Rede PARF Documento Tcnico N 11

Rede Pan-Americana da Harmonizao de Regulamentao Farmacutica

Grupo de Trabalho em Boas Prticas de Laboratrio

Boas prticas da OMS para laboratrios de microbiologia farmacutica

Traduzido de: World Health Organization. Annex 2: WHO good practices for pharmaceutical microbiology laboratories. En: WHO Expert Committee on Specifications for Pharmaceutical Preparations: forty-fifth report. Geneva: World Health Organization; 2011. (WHO technical report series; 961).

Rede PARF Documento Tcnico N 11

Rede Pan-Americana de Harmonizao de Regulamentao Farmacutica Grupo de Trabalho em Boas Prticas de Laboratrio

Boas prticas da OMS para laboratrios de microbiologia farmacutica

Traduzido de: World Health Organization. Annex 2: WHO good practices for pharmaceutical microbiology laboratories. En: WHO Expert Committee on Specifications for Pharmaceutical Preparations: forty-fifth report. Geneva: World Health Organization; 2011. (WHO technical report series; 961).

Washington, DC Janeiro 2013

Edio original em ingls: Annex 2: WHO good practices for pharmaceutical microbiology laboratories. En: WHO Expert Committee on Specifications for Pharmaceutical Preparations: forty-fifth report. Geneva: World Health Organization; 2011. (WHO technical report series; 961). World Health Organization, 2011 Organizao Mundial da Sade Boas prticas da OMS para laboratrios de microbiologa farmacutica. Washington, DC: OPS, 2012. (Rede PARF Documento Tcnico N 11).

Organizao Mundial da Sade, 2012. Todos os direitos reservados. A edio em portugus foi realizada pela Organizao Pan-Americana da Sade, rea de Sistemas de Salud basados en Atencin Primaria de Salud. A Organizao Pan-Americana da Sade aceita pedidos de permisso para reproduo de suas publicaes, parcial ou integralmente. Os pedidos e consultas devem ser enviados para Editorial Services, Area of Knowledge Management and Communications (KMC), Panamerican Health Organization, Washington, D.C., Estados Unidos (correio eletrnico: pubrights@paho.org). As publicaes da Organizao Pan-Americana da Sade contam com a proteo de direitos autorais segundo os dispositivos do Protocolo 2 da Conveno Universal de Direitos Autorais. As designaes empregadas e a apresentao do material na presente publicao no implicam a expresso de uma opinio por parte da Organizao Pan-Americana da Sade no que se refere situao de um pas, territrio, cidade ou rea ou de suas autoridades ou no que se refere delimitao de seus limites ou fronteiras. A meno de companhias especficas ou dos produtos de determinados fabricantes no significa que sejam apoiados ou recomendados pela Organizao Pan-Americana da Sade em detrimento de outros de natureza semelhante que no tenham sido mencionados. Salvo erros e omisses, o nome dos produtos patenteados distinguido pela inicial maiscula. Todas as precaues razoveis foram tomadas pela Organizao Pan-Americana da Sade para confirmar as informaes contidas na presente publicao. No entanto, o material publicado distribudo sem garantias de qualquer tipo, sejam elas explcitas ou implcitas. A responsabilidade pela interpretao e uso do material cabe ao leitor. Em nenhuma hiptese a Organizao Pan-Americana da Sade dever ser responsabilizada por danos resultantes do uso do referido material.

Sumrio
Agradecimentos............................................................................................................................ v Antecedentes .............................................................................................................................. vi Histrico...................................................................................................................................... vii Introduo e escopo do documento............................................................................................viii Glossrio...................................................................................................................................... ix Boas prticas da OMS para laboratrios de microbiologia farmautica.......................................1 1. Pessoal..............................................................................................................................1 2. Ambiente ...........................................................................................................................1 3. Validao dos mtodos .....................................................................................................4 4. Equipamento......................................................................................................................5 5. Reagentes e meios de cultura...........................................................................................7 6. Materiais de referncia e culturas de referncia ............................................................10 7. Amostragem.................................................................................................................... 11 8. Manuseio e identificao das amostras.......................................................................... 11 9. Descarte de resduos contaminados...............................................................................12 10. Garantia da qualidade dos resultados e controle da qualidade do desempenho............12 11. Procedimentos do teste...................................................................................................12 12. Relatrios de ensaio........................................................................................................12 Referncias...........................................................................................................................13 Apndice 1: Exemplos de reas (ambientes) em que as atividades operacionais podem ser realizadas .....15 Apndice 2: Exemplos de manuteno dos equipamentos............................................................................17 Apndice 3: Exemplo de intervalos de calibrao para diferentes equipamentos.......................................... 19 Apndice 4: Exemplos de qualificao dos equipamentos e monitoramento.................................................21 Apndice 5: Uso geral das culturas de referncia...........................................................................................23

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Agradecimentos
A verso em Portugus do documento WHO Technical Report Series, No. 961, 2011, Anexo 2 foi realizada pelo grupo do Brasil ANVISA, INCQS, e FUNED: Maria do Ceu Borralho e Albuquerque - Agencia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA) Reginelena Ferreira da Silva - Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade (INCQS) Amlia Soares Santana - Fundao Ezequiel Dias (FUNED) Roberta de Matos Caetano - Fundao Ezequiel Dias (FUNED)

Integrantes do Grupo de Trabalho de Boas Prticas de Laboratrio (GT/BPL):

Membros titulares
Mara Gloria Olate, LNC - ISP/Chile, Coordenadora Ofelia Villalba, CNCC - INS/Peru Nilka M. Guerrero, IEA/Panam Lucette Cargill, CRDTL/Jamaica Sigrid Mathison, MSP/Uruguai Damian Cairatti, USP/United States Pharmacopeia Thomas Schultz, FIFARMA

Membros alternos
Olga Gruc, INAME-ANMAT/Argentina Ana Lara Sterling, CECMED/Cuba

Observadores
Rosalba Alzate, Univ. de Antioquia/Colmbia Ruben Szyszkowsky, Univ. de Buenos Aires/Argentina Carlos Saldarriaga Alzate, Univ. de Antioquia/Colmbia Milagros Real Prez, Instituto Nacional de Salud/Peru Catalina Massa, Univ. de Crdoba/Argentina

Secretariado
Jos M. Parisi OPS-OMS/Washington, DC

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Antecedentes
O Grupo de Trabalho de Boas Prticas de Laboratrio (GT/BPL) criado em junho de ano 2005 por recomendao da IV Conferncia Pan-Americana para a Harmonizao da Regulamentao Farmacutica (Rede PARF), tem trabalhado desde ento para o fortalecimento do desempenho dos laboratrios de controle, a fim de assegurar que os medicamentos cumpram as normas internacionais de qualidade e sejam seguros e eficazes. O cumprimento das recomendaes providas pela OMS proporciona a harmonizao das boas prticas, a cooperao entre laboratrios e o reconhecimento mtuo de resultado. Alm disso, permite que os laboratrios alcancem a pr-qualificao OMS, pela qual passam a ser laboratrios de referncia para as Agncias das Naes Unidas que requeiram seus servios.

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Histrico
O Comit de Especialistas da OMS sobre Especificaes para Preparaes Farmacuticas adotou em 2009 uma verso revisada das Good practices for pharmaceutical quality control laboratories (1). Durante as inspees de pr-qualificao, os inspetores haviam notado que alguns dos textos precisavam de um guia adicional, especialmente com foco em microbiologia. Em face ao disposto, o Comit de Especialistas recomendou que a Secretaria da OMS elaborasse um novo texto sobre boas prticas farmacuticas para os laboratrios de microbiologia. O texto a seguir se prope a atender as especificaes deste tipo de laboratrio.

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Introduo e escopo do documento

Os laboratrios de microbiologia farmacutica podem estar envolvidos em: teste de esterilidade; deteco, isolamento, enumerao e identificao de micro-organismos (bactrias, leveduras e bolores), testes de endotoxinas bacterianas em diferentes materiais (por exemplo, matrias primas, gua), produtos, superfcies, vesturio e ambiente, e ensaio utilizando micro-organismos como parte do sistema teste. Essas diretrizes dizem respeito a todos os laboratrios de microbiologia envolvidos nas atividades mencionadas anteriormente, sejam elas independentes, um departamento ou unidade de uma instalao de fabricao de produtos farmacuticos. Essas diretrizes so baseadas e complementam os requisitos descritos nos documentos Good practices for pharmaceutical quality control laboratories (1); General guidelines for the establishment, maintenance and distribution of chemical reference substances. Revision (2); The International Pharmacopoeia,Fourth Edition (3); First Supplement to The International Pharmacopoeia, Fourth Edition (4); e ISO/IEC 17025 (5).

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Glossrio
calibrao Conjunto de operaes que estabelece, sob condies especficas, a relao entre os valores indicados por um instrumento ou sistema de medio (especialmente de pesagem), registro e controle ou os valores representados pela medida de um material, com os correspondentes valores conhecidos de um padro de referncia. Devem ser estabelecidos os limites de aceitao para os resultados da medio. cepas de referncia Micro-organismos definidos pelo menos para o gnero e espcie, catalogadas e descritas de acordo com suas caractersticas e, de preferncia que ateste a origem (6). Normalmente so obtidos a partir de uma coleo reconhecida nacional ou internacionalmente. culturas de referncia Termo coletivo para as cepas de referncia e os estoques de referncia. cultura de trabalho Subcultura primria a partir de uma cultura estoque de referncia (6). especificidade (seletividade) A capacidade do mtodo para detectar o(s) micro-organismo(s) especfico(s) que pode(m) estar presente(s) na amostra de teste. estoque de referncia Um conjunto de culturas distintas idnticas obtidas por uma subcultura nica a partir da cepa de referncia (6). limite de deteco O menor nmero de micro-organismos que podem ser detectados, mas em nmeros que no podem ser estimados com exatido. limite de quantificao Aplicados a testes microbiolgicos quantitativos. O menor nmero de micro-organismos dentro de uma variabilidade definida que pode ser determinada sob condies experimentais do mtodo em avaliao. material de referncia Material suficientemente homogneo e estvel com relao a uma ou mais propriedades especficas, as quais foram estabelecidas para uso definido em um processo de medio. material de referncia certificado Material de referncia, caracterizado por um procedimento metrologicamente vlido para uma ou mais propriedades especificas acompanhado por um certificado que fornece o valor da(s) propriedade(s) especifica(s), sua(s) incerteza(s) associada(s) e uma declarao da rastreabilidade metrolgica. O limite de aceitao dos resultados deve ser estabelecido. mtodo de referncia Mtodo que foi validado como sendo adequado ao uso e que pode ser comparado a um mtodo alternativo.

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preciso O grau de concordncia entre os resultados individuais. repetitividade Grau de concordncia entre os resultados de medies sucessivas da mesma medida e nas mesmas condies de medio (Adaptado da ISO). reprodutibilidade Reprodutibilidade expressa a preciso entre laboratrios. robustez Capacidade do processo para fornecer os resultados analticos de aceitvel exatido e preciso sob uma variedade de condies. sensibilidade A frao do nmero total de culturas positivas ou colnias corretamente identificadas no ensaio presuntivo (7). validao Ao de provar, de acordo com os princpios dos guias de boas prticas da qualidade diretrizes e regulamentos (GxP - Boas Prticas), que qualquer procedimento, processo, equipamento (incluindo o software ou hardware utilizado), material, atividade ou sistema so adequados para um uso pretendido. verificao Aplicao de mtodos, procedimentos, testes e outras avaliaes, alm do monitoramento para determinar a conformidade com os princpios de Boas Prticas de Laboratrio (GxP).

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Boas prticas da OMS para laboratrios de microbiologia farmautica

1. Pessoal
1.1 Os testes microbiolgicos devem ser realizados e supervisionados por uma pessoa experiente, qualificada em microbiologia ou equivalente. O pessoal deve ter formao bsica em microbiologia e experincia prtica relevante antes de ser autorizado a executar o trabalho abrangido pelo escopo analtico microbiolgico. Descries atualizadas do trabalho devem ser disponibilizadas para todo o pessoal envolvido nos testes ou calibraes, validaes e verificaes. O laboratrio deve manter registros de todo o pessoal tcnico, descrevendo as suas qualificaes, treinamento e experincia. Caso o laboratrio inclua opinies e interpretaes dos resultados dos testes em relatrios, isso deve ser feito por pessoal autorizado, com experincia adequada e conhecimentos relevantes incluindo, por exemplo, conhecimento dos requisitos regulatrios, tecnolgicos, critrios de aceitao e aplicao especfica. A gerncia do laboratrio deve garantir que todo o pessoal tenha recebido treinamento adequado para o desempenho competente de ensaios e operao de equipamentos. Isto inclui treinamento em tcnicas bsicas, por exemplo, tcnica de plaqueamento, contagem de colnias, tcnica assptica, preparao de meios de cultura, diluies em srie e tcnicas bsicas em identificao, com critrio de aceitao se for o caso. O pessoal somente pode realizar ensaios se for reconhecidamente competente para faz-lo ou se estiver sob superviso adequada. A competncia deve ser monitorada continuamente com previso de reciclagem quando necessrio. Quando um mtodo ou tcnica no for de uso constante, pode ser necessrio a verificao do desempenho do pessoal previamente realizao dos ensaios. Em alguns casos, pode ser mais apropriado capacitar o analista para a realizao de uma tcnica ou para o uso de um instrumento especfico, ao invs de capacit-lo execuo de um mtodo analtico completo. Em algumas situaes aceitvel relatar a competncia para a realizao de uma tcnica geral ou instrumento utilizado ao invs de mtodos especficos. O pessoal deve ser treinado em procedimentos necessrios para a conteno de micro-organismos dentro das instalaes do laboratrio. O pessoal deve ser treinado para manusear com segurana os micro-organismos.

1.2

1.3

1.4

1.5 1.6

2. Ambiente
2.1 Dependncias 2.1.1 O laboratrio de microbiologia e certos equipamentos que do suporte (por exemplo, autoclaves e vidrarias) devem ser de uso especfico e separados das outras reas, especialmente das reas de produo. Laboratrios de Microbiologia devem ser projetados para atender s operaes a serem realizadas nos mesmos. Devem ter espao suficiente para todas as atividades a fim de prevenir contaminao e contaminao cruzada. Devem ter espao adequado para guarda de amostras, micro-organismos de referncia, meios de cultura

2.1.2

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(se necessrio, com refrigerao) , anlises e registros. Devido natureza de alguns materiais (por exemplo, meios estreis, micro-organismos de referncia ou culturas incubadas) necessrio separar os locais de armazenamento. 2.1.3 Os laboratrios devem ser adequadamente projetados e devem levar em conta a adequao dos materiais de construo para permitir limpeza adequada, desinfeco e minimizar os riscos de contaminao. Deve haver fornecimento de ar separado para laboratrios e para reas de produo. Unidades de gerenciamento e tratamento de ar, incluindo controle de temperatura e umidade, quando necessrios, devem ser instalados separadamente para os laboratrios de microbiologia. O ar fornecido ao laboratrio deve ser de qualidade adequada e no deve ser uma fonte de contaminao. O acesso ao laboratrio de microbiologia deve ser restrito ao pessoal autorizado. O pessoal deve ser informado quanto ao que segue: procedimentos apropriados para entrada e sada, incluindo a vestimenta e entrada de materiais; destinao de uso para reas especficas; restries impostas ao trabalho dentro dessas reas; as razes para a existncia de tais restries, e nveis de conteno adequados. 2.1.6 Atividades do laboratrio, tais como a preparao da amostra, preparao de meio de cultura, equipamentos e contagem de micro-organismos, devem ser realizadas em espaos ou pelo menos em tempos diferentes, de modo a minimizar os riscos de contaminao cruzada, resultados falso-positivos e falso-negativos. Onde so utilizadas reas no exclusivas, os princpios de gesto de risco devem ser aplicados. Testes de esterilidade devem ser realizados sempre em uma rea especfica. Deve-se considerar a adequao da planta para a classificao das reas e operaes a serem desempenhadas dentro do laboratrio de microbiologia. A classificao deve ser baseada na criticidade do produto e operaes realizadas na rea. Deve- se realizar o teste de esterilidade sob a mesma classe utilizada para operaes estril/ assptica de produo. O Apndice 1 mostra as recomendaes para as reas de classificao. Em geral, equipamentos de laboratrio no devem ser rotineiramente movidos entre reas de diferentes classes de limpeza para evitar contaminao cruzada. Equipamento de laboratrio de microbiologia no deve ser utilizado fora da rea, a menos que haja precaues especficas para prevenir a contaminao cruzada.

2.1.4

2.1.5

2.1.7

2.1.8

2.2

Monitoramento ambiental do laboratrio 2.2.1 Quando necessrio (por exemplo, em reas de teste de esterilidade) deve haver um programa de monitoramento ambiental apropriado que cubra, por exemplo, a utilizao de monitoramento do ar ativo (impactao do ar), exposio de placas ou placas de contato, temperatura e diferencial de presso. Devem ser definidos limites de alerta e ao. Deve- se identificar as tendncias dos resultados do monitoramento ambiental.

2.3

Limpeza, Desinfeco e Higiene

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2.3.1 2.3.2 2.3.3 2.4

Deve haver um programa de limpeza e desinfeco documentado. Os resultados do monitoramento ambiental devem ser considerados quando relevantes. Deve haver um procedimento para lidar com os derramamentos. Instalaes adequadas para lavagem e desinfeco das mos devem estar disponveis.

Instalaes do teste de esterilidade 2.4.1 Instalaes utilizadas para a realizao de testes de esterilidade devem atender a requisitos especficos a fim de garantir a integridade dos testes. WHO good manufacturing practices (GMP) for sterile pharmaceutical products (8) exige a realizao de testes de esterilidade e traz requisitos especficos. Essa seo fornece detalhes dos requisitos de instalao da sala limpa para o teste de esterilidade. O teste de esterilidade deve ser realizado sob condies asspticas para o qual deve estabelecer padres de qualidade do ar assptico requerido para a fabricao de produtos farmacuticos. As premissas, servios e equipamentos devem estar sujeitos a processos de qualificaes adequados. O teste de esterilidade deve ser efetuado dentro de uma zona de fluxo de ar unidirecional protegido de classe A ou cabine de segurana biolgica (certificada), que deve estar localizada dentro da sala limpa circundada com classe B. Como alternativa, os testes podem ser efetuados dentro de um isolador de barreira. Deve-se tomar cuidado com o projeto do layout de instalaes e padres do fluxo de ar ambiente, para garantir que os padres de fluxo de ar unidirecional no sejam interrompidos. A classificao de salas limpas e equipamentos de tratamento de ar das instalaes do teste de esterilidade devem ser requalificados, pelo menos anualmente por pessoal competente do laboratrio ou contratado. Deve-se respeitar os limites de partculas no-viveis e viveis do ambiente, executar a verificao da integridade do filtro de ar de alta eficincia de partculas (HEPA) e fluxos de ar ambiente. De qualquer modo uma frequncia alternativa do monitoramento pode ser justificada com base no Quality Risk Management (QRM). O mapeamento dos locais dos pontos de amostragem para monitoramento de rotina deve ser documentado, bem como a durao da exposio e a freqncia de todos os tipos de monitoramento ambiental microbiolgico devem ser especificados em procedimentos descritos. O ar para as instalaes de classe A e B deve ser fornecido atravs de filtros terminais HEPA.

2.4.2

2.4.3

2.4.4

2.4.5

2.4.6. Instrumentos indicadores, alarmes para fluxos de ar e diferenciais de presso devem ser providenciados. (GMP: Heating, ventilation and air-conditioning systems for nonsterile pharmaceutical dosage forms (8); and GMP for sterile pharmaceutical products) (8). 2.4.7 As leituras de presso da sala devem ser realizadas e registradas atravs de equipamentos montados externamente, a menos que um sistema validado de monitoramento contnuo da presso esteja instalado. Deve- se realizar e registrar as leituras, no mnimo, para as entradas do operador na sala de teste. Os equipamentos de presso para as reas devem ser identificados e suas especificaes definidas. A entrada para a sala limpa deve ser atravs de sistema de antecmaras e oferecer disponibilidade de ambiente para a troca, onde os operadores vistam roupas adequadas para a rea limpa. A ltima antecmara para troca da vestimenta deve ter quando em repouso, a mesma classe da sala de anlise. O ambiente para troca da vestimenta
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deve ser de tamanho adequado para facilitar a troca. Deve existir demarcao clara das diferentes reas. 2.4.9 O vesturio dos operadores para o teste de esterilidade deve estar de acordo com os princpios da seo 10 do documento WHO GMP for sterile pharmaceutical products (8). Os operadores devem ser treinados e certificados em procedimentos de paramentao e os registros de treinamento devem ser mantidos.

2.4.10 As conexes e acabamentos das instalaes devem cumprir seo 11 da WHO GMP for sterile pharmaceutical products (8). 2.4.11 O monitoramento ambiental microbiolgico deve refletir a instalao utilizada ( sala ou isolador) e incluir a combinao dos mtodos de amostragem do ar e superfcie como: amostragem ativa do ar; exposio de placas; superfcie de contato; replicata de placas para deteco e contagem de micro-organismos (RODAC), swabs ou filmes flexveis; luvas dos operadores. O Monitoramento ambiental microbiolgico da rea de teste de esterilidade deve ser realizado durante cada sesso de trabalho nas condies de funcionamento (dinmico). As especificaes frente a contaminao microbiana devem estar descritas, incluindo os limites apropriados de alerta e ao. Os limites microbiolgicos para o monitoramento ambiental so dadas no WHO GMP for sterile pharmaceutical products (8).

3. Validao dos mtodos

3.1 Os testes farmacopicos normalizados so considerados validados. No entanto, o mtodo especfico a ser utilizado pelo laboratrio precisa ser demonstrado como adequado ao uso pela recuperao de bactrias, leveduras e bolores na presena do produto especfico. O laboratrio deve demonstrar que o critrio de desempenho do mtodo normalizado atendido, antes de introduzi-lo na rotina (mtodo de verificao) e que a especificao do mtodo adequada para o produto (a demonstrao da adequao do mtodo inclui o uso de controles positivos e negativos). Os mtodos de ensaio no baseados em compndios ou outras referncias reconhecidas devem ser validados antes da utilizao. A validao deve incluir, quando apropriado, determinao da exatido, preciso, especificidade, limite de deteco, limite de quantificao, linearidade e robustez. Efeitos potencialmente inibitrios a partir da amostra deve ser levado em conta quando testar diferentes tipos de amostras. Os resultados devem ser avaliados com mtodos estatsticos adequados, por exemplo, conforme descritos em farmacopias nacionais, regionais ou internacionais.

3.2

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4. Equipamento
Cada item de equipamento, instrumento ou outro dispositivo utilizado para testes, verificao e calibrao deve ser univocamente identificado. Como parte do sistema da qualidade, o laboratrio deve ter documentado um programa de qualificao, calibrao, verificao do desempenho, manuteno e um sistema de monitoramento de uso dos equipamentos. 4.1 Manuteno do equipamento 4.1.1 A manuteno de equipamentos essenciais devem ser realizadas em intervalos pr-determinados de acordo com um procedimento documentado. Registros detalhados devem ser mantidos. (Para exemplos de manuteno de equipamentos e intervalos ver Apndice 2).

4.2

Qualificao 4.2.1 Para qualificao dos equipamentos ver seo 8 e 12 em Good practices for pharmaceutical quality control laboratories (1).

4.3

Calibrao, verificao do desempenho e monitoramento de uso 4.3.1 4.3.2 A data de calibrao e manuteno e a data em que a recalibrao realizada deve ser claramente indicada na etiqueta anexada ao instrumento. A frequncia das calibraes e as verificaes de desempenho devem ser determinadas pelo histrico documentado do equipamento e baseadas na necessidade, tipo e desempenho anterior do equipamento. Os intervalos entre calibrao e verificao devem ser menores quando o equipamento mostrar tendncia para sair do limite de aceitao (para exemplos de intervalos para verificao da calibrao para diferentes equipamentos do laboratrio, ver Apndice 3; e para qualificao e monitoramento de equipamentos, ver Apndice 4). O desempenho dos equipamentos deve estar conforme critrios de aceitao pr-definidos. 4.3.3 Dispositivos para medio de temperatura 4.3.3.1 Quando a temperatura possuir efeito direto sobre o resultado de uma anlise, ou for critica para o desempenho correto do equipamento, os dispositivos medidores de temperatura, devem ser de qualidade adequada para alcanar a exatido necessria (e.x termmetros liquido de vidro, termopares e termmetros com resistncia de platina, usados em incubadoras e autoclaves). A calibrao dos dispositivos deve ser rastreavl a padres nacionais e internacionais de temperatura.

4.3.3.2

4.3.4 Incubadoras, banhos de gua (banhos-maria) e fornos A estabilidade da temperatura, a uniformidade de distribuio da temperatura e o tempo necessrio para atingir condies de equilbrio em incubadoras, banhos de gua, fornos e salas com temperaturas controladas devem ser inicialmente estabelecidos e documentados, principalmente em relao ao uso normal do equipamento (por exemplo: posio, espao, e altura das pilhas das placas de petri). A manu-

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teno das caractersticas registradas durante a validao inicial dos equipamentos deve ser verificada e registrada aps cada reparo ou modificao significativa. As temperaturas de operao de cada equipamento devem ser monitoradas e os registros armazenados. A utilizao do equipamento deve ser considerada ao determinar quais controles de temperatura so necessrios. 4.3.5 Autoclaves, incluindo preparadores de meios 4.3.5.1 Autoclaves devem ser capazes de atender o tempo e a temperatura especificados no procedimento; o monitoramento da presso por si s no aceitvel. Sensores utilizados para controle ou monitoramento do ciclo de operao necessitam de calibrao e o desempenho dos cronmetros deve ser verificado. A validao inicial deve incluir estudos sobre o desempenho (pesquisas de distribuio espacial da temperatura) para cada ciclo de operao e cada configurao de carga usada na prtica. Esse processo precisa ser repetido aps reparo ou modificao significativa (e.x mudana do programador, sonda do termorregulador, mudana de carga ou ciclo de operao) ou quando indicado pelos resultados das verificaes do controle de qualidade do meio de cultura ou gerenciamento de risco. Sensores de temperatura devem ser posicionados em nmero suficiente dentro da carga (e.x recipientes cheios com lquido/meios) de tal forma que as diferentes localizaes possam ser demonstradas. No caso de preparadores de meios, em que o aquecimento uniforme no pode ser demonstrado de outra forma, o uso de dois sensores, um adjacente a sonda de controle e o outro afastado desta, pode ser considerado apropriado. Para a validao e a revalidao deve-se considerar os tempos de elevao e decrscimo da temperatura bem como o tempo efetivo da temperatura de esterilizao. 4.3.5.3 Devem-se fornecer instrues operacionais claras, com base nos perfis de aquecimento determinados para usos especficos durante a validao/revalidao. Devem ser estabelecidos critrios de aceitao/rejeio e registros de operao de autoclaves incluindo temperatura e tempo mantidos em cada ciclo. O monitoramento pode ser realizado de uma das seguintes formas: utilizao de um termopar e de um registrador para produzir um grfico ou relatrio impresso; observao direta e registro da temperatura mxima alcanada e tempo nessa temperatura. Alm do monitoramento direto da temperatura de uma autoclave, a eficincia de sua operao durante cada ciclo pode ser verificada pelo uso de indicadores qumicos ou biolgicos para fins de esterilizao ou descontaminao. Tiras indicadoras ou fitas de controle de esterilizao para autoclaves devem ser utilizadas somente para indicar que uma carga foi processada e no so suficientes para demonstrar a concluso de um ciclo aceitvel. Os laboratrios devem ter uma autoclave de descontaminao separada. 6
SRIE REDE PARF - DOCUMENTO TCNICO N 11

4.3.5.2

4.3.5.4

No entanto, em casos excepcionais uma nica autoclave pode ser aceitvel desde que precaues sejam tomadas para separar cargas de descontaminao e esterilizao, e um programa documentado de limpeza no local para lidar com o ambiente interno e externo da autoclave. 4.3.6 Pesos e balanas Pesos e balanas devem ser calibrados de forma rastrevel em intervalos regulares (de acordo com seu uso pretendido) utilizando peso padro apropriados rastreveis e pesos padro certificados. 4.3.7 Equipamentos volumtricos 4.3.7.1 Os laboratrios de microbiologia devem realizar a verificao inicial dos equipamentos volumtricos (dispensadores automticos, dispensadores/ diluidores, pipetas manuais mecnicas e pipetas descartveis) e devem realizar verificaes regulares para garantir que os equipamentos estejam operando dentro da especificao requerida. A verificao inicial pode no ser necessria para vidraria que for certificada para uma tolerncia especfica. Os equipamentos devem ser verificados quanto exatido do volume dispensado, em comparao com o volume pr estabelecido (para diversos ajustes diferentes, no caso de instrumentos com volume varivel). A preciso dos volumes dispensados deve ser avaliada. Para dispositivos volumtricos descartveis os laboratrios devem adquirir os suprimentos de empresas com um sistema de qualidade reconhecido. Aps a validao inicial da adequao do dispositivo, recomenda-se a execuo de verificaes aleatrias de exatido. Se o fornecedor no tiver um sistema de qualidade reconhecido, os laboratrios devem verificar a adequao de cada lote do dispositivo.

4.3.7.2

4.3.8

Outros equipamentos Medidores de condutividade, medidores de oxignio, medidores de pH e outros instrumentos similares devem ser verificados regularmente ou antes de cada uso. As solues-tampo usadas para fins de verificao devem ser guardadas em condies apropriadas e devem ser identificadas com uma data de validade. Quando a umidade for importante para o resultado do ensaio, higrmetros devem ser calibrados, sendo a calibrao rastrevel a padres nacionais ou internacionais. Cronmetros, incluindo o cronmetro da autoclave, devem ser verificados, usando-se um cronmetro calibrado ou o sinal de tempo nacional (Hora do Observatrio Nacional) como referncia. Quando centrfugas forem utilizadas em procedimentos de ensaio, a verificao das rotaes por minuto (RPM) deve ser feita e os registros mantidos. Quando for crtico para o ensaio, a centrfuga deve ser calibrada.

5. Reagentes e meios de cultura

Os laboratrios devem assegurar que a qualidade dos reagentes e meios de cultura utilizados estejam apropriados para o ensaio em questo. 5.1 Reagentes

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5.1.1 5.2

Os laboratrios devem verificar a adequao de cada lote de reagentes crticos para o ensaio, inicialmente e durante sua validade.

Meios de cultura 5.2.1 Meios de cultura podem ser preparados internamente ou comprados parcialmente ou totalmente preparados. Fornecedores de meios prontos para o uso devem ser aprovados e qualificados. O fornecedor qualificado pode certificar alguns dos parmetros de qualidade listados abaixo. A promoo do crescimento e, se apropriado, outros testes de desempenho (ver seo 5.2.2) devem ser realizados em todos os meios preparados em cada lote e em cada remessa. Quando o fornecedor de meio totalmente preparado estiver qualificado e oferecer certificao de promoo do crescimento por lote de meio, e as condies de transporte tiverem sido qualificadas, o usurio poder utilizar o certificado do fabricante como verificao peridica dos seus resultados. 5.2.2 O desempenho apropriado dos meios de cultura, diluentes e outras solues devem ser verificados, quando relevante com relao: recuperao ou a manuteno dos micror-organismos-alvo. Recuperao de 50200% que deve ser demonstrada aps a inoculao de no mais que 100 unidades formadoras de colnia (UFC); inibio ou supresso de micro-organismos no-alvo; propriedades bioqumicas (diferenciais e diagnsticas), e propriedades adequadas (por exemplo: pH, volume e esterilidade). Para avaliao da recuperao ou manuteno de micro-organismos deve ser dada preferncia a procedimentos quantitativos. 5.2.3 Matrias-prima, (tanto formulaes comerciais desidratadas como constituintes individuais), e meios de cultura devem ser armazenados sob condies apropriadas recomendadas pelo fabricante, como, por exemplo, em ambiente frio, seco e protegido da luz. Todos os recipientes, especialmente aqueles com meios desidratados devem ser hermeticamente fechados. Meios desidratados que se apresentem endurecidos, empedrados ou com mudana de colorao, no devem ser utilizados. gua com qualidade microbiolgica adequada livre de substncias bactericidas, inibidoras ou interferentes, deve ser utilizada na preparao, a no ser que o mtodo de teste especifique de outra forma. Os meios contendo antimetablitos ou inibidores devem ser preparados utilizando vidrarias separadas para essa finalidade, sendo que esses agentes presentes dentro de outros meios podem inibir o crescimento e a deteco de micro-organismos presentes na amostra sob teste. Se a vidraria utilizada na preparao de meios contendo antimetablitos ou inibidores for utilizada para outras finalidades os procedimentos de lavagem devem ser validados. 5.2.6 A distribuio do meio aps a esterilizao deve ser realizada sob fluxo de ar unidirecional para minimizar a potencial contaminao pelo ambiente. Isto deve ser considerado como requisito mnimo para meios utilizados em testes de produtos estreis.

5.2.4

5.2.5

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A etapa deve incluir o resfriamento do meio, assim como a remoo das tampas dos recipientes para evitar a acumulao da gua de condensao durante o resfriamento. 5.2.7 Os meios plaqueados que so irradiados podem exigir a adio de um antioxidante e varredura de radicais livres para oferecer proteo contra os efeitos do processo de irradiao. Os meios irradiados e no irradiados devem ser validados atravs da realizao de testes quantitativos de promoo de crescimento. A validade dos meios preparados deve ser definida, conferida quanto a sua adequao e sob as condies determinadas de armazenamento. Os lotes de meios devem ser identificados e verificados quanto a sua adequao ao uso conforme documento especfico da qualidade. Para meio comprado pronto o laboratrio usurio deve garantir que ser notificado pelo fabricante de quaisquer alteraes especificao da qualidade.

5.2.8 5.2.9

5.2.10 Os meios de cultura devem ser preparados de acordo com as instrues do fabricante, tomando cuidado com as especificaes do tempo e temperatura para a esterilizao. 5.2.11 Equipamento de micro-ondas no deve ser utilizado para a fuso de meios de cultura devido distribuio inconsistente do processo de aquecimento. 5.3 Rotulagem 5.3.1 Os laboratrios devem assegurar que todos os reagentes (incluindo solues estoque), meios de cultura, diluentes e outras solues devem estar devidamente rotulados para indicar, conforme o caso, a identificao, concentrao, condies de armazenamento, data de preparao, data de validade e perodos de armazenamento recomendados. O responsvel pela preparao do meio de cultura deve ser identificado pelos registros.

5.4

Recuperao de micro-organismos 5.4.1 A recuperao dos micro-organismos necessria quando as metodologias utilizadas nos testes produzirem efeitos subletais e ocasionar injrias nas clulas. Por exemplo, exposio a: injrias pelo processamento, por exemplo, uso de calor; agentes antimicrobianos; conservantes; extremos de presso osmtica, e extremos de pH. 5.4.2 A recuperao de micro-organismo pode ser obtida por: exposio a meio lquido, como por exemplo, soluo salina temperatura ambiente por 2 horas, e exposio a meio slido de recuperao por 4-6 horas.

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6. Materiais de referncia e culturas de referncia

6.1. Padres internacionais e substncias de referncia farmacopeicas 6.1.1 Materiais de referncia e materiais de referncia certificados so utilizados de forma geral, no laboratrio de microbiologia, para qualificar, verificar e calibrar equipamentos. Sempre que possvel os materiais de referncia devem ser utilizados nas matrizes apropriadas. Padres internacionais e substncias de referncia so empregados, por exemplo, para: determinar a potncia ou teor; validar mtodos; comparar mtodos; controles positivos, e testes de promoo de crescimento. Se possvel, materiais de referncia devem ser usados nas matrizes utilizadas nos ensaios. 6.2 Culturas de referncia 6.2.1 O uso de culturas de referncia necessrio para o estabelecimento do desempenho aceitvel dos meios de cultura (incluindo kits de ensaio), para validao de mtodos, para verificao da adequao do mtodo de ensaio e para avaliar o seu desempenho. A rastreabilidade necessria, por exemplo, quando estabelecemos o desempenho de meios, kits para testes e validao de mtodos de ensaio. Para demonstrar a rastreabilidade, os laboratrios devem usar cepas de micro-organismos de referncia obtidas diretamente a partir de colees reconhecidas nacional ou internacionalmente, caso existam. Como alternativa, podem ser utilizadas culturas comerciais que o laboratrio tenha comprovado ter propriedades equivalentes. 6.2.2 As cepas de referncia devem ser sub-cultivadas uma nica vez, para fornecer estoques de referncia. Verificaes bioqumicas e de pureza devem ser feitas em paralelo, conforme apropriado. Recomenda-se guardar estoques de referncia em alquotas congeladas ou liofilizadas. Culturas de trabalho, para uso de rotina, devem ser subculturas primrias do estoque de referncia (ver Apndice 5 - Uso geral das culturas de referncia). Uma vez descongelados, os estoques de referncia no devem ser recongelados e reutilizados. As cepas de trabalho no devem normalmente ser subcultivadas . Geralmente no mais do que cinco geraes (ou passagens) da cepa de referncia original podem ser subcultivadas, se for definido por um mtodo padro ou os laboratrios comprovarem por evidncias documentais que no houve nenhuma alterao em qualquer propriedade relevante. 10
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6.2.3

Derivados comerciais de cepas de referncia s podem ser utilizados como culturas de trabalho.

7. Amostragem
Os princpios gerais so referidos em Good practices for pharmaceutical quality control laboratories (1). 7.1 Onde laboratrios de ensaio so responsveis pela amostragem inicial para a obteno dos itens de ensaio, recomenda-se fortemente que o procedimento de amostragem seja coberto por um sistema de garantia da qualidade e submetido a auditorias regularmente. Qualquer processo de desinfeco utilizado para obter a amostra (ex. desinfeco em alguns pontos da embalagem da amostra) no deve comprometer o nvel microbiolgico interno da amostra. O transporte e o armazenamento das amostras devem ser realizados em condies que mantenham a integridade das mesmas (por exemplo: resfriada ou congelada quando apropriado). Os ensaios devem ser realizados o mais rpido possvel aps a amostragem. Para as amostras onde for possvel o crescimento da populao microbiana durante o transporte e o armazenamento, deve ser demonstrado que as condies de armazenamento, tempo e de temperatura, no afetam a exatido dos resultados dos testes. As condies de armazenamento devem ser monitoradas e os registros mantidos. A responsabilidade pelo transporte, armazenamento entre a amostragem e chegada ao laboratrio do teste deve estar claramente documentado. 7.4 A amostragem deve ser executada somente por pessoal treinado. Deve ser realizada de forma assptica utilizando material estril. Precaues apropriadas devem ser tomadas para garantir que a integridade das amostras mantida por meio do uso de recipientes estreis selados, onde apropriado. Pode ser necessrio monitorar as condies ambientais, por exemplo, contaminao do ar e temperatura, no local de amostragem. A hora da amostragem deve ser registrada, se apropriado.

7.2

7.3

8. Manuseio e identificao das amostras

8.1 O laboratrio deve ter procedimentos que cubram a entrega, o recebimento e a identificao da amostra. Se houver amostra insuficiente, ou em condies inadequadas devido deteriorao fsica, temperatura incorreta, embalagem danificada ou rotulagem deficiente, o laboratrio deve entrar em contato com o cliente, antes de decidir testar ou recusar a amostra. O laboratrio deve registrar todas as informaes relevantes exemplo: data e, quando relevante, horrio de recebimento; condies da amostra no recebimento e quando necessrio temperatura, e caractersticas do procedimento de amostragem (incluindo data e condies da amostragem; 8.3 As amostras que sero analisadas posteriormente devem ser armazenadas sob condies adequadas para minimizar as variaes na populao microbiana presente. As condies de armazenamento devem ser validadas, definidas e registradas.

8.2

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11

8.4

As embalagens e rtulos das amostras podem estar altamente contaminados e devem ser manipulados e estocados com cuidado, a fim de evitar qualquer disseminao de contaminao. Os processos de desinfeco aplicados nos recipientes no devem afetar a integridade da amostra. Deve-se saber que o lcool no esporicida. A subamostragem feita no laboratrio imediatamente antes dos ensaios considerada como parte do mtodo de ensaio. Deve ser feita de acordo com os padres nacionais ou internacionais, caso existam, ou por mtodos internos validados. Procedimentos de subamostragem devem ser projetados para coletar uma amostra representativa. Deve haver um procedimento escrito para a reteno e descarte de amostras. Se a intregridade das amostras puder ser mantida apropriado que as mesmas sejam estocadas at que os resultados do ensaio estejam disponveis, ou por um tempo maior, se necessrio. As amostras sabidamente contaminadas devem ser descontaminadas antes de serem descartadas (ver seo 11.1).

8.5

8.6

9. Descarte de resduos contaminados

9.1 Os procedimentos de descarte dos materiais contaminados devem ser projetados para minimizar a possibilidade de contaminao do ambiente do teste ou dos materiais. Isto uma questo de boas prticas de laboratrio, devendo obedecer a regulamentos nacionais ou internacionais ou regulamentos ambientais de sade e segurana.

10. Garantia da qualidade dos resultados e controle da qualidade do desempenho

10.1 Controle interno da qualidade 10.1.1 O laboratrio deve ter um sistema de garantia da qualidade interna ou controle de qualidade (por exemplo: monitoramento dos desvios, uso de amostras fortificadas, testes replicados e participao em testes de proficincia, se for o caso) para garantir a consistncia dos resultados do dia a dia e sua conformidade com os critrios definidos.

11. Procedimentos do teste

11.1 Os testes normalmente devem ser feitos de acordo com procedimentos descritos em farmacopias nacionais, regionais ou internacionais. 11.2 Procedimentos alternativos para testes podem ser utilizados, desde que adequadamente validados e seja demonstrado a sua equivalncia aos mtodos oficiais.

12. Relatrios de ensaio

12.1 Se o resultado da contagem for negativo, este deve ser relatado como no detectado para uma unidade definida ou menor que o limite de deteco para uma unidade definida. O resultado no deve ser apresentado como zero para uma unidade definida, a no ser que ele seja uma exigncia regulatria. Os resultados de ensaios qualitativos devem ser registrados como detectado/no detectado numa quantidade ou volume definido. Tambm podem ser expressos como menor que um nmero especificado de micro-organismos para uma unidade definida, quando o nmero de micro-organismo especificado exceder o limite de deteco do

12

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mtodo e isto tiver sido acordado com o cliente. Nos dados brutos o resultado no deve ser dado como zero para uma unidade definida a no ser que seja uma exigncia regulatria. Um valor reportado de 0 pode ser utilizado para entrada de dados e clculos ou anlise de tendncias em bases de dados eletrnicos. 12.2 Quando uma estimativa da incerteza do resultado do ensaio for expressa no relatrio de ensaio, quaisquer limitaes (particularmente se a estimativa no incluir a contribuio do componente da distribuio dos micro-organismos dentro da amostra) precisam ser esclarecidas com o cliente.

Referncias
1. Good Practices for pharmaceutical quality control laboratories. In: WHO Expert Committee on Specifi cations for Pharmaceutical Preparations. Fortyfourth report. Geneva, World Health Organization. WHO Technical Report Series, No. 957, 2010, Annex 1. General guidelines for the establishment, maintenance and distribution of chemical reference substances. Revision. In: WHO Expert Committee on Specifi cations for Pharmaceutical Preparations. Forty-first report. Geneva, World Health Organization. WHO Technical Report Series, No. 943, 2007, Annex 3. The International Pharmacopoeia, Fourth Edition. Geneva, World Health Organization, 2006. Also available on CD-ROM. The International Pharmacopoeia, Fourth Edition, First Supplement. Geneva, World Health Organization, 2008. Also available on CD-ROM. ISO/IEC 17025 (2005) General requirements for the competence of testing and calibration laboratories. ISO 11133-1 (2000) Microbiology of food and animal feeding stuffs Guidelines on preparation and production of culture media Part 1: General guidelines on quality assurance for the preparation of culture media in the laboratory. ISO 13843 (2000) Water quality Guidance on validation of microbiological methods. WHO good manufacturing practices: main principles for pharmaceutical products. In: Quality assurance of pharmaceuticals. A compendium of guidelines and related materials. Volume 2, 2nd updated edition. Good manufacturing practices (GMP) and inspection. Geneva, World Health Organization, 2007, and subsequent updates, including WHO GMP for sterile pharmaceutical products. In: WHO Expert Committee on Specifictions for Pharmaceutical Preparations. Forty-fifth report. Geneva, World Health Organization. WHO Technical Report Series, No. 961, Annex 6, 2011; and GMP: Heating, ventilation and air-conditioning systems for non-sterile pharmaceutical dosage forms. In: WHO Expert Committee on Specifi ctions for Pharmaceutical Preparations. Forty-fi fth report. Geneva, World Health Organization. WHO Technical Report Series, No. 961, 2011, Annex 5.

2.

3. 4. 5. 6.

7. 8.

Leitura complementar
ISO 7218 (2007) Microbiology of food and animal feeding stuffs General requirements and guidance for microbiological examinations. ISO 6887-1 (1999) Microbiology of food and animal feeding stuffs Preparation of test samples, initial suspension and decimal dilutions for microbiological examination Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension and decimal dilutions. ISO Guide 30 (1992) Terms and defi nitions used in connection with reference materials.
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ISO 9000 (2008) Quality management systems fundamentals and vocabulary. ISO Guide 99 (1993) International vocabulary of basic and general terms in metrology (VIM). ISO (CIPM):1995. Guide to the expression of uncertainty in measurements. Draft ISO/DIS 16140. (1999) Food microbiology. Protocol for the validation of alternative methods. Draft ISO/FDIS (2003) 11133-2. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Guidelines on preparation and production of culture media. Part 2 Practical guidelines on performance testing on culture media. EN 12741 (1999). Biotechnology Laboratories for research, development and analysis Guidance for biotechnology laboratory operations. Draft Quality Risk Management. Disponivel em: <http://www.who.int/medicines/services/expertcommittees/pharmprep/QualityRiskManagement-QAS10-376_18082010.pdf>. Acesso em 07/03/2012.

Apndice 1: Exemplos de reas (ambientes) em que as atividades operacionais podem ser realizadas
As reas so projetadas e classificadas durante a instalao, conforme categorias abaixo, e monitoradas, por exemplo, atravs de abastecimento adequado de ar.
r ea Recebimento de amostra Preparo de Meios Autoclave Autoclave dentro da rea de teste de esterilidade Unidade de Fluxo de Ar Unidirecional UDAF (cabine de segurana biolgica) Local onde est instalado a Unidade de Fluxo de Ar Unidirecional - UDAF Isolador onde ser realizado o teste de esterilidade Local onde est instalado o isolador Incubadora Contagem Descontaminao Classe de instalao Sem classificao Sem classificao Sem classificao Classe B Classe A Classe B Classe A (Nmero de particulas viveis NVP somente Microbiologia) Sem classificao Sem classificao Sem classificao Sem classificao P ro p o s t o Sem classificao Sem classificao Sem classificao ISO 5 (turbulncia) < 10 UFC/ m3 ISO 5 (UDAF) e < 1 UFC/ m3 ISO 5 (turbulncia) < 10 UFC/ m3 ISO 5 (UDAF) e < 1 UFC/ m3 Sem classificao Sem classificao Sem classificao Sem classificao

UFC unidade formadora de colnia.

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Apndice 2: Exemplos de manuteno dos equipamentos

Estas informaes so fornecidas como exemplo e a frequncia ser baseada na necessidade, tipo e desempenho prvio do equipamento e das recomendaes do manual do fornecedor.
Tipo d e equi pam ent o Incubadora Refrigeradores Freezers, Fornos Banho Maria Centrfuga Autoclave Esvaziar, limpar desinfetar e repor a gua Revisar Limpar e desinfetar Fazer inspeo visual do cesto, limpar e drenar a cmara Reviso completa Verificar a segurana da vlvula de presso Cabine de Segurana Biolgica, Cabine unidirecional Microscpio pHmetro Balanas, diluentes gravimtricos Destilador Deionizador e unidade de osmose reversa Jarra de anaerobiose Distribuidores de meios, equipamentos volumtricos, pipetas e equipamentos para servios gerais Semeadores em espiral Laboratrio Reviso completa e verificao mecnica Servio completo de manuteno Limpar eletrodo Limpar Revisar Limpeza e remover crosta Trocar cartucho/ membrana Limpar/desinfetar Descontaminar, limpar e esterilizar conforme apropriado Revisar Descontaminar, limpar e esterilizar Limpar e desinfetar a superfcie de trabalho Limpar pisos, desinfetar tanques e pias Limpar e desinfetar outras superfcies Exigncia Limpar e desinfetar a superfcies internas F re q u n c i a s u g e ri d a Mensalmente Quando necessrio (e.x a cada 3 ms) Quando necessrio (e.x anualmente) Mensalmente ou a cada 6 meses se usado biocida Anualmente A cada uso Regularmente, ou conforme recomendado pelo fabricante Anualmente ou conforme recomendado pelo fabricante Anualmente Anualmente ou conforme recomendado pelo fabricante Anualmente ou conforme recomendado pelo fabricante A cada uso A cada uso Anualmente Conforme necessrio ( e.x a cada 3 meses) Conforme recomendado pelo fabricante Aps cada uso A cada uso

Anualmente A cada uso Diariamente e durante o uso Diariamente A cada 3 meses

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Apndice 3: Exemplo de intervalos de calibrao para diferentes equipamentos

Esta informao fornecida como um exemplo e a freqncia ser baseada sobre a necessidade, o tipo de desempenho, anterior e criticidade dos equipamentos.
Tipo de equi pam ent o Termmetros de referncia (lquido em vidro) Termopares de referncia Termmetros de trabalho e Termopares de Trabalho Balanas Pesos de calibrao Peso(s) aferidor(es) Vidrarias volumtricas Microscpios Higrmetros Centrfugas Exigncia Recalibrao inteiramente rastravel Um nico ponto (p.e.x: verificao do ponto de congelamento) Recalibrao inteiramente rastravel Verificao com termmetro de refrncia Verificao com termmetro de refrncia no ponto de congelamento e/ou faixa de temperaturas operacionais Calibrao interamente rastravel Calibrao interamente rastravel Verificao com peso calibrado ou verificao na balana imediatamente aps calibrao rastravel Calibrao gravimtrica na tolerncia exigida Calibrao rastravel por estgio do micrmetro de mesa (onde apropriado) Calibrao rastrevel Calibrao rastrevel ou verificao com um tacmetro independente, conforme apropriado F re q u n c ia s u g e ri da A cada 3 anos Anualmente A cada 3 anos Anualmente Anualmente Anualmente Anualmente Anualmente Anualmente Inicialmente Anualmente Anualmente

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Apndice 4: Exemplos de qualificao dos equipamentos e monitoramento

Esta informao fornecida como um exemplo e a freqncia ser baseada na necessidade, o tipo de desempenho, anterior e criticidade dos equipamentos.
Tipo de eq ui pam ent o Equipamento com temperatura controlada (incubadoras, banhos, geladeiras, freezers) Estufas de esterilizao Requisito Estabelecer estabilidade e uniformidade de temperatura Monitorar a temperatura Estabelecer estabilidade e uniformidade de temperatura Monitorar a temperatura Autoclaves Estabelecer caractersticas para cargas/ciclos Monitorar a temperatura/presso tempo reas classe A utilizadas para o teste de esterilidade Cabine de segurana unidirecional Isolador Cabine unidirecional Estabelecer desempenho Monitoramento microbiolgico Monitoramento do fluxo de ar Teste de integridade do filtro HEPA Estabelecer desempenho Monitoramento microbiolgico Monitoramento do fluxo de ar Teste de integridade do filtro HEPA Cronmetro Microscpio pHmtro Balanas Deionizadores e unidades de osmose reversa Diluentes gravimtricos Dispensadores de meios Pipetadores / Pipetas Semeadores em espiral Verificar com sinal de tempo nacional Verificar alinhamento Ajustar utilizando, pelo menos solues tampo de qualidade adequada Verificar o zero e a leitura com peso aferidor Verificar condutividade Verificar contaminao microbiana Verificar peso de volume dispensado Verificar relao de diluio Verificar volume dispensado Verificar exatido e preciso do volume dispensado Estabelecer desempenho com mtodo convencional Verificar estado da cnula e os pontos iniciais e finais Verificar volume dispensado F re q n c i a s u g e ri d a Inicialmente, a cada 2 anos e aps reparo/ modificao Diariamente/a cada uso Inicialmente a cada 2 anos e aps reparo/ modificao A cada uso Inicialmente a cada 2 anos e aps reparo/ modificao A cada uso Inicialmente a cada ano e aps reparo/ modificao Cada uso 6 meses 6 meses Inicialmente e aps reparo/modificao Cada uso 6 meses 6 meses Anualmente Diariamente/a cada uso Diariamente/a cada uso Diariamente/a cada uso Semanalmente Mensalmente Diria Diria A cada ajuste de troca Regularmente (a ser definido, levando em conta a frequncia e a natureza de uso) Inicialmente e anualmente Diariamente/a cada uso Mensalmente Continua...

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...Continuao Apndice 4 Tipo de eq ui pam ent o Contador de colnias Centrfuga Incubadoras e jarras de anaerobiose Ambiente de laboratrio Requisito Verificar com nmero contado manualmente Verificar velocidade com um tacmetro calibrado e independente Verificar com indicador anaerbico Monitorar quanto contaminao microbiana do ar e das superfcies, utilizando, por exemplo, amostradores de ar, exposio de placas, placas de contato ou swabs F re q n c i a s u g e ri d a Anualmente Anualmente A cada uso Com base na avaliao de risco, e um programa de monitoramento ambiental estabelecido

Apndice 5: Uso geral das culturas de referncia

Cepas de referncia Proveniente de fonte reconhecida por rgos de habilitao

Estoque de referncia G1 Liofilizada, armazenamento em nitrognio lquido, congelados, etc. Condies especficas e tempos de armazenamento recomendados.

Cultura de trabalho Condies especficas e tempos de armazenamento recomendados Uso de rotina

Estoque de referncia G2 Liofilizada, armazenamento em nitrognio lquido, congelados, etc. Condies especficas e tempos de armazenamento recomendados.

Cultura de trabalho Condies especficas e tempos de armazenamento recomendados Uso de rotina

Estoque de referncia G3 Liofilizada, armazenamento em nitrognio lquido, congelados, etc. Condies especficas e tempos de armazenamento recomendados.

Cultura de trabalho Condies especficas e tempos de armazenamento recomendados Uso de rotina

Estoque de referncia G4 Liofilizada, armazenamento em nitrognio lquido, congelados, etc. Condies especficas e tempos de armazenamento recomendados.

Cultura de trabalho Condies especficas e tempos de armazenamento recomendados Uso de rotina

Cultura de trabalho Condies especficas e tempos de armazenamento recomendados Uso de rotina

Todas as partes do processo devem ser devidamente documentadas, mantendo-se registros detalhados de todas as etapas. Verificaes de pureza e testes bioqumicos devem ser realizadas conforme o caso.
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 Rede PARF Documento Tcnico N 11

Boas prticas da OMS para laboratrios de microbiologia farmacuticas