Bacteriologa y Laboratorio Clnico DETECCION Y ANALISIS DE Staphylococcus aureus, MOHOS Y LEVADURAS EN AROMATICAS

Presentado a: Dra. Karen Martnez AUTORES: RAQUEL CABALLERO, LUISA CACERES, ANDRES QUIROZ. San Jos de Ccuta, norte de Santander -Colombia. 1 de Octubre del 2013. RESUMEN Staphylococcus aureus es una especie bacteriana integrada por formas cocceas de 0,8-1,0 m de dimetro, que se dividen en ms de un plano, por lo que se agrupan irregularmente en racimos. Son inmviles y carecen de esporas. Son Gram positivas. Es una especie muy sensible a la accin del calor y de los desinfectantes. Su presencia o la de sus toxinas en los alimentos es signo evidente de falta de higiene. La presente practica tuvo como objetivo principal el diagnostico de Staphylococcus aureus y Mohos y levaduras mediante las tcnicas placa profunda, Petrifilm. La prctica consisti en cultivar diferentes diluciones de muestras de Aromticas ya expendidas por una cadena comercial; se le realizaron diluciones hasta 10-2, y se les practico anlisis para la deteccin de , Mohos y levaduras por tcnica de Placa Profunda que se cultivaron en Agar Sabouraud tambin se le realizaron anlisis de Aerobios Mesofilos, Coliformes totales , S. aureus y Mohos y levaduras por mtodo de Petrifilm se llev a una posterior incubacin a 37 C durante 24 horas los petrifilm. Para la determinacin de los resultados de mohos y levaduras por placa profunda debemos dejar las cajas sembradas a una temperatura de 25C (Temperatura ambiente) por un tiempo de entre 5 a 7 das. Los resultados para la muestra de Aromticas en los medios de petrifilm fueron as: para Aerobios Mesofilos 430 Ufc/gr, coliformes totales <10 Ufc/gr , S. aureus 20 Ufc/ gr y Mohos y levaduras 10 Ufc/gr se llev a una posterior incubacin a 37 C durante 24 horas los petrifilm. Bajo la tcnica utilizada que fue Placa Petrifilm se puede decir que la aromtica es un alimento apto para consumo humano, ya que los resultados encontrados se encuentran dentro de lo permitido para aromticas segn la norma INVIMA.

PALABRAS CLAVE: Coliformes Totales, Coliformes fecales, Aromticas, Mohos, Levaduras, Petrifilm. Control y seguridad Alimentaria. 2013

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INTRODUCCION El Staphylococcus aureus es un coco Gram positivo, anaerobio facultativo y catalasa positivo. Su temperatura optima de crecimiento es 37C pero logrando desarrollarse hasta los 10C o ligeramente menos.(Koneman, 1999) La intoxicacin alimentaria estafiloccica es en sndrome caracterizado por nauseas, vmitos, diarrea, malestar y debilidad general. Los sntomas comienzan a manifestarse de 1 a 6 horas despus de consumido el alimento. (ICMSF, 2000) Las intoxicaciones debidas a S. aureus en alimentos estn clasificadas como las causas ms prevalentes de gastroenteritis en el mundo. Esto se debe a la ingestin de una o ms enterotoxinas estafiloccicas preformadas en alimentos contaminados por miembros del genero Staphylococcus, en donde predomina S. aureus. (Doyle, 1997) La principal fuente de contaminacin de alimentos por Staphylococcus se debe a la manipulacin de estos por parte de personas contaminadas, ya que los humanos son el principal reservorio de este microorganismo. Si bien muchas especies del genero Staphylococcus se consideran habitantes normales del cuerpo

humano, Staphylococcus aureus es el patgeno ms destacado. En los humanos, las fosas nasales son los sitios de colonizacin predominantes, aunque se pueden encontrar clulas de S.aureus en diferentes sitios de la piel. La diseminacin de este microorganismo entre humanos y de los humanos a los alimentos puede ocurrir por contacto directo o indirecto por fragmentos de piel. La presencia del Staphylococcus aureus es un alimento se interpreta por lo general, como un indicador de la contaminacin a travs de la piel, fosas nasales y la boca de los manipuladores de alimentos, si bien el material y equipos sucios y materias primas de origen animal pueden ser as mismo la fuente de contaminacin. Las levaduras y los mohos crecen ms lentamente que las bacterias en los alientos no cidos que conservan humedad y por ello pocas veces determinan problemas en tales alimentos. Sin embargo cidos y en los de baja actividad de agua, crecen con mayor rapidez que las bacterias, determinados por ello importantes prdidas por alteracin de frutas, jugos, vegetales, quesos, productos derivados de los cereales y encurtidos, as como los alimentos congelados y en los deshidratados, cuyo almacenamiento se realiza en condiciones inadecuadas.

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Adems existe el peligro potencial de produccin de micotoxinas por parte de los hongos. Por lo tanto, los mohos y las levaduras son agentes alterantes de un nmero importante de alimentos. (ICMSF, 2000). Las condiciones necesarias para que un hongo crezca en superficie son: existencia de esporas, base nutriente, humedad y temperatura entre 4C y 38 C. En la prctica, los hongos filamentosos y las levaduras tambin se diferencian en el laboratorio en dos grupos segn el aspecto macroscpico de sus colonias: las levaduras forman colonias hmedas, cremosas, opacas o pastosas, y los hongos filamentosos producen colonias algodonosas, lanosas o pulverulentas. (Romejo,2005).

MATERIALES Y METODOS Alimentos elaborados (Queso de Hoja, Aromticas), Frascos con Agua Peptona, pipetas, Cajas de petri, tubos de ensayo, frascos, pipeteador, mechero, termmetro, balanza, caldo lauryl sulfato, Placas Petrifilm (STX, AC, EC, YM), Agar Sabouraud, Agar Baid Parker.

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METODOLOGIA Muestra N 6 Aromticas

Tomamos 10 gr del alimento y lo llevamos a un agua peptona de 90 ml y as nos queda una dilucin 10-1 tomamos 1 ml de la dilucin y lo depositamos en un agua peptona de 9ml y obtenemos una dilucin 10-2 . Tomamos 1ml de cada dilucin y lo agregamos en una caja de Petri, aadindole el medio de cultivo en este caso para mohos y levaduras es el Agar Sabouraud a una temperatura entre 45 y 50 C, se incub a una temperatura de 25C por un tiempo de 5 a 7 das.

De la dilucin obtenida se inoculan en las Placas Petrifilm STX, EC, AC, YM un 1ml en cada una de ellas y se esparce, y se llevan a incubacin a 37 C por 24 horas, excepto la Petrifilm YM (Mohos y Levaduras) que se lleva a incubacin a 25 C por 7 das.

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RESULTADOS MUESTRA ANALISIS METODO Aerobios Mesofilos AROMATICAS Coliformes Petrifilm Totales S. aureus Mohos y Levaduras DILUCION 10-1 10-1 10-1 10-1 RECUENTO 43 INFORME 430 Ufc /gr

<10 Ufc/gr

2 1

20 Ufc/gr 10 Ufc/gr

DISCUSION El resultado obtenido en la placa para recuento de aerobios mesfilos, S. aureus, mohos y levaduras, se encuentran dentro de lo permitido para aromticas segn la norma INVIMA, la cual dice que para aerobios mesfilos hasta 100000ufc/gr, para S. aureus menor de 100 ufc/gr y para mohos y levaduras hasta 2000 ufc/gr. Ninguno de los anlisis realizados para aromtica arrojo resultados que indiquen que sea un alimento no apto para el consumo humano.

CONCLUSIONES Se observo crecimiento de aerobios mesfilos, S. aureus, y mohos y levaduras dentro de los rangos permitidos por el INVIMA. Despus de 8 das de incubacin a 25C se observo un mnimo crecimiento de mohos a partir de una dilucin de 10-1 de aromtica.

RECOMENDACIONES

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Para realizar los recuentos de las Aromticas esperar un tiempo estimado antes de hacer las diluciones para dejar que la muestra se disuelva en el Agua peptona y se sumerjan las partculas, para que no se vayan restos y poder realizar bien las lecturas. se recomienda ejercer poca presin sobre las Placas Petrifilm despus de inoculada la muestra para evitar q se esparza fuera del el circulo limitado. .

ANEXOS

Placas Petrifilm-Tomado por Raquel Caballero

Placa Petrifilm SXT-Tomado por Raquel Caballero

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Dilucin 10 Aromaticas -Tomado por Raquel Caballero

-1

Placas Petrifilm-Tomado por Raquel Caballero

BIBLIOGRAFIA
Alonso Nore Lina Ximena, Poveda Snchez Jeimy Alexandra, Estudio Comparativo en Tcnicas de Recuento rpido y las Placas Petrifilm para el anlisis de Alimentos, http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis230.pdf, 2008

Gobierno de Chile, Procedimiento, Recuento Mohos y

Levaduras en alimentos,

http://www.ispch.cl/lab_amb/doc/microbiologia_alimentos/PRT-031.pdf,2008

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