MUNDO MICROBIANO

INTRODUCCION: El siguiente trabajo ha sido realizado con el fin de hablar sobre las tcnicas de preparados microscpicos, son dos clases: Los preparados en fresco, son aquellos preparados que se realizan in vivo; y los Preparados en seco, que dependen de una larga preparacin para su observacin. Tambin se hablara sobre la forma de preparado de cada tipo, sus usos, y las observaciones y diferencias de cada preparado microscpico.

OBJETIVOS: Observar e identificar estructuras y microorganismos presentes en las muestras analizadas.

MATERIALES: Laminas porta-cubre. Laminas porta-objetos. Goteros. Microscopio. Muestras recogidas en la visita tcnica. CuSO4 Albumina de huevo Tubo de ensayo Gradilla

 PREPARADO EN EL MICROSCOPIO Preparado en fresco o examen directo: El microscopio ptico tiene por lo general varios objetivos que van de 4x, 10x, 40x y 100x, stos son los aumentos o nmeros de veces que puedes ver el objeto a observar. Podemos utilizar los dos tipos de preparados, solo que al utilizar muestras en fresco, la observacin la realizamos en los objetivos 4x, 10x y 40x y cuando utilizamos preparados en seco, stos se debern teir con algn colorante, secar y agregar una gota de aceite de inmersin para posteriormente ser observados con el objetivo 100x, llamado de inmersin. Asi que puedes utilizar los dos tipos de muestras, tanto frescas como fijas y teidas. Se coloca una gota de agua estancada y luego se cubre con una laminilla cubreobjetos.

Preparado definitivo o preparado en seco: Se emplea por lo general material muerto, este tipo de preparado no contiene liquido, son duraderos y requiere para su duracin mayor tiempo y trabajo; es decir, esta requiere de tcnicas mas precisas que van a dar un resultado exacto, tiene la finalidad de resaltar ciertas estructuras y organismos para lo cual el principal elemento a usar es el colorante. Extensin: se extiende la muestra lo mas uniformemente posible utilizando asa de koll o mondadientes. * Frotis: tomar dos laminillas y en el tercio de extremo de una de ellas se colocara la muestra sobre la cual se coloca el borde de la otra lamina. * Coloracin simple: un solo color, puede ser colorante acido o bsico, puede ser por extensin o Frotis. * Coloracin doble: se utiliza dos colores, por extensin o Frotis, se colorea primero con hematoxilina, luego se lava y se vuelve a colorear con eosina. * Coloracin neutra: se colorea con tinte Wright, por extensin o Frotis. * Coloracin compuesta: o gram usa dos colorantes, un mordiente, y decolorante. * Coloracin simple: 1. Con un mondadientes extraer mucosa labial y realizar una extensin sobre la lmina. 2. Fijar al calor moderadamente o al ambiente. 3. colorear Eosina o Azul de metileno. 4. Secar al medio ambiente. 5. Observa en el microscopio.

 PROCEDIMIENTO Observacin de vida protozoaria en el agua estancada: En una lamina portaobjetos colocar una gota del agua estancada con la ayuda del gotero.

Luego cubrir con la laminilla.

Finalmente mirar al microscopio con el objetivo de menor aumento (10x).

Identificacin de protenas: Reaccin de Biuriel o Peotrowsky:

En un tubo de ensayo colocar 3ml de Na(OH).

Luego se le agrega 1ml de albumina de huevo al tubo de ensayo junto a unas gotitas de sulfato de cobre (CuSO4).

Finalmente se agita el tubo de ensayo dando un color lila por presencia de protenas en la albumina de huevo.

Obtencin de protenas a partir de materia viva (un sapo): El sapo recogido en la visita tcnica es pulverizado con un mortero y piln para obtener sustancias proteicas.

Luego se echa la sustancia salida del sapo al tubo de ensayo.

Luego se le echa unas gotas de sulfato de cobre (CuSO4) y se comienza a agitar, quedando una sustancia oscura con un morado oscuro eso quiere decir que el sapo si contiene protenas en todo su cuerpo.

CONCLUSIONES:

Con esta prctica de laboratorio se aprendi a realizar adecuadamente el tipode preparado en fresco o examen directo en la observacin de microrganismos que se encuentran en el agua estancada de Rio de la Bocatoma.

BIBLIOGRAFA: Apuntes de las clases de Laboratorio de Biologa Ambiental. Wikipedia.