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Mutao
Alteraes (hereditrias) na sequncia de nucleotdeos de um gene

Recombinao gnica
Elementos genticos contidos em dois genomas

diferentes so reunidos em uma mesma unidade Provoca alteraes mais significativas

Gentipo
Potencial total herdado
Procariotos: cromossomo + qualquer DNA presente Eucariotos: cromossomo + DNA organelas

Mutaes espontneas vs mutaes induzidas

Espontneas
Erros cometidos pelas DNApol Incorporao de base trocada Escorreges em sequncias repetitivas Danos espontneos sofridos pelo DNA a partir da hidrlise, desaminao e depurinao

Fentipo
Expresso de uma poro do gentipo Pseudomonas sp. (colnias mucosas X colnias secas)

Elementos de transposio

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Agentes mutagnicos e seus mecanismos de ao

Induzidas
Agentes externos Qumicos Hidroxilamina Nitrosoguanidina xido nitroso Fsicos Radiao (raios-X, luz ultra-violeta, )

Agente mutagnico

Mecanismo de ao

Efeitos C se converte em U G se converte em X (pareamento com C por 2 H-H) A se converte em I (pareamento com C por 2 H-H) Substitui a T, mas pareia com G

cido nitroso

Desaminao oxidativa das bases

5-bromo-uracil (5-BU)

Anlogo estrutural da T

2-aminopurina (2-AP)

Anlogo estrutural da A

Substitui a A, mas pareia com C

Laranja de acridina Radiao UV

Agente intercalante entre pares de bases Formao de dmeros de Y adjacentes, principalmente de T

Leva adio ou deleo de pares de bases do DNA Afeta o processamento de duplicao de DNA

Causas de mutao espontnea

Depurinao
A ligao entre a base (guanina ou adenina) e a desoxirribose O stio fica sem a base ausncia de replicao

Leses espontneas
Se a citosina perder o grupo amino, esta se transforma numa uracila, que se pareia com a adenina, provocando uma transio CG-TA

Reparo:

sistemas

de

repa ro A uracila posteriormente C U G A T A transformada em timina por mecanismos de reparo

rem ovem os s tios apurnicos e colocam um nuc leotdeo int eiro ou inserem uma base (qualquer) no stio apurnico = mutao

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Causas de mutao induzida

Substituio de uma base (anlogos de base)
5-BU

Agentes intercalantes

Se pareia com a adenina Mutao AT GC

Br

Br Se pareia com a guanina Forma enol Citosina Tambm p odem intercalar-se em DNA fs ( que est sendo rep licado, por exemplo, formando alas e provocando delees erros na matriz de leitura)

Radiao
Formao de dmeros (em geral duas timinas) A maquinaria da replicao reconhece o dmero e coloca duas adeninas na fita complementar Se o dmero se formar entre uma citosina e uma timina, o sistema tambm coloca duas

Principais tipos de mutao

Mutaes de ponto (substituies de bases/transio transverso)
Mutao silenciosa Mutao missense conservativa/no conservativa Mutao nonsense

adeninas

Mutao frameshift (alterao da sequncia de leitura)

Insero/deleo de nucleotdeo

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Formas Ceto Forma imino

Forma imino de Adenina Guanina

Forma imino
Forma-se ento o par Citosina-Adenina

Forma enol

Forma enol
Forma imino de Adenina Guanina

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Volta ao estado normal

Provocam mutaes do tipo transio (troca de uma purina por outra ou de uma pirimidina por outra) As formas tautomricas existem em pequena quantidade,
Mutao

so raras, enquanto as formas ceto so abundantes Transverses so muito mais raras e exigem, em algum ponto da duplicao do DNA, que haja pareamentos

Parece guanina Se pareia com a citosina

purina-purina ou pirimidina-pirimidina

Mecanismos de reparo do DNA

Os sistemas de reparo podem reconhecer uma srie de distores no DNA como sinais para a sua ativao Preveno de erros ( Mutao corrigida ANTES da diviso no h mutao)
Pareamento guanina-adenina Duas purinas - transverso Guanina

Neutralizao de compostos potencialmente danosos ao DNA - Detoxicao de radicais superxido

Superxido

Radicais superxido

dismutase

Perxido de hidrognio

Catalase

gua

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Mutaes reversas
Reverses de mesmo stio Reverses de segundo stio Mutaes supressoras: restauram o fentipo selvagem 1. Mutao em outro local do gene restaurao da funo (mutao frameshift adjacente mutao inicial) 2. Mutao em outro gene restaurao a funo do gene mutado 3. Mutao em outro gene produto substituinte

Reparo do pareamento errado

Substituio complementar DNA polimerase e outras enzimas que avaliam o DNA em busca de pareamentos incorretos Depende de metilao da fita me
Em geral, depois que o DNA duplicado, as fitas so metiladas Com isso, o DNA recm replicado no metilado, permitindo que os sistemas de reparo reconheam a fita velha e a nova, reparando apenas a nova.

da

base

incorreta

pela

base

correta

Reparo direto (raro) Envolve a reverso ou simples remoo do dano Se uma base for modificada de alguma maneira desaminao, por exemplo - este mecanismo reintroduz o grupo faltante para refazer o pareamento correto Reparo por exciso Exciso de base (comum)
Desaminao da citosina leva formao de uma uracila que transformada em timina mutao!

- Pareamentos errados Exciso de nucleotdeos

- Se h quebra do nucleotdeo, ou a formao de

dmeros, um ou vrios nucleotdeos podem ser retirados e corrigidos

1. Identificao destes mal-pareamentos pela distino entre fitas novas e velhas 2. Exciso de sequncia que inclui a base danificada 3. Polimerizao de novo trecho de DNA

- Se uma uracila encontrada, retirada e substituda por uma timina

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DNA normal mutao endonuclease exonuclease Polimerase I ligase

Resistncia a antivirais
AIDS Aumento das drogas antivirais aumento da resistncia Mutaes genticas no genoma viral Presso seletiva X mutaes espontneas

Diversas consequncias biolgicas Alterao da patogenicidade viral Alterao da transmissibilidade Alterao da estabilidade gentica Circunstncias favorveis Aumento dos nveis de replicao viral Aumento da taxa de mutao intrnseca Exposio prolongada ao antiviral

HIV Mutaes no gene da TR associada resistncia aos inibidores de TR anlogos de nucleotdeos e nucleosdeos (nRTI)
Complexo de insero 69: multi-resistncia a todos nRTIs Complexo 151: multi-resistncia a todos nRTIs, exceto fenofovir

Mutaes associadas a anlogos de timidina: todos

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Mutaes no gene da protease associados resistncia aos inibidores de protease Mutaes no gene do envelope associados resistncia a inibidores de entrada Mutaes no gene da integrase, associadas resistncia a inibidores de integrase Substituies de aminocidos conferem resistncia

Surgimento da resistncia Habilidade de mudana constante Influenza Vrus

Surgimento da resistncia Habilidade de mudana constante Influenza Vrus

Mutaes devido replicao podem resultar em resistncia a 1 ou + drogas antivirais

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Acompanhamento das mutaes Coleta de amostras pelo CDC Determinao da resistncia s drogas liberadas pelo FDA Monitoramento CDC + WHO
Coletas de amostras pelo mundo inteiro Realizao de painis para testar diagnstico e resistncia Monitoramento e deteco de resistncia devido ao melhoramento das tcnicas laboratoriais e aumento dos stios domsticos e globais aumento dos laboratrios que testam a resistncia

Mutaes Influenza 2009-2010 - Panorama

H1N1 98,9% sensvel a tamiflu - 100% sensvel a zanamivir - 100% resistentes a amantadina e rinantadina

Inibidores de sialidase
Atuam na neuraminidase impedem liberao Resistncia s drogas < eficincia fraca ligao ao substrato

Mutaes neuraminidases resistentes a oseltamivir, mas sensveis a zanamivir (outro stio da protena)

Alto risco de desenvolvimento de resistncia ALERTA OMS: orientao aos mdicos quanto ao risco de emergncia de vrus resistentes ao oseltamivir > risco em pacientes severamente

Previso da droga Tratamento H1N1 Mutao de resistncia mais provvel na neuraminidase oseltamivir Previso da sensibilidade ao zanamivir

imunocomprometidos ou imunossuprimidos doena prolongada tratada por oseltamivir com evidncia de replicao viral persistente

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Pacientes exposio,

submetidos com

profilaxia contgio

pse

Sistema nico de Sade (SUS) incorporou o SNVE, definindo em seu texto legal (Lei n 8.080/90) a VIGILNCIA EPIDEMIOLGICA como um conjunto de aes que proporciona o conhecimento, a deteco ou preveno de qualquer mudana nos fatores determinantes e condicionantes de sade individual ou coletiva, com a finalidade de recomendar e adotar as medidas de preveno e controle das doenas ou agravos.

posterior

desenvolvimento de doena INVESTIGAO LABORATORIAL

Deteco de resistncia

investigao epidemiolgica

1. Determinao da disseminao da cepa resistente 2. Aumento da vigilncia comunitria

PANDEMIA POR FLUFLU-resistente

Funes da vigilncia epidemiolgica

Coleta de dados Processamento dos dados coletados Anlise e interpretao dos dados processados Recomendao das medidas de controle apropriadas Promoo das aes de controle indicadas Avaliao da eficcia e efetividade das medidas adotadas Divulgao de informaes pertinentes

Ministrio da Sade Doenas de notificao nacional Doenas consideradas de maior relevncia sanitria para o pas

Sistema de Informao de Agravos de Notificao (Sinan)

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Parmetros para incluso no sistema de agravos

Magnitude aplicvel a doenas de elevada freqncia, que
afetam grandes contingentes populacionais e se traduzem por altas taxas de incid ncia, prevalnc ia, mortalidade e a nos potenc iais de vida perdidos Potencial de disseminao representado pelo elevado poder de transmisso da doena, por meio de vetores ou out ras fontes de infeco, colocando sob risco a sade coletiva

Transcendncia expressa-se por caractersticas subsidirias que conferem relevncia especial doena ou agra vo, destacando-s e: severidade, medida por taxa s de letalidade, de hospitalizao e de seqelas; relevncia so cia l, avaliada, subjetivam ente, pelo valor imputado pela sociedade ocorrncia da doena e que se ma nif esta pela sensao d e m edo, repu lsa ou ind ignao; e relev ncia eco nmica, avaliada por prejuzo s decorrentes de rest ries com erc iais, reduo da fora de t rabalho, abs ent esmo escolar e laboral, custos assistenc iais e previdencirios, etc.

Vulnerabilidade medida pela disponibilidade concreta de instrumentos especficos de preveno e controle da doena , propic iando a atuao efetiva dos servios d e sade sobre os indivduos e coletividades Ocorrncia de epidemias, surtos e agravos inusitados sade so situaes emergenciais em que se impe a notif icao im ediata de todos os casos suspeitos, com o objetivo d e delimita r a rea de ocorrnc ia, elucidar o d iagnstico e def lagra r med idas de controle aplicveis. Meca nismos p rp rios de notificao devem ser

Compromissos internacionais relativos ao cumprimento de metas continentais ou mundiais de cont role, de eliminao ou de erradicao de doenas, previstas em acordos firmados pelo governo brasileiro com organism os internacionais. Esses do

compromissos

inclu em

obrigaes

assumidas

por fora

Regulamento Sa nitrio I nternac ional, estabelecido no mbito da Organizao Mu ndial da Sade, qu e ainda exige a notificao compulsria dos casos de clera, febre amarela e peste. E ntreta nto, este regulam ento est sendo objeto d e reviso e, possivelm ent e, os Estados-Membros da O MS passaro a notif icar eventos inusitados que possam ter repercusses internacionais

institudos com base na apresentao clnica e ep idem iolgica do evento

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Disseminao da multi-resistncia a drogas atravs da transferncia d e

Bioinformtica e modelagem computacional

Desenvolvimento de drogas por computador Mais difcil identificar do que anlogos Desenho de drogas que interagem com estruturas conhecidas e especficas ex. saquinavir: inibidor de protease (HIV)

integrons codificando MDR-1 para bomba de efluxo, por retrovrus

FIM

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