DEMONSTRAO DA RESPIRAO PELO MTODO INDICADOR

INTRODUO Nos processos fotossinttico e respiratrio ocorrem trocas gasosas com o meio ambiente. Na respirao aerbica, h consumo de oxignio e liberao de gs carbnico, enquanto na fermentao no h consumo de oxignio, mas pode haver liberao de gs carbnico (apenas no caso de fermentao alcolica). O CO2 em presena de gua forma cido carbnico e, portanto, num sistema fechado, a respirao acidifica a fase aquosa, j que se estabelece um equilbrio entre as fases aquosa e lquida (com deslocamento para a direita): CO2 (ar) CO2 (gua) H2CO3 (gua) H+ + HCO3(gua)

Se a fase aquosa contiver um indicador de pH, as variaes na quantidade de CO2 no ar podem ser detectadas pelas mudanas de colorao. O azul de bromotimol um indicador que se apresenta verde em meio neutro, azul em meio bsico e amarelo em meio cido e pode, portanto, ser usado para se observar a acidificao de uma fase aquosa por CO2 proveniente da respirao. OBJETIVO Demonstrar a ocorrncia de atividade respiratria em diversos materiais biolgicos. MATERIAL - Suspenso de levedo, em soluo de sacarose a 10% - Suspenso de levedo, em gua destilada - Suspenso de levedo fervido - Folha - Malhas de plstico ou suportes metlicos (5) - Sementes de milho em germinao - Canudos de refresco ou pipetas - Soluo de bromotimol - Tubos de ensaio grandes (9) - Tubos de ensaio pequenos (4) - Estante para tubos de ensaio - Plstico preto (ou papel alumnio) - Rolhas de borracha - Conta-gotas - HCl (0,1 N) - NaOH (0,1N) PROCEDIMENTO 1- Enumere 6 tubos de ensaio tamanho mdio e adicione neles 5 gotas de azul de bromotimol. Coloque no fundo dos tubos de n 2 a 6 um pequeno suporte para manter uma plataforma cerca de 1 cm acima do nvel do indicador. Este arranjo servir de apoio para um tubo menor, que conter o material a se investigar, e que no deve tocar a soluo indicadora. Com esses tubos, proceda aos seguintes ensaios: Tubo 1 - Testemunha, para referncia da colorao inicial do indicador. Tubo 2 - Coloque suspenso de levedo preparada em soluo de sacarose a 10% at a metade de um tubo de ensaio pequeno, que ser introduzido no tubo com o indicador at tocar o suporte. Tubo 3 - Proceda da mesma forma anterior, mas usando suspenso de levedo preparada em gua. Tubo 4 - Proceda da mesma maneira que a anterior, porm usando suspenso de levedo previamente fervida.

Tubo 5 - Proceda de forma semelhante anterior, colocando sementes recm germinadas de milho no tubo pequeno ou sobre uma mecha de algodo umedecido, mas que no esteja em contato com a soluo indicadora. Tubo 6 Coloque uma tira de folha no suporte, acima do indicador. Enrole o tubo de ensaio em papel alumnio para evitar a entrada de luz. Feche bem os tubos com arrolhas imediatamente aps a montagem (Figura 1) e aguarde 1 hora. Observe as mudanas na cor do indicador e note suas observaes, adotando um sistema de conveno para as variaes de cor da soluo indicadora.

Figura 1. Montagem do experimento. Os nmeros dos tubos esto indicados e correspondem ao descrito em procedimentos. Enquanto espera execute os seguintes ensaios: Teste 1: Coloque 3 ou 4 gotas do indicador em tubo de ensaio e acrescente uma gota de HCl 0,1 N. Observe o que ocorre. Em seguida, adicione NaOH 0,1 N, gota a gota, at que haja nova mudana de cor. Anote esta mudana e explique os resultados.

Teste 2: Coloque 3 ou 4 gotas do indicador em um tubo de ensaio. Acrescente algumas gotas de gua contendo gs carbnico at que mude a colorao. Anote o resultado. Teste 3: Coloque 10 a 12 gotas do indicador em um tubo de ensaio. Sopre devagar, atravs de um canudo de refresco (ou uma pipeta), de modo que o ar borbulhe na soluo. Anote a mudana de cor. QUESTES 1- Comparando os resultados dos testes 1 e 2, o que acontece ao CO2 quando dissolvido em gua? 2- Explique o resultado do teste 3. 3- O que havia em comum nos tubos onde houve mudana de cor? 4- Compare e justifique os resultados obtidos nos tubos 2, 3 e 4. 5- Para demonstrar a respirao em folhas, foi necessrio cobrir o tubo com papel-alumnio. Por qu?