REVISIN GEN Q10 Existen diversos tipos de coenzimas Q, la forma ms comn en humanos es la coenzima Q10 (CoQ10), tambin es conocida

como ubiquinona; esta coenzima es un poderoso antioxidante gracias a su capacidad redox (forma oxidada quinona, forma reducida quinol) fue descubierta en 1957 por investigadores de la Universidad de Wisconsin. (Groneberg, et al, 2005). CoQ10 es un compuesto sintetizado endgenamente que acta como un portador de electrones en la cadena respiratoria mitocondrial. Adems de su papel nico en las mitocondrias, las funciones de CoQ10 barrido de radicales libres y la inhibicin de la peroxidacin de lpidos(Yan, 2013). Hay pruebas de que la CoQ10 afecta a la expresin de cientos de genes humanos implicados en la sealizacin celular, el metabolismo y el transporte de nutrientes (Geromel V, et al, 2002) y que puede tener efectos antiinflamatorios a travs de modificacin de la expresin de genes. (Schmelzer C, et al, 2008). El poder antioxidante mxima de la CoQ10 es atribuido a sus propiedades donantes de electrones que neutraliza los radicales libres y su capacidad para reponer otros valiosos antioxidantes endgenos. Es un compuesto ubicuo, que se encuentra en altas concentraciones en tejidos con alta rotacin de energa, tales como el cerebro y el corazn. La CoQ10 tiene significativa propiedades neuroprotectoras , que le permita proteger neuronalmente a las clulas contra daos en varias enfermedades neurodegenerativas como por ejemplo la enfermedad de Alzheimer , enfermedad de Parkinson y la epilepsia. La coenzima Q (CoQ) en el envejecimiento. En la actividad de la cadena de transporte electrnico, la CoQ es el factor lipdico nica implicada en el transporte de electrones desde el complejo I o II para el complejo III. De hecho, CoQ ha sido acusado de ser uno de los principales factores que intervienen en la produccin de ROS. Por otra parte, CoQ tambin est implicado en la proteccin de las membranas celulares contra el dao oxidativo a travs de su participacin en diferentes procesos que implican la proteccin de la peroxidacin de lpidos directa a travs del mantenimiento de la vitamina E o vitamina C en la clula. Entonces, Q es una molcula esencial que interviene en la funcin mitocondrial y proteccin antioxidante y, a continuacin, en el proceso de envejecimiento (Guillermo Lpez-Lluch., 2010)

El estudio realizado en ratas, induccin de estrs para provocar una posterior depresin (Aboul y Fotouh, 2013); en donde la enfermedad se acompaa de un estado antioxidante disminuido y la acumulacin de xido ntrico (NO) en el cerebro durante el estrs crnico, lo cual conduce la produccin de especies reactivas de oxgeno (ROS) o de nitrgeno, tales como peroxinitrito. Las ratas sometidas a estrs, modelando una supuesta depresin, lo que habra reducido la produccin de enzimas antioxidantes reforzando as an ms la hiptesis del estrs oxidativo de la depresin. Dado que hay un defecto a nivel de la mitocondria, dao oxidativo y una disminucin en el nivel de CoQ10 durante la depresin en la cual estn inmersas las ratas, la coenzima es un componente importante en la cadena respiratoria dado que mejora la produccin de ATP en la alimentacin de la energa en las clulas del cuerpo y como se mencion anteriormente un fuerte antioxidante. A causa de estas caractersticas se plante la hiptesis de administrar la CoQ10 la cual podra revertir el dao neuronal en la depresin y por lo tanto mejorar los sntomas depresivos y reducir la resistencia al tratamiento antidepresivo. Sin embargo esta medida est en estudios todava, no se ha llevado a la prctica. En un estudio llevado a cabo que evala el desarrollo de dolor neuroptico diabtico tipo 2 en modelo de ratn diabtico y los efectos profilcticos y teraputicos de la CoQ10. CoQ10 suprime el dolor neuroptico producto del inicio temprano de la diabetes mellitus tipo 2, impulsado por el aumento de la obesidad. Por ltimo la CoQ10 suprime de manera efectiva la peroxidacin de lpidos en ganglios de la raz dorsal, la mdula espinal, y la sangre de ratones diabticos. El efecto analgsico de la CoQ10 puede resultar del estrs anti-oxidativo y la disminucin adicional de las vas de sealizacin sensibles al estrs y el dolor relacionados tales como MAPK, NF-kB y TLR4 (Yan, 2013) Efectos del contenido de coQ10 en bioenergtica celular: Las mitocondrias son el motor celular y el principal productor de especies reactivas de oxgeno durante los procesos normales oxidativos del metabolismo. Estas funciones son realizadas por la cadena de transferencia de electrones mitocondrial en la que la Coenzima Q10 desempea un papel clave en el mecanismo de la produccin de energa y es reconocido como un potente antioxidante. Por estas razones, se puede argumentar que los niveles de ubiquinona mitocondriales altos pueden mejorar el estado

de energa celular y proteger contra el estrs oxidativo. A pesar del gran nmero de estudios clnicos sobre el efecto de la suplementacin con CoQ10, hay muy pocos datos experimentales sobre el contenido ubiquinona mitocondrial y el estado bioenergtica celular despus de la suplementacin. Se realiz un experimento en el que se midi el contenido de ubiquinona en lneas de clulas cultivadas despus de la suplementacin con diferentes formulaciones de CoQ10, mostrando que el ms eficaz en el aumento del nivel basal CoQ10 era una formulacin soluble en agua llamado Qter . Se evalu el efecto de la suplementacin de la bioenergtica ubiquinona y el agotamiento (el uso de un inhibidor de la sntesis de CoQ10: 4-NB), lo que demuestra que el contenido de CoQ10 intracelular se correlaciona positivamente con la funcionalidad mitocondrial (tasa de consumo de oxgeno, el potencial transmembrana, la sntesis de ATP) y la resistencia al estrs oxidativo. Los resultados podran explicarse teniendo en cuenta la organizacin de la cadena respiratoria mitocondrial (Bergamini C et al., 2012). Actualmente, se han propuesto dos modelos: el modelo de colisin aleatoria y una organizacin llamada Supercomplejo Respirosoma (Schagger H, et al., 2002). En el primer modelo de la transferencia de electrones a travs de la cadena respiratoria est asegurada por la difusin libre de cada componente dentro de la membrana mitocondrial interna. En este escenario, la CoQ10 forma un charco utilizado por todos los complejos respiratorios CoQ-dependientes (principalmente Complejo I, II y III ). Por otro lado, la Respirosoma requiere una organizacin de estado slido en el que slo CoQ10 enlazado est involucrado en la transferencia de electrones. Esta ltima hiptesis parece estar en contraste con un efecto dependiente de la dosis de la adicin de CoQ10 en la frecuencia respiratoria. Sin embargo, puede ser posible que la ubiquinona envolvente deba estar en equilibrio con la piscina. Esta hiptesis podra explicar el efecto beneficioso de la aplicacin exgena de CoQ10. La CoQ10 es sintetizada como producto terminal de la va del mevalonato y es incorporada a travs de la dieta y de suplementos dietarios. El contenido celular de CoQ10 es homeostticamente regulado; sin embargo, se encuentra disminuida en varias patologas como cncer, enfermedades mitocondriales, cardacas y musculares as como tambin durante el tratamiento con estatinas. El tratamiento con CoQ10 presenta grandes beneficios teraputicos

revirtiendo, en algunos casos, las patologas y / o en otros mejorando la calidad de vida del paciente. La CoQ10 se determina frecuentemente en plasma en donde la concentracin est extremadamente disminuida aun en sujetos sanos (0,3-1,7 M) . Sin embargo, existen algunos trabajos que cuestionan el valor de la determinacin plasmtica de la CoQ10 puesto que no reflejara exactamente la concentracin intracelular y, por lo tanto, su relacin con la patologa podra ser discutida . Es por ello que recientemente, para la investigacin clnica de las posibles deficiencias de CoQ10, se est poniendo atencin en su determinacin en clulas sanguneas. Las clulas de eleccin son las plaquetas puesto que son ricas en mitocondrias y se pueden aislar fcilmente de pequeos volmenes sanguneos. No obstante, se ha demostrado que slo en algunos pacientes se encuentran disminuidos los niveles tisulares de CoQ10, siendo poco clara la correlacin de la patologa o de la respuesta teraputica con los niveles plasmticos y/o plaquetarios de CoQ10. Este hecho hace indispensable, aunque resulte invasivo, la determinacin de CoQ10 en msculo para evidenciar su alteracin. Por lo tanto, es prioritario desarrollar metodologas analticas que permitan la evaluacin de la CoQ10 en las matrices de mayor importancia, para el correcto diagnstico de las patologas que involucran su deficiencia, mediante sistemas analticos y de preparacin de muestra altamente sensibles, que requieran el procesamiento de poca cantidad de muestra y que sean lo suficientemente sencillos para ser utilizados en laboratorios clnicos de rutina. Hasta el presente, el mtodo ms utilizado para la determinacin de CoQ10 es la cromatografa lquida (HPLC) con deteccin electroqumica debido a su elevada sensibilidad. Sin embargo, el uso de dicho detector requiere de largos perodos de estabilizacin y, por otro lado, el electrodo puede ser pasivado por componentes lipoflicos de la muestra, lo que acorta su tiempo de vida media. Otros autores han propuesto mtodos por HPLC acoplados a detector de masa. Aunque con este tipo de detector se obtiene una elevada sensibilidad, an mayor que con detector electroqumico, su uso es muy costoso, se necesitan operadores altamente calificados y se requiere de una instrumentacin sofisticada que no es comn en laboratorios clnicos. Si bien una de las instrumentaciones ms comnmente utilizadas en el laboratorio clnico es la HPLC con deteccin UV, su sensibilidad no resulta adecuada para analitos que se encuentran en muy bajas concentraciones como la CoQ10.

Una de las tendencias actuales de la qumica analtica avanzada es la miniaturizacin del instrumental y de los procedimientos analticos. Separaciones ultra rpidas, consumo de pequeas cantidades de solventes y reactivos, utilizacin de pequeas cantidades de muestra, as como el incremento de la sensibilidad y fcil automatizacin, son las principales ventajas y metas a ser alcanzadas con los micromtodos. Es por ello que la utilizacin de microcolumnas cromatogrficas (1-2 mm de dimetro interno) podra ser sumamente til para superar las dificultades de la determinacin de CoQ10 utilizando HPLC con deteccin UV. En un trabajo previo, este grupo ha informado el uso de microcolumnas cromatogrficas que han sido utilizadas para la determinacin de CoQ10 en productos farmacuticos y cosmticos. Dicho mtodo permiti reducir el consumo de solventes y fase mvil, con mnimo requerimiento de muestra y un incremento de la sensibilidad comparable al obtenido con deteccin electroqumica . Es por ello que el objetivo del presente trabajo fue disear y optimizar la preparacin de muestra adecuada para la determinacin de CoQ10 en plasma, msculo y plaquetas, adecuando el sistema analtico a la miniaturizacin cromatogrfica con deteccin UV. La determinacin de CoQ10 en dichas muestras ser de gran importancia clnica en la deteccin de la deficiencia de CoQ10 en distintos tipos de patologas.

Referencias

1. Lpez-Lluch G, Rodrguez-Aguilera JC, Santos-Ocaa C, Navas P. Is coenzyme Q a key factor inaging. 2010. Mech Ageing Dev. 131(4):225-35. 2. Sawsan Aboul-Fotouh. Coenzyme Q10 displays antidepressant-like activity with reduction of hippocampal oxidative/nitrosative DNA damage in chronically stressed rats. Pharmacol, Biochem Behav 2013; 104:105-112. 3. Groneberg D, Kindermann B, Althammer M, Klapper M, Vormann J, Littarru J. Coenzyme Q10 affects expression of genes involved in cell signalling, metabolism and transport in human CaCo-2 cells. Istituto di Biochimica, Universit a Politecnica delle Marche 2005; 37:1208.1218. 4. Yan Ping Zhang, Chun Yu Song, Yue Yuan, Ariel Eber, Yiliam Rodriguez, Roy C. Levitt, Peter Takacs, Zhe Yang, Ronald Goldberg, Keith A. Candiotti, 2013. Diabetic neuropathic pain development in type 2 diabetic mouse model and the prophylactic and therapeutic effects of coenzyme Q10. Neurobiology of Disease 58, 169178. 5. Schfer E, Dencher NA, Vonck J & Parcej DN (2007) Biochemistry 46, 12579-12585. 6. Acin-Perez R, Fernandez-Silva P, Peleato ML, Perez-Martos A, Enriquez JA. (2008). Respiratory active mitochondrial supercomplexes. Mol. Cell 32:529539. 7. Geromel V, Rotig A, Munnich A, Rustin P (2002), Coenzyme Q10 depletion is comparatively less detrimental to human cultured skin fibroblasts than respiratory chain complex deficiencies. Free Radic Res 36: 375379. 8. Schmelzer C, Lindner I, Rimbach G, Niklowitz P, Menke T, et al. (2008), Functions of coenzyme Q10 in inflammation and gene expression. Biofactors 32: 179183.

9. Bergamini C, Moruzzi N, Sblendido A, Lenaz G, Fato R., A (2012). Water soluble CoQ10 formulation improves intracellular distribution and promotes mitochondrial respiration in cultured cells. PLoS One. ;7(3) 10. Schagger H. (2002). Respiratory chain supercomplexes of mitochondria and bacteria. Biochim Biophys Acta 1555: 154-159. 11. Bergamini C., Moruzzi N., Tognoli M.L., Sblendido A., Lenaz G., Fato R. (2012). Efects of CoQ10 content on cellular bioenergetics.

12. Mario Contin, Manuela Martinefski, Silvia Lucangioli, Valeria Tripodi. (2011) Sistema cromatogrfico miniaturizado para la determinacin de coenzima Q10 en plasma,

msculo y plaquetas. Acta BioqumCln Latinoam; 45 (2): 273-8.