da glicose-6-fosfato (ver Equao 23
que o inverso da Equao 7) a K
eq
j contm somatrios no numerador e no denominador. No
caso da glicose-6-fosfato porque o pKa da forma sem carga eltrica 6,1, a pH 7, apenas cerca de
10% das molculas esto nesta forma e os outros 90% na forma de glicose-6-fosfato
-
. No caso do

2
pK
a
de um cido = - log K
a
e o pH = - log [H
+
]. A Equao 15 permite prever a razo entre as concentraes das formas
dissociada e no dissociada de um cido AH conhecido o pH do meio e o pK
a
. Se, por exemplo, o valor do pH do meio
coincide com o do pK
a
do cido AH as concentraes das formas no dissociada (AH) e dissociada (A
-
) so iguais.
Pgina 10 de 24
Pi, na ausncia de ies Mg
2+
, predominam os ies H2PO
4
-
(cerca de 60%) e HPO
4
2-
(cerca de 40%)
mas, na presena de ies Mg
2+
, tambm existe a forma MgHPO
4
.

Equao 23 glicose-6-fosfato + H
2
O glicose + Pi

A K
eq
pode ter, em Bioqumica, significados mais complexos que o que explicamos acima
usando o exemplo da dissociao protnica. A reao de hidrlise do ATP pela ao cataltica das
ATPases (ver Equao 6) s ocorre na presena do io Mg
2+
porque so complexos ATP-Mg que
interagem com a enzima como reagentes e quer o ADP, quer o Pi tambm formam complexos com
o Mg. Quando o ATP intervm num processo reativo, as K
eq
usadas em Bioqumica so K
eq
em que
[ATP] significa a soma das concentraes das diferentes formas de ATP na mistura em equilbrio.
As formas que existem na mistura em equilbrio so, predominantemente, o MgATP
2-
, o ATP
4-
e o
HATP
3-
e a proporo de cada uma delas depende do pH do meio e da concentrao de Mg
2+
livre.
Algo de semelhante se pode dizer em relao ao ADP e ao Pi. Tal como no caso da reao de
hidrlise da glicose-6-fosfato, tambm a K
eq
para a reao de hidrlise do ATP uma razo em a
concentrao do reagente (ATP) e a de cada um dos produtos (ADP e Pi) so somatrios das
diferentes formas de cada um dos compostos em questo.
Se na Equao 10 substituirmos K
eq
por K
eq
o valor de G obtido denomina-se G e
esse valor que pode ser encontrado nos textos de Bioqumica. Da mesma forma que se pode definir
uma K
eq
tambm se pode definir um Q
R
: se, na Equao 1, K
eq
e Q
R
forem substitudos por K
eq
e
Q
R
, o valor de G obtido ser denominado de G. s vezes a indicao explicita de que se trata
de K
eq
, Q
R
, G e G omitida escrevendo-se, simplesmente, K
eq
, Q
R
, G e G e, por razes de
simplificao, o que faremos no restante texto.
1.5 Relao entre diferena de potencial redox (E) e funo de Gibbs (G).
A equao de Gibbs descreve a existncia de uma relao direta entre o simtrico do ln
(K
eq
/Q
R
) e o valor de G (ver Equao 1).
Quando a reao em anlise uma reao redox (do tipo oxi1 + red2 red1 + oxi2) a
equao de Nernst
3
(Equao 24) mostra que existe uma relao direta entre a diferena de
potencial (E do semielemento de pilha onde ocorre a reduo E do semielemento de pilha onde se
d a oxidao) e o ln da razo K
eq
/Q
R
.

Equao 24 E =
RT
nF
ln_
K
cq

R
_ _

Da Equao 1 e da Equao 24 deduz-se a Equao 25: existe uma relao direta entre o
valor de G e o simtrico do valor de E. Quando G negativo, E positivo e a reao tende a
evoluir no sentido em que foi escrita.

Equao 25 G = -nF E


3
Na equao E = [RT/(nF)] ln (Keq/QR), R e T j foram definidos (ver Captulo 1.1); n o nmero de moles de eletres
trocados na reao em anlise e F a carga de um mole de eletres (constante de Faraday = 96500 Coulomb). Esta
equao equivalente a uma outra em que se substituem o valor das constantes pelos respetivos valores, se considera a
temperatura como 298 Kelvin e se usam log em vez de ln: E = (0,059/n) log (Keq/Q). Em condies padro em que QR
= 1 fica E = [RT/(nF)] ln Keq ou E = (0,059/n) log Keq. Acrescenta-se ao E (E) ou ao E (E) quando se
quer evidenciar a ideia que consideramos o pH constante e igual a 7 (ver Captulo 1.4).
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Equaes semelhantes (em que se substitui G por G, E por E e K
eq
/Q
R
por K
eq
)
podem ser escritas quando se consideram condies padro.

Equao 26 G = -nF E; E

=
RT
nF
lnK
cq


A Equao 24 e a Equao 25 servem para evidenciar que o sinal da diferena de potencial
entre dois semielementos de pilha nos mostra em que sentido a reao tende a ocorrer e que o seu
valor nos indica se a reao est muito afastada do equilbrio qumico ou em equilbrio qumico.
Est em equilbrio qumico quando K
eq
/Q
R
=1, E=0 e G=0).
1.6 Conceitos de reao ou processo de transporte fisiologicamente reversvel e
irreversvel.
A esmagadora maioria das reaes qumicas existentes nos seres vivos so catalisadas por
enzimas, protenas que foram selecionadas ao longo da evoluo e que explicam a existncia de
determinadas reaes e a inexistncia (ou irrelevncia) de outras. Quando a atividade de uma
enzima , numa clula ou num compartimento subcelular, muito elevada a reao que ela catalisa
tende a situar-se prxima do equilbrio qumico (Q
R
K
eq
)
4
. Neste caso, a reao fisiologicamente
reversvel porque variaes fisiolgicas das concentraes dos reagentes e produtos (e, portanto, do
Q
R
) podem fazer balanar a reao entre o sentido direto (se o Q
R
diminuir e ficar menor que a K
eq
)
e o sentido inverso (se o Q
R
aumentar e ficar maior que a K
eq
). Pelo contrrio, noutros casos, a
enzima responsvel por uma determinada reao tem, na clula, uma atividade to baixa que no
permite a aproximao do Q
R
K
eq
. Nestes casos, a reao catalisada por esta enzima diz-se
fisiologicamente irreversvel. As enzimas situadas a jusante (as que removem os produtos dessa
reao) e as enzimas situadas a montante (as que fornecem os substratos para essa reao) na via
metablica tm, comparativamente, uma atividade mais elevada e mantm o Q
R
da reao
fisiologicamente irreversvel abaixo da K
eq
.
Na gliclise, com exceo de trs enzimas (as cnases da glicose, do piruvato e da frutose-
6-fosfato; ver Equaes 5, 27 e 28, respetivamente), todas as outras catalisam reaes
fisiologicamente reversveis.

Equao 27 fosfoenolpiruvato + ADP piruvato + ATP
Equao 28 frutose-6-fosfato + ATP frutose-1,6-bisfosfato + ADP

De notar que, quando se diz que uma enzima catalisa uma reao fisiologicamente
irreversvel, apenas se quer dizer que o sentido da reao catalisada por essa enzima , nas clulas
do organismo, sempre o mesmo. No caso da reao catalisada pela cnase da frutose-6-fosfato, por
exemplo, a converso lquida de frutose-1,6-bisfosfato e ADP em ATP e frutose-6-fosfato (reao
inversa indicada na Equao 28) no ocorre nunca na clula porque o G para esta reao , em
todas as condies do metabolismo, sempre positivo. Todos os valores de Q
R
fisiolgicos para a
reao expressa pela Equao 28 so inferiores K
eq
: a reao expressa pela Equao 28, nas
clulas, s exergnica no sentido em que o ATP fosforila a frutose-6-fosfato (Equao 28 no
sentido em que est escrita).

4
As reaes de associao e dissociao protnica (cido-base) tambm se encontram, nas clulas e no lquido
extracelular, num estado prximo do equilbrio qumico e a razo a mesma: a alta velocidade com que estes fenmenos
decorrem. A nica diferena relativamente s reaes enzmicas fisiologicamente reversveis que as reaes cido-base
no so catalisadas por enzimas. Na verdade tambm se pode defender a ideia que esta afirmao tem excees. O CO
2

um cido porque, no meio interno, reage com a gua para formar cido carbnico que se dissocia em io bicarbonato e
proto (H
2
CO
3
HCO
3
-
+ H
+
). A dissociao do cido carbnico no catalisada por enzimas mas o passo que a precede
(CO
2
+ H
2
O H
2
CO
3
) catalisada por uma enzima que costume designar de andrase carbnica.
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Existe uma enzima que pode converter a frutose-1,6-bisfosfato em frutose-6-fosfato, mas a
reao em causa uma hidrlise (a enzima que a catalisa chama-se fosftase da frutose-1,6-
bisfosfato; ver Equao 29) e no catalisada pela cnase da frutose-6-fosfato. O ATP e o ADP
participam do processo reativo quando o catalisador a cnase da frutose-6-fosfato, mas no quando
o catalisador a fosftase da frutose-6-fosfato.

Equao 29 frutose-1,6-bisfosfato + H
2
O frutose-6-fosfato + Pi

Tambm os processos de transporte podem ser fisiologicamente reversveis ou irreversveis.
No polo basal dos entercitos existe um transportador para a glicose (um uniporte
designado por GLUT2) que catalisa o transporte da glicose atravs da membrana e o processo d-se
sempre a favor do gradiente (transporte passivo). Durante o processo de absoro de glicose a
concentrao maior no entercito que no plasma sanguneo e o processo ocorre do entercito para
o plasma. Contudo, a condio inversa acontece fora do perodo absortivo e neste caso a glicose
difunde do plasma para o entercito.
Uma situao semelhante acontece no caso dos hepatcitos: durante o perodo absortivo o
gradiente da glicose favorece a entrada de glicose para o fgado enquanto no jejum, o hepatcito
sintetiza glicose e o gradiente favorece a sada de glicose. No caso do msculo, pelo contrrio, o
gradiente da glicose entre o plasma sanguneo e as fibras musculares favorece sempre a entrada de
glicose sendo o processo de entrada da glicose fisiologicamente irreversvel. Curiosamente, o
uniporte presente no fgado (GLUT2) e no msculo (GLUT4) so produtos de genes distintos, mas
o que determina o carter reversvel ou irreversvel do processo de transporte de glicose no a
estrutura dos transportadores mas o gradiente de concentraes da glicose: quando o gradiente se
inverte, um sistema de transporte passivo passa a operar em sentido inverso.
A atividade da bomba de Na
+
/K
+
(tambm chamada ATPase do Na
+
/K
+
) a que j fizemos
referncia (ver Equao 8) fisiologicamente irreversvel: a ao desta enzima/transportador
acoplar o processo exergnico de hidrlise do ATP com os processos endergnicos de transporte
dos ies Na
+
(e K
+
) contra gradiente.
Isso no quer, evidentemente, dizer que no existam outras enzimas que no promovam a
formao de ATP a partir de ADP e Pi: a atividade da sntase do ATP a que tambm j fizemos
referncia (ver Equao 9) exatamente essa. Tambm no quer dizer que os ies Na
+
no possam
passar do meio extracelular para o intracelular e que os ies K
+
no possam sair do meio intracelular
para o extracelular. Atravs de protenas da membrana denominadas canais inicos o movimento
dos ies Na
+
e K
+
ocorre a favor do gradiente eletroqumico e exatamente isso que acontece, por
exemplo, nas clulas musculares esquelticas quando uma clula muscular estimulada pelo seu
nervo motor. Nas situaes de excitao celular a diferena de potencial da membrana varia em
consequncia da entrada e sada de ies mas o sentido em que os ies se movimentam atravs de
canais inicos sempre a favor do gradiente eletroqumico (ver Captulo 1.1).
1.7 Conceito de ligao rica em energia usado em bioqumica.
Apesar do que afirmamos no Captulo 4 (que o carter exergnico ou endergnico de um
processo depende do G e no do G) poder compreender-se que, para justificar o carter
endergnico ou exergnico de uma reao que ocorre nos seres vivos seja, s vezes, invocado o
valor muito positivo ou muito negativo do G de uma dada reao enzmica. s vezes, no
existem dados fiveis acerca das concentraes estacionrias de um ou mais dos reagentes e
produtos envolvidos no processo sendo impossvel fazer uma estimativa dos Q
R
possveis. Sem o
valor do Q
R
impossvel estimar o valor do G. Se, com base noutros dados, se sabe que, na clula,
a reao evolui no sentido AB foroso admitir que o valor da K
eq
da reao AB superior ao
do Q
R
e que a reao exergnica.
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Se o valor do G de uma reao muito negativo deve concluir-se que a K
eq
tem um valor
elevado e que esse valor elevado contribui para o carter exergnico da reao. A Equao 30 pode
deduzir-se a partir das Equao 1 e da Equao 10 e mostra que o valor do G o somatrio de G
com uma expresso que depende do Q
R
: quando o G negativo e tem um valor absoluto elevado
provvel que o G tambm tenha um valor negativo e que o processo seja exergnico no sentido
AB.

Equao 30 G G
1
RT ln2
3
4
R
5 6

Ao contrrio, do valor de G que, se desconhecermos o valor do Q
R
numa clula, no se
pode determinar, o valor do G muito fcil de determinar a partir da K
eq
da reao (ver Equao
10). Por este motivo popularizou-se a ideia de usar o valor do G como um indicador da tendncia
de uma reao evoluir em determinado sentido e da sua capacidade de, quando acoplada a outra,
determinar o sinal (negativo ou positivo) da reao global.
Como j referido (ver Captulo 2) a hidrlise do ATP , nas clulas, um processo
exergnico e algumas das protenas que ligam o ATP catalisam a sua hidrlise acoplando esta
reao com outros processos endergnicos. So exemplos j referidos os casos da ATPase do
Na
+
/K
+
(ver Equao 8), das cnases da glicose e da frutose-6-fosfato (ver Equaes 5 e 28); um
outro a reao catalisada pela carboxlase do piruvato (ver Equao 31).

Equao 31 CO
2
+ piruvato + ATP oxalacetato + ADP + Pi

O transporte contragradiente do Na
+
e do K
+
, a fosforilao da glicose e da frutose-6-fosfato
e a carboxilao do piruvato podem ocorrer porque o valor da energia livre de Gibbs (G) associada
ao processo de hidrlise do ATP suficientemente negativo (processo exergnico) para que, apesar
do valor positivo do processo acoplado (endergnico), o valor do G associado ao processo global
(somatrio dos dois G) seja tambm negativo.
O facto de muitas enzimas e transportadores de membrana acoplarem reaes em que o
componente exergnico a rotura hidroltica das ligaes fosfoanidrido do ATP (as que existem
entre os fosfatos e ou entre os fosfatos e ) levou ao uso da terminologia ligaes ricas em
energia para classificar estas ligaes. O G (de facto, o G; ver Captulo 1.4) associado
rotura hidroltica destas ligaes , respetivamente, -31 e -46 kJ/mol.
O valor do G associado rotura hidroltica de outras ligaes anidrido (como a que existe
no 1,3-bisfosfoglicerato entre o grupo carboxlico e o fosfato), de ligaes fosfamida (como a que
existe na fosfocreatina entre o grupo guanidina e o fosfato), enol-fosfato (como a que existe no
fosfoenolpiruvato entre o grupo hidroxlico no carbono 2 e o fosfato) e tioster (como a que existe
na acetil-CoA e na succinil-CoA) ainda mais negativo o que levou extenso do conceito a estas
ligaes.
O valor do G associado rotura hidroltica de ligaes glicosdicas ou ster (fosfoster
includas) situa-se, em geral, entre -10 kJ/mol e -20 kJ/mol e estas ligaes no so ricas em
energia.
O conceito revelou-se til porque, normalmente, quando uma enzima catalisa o
acoplamento de duas semirreaes em que uma a rotura de uma ligao rica em energia e a
outra a formao de uma ligao que no rica em energia a reao fisiologicamente
irreversvel ocorrendo no sentido em que se d a rotura das ligaes ricas em energia. So
exemplos as reaes catalisadas pelas cnases da glicose e frutose-6-fosfato (ver Equao 5 e
Equao 28).
Pelo contrrio, quando uma enzima catalisa uma reao que pode ser entendida como o
acoplamento de dois processos em que, num deles se rompe uma ligao rica em energia e no
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outro se forma uma ligao rica em energia o processo reativo , com muita frequncia,
fisiologicamente reversvel. So exemplos as reaes catalisadas pelas cnases do 3-fosfoglicerato
(Equao 32) e da creatina (Equao 33) e pela sinttase de succinil-CoA (Equao 34).

Equao 32 1,3-bisfosfoglicerato + ADP 3-fosfoglicerato + ATP
Equao 33 fosfocreatina + ADP creatina + ATP
Equao 34 succinato + CoA + ATP (ou GTP) succinil-CoA + ADP (ou GDP) + Pi

Uma exceo a esta ltima regra a reao catalisada pela cnase do piruvato (ver Equao
27). Apesar de a reao catalisada pela cnase do piruvato poder ser entendida como um processo
em que se rompe uma ligao rica em energia (a ligao enol-fosfato do fosfoenolpiruvato)
formando-se outra (a ligao fosfoanidrido entre os fosfatos e do ATP) a reao
fisiologicamente irreversvel no sentido em que est escrita na Equao 27: rotura da ligao enol-
fosfato e formao de uma ligao fosfoanidrido do ATP.
2 - Conceitos gerais do funcionamento das enzimas e sua nomenclatura
2.1 As enzimas aumentam a velocidade das reaes porque diminuem a energia
livre de ativao, o G relativo formao do estado de transio.
Numa reao, qualquer reao, a converso dos reagentes em produtos ocorre por passos
discretos formando-se no processo compostos instveis e impossveis de isolar a que chamamos
estados de transio. Numa reao AP haver um estado de transio A* e a reao evolui via
converso AA* e A*P.
Em grande medida a catlise enzmica assim como a especificidade das enzimas resultam
da complementaridade estrutural e de carga entre as enzimas e os estados de transio formados no
processo reativo. De facto, j foram sintetizadas enzimas artificiais produzindo anticorpos contra
substncias que so anlogos do estado de transio de processos reativos. Estas enzimas artificiais
designam-se por abzimas (o prefixo ab deriva da expresso inglesa antibody).
Porque a enzima se liga fortemente ao estado de transio (A*) favorece a formao deste
estado de transio fazendo com que a sua concentrao seja mais elevada que a que poderia existir
na sua ausncia. Se admitirmos que a velocidade da reao A*P aumenta quando aumenta a
concentrao do estado de transio (A*) concluiremos que aumentar a concentrao do estado de
transio tem como consequncia o aumento da velocidade da reao global (AP).
Esta ideia tambm pode ser expressa em termos de energia livre de Gibbs. Na ausncia de
enzima o G correspondente transformao A A* ser tanto mais elevado quanto menor for o
valor da K
eq
relativa a esta transformao. Sendo a enzima complementar ao estado de transio
(A*), a presena da enzima vai favorecer a formao deste estado de transio; ou seja, a presena
da enzima vai aumentar a K
eq
aparente relativa transformao A A* e, portanto, aumentar a
quantidade de A* em equilbrio com A. Na realidade, passa a existir um estado de transio
diferente daquele que se podia formar na ausncia de enzima e que corresponde ao complexo
enzima-estado de transio (EA*). Dizer que a K
eq
aparente da transformao A A* aumenta
equivalente a afirmar que diminui a energia livre de Gibbs padro correspondente formao do
estado de transio. A energia livre de Gibbs padro correspondente transformao AA* (r1) ou
transformao E + A EA* (r2) tambm se denomina energia livre de ativao. Porque a K
eq

da transformao r2 (a que envolve a enzima) maior que a K
eq
da transformao r1 (a que no
envolve a enzima), G2<G1. A presena da enzima diminuiu a energia livre de Gibbs padro
relativa formao do estado de transio (energia livre de ativao) e, desta forma, possibilita a
existncia de uma concentrao maior do composto estado de transio e um aumento da
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velocidade da reao global. Desta maneira se pode compreender a afirmao que diz que a ao
cataltica das enzimas uma consequncia da diminuio da energia livre de ativao.
2.2 A presena de uma enzima no afeta o sentido em que a reao que ela
catalisa vai evoluir.
As enzimas baixam a energia livre de ativao das reaes que catalisam mas no tm nada
que ver com o sentido global em que a reao vai evoluir sendo, pelo menos teoricamente, capazes
de catalisar quer a reao direta (AP) quer a inversa (PA). Ao favorecerem a formao do
complexo EA* tanto aumentam o valor da K
eq
relativa transformao E+AEA* como o da K
eq

relativa transformao E+PEA*.
A maltase, por exemplo, catalisa a hidrlise da maltose (Equao 35) e a K
eq

correspondente ao processo de hidrlise 5,2 10
2
M (equivalente a G= -15,5 kJ mol
-1
).

Equao 35 maltose + H
2
O 2 glicose

Este valor da K
eq
permite prever que se adicionarmos maltase a uma soluo de glicose ser
muito difcil observar a transformao inversa da hidrlise: a reao ficar em equilbrio qumico
logo que algumas poucas molculas de glicose originem maltose. No entanto, os resultados
experimentais com enzimas cujas reaes tm K
eq
com valores mais prximos da unidade permitem
induzir que, tal como acontece no caso destas enzimas, tambm a maltase catalisa a reao inversa
reao de hidrlise da maltose.
2.3 Significado das expresses cofator, grupo prosttico e coenzima.
A expresso cofator usada para designar substncias que, no sendo reagentes nem
produtos da reao, so indispensveis atividade da enzima que catalisa a reao em anlise. O
exemplo clssico o Mg
2+
que deve estar presente no meio de ensaio sempre que se ensaiam
enzimas que usam como substrato o ATP. Esta necessidade uma consequncia do facto de a
ligao do ATP s enzimas ser mediada por ies Mg
2+
. Pode dizer-se que o substrato das enzimas
no o ATP isolado mas sim o complexo ATP-Mg
2+
. No entanto o Mg
2+
no sofre nenhuma
transformao durante a reao mantendo-se, em parte, ligado aos produtos (quer estes sejam
fosfatos orgnicos, o Pi, ou o PPi) e, em parte, na forma livre.
No entanto, no infrequente designarem-se tambm de cofatores compostos que, com
maior adequao, caberiam nas designaes de grupos prostticos ou coenzimas.
Usa-se a expresso grupo prosttico para designar os componentes de uma protena que
no so constitudas por resduos aminoacdicos mas que esto fortemente ligados (em muitos casos
por uma ligao covalente) (s) cadeia(s) aminoacdica(s). Quando queremos distinguir os
componentes de uma protena que contm um ou mais grupos prostticos chamamos apoprotena
parte da cadeia aminoacdica e ao conjunto holoprotena: no caso de uma enzima as expresses
equivalentes so apoenzima e holoenzima. Os grupos prostticos de uma enzima so
indispensveis sua atividade e tambm no se consomem quando se completa um ciclo cataltico;
por isso, no de estranhar que a palavra cofator tambm possa ser usada para os designar.
Por exemplo, o complexo desidrognase do piruvato contm 3 grupos prostticos: a
tiamina-pirofosfato (tambm chamada tiamina difosfato), o cido lipico e o FAD. Durante o
processo cataltico estes 3 grupos prostticos intervm diretamente no processo reativo. Num ciclo
cataltico a tiamina pirofosfato fica ligada (e desligada) a um grupo hidroxietilo, o cido lipico
liga-se (e desliga-se) a um acetilo e sofre reduo (e oxidao) e o FAD tambm reduzido (e
oxidado). O oxidante final uma substncia que se liga de forma dbil enzima: o NAD
+
. O
somatrio das diversas reaes parciais catalisadas pelo complexo desidrognase do piruvato
expresso pela Equao 36:
Pgina 16 de 24

Equao 36 piruvato + NAD
+
+ CoA acetil-CoA + CO
2
+ NADH

As expresses grupo prosttico e coenzima no tm exatamente o mesmo significado
mas podem confundir-se.
Coenzimas so substncias que podem estar em dois estados (ou formas) interconvertveis
durante o metabolismo celular: o par NAD
+
, NADH e o par NADP
+
, NADPH so coenzimas
porque variam entre o estado oxidado e reduzido; a coenzima A tambm uma coenzima porque
pode estar na forma livre (CoASH) ou ligada ao acetilo (acetil-CoA), ao succinilo (succinil-CoA)
ou a diversos cidos gordos (diversos acis-CoA). Em ensaios in vitro uma das formas de uma dada
coenzima ser um substrato como qualquer outro e, se estiver envolvida na atividade da enzima em
estudo, tem de ser adicionada ao meio de ensaio. No entanto, se se pensar no contexto do
metabolismo celular, percebe-se que, em analogia com as enzimas (que se transformam durante o
ciclo cataltico mas se regeneram no final do ciclo), se chamem coenzimas ao NAD
+
, ao NADH, ao
NADP
+
, ao NADPH e coenzima A. Dois exemplos: (1) o NAD
+
reduz-se a NADH durante a
converso glicose piruvato, mas o NADH formado sofre reoxidao a NAD
+
na converso
piruvato lactato (ver Equao 37) ou por ao da cadeia respiratria; (2) a CoASH converte-se
em acetil-CoA por ao da desidrognase do piruvato (ver Equao 36) mas, na primeira reao
do ciclo de Krebs, a catalisada pela sntase do citrato, a CoASH regenerada (ver Equao 38).

Equao 37 piruvato + NADH lactato + NAD
+

Equao 38 oxalacetato + acetil-CoA citrato + CoASH

s vezes a expresso coenzima tambm usada para incluir os grupos prostticos.
Percebe-se que assim seja se pensarmos que durante um ciclo cataltico os grupos prostticos
sofrem uma determinada transformao mas so regenerados no final. Durante o ciclo cataltico da
desidrognase do piruvato, o FAD reduzido a FADH2 pela forma reduzida do cido lipico (que
se oxida) mas, logo de seguida, oxidado pelo NAD
+
regenerando-se o FAD. O facto de a ligao
do NAD
+
(e do NADH), do NADP
+
(ou do NADPH) e da coenzima A s enzimas com que
interagem ser dbil (no sendo adequado pensar no complexo da enzima com estas substncias
como uma holoenzima) permite compreender que a expresso grupo prosttico no seja adequada
para designar estas substncias.
Para uma correlao com a clnica ver subcaptulo seguinte:
2.3.a O FAD o grupo prosttico da protena de transferncia de eletres e mutaes
nesta protena podem diminuir a ligao ao FAD
Uma doena congnita designada de acidemia glutrica tipo II causada por mutaes
numa das duas enzimas que, de forma sequenciada, transferem eletres desde o FAD de diversas
desidrognases at ubiquinona situada na cadeia respiratria.
Essas duas protenas designam-se de flavoprotena de transferncia de eletres (ETF) e de
oxiredtase ETF:ubiquinona e ambas contm FAD como grupo prosttico.
Nalguns casos os doentes melhoram se tomarem doses elevadas de riboflavina, o precursor
na sntese de FAD.
Num estudo recente (2009) uma equipa da Universidade Nova de Lisboa [1] participou
num estudo em que se estudou uma ETF mutada causadora da doena. Os estudos mostraram que
quando a temperatura do meio de ensaio era superior a 37C a enzima perdia afinidade para o FAD
e que esta perda era acompanhada de diminuio de atividade e alteraes conformacionais que a
tornavam mais sensvel ao hidroltica de protases. Curiosamente o aumento da temperatura
corporal (como a febre) fator precipitante das crises nestes doentes. O FAD est ligado de forma
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permanente ETF normal e diz-se, por isso, que um grupo prosttico da ETF, mas, a forma
mutada usada no estudo acima referido essa ligao desfaz-se quando a temperatura se eleva.
2.4 Os nomes das enzimas descrevem as suas atividades catalticas.
As enzimas so, na esmagadora maioria das vezes, denominadas de acordo com critrios
funcionais, ou seja, o nome que lhes atribudo est relacionado com a sua atividade cataltica. Em
geral, uma mesma enzima pode ter vrios nomes e a nomenclatura no isenta de ambiguidades; a
atribuio de um nmero EC s enzimas uma tentativa de resolver essas ambiguidades. Quando a
uma mesma atividade enzmica correspondem vrias protenas que so produtos de genes distintos
que coexistem numa mesma espcie diz-se que estas protenas so isoenzimas e so denominadas
com o mesmo nome. Foram definidas 6 classes de enzimas: oxiredtases, transfrases, hidrlases,
lases, isomrases e lgases ou sinttases. No caso das reaes mais complexas os critrios que
levaram a Comisso de Enzimas do Nomenclature Committee of the International Union of
Biochemistry and Molecular Biology a classificar uma enzima numa classe e no noutra pode ser
difcil de compreender. O texto que se segue visa apenas ajudar a compreender alguns dos critrios
usados para denominar as enzimas de maneira que os nomes usados no paream to bizarros.
2.4.a As oxi-redtases (EC 1.x.y.z) catalisam reaes redox.
5

2.4.a.1 Desidrognases e redtases
Muitas reaes enzmicas de oxi-reduo podem ser esquematizadas da seguinte maneira:

Equao 39 XH
2
+ NAD
+
(ou NADP
+
, FAD, FMN)
X + NADH (ou NADPH, FADH
2
, FMNH
2
)

Nestas reaes a enzima envolvida no processo catalisa uma reao em que o NAD
+
, o
NADP
+
, o FAD ou o FMN oxidam um substrato XH
2
. Nos casos em que o oxidante o FAD ou o
FMN, a reao pode ser interpretada como a perda de dois hidrognios pelo reagente que se oxida
(XH
2
) e a sua aceitao pelo FAD ou pelo FMN. Quando o oxidante o NAD
+
ou o NADP
+
, a
reao pode ser interpretada como a transferncia de um hidrognio e dois eletres (um io hidreto)
entre um reagente que se oxida (XH
2
) e o NAD
+
ou o NADP
+
. Nestes casos, a enzima que catalisa a
reao , frequentemente, denominada desidrognase do XH
2
. Obviamente que a mesma enzima
tambm pode catalisar a reao inversa, mas o nome adequado ser desidrognase do composto
orgnico que cede o hidreto ou os hidrognios ao NAD
+
, NADP
+
, FAD ou FMN. So exemplos as
desidrognases do lactato (Equao 37), do piruvato (Equao 40), da glicose-6-fosfato (Equao
41) e do succinato (Equao 42).

Equao 40 piruvato + NAD
+
+ CoA acetil-CoA + NADH + CO
2

Equao 41 glicose-6-fosfato + NADP
+
6-fosfogliconolactona + NADPH
Equao 42 succinato + FAD fumarato + FADH
2


A desidrognase do NADH tambm existe, mas no se refere a nenhuma das enzimas acima
referidas. De facto, lidas em sentido inverso, as reaes representadas pela Equao 37 e pela
Equao 40 podem ser interpretadas como a perda de um io hidreto pelo NADH, mas o nome
desidrognase do NADH no se aplica s enzimas que catalisam aquelas reaes. A desidrognase

5
A parte do texto relativa nomenclatura das oxi-redtases tambm aparece num outro texto sobre reaes redox, escrito
pelo mesmo autor.
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do NADH uma enzima da cadeia respiratria (tambm designada como complexo I) que catalisa a
oxidao do NADH pela coenzima Q (ubiquinona). O agente oxidante direto o FMN (um grupo
prosttico do complexo I), que se reduz a FMNH
2
e acaba por ceder os hidrognios coenzima Q.
A
Equao 43 representa a primeira parte do processo catalisado pela desidrognase do
NADH.

Equao 43 NADH + FMN NAD
+
+ FMNH
2


Com alguma frequncia as oxi-redtases em que um dos substratos o NADPH catalisam
reaes fisiologicamente irreversveis em que o NADPH funciona como agente redutor. So
reaes do tipo:

Equao 44 NADPH + Y NADP
+
+ YH
2


Nestas reaes o NADPH reduz o composto Y cedendo-lhe um io hidreto. Com muita
frequncia as enzimas que catalisam reaes deste tipo designam-se redtase do Y. So exemplos
a redtase das aldoses (Equao 45 uma das aldoses possveis a glicose que se reduz ao
polialcool correspondente), a redtase do hidroxi-metil-glutaril-CoA (Equao 46) e a redtase do
glutatio (Equao 47).

Equao 45 NADPH + glicose NADP
+
+ sorbitol
Equao 46 2 NADPH + hidroxi-metil-glutaril-CoA 2 NADP
+
+ mevalonato + CoA
Equao 47 NADPH + GS-SG (dissulfureto do glutatio) NADP
+
+ 2 GSH (glutatio)
2.4.a.2 Oxdases e oxignases
Nalgumas reaes enzmicas de oxi-reduo o oxignio molecular um dos reagentes,
funcionando como oxidante de um outro substrato (um composto orgnico). Quando o O
2
um dos
reagentes as enzimas designam-se de oxdases ou de oxignases.
Embora haja excees, o nome oxdase usado quando, como resultado da reduo do O
2
,
se forma H
2
O, perxido de hidrognio (H
2
O
2
) ou o io superxido (O
2
-
) e nenhum dos tomos de
oxignio fica incorporado no composto orgnico que se oxida. De notar que o O
2
- (-), o H
2
O
2
(-
1) e a H
2
O (-2) contm o elemento oxignio com nmeros de oxidao menores (os indicados entre
parntesis) que o oxignio molecular (zero). So exemplos de oxdases, a oxdase do citocromo c
(Equao 48), a oxdase do protoporfirinognio III (Equao 49) e a oxdase do NADPH (Equao
50).

Equao 48 2 citocromo c (Fe
2+
) + O
2
+ 2 H
+
2 citocromo c (Fe
3+
) + H
2
O
Equao 49 protoporfirinognio III + 3 O
2
protoporfirina III + 3 H
2
O
2

Equao 50 NADPH + 2 O
2
NADP
+
+ H
+
+ 2 O
2
-


O nome oxignase atribudo s enzimas em que, tal como no caso das oxdases, o
oxignio molecular o agente oxidante, mas em que pelo menos um dos tomos do oxignio fica
incorporado no substrato orgnico que se oxida.
Dentro do grupo das oxignases destaca-se um grande grupo designado de mono-
oxignases. As reaes catalisadas pelas mono-oxignases so particularmente complexas porque
existem sempre dois agentes redutores, quer dizer, h duas substncias distintas (WH
2
e VH) que
so oxidadas durante o processo cataltico. Em geral, as reaes catalisadas pelas mono-oxignases
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podem ser interpretadas pensando que um dos redutores (WH
2
) cede dois tomos de hidrognio
reduzindo um dos tomos do O
2
a H
2
O enquanto o outro (VH) aceita o outro tomo de oxignio:

Equao 51 WH
2
+ O
2
+ VH W + H
2
O + VOH

Porque as mono-oxignases oxidam simultaneamente duas substncias distintas tambm se
designam como oxignases de funo mista. Porque uma dessas substncias, o VH sofre
hidroxilao durante o processo (converte-se em VOH, hidroxilando-se), as mono-oxignases
deste tipo so, muitas vezes, designadas de hidroxlases do VH. So exemplos a hidroxlase da
fenilalanina (Equao 52) e a hidroxlase da tirosina (Equao 53). Nestes casos a substncia que
hidroxilada um aminocido e o dador de tomos de hidrognio ao oxignio, gerando gua, a
tetrahidrobiopterina.

Equao 52 fenilalanina + tetrahidrobiopterina + O
2

tirosina + dihidrobiopterina + H
2
O
Equao 53 tirosina + tetrahidrobiopterina + O
2

dihidroxifenilalanina (ou L-DOPA) + dihidrobiopterina + H
2
O

Com frequncia as hidroxlases so componentes de um sistema enzmico que, alm da
hidroxlase, inclui uma redtase, a redtase do W. Nos dois exemplos acima referidos a
tetrahidrobiopterina (WH
2
) oxidada a dihidrobiopterina (W) por ao da hidroxlase mas, para que
o ciclo cataltico possa continuar, tem de ser novamente reduzida a tetrahidrobiopterina. O
componente do sistema enzmico que catalisa a reduo da dihidrobiopterina a tetrahidrobiopterina
a redtase da dihidrobiopterina (Equao 54).

Equao 54 NADPH + dihidrobiopterina NADP
+
+ tetrahidrobiopterina

Algumas hidroxlases contm como grupo prosttico um grupo heme que se liga ao O
2
(o
agente oxidante nas mono-oxignases) durante o processo cataltico. Muitas destas hidroxlases
hemnicas designam-se por citocromos P450 e constituem um grande grupo de enzimas. Os
citocromos P450 esto envolvidos na hidroxilao de compostos que so intermedirios na sntese
de corticosteroides e na metabolizao de xenobiticos, como frmacos. Tal como as outras
hidroxlases acima referidas, os citocromos P450 fazem parte de sistemas enzmicas que incluem
uma redtase, a redtase do citocromo P450 em que o agente redutor o NADPH. Neste caso, no
entanto, no existe um intermedirio exterior enzima que aceita dos hidrognios do NADPH. A
redtase do citocromo P450 intervm no processo cataltico no decurso do ciclo cataltico em que o
substrato que vai ser hidroxilado est ligado ao citocromo P450. Tal como j acontecia nos casos
dos sistemas enzmicos que incluam as hidroxlases da fenilalanina ou da tirosina, a atividade dos
sistemas enzmicos que incluem o citocromo P450 pode ser esquematizada como se segue:

Equao 55 NADPH + O
2
+ VH NADP
+
+ H
2
O + VOH

De notar que a Equao 55 a que resulta da soma da Equao 51 com a equao
correspondente reduo de W pelo NADPH. O composto VH o composto que sofre hidroxilao
e pode ser um xenobitico, por exemplo.
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2.4.a.3 Peroxdases
As enzimas que catalisam a reduo do oxignio de perxidos (cujo nmero de oxidao
passa de -1 a -2) designam-se de peroxdases. So exemplos a peroxdase do glutatio (Equao 56)
e a mieloperoxdase (Equao 57).

Equao 56 2 GSH + H
2
O
2
GSSG + 2 H
2
O
Equao 57 Cl
-
+ H
2
O
2
ClO
-
(hipoclorito) + H
2
O

No caso da peroxdase do glutatio, o agente redutor o glutatio: o nmero de oxidao do
S do grupo tiol do glutatio reduzido (GSH) -2 aumentando para -1 no dissulfureto de glutatio
(oxidado; GSSG). A reao tambm pode ser interpretada como a aceitao pelo oxidante (o
perxido de hidrognio) de tomos de hidrognio cedidos pelo glutatio (que sofre oxidao).
No caso da mieloperoxdase, o agente redutor o io Cl
-
(nmero de oxidao do cloro = -
1) que se oxida a hipoclorito (nmero de oxidao do cloro = +1). A reao tambm pode ser
interpretada como a transferncia de um tomo de oxignio entre o oxidante (H
2
O
2
) e o redutor (Cl
-
).
2.4.a.4 Reaes enzmicas de dismutao
Designam-se como reaes de dismutao reaes de oxi-reduo em que uma mesma
substncia funciona, simultaneamente, como oxidante e como redutor. So exemplos as reaes
catalisadas pela dismtase do superxido (Equao 58) e pela catlase (Equao 59).

Equao 58 2 O
2
-
+ 2 H
+
O
2
+ H
2
O
2

Equao 59 2 H
2
O
2
O
2
+ 2 H
2
O

De notar que na reao expressa pela Equao 58, uma das molculas de superxido
(nmero de oxidao do oxignio = - ) se oxida a O
2
enquanto a outra se reduz a H
2
O
2
(nmero de
oxidao do oxignio = -1). De forma semelhante, na reao expressa pela Equao 59, enquanto
uma das molculas de H
2
O
2
se oxida a O
2
, a outra reduz-se a gua.
2.4.b As transfrases (EC 2.x.y.z) catalisam reaes de transferncia de grupos qumicos
ou resduos entre os substratos.
Nas reaes catalisadas pelas transfrases um substrato dador cede um grupo qumico ou
um resduo T a um outro substrato (o substrato aceitador) que o aceita:

Equao 60 XT + Y X + YT

As cnases so a subclasse das fosfotransfrases que catalisam reaes do tipo:

Equao 61 ATP + Y ADP + Y-P

A ao cataltica de uma cnase pode ser descrita como a transferncia do grupo fosfato (P)
terminal do ATP (ou doutro nucleosdeo trifosfato) para um substrato Y que o aceita.
Evidentemente que a reao inversa a esta (a transferncia de um grupo fosfato de um composto Y-
P para o ADP) tambm ser catalisada pela mesma cnase. Independentemente do sentido em que a
reao evolui na clula uma cnase deste tipo denominar-se-ia cnase do Y (o aceitador do fosfato
do ATP). So exemplos de cnases a cnase da glicose (Equao 5), a cnase da frutose-6-fosfato
(Equao 28) e a cnase do piruvato (Equao 27).
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As fosforlases e as pirofosforlases so transfrases em que o substrato aceitador ,
respetivamente, o fosfato inorgnico (Pi) e o pirosfosfato inorgnico (PPi):

Equao 62 XT + Pi X + T-P
Equao 63 YT + PPi Y + T-P-P

No primeiro caso (Equao 62) a enzima denominar-se-ia fosforlase do XT e no segundo
pirofosforlase do YT (Equao 63). Um exemplo de uma fosforlase a fosforlase do glicognio
(Equao 64).

Equao 64 glicognio (n) + Pi glicognio (n-1) + glicose-1-fosfato

A reao catalisada pela fosforlase do glicognio fisiologicamente irreversvel no sentido
indicado pela Equao 64 e pode ser descrita como a transferncia de um resduo de glicose do
glicognio para o Pi.
Um exemplo de pirofosforlase a pirofosforlase do UDP-glicose (Equao 65).

Equao 65 glicose-1-fosfato + UTP UDP-glicose + PPi

Nas clulas, a reao catalisada pela pirofosforlase do UDP-glicose tambm irreversvel
(fisiologicamente irreversvel) no sentido indicado pela Equao 65. A causa dessa irreversibilidade
est relacionada com o facto de o PPi ser, nas clulas, instantaneamente hidrolisado a Pi: sem um
dos produtos a reao no pode ocorrer em sentido inverso. Para compreendermos porque se chama
pirofosforlase do UDP-glicose (uridino difosfato de glicose) enzima que catalisa a reao
expressa pela Equao 65 temos de pensar na reao inversa que pode ser entendida como a
transferncia do resduo UMP (uridino monofosfato) para o PPi; ao romper-se a ligao entre os
resduos de fosfato do UDP-glicose liberta-se glicose-1-fosfato e o resduo UMP aceite pelo PPi.
s reaes catalisadas pelas fosforlases e pelas pirofosforlases chamam-se,
respetivamente, fosforlises e pirofosfosforlises. Se atentarmos na Equao 64 notaremos que na
lise do glicognio o fosfato foi o reagente que provocou essa lise; se atentarmos na Equao 65 (lida
em sentido inverso) notaremos que, na lise do UDP-glicose, o pirofosfato foi o reagente que
provocou essa lise.
Quando uma enzima catalisa uma reao de transferncia em que o resduo transferido o
UMP (uridina monofosfato, tambm designado por uridilato ou UMP) e o substrato aceitador no
o pirofosfato a enzima em questo um iridil-transfrase (ou uma transfrase de uridilato). Um
exemplo a uridil-transfrase da galactose-1-fosfato.

Equao 66 UDP-glicose + galactose-1-fosfato glicose-1-fosfato + UDP-galactose

Para compreender que na reao expressa pela Equao 66 h uma transferncia de
uridilato h que notar que o UDP-glicose pode ser descrito como sendo constitudo por UMP ligado
por uma ligao fosfoanidrido glicose-1-fosfato. A uridil-transfrase da galactose-1-fosfato
catalisa a transferncia do resduo de AMP do substrato dador (o UDP-glicose) para o a galactose-
1-fosfato refazendo-se uma ligao do mesmo tipo. Do substrato dador sobra a glicose-1-fosfato e
quando a galactose-1-fosfato aceito o AMP forma-se UDP-galatose.

2.4.c As hidrlases (EC 3.x.y.z) catalisam reaes de hidrlise.
As hidrlases catalisam reaes de em que uma molcula de H
2
O um dos reagentes e
durante o processo ocorre ciso do outro reagente:
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Equao 67 AB + H
2
O A + B

Os ligaes qumicas que podem sofrer hidrlise so as ligaes glicosdicas (semiacetal
ligado a hidroxilo, cido, amina ou outro semiacetal + H
2
O semiacetal livre + hidroxilo livre,
cido livre, amina livre ou outro semiacetal livre), as ligaes ster ou tioster (ster ou tioster +
H
2
O cido + hidroxilo ou tiol), as ligaes amida (amida + H
2
O cido + amina ou amnio) e
as ligaes anidrido (anidrido + H
2
O cido + cido).
Exemplos de hidrlases em que h rotura de ligaes glicosdicas so a maltase (Equao
35) e a fosftase da frutose-2,6-bisfosfato (Equao 68).

Equao 68 frutose-2,6-bisfosfato + H
2
O frutose-6-fosfato + Pi

Exemplos de hidrlases em que h rotura de ligaes ster so a fosftase da frutose-1,6-
bisfosfato (Equao 29) e a hidrlase da 6-fosfoglicono-lactona (Equao 69). No caso da hidrlase
da 6-fosfoglicono-lactona a ligao ster que sofre hidrlise intramolecular (um ster
intramolecular uma lactona) e por isso, da rotura, no resultam dois compostos mas apenas um.

Equao 69 6-fosfoglicono-lactona + H
2
O 6-fosfogliconato

A glutamnase (Equao 70) e a asparagnase (Equao 71) so hidrlases que catalisam a
hidrlise de ligaes amida.

Equao 70 glutamina + H
2
O glutamato + NH
4
+

Equao 71 asparagina + H
2
O aspartato + NH
4
+


As reaes qumicas catalisadas pela ATPase do Na
+
/K
+
(Equao 8) e pela sntase do ATP
(Equao 9) tambm so hidrlises. Em ambos os casos h rotura da ligao anidrido que existe
entre os fosfatos e do ATP e o outro reagente a gua. No caso da sntase do ATP, por motivos
j explicados (ver Captulo 1.2), a reao ocorre nas clulas no sentido inverso reao de
hidrlise.
As fosftases so hidrlases em que um dos produtos o Pi. Numa reao do tipo expresso
pela Equao 72 a enzima seria uma fosftase do XP. Exemplos de fosftases j foram apontados
acima (Equao 29 e Equao 68).

Equao 72 XP + H
2
O X + Pi
2.4.d As lases (EC 4.x.y.z) catalisam reaes em que um reagente A=B que contm uma
dupla ligao deixa de a ter quando se liga a um reagente C.
Nas reaes catalisadas pelas lases um dos reagentes que contm uma dupla ligao
combina-se com um segundo reagente de tal maneira que o produto j no contm a dupla ligao:

Equao 73 A=B + C ABC

Obviamente que a reao inversa descrita acima tambm ser catalisada por uma lase.
Em geral, as lases tm nomes de uso corrente que nos dizem pouco acerca da reao que
catalisam. A enlase (Equao 74), a fumrase (Equao 75) e a aldlase (Equao 76) so lases.

Equao 74 2-fosfoglicerato fosfoenolpiruvato + H
2
O
Equao 75 fumarato + H
2
O malato
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Equao 76 frutose-1,6-bisfosfato dihidroxiacetona-fosfato + gliceraldedo-3-fosfato

O fosfoenolpiruvato, o fumarato e o gliceraldedo-3-fosfato contm duplas ligaes que no
existem nem no 2-fosfoglicerato, nem no malato nem na frutose-1,6-bisfosfato. De notar que as
reaes expressas pela Equao 74 e pela Equao 75 no so reaes de hidrlise. Quando a H
2
O
reage com o fosfoenolpiruvato ou com o fumarato desaparecem ligaes duplas mas no se rompem
ligaes glicosdicas, ster, amida ou anidrido. Enzimas com atividades semelhantes s catalisadas
pela enlase ou pela fumrase so s vezes conhecidas como hidrtases: o caso da hidrtase do 2-
enoil-CoA (Equao 77).

Equao 77 2-enoil-CoA + H
2
O 3-hidroxi-acil-CoA
2.4.e As isomrases (EC 5.x.y.z) catalisam reaes em que um ismero se converte
noutro.
As isomrases catalisam reaes de isomerizao (AB) interconvertendo ismeros. So
exemplos de reaes catalisadas por isomrases as expressas pela Equao 78 (isomrase das
hexoses-fosfato), Equao 79 (epimrase das pentoses-5-fosfato) e Equao 80 (mtase do
fosfoglicerato).

Equao 78 glicose-6-fosfato frutose-6-fosfato
Equao 79 ribulose-5-fosfato xilulose-5-fosfato
Equao 80 3-fosfoglicerato 2-fosfoglicerato

Quando os ismeros que se interconvertem so epmeros, a isomrase em questo ser uma
epimrase. Quando apenas diferem na posio de um grupo fosfato a isomrase que catalisa a
reao denomina-se mtase.
2.4.f As lgases (ou sinttases; EC 6,x,y,z) catalisam reaes que podem ser lidas como o
somatrio de duas reaes sendo uma de hidrlise do ATP e outra de combinao
de duas substncias.
As lgases (ou sinttases) catalisam reaes dos tipos esquematizados pelas :

Equao 81 ATP (ou GTP) + A + B ADP (ou GDP) + Pi + AB
Equao 82 ATP (ou GTP) + A + B AMP (ou GMP) + PPi + AB

Nos casos dos exemplos as sinttases que catalisassem estas reaes poderiam denominar-
se, em ambos os casos, sinttase do AB. So exemplos de sinttases a sinttase de acil-CoA
(Equao 83), a sinttase do succinil-CoA (Equao 34) e a carboxlase do piruvato (Equao 31).

Equao 83 cido gordo + CoA + ATP acil-CoA + AMP + PPi

As sinttases so as enzimas em que mais facilmente se percebe que a reao que catalisam
pode ser entendida como o somatrio de uma reao de hidrlise (exergnica) acoplada a uma
reao inversa a uma outra reao de hidrlise (endergnica). Nas mitocndrias, a reao catalisada
pela sinttase do succinil-CoA (ver Equao 34) evolui habitualmente no sentido da formao de
succinato, CoA e GTP (ou ATP): geralmente, no ciclo de Krebs, a reao de hidrlise do succinil-
CoA a componente exergnica de um processo global em que a formao de ATP (ou GTP) a
partir de ADP (ou GDP) + Pi a componente endergnica.
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2.4.g Por tradio algumas enzimas chamam-se vulgarmente sntases.
A palavra sntase no faz parte do lxico da classificao das enzimas, mas est
popularmente associada a algumas enzimas. Em todas as reaes se sintetizam compostos e no
ser de estranhar que um investigador que tenta descobrir a enzima que sintetiza o composto A,
acabe por chamar sntase do A enzima que descobriu e que catalisa a sntese de A.
A enzima que, nos seres vivos, catalisa a sntese do glicognio (Equao 84) chama-se
sntase do glicognio e facilmente se compreende que esteja classificada como uma transfrase: a
sntase do glicognio catalisa a transferncia de um resduo de glicose do UDP-glicose para uma
molcula de glicognio que fica com mais um resduo de glicose.

Equao 84 glicognio (n) + UDP-glicose glicognio (n+1) + UDP
A sntase do citrato catalisa uma reao mais complexa (Equao 85) e fcil de
compreender que a sua classificao na classe das lases no tenha qualquer relevncia no nome que
vulgarmente lhe atribudo.

Equao 85 acetil-CoA + oxalacetato + H
2
O citrato + CoA


Este texto foi, na sua 1 verso, escrito em novembro de 2005 por Rui Fontes que agradece
todas as crticas que queiram fazer-lhe. Foi revisto nos anos de 2007, 2008, 2009, 2010, 2011 e
2012 (sempre entre setembro e dezembro).

3 Bibliografia

Como bibliografia geral foram consultados diversos livros de texto de Bioqumica e de Qumica
assim como:

Cvitas, T. (2007) The Gibbs function of a chemical reaction, Croatica Chemica Acta. 80, 605-612.
Banks, B. E. & Vernon, C. A. (1970) Reassessment of the role of ATP in vivo, J Theor Biol. 29, 301-26.
Interunion commition on biothermodinamics. (1976) Recommendations for measurement and presentation of biochemical
equilibrium data. Prepared by the Interunion Commission on Biothermodynamics, J Biol Chem. 251, 6879-85.
Wilkie, D. (1970) Thermodynamics and biology, Chem Br. 6, 472-6.
Crabtree, B. & Taylor, D. (1979) Thermodynamics and methabolism in Biochemical Thermodynamics (James, N., ed) pp.
333-78, Elsevier, Amsterdam.

Referncias especficas

1. Henriques, B. J., Rodrigues, J. V., Olsen, R. K., Bross, P. & Gomes, C. M. (2009) Role of flavinylation in a mild
variant of multiple acyl-CoA dehydrogenation deficiency: a molecular rationale for the effects of riboflavin
supplementation, J Biol Chem. 284, 4222-9.