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Gua microbiolgica para Docentes de enseanza media como recurso pedaggico de aula y laboratorio.
Mdulo de biologa como recurso transversal para toda la enseanza media.

Autoras Liliana Henrquez Pradenas& Natalia Mauln Seguel. Profesores guas Magister Carlos Nez & Magister Ricardo Pefaur.

Para optar al Ttulo de Profesor de Biologa y Ciencias Naturales y al Grado Acadmico de Licenciado en Educacin. 2012

Elaborado por Liliana Henrquez Pradenas y Natalia Mauln Seguel con la ayuda de los profesores guas Carlos Nez y Ricardo Pefaur, de la Pontificia Universidad Catlica de Valparaso, Chile. Este es un recurso para Docentes, por lo que presenta material en formato digital e impreso. Su uso es meramente pedaggico, por lo que se recomienda su cuidado y correcta difusin. Terminado en Julio del 2012.

Dedicado a aquellos nuevos docentes que inician una bella etapa de labor pedaggica y que tienen todas las ansias de realizar una excelente clase. Liliana y Natalia.

1 PRLOGO El propsito de la enseanza de las ciencias en Chile en una perspectiva de alfabetizacin cientfica, es lograr que los alumnos y alumnas desarrollen la capacidad de usar el conocimiento cientfico, de identificar problemas y de esbozar conclusiones basadas en evidencia, en orden a entender y participar de las decisiones sobre el mundo natural y los cambios provocados por la actividad humana. Desde la perspectiva de la integracin cultural y poltica de una sociedad democrtica, en que la resolucin de problemas personales, sociales y medioambientales es cada vez ms compleja y demandante de recursos del saber, es particularmente clara la necesidad de una formacin cientfica bsica de toda la ciudadana (MINEDUC, 2009). Dentro del programa de Educacin Media Cientfico Humanista, no se considera la enseanza de la Microbiologa como una unidad independiente; sin embargo, algunos aspectos de ella son tratados en diferentes niveles de educacin, siendo poco significativo dentro del currculum nacional, lo que dificulta su comprensin global. La transmisin de datos no es el fin de la educacin cientfica, no puede ensear ciencias solo con datos, deben ser estos datos un medio (Campanario, 2000). Es por ello que consideramos necesaria la utilizacin de las actividades prcticas como apoyo a lo terico, para darle a estas pocas horas de la microbiologa un aprendizaje significativo. El propsito de este recurso, es la utilizacin del documento en el aula para que facilite la realizacin de actividades prcticas, para lograr en el estudiante una mayor comprensin de la microbiologa y por ende de la ciencia, siendo este un recurso transversal para toda la enseanza media, cuya finalidad es lograr en ellos un aprendizaje significativo.

2 NDICE Pgina. Organigrama..7 Introduccin...8 Captulo 1: Observando microorganismos in vivo...9 Ficha tcnica Puntos clave del captulo Actividad 1: Descubriendo vida en el agua estancada.11 Descripcin de la actividad 1 Procedimiento Recomendaciones Gua estudiante Actividad N 1: Descubriendo vida en el agua estancada!..............................12 Actividad 2: Qu hay en el sarro dental?.......................................................................................14 Descripcin de la Actividad 2 Procedimiento Recomendaciones Gua del estudiante Actividad N 2: Qu hay en el sarro dental?.............................................15 Actividad N 3: Rascndose la nariz!.............................................................................................17 Descripcin de la Actividad Procedimiento Recomendaciones Gua del estudiante Actividad N 3: Rascndose la nariz!........................................................18 Captulo 2: Analizando el medio que nos rodea..20 Ficha tcnica Puntos claves del captulo Actividad N 1: La prueba del dedo!..............................................................................................22 Descripcin de la Actividad 1 Procedimiento Recomendaciones Gua del estudiante Actividad N 1.1: Cmo elaborar una incubadora artesanal?...................23 Gua del estudiante Actividad N 1.2: Elaboracin de medio de cultivo slido25 Gua del estudiante Actividad N 1.3: La prueba del dedo...27 Gua del estudiante Actividad N 1.4 Parte I: Observacin de la prueba del dedo.29 Gua del estudiante Actividad N 1.4 Parte II: Observacin de la prueba del dedo30 Actividad N 2: El aire que respiramos...31 Descripcin de la actividad Procedimiento Recomendaciones Gua del estudiante Actividad N 2Parte I: El aire que respiramos32 Gua del estudiante Actividad N 2Parte II: El aire que respiramos33

Pgina. Captulo 3: Coloreando microorganismos...34 Ficha Tcnica Puntos claves del captulo Actividad N1: Tincin simple36 Descripcin de la actividad Procedimiento Recomendaciones Gua del estudiante Actividad N 1 Parte I: Tincin simple...38 Gua del estudiante Actividad N 1 Parte II: Tincin simple..41 Actividad N 2: Tincin Gram.42 Descripcin de la actividad Procedimiento Recomendaciones Gua del estudiante Actividad N 2: Tincin de gram....44 Captulo 4: Seccin anexos..48 Normas para Actividades Experimentales..49 Cmo utilizar un microscopio?.................................................................................................50 Materiales utilizados en los laboratorios de microbiologa............51 Conceptos asociados a microbiologa.52 Medios de cultivo54 Bibliografa..57 CD58

7 ORGANIGRAMA Esta gua presenta un orden bastante simple para que usted pueda ir incursionando por nuestros captulos los cuales se encuentran diferenciados en colores, ver esquema 1, donde podr seleccionar el que ms se adece a los contenidos que esta por ensear. Luego cada captulo presenta una tabla con la Ficha Tcnica en el cual se especifican; objetivos de aprendizaje, contenidos

conceptuales, habilidades de investigacin cientfica y habilidades socioemocionales. Posterior a esta, tenemos los Puntos claves del captulo que trabaja de manera general el marco terico que debe manejar el docente. De vez en cuando se citan ciertos recursos que estn presenten en el captulo IV de la gua (seccin Anexos). Cada captulo presenta actividades experimentales que se pueden trabajar tanto en el aula como en el laboratorio, en donde se incorpora materiales a utilizar, procedimiento del experimento y preguntas. Tambin recordar que esta gua posee material fotocopiable previamente indicado y un CD adjunto con la gua en formato digital.

Esquema 1: Identificacin de captulo por color.

8 INTRODUCCIN La observacin de microorganismos in vivo es la experiencia prctica ms simple y rpida de llevar a cabo, sobre todo en un establecimiento educacional. El prctico permite la observacin directa, adems facilita el estudio de determinadas caractersticas morfolgicas, tamaos reales y movimiento de los microorganismos. Para que los estudiantes puedan comprender correctamente los conceptos asociados a esta actividad experimental es necesario activar conocimientos previos. Estos conocimientos previos que poseen los estudiantes los podemos conocer a travs de la realizacin de preguntas de indagacin al inicio de la clase. Tambin es muy til hacer una lluvia de ideas, luego de conocer sus preconcepciones podemos dar pie a la clase en donde iniciamos entregando los objetivos de esta. Este punto es necesario que se realice ya que permite que los estudiantes tengan claro el foco de trabajo. Una buena estrategia para que los estudiantes no los olviden, es anotarlos a un costado del pizarrn. Si al momento de recoger los conocimientos previos nos damos cuenta que los estudiantes estn muy alejados del concepto en s, es til realizar en conjunto un mapa conceptual. Por ejemplo, un mapa conceptual que ha sido de gran ayuda tanto para nosotros como docentes como para los estudiantes que por primera vez se acercan a estos conceptos es el mapa 1:

Mapa conceptual1: Diferenciacin segn estructura celular, para contextualizar a los estudiantes.

Una vez que los estudiantes conocen los objetivos de trabajo, se procede a explicarles la actividad experimental en donde se trabajar en grupos de trabajo, para ello es necesario darles a conocer normas de laboratorio (ver captulo IV).

CAPITULO 1: OBSERVANDO MICROORGANISMOS IN VIVO

10 FICHA TCNICA

Objetivo de Aprendizaje Contenidos Conceptuales Habilidades de Investigacin Cientfica

Realizan actividad prctica siguiendo protocolo de trabajo. Observan los diferentes microorganismos presentes en las muestras. Describen y analizan lo observado. Microorganismos Usar instrumentos manipulndolos adecuadamente. Explorar las muestras observadas. Procesamiento e interpretacin de datos y formulacin de explicaciones. Demostrar curiosidad e inters por conocer seres vivos, objetos y/o eventos que conforman en entorno natural

Habilidades Socioemocionales (Actitudes) Puntos claves del captulo

Las actividades experimentales que se trabajarn en este captulo son las correspondientes a: -Descubriendo vida en el agua estancada! -Qu hay en el sarro dental? - Rascndose la nariz. Para ello es imprescindible que conozcamos los conceptos asociados a estos. Diariamente convivimos con una serie de microorganismos los cuales son invisibles al ojo humano, por ello es complejo que los estudiantes comprendan la relacin cotidiana que tenemos con ellos por el hecho de ser invisibles, y no la dan la importancia que estos tienen. A travs de estas tres actividades los estudiantes podrn conocer ms profundamente el mundo microscpico, pues analizarn el mundo que nos rodea a travs de actividades experimentales simples. Es necesario que los estudiantes con antelacin conozcan las normas de laboratorio (ver captulo IV) para mantener una correcta disciplina al realizar los prcticos. Para poder llevar a cabo estas actividades el docente debe manejar ciertos contenidos como la realizacin de un examen en fresco (preparacin hmeda). La preparacin hmeda se realiza colocando una gota de la suspensin de microorganismos sobre un portaobjeto, la cual se puede observar directamente al microscopio (ver utilizacin del microscopio captulo IV).

11 Descubriendo vida en el agua estancada! Actividad 1 Descripcin de la Actividad 1 Capitulo 1 Actividad 1 Objetivo de Aprendizaje Observacin de microorganismos in vivo Descubriendo vida en el agua estancada! Realizan actividad prctica siguiendo protocolo de trabajo. Observan los diferentes microorganismos presentes en la muestra de agua estancada. Describen y analizan lo observado. Microorganismos

Usar instrumentos manipulndolos adecuadamente. Explorar las muestras observadas. Procesamiento e interpretacin de datos y formulacin de explicaciones. Planificar y llevar a cabo actividades prcticas y de investigacin, trabajando tanto de manera individual como grupal. Usar y evaluar crticamente las evidencias. Habilidades Demostrar curiosidad e inters por conocer seres vivos, objetos y/o Socioemocionales eventos que conforman en entorno natural (Actitudes) Recursos Agua estancada (florero) Microscopio Portaobjetos Cubreobjeto Papel absorbente Gotario PROCEDIMIENTO: 1. Tomar una gota de la muestra (agua estancada) con el gotario, y depositarla sobre el portaobjeto, recuerde que este debe estar seco y limpio, libre de grasa. 2. Colocar el cubreobjeto sobre el portaobjeto, especficamente por encima de la gota de agua. 3. Si hay un exceso de muestra (agua) la puede retirar con papel absorbente. 4. Ubique la muestra en el microscopio, siempre con el menor objetivo 4x. Es importante tomar en cuenta que la luz del microscopio ir evaporando el agua de la muestra, por lo tanto los microorganismos perdern movilidad, para evitar esa situacin agregue ms lquido, es decir, ms muestra.Luego, cambie el aumento a 10X hasta utilizar el 40x. Recomendaciones: El docente debe revisar con antelacin el funcionamiento del o los microscopios, y cerciorarse de la cantidad de dicho instrumento, para que en el caso de que el recurso fuera limitado, deba planificar una actividad demostrativa, y en caso que exista ms de uno, planificar una actividad grupal.Si el profesor lo estima conveniente, puede ejecutar la actividad con diferentes muestras de aguas y comparar la cantidad de microorganismos que hay en cada una de ellas.
A continuacin se presenta un material fotocopiable para entregar a los estudiantes.

Contenidos Conceptuales Habilidades de Investigacin Cientfica

12 Gua del estudiante Actividad N 1 Descubriendo vida en el agua estancada Integrantes:_____________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ Curso: Fecha: Materiales: -Agua estancada (florero) -Microscopio -Portaobjetos -Cubreobjeto -Papel absorbente -Gotario
PROCEDIMIENTO:

1. Tomar una gota de la muestra (agua estancada) con el gotario, y depositarla sobre el portaobjeto, recuerde que este debe estar seco y limpio, libre de grasa. 2. Colocar el cubreobjeto sobre el portaobjeto, especficamente por encima de la gota de agua. 3. Si hay un exceso de muestra (agua) la puede retirar con papel absorbente. 4. Ubique la muestra en el microscopio, siempre con el menor objetivo 4x. Es importante tomar en cuenta que la luz del microscopio ir evaporando el agua de la muestra, por lo tanto los microorganismos perdern movilidad, para evitar esa situacin agregue ms lquido (ms muestra). 5. Luego, cambie el aumento a 10X hasta utilizar el 40x. Preguntas de indagacin Qu debisemos ver en la muestra al observarla al microscopio?

1. Dibuja segn cada aumento y las respectivas observaciones. Aumento 4X Observaciones:

13 Aumento 10X Observaciones:

Aumento 40X Observaciones:

2. Qu ocurre con el trascurso del tiempo en la movilidad de los microorganismos? Construyan posibles explicaciones al fenmeno. ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ 3. Para finalizar, seale los inconvenientes y ventajas percibidos en la realizacin del prctico descubriendo vida en el agua estancada. ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________

14 Qu hay en el sarro dental? Actividad 2 Descripcin de la Actividad 2 Captulo 1 Actividad 2 Objetivo de Aprendizaje Observacin de microorganismos in vivo Qu hay en el sarro dental? Realizan actividad prctica siguiendo protocolo de trabajo. Observan los diferentes microorganismos presentes en la muestra de sarro dental. Describen y analizan lo observado. Microorganismos

Contenidos Conceptuales Habilidades de Investigacin Cientfica

Usar instrumentos manipulndolos adecuadamente. Explorar las muestras observadas. Procesamiento e interpretacin de datos y formulacin de explicaciones. Elaboran conclusiones, explicaciones y predicciones de los fenmenos o problemas en estudio. Habilidades Demostrar curiosidad e inters por conocer seres vivos, objetos y/o Socioemocionales eventos que conforman el entorno cotidiano. (Actitudes) Recursos Sarro dental Microscopio Portaobjetos Cubreobjetos Mondadientes Papel absorbente Solucin salina (agua destilada + NaCl 0,8%) PROCEDIMIENTO: 1. Con el gotario agregue una gota de la solucin salina (agua destilada + NaCl 0,8%) en el portaobjeto. 2. Tome una muestra de sarro dental con el mondadiente y disulvala en la gota de la solucin salina que est en el portaobjeto. Si hay exceso de agua puede utilizar papel absorbente. 3. Ubique la muestra en el microscopio, siempre desde el menor objetivo 4x hasta llegar a 40x. Recomendaciones: El docente debe revisar con antelacin el funcionamiento del o los microscopios, y cerciorarse de la cantidad de dicho instrumento, para que en el caso de que el recurso fuera limitado, deba planificar una actividad demostrativa, y en caso que exista ms de uno, planificar una actividad grupal.Si el profesor lo estima conveniente, puede ejecutar la actividad con diferentes muestras de aguas y comparar la cantidad de microorganismos que hay en cada una de ellas.

A continuacin se presenta un material fotocopiable para entregar a los estudiantes.

15 Gua del estudiante Actividad N 2 Qu hay en el sarro dental? Integrantes:______________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ Curso: Fecha: Materiales: -Sarro dental -Microscopio -Portaobjetos -Cubreobjetos -Mondadientes -Papel absorbente -Solucin salina (agua destilada + NaCl 0,8%) Procedimiento 1. Con el gotario agregue una gota de la solucin salina (agua destilada + NaCl 0,8%) en el portaobjeto. 2. Tome una muestra de sarro dental con el mondadiente y disulvala en la gota de la solucin salina que est en el portaobjeto. Si hay exceso de agua puede utilizar papel absorbente. 3. Ubique la muestra en el microscopio, siempre con el menor objetivo 4x hasta llegar a 40x. Preguntas de indagacin 1. Por qu se forma el sarro dental? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________ 2. Dibuja segn cada aumento y las respectivas observaciones. Aumento 4X Observaciones:

16 Aumento 10X Observaciones:

Aumento 40X Observaciones:

3. Cul es la influencia del sarro dental en la higiene bucal? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ 4. Para finalizar sealar los inconvenientes y ventajas percibidos en la realizacin del prctico Qu hay en el sarro dental
___________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________________

17 Rascndose la nariz! Actividad N 3 Descripcin de la Actividad Captulo 1 Actividad 3 Objetivo de Aprendizaje Observacin de microorganismos in vivo Rascndose la nariz Realizan actividad prctica siguiendo protocolo de trabajo. Observan los diferentes microorganismos presentes en la muestra de mucosidad nasal. Describen y analizan lo observado. Microorganismos Usar instrumentos manipulndolos adecuadamente. Explorar las muestras observadas. Procesamiento e interpretacin de datos y formulacin de explicaciones. Demostrar curiosidad e inters por conocer seres vivos, objetos y/o eventos que conforman el entorno cotidiano. Mucosidad nasal Microscopio Portaobjetos Cubreobjetos Cotonito de algodn Papel absorbente Solucin salina (agua destilada + NaCl 0,8%)

Contenidos Conceptuales Habilidades de Investigacin Cientfica Habilidades Socioemocionales (Actitudes) Recursos

PROCEDIMIENTO: 1. Con el gotario agregue una gota de la solucin salina (agua destilada + NaCl 0,8%) en el portaobjeto 2. Con el cotonito tome una muestra de mucosidad nasal y disulvala en la gota de la solucin salina que est en el portaobjeto, cubra la muestra con el cubreobjeto. Si hay exceso de agua puede utilizar papel absorbente. 3. Ubique la muestra en el microscopio, siempre desde el menor objetivo 4x hasta llegar a 40x. 4. Registre sus observaciones en la tabla correspondiente. Recomendaciones El docente debe revisar con antelacin el funcionamiento del o los microscopios, y cerciorarse de la cantidad de dicho instrumento, para que en el caso de que el recurso fuera limitado, deba planificar una actividad demostrativa, y en caso que exista ms de uno, planificar una actividad grupal.Si el profesor lo estima conveniente, puede ejecutar la actividad con diferentes muestras de aguas y comparar la cantidad de microorganismos que hay en cada una de ellas.

A continuacin se presenta un material fotocopiable para entregar a los estudiantes.

18 Gua del estudiante Actividad N 3 Rascndose la nariz! Integrantes:______________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ Curso:Fecha: Materiales: -Mucosidad nasal -Microscopio -Portaobjetos -Cubreobjetos -Cotonito de algodn -Papel absorbente -Solucin salina (agua destilada + NaCl 0,8%) Procedimiento: 1. Con el gotario agregue una gota de la solucin salina en el portaobjeto, recuerde que previamente debe preparar la solucin con agua destilada ms NaCl (0,8%). 2. Con el cotonito tome una muestra de mucosidad nasal y disulvala en la gota de la solucin salina que est en el portaobjeto, cubra la muestra con el cubreobjeto. Si hay exceso de agua puede utilizar papel absorbente. 3. Ubique la muestra en el microscopio, siempre con el menor objetivo 4x hasta llegar a 40x. 4. Registre sus observaciones en la tabla correspondiente. Preguntas de indagacin A qu se debe la mucosidad nasal? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ Qu podramos encontrar en la mucosidad nasal? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ 1. Dibuja segn cada aumento y las respectivas observaciones. Aumento 4X Observaciones:

19 Aumento 10X Observaciones:

Aumento 40X Observaciones:

2. Para finalizar sealar los inconvenientes y ventajas percibidos en la realizacin del prctico mucosidad
nasal

___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________

Captulo 20 II

CAPTULO 2: ANALIZANDO EL MEDIO QUE NOS RODEA

Captulo 21 II FICHA TCNICA

Objetivo de Aprendizaje

Contenidos Conceptuales Habilidades de Investigacin Cientfica

Realizan actividad prctica siguiendo protocolo de trabajo. Observan los diferentes microrganismos, realizan medios de cultivo y siembra de microorganismos. Describen y analizan lo observado. Microorganismos, medios de cultivo y siembra

Usar instrumentos manipulndolos adecuadamente. Realizan medios de cultivo en placa y siembra. Predecir los resultados esperados. Explorar las muestras observadas. Procesamiento e interpretacin de datos y formulacin de explicaciones. Habilidades Demostrar curiosidad e inters por conocer seres vivos, objetos Socioemocionales y/o eventos que conforman en entorno natural (Actitudes)

Puntos claves del captulo

Las actividades experimentales que se trabajarn en este captulo son las correspondientes a: -La prueba del dedo. -El aire que respiramos Para ello es imprescindible que conozcamos las normas de laboratorio (ver captulo IV), y seguir paso a paso los procedimientos de las guas de trabajo. Antes de comenzar debemos tener en claro qu es un medio de cultivo: Los medios de cultivo se pueden preparar para ser usados en estado lquido o como geles solidificantes. Para que un medio de cultivo pase a semislido por lo general se usan productos solidificantes, que normalmente es Agar, pero en este caso es elaborado con un cubo de caldo de carne y gelatina (actividad N 1.2). Los medios de cultivo se disponen en placas circulares de vidrio o plstico, con tapaderas que se denominan placas de Petri, donde las clulas microbianas pueden proliferar y formar colonias visibles al ojo humano. Se debe mencionar que el sustrato que contiene los nutrientes necesarios para el crecimiento de microorganismos es el medio, mientras que el cultivo es el crecimiento de los microorganismos en el medio de cultivo. Para que crezca un cultivo de microorganismos es necesario un medio favorable en donde las condiciones de temperatura estn controladas (calor seco), para eso ser necesario la elaboracin de una incubadora artesanal (actividad N 1.1)

Captulo 22 II La prueba del dedo! Actividad N 1 Descripcin de la Actividad 1

Capitulo 2 Actividad 1 Objetivo de Aprendizaje Contenidos Conceptuales Habilidades de Investigacin Cientfica

Analizando el medio que nos rodea La prueba del dedo! Elaborar un medio de cultivo para microorganismos Microorganismos, medio de cultivo

Observar las colonias de bacterias presentes en los medios de cultivo Explorar las muestras observadas. Experimentar de manera prctica lo qu es un cultivo Habilidades Demostrar curiosidad e inters por conocer seres vivos, objetos Socioemocionales y/o eventos que conforman el entorno natural. (Actitudes) Asumir responsabilidades e interactuar en forma colaborativa y flexible en los trabajos en equipo, aportando y enriqueciendo el trabajo comn. Reconocer la importancia de seguir normas y procedimientos que resguarden y promuevan la seguridad personal y colectiva Recursos Incubadora artesanal Medio de cultivo con jalea Placa de Petri PROCEDIMIENTO Esta actividad se divide en cuatro etapas: 1. Elaboracin de incubadora artesanal. 2. Elaboracin de medio de cultivo slidocon jalea y caldo nutritivo, e incubacin por 24 horas. 3. Realizacin de la muestra: La prueba del dedo, e incubacin por una semana. 4. Observacin final de la muestra.

Recomendaciones: Si el profesor lo estima conveniente puede hacer partcipe a los estudiantes de las cuatro etapas de esta actividad. Para ello debe considerar el tiempo para cada una de las etapas y ajustarlo al currculum para utilizar el tiempo eficientemente. Si por razones de tiempo slo estima conveniente que los estudiantes realicen algunas de estas etapas, se recomienda que participen en la actividad 3 y 4, por lo que necesariamente la actividad 1 y 2 debe realizarla previamente el profesor.

A continuacin se presenta un material fotocopiable para entregar a los estudiantes.

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Cmo elaborar una incubadora artesanal? Gua del estudiante Actividad N 1.1 Materiales: -Caja de carton o plumavit de 50 cm X 50 cm -Papel de aluminio para forrar caja -Corta cartn o tijeras -Cinta adhesiva -Vaso plstico -Silicona lquida -Agua potable -Termmetro -Cartulina para forrar caja -Pegamento en barra -Pitilla de lana Procedimiento: Para el caso de una caja de cartn forra cada una de sus caras interiores con el papel de aluminio, pegando este con pegamento en barra o silicona lquida para darle ms firmeza y reforzar las esquinas con cinta adhesiva, si la caja es de plumavit el forrado no es necesario. Selecciona una de sus caras para que cumpla la funcin de puerta, como en la imagen 1, preferentemente una de las que se abre, la que tambin debe estar forrada.

Imagen 1. Indicacin de puerta.

Cubre el exterior con cartulina y procura marcar cul de las caras corresponde a la puerta y a la base de la incubadora como en la imagen 2.

Imagen 2. Indicacin de base y puerta.

24 Para mayor facilidad de apertura/cierre de la puerta elabora un pasador con la pitilla de lana y el corta cartn. Para ello realiza pequea perforaciones por donde pasar la lana, ver imagen 3.

Imagen 3. Perforaciones.

Pasa a travs de las perforaciones la pitilla de lana y hacer un nudo similar al que realizas al amarrar los zapatos. Ver imagen 4

Imagen 4. Pitilla de lana uniendo perforaciones.

En una de las esquinas interiores ubicar y pegar con silicona el vaso plstico, ver imagen 5, y finalmente dejar el termmetro en el interior del vaso.

Imagen 5. Vaso en el interior de la caja.

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.Elaboracin de medio de cultivo slido.

Gua del estudiante Actividad N 1.2

Materiales: -1 olla para 1 litro de agua. -1 Hervidor elctrico o tetera -2 litros de agua aprox. -Placas de Petri (2 por grupo) -1 cubo de caldo de carne -1 paquete de jalea incolora o de sabor pia. -1 pao para limpiar. - 5 ml. De cloro lquido. -Incubadora artesanal. Procedimiento: En una olla introduzca las placas de Petri con sus tapas correspondientes, y un cucharon. Hierva 1 litro de agua en el hervidor y vierta el contenido en la olla y deje actuar durante 5 minutos, con el fin de esterilizar las placas.

Imagen 1. Esterilizacin de placas de Petri.

Saque las placas de Petri con sus tapas y djelas sobre una superficie limpia, previamente desinfectada con cloro.

Imagen 2. Placas de Petri ya esterilizadas.

26 Lave con agua caliente la olla para volverla a utilizar, luego vierta 2 tazas de agua caliente (previamente hervida) en la olla. Muela el cubo de caldo de carne e introdzcalo en la olla y revulvalo, luego tambin vierta la gelatina a la olla y revulvalo hasta que ambos productos se disuelvan completamente. Agregue dos tazas de agua helada y revuelva hasta que estn todos los productos incorporados. Cuando la mezcla este fra, con el cucharon extraiga la mezcla y virtala al interior de la placa de Petri y tpela.

Imagen 3. Placas de Petri con medios de cultivo.

Una vez solidificado el medio de cultivo, posicin 1 de imagen 4, coloque la placa de Petri invertida como en la posicin 2 de imagen 4, para que el agua del medio de cultivo al condensarse no afecte.

Imagen 4. Placas de Petri invertidas.

Finalmente almacene las placas de Petri invertidas en el interior de la incubadora artesanal, ver imagen 5, llene el vaso de este e introduzca el termmetro, cierre la incubadora y espere 24 horas para realizar la siembra.

Imagen 5. Placas de Petri invertidas al interior de incubadora artesanal.

27 La prueba del dedo Gua del estudiante Actividad N 1.3 Formar grupos de trabajo de 4 personas aprox. Materiales: -Incubadora artesanal -2 medios de cultivo por grupo -Lpiz marcador -1 pao para limpiar -5 ml. de cloro -Mechero -Agua -Jabn lquido -Superficies sucias Procedimiento: Cada grupo de trabajo (de 4 personas aprox.) debe recibir dos medios de cultivo. Rotulen con lpiz marcadorla base de la placa identificndola con el nombre del grupo y fecha de realizacin de la siembra.

Imagen 1. Rotulacin placa de Petri.

Desinfecte el mesn en el cual va a trabajar. Para desinfectar objetos inanimados o inertes puede utilizar cloro lquido. Para esto utilice el pao y los 5 ml. de cloro lquido. En presencia del profesor ubique la placa cerca del mechero, el cual debe estar encendido para mantener un ambiente asptico en el rea de trabajo. Ver Imagen 2.

Imagen 2. Utilizacin mechero en presencia del profesor.

28 Uno de los integrantes del grupo debe lavar sus manos con abundante agua y jabn. Otro de los integrantes debe tocar con sus manos (dedo ndice) superficies cotidianas como; manilla de la puerta, monedas, lavamanos, suelo, entre otros. Un tercer integrante del grupo debe levantar la tapa de la placa 1 sutilmente y la persona que realiz la prueba del dedo limpio debe pasar su dedo ndice por la superficie del medio de cultivo slido. Posterior a esto se cierra la placa. El cuarto integrante debe levantar la tapa de la placa 2 sutilmente y la persona que realiz la prueba del dedo sucio debe pasar su dedo ndice por la superficie del medio de cultivo slido. Posterior a esto se cierra la placa.

Imagen 3. Tapa de la placa de Petri levantada sutilmente para realizar la siembra.

Finalmente se almacenan los medios de cultivos en la incubadora artesanal por 1 semana.

Imagen 4. Incubacin de siembras placa 1 y placa 2, por 1 semana.

29 Observacin de la prueba del dedo Gua del estudiante Actividad N 1.4 Parte I Integrantes:_________________________________________________________________________ _______________________________________________________ Preguntas de indagacin 1. Qu deberamos encontrar al cabo de una semana en la placa 1? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _______________________________________ 2. Qu deberamos encontrar al cabo de una semana en la placa 2? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ 3. De acuerdo a sus conocimientos, mencione 2 similitudes y diferencias entre ambas placas. Fundamente sus respuestas con argumentos concretos. ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _______________________________________ 4. Realiza a travs de un dibujo una aproximacin de lo que debiramos encontrar en la placa tras una semana de incubacin. Placa 1 Placa 2

30 Observacin de la prueba del dedo Gua del estudiante Actividad N 1.4 Parte II

Integrantes:_________________________________________________________________________ ____________________________________________________________ Materiales: -Incubadora con cultivos. -Cultivos para cada grupo de trabajo. Procedimiento: -Retirar de la incubadora las placas correspondientes al grupo de trabajo. -No se deben abrir las placas. -Realizar preguntas de la gua del estudiante. -Una vez utilizadas devolver las placas a la incubadora. Preguntas 1. En la placa n 1 encontr lo que esperaba?, de lo contrario, Cul crees que fue el motivo de tal respuesta? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ 2. En la placa n 2 encontr lo que esperaba?, de lo contrario, Cul crees que fue el motivo de tal respuesta? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ 3. Mencione 2 similitudes y diferencias entre ambas placas. Fundamente sus respuestas con argumentos concretos. ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ 4. Observa y realiza un dibujo de ambas placas y contrstalo con tu prediccin. Placa 1 Placa 2

Contraste:__________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________

Captulo II El aire que respiramos Actividad 2 Descripcin de la actividad Capitulo 2 Actividad 2 Objetivo de Aprendizaje Contenidos Conceptuales Habilidades de Investigacin Cientfica Habilidades Socioemocionales (Actitudes) Analizando el medio que nos rodea El aire que respiramos Observan los cultivos con presencia de colonias Clula procarionte, eucarionte y bacterias. Observar las colonias de bacterias presentes en los medios de cultivo Explorar las muestras observadas. Experimentar de manera prctica lo que es un cultivo Demostrar curiosidad e inters por conocer seres vivos, objetos y/o eventos que conforman el entorno natural. Asumir responsabilidades e interactuar en forma colaborativa y flexible en los trabajos en equipo, aportando y enriqueciendo el trabajo comn. Reconocer la importancia de seguir normas y procedimientos que resguarden y promuevan la seguridad personal y colectiva Placas con medio de cultivo, ver actividad 1.2 del captulo II. Incubadora, ver actividad 1.1 del captulo II. Lpiz marcador 31

Recursos

Procedimiento: -Realizar previamente los medios de cultivo, ver actividad 1.2 del captulo II. -Luego de 24 horas almacenadas en la incubadora, retirar los medios de cultivos y repartir una placa por grupo de trabajo. -Los estudiantes deben marcar la placa de Petri con la cual trabajarn. Ver imagen 1, actividad 1.3 captulo II. -Uno de los integrantes destapa la placa de Petri y la dejan sin su tapa por 30 minutos aprox. -Luego cierran las placas y las almacenan por 1 semana en la incubadora artesanal en posicin invertida. Ver imagen 4 actividad 1.3 captulo II. Recomendaciones: El profesor debe informarse de la elaboracin de la incubadora artesanal y medios de cultivo, presentes en la actividad N 1.

A continuacin se presenta un material fotocopiable para entregar a los estudiantes.

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El aire que respiramos Gua del estudiante Actividad N 2 Parte I Integrantes: __________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ Materiales: -Medios de cultivo -Incubadora artesanal -Lpiz marcador Procedimiento: -Realizar medios de cultivo. -Luego de 24 horas almacenadas en la incubadora, retirar los medios de cultivos y repartir una placa por grupo de trabajo. -Marcar con nombre de grupo y fecha la placa de Petri con la cual trabajarn. -Uno de los integrantes destapa la placa de Petri y la dejan sin su tapa por 30 minutos aprox. -Luego cierran la placa y la almacenan por 1 semana en la incubadora artesanal en posicin invertida. Preguntas de Indagacin 1. Qu deberamos encontrar al cabo de una semana en la placa de Petri? Fundamenta. ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________

33 El aire que respiramos Gua del estudiante Actividad N 2 Parte II Integrantes: __________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________ Materiales: -Medios de cultivo -Incubadora artesanal Procedimiento: -Retirar medio de cultivo correspondiente al grupo, de la incubadora artesanal. -Observar y responder la gua. Preguntas 1. Qu encontramos en los medios de cultivo al cabo de una semana? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ __________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________ 2. Contraste su respuesta con sus predicciones iniciales. ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ __________________________________________________ 3. A qu se debe lo observado en la placa de Petri. ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ __________________________________________________ 4. Qu conclusiones pueden extraer de esta actividad? ___________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _________________________________________

Captulo III 34

Captulo 3: Coloreando microorganismos

Captulo III 35 FICHA TCNICA

Objetivo de Aprendizaje

Contenidos Conceptuales Habilidades de Investigacin Cientfica

Habilidades Socioemocionales (Actitudes)

Realizan actividad prctica siguiendo protocolo de trabajo. Observan los diferentes microrganismos presentes en las muestras. Describen y analizan lo observado. Microorganismos Usar instrumentos manipulndolos adecuadamente. Explorar las muestras observadas. Procesamiento e interpretacin de datos y formulacin de explicaciones. Demostrar curiosidad e inters por conocer seres vivos, objetos y/o eventos que conforman en entorno natural

Puntos claves del captulo

Una de las caractersticas ms relevantes de las bacterias es su morfologa, caracterizada por el tamao, la forma, el arreglo y la estructura. Existen bacterias con forma redondeada llamadas cocos, en forma cilndrica llamadas bacilos y una tercera morfologa las que tienen forma de espirales, denominadas espirilos. Para poder identificar la morfologa de las bacterias se realizan diferentes tinciones en donde una muestra de cultivo es extendida y fijada en un portaobjeto con un colorante especfico. Una de las coloraciones ms utilizadas para determinar la morfologa de las bacterias recibe el nombre de coloracin simple (actividad 1 de este captulo). Para obtener informacin ms especfica acerca de la morfologa y composicin qumica de las bacterias, se debe recurrir a tinciones diferenciales que involucran el uso de varios reactivos, como es el caso de la tincin de gram. La tincin de gram est diseada para diferenciar entre las bacterias gram positiva y gram negativa, ya que las que pueden retener el colorante cristal violeta se tien de color azul intenso/ siendo bacterias gram positivas, y aquellas que no lo pueden retener se tien de rojo siendo estas bacterias gram negativas.

Captulo III 36 Tincin simple Actividad N1 Descripcin de la actividad 1 Captulo 3 Actividad 1 Objetivo de Aprendizaje Contenidos Conceptuales Habilidades de Investigacin Cientfica Habilidades Socioemocionales (Actitudes) Coloreando microorganismos Tincin simple Observan los cultivos con presencia de colonias Clula procarionte, bacterias. Observar las colonias de bacterias presentes en los medios de cultivo Explorar las muestras observadas. Experimentar de manera prctica lo qu es un cultivo Demostrar curiosidad e inters por conocer seres vivos, objetos y/o eventos que conforman el entorno natural. Asumir responsabilidades e interactuar en forma colaborativa y flexible en los trabajos en equipo, aportando y enriqueciendo el trabajo comn. Reconocer la importancia de seguir normas y procedimientos que resguarden y promuevan la seguridad personal y colectiva Portaobjeto, alcohol, gotario, solucin salina, placas con cultivo, mechero, azul de metileno (o cristal violeta o safranina), agua, microscopio.

Recursos

Procedimiento: 1. Tome un portaobjeto desde los bordes y limpie la superficie con alcohol para eliminar los restos de grasa. 2. Con un gotario agregue una o dos gotas de solucin salina (agua destilada + NaCl al 0,8%) sobre el centro del portaobjeto. 3. Luego tome una muestra (inculo) desde las placas que ya ha sembrado, con la ayuda de un mondadiente. Extienda sobre el portaobjeto la muestra obtenida. 4. En presencia del profesor, tome el portaobjeto desde los extremos y evapore el exceso de agua pasando la muestra sobre la llama del mechero, cuidando de no quemarse y no quemar la muestra. 5. Una vez que el agua se haya evaporado dejar enfriar la preparacin y con un gotario tome unos 2 ml de colorante, puede ser: azul de metileno, cristal violeta o safranina. Derrame una gota de colorante sobre el frotis realizado, y deje actuar el colorante por un minuto.

37 6. Ubique el portaobjeto bajo una corriente suave de agua para eliminar el resto del colorante, lo ideal sera disponer el portaobjetos de lado bajo la corriente de agua. 7. Seque la muestra al aire hasta que ya no tenga exceso de agua. 8. Una vez seque puede realizar la observacin microscpica desde el menor al mayor aumento.

Recomendaciones: El profesor debe cerciorarse de que existan mecheros disponibles, y de la seguridad adecuada para realizar este prctico. Adems se debe contar un cultivo de bacterias previo, se recomienda utilizar los elaborados en los captulos anteriores.

A continuacin se presenta un material fotocopiable para entregar a los estudiantes.

38 Tincin simple Gua del estudiante Actividad N 1 Parte I Integrantes:______________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ ______________________________________________________ Curso: Fecha: Materiales: -Cultivo de bacterias (se puede utilizar La prueba del dedo) -Portaobjejo -Alcohol -Mechero -Mondadiente -Azul de metileno, cristal violeta o safranina -solucin salina (agua destilada + NaCl al 0,8%) -Agua Pregunta de Indagacin 1. Qu crees t que veremos al teir estos microorganismos? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _______________________________________________ Procedimiento: 1. Tome un portaobjeto y limpie la superficie con gotas de alcohol para eliminar los restos de grasa.

Imagen 1. Limpieza portaobjeto.

2. Con un gotario agregue una o dos gotas de solucin salina (agua destilada + NaCl al 0,8%) sobre el centro del portaobjeto.

Imagen 2. Agregando solucin salina.

39 3. Luego tome una muestra desde las placas que ya ha sembrado. Con la ayuda de un mondadiente extienda sobre el portaobjeto la muestra (ver imagen 3. Secuencia 3).

Imagen 3. Secuencia de extensin.

4. En presencia del profesor, tome el portaobjeto desde los extremos y evapore el exceso de agua pasando la muestra sobre la llama del mechero, cuidando de no quemarse y no quemar la muestra.

Imagen 4. Fijacin de la muestra.

5. Una vez que el agua se haya evaporado dejar enfriar la preparacin y con un gotario tome unos 2 ml de colorante, puede ser: azul de metileno, cristal violeta o safranina. Derrame una gota de colorante sobre el frotis realizado, y deje actuar el colorante por un minuto.

Imagen 5. Incorporacin tincin.

6. Ubique el portaobjeto bajo una corriente suave de agua para eliminar el resto del colorante, lo ideal sera disponer el portaobjetos de lado bajo la corriente de agua.

Imagen 6. Lavado.

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7. Seque la muestra al aire hasta que ya no tenga exceso de agua.

Imagen 7. Secado al aire.

8. Una vez seca la muestra puede realizar la observacin microscpica desde el menor al mayor aumento y resolver la Parte II de la gua

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Tincin simple Gua del estudiante Actividad N 1 Parte II Integrantes:______________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ ______________________________________________ Curso: Fecha: Preguntas
1. Cul es la finalidad de utilizar azul de metileno?

_______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________ _________________________________________________________________ 2. Por qu es importante fijar la muestra? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _________________________________________ 3. Completa el siguiente recuadro: Aumento 4X Dibuje las clulas bacterianas segn aumento Aumento 10X Aumento 40X

Descripcin de lo observado

Captulo 42 III Tincin Gram Actividad N 2 Descripcin de la actividad Unidad 3 Actividad Objetivo de Aprendizaje Contenidos Conceptuales Habilidades de Investigacin Cientfica Habilidades Socioemocionales (Actitudes) Coloreando microorganismos Tincin gran Observan los cultivos con presencia de colonias Clula procarionte, bacterias. Observar las colonias de bacterias presentes en los medios de cultivo Explorar las muestras observadas. Experimentar de manera prctica lo qu es un cultivo Demostrar curiosidad e inters por conocer seres vivos, objetos y/o eventos que conforman el entorno natural. Asumir responsabilidades e interactuar en forma colaborativa y flexible en los trabajos en equipo, aportando y enriqueciendo el trabajo comn. Reconocer la importancia de seguir normas y procedimientos que resguarden y promuevan la seguridad personal y colectiva Portaobjeto, alcohol, solucin salina, placa con cultivo, agua, mechero, cristal violeta, yodo o lugol, safranina, microscopio.

Recursos

Procedimiento: 1. Tome un portaobjeto y limpie la superficie con gotas de alcohol para eliminar los restos de grasa. 2. Con un gotario agregue una o dos gotas de solucin salina (agua destilada + NaCl al 0,8%) sobre el centro del portaobjeto. 3. Luego tome una muestra desde las placas que ya ha sembrado. Con la ayuda de un mondadiente extienda sobre el portaobjeto la muestra. 4. En presencia del profesor, tome el portaobjeto desde los extremos y evapore el exceso de agua pasando la muestra sobre la llama del mechero, cuidando de no quemarse y no quemar la muestra. 5. Una vez que el agua se haya evaporado dejar enfriar la preparacin y con un gotario tome unos 2 ml de colorante cristal violeta. Derrame una gota de colorante sobre el frotis realizado, y deje actuar el colorante por 30 segundos. 6. Ubique el portaobjeto bajo una corriente suave de agua para eliminar el resto del colorante, lo ideal sera disponer el portaobjetos de lado bajo la corriente de agua.

43 7. Con un gotario tome unos 2 ml de yodo/lugol. Derrame una gota de colorante sobre el frotis realizado, y deje actuar el colorante por 30 segundos. 8. Lave la muestra con alcohol para retirar el exceso de colorante. 9. Ubique el portaobjeto bajo una corriente suave de agua para eliminar el resto del colorante, lo ideal sera disponer el portaobjetos de lado bajo la corriente de agua. 10.Con un gotario tome unos 2 ml de safranina. Derrame una gota de colorante sobre el frotis realizado, y deje actuar el colorante por 20 segundos. 11.Ubique el portaobjeto bajo una corriente suave de agua para eliminar el resto del colorante, lo ideal sera disponer el portaobjetos de lado bajo la corriente de agua. 12.Seque la muestra al aire hasta que ya no tenga exceso de agua. 13.Una vez seca la muestra puede realizar la observacin microscpica desde el menor al mayor aumento y resolver la Parte II de la gua

Recomendaciones: Para realizar este prctico es necesario tener todos los recursos para lograr el objetivo de la clase. Adems se recomienda mantener los recursos cercanos al momento de la experimentacin y darles a conocer las normas de seguridad.

A continuacin se presenta un material fotocopiable para entregar a los estudiantes.

44 Tincin de gram Gua del estudiante Actividad N 2 Integrantes:______________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ Curso: Fecha: Materiales: -Portaobjeto -alcohol -solucin salina -placa con cultivo -agua -mechero -cristal violeta -yodo o lugol -safranina -microscopio Procedimiento: 1. Tome un portaobjeto y limpie la superficie con gotas de alcohol para eliminar los restos de grasa.

2. Con un gotario agregue una o dos gotas de solucin salina (agua destilada + NaCl al 0,8%) sobre el centro del portaobjeto.

45 3. Luego tome una muestra desde las placas que ya ha sembrado. Con la ayuda de un mondadiente extienda sobre el portaobjeto la muestra (ver secuencia 3).

4. En presencia del profesor, tome el portaobjeto desde los extremos y evapore el exceso de agua pasando la muestra sobre la llama del mechero, cuidando de no quemarse y no quemar la muestra.

5. Una vez que el agua se haya evaporado dejar enfriar la preparacin y con un gotario tome unos 2 ml de colorante cristal violeta. Derrame una gota de colorante sobre el frotis realizado, y deje actuar el colorante por 30 segundos.

6. Ubique el portaobjeto bajo una corriente suave de agua para eliminar el resto del colorante, lo ideal sera disponer el portaobjetos de lado bajo la corriente de agua.

7. Con un gotario tome unos 2 ml de yodo/lugol. Derrame una gota de colorante sobre el frotis realizado, y deje actuar el colorante por 30 segundos.

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8. Lave la muestra con alcohol para retirar el exceso de colorante.

9. Ubique el portaobjeto bajo una corriente suave de agua para eliminar el resto del colorante, lo ideal sera disponer el portaobjetos de lado bajo la corriente de agua.

10.Con un gotario tome unos 2 ml de safranina. Derrame una gota de colorante sobre el frotis realizado, y deje actuar el colorante por 20 segundos.

11.Ubique el portaobjeto bajo una corriente suave de agua para eliminar el resto del colorante, lo ideal sera disponer el portaobjetos de lado bajo la corriente de agua.

12.Seque la muestra al aire hasta que ya no tenga exceso de agua.

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13.Una vez seca la muestra puede realizar la observacin microscpica desde el menor al mayor aumento y resolver la Parte II de la gua Preguntas
1. Cul es la finalidad de utilizar las tinciones?

___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________ 2. Por qu es importante fijar la muestra? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _________________________________________ 3. Qu resultados obtenemos al realizar la tincin gram? ___________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________ _________________________________________ 4. Completa el siguiente recuadro: Aumento 4X Dibuje y coloree las clulas bacterianas segn aumento Aumento 10X Aumento 40X

Descripcin de lo observado

Captulo 48 IV

Captulo 4: SECCIN ANEXOS.

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Normas para Actividades Experimentales

1. Respetar al profesor y a los compaeros. 2. Seguir atentamente las instrucciones dadas. 3. No correr durante la realizacin de experimentos. 4. No gritar durante la clase. 5. Seguir rigurosamente el protocolo de trabajo. 6. Utilizar implementos adecuados segn lo solicite el profesor, por ejemplo: delantal blanco, guantes, pelo tomado. 7. Lavarse las manos antes y despus de cada actividad prctica. 8. No descuidar los implementos utilizados ni dejar sin supervisin el experimento que se realiza. 9. En caso de accidente informar inmediatamente al profesor. 10. Observar, analizar y reflexionar en cada actividad prctica.

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Cmo utilizar un microscopio

El microscopio es un aparato que aumenta la imagen de los objetos y nos permite observar aquello que, en un principio, es invisible para el ojo humano. Fue utilizado por primera vez por Anton van Leeuwenhoek, el ao 1675. Mucho de los microscopios pticos permiten aumentar objetos de 50 a 1.000 veces. Los ms potentes alcanzan los 2.000 aumentos. A continuacin se ve lo fcil que es utilizar un microscopio, sobre todo cuando se aprende un poco ms acerca de ellos. 1 2
4

3 6 7

1 Ocular: es la parte por donde miras. Contiene una lente.

2

Tubo: en algunos microscopios es regulable y se puede inclinar.

Objetivos: la mayora de microscopios tienen 4. Son los encargados de agrandar en primera instancia el objeto.
4

Revolver: aqu se acoplan los objetivos.

Platina: Aqu se coloca el objeto que se desea ver.

Tornillo macro y micromtrico: los haces giran para enfocar la imagen.

Condensador: lente especial ubicado bajo la platina, cuya funcin es condensar los rayos de luz que se dirigirn a la preparacin.

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Materiales utilizados en los laboratorios de microbiologa

Antes de comenzar con actividades prcticas es esencial conocer el material que se requiere para llevar a cabo los prcticos en el laboratorio. Materiales de vidrio Utilizacin Siembra en medio slido o superficie. Tambin existen de plstico. Observaciones microscpicas. Observaciones microscpicas.

Material Placas de Petri Portaobjetos Cubreobjetos

Ejemplo

Gotarios

Traspaso exactos.

de

lquidos

en

volmenes

Material Mechero Bunsen

Materiales y aparatos diversos Utilizacin Esterilizacin al rojo y flameado. Proporciona ambiente asptico en el rea de trabajo.

Ejemplo

Microscopio de campo claro

Observacin de microorganismos.

Incubadora o estufa

Crecimiento de cultivos en condiciones controladas de temperatura (calor seco). En este caso se le enseara a construir una incubadora o estufa casera.

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Conceptos asociados a microbiologa

Lea atentamente los siguientes conceptos.
Conceptos Colonia Cultivo puro Cultivo mixto Relacionados con la forma en que se disponen los microorganismos en la placa de Petri Acumulo de clulas microbianas de proporciones macroscpicas. Cultivo que contiene un solo tipo de microorganismo (o bacteria) Cultivo que contiene dos o ms tipo de microorganismos (o bacterias)

CARACTERIZACIN DE LAS COLONIAS

COLONIA

Cuando se realiza un cultivo podemos encontrar una serie de colonias, las cuales se caracterizan utilizando los siguientes parmetros: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Forma: punteada, circular, irregular, rizoide, fusiforme Elevacin: plana, elevada, convexa, umbilicada, cncava Borde: entero, ondulado, lobulado, dentado, rizoide Opacidad: translucida, opaca y brillante Cromognesis: color de la colonia Superficie: suave, rugosa Consistencia: mucosa, granular

Imagen 1. Tipos de colonias.

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Conceptos Esterilizacin

Desinfeccin

Desinfectante Antisptico Asepsia Sepsis

Relacionados con las medidas necesarias que deben estar presente en los laboratorios de microbiologa Procedimiento utilizado para destruir cualquier forma de vida microbiana, incluyendo formas resistentes como las esporas. Procedimiento destinado a matar formas microbianas, sin eliminar formas resistentes como las esporas, slo se eliminan clulas vegetales. Sustancia que desinfecta y se utiliza sobre objetos inertes. Es altamente txico. Sustancia que desinfecta y se puede utilizar sobre tejido vivo. Ausencia TOTAL de microorganismos. Crecimiento de microorganismos en tejidos vivos.

Antes de comenzar a realizar prcticos microbiolgicos se deben tomar en cuenta las medidas necesarias para evitar la contaminacin de los materiales empleados, pues como los microorganismos se encuentran por todas partes, y debido a su pequeo tamao, se esparcen fcilmente por el aire y por las superficies. Por lo tanto para manipular material de laboratorio es importante tener presente la esterilidad del material antes de proceder a su utilizacin. Para llevar a cabo una esterilizacin en el laboratorio del establecimiento, se puede colocar el material sobre una rejilla en una olla a presin, con un poco de agua, por aproximadamente 15 minutos. El material que es de vidrio es conveniente envolverlo en papel y luego esterilizarlo en el horno de la cocina durante 2 horas. Posterior a esto se estara en condiciones para llevar a cabo los prcticos en el laboratorio. Es importante sealar el rol que cumple el mechero de Bunsen en el proceso de esterilizacin. Este instrumento permite esterilizar materiales (asas, pipetas), y mantener un ambiente asptico en el rea de trabajo. En cada una de las actividades prcticas el mechero de Bunsen debe estar encendido, y el docente debe trabajar muy cerca de l, adems no debe olvidar desinfectar el mesn en el cual va a trabajar. Para desinfectar objetos inanimados o inertes puede utilizar el cloro.

54 MEDIOS DE CULTIVO Los microorganismos se cultivan en agua pues contienen los requerimientos necesarios para el crecimiento. La solucin acuosa que posee los nutrientes precisos se llama medio de cultivo, los componentes de los medios de cultivo le proporcionan a la clula microbiana los ingredientes requeridos para que produzcan ms clulas como ella misma. Se debe mencionar que el sustrato que contiene los nutrientes necesarios para el crecimiento de microorganismos es el medio, mientras que el cultivo es el crecimiento de los microorganismos en el medio del cultivo. Los medios de cultivo se pueden preparar para ser usados en estado lquido o como geles solidificantes. Para que un medio lquido pase a semislido por lo general se usan productos solidificantes, que normalmente es agar.Los medios de cultivos con agar se disponen en cpsulas circulares de vidrio o plstico, con tapaderas que normalmente se denominan placas de Petri, donde las clulas microbianas pueden proliferar y formar colonias visibles al ojo humano. Existe una gran variedad de medios de cultivo, dependiendo de los microorganismos, porque no existe un medio de cultivo de tipo universal. Tenga presente que para estudiar detalladamente los microorganismos es necesario realizar cultivos y aislar la especie de organismos que se desea estudiar, para eso se realizan medios de cultivo (lquidos o slidos) ricos en nutrientes, adems de condiciones y pH especiales, para que en estas condiciones se puedan reproducir y se forman colonias apreciables al ojo humano. Preparando medios de cultivo Medio con jalea Medio de preparacin casera, de fcil alcance sobre todo para establecimiento de escasos recursos. Materiales 32 gr de jalea o gelatina de color claro (pia, limn). 100 ml de agua 3 cpsulas de Petri esterilizadas Recipiente resistente al calor Procedimiento 1. Hervir agua. 2. Colocar gelatina en un recipiente y luego agregar el agua hervida caliente sin dejar de revolver hasta que la gelatina se disuelva. 3. Disolver el caldo concentrado de carne en un poco de agua y luego filtrarlo, usando un embudo y papel filtro. Agregar el filtrado a la mezcla de gelatina. 4. Verter la gelatina en las placas de Petri; no olvidar taparlas y esperar que se solidifiquen. 5. Dejar en incubadora

55 Medio con smola Preparacin A Materiales Procedimiento

15 gramos de smola 1. 5 gr de azcar 10 gr de caldo concentrado de carne (en cubo) 2. 250 ml de agua 2 cpsulas de Petri Papel filtro Embudo 3. Recipiente resiste al calor 15 gr de smola 250 ml de leche 2 cpsulas de Petri

Poner a calentar el agua en un recipiente y agregar la smola lentamente revolviendo de manera suave. Hervir por 15 minutos, sin dejar de revolver, y luego agregar azcar. Simultneamente, disolver el caldo concentrado de carne en un poco de agua y luego filtrar, usando un embudo y papel filtro. Una vez obtenido este caldo, agregarlo a la mezcla de smola y azcar. Verter la mezcla obtenida en las cpsulas de Petri y esperar que solidifique. Mantener las cpsulas tapadas. 1. Calentar la leche y verter sobre ella la smola, poco a poco. Deja hervir por 15 minutos, aproximadamente, sin dejar de revolver. 2. Una vez que la mezcla est lista, verterlas en las cpsulas y esperar a que solidifique. Mantener las cpsulas tapadas. Procedimiento

Preparacin B

Medio con maicena Preparacin A

Materiales 20 gr de maicena 10 gr de caldo concentrado de carne 200 ml de agua 5 g de azcar 2 cpsulas de Petri Papel filtro Embudo 1. Calentar agua y agregar poco a poco la maicena, previamente disuelta en un poco de agua fra. Revolver constantemente. 2. Disolver el caldo concentrado de carne en un poco de agua y luego filtrado, usando un embudo y papel filtro. Agregar el filtrado a la mezcla. 3. Dejar hervir la mezcla durante 15 minutos, sin dejar de revolver, y una vez que la mezcla est cocida, verterla en las cpsulas y agregar azcar en cada una de ellas. Dejar que la mezcla solidifique y no olvidar tapar las cpsulas.

Preparacin B

20 gr de maicena 100 ml de leche 5 gr de azcar 2 cpsulas de Petri

1. Calentar la leche y agregar maicena, previamente disuelta en un poco de agua fra. Dejar hervir durante 15 minutos sin dejar de revolver. 2. Verter la mezcla en las cpsulas y agregar en cada una de ellas el azcar. Deja que la mezcla se solidifique y mantn las cpsulas tapadas.

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Medio con Agar Preparacin A

Materiales

Procedimiento

0,75 g de agar 5 g de azcar 8,5 ml de extracto de carne 50 ml de agua 3 cpsulas de Petri Botella o frasco de vidrio

Preparacin B

0,75 g de agar 3 ml de extracto de levaduras 5 g de azcar 50 ml de agua 3 cpsulas de Petri Botella o frasco de vidrio

Preparacin C 0, 75 g de agar 1, 5 de leche en polvo 50 ml de agua 3 cpsulas de Petri Botella o frasco de vidrio Preparacin D 0,75 de agar 1 huevo 50 ml de agua 3 cpsulas de Petri Botella o frasco de vidrio

1. Preparar el agar en una botella, o frasco de vidrio, disolvindolo con agua. 2. Agregar azcar y el extracto de carne al agar. 3. Esterilizar este medio y verter la mezcla en las cpsulas, no olvidar tparlas y esperar a que solidifique. 1. 1. Disolver el agar con el agua y colocarlo en una botella o frasco de vidrio. 2. Agregar azcar y el extracto de levadura al agar. 3. Esterilizar el medio y luego verter la mezcla en las cpsulas, taparlas y esperar que solidifique. 2. 1. Disolver el agar en 25 ml de agua y agregar leche disuelta en el resto del agua. Colocar la mezcla dentro de una botella o frasco de vidrio. 2. Esterilizar el medio y luego verter la solucin en las placas, taparlas y esperar que solidifique. 3. 1. Batir un huevo a mano o con una batera. 2. Disolver el agar con el agua en una botella o frasco de vidrio. 3. Esterilizar el medio y luego agregar el huevo batido moviendo la botella con el fin de homogenizar la mezcla. 4. Verter la mezcla sobre la cpsulas, taparlas y espera que solidifique.

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Bibliografa Bases curriculares 2012, MINEDUC.

Brook (2003). Biologa de microorganismos, dcima edicin. Planes y Programas 2009, MINEDUC. Tortora, Funke and Case. Introduccin a la Microbiologa. 9na Edicin 2007. Editorial Mdica Panamericana.

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CD

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Mdulo de biologa como recurso transversal para toda la enseanza media.