Anlisis Clnico I INTRODUCCION El uroanlisis contempla una serie de exmenes realizados en muestras de orina, las que pueden ser

recolectadas en forma de una muestra de orina miccional (aislada) o como muestras de orina con recoleccin de 24 horas. El tipo de muestra depender del anlisis que se requiera, depender tambin de la edad y condicin fisiolgica del paciente (ejemplo en un paciente postrado un anlisis en orina de 24 horas resulta muy complicado y en ocasiones el mdico opta por solicitar el examen en una muestra de orina aislada). Uno de los aspectos ms importantes en el uroanlisis es la forma correcta de la obtencin de las muestras, ya que son muestras que se contaminan fcilmente, lo que podra conducir a resultados errneos. El objeto de cualquier trabajo analtico es proporcionar resultados de anlisis con un alto nivel de exactitud reproducible y con un alto nivel de precisin, de tal manera que se puedan sacar conclusiones y tomar decisiones con base en una informacin que tenga niveles aceptables de error y ambigedad. Como se mencionar en la parte del desarrollo en la fase analtica se realizan las mediciones y observaciones en las diversas reas que cubre el laboratorio. Cada procedimiento de anlisis debe describir no slo las mediciones y observaciones implementadas en el laboratorio, sino tambin la verificacin de las caractersticas de ejecucin que pretende el autor del procedimiento o el fabricante del sistema analtico, adems, los procedimientos de control que corresponden a cada medicin y observacin deben describirse, incluyendo los aspectos de control interno y evaluacin externa de la calidad. Los procedimientos y materiales de control varan segn la especialidad, y en todos los casos, en la fase analtica deben considerarse una medicin u observacin y un procedimiento control.De esta manera, el rea de uroanlisis no est exenta de Control de Calidad. Durante siglos las caractersticas visuales de la orina fueron utilizadas por los mdicos como piedra angular del diagnstico. Con el progreso de la ciencia mdica, estudios qumicos y microscpicos permiten ahora una interpretacin mas detallada de la orina. PRCTICA N 02: CARACTERSTICAS FSICAS DE LA ORINA 1. OBJETIVOS: Reconocer la correcta obtencin de las muestras para uroanlisis. Descubrir con anticipacin las enfermedades renales y diabetes. Observar las caractersticas de un resultado de examen de uroanlisis. 2. FUNDAMENTO TEORICO:

Anlisis Clnico I La orina es el producto de desecho lquido excretado por los riones. sta se almacena en la vejiga hasta el momento de ser vaciada a travs de la uretra.

La orina esta constituida por agua, y numerosos sustancias (creatinina, cido rico, urea, fosfatos, sulfatos, magnesio, calcio sodio, potasio, cloro, etc). Estas sustancias son excretadas a diario, es decir, cada 24 horas. Tambin se puede encontrar glucosa, cuerpos cetnicos, protenas, porfirinas y bilirrubina en diferentes procesos patolgicos. En el sedimento de la orina, es decir en el residuo que se obtiene despus de centrifugar la orina se encuentran cilindros, eritrocitos, clulas epiteliales y leucocitos. UROANALISIS Los trminos uroanlisis, urianlisis, anlisis de la orina citoqumico de orina, parcial de orina describen un perfil o grupo de pruebas tamiz con capacidad para detectar enfermedad renal, del tracto urinario o sistmica. Desde el punto de vista de los procedimientos mdicos, la orina se ha descrito como una biopsia lquida, obtenida de forma indolora, y para muchos, la mejor herramienta de diagnstico no invasiva de las que dispone el mdico. 1) FASE PRE-ANALTICA EN EL EXAMEN GENERAL DE ORINA ORECOLECCIN DE UNA MUESTRA DE ORINA

Anlisis Clnico I

Para el correcto diagnstico es de gran importancia una buena muestra. Existen muestras de orina tomadas como primera matinal, en sta los elementos se encuentran en mayor concentracin. Se deben desechar las primeras gotas, tomar el volumen siguiente y descartar la parte final. En la mujer se deben separar los labios en el momento de la miccin, evitando en esta forma agregarle contaminacin vaginal. Para estudios bacteriolgicos (ejemplo, urocultivo) la orina se recoge en un frasco estril, desechando el primer chorro y guardando la porcin de la mitad para el cultivo. En los nios que no controlan esfnter se utiliza un recolector peditrico, el que se adhiere a sus genitales y donde la orina se va depositando lentamente. Este mtodo, si bien resulta til, presenta varios inconvenientes, siendo el principal la alta contaminacin de la muestra. Una muestra de orina debe analizarse lo mas rpido posible. Si esto no es posible, debe guardarse en refrigeracin hasta el momento de su procesamiento. Cuando se deja algn tiempo, se inicia la descomposicin de la muestra por la presencia de bacterias: se degrada la urea, se produce amoniaco y se incrementa el pH que desintegra los cilindros y si existe glucosuria, esta desaparece por usarse la glucosa como alimento de las bacterias. Ya que el control de calidad en la seccin de anlisis de orina (o en cualquier otra seccin del laboratorio) es una integracin de muchos factores, se describe primeramente para esta fase lo siguiente: 1. Las muestras de orina se toman siguiendo instrucciones estrictas. 2. Los recipientes, adems de estar muy limpios, deben cumplir con las siguientes condiciones:

Ser de plstico translcido y desechable y no volverse a utilizar. La tapa debe cerrar hermticamente de tal manera que el contenido no se derrame, independientemente de la posicin del recipiente.

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En todo estudio microbiolgico el recipiente debe haberse esterilizado previamente. El diseo del recipiente debe permitir que la etiqueta quede pegada an en condiciones de refrigeracin o de congelacin. Es importante pegar la etiqueta en el recipiente no en la tapa para evitar equivocaciones por cambios de tapas. 3. Cuando la muestra se tenga que estabilizar por la presencia de un componente inestable o porque el anlisis vaya a demorar, se debern aadir conservadores o estabilizadores al recipiente o a la muestra de orina directamente. O si esto no es posible, refrigerar la muestra inmediatamente. Al aadir alguna sustancia, es importante que en la etiqueta queden bien registradas la naturaleza de la sustancia y, si es peligrosa, debe advertirse claramente. 4. Antes de obtener la muestra el paciente debe recibir instrucciones escritas y orales detalladas y claras acerca del procedimiento. La muestra se toma en un rea aislada, de ser posible con excusado, y el paciente parado o sentado. Para cultivos microbiolgicos ser necesario que el paciente se lave cuidadosamente el meato urinario y los genitales con agua. La orina se recoge directamente en un recipiente estril descartando la primera orina evacuada. La orina de bebs se obtiene despus de lavar cuidadosamente el meato urinario, con una bolsa de plstico colocada sobre los genitales, y esperando la miccin espontnea. Para estudios microbiolgicos el proceso se repite 45 min. despus si no se recogi orina la primera vez. 5. Una muestra aleatoria se obtiene a cualquier hora en un periodo de 24 horas. 6. La primera orina matutina se obtiene inmediatamente despus de que el paciente se levante. 7. La orina matutina se obtiene aproximadamente 1 o 2 horas despus de evacuar la orina de la noche. 8. Una muestra programada de orina se obtiene en un intervalo especfico en un periodo de 24 horas. Las muestras programadas incluyen aquellas asociadas a cantidades "dinmicas" para las que se recoge orina en series de frascos con intervalos preestablecidos, por ejemplo, muestras de 2-3 horas que se obtienen a horas especficas del da, o en un periodo definido despus de una comida o las ms tradicionales de 12 y 24 horas. Recordar los siguientes factores al obtener muestras de orina programadas:

Obtener las muestras cuidadosamente siguiendo las instrucciones rigurosamente. Dar indicaciones al paciente acerca de cmo obtener cada muestra, y del intervalo de tiempo en que comienza y termina la recoleccin. Al principio del intervalo se evacua la orina y se descarta. Despus de esa evacuacin, obtener todas las muestras de orina siguientes incluyendo la ltima. Tener a la mano suficientes recipientes con los preservativos indicados. Refrigerar cada muestra entre 2C y 6C tan pronto como se obtenga.

Anlisis Clnico I Anotar en la solicitud cualquier muestra que se haya descartado y los volmenes totales de las alcuotas de muestra. 9. Las muestras mltiples son de utilidad en los estudios microbiolgicos, por ejemplo, se recomienda obtener la segunda mitad de la primera orina matutina durante tres das consecutivos para investigar la presencia de Micobacterium tuberculosis. 10. La orina es un buen medio de cultivo para las bacterias y, puesto que la evaluacin de infecciones urinarias se basa principalmente en la cuenta de colonias de organismos, es muy importante transportar las muestras rpidamente al laboratorio. Si esto no ocurre en las primeras tres horas despus de obtener la muestra, se debe refrigerar a 4C. Aunque la orina almacenada durante 24 horas an a baja temperatura, puede sufrir una disminucin en la cuenta bacteriana. 11. es necesario mezclar muy bien las muestras de orina cuando llegan al laboratorio, antes de tomar una porcin para anlisis. Frecuentemente la orina tiene un aspecto turbio, especialmente cuando se ha almacenado durante algn tiempo, por lo que debe centrifugarse antes de usarse. 12. Para aislar ciertas sustancias de la orina se necesita medir el pH de la muestra y ajustarlo. Por ejemplo, la beta-2-microglobulina se desnaturaliza por encima de pH 6.0 y las catecolaminas y sustancias relacionadas se aislan a un pH menor a 2.0. 13. Es a menudo til medir la concentracin de creatinina en la orina, cuando hay duda acerca de si la muestra recogida durante 24 horas est completa. Como la depuracin de creatinina se relaciona con la masa corporal es relativamente constante de un da para otro en los individuos y los cambios notorios ponen en duda la integridad de la muestra.

Anlisis Clnico I

B A

B A

C D E

Toma de muestra en hombres. A. Lvese lasmanos con agua y jabn durante 30 segundos. Abra el paquete que contiene las toallitas desechables que la enfermera le di y pngalas en un lugar limpio y seco, cercano a usted. B. Destape el frasco para recoger la muestra y coloque la tapa con el lado plano hacia abajo. No toque el interior del recipiente o de la tapa. C. Preprese para orinar (si no est circuncidado, deslice el prepucio hacia atrs). Usando una toallita, limpie la cabeza del pene empezando por la abertura uretral y contine en direccin a usted, como muestra la ilustracin. Cuando termine, bote la toallita usada. D. Orine una pequea cantidad de lquido en el inodoro. Despus de pasar 1 o 2 segundos, recoja aproximadamente 1 onza de orina (30 mL) en el recipiente.

Toma de muestra en mujeres. A. Lvese las manos con agua y jabn durante 30 segundos. Abra el paquete que contiene las toallitas desechables que la enfermera le dio y pngalas en un lugar limpio y seco, cercano a usted. B. Destape el frasco para recoger la muestra y coloque la tapa con el lado plano hacia abajo. No toque el interior del recipiente o de la tapa. C. Sintese en el inodoro, lo ms hacia atrs que pueda. Separe los labios vaginales con una mano, y mantenga los pliegues separados. D. Usando las toallitas, limpie bien la zona entre los labios y alrededor de la uretra, vaya de adelante hacia atrs. Use una toallita nueva en cada pase. E. Orine una pequea cantidad de lquido en el inodoro. Despus de pasar 1 o 2 segundos, coloque el frasco debajo del flujo urinario y recoja aproximadamente 1 onza de orina (30 mL) en el recipiente. No deje que el frasco toque la piel en ningn momento.

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COLOR Rojo a castao Rojo a prpura

PATOLOGICAS Porfobilina Porfobilingeno Uroporfirina

NO PATOLOGICAS

cido homogentsico cido phidroxipirvico Castao a negro Bilirrubina Fenol Melanina Metahemoglobina Mioglobina Porfirinas

Compuestos de hierro Cloroquina Hidroquinona Levodopa Metronidazol Nitrofurantona Quinina Resorcinol Aciflavina Amitriptilina

Azul a verde

Biliverdina Infeccin por pseudomonas

Azul de Evans Azul de metileno Azur A Complejo de

Anlisis Clnico I 2) FASE EXAMEN

vitamina B Cerosota

ANALTICA EN EL GENERAL DE ORINA.

El anlisis de orina de rutina comprende el examen de: las caractersticas fsicas: color, aspecto y densidad; las caractersticas qumicas, incluyendo el pH, el contenido de protenas, glucosa, cetonas, sangre oculta, nitritos, leucocitos, bilirrubina, urobilingeno, etc; y las estructuras microscpicas presentes en el sedimento.

EXAMEN FSICO Durante siglos las caractersticas visuales de la orina fueron utilizadas por los mdicos como piedra angular del diagnstico. Con el progreso de la ciencia mdica, estudios qumicos y microscpicos permiten ahora una interpretacin mas detallada de la orina.

A) ASPECTO La orina normal habitualmente es clara pero puede tornarse turbia por precipitacin de partculas de fosfato amorfo en orinas alcalinas, o urato amorfo en orinas cidas. El fosfato amorfo constituye un precipitado blanco que se disuelve cuando se agrega un cido. El urato amorfo con frecuencia posee un color rosado por los pigmentos y se disuelve al calentar la muestra.La orina puede ser turbia por la presencia de leucocitos o de clulas epiteliales, y esto puede confirmarse mediante el examen microscpico del sedimento. Las bacterias pueden causar turbidez, en especial si la muestra queda en el recipiente a temperatura ambiente. El moco puede dar a la orina un aspecto ahumado o turbio. La grasa y el quilo dan un color lechoso. Existen slo unas pocas situaciones donde el olor de la orina tiene importancia. Las cetonas pueden conferir un olor dulce o a frutas. Una muestra contaminada con bacterias puede tener un olor picante por el amoniaco producido. La excrecin de orina que huele a jarabe de arce constituye un ndice de un trastorno metablico congnito que se ha denominado apropiadamente "enfermedad de la orina con olor a jarabe de arce". Se dice que la orina de un lactante con fenilcetonuria tiene un olor "rancio" o "a ratn". El olor de la orina que se asemeja al de "pies sudados" se encuentra en la acidemia isovalrica o en individuos que presentan cantidades excesivas de cido butrico o hexanoico. La

Anlisis Clnico I

hipermetioninemia ha sido asociada con un olor a "manteca rancia" o a "pescado". Como existen diversos trastornos hereditarios que se asocian con un olor especfico, Thomas y Howell (1973) recomendaron que antela presencia prolongada de cualquier olor inusual y fuerte en la orina de un lactante debe hacerse una investigacin bioqumica completa. B) COLOR La orina presenta una amplia gama de colores, por lo cual est determinado por su concentracin. El color puede variar de un amarillo plido a un mbar oscuro, segn la concentracin de los pigmentos urocrmicos y, en menor medida, la urobilina y de la uroeritrina. Cuanto ms pigmento tenga, mayor ser la intensidad del color, sin embargo, existen muchos factores que pueden alterar el color normal de la orina, incluyendo medicaciones y dietas, as como diversos productos qumicos que pueden estar presentes en situaciones patolgicas. En el cuadro se presentan algunas de las sustancias que pueden influir en el color de la orina.

Anlisis Clnico I La un orina color normal

COLOR PATOLOGICAS NO PATOLOGICAS

tiene

mbar(amarillo claro) caracterstico. El color de laorina depende de los urocromos, que normalmentese encuentran all presentes, comoporfirinas, bilirrubina y uroeritrina. Es importanteaclarar que un color diferente al normalno necesariamente indica enfermedadpues esta situacin puede presentarse por algunas drogas o alimentos.

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Blanco Quilo Pus (muchos leucocitos) Amarillo Bilirrubina Urobilina Acriflavina Azo-Gantrisin Colorantes de alimentos Nitrofurantona Orina concentrada Pyrium Quinacrina Riboflavina Serotonina Sulfasalazina Zanahorias Rosado a rojo Eritrocitos Hemoglobina Mioglobina Porfobilina Porfirinas Aminopiridina Antipirina Bromosulftalena Cscara Colorantes de alimentos Difenilhidantona Fanacetina Fenolftalena Metildopa Fosfatos

C) OLOR El olor normal de la orina es sui generis, se describe como urinoide, este olor puede ser ms fuerte en muestras concentradas sin que esto implique infeccin. En la tabla se resumen algunas de las variaciones ms significativas del olor de la orina.

Variaciones de importancia clnica en el olor de la orina Olor Alcohol importancia clnica intoxicacin por etanol

Anlisis Clnico I Amoniacal infecciones del tracto urinario por bacterias que descomponen la urea (ureasa positivas), retencin prolongada de orina fstulas vesico-intestinales en presencia de cetonuria, acidosis metablica (frecuentemente debida a ayuno prolongado o diabetes mellitus no controlada) olor a rancio de la orina y el aliento en presencia de encefalopatas hepticas fenilcetonuria Hipermetioninemia, tiroxinemia Exceso de hexanoico, cido butrico o

Fecaloide Fruta fresca o acetona

Hedor heptico

Humedad Rancio Sudor de pies

Sulfrico Sulfuro de hidrgeno

descomposicin de cistatina infecciones del tracto urinario con proteinuria (debida a la putrefaccin producida por bacterias)

En el examen fsico tambin se considera el pH y la densidad, parmetros que son medidos con cintas para orinas.

D) Ph Es el reflejo de la acidez de la orina. El pH normal va de 5.5 - 6.5. Influyendo el rgimen diettico de cada paciente. Este se determina utilizando una cinta lectora de pH la que se sumerge en una muestra de orina por dos o tres segundos y luego se compara el color obtenido con una carta patrn de colores.

Anlisis Clnico I La prueba se basa en la combinacin detres indicadores: el rojo de metilo, el azul debromotimol y la fenolftalena, que reaccionancon los iones de hidrgeno, presentesen la muestra de orina. Las reacciones producencambios cromticos, que van del naranjaal verde amarillo y al azul, que el bacterilogomediante una tabla de comparacinpuede leer o el lector de tirillas detectarpara determinar el pH de la orina. Antes deinterpretar el pH de la orina vale la penarecordar que los riones normales producenorina con pH de 4,6 a 8,0, usualmente stese encuentra alrededor de 5,5 a 6,5.La orinase torna ms alcalina despus de las comidas;debido a la secrecin de cido por lamucosa gstrica su pH es mas bajo en estadosde ayuno. Las protenas causan disminucindel pH y los ctricos lo aumentan.Adems, en los nios usualmente es alcalina,relacionado con el consumo de leche. Enla figura se esquematiza el principio sobreel cual se basa la prueba.

Figura. Principio de la determinacin del pH en orina. Valores de referencia: 4,8 a 7,4 a lo largodel da y 5,5 a 6,5 en la orina de la primeramuestra de la maana. Una de las principalesfunciones del rin es mantener el equilibriocido-base del organismo, de tal maneraque el pH sanguneo se mantenga estable.En trminos generales, a excepcin de lospacientes con acidosis tubular renal, el pHde la orina refleja el pH srico. La incapacidadpara acidificar la orina a un pH menorde 5.5, a pesar de un ayuno prolongado y dela administracin de una carga de cido, esconsiderado como el sello caracterstico de laacidosis tubular renal. En la acidosis tubularrenal tipo I (distal), el pH srico es cido perola orina es alcalina, esto es secundario a laincapacidad de secretar los protones en laorina. La acidosis tubular renal tipo II (proximal)se caracteriza por una inhabilidad en laabsorcin del bicarbonato. Esta situacin producela orina alcalina inicialmente, pero comola carga de filtracin de bicarbonato disminuye,la orina se torna ms cida. Utilidad clnica:El pH de la orina es til en la evaluacindel estado cido-bsico de un determinadopaciente, por ejemplo:Pacientes pH < 7 debido a una acidosismetablica por ayuno prolongado, acidosisdiabtica, insuficiencia renal, acidosis tubularrenal,

Anlisis Clnico I algunas sustancias qumicas y medicamentos(salicilatos, etilen-glicol, alcohol,biguanidas, anfotericina, espironolactona, AINES) o a una acidosis respiratoria porretencin de CO2, como puede ocurrir enpacientes con enfisema. Pacientes con pH > 7 debido a alcalosis metablica por deficiencia grave de potasio, ingestin excesiva de lcalis, diurticos y vmito o a alcalosis respiratoria por hiperventilacin. El pH de la orina tambin es de utilidaden el diagnstico y manejo de las infeccionesy clculos del tracto urinario. La orina alcalinaen un paciente con infeccin del tractourinario sugiere la presencia de un organismoque degrada la urea, la cual puede estarasociada con cristales de fosfato de amonio ymagnesio que pueden formar clculos coraliformes.Los valores de pH reiteradamentealcalinos evidencian una infeccin del tracto urogenital, a pesar de la disminucin de lasobrevida de los leucocitos. Los clculos decido rico estn asociados con la acidificacinde la orina. Resultados falsos positivos o negativos: Si la muestra no se procesa en el tiempoadecuado, la orina puede tornarse alcalinacomo consecuencia de la descomposicinbacteriana de la urea y en este caso la determinacindel pH carecera de valor diagnstico. Limitaciones de la prueba: El pH urinario puede modificarse segnlos hbitos nutricionales del individuo: lasprotenas animales y las frutas cidas acidificanla orina y las dietas vegetarianas yricas en citrato la alcalizan. Cuandoel pH urinario se encuentra en extremos,alto o bajo, puede haber destruccin prematurade leucocitos y eritrocitos, lo queexplica la combinacin de resultados negativosen el sedimento con una reaccin positivapara alguna de estas clulas en la tirilla.

E) ESPUMA Normalmente la orina es blanca, abundante y fugaz. Si la espuma es blanca abundante y persistente pueden sugerir presencia de protenas. Tambin podemos encontrar orina de color verde, escasa y fugaz cuando hay presencia de pigmentos biliares. F) GRAVEDAD ESPECIFICA (PESO ESPECIFICO O DENSIDAD) La prueba, mediante reaccin con un formadorde complejos y deteccin de los protonesliberados, mide las concentraciones inicasen orina. Como resultado de las reaccionesse producen cambios cromticos, queel bacterilogo mediante una tabla de comparacinpuede leer o el lector de tirillas detectar.Dependiendo de la marca de tirillasutilizadas, se determina o no los componentesno inicos de la orina, tales como la glucosao la urea. Valores de referencia: 1.015 a 1.025. Adiferencia de la osmolaridad, que dependeslo del nmero de partculas en la orina, lagravedad especfica depende tanto del pesocomo del nmero de ellas. Es as como sustanciasde alto peso molecular pueden

Anlisis Clnico I aumentarsignificativamente la gravedad especficasin mayor modificacin de la osmolaridad.Desde el punto de vista de los valoresde la gravedad especfica de la orina, hay trminosque se definen con ella: isostenuriacuando constantemente est en 1.010 e hipostenuriacuando est por debajo de estevalor; en tanto que el trmino de hiperstenuria no se utiliza. En estado normal, la gravedadespecfica de la orina puede oscilarentre 1.003 y 1.030, pero en la prctica, unvalor menor de 1.010 indica una relativa hidrataciny un valor mayor de 1.020 sugiere una relativa deshidratacin. Utilidad clnica de la prueba:Como parmetro de laboratorio, la gravedadespecfica ofrece al mdico informacinimportante sobre el estado de hidrataciny de la capacidad de concentracin delos riones de un paciente. La gravedad especficade la orina se aumenta en presenciade glucosuria, en el sndrome de secrecininapropiada de la hormona antidiurtica ypuede estar disminuida por el uso de diurticos,en la diabetes inspida, en el hiperaldosteronismo, en la insuficiencia suprarrenal ycuando hay dao de la funcin renal. En lamayora de los pacientes con enfermedad renalparenquimatosa, el margen de variacinde la gravedad especfica se estrecha con eltiempo, hasta que finalmente el filtrado glomerularno se altera en su paso por el nefrnen donde se fija en 1.010 o menos. En elpaciente con oliguria, la densidad especficapuede ayudar a distinguir entre insuficienciarenal aguda, en la que hay isostenuria yla oliguria por deshidratacin, en la cual se encuentra elevada. Ejemplos de hipostenuriapersistente son la diabetes inspida, la ingestincompulsiva de agua, la hipopotasemiagrave, la hipercalcemia, enfermedadesrenales parenquimatosas fundamentalmentedel tipo de tbulo intersticial, la insuficienciarenal aguda y los defectos tubulares renales. Adems, la gravedad especifica puede serde utilidad para evaluar la calidad de lamuestra en estudios antidopaje y consumode drogas de abuso ya que cuando est pordebajo de 1.005 es altamente sospechosa deestar diluida. Resultados falsos positivos o negativos: La gravedad especfica tiende a estar falsamenteelevada en orinas con pH por debajode 6 y falsamente disminuida en orinas conpH por encima 7. Cuando en la orina haypequeas cantidades de protenas (100 a 500mg/da) ocetonuria, la gravedad especficausualmente arroja valores un poco ms altos que los reales. Limitaciones de la prueba: La gravedad especfica de la orina dependedel estado de hidratacin, la cual puedeestar modificada, intencional o accidentalmente,debido a la ingesta de stos, la transpiracin,la temperatura medioambiental yel uso de diurticos, incluido el caf. Cuandola densidad especfica est por debajo de1.010 tiene significacin analtica por cuantoen dicha orina, cuando hay eritrocitos y/oleucocitos, stos se destruyen rpidamentedando como resultado un sedimento urinarionegativo (falso negativo) mientras que lareaccin para eritrocitos y leucocitos es positivaen la tirilla (verdadero positivo).

Anlisis Clnico I Interferencia con medicamentos: Los medicamentos, y cualquier otro tipode sustancias, que modifican la diuresis puedendar resultados falsamente bajos o altos,con valores que pueden oscilar entre 1.000 y1.040, incluso en personas sanas. 3. MATERIALES: Probetas Cintas de Ph 4. PROCEDIMIENTO: Urodecmetro Muestra de orina

Obtencin de muestra

Observacin del aspecto, color y espuma.

Urodecmetro utilizado para medicin de densidad de la orina

la

Anlisis Clnico I Medicin de pH

5. RESULTADOS: En la muestra de orina estudiada observamos lo siguiente:

CARACTERSTICA
ASPECTO

RESULTADO
Limpio y ligeramente turbio.

COLOR

Amarillo

OLOR

Sui generis.

ESPUMA

Blanca, escasa y fugaz.

DENSIDAD

1.018

PH

TEMPERATURA

24

6. CONCLUSIONES: - Es importante una correcta obtencin de la muestraas como su manipulacin, conservacin y transporte.Tambin una buena metodologa de trabajo por parte del personal encargado asegura la fiabilidad de los datos obtenidos reduciendo al mnimo errores que conllevan el rechazo de las muestras. PRCTICA N 03:EXAMEN QUMICO DE ORINA

Anlisis Clnico I

1. OBJETIVOS: Contemplar el estudio cualitativo, semicuantitativo o cuantitativo de algunas sustancias que pueden estar presentes en una muestra de orina y cuya presencia a niveles elevados es indicador de alguna patologa. - Reconocer los valores de protenas, hemoglobina, glucosa, cetonas,Bilirrubina y urobilingeno que contiene la muestra de orina. 2. FUNDAMENTO TERICO: El examen qumico habitualmente serealiza con tiras reactivas (Labstix, Multistixy otras) que contienen espacioscon diferentes reactivos especficos, indicadoresy buffers (pH, glucosa, hemoglobina,etc.).

DENSIDAD La densidad generalmente se obtiene mediante las tiras reactivas aunque la medicin con el densmetro (examen fsico) es un mtodo ms exacto. Indica la cantidad relativa de solutos que contiene un volumen definido de orina. El 70% a 80% de estos solutos corresponde a la urea. El rango del valor normal en pediatra es muy amplio: 1.003g/l a 1.030 g/l. Los valores inferiores corresponden a los recin nacidos ylactantes, que generalmente oscilan entre 1.005 g/l a 1.010 g/l y para los nios mayores de 1.010 g/l a 1.025 g/l. Los valores de1.023 indican una capacidad de concentracin urinaria normal. Los valores 1.005 g/l corresponden a hipostenuria, que puede producirse por una alteracin de los mecanismos de concentracin tubular o tbulointersticial, como ocurre en la pielonefritis, en las nefritis tbulointersticiales, tubulopatas,diabetes inspida nefrognica o en la insuficiencia renal; otra situacincorresponde a la respuesta que ofrece el rin cuando tiene la capacidad de concentracin urinaria normal y existe sobrecargahdrica; en este caso, existe poliuria e hipostenuria (ingesta abundantede jugos diluidos, potomana o intoxicacin hdrica). Por ltimo, cuandoexiste deficiencia de la hormona antidiurtica, el volumen urinario superalos 3.000 ml/da y la densidad urinariaes

Anlisis Clnico I cercana a 1.000 g/l (diabetes inspidacentral).El valor es 1.025 g/l, como se observanormalmente en la primera orina del da, corresponde a una concentracinurinaria adecuada a la restriccin de laingesta de lquidos que ocurre durante lashoras del sueo.En las patologas que cursan con hipovolemia,si el tbulo conserva su capacidadde concentracin, el rin responde aumentandola densidad urinaria y disminuyendola diuresis.Hay determinadas sustancias que aumentanla densidad urinaria independientementede la capacidad de concentracinrenal. Algunas de ellas son: glucosa, manitol,medios de contraste y la proteinuriamasiva.La forma ms correcta para evaluar lacapacidad de concentracin renal es ladeterminacin de la osmolaridad urinaria,pero lamentablemente son muy pocoslos laboratorios que cuentan con un osmmetro. PH La orina es normalmente cida. Los valoresde pH oscilan entre 5 y 6 con un rangode 4,5 a 8,5. Los pH alcalinos son los quepresentan ms conflicto para su interpretacin.La causa ms comn de hallar un pH 7es que la muestra no ha sido procesada inmediatamente, ha permanecido a temperaturaambiente, se ha producido el escapede CO2, la urea se ha convertido en amonacoy ha aumentado el pH. Si se sospecha acidosis tubular, el pH sedebe determinar usando un electrodo especficoy al mismo tiempo obtener un estadocido base (EAB) sanguneo.La infeccin urinaria producida por Proteus(organismo productor de urea) se asociaa EAB normal y pH alcalino.La acidosis tubular distal se acompaade acidosis metablica y pH 7 porque elmecanismo de acidificacin renal se encuentraalterado. PROTENAS En pediatra, el valor normal de proteinuriaes <100 mg/m2/24 horas o tirareactiva = 0. Si el resultado es positivo, elexamen debe repetirse para confirmar eldiagnstico de proteinuria. En nios se puede hallar proteinuria nosignificativa (trazas a +) en los estadosfebriles, exposicin prolongada al fro o alcalor, secundaria a ejercicio fsico u ortosttica. Es transitoria y no indica patologa.Los mismos valores pueden estar presentesen cistitis, uretritis, secreciones vaginaleso balanopostitis. Los valores que corresponden a proteinuriamasiva.

Anlisis Clnico I El resultado positivo en la tira reactivadebe confirmarse con una proteinuria cuantitativade 24 horas o con el ndice proteinuria/creatininuria (PrU mg/dl/CrU mg/dl). Este ndice es til en pediatra, fundamentalmenteen los pequeos que no regulanesfnteres, ya que se realiza en una muestraaislada de orina. Su valor normal es 0,2;valores mayores a 3 indican proteinuria enrango nefrtico (40 mg/m2/hora). En las enfermedades renales existe unperodo latente asociado principalmente a la hiperfiltracin glomerular y a otros factores Sin color o color amarillo claro Diluida. Diabetes inspida. Abundante ingesta de lquidos diluidos.Turbia Fosfatos amorfos, uratos, clulas, bacterias, contaminacin fecal.Lechosa Lpidos (nefrosis), piuria. Color amarillo naranja a marrn Concentrada, pigmentos biliares, nitrofuranos, dipirona.Color rojo a marrn Hematuria, hemoglobinuria, mioglobinuria, porfirina, rifampicina,teofilina, ingesta de remolacha. Colorante (ingesta de golosinas).Color marrn oscuro Metronidazol, imipenem, fenoles.Color amarillo verdoso Bilirrubina. Color azul verdoso Pseudomonas. Azul de metileno, rivoflavina. Clorofila (dentfricos).Rosada Acido rico (recin nacido).Interpretacin del anlisis de orina / comprometidos con la progresin a la insuficienciarenal crnica. En este perodo existeaumento de la excrecin de albmina que nopuede ser detectada por los mtodos comunes. Por esta razn, debe ser dosada comomicroalbuminuria. El valor normal es de 30g/minuto. El dosaje debe realizarse en orinade 24 horas. Ser necesario investigarlaespecialmente en los pacientes que hayansufrido sndrome urmico hemoltico, conhipertensin o con diabetes. La proteinuria puede ser la expresinde una enfermedad renal, como ocurre enlos sndromes nefrtico y nefrtico, en lanefropata por reflujo o en la insuficienciarenal. Otras veces puede ser secundaria auna sobrecarga renal, como ocurre en elmieloma o en la leucemia, situaciones enlas cuales el aumento de las protenas filtradaspor el rin sobrepasa la capacidadde reabsorcin tubular. La b2 microglobulina es una protenasrica de bajo peso molecular que se filtpor el rin en un porcentaje inferior al 1%del valor de su nivel

Anlisis Clnico I plasmtico, se reabsorbey metaboliza en el tbulo proximal; porlo tanto, constituye un buen marcador dedisfuncin tubular si la concentracin urinariasupera los 350 g/dl.

GLUCOSA El valor normal de la glucosa en orina esde100 mg/dl (tira reactiva = 0). Su aparicinpuede deberse a dos factores: 1) disminucinde la reabsorcin tubular (tubulopataproximal) y 2) niveles sanguneos que superanel umbral renal, como la diabetesmellitus u otros estados hiperglucmicos.

CETONAS Las cetonas aparecen en la orina cuando existe un metabolismo anormal o disminuidode carbohidratos, por lo cual es muy comn hallarlas durante el ayuno, el ejercicioprolongado o cuando existen vmitosreiterados.La nica patologa en la cual la cetonuriatiene importancia prctica es la diabetesmellitus.

SANGRE La tira reactiva positiva indica tres posibilidades: 1) hematuria, 2) hemoglobinuria o3) mioglobinuria. La observacin del sedimentoen la muestra de orina centrifugadaorientar el diagnstico. Si hay eritrocitosestamos en presencia de hematuria; en caso contrario deber realizarse el diagnsticodiferencial entre hemoglobinuria y mioglobinuriapara el cual podr utilizarse cualquierade los mtodos que se enumeran acontinuacin: 1) se centrifuga una muestrade sangre y si el plasma es rosado existehemlisis; por lo tanto, en orina hay hemoglobina(Hb); si el plasma es claro en orina haymioglobina; 2) agregando sulfato de amonio(2,8 g) a 5 ml de orina centrifugada, se espera5 minutos y se filtra. La Hb precipita y quedaen el papel; la mioglobina no precipita, por lotanto pasa libremente a travs del filtro. La patologa asociada a mioglobinuriaes el dao muscular severo, que puede sercausado por convulsiones, ejercicio prolongado,shock elctrico, politraumatismosseveros e hipertermia maligna, en especialsi existe una miopata preexistente. La mioglobinaes liberada por los

Anlisis Clnico I msculos y eslibremente filtrada por el rin.Cuando la cantidad filtrada de Hb omioglobina es importante, puede desarrollarseinsuficiencia renal aguda por obstruccintubular.La hemoglobinuria es secundaria a crisishemolticas de cualquier etiologa.

BILIRRUBINA La reaccin positiva para la bilirrubinaindica la presencia de enfermedades hepticas.La lectura de trazas de bilirrubina essuficiente para realizar una investigacinen sangre con enzimas hepticas.

UROBILINGENO El urobilingeno est presente en orinacuando en la sangre hay aumento de bilirrubinano conjugada, como ocurre en las anemias hemolticas o en la hepatitis grave, aunque ya casi no se toma en cuentaporque el urobilingeno se oxida rpidamentecon el aire.

LEUCOCITURIA Se detecta por la accin de la estearasacitoplasmtica leucocitaria que produce lahidrlisis del reactivo de la tira y cambia elcolor. Puede diagnosticarse un nmero anormalde leucocitos con un rango de sensibilidad de 70%-80%. En orinas muy alcalina existe hemlisis de leucocitos, obtenindosefalsos positivos.

NITRITOS La enzima reductasa bacteriana metabolizalos nitratos urinarios en nitritos. Si laorina contiene un nmero importante debacterias, por este mtodo se podr detectarbacteriuria con una sensibilidad del 50%.Sin duda el examen microscpico es elmejor mtodo para diagnosticar leucocituriay bacteriuria.Falsos positivos y negativosde las tiras reactivasLos factores ms comunes que puedenalterar los resultados de las tiras reactivasson los siguientes: valores extremos de pHy densidad urinarios, oxidantes, antibiticos,cido ascrbico, proteinuria, antispticosy jabones.

Anlisis Clnico I

3. MATERIALES: Tubos de ensayo Muestra de orina Mechero Acido ntrico concentrado Reactivo de Benedict Nitropruciato de sodio 5% Hidrxido de sodio 50% Acido actico glacial Lugol Tiras reactivas

4. EXPERIENCIAS: a) DETERMINACIN CUALITATIVA DE PROTENAS (MTODO DEL ANILLO DE HELLER) Prueba de laboratorio para la determinacin de proteinuria en la que la orina se coloca en capa sobre cido ntrico. La aparicin de un anillo de precipitado proteico en la interfase de los dos lquidos es un signo positivo. Este mtodo puede ser til cuando slo se dispone de una cantidad pequea de orina, pero no es tan sensible como las dems pruebas de precipitacin. Tambin es muy difcil semicuantificar los resultados.

PROCEDIMIENTO:

Colocar 1 ml de cido ntrico concentrado en el fondo de un tubo de ensayo. Cubrir el cido con 1 ml de orina centrifugada, pero cuidado que sta se deslice lentamente por al pared del tubo, de este modo se forman dos capas de lquido. La formacin de un precipitado blanco en la unin de ambos lquidos al cabo de tres minutos indica la presencia de protena. Pude intentarse cuantificar la densidad del anillo formado.

RESULTADOS POSITIVOS FALSOS Esta prueba resulta afectada por los frmacos que interfieren las pruebas de calor y con cido.

Anlisis Clnico I

Concentraciones elevadas de cido rico y de urea pueden dar resultados positivos falsos, pero estos obstculos pueden salvar diluyendo la orina y repitiendo la prueba.

RESULTADOS NEGATIVOS FALSOS Como esta prueba es muy sensible, las orinas diluidas pueden dar resultados negativos. El uso de rutina de cido ntrico concentrado en esta prueba puede constituir una desventaja.

Elprocedimiento para la reaccin del anillo de Robert es idntico al de la reaccin de Heller, salvo que el reactivo para la primera esta formada por una parte de cido ntrico concentrado y 5 partes de sulfato de magnesio saturado.

SIGNIFICACIN CLNICA La orina de personas sanas no contiene protenas slo pequeas cantidades; normalmente el glomrulo evita el paso de estas de la sangre al filtrado glomerular. Alteraciones glomerulares causan el aumento de la permeabilidad de las protenas plasmticas lo que ocasiona la proteinria, que indica presencia de protenas en orina. La presencia persistente de proteinria indica enfermedad renal. Concentraciones elevadas de protenas en liquido cefalorraqudeo (LCR) pueden ser debidas a infecciones o a presin intracraneal elevada. El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clnicos y de laboratorio.

Anlisis Clnico I

5.- RESULTADOS: En la muestra estudiada se observ lo siguiente:

La formacin de un precipitado blanco en la unin de ambos lquidos lo que indica la presencia de protenas.

b) DETERMINACIN SEMICUANTITATIVA DE GLUCOSA (MTODO DE BENEDIT) El fundamento de esta reaccin radica en que en un medio alcalino, el ion cprico (otorgado por el sulfato cprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehdo del azcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al xido cuproso (Cu2O). El medio alcalino facilita que el azcar est de forma lineal, puesto que el azcar en solucin forma un anillo de piransico o furansico. Una vez que el azcar est lineal, su grupo aldehdo puede reaccionar con el ion cprico en solucin. En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetopentosa) es capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un intermediario enlico) a glucosa (que es capaz de reducir al ion cprico).

Anlisis Clnico I Los disacridos como la sacarosa (enlace (1 2)O) y la trehalosa (enlace (11)O), no dan positivo puesto que sus OH anomricos estn siendo utilizados en el enlace glucosdico. En resumen, se habla de azcares reductores cuando tienen su OH anomrico libre, y stos son los que dan positivo en la prueba de Benedict.

PROCEDIMIENTO: En un tubo de ensayo colocar 2.5 ml de reactivo de Benedic, agregar IV gotas de orina, mezclar bien luego llevar a bao mara de agua hirviente por 5 minutos, posteriormente dejar enfriar espontneamente.

CC COLOR

0.0 Azul

APARIENCIA RESULTADOS

(-)

GLUCOSA g/ 100ml 0.25 0.5 1.0 Verde Verde Amarillo c/ pp a Verde amarillo oliva () (+) (2+)

1.5 Marrn

2.0 Anaranjado a Roja (4+)

(3+)

En la muestra estudiada se observ lo siguiente:

La Accin reductora de la glucosa en medio alcalino de sulfato de cobre reduce el in cprico en cuproso el cual precipita en forma de xido de color anaranjado. Apariencia : (4+)

Anlisis Clnico I

c) DETERMINACIN CUALITATIVA DE ACETONA (METODO DE LEGAL) La prueba se basa en el principio de laprueba de Legal. El cido acetoactico y laacetona reaccionan con nitroprusiato sdicoy glicina en un medio alcalino para formarun complejo color violeta, que el bacterilogomediante una tabla de comparacinpuede leer o el lector de tirillas detectar paradeterminar la presencia de cetonas en la orina. La reaccin es especfica para el cidoacetoactico y la acetona. No es interferidapor el cido beta-hidroxibutrico ni por la presenciade glucosa, protenas y cido ascrbicoen la muestra. La intensidad del color de anillo es directamente proporcional a la concentracin de acetona.

PROCEDIMIENTO: En un tubo de ensayo colocamos 2.5 ml de orina, agregamos 0.3 ml de nitropruciato de sodio al 2 %, agregamos luego 1ml de hidrxido de sodio al 50 % y al final agregamos III gotas de cido actico glacial por las paredes del tubo. Las pruebas son positivas cuando se forma el aillo rojo vinoso. INTERPRETACIN DE LA PRUEBA: Valores de referencia: negativo (< 5 mg/dL). Las cetonas (cido acetoactico, beta-hidroxibutricoy acetona) aparecen en la orinacuando en el organismo se produce unaumento de la degradacin de las grasas porun aporte energtico insuficiente de hidratosde carbono. El predominio de la liplisis sobrela lipognesis produce un aumento de losniveles de cidos grasos libres en el suero y,por su descomposicin en el hgado, se formams acetilcoenzima A, que puede ser utilizadapor otros procesos metablicos comoel ciclo del cido tricarboxlico. Este exceso seconvierte en cido acetoactico, que a su vezse transforma parcialmente en cido beta-hidroxibutricoy de la acetona. UTILIDAD CLNICA:

Anlisis Clnico I Desde el punto de vista clnico, la deteccinde cetonuria, sin ser exclusiva, es particularmentetil en los pacientes con diabetesmellitus. La cetonuria se encuentra muy asociadaa la diabetes descompensada, pero tambinpuede ocurrir durante el embarazo, debidoa dietas libres de carbohidratos, a deshidratacin,ayuno, inflamacin intestinal ehiperemesis. RESULTADOS:En la muestra estudiada se observ lo siguiente:

Se observa la formacin de un anillo en la superficie.

d) DETERMINACIN CUALITATIVA DE BILIRRUBINA (MTODO DE LUGOL) Se basa en la oxidacin de la bilirrubina en cidos oxidantes que pone de manifiesto su color azul verdosa caracterstica. La reaccin positiva para enfermedades hepticas. la bilirrubinaindica la presencia de

La lectura de trazas de bilirrubina essuficiente para realizar una investigacinen sangre con enzimas hepticas. PROCEDIMIENTO: En un tubo de ensayo colocamos 2 ml de orina y agregamos de III a IV gotas de lugol por las paredes del tubo de ensayo. La prueba da positiva cuando se forma un anillo verde. RESULTADOS: En la muestra estudiada se observ lo siguiente:

Se puede observar que no se form el anillo color verdoso.

Anlisis Clnico I

e) UTILIZACIN DE TIRAS REACTIVAS La Tira Reactiva de anlisis de orina es una prueba de deteccin rpida para la deteccin de: Acido Ascorbico, Glucosa, Bilirrubina, Cetona, Peso especfico, Sangre, PH, Protenas, Urobilingeno, Nitrito y Leucocitos. Las tiras reactivas son como una prueba de control de calidad para el cuerpo. Prueban muchas de las funciones del cuerpo con los diferentes parmetros encontrados en la orina, permitiendo que cualquier problema sea investigado y dirigido, antes de que se agrave. Las tiras reactivas, se pueden utilizar en la evaluacin general de la salud, y ayudan en el diagnstico y seguimiento de enfermedades metablicas o sistmicas que afectan la funcin renal, trastornos endocrinos y las enfermedades o trastornos del tracto urinario La tira reactiva si se mantiene dentro de la muestra mucho tiempo, las sustancias qumicas impregnadas en la tira tienen a disolverse, con lo que se obtendrn lecturas y cifras pocos precisas. Si los reactivos de la muestra se mezclan, las lecturas tambin sern poco preciso, para evitar esto es recomendable sacudir la tira sobre un papel absorbente para eliminar el exceso de orina despus de haberla sumergido en la muestra. ALMACENAMIENTO Es importante proteger de la humead y del calor excesivo y guardar en un rea fray seca, es ideal vigilar los cambios decolor en cada uso, por que si existe un cambio de color indica una perdida de reactividad.Se mantendr tapado el recipiente y se examinara las directrices del fabricante con cada nuevo lote, por si hubiera cambios en el procedimiento.

Anlisis Clnico I

PH Los inicadores rojo de metilo y azul de bromitol dan una gamma de naranjas, verdes, azules al elevarse el ph. PROTEINAS El acidosulfosalicilico precipita la albmina presente en la orina, dando una turbidez aproximadamente proporcional a la concentracin existente. La prueba se basa en la capacidad de las protenas para alterar la reaccin al color sin modificar el ph. La tira reactiva se encuentra impregnada con azul de tetrabromofenol tamponado hasta un ph cido de 3 en forma de tetraclorofenol-tetrabromosulftaleina.

GLUCOSA La glucosa se reduce a cobre de la solucin alcalina del reactivo de benedict a oxido cuproso con la formacin de un precipitado de color rojo ladrillo. Se basa en el mtodo especifico enzimtico de doble secuencia, con glucosa oxidada, peroxidasa y un cromogeno, la intensidad del color verde a azul depende de la cantidad de glucosa existente, pudindose obtener resultados semicuantitativos de 100 gr/dl. ACETONA El nitroputasio sdico en presencia de acetona forma un color violeta. La zona reactiva tamponada alcalinamente contiene nitroputasio sodico y glicina, que al reaccionar con el cido acetoacetico y acetona forman un compuesto de color violeta. HEMOGLOBINA La hemoglobina y el peroxido de hidrgeno oxidan al piramidon produciendo un color rosa violeta. La prueba se basa en la liberacin de oxigeno por el peroxido de la tira reactiva. La zona de la relativa esta imnpregnada de una mezcla

Anlisis Clnico I tamponada de un perxido orgnico y el cromogeno tetrametilbencina que es oxidado por el hem de la hemoglobina presente, produciendo un color verde a verde azulado. BILIRRUBINA Se basan en una diazoreaccion en que la bilirrubina presente en la orina se acopla con el sulfonqato de p-nitrobencenodiazonio-p-tolueno para dar una coloracin azulado prpura. UROBILINOGENO El urobolinogeno se encuentra en la orina en condiciones normales. La zona de la tira reactiva contiene una sal de diazonio y un tampn que mediante reaccin de acoplamiento con el urobilinogeno presente forma un color azulico rojizo. NITRITOS La prueba depende de la conversin de nitratos en nitritos por accin bacteriana de la orina. La zona ms reactiva tamponada esta impregnada de una amina y un acoplador. RESULTADOS: En la muestra estudiada se observ lo siguiente:

Introducimos la tira reactiva en el tubo de ensayo que contiene a la orina.

Anlisis Clnico I

BILIRRUBINA

URUBILINOGENO CETONA

NORMAL -

GLUCOSA

>100

PROTENAS

SANGRE Se observa el cambio de color en la tira reactiva, en este caso es una tira reactiva cuantitativa, que cambian ms o menos de color segn cunta sustancia haya en la orina: traen una escala de colores en el envase; se coloca la tira al lado de dicha escala, y se decide a cul de los colores correspondientes se parece ms. El nmero que trae debajo dicho color nos dir la concentracin aproximada en orina 5. CONCLUSIONES:

NITRITOS

PH

DENSIDAD

1.010

LEUCOCITOS

25

- La investigacin de la orina por mediode las tiras reactivas es un mtodo til ya que puede usarlo en la prcticadiaria y obtener un diagnstico presuntivoprevio que se confirmar, ms tarde,en el laboratorio con el examen microscpico.

Anlisis Clnico I - El examen qumico de orina tiene la finalidad de detectar la presencia de elementos que normalmente no estn presentes en la orina.

PRCTICA N 04: EXAMEN MICROSCOPICO DEL SEDIMENTO URINARIO

1. OBJETIVOS: Relacionar los datos obtenidos a travs del sedimento urinario con el cuadro clnico del paciente. Reconocer numerosas estructuras con una forma muy diversa. Como clulas de la va urinaria descendente y de los riones, as como sangre, sales urinarias precipitadas con forma cristalina o cilindros formados en los canalculos renales. 2. FUNDAMENTO TEORICO: A. SEDIMENTO ORGANIZADO: CELULAS Y CILINDROS Eritrocitos

Los hemates se eliminan en forma muy reducida en la orina, incluso en personas normales, con aumento 400x, se puede observar aproximadamente 0 a 2 hemates por campo. stos se identifican al examen microscpico como discos redondos de color dbilmente amarillo rojizo, con doble contorno. En las orinas hipotnicas se hinchan y en las hipertnicas se arrugan. La morfologa de los hemates puede revelar el origen glomerular o postglomerular de la hematuria. Los eritrocitos que atraviesan el canal glomerular aparecen "dismrficos", es decir, se deforman, fragmentan y tienen muescas. Estas clulas se diferencian de los hemates uniformes de origen postglomerular. La hematuria glomerular se sospecha cuando ms del 80% de los hemates tienen aspecto dismrfico. De todas formas, la observacin de hemates eumrficos no descarta la enfermedad glomerular. Los acantocitos, es decir los hemates en forma de anillo y evaginaciones, son caractersticos de la enfermedad del glomrulo. Un 5% de ellos con relacin a la totalidad de los eritrocitos sugiere fehacientemente una hematuria glomerular, probabilidad que aumenta aun ms si el porcentaje aumenta a un 10%. Elementos que apoyan la sospecha de una hematuria de origen glomerular son la presencia simultnea de cilindros eritrocitarios, granulosos, hialinos.

Anlisis Clnico I

Sedimento

Frecuente

Menos frecuente

-Todas las formas de glomerulonefritis

- Afeccin renal de enfermedades sistmicas - Tumores benignos y malignos del rin y vas urinarias - Traumatismos - Malformaciones - Trombosis de los vasos renales

- Infeccin primaria
- Tuberculosis - Nefropata diabtica - Pielonefritis - Enfermedades renales hereditarias

Hematuria

ERITROCITOS

Anlisis Clnico I

LEUCOCITOS

Cuando se habla de leucocitos casi siempre se habla de granulocitos, y estos indican la presencia de procesos inflamatorios del rin y la va urinaria. Al examinar un sedimento urinario de una persona sana, pueden detectarse hasta 5 leucocitos por campo de 400x, sin que esto tenga significado patolgico. Son clulas de tamao mayor a los hemates y menor a las clulas epiteliales, con presencia de ncleo sementado y granulaciones. En la mujer debe tenerse en cuenta que los leucocitos hallados pueden ser de origen vaginal, sobre todo si se acompaan de una gran cantidad de clulas de epitelio plano, por lo que el estudio de la orina de chorro medio puede ser de gran valor para aclarar esta cuestin. Si adems de la leucocituria se evidenciaran cilindros leucocitarios procedentes de los tbulos, el origen sera renal y el diagnstico pielonefritis. En los casos de leucocituria estril (sin desarrollo bacteriano en los urocultivos) deber descartarse tuberculosis, micosis, clamidias, herpes simple as como tambin Nefritis intersticial medicamentosa

Sedimento

Frecuente
- Pielonefritis - Todas las enfermedades inflamatorias de las vas urinarias descendentes.

Menos frecuente
- Glomerulonefritis - Rechazo de transplantes - Enfermedades sistmicas con afeccin renal

Leucocituria

LEUCOCITOS

Anlisis Clnico I

CLULAS EPITELIAL

Los elementos epiteliales son frecuentes en el sedimento urinario y su valor diagnstico muy reducido. Existen diversos tipos: - Epitelio plano: Procede de los genitales externos o de la porcin inferior de la uretra. Se trata de grandes clulas de aspecto irregular con un ncleo pequeo y redondo, pudiendo observarse en forma frecuente un repliegue parcial en el borde celular. - Epitelio de transicin: Tiene su origen desde la pelvis renal, urter y vejiga, hasta la uretra. Su presencia acompaada de leucocituria puede indicar una inflamacin de la va urinaria descendente. En caso de apreciar anomalas nucleares deber descartarse un proceso maligno. Estas clulas son ms pequeas que las del epitelio plano, son redondeadas con "cola" y su ncleo es ms grande y redondo. - Epitelio tubular o renal: Son clulas algo mayores que los leucocitos y presentan granulaciones. Su ncleo, de difcil visualizacin es grande y redondo. Las clulas de epitelio tubular que contienen gotas de grasa muy refringentes en el protoplasma, se conocen como clulas granulosas o cuerpos ovales grasos y su presencia sugiere la existencia de un Sme. Nefrtico.

Anlisis Clnico I

EPITELIO PLANO

EPITELIO DE TRANSICIN

Anlisis Clnico I

EPITELIO TUBULAR O RENAL

CILINDROS

La presencia de cilindros indica casi siempre la presencia de una enfermedad renal, aunque la evidencia de alguno de ellos (hialinos y granulosos) puede encontrarse en personas sanas tras grandes esfuerzos fsicos. Por lo general la cilindruria cursa con proteinuria, ya que los cilindros se originan por el espesamiento de las protenas o su precipitacin sobre todo en el tbulo distal. Los cilindros son estructuras longitudinales que se corresponden con la luz de los tbulos y que pueden contener diferentes elementos. Existen diversos tipos de cilindros: - Cilindros hialinos: Est compuestos por una protena de alto peso molecular (mucoproteina de Tamm-Horsfall) que se produce y elimina en cantidades muy pequeas en condiciones normales. Estos cilindros son homogneos, incoloros, transparentes y poco refringentes, por lo que son fciles de omitir. Pueden aparecer en forma aislada en personas sanas o tras la administracin de diurticos potentes como la furosemida. No es raro detectar cilindros hialinos con inclusiones celulares (eritrocitos, leucocitos, epitelio tubular), lo que determina la presencia de enfermedad del parnquima renal.

- Cilindros granulosos: Ocasionalmente pueden aparecer en personas sanas, aunque su presencia se relaciona con enfermedades agudas y crnicas del rin. Suelen ser ms grandes que los hialinos y presentar inclusiones granulares. No es raro observar una mezcla de cilindros hialinos y granulosos.

Anlisis Clnico I - Cilindros creos: Suelen ser ms anchos que los hialinos, muestran una refringencia mucho mayor y no son fciles de omitir. Presenta muescas o hendiduras finas en sus bordes, que se dirigen perpendicularmente al eje longitudinal del cilindro. Su presencia indica siempre una enfermedad renal crnica grave en un paciente con insuficiencia renal crnica avanzada, pero en ocasiones puede observarse en la fase de recuperacin de la diuresis luego de una perodo de anuria. - Cilindros epiteliales: Estn compuestos de epitelio tubular descamado. Su presencia se aprecia especialmente en la fase de recuperacin de la diresis luego de una falla renal aguda por necrosis tubular isqumica o txica. Son poco frecuentes. - Cilindros con inclusiones lipdicas: Se diferencian de los epiteliales por la inclusin de gotas de grasa en las clulas tubulares.

- Cilindros eritrocitarios: Se componen de eritrocitos hinchados que se adhieren a una sustancia fundamental hialina. Indican siempre el origen renal de la hematuria y por consiguiente se trata de un hallazgo muy valioso. Aparecen fundamentalmente en la Glomerulonefritis aguda y crnica y tambin en la Nefropata lpica, panarteritis nodosa, endocarditis bacteriana asociada a Glomerulonefritis.

- Cilindro leucocitario: Se producen cuando ocurre una exudacin intensa de leucocitos y al mismo tiempo se eliminan protenas por el tbulo. Su presencia tiene fundamental importancia ya que demuestra que la inflamacin es de origen renal, casi siempre, a causa de una pielonefritis.

Anlisis Clnico I

CILINDROS HIALINOS

Anlisis Clnico I

CILINDROS GRANULOSOS

CILINDROS CREOS

Anlisis Clnico I

Anlisis Clnico I

CILINDROS ERITROCITARIOS

Anlisis Clnico I

CILINDRO LEUCOCITARIO

PARASITOS

Las parasitosis urinarias, muy infrecuentes hasta la fecha en nuestro medio, estn siendo diagnosticadas cada vez con mayor frecuencia debido a los fenmenos migratorios.

Huevo de Enterobius vermicularis

Huevo de Schistosoma haematobium

Anlisis Clnico I

Trichomonas vaginalis

ESPERMATURIA
La espermaturia es la eliminacin de esperma con la orina. La existencia de algunos espermatozoides en la orina recientemente emitida no tiene importancia ni tiene valor clnico. La eliminacin de esperma que aparece despus de un acto sexual, provoca infecundidad. En la espermaturia, la orina mezclada con el esperma aparece despus de un acto sexual. Esta orina muestra en suspensin el semen eliminado en forma de bandas mucosas que sedimentan cuando la orina se deja en reposo. Normalmente el semen se acumula en la uretra prosttica antes de ser eyaculado. La eyaculacin implica el cierre del cuello vesical, la apertura del esfnter de la uretra y la contraccin de la uretra prosttica y bulbar que lo proyecta al exterior. Le espermaturia aparece en la miccin despus que el semen acumulado en la uretra, se eyacula a la vejiga por falla en el cierre del cuello vesical que no le impide el retroceso. Este fenmeno llamado retroeyaculacin, puede estar provocado por causas neurolgicas o lesin de la musculatura del cuello vesical. Las causas neurolgicas pueden ser congnitas (mieomeningocele) disfunciones vsico-uretrales neurognicas, (lesionados medulares) reseccin de los ganglios simpticos retroperitoneales de los vaciamientos ganglionares por cncer del testculo y en la simpaticectoma lumbar. Las causas orgnicas son secundarias a la seccin o reseccin de la musculatura del cuello vesical como en la adenomiomectoma y la prostatectoma.

Anlisis Clnico I

ESPERMATOZOIDES

B.- SEDIMENRO NO ORGANIZADO CRISTALES CRISTALES Se presentan normalmente en todas las orinas, lo ms importante es saber diferenciar cristales normales de la orina con aquellos que estn asociados con alguna patologa. Cuando la orina est sobresaturada con algn compuesto cristalino en particular o cuando las propiedades de solubilidad de esta se encuentran alterados se produce la formacin de los mismos. Se observan cristales amorfos de uratos, cido rico y oxalatos de calcio en orinas cidas, mientras que los de fosfatos siempre se encuentran en orinas alcalinas. Los cristales pueden tomar diferentes formas que dependen del compuesto qumico y del pH de la orina. Cristales de cido rico:Existen en diversas formas, cuadros romboidales, piedra de amolar, rosetas, pesas, barriles y bastones. Su color vara desde el rojo pardo a incoloros. Significado clnico: Su presencia en la orina no necesariamente indica un estado patolgico. Estn presentes en la orina en enfermedades como la gota, leucemia, metabolismo de las purinas aumentado, enfermedad febril aguda y nefritis crnica.

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SOLUBLES EN: NaOH diluido. INSOLUBLES EN: alcohol, cido actico, amonaco

Oxalatos de calcio: Normalmente se los encuentra en orinas cidas, aunque tambin pueden formarse en orinas con un pH ligeramente alcalino a neutro. Son incoloros, de forma octadrica o de sobre, simulan cuadrados pequeos cruzados por lneas diagonales que se intersectan. Otras veces se presentan como esferas ovales o discos bicncavos con forma de pesas de gimnasia. Significado clnico: todas las formas pueden encontrarse en un sedimento normal, dependiendo de la dieta. Su nmero se incrementa cuando la dieta es rica en cido oxlico (tomates, naranjas esprragos, y manzanas). Estos cristales estn relacionados con la formacin de clculos renales y se han visto en gran cantidad en pacientes con patologas como la diabetes mellitus, enfermedades del sistema nervioso, enfermedad heptica y enfermedad renal crnica.

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SOLUBLE: HCl cc. INSOLUBLE: cido actico.

Cristales de cido hiprico: Se observan con escasa frecuencia, pueden formarse en orinas ligeramente alcalinas o neutras pero siempre se los encuentra en orinas cidas. Son incoloros o tienen un color amarillo plido. Se los observa como prismas o placas elongadas, pueden ser tan delgados que parecen agujas y con frecuencia estn agrupados. Significado clnico: Normalmente no tienen, pero se los ha encontrado en gran cantidad en pacientes con estado febril agudo y en enfermedades hepticas.

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Cristales de fosfatos triple: Tambin llamados fosfatos amonio magnsicos, aparecen en las orinas neutras y alcalinas. Se presentan como prismas incoloros de 3 a 6 caras que con frecuencia tienen extremos oblicuos. A veces pueden precipitar formando cristales plumosos o con aspecto de helecho. Significado clnico: aparecen en procesos patolgicos como pielitis crnica, cistitis crnica, hipertrofia de prstata y en casos en que exista retencin vesical de la orina. Pueden formar clculos urinarios. Cristales de leucina: Se los encuentra en orinas cidas en forma de esferas con estriaciones concntricas. Son altamente refringentes y aparecen como cuerpos amarillentos u amarronados. Aparecen en la orina en asociacin con los cristales de tirosina. Significado clnico: responden a las mismas condiciones que los de tirosina.

SOLUBLE: cido actico y alcohol caliente. INSOLUBLE: HCl

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Cristales de cistina: Se encuentran en orinas con pH cido y se observan como lminas delgadas, incoloras y hexagonales. Significado clnico: la mayora de las veces se los observa en orinas de pacientes que padecen distintos tipos de desrdenes metablicos hereditarios.

SOLUBLE: NH3, HCl. INSOLUBLE:cido actico,alcohol, eter,acetona, agua hirviente

Cristales de tirosina:Son muy poco frecuentes y slo se observan en orinas cidas. Su color vara desde incoloros a amarillo pardo. Su forma es la de agujas muy finas y refringentes, apareciendo en grupos o acmulos. Frecuentemente se los encuentra junto con cristales de leucina. Son producto del metabolismo proteico. Significado clnico: aparecen en orinas de pacientes con necrosis o degeneramiento tisular como por ejemplo enfermedad heptica aguda, hepatitis, cirrosis, leucemia y fiebre tifoidea.

SOLUBLE: Hidroxido de amonio, HClINSOLUBLE: cido actico)

Anlisis Clnico I Cristales de colesterol:Se encuentran en orinas cidas o neutras, aparecen como lminas planas y transparentes con ngulos mellados. Muchas veces se encuentran formando una pelcula en la superficie de la orina en lugar de encontrarse en el sedimento. Significado clnico: no son comunes en la orina y siempre que estn se los relaciona con alguna patologa. Se los encuentra en enfermedades renales como en el sndrome nefrtico y predominan en la quiluria, que se produce como consecuencia de la obstruccin del flujo linftico del abdomen.

SOLUBLE: cloroformo,ter, alcohol caliente. INSOLUBLE: cido actico.

3. PROCEDIMIENTO: Con un movimiento rpido y firme eliminamos el sobrenadante y colocamos I gota del sedimento entre porta y cubre. Observamos en el microscopio a menor aumento y luego a mayor aumento.

Glbulos blancos

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Clulas epiteliales

4. CONCLUSIONES: Cuando las muestras de orina son procesadas, la probabilidad de detectar infeccin del tracto urinario, usando el examen microscpico del sedimento urinario, es alta. Estas pruebas deben ser realizadas en la primera orina de la maana, hacer una toma adecuada de la muestra y examinar el sedimento inmediatamente despus de emitida. Si se cumplen estas dos premisas, consideramos el anlisis microscpico del sedimento urinario constituyen una alternativa razonable para iniciar el manejo del paciente, mientras se obtienen los resultados del urocultivo.

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PRCTICA N 05: TOMA DE MUESTR A VSE/Hto 1. OBJETIVOS: Aprender tcnicas correctas para una buena extraccin de toma de muestra. Calcular al valor hematocrito y la velocidad de sedimentacin eritrocitica.

2. FUNDAMENTO TEORICO: MUESTRAS SANGUINEAS Es el fluido ms utilizado. Las venipunciones se deben estandarizar en trminos de la hora de recoleccin. Se debe definir muy bien el protocolo de reparacin de muestras, el tiempo de aplicacin del torniquete, la postura durante la toma de sangre, la temperatura, de transporte y el almacenamiento. Los datos obtenidos de sangre venosa no pueden compararse con los obtenidos de sangre de capilares. Los valores hematolgicos tambin dependen de la edad, sexo hbito de fumar, hora de da, posicin erecta o supina del paciente durante la toma, duracin de la estasis venosas producida por el torniquete y la administracin de lquidos y drogas. Los 3 mtodos ms importantes para obtenerlo son:

Anlisis Clnico I 1) Puncin venosa 2) Puncin capilar La sangre oxigenada por el pulmn, es bombeada por el corazn hacia todos los rganosy tejidos para cubrir las necesidades metablicas. Esta sangre arterial tiene prcticamenteuna composicin uniforme en todo el cuerpo. La venosa vara segn la actividadmetablica del rgano o tejido por lo que el punto donde se extrae la muestra puede influiren la composicin de la sangre venosa. Esta tiene menos Oxigeno que la arterial tambinse diferencia por el pH, por su concentracin en Dixido de Carbono y su hematocrito. La sangre obtenida por puncin de la piel, que a veces se denomina sangre capilarincorrectamente, es una mezcla de sangre procedente de arteriolas, vnulas y capilarespor lo tanto es en parte arterial, y en parte venosa.El aumento de presin en las arteriolas hace que la muestra sea ms rica en sangrearterial, pero contiene tambin lquido intersticial e intracelular. PREPARACIN DEL PACIENTE Ayuno del paciente: Si exceptuamos la glucosa, los triglicridos y el fsforo inorgnico, los dems elementossanguneos no se alteran significativamente despus de un desayuno normal por lo queel paciente no precisa guardar ayuno absoluto antes de la toma de sangre. Sin embargo la lipemia provocada por un aumento transitorio de los triglicridos (comoquilomicrones) despus de una comida que contengan grasa, puede provocarinterferencias con un gran nmero de determinaciones qumicas, debida a la turbidez. Lahiperlipemia postprandial transitoria suele desaparecer de 4 a 6 horas despus de lacomida. El paciente concurrir con 8 hs de Ayuno para efectuarse cualquier tipo de extraccin sangunea, siendo la excepcin la determinacin de triglicridos y perfil lipidico para las cuales el ayuno ser de 12 hs Momento para la obtencin de los especmenes sanguneos Algunas sustancias exhiben variaciones diurnas de importancia. Ej: cortisol, hierro,glucosa, triglicridos y estriol. Estas sustancias pueden variar de 30 a 50 % durante el da.

Anlisis Clnico I A menos que se especifiquen lo contrario, es mejor obtener los especimenes sanguneosde 7 a 9 hs de la maana. Las alteraciones estn asociadas a los ritmos circadianos oritmos biolgicos, que provocan cambios relacionados con el dia. Por ej. La secrecin deCatecolaminas es mayor durante el da que durante la noche, excepto en los veladores. Los ritmos biolgicos se encuentran adaptados al entorno por medio de los diferentesfactores externos que le son propios los ciclos luz/oscuridad y sueo/actividad, laalimentacin, la influencia social, las estaciones, la temperatura, la humedad y los camposmagnticos. Los sincronizadores influyen sobre el reloj interno hasta conseguir que esteoscile en funcin de los factores ambientales. La toma de los especmenes sanguneos se realizara entre las 7,00 a 9,00 de la maana, con lo cual se respetan los ciclos circadianos o ritmo biolgicos de todos los especmenes

Ejercicio antes de la toma La actividad muscular tiene efectos, tanto transitorios como de larga duracin, sobrediversos parmetros qumicos. Los efectos duraderos del ejercicio consisten enincrementos de las actividades de las enzimas musculares medidas en suero, ejemplo:creatinincinasa, aldolasa, aspartato-aminotransferasa y lactato-deshidrogenasa. Elejercicio fsico prolongado modifica los niveles de cierto nmero de las hormonassexuales. El volumen del plasma, esta disminuido significativamente despus del ejercicio, despusde tres semanas de reposo en cama y despus de exponerse al fro. El paciente no habr realizado ejercicios previo a la extraccin de la muestra sangunea Posicin del paciente Debe tranquilizarse al paciente, el estrs provocado por la flebotomia puede afectar losresultados del laboratorio como cambios en la concentracin de catecolaminas y gasesen sangre. Las modificaciones posicinales afecta: Albmina, protenas, diversasenzimas, calcio, bilirrubina, colesterol, triglicridos, angiotensina, aldosterona y renina.

Anlisis Clnico I Acostado: Existe un acomodo o distribucin hemodinmica y de otros lquidos corporales Sentado: Empieza la salida de lquido intravascular al espacio intersticial y, por lo tanto, se producehemoconcentracin La toma de la muestra se realizara si fuera posible con el paciente acostado, de no poder hacerlo la misma se har con el paciente sentado y despus de que halla descansado algunos minutos

Efecto postural en la medicin de protenas totales, albmina y calcio

Torniquete Este puede producir xtasis venoso localizado, la muestra se hace hemoconcentrada,induciendo valores errneamente altos para todos los especmenes proteicos y todas lasespecies ligadas a protenas. El mismo no debe prolongarse por mas de 1 minuto.

Anlisis Clnico I Se pide al paciente que cierre el puo, lo cual distiende las venas, el ejercicio excesivo delpuo debe evitarse, dado que el mismo puede producir elevacin en la concentracin depotasio, como en la de la LDH. Las muestras para determinar Lactato deben ser tomadassin torniquete. El uso del torniquete no debe exceder de 1 minuto y su presin no debe ser excesiva, para determinar Lactato no debe usarse el mismo

Obtencin de las muestras Puncin capilar La sangre capilar contiene ms glucosa, ms leucocitos, mas glbulos rojos yhemoglobina. Pero las plaquetas son mas bajas. Los glbulos rojos de la sangre decapilares son menos frgiles que los venosos.

Sitios de puncin subcutnea

Sitio adecuado de puncin en el taln La puncin en las reas sombreadas evita lesiones en tejidos seos

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Tcnica: 1) Seleccionar el punto para la puncin. En lactantes casi siempre se elige la superficieplantar interna o externa del taln. En nios de ms edad puede utilizarse la superficiepalmar de la ltima falange del 2,3 o 4 dedo de la mano. Otro punto es la superficieplantar del 1 dedo del pie, la cara lateral de un dedo junto a la ua y el lbulo de laoreja. La zona no debe presentar edema ni punciones anteriores. 2) Calentar la zona de la puncin con una compresa hmeda a una temperatura nosuperior a 42C con esto se aumenta el flujo sanguneo por las arteriolas y loscapilares, consiguiendo una muestra con un mayor componente arterial que resulta tilen las determinaciones de pH y gases. 3) Limpiar la zona de puncin con una solucin acuosa de alcohol al 70%. Se deja secarla piel y no se toca la zona con ningn objeto que no haya sido previamenteesterilizado. 4) La puncin se lleva a cabo con una lanceta estril, realizando un nico movimiento conel instrumento casi en paralelo con respecto a la superficie de la piel. Cuando se realizaen el taln se sujetara ste con el 1 dedo sobre el arco y con el pulgar proximal alpunto de puncin, en la zona del tobillo. Debe utilizarse una lanceta de menos de 2,4mm de longitud para no lesionar el calcneo (hueso del taln). 5) Desechar la primera gota de sangre enjugndola con una gasa estril. A continuacin,regular el flujo de sangre mediante presin con el pulgar. No hay que realizarmaniobras de ordee ya que se pueden hemolizar la muestra e introducir un exceso delquido histico. 6) Recoger la muestra en un recipiente adecuado. Para volmenes pequeos se puedenutilizar capilares desechables de vidrio de pequeo calibre y extremo abierto. El grosorpuede ser uniforme o disminuir gradualmente en uno de los extremos. Vienenheparinizados o no y con agitados magntico o no.La aspiracin de la muestra enforma oral no se recomienda en absoluto por razones de seguridad. Para sellarlos seemplean compuestos de arcilla y plstico. Las complicaciones con esta forma de obtencin de las muestras de sangre capilar sonsumamente raras.Pueden producirse cicatrices dolorosas en la zona de puncin de los talones. Por ello lapuncin debe

Anlisis Clnico I hacerse en el borde del taln y no en el centro. Tambin se han descritoosteomielitis del calcneo. Ventajas: Son relativamente fciles de obtener, es la forma preferida de sangre para los frotissanguneos. Es el mtodo de eleccin en los pacientes peditricos, especialmente enlactantes. Este tipo de puncin tambin suele utilizarse en pacientes geritricos. Laexcesiva cantidad extrada por venopuncin repetidas puede provocar anemiaespecialmente en nios prematuros. L a venopuncin de venas profundas tambin puedecondicionar, ocasionalmente: 1) paro cardiaco; 2) hemorragia; 3) trombosis; 4)constriccin venosa seguida de gangrena en las extremidades 5) lesin de rganos otejidos puncionados accidentalmente; 6) infeccin La puncin cutnea resulta til enadultos aquejados de 1) obesidad; 2) quemaduras graves; 3) tendencia tromblica. Desventajas: Solo puede obtenerse una pequea cantidad de sangre y por lo tanto no pueden hacerserepeticiones. La sangre tiende a hemolizarse o coagularse si la obtencin lleva muchotiempo, y no es recomendada en pacientes cuya resistencia a la infeccin estamarcadamente disminuida Puncin venosa La facilidad de la obtencin de la muestra venosa hace que este sea el mtodo principalde extraccin. La mayora de las sustancias analizadas se encuentran presentes en formasoluble o dispersas en forma homognea. Se evitara la inyeccin de aire en la vena,comprobando que el embolo esta hasta el fondo del barril. Tambin se evitara laextraccin en la extremidad en que haya una venoclisis o transfusin de sangre,soluciones glucosadas o con electrolitos. Siempre libere el torniquete antes de extraer laaguja esto evitara que aparezca un hematoma. Cuando se obtienen mltiples muestras,quitar el torniquete al trmino de un minuto de haber comenzado la extraccin de sangre,para evitar la hemoconcentracin. Sin embargo hay que considerar varias fuentes de error que se presentan durante lapreparacin del sujeto para la extraccin.

Anlisis Clnico I El responsable de efectuar la flebotoma debe tener los conocimientos bsicos delprocedimiento: Concentracin sangunea local es consecuencia de una aplicacinprolongada de un torniquete. Una retraccin excesiva del embolo puede contraer unavena pequea y la sangre no entra en la jeringa, esto puede remediarse haciendo unligero movimiento hacia atrs y adelante y reduciendo la fuerza de aspiracin. Tambinpuede no llegar sangre a la jeringa si se punciona solo la capa exterior de la vena, esto sesoluciona retrayendo un poco la aguja y hacindola entrar de nuevo, esto puede provocarhematoma, si se nota indicios de este se debe retirar la aguja y aplicar una presin localde 10 minutos, no masajear. Transfusin de la vena, esto tambin causa de que no salgasangre por haberla atravesado, en este caso se retira la aguja un poco, se aspirasuavemente para ver si entonces sale. Sincope, su mejor tratamiento es poner al pacienteen decbito, si ya esta darle atencin medica. Se realiza con agujas que pueden estarconectadas a jeringas o tubos de ensayo de vidrio con un vaci determinadoLas agujas y jeringas descartables eliminan el riesgo de transmisin de hepatitis, siempreque se realice la extraccin con la tcnica adecuada y se elimine las agujas en la formacorrecta en descartadores apropiados. Para evitar la puncin accidental del operador no debe tratar de volver a encapuchar laaguja nuevamente. Los tubos deben contener distintos tipos de anticoagulantes segn la determinacin quese debe practicar. A partir de sangre sin anticoagulante se obtiene suero, si tieneanticoagulante se obtiene plasma. Existen tubos separadores de suero que se empleanpara obtener el suero a partir de sangre total. Un tubo de vidrio al vaci sirve como sistema cerrado. Durante el centrifugado la sangrese hace pasar por un tubo de gel de slice localizado en la base del tubo, que modificatemporalmente su viscosidad. El peso especifico del gel es intermedio entre el de los hemates y el del suero, de formaque el gel va subiendo y se sita entre los hemates alojados en el fondo y la capasuperior de suero. Finalmente se endurece y forma una barrera inerte. En estos tubos lamuestra puede ser transportada sin que se altere el estado de la mezcla Tambin haytubos peditricos basados en el mismo procedimiento. Las ventajas de los tubosseparadores de suero son: 1) su fcil manejo. 2) Un tiempo de procesamiento ms cortopor la activacin del cogulo. 3) La

Anlisis Clnico I obtencin de una mayor cantidad de suero. 4) Laposibilidad de proceder a la centrifugacin en una sola fase. 5) La utilizacin del mismotubo en el que se ha extrado la muestra. 6) Una fcil identificacin

Venas superficiales del brazo 1Cefalica; 2 Baslica; 3 Media Baslica; 4 Mediana Ceflica; 5 Radial accesoria; 6 Cubital superficial; 7 radial superficial

Tcnica: 1) Se debe tranquilizar al paciente, eliminando su tensin. El estrs afecta la secrecinde hormonas suprarrenales. La ansiedad conduce a hiperventilacin ante de laextraccin provoca cambios en el equilibrio cido-base; aumento en la concentracinde lactato y en la concentracin de los cidos grasos no eterificados.

Anlisis Clnico I 2) Se ha de colocar adecuadamente al paciente para tener acceso fcil y cmodo a lafosa radial. 3) Hay que preparar todo el material necesario para la extraccin. 4) Se aplica un torniquete. La incorrecta aplicacin del torniquete y el ejercicio del puopueden conducir a resultados errneos. Para lactato deben tomarse sin torniquetepor que la rigidez aumenta el valor. Las prolongaciones del tiempo del torniquetepuedeinducir cambios significativos en varios analitos especialmente enzimas y protenas. No hay que dejar un torniquete ms de 1 minuto. Se solicita que cierre el puopara que las venas resulten ms palpables. 5) Se selecciona la vena. Se prefiere la cubital interna y la ceflica. Tambin puedenutilizarse las venas de las muecas, el tobillo y la mano. Si ya existe un catterintravenoso en un brazo, se utilizara el otro para la extraccin para evitar dilucionescon el contenido del catter. 6) Se limpia la zona de venopuncin con un algodn con solucin a de alcohol al 70%.Se comienza en el punto de la puncin y se prosigue la limpieza hacia afuera, siguiendo un movimiento en espiral. Se deja secar la zona y no se toca con ningn objeto que no haya sido esterilizado previamente. 7) Se fija firmemente la vena tanto por encima, como por debajo del lugar de puncin. 8) Se realiza la venopuncin a) se penetra a travs de la piel con la aguja formando un ngulo de aproximadamente 15 con el brazo y con el bisel hacia arriba se sigue la direccin de la vena. La aguja debe ser calibre adecuado 0.8 por que es el dimetro del glbulo rojo y estos no se rompen produciendo hemlisis. 9) Cuando la sangre comience a fluir, se suelta el torniquete. 10) Una vez que se haya extrado toda la muestra, hay que indicar al paciente que relaje el puo y que no bombee con la mano. 11) Se coloca un algodn sobre el punto de puncin, se extrae la aguja y se ejerce presin sobre la zona. 12) Se mezclan los tubos, si la extraccin se hizo con jeringa se transfiere la sangre al tubo. Eliminando la aguja en el descartador correspondiente y dejar fluir la muestra por las paredes del tubo para evitar que los glbulos rojos se rompan y no seproduzca hemlisis.

Anlisis Clnico I 13) Verificar el estado del paciente, si se ha mareado o si la hemorragia est controlada.Las jeringas plsticas descartables deben ser de un material que no libere gas.

VSE o Eritrosedimentacin Es una prueba diagnstica de laboratorio utilizada frecuentemente en medicina. Consiste en medir la velocidad con la que sedimentan (decantan, caen) los glbulos rojos o eritrocitos de la sangre, provenientes de una muestra de plasma sanguneo(Citratado o con EDTA) , en un periodo determinado de tiempo, habitualmente una hora. Esta prueba y su relacin con la medicina fueron descubiertos y desarrollados en ao 1897 por un doctor Polaco Edmund Biernacki. Para la prueba, la sangre no debe coagularse, motivo por el cual, la sangre extrada se le adiciona una sustancia anticoagulante (la ms comn es citrato sdico al 3,8 % en proporcin exacta de 1 parte de citrato por 3 de sangre, es decir, al 1/4). La sangre, homogeneizada, se carga en una pipeta, se la acomoda en un soporte y a determinado tiempo (60 minutos si est la pipeta a 90 grados de la mesa donde se apoya el soporte, o menos tiempo cuanto menor sea el ngulo entre la mesa y la pipeta; hay soportes especiales que permiten inclinaciones controladas para obtener ngulos diferentes a 90 grados).

Anlisis Clnico I Al cabo del tiempo establecido, se procede a leer cuantos milmetros han sedimentado (bajado los hemates). La sedimentacin eritrocitica se realiza en tres etapas: Hemaglutinacin: Es la tendencia de los hemates a formar agregados en forma de "pilas de moneda". Estos sedimentan de forma muy lenta por lo que van a determinar la velocidad de todo el proceso Sedimentacin: Desplazamiento de los hemates hacia el fondo de la pipeta a velocidad constante acmulo o depsito en el fondo. El principio fsico de esta prueba se basa en la Ley de Stokes considerando los hemates como esferas suspendidas en un medio infinito. Factores: 1. Formacin de Rouleraux 2. Concentracin de fibringeno en el plasma 3. Concentracin de globulinas y en el plasma Valores de referencia: Varn: 0 15 mm/h Mujer: 0 19 mm/h HEMATOCRITO El hematocrito es el porcentaje ocupado por glbulos rojos del volumen total de la sangre. Los valores medios varan entre 42%-52% en los hombres, y 37%-47% en las mujeres. Estas cifras pueden cambiar de acuerdo a diversos factores fisiolgicos, como la edad y la condicin fsica del sujeto. Es una parte integral del hemograma, junto con la medicin de la hemoglobina, y el conteo de leucocitos y plaquetas.

Anlisis Clnico I

Valores bajos de hematocrito La disminucin de glbulos rojos en la sangre es una anemia. Se puede relacionar con diferentes condiciones, como hemorragia o leucemia. Hay numerosos factores que pueden contribuir a desarrollar una anemia, como la baja en la ingesta de hierro, o pacientes con enfermedad renal crnica, que no generansuficienteeritropoyetina para glbulos rojos en la mdula sea Valores altos de hematocrito Se pueden asociar a deshidratacin o hipoxia. Patologas como la policitemia vera consisten en una desmedida produccin de glbulos rojos. En casos de enfermedad pulmonar obstructiva crnica, la hipoxia genera un aumento en la produccin de eritropoyetina por el rin, lo que puede resultar en un hematocrito alto. Valores normales Varn: 40 54 % Mujer: 37 47% Mtodos de medicin estimular la produccin de

Anlisis Clnico I El hematocrito (PCV) se puede determinar por centrifugacin heparinizada de sangre en un tubo capilar (tambin conocido como un tubo de microhematocrito) a 10.000 rpm durante cinco minutos. [ 2 ] Esto separa la sangre en capas. El volumen de concentrado de glbulos rojos, dividido por el volumen total de la muestra de sangre da el PCV. Debido a que un tubo se utiliza, esto puede ser calculada mediante la medicin de las longitudes de las capas. Con equipos de laboratorio modernos, el hematocrito se calcula por un analizador automtico y no se mide directamente. Se determina multiplicando el recuento de glbulos rojos por el volumen corpuscular medio. El hematocrito es un poco ms preciso como el PCV incluye pequeas cantidades de plasma de la sangre atrapada entre los glbulos rojos. Un hematocrito calcula como un porcentaje puede ser derivado al triplicar la hemoglobina concentracin en g / dl y colocar las unidades. [ 3 ] El nivel de hemoglobina es la medida utilizada por los bancos de sangre . [ aclaraciones necesarias ] [ cita requerida ] Se han dado casos en los que la sangre para la prueba se ha elaborado sin querer prximo a una lnea intravenosa que era infundir concentrado de hemates o lquidos. En estas situaciones, el nivel de hemoglobina en la muestra de sangre no ser el verdadero nivel para el paciente ya que la muestra que contienen una gran cantidad de material de infusin en lugar de lo que se diluye en la sangre total en circulacin. Es decir, si glbulos rojos se estn suministrando, la muestra contiene una gran cantidad de las clulas y el hematocrito se artificialmente muy alto. Por el contrario, si u otros fluidos salinos se estn suministrando, la muestra de sangre se diluye y el hematocrito se artificialmente bajos. 3. MATERIALES: Agujas n 21 Anticoagulantes Algodn alcohol Centrifuga Liga o torniquete Capilares

4. PROCEDIMIENTO:

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Extraccin de sangre por puncion venosa

Colocamos la sangre en capilares

Llevamos los capilares a la centrifuga a una velocidad de 3500 rpm

Mediante un cuadro de referencia medimos la VSE y el hematocrito.

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5. CONCLUSIONES: Antes de acceder a puncionar se debe considerar una serie de parmetros relevantes para el xito de la puncin, tales como: Las condiciones fsicas y psicolgicas que trae el paciente, considerar un tiempo adecuado para explicar el procedimiento (lo que es esencial para disminuirla ansiedad), considerar las condiciones en que ser tomada la muestra, sentado o en camilla, necesidad de pedir ayuda antes de iniciar el procedimiento, verificar que en el sitio a puncionar se encuentra indemne y lejos de focos de infeccin. ElVSE consiste en medir la que sedimentan (decantan, caen) velocidad con la los glbulos rojos

o eritrocitos de la sangre, provenientes de una muestra de plasma sanguneo (Citratado o con EDTA), en un periodo determinado de tiempo, habitualmente una hora. El hematocrito es el porcentaje ocupado por glbulos rojos del volumen total de la sangre.

6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS: http://www.monografias.com/trabajos5/uroanalisis/uroanalisis.shtml#_Toc48349467

5 http://biblioteca.duoc.cl/bdigital/Documentos_Digitales/600/610/39579.pdf http://www.urologiacolombiana.com/revistas/abril-2007/005.pdf http://es.scribd.com/doc/8488378/Analisis-de-Orina-Interpretacion http://www.zubizarreta.org.ar/docs/MUESTRAS2.pdf