Principais motivos de reprovao da metodologia analtica pela Anvisa

Workshop - Validao de metodologia analtica Gerncia Geral de Medicamentos

Braslia, 03 de dezembro de 2013

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A validao da metodologia deve ser capaz de garantir, por meio de estudos experimentais, que o mtodo analtico utilizado atenda s exigncias das aplicaes analticas, assegurando a confiabilidade dos resultados. Para tanto, deve-se se apresentar como especfico, linear, preciso, exato, robusto e adequados anlise.

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Motivos de indeferimentos relacionados a validao da metodologia analtica:

Ausncia no dossi de registro e ps-registro relacionados a validao de metodologia analtica; dos documentos

No realizao de validao/validao parcial pela importadora do produto; Uso de padro de trabalho/secundrio nas validaes. A empresa utiliza o fornecedor da matria prima (frmaco) como padro, ao invs de padro primrio ou quando pertinente, o padro caracterizado; Emprego de metodologias diferentes na validao e na validao parcial; Falta de informaes sobre os critrios de aceitao do mtodo analtico.

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Motivos de indeferimentos relacionados a validao da metodologia analtica:

Exemplo: A normativa sanitria estabelece que devem ser utilizadas substncias de referncia oficializadas pela Farmacopeia Brasileira ou, na ausncia destas, por outros cdigos autorizados pela legislao vigente. No caso da inexistncia dessas substncias, ser admitido o uso de padres de trabalho, desde que sejam devidamente caracterizados. Entretanto, consta nos documentos enviados que o padro utilizado na validao do mtodo analtico foi de um lote da matria prima, ou seja, no foi realizado com uma substncia de referncia. Alm disso, nos documentos no existe justificativa tcnica e cientfica para tal situao e tambm no existe comprovao da caracterizao do padro utilizado.

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Motivos de indeferimentos relacionados a validao da metodologia analtica:

Exemplo: Durante o perodo de anlise foi solicitado que a empresa enviasse validao do mtodo analtico de teor do frmaco no produto acabado utilizando substncias de referncia e a avaliao da especificidade/seletividade com amostras armazenadas sob condies de estresse, com avaliao da pureza do pico. No cumprimento de exigncia, foi apresentada validao realizada em 2007, a mesma j enviada anteriormente no processo, juntamente com uma validao parcial realizada pela empresa contratada pela detentora do registro, nas quais utilizado como padro de referncia um padro secundrio fabricado pela empresa fabricante do ativo utilizado pela empresa na produo do medicamento. Alm disso, no foi realizada a avaliao das amostras sob condio de estresse, sem qualquer justificativa para o no cumprimento da exigncia.

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Motivos de indeferimentos relacionados a validao da metodologia analtica:

Exemplo: Com relao a avaliao de teor do frmaco no produto acabado foi enviada validao de nova metodologia realizada por laboratrio contratado e a validao parcial pela empresa fabricante. Entretanto, essa diferente da metodologia utilizada pela empresa, conforme destacado no quadro abaixo.
Parmetros cromatogrficos Especificao da coluna Metodologia validada no cumprimento de exigncia

Metodologia adotada pela empresa

C18 Hyputiry 150 mm x 4,5 mm, 5 m 85:15 (soluo aquosa de fosfato de sdio monobsico:metanol) 2,0 ml/min 25 C - forno

C18 Eclipse XDB 250 mm x 4,6 mm, 5 m Gradiente - Fase A: tampo pH 3,3 Fase B: etanol absoluto 1,0 ml/min 25 C - coluna e 5C - amostras

Fase mvel Fluxo Temperatura Comprimento de onda

280 nm

230 nm

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Problemas relativos aos parmetros de especificidade/ seletividade:

No avaliao da pureza do pico do ativo ao se estressar a amostra; No avaliao da interferncia de impurezas ou dos produtos de degradao; O estudo de degradao forada empregado no suficiente para garantir que o mtodo seja especfico/seletivo para o frmaco frente a seus produtos de degradao;

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ANVISA GGMED Problemas relativos aos parmetros especificidade/ seletividade:
Seletividade/especificidade realizada apenas com placebo, sem o estresse das amostras; Nos estudos de seletividade/especificidade as amostras no so submetidas a condies de estresse, ou seja, no avaliado pelo menos uma % de degradao mnima para considerar o estudo de estresse vlido. No so apresentados dados de literatura que comprovem que a molcula e a formulao sejam estveis e que no sofram degradao mesmo em condies drsticas de estresse.

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ANVISA GGMED Problemas relativos aos parmetros especificidade/ seletividade:
Exemplo: No relatrio de validao constava que o mtodo analtico determina que o comprimento de onda para anlise do teor seja de 216 nm. Constatamos nos documentos que, para fins de avaliao da especificidade/seletividade, as amostras submetidas a condies de estresse foram avaliadas com Detector DAD programado para absorver no comprimento de onda de 270 nm, ou seja, com comprimento de onda diferente do determinado no mtodo analtico. O critrio estabelecido para a aprovao do parmetro de especificidade/seletividade o ndice de pureza maior que 0,98. Entretanto, no h no relatrio de validao nenhum resultado que comprove a avaliao do ndice de pureza de pico.

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Exemplo: Durante a anlise dos documentos constatou-se que o pico cromatogrfico do ativo apresentava-se deformado na anlise da amostra do estudo de estabilidade

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Exemplo continuao:
O pico do ativo encontra-se disforme na anlise do padro controle, do padro sob estresse, da amostra. No relatrio no foi apresentado nenhuma justifica tcnica para o ocorrido durante as anlises. Possivelmente, a situao expressa nos resultados est relacionada a problema no desenvolvimento e otimizao do mtodo analtico e que o mesmo necessita ser resolvido antes da aplicao do mtodo na rotina de anlise. Vale ressaltar que a garantia da adequabilidade do mtodo desenvolvido para a avaliao do medicamento um procedimento anterior a validao da metodologia.

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Exemplo: O item 2.1.2 da resoluo RE n. 899/2003, determina que para avaliao dos parmetros especificidade e seletividade do mtodo analtico de teor devem ser includas comparaes de amostras armazenadas sob condies de estresse e amostras no contaminadas. Entretanto, observamos no dossi que no foi realizado o determinado na legislao vigente para a validao da metodologia analtica de teor utilizada nos estudos de estabilidade. O procedimento adotado para avaliao do parmetro seletividade/especificidade da metodologia analtica de teor utilizada nos estudos de estabilidade foi: (...) selectivity of the method was demonstrated by injecting a selectivity solution containing the diluent and placebo (...)

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Exemplo continuao:
Alm disso, em mtodos cromatogrficos, devem ser tomadas as precaues necessrias para garantir a pureza dos picos cromatogrficos. De acordo com os resultados, a especificidade foi avaliada apenas frente ao placebo nas concentraes de 10%, 25% e 50%. A empresa realizou apenas a especificidade quantitativa e faltou a especificidade qualitativa, porm no entendemos o motivo do placebo estar nas concentraes de 10%, 25% e 50%. Deveria ter sido testado frente a concentrao de placebo que est presente no produto e que representa 100% da concentrao do placebo.

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Problemas relativos aos parmetros de linearidade/ preciso e exatido:

Na avaliao do mtodo de teor e de identificao o parmetro exatido do mtodo avaliado somente com o padro do frmaco; Na avaliao do parmetro de preciso utilizada apenas o padro e o placebo. No avaliada a amostra do medicamento, em desacordo com a descrio previamente estabelecida para o mtodo; Linearidade: Faixa de linearidade inadequada, sem justificativa, sem tratamento de resduos e sem avaliao de pelo menos cinco pontos entre o intervalo estabelecido previamente pela empresa. Tal fato ocorre, principalmente, nos mtodos para avaliao de impurezas e dissoluo;

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Problemas relativos aos parmetros de linearidade/ preciso e exatido:

No parmetro exatido, nvel de recuperao inadequado para os testes que a metodologia analtica se prope. Ausncia de comprovao da realizao da preciso intermediria e falta de informao referente ao que foi variado. Em alguns dossis considerado, inadequadamente, como sinnimos a reprodutibilidade e a preciso intermediria; Preciso intermediria realizada apenas com um analista;

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Problemas relativos ao parmetro robustez:

No so apresentados dados que comprovem que o mtodo analtico utilizado tem a capacidade de no ser afetado por uma pequena e deliberada modificao em seus parmetros e nem os critrios de aceitao da variao. A robustez de um mtodo de teor, por exemplo, tem que ser capaz de demonstrar que modificaes nas condies de anlise cromatografia (por exemplo: fluxo, pH, proporo de fase mvel,...) no iro afetar a quantificao do princpio ativo. Isso pode representar uma variao nos parmetros cromatogrficos (Tailing, Resoluo, Eficincia, Fator de Capacidade).

Validao de mtodos analticos uma poltica da qualidade e um trabalho em equipe.

Obrigada!
medicamento.assessoria@anvisa.gov.br