DIGESTIN Y DIGESTIN Y

METABOLISMO DE METABOLISMO DE
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METABOLISMO DE METABOLISMO DE
PROTENAS PROTENAS
Papel de las protenas en la Papel de las protenas en la
nutricin nutricin
1. 1. Sntesis Sntesis de de nuevas nuevas protenas protenas. .
2. 2. Formacin Formacin de de compuestos compuestos no no
proteicos proteicos de de importancia importancia fisiolgica fisiolgica. .
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proteicos proteicos de de importancia importancia fisiolgica fisiolgica. .
3. 3. Produccin Produccin de de energa energa. .
DIGESTIN DE DIGESTIN DE
PROTENAS PROTENAS
DIGESTIN DE PROTENAS DIGESTIN DE PROTENAS
11.. Protenas Protenas -- -->> Hidrolasas Hidrolasas -- -->> Aas Aas,, oligoptidos oligoptidos..
Excepcin : Excepcin :
Mamferos lactantes Mamferos lactantes
Absorben protenas intactas Absorben protenas intactas
Calostro (Inmunoglobulinas) Calostro (Inmunoglobulinas)
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22.. Digestin Digestin:: qumica/enzimtica qumica/enzimtica
a. a. HCl HCl
b. Pepsina A y B b. Pepsina A y B
c. Enzimas pancreticas c. Enzimas pancreticas
d. d. Oligopetidasas Oligopetidasas (citoplasma de los (citoplasma de los enterocitos enterocitos))
ESTMAGO:
HCl: pepsingeno
Denaturalizacin y Ruptura de enlaces.
DIGESTIN DE PROTENAS DIGESTIN DE PROTENAS
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Denaturalizacin y Ruptura de enlaces.
Pepsina A y B: (endopeptidasa)
Protena desnaturalizada.
INTESTINO DELGADO:
Enzimas pancreticas:
- Tripsina, Quimotripsina, Elastasa: endop
-Carboxipeptidasas A y B : exopep.
DIGESTIN DE PROTENAS DIGESTIN DE PROTENAS
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Enzimas intestinales:
- Aminopeptidasa: exopep.
-Dipeptidasa: exopep.
INTESTINO GRUESO:
Enzimas microbianas
Especificidad enzimas Especificidad enzimas
proteolticas ( proteolticas (TGI TGI) )
Lugar de Lugar de
accin accin
Enzima Enzima Especificidad Especificidad
Estmago Pepsina Rx = Fen,Tir, Trp,
Met, Leu, Glu, Asp
Intestino, Tripsina Rx = Lis, Arg, His
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lumen
Quimotripsina
Elastasa
Carboxipeptidasa A
Carboxipeptidasa B
Rx = Fen, Tir, Trp
Rx = Ala, Ser, Gli
Rx = C terminal de
AA , Lis, Arg y Pro.
Rx = C terminal Lis
y Arg
Lugar de accin Enzima Especificidad
Intestino,
membrana
Aminopeptidasas Rx = N terminal
oligopptidos
residuales
Especificidad enzimas Especificidad enzimas
proteolticas (TGI) proteolticas (TGI)
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residuales
Intestino,
Citosol clular
Aminopeptidasas
Dipeptidasas
Prolidasa
Rx = N terminal
oligopptidos
residuales
Dipptidos Pro.
Dipptidos con Pro.
DIGESTIN DE PROTENAS DIGESTIN DE PROTENAS
La digestin de protenas comienza en el La digestin de protenas comienza en el
estmago. estmago.
Entrada protenas al estmago secrecin gastrina,
estimula formacin HCl; antisptico y mata a la
mayora de los patgenos que ingresan tracto intestinal.
Protenas globulares desnaturalizan a pHs cidos.
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Protenas globulares desnaturalizan a pHs cidos.
Pepsina (MW 33kD), secretada como su zimgeno, el
pepsinogeno (MW 40kD). 42 residuos del extremo
amino-terminal.
No es muy especfica, hidroliza enlaces de AAs
aromticos, tambin Met y Leu.
Pptidos tamao variable y algunos Pptidos tamao variable y algunos AAs AAs libres libres
DIGESTIN DE PROTENAS DIGESTIN DE PROTENAS
Estomago Estomago contenidos cidos contenidos cidos
intestino delgado: intestino delgado:
Sntesis hormona secretina a la
sangre.
Estimula pncreas para secretar
bicarbonato en el intestino delgado
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bicarbonato en el intestino delgado
pH alrededor de 7.0.
Entrada AAs parte superior del
intestino liberacin colecistocinina,
liberacin de muchas enzimas
pancreticas actividad cataltica entre
pH: 7 y 8.
DIGESTIN DE PROTENAS DIGESTIN DE PROTENAS
Estomago Estomago contenidos cidos contenidos cidos intestino intestino
delgado: delgado:
Zimgenos Zimgenos de de Carboxidasas Carboxidasas A A yy B, B,
Tripsina, Tripsina, Quimotripsina Quimotripsina yy Elastasa Elastasa. .
Quimotripsingeno (MW 24kD) da
origen a la quimotripsina por
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origen a la quimotripsina por
separacin de 2 dipptidos.
Qtripsingeno 245 AAs se mantiene
unida por 2 puentes disulfuro.
A - Quimotripsina hidrlisis
enzimtica de 4 enlaces peptdicos.
DIGESTIN DE PROTENAS
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1. Pepsina (estmago)
2. Proteasas pancreticas.
Pptidos cortos de diversos tamaos y Pptidos cortos de diversos tamaos y AAs AAs libres libres.
Pptidos AAs libres (peptidasas de mucosa intestinal),
Leucin-amino-peptidasa, que tambin contiene Zn
2+
,
Separa los restos amino-terminales de los pptidos.
AAs libres excretados al torrente sanguneo hgado
DIGESTIN DE PROTENAS DIGESTIN DE PROTENAS
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AAs libres excretados al torrente sanguneo hgado
Metabolismo ulterior, incluida su degradacin.
Las protenas endgenas deben degradarse, despus de
un tiempo (depende de la velocidad con la que catalizan
su reaccin y dependiendo si son o no enzimas
constitutivas).
Seales como desaminacin o metilacin indican a las
proteasas el momento de la degradacin.
Absorcin intestinal de los Absorcin intestinal de los
productos de la digestin de productos de la digestin de
protenas protenas
Se conocen varios sistemas para el transporte de los L-aa
1. Cootransporte con sodio + transporte activo para aa
neutros, bsicos y cidos , iminocidos glicina, cistena y
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neutros, bsicos y cidos , iminocidos glicina, cistena y
- aa.
2. Se conoce una va para los oligopptidos pequeos
asociado a sodio
3. Otra para oligopptidos mayores con la hidrlisis del
pptido en el interior de la clula seguida del transporte de
los aa resultantes de la hidrlisis.
Recambio Protico Recambio Protico
Estn sujetos a una biosntesis y degradacin continua.
Muchos de los aminocidos liberados durante el
recambio son reutilizados en la sntesis de nuevas
protenas.
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En una persona de 70 Kg de peso, consume 100 g de
protena al da y excretar una cantidad equivalente
de productos nitrogenados, sin embargo los estudios
con marcaje radioactivo indican que se sintetizan 400
g y se degradan 400 g.
Las protenas presentan una enorme variabilidad
en cuanto a su vida media que va de pocos
minutos a meses. Ej albmina =21 das, Hb = 120
das
Recambio Protico Recambio Protico
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das
Las que se segregan a un medio extracelular como
las enzimas digestivas, las hormonas y los
anticuerpos su recambio es rpido.
En cambio las que son estructurales como el
colgeno son ms estables.
Intercambio de AAs entre los Intercambio de AAs entre los
diferentes rganos diferentes rganos
Los Los principales principales rganos rganos encargados encargados de de
mantener mantener la la concentracin concentracin sangunea sangunea son son: : El El
tracto tracto digestivo, digestivo, hgado, hgado, msculo, msculo, rin rin yy el el
cerebro cerebro. .
Llegan Llegan por por va va porta porta al al hgado hgado donde donde unos unos son son
retenidos retenidos yy otros otros son son liberados liberados aa la la circulacin circulacin
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retenidos retenidos yy otros otros son son liberados liberados aa la la circulacin circulacin
sangunea sangunea. .
El El tejido tejido muscular muscular consume consume al al menos menos 60 60%% de de
los los ramificados ramificados yy liberando liberando alanina alanina que que es es
consumida consumida por por el el hgado hgado . .
Cerebro Cerebro gran gran consumidor consumidor de de valina valina
Rin Rin de de glutamina glutamina
Rxs generales de AAs Rxs generales de AAs
1. 1. Transaminacin Transaminacin
--cetocido cetocido
11
+ + AA AA
11
--cetocido cetocido
22
+ + AA AA
22
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2. 2. Desaminacin Desaminacin oxidativa oxidativa
AA + AA + NADP NADP
+ +
+ + HH
22
OO
--cetocido cetocido + + NADPH NADPH + + NH NH
44
++
+ H + H
++
Hgado Hgado: : Sitio Sitio de de degradacin degradacin de de
AAs AAs en en Mamferos Mamferos. .
Considerar Considerar: :
1. 1.Prdida Prdida del del grupo grupo amino amino. .
2. 2.Esqueleto Esqueleto carbonado carbonado. .
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2. 2.Esqueleto Esqueleto carbonado carbonado. .
Amino Amino de de muchos muchos AAs AAs: :
1. 1.Transferido Transferido al al glutamato glutamato. .
2. 2.Desaminacin Desaminacin oxidativa oxidativa llega llega aa
formacin formacin de de amonio amonio. .
DESAMINACIN OXIDATIVA DESAMINACIN OXIDATIVA:
GLUTAMATO DESHIDROGENASA (matriz mitocondrial)
ENZIMA ALOSTRICA, 6 SUBUNIDADES =
-la reaccin es reversible (NAD/NADP reaccin
directa/inversa)
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DESAMINACIN OXIDATIVA DESAMINACIN OXIDATIVA:
GLUTAMATO DESHIDROGENASA GLUTAMATO DESHIDROGENASA
la actividad puede ser:
-INHIBIDA POR ATP Y GTP
- ESTIMULADA POR ADP Y GDP
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DESAMINACIN DESAMINACIN OXIDATIVA OXIDATIVA
NO TODOS AAs PUEDEN DESAMINARSE DIRECTAMENTE
SE VALEN DE LA TRANSAMINACIN TRANSAMINACIN
* SE TRANSFIERE EL AMINO GRUPO AL -CETO CIDO
FORMANDO GLUTAMATO GLUTAMATO Y EL CORRESPONDIENTE
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FORMANDO GLUTAMATO GLUTAMATO Y EL CORRESPONDIENTE
--CETO CETO CIDO CIDO.
TRANSAMINACIN TRANSAMINACIN: :
Reversible, ocurre en: CITOPLASMA Y MITOCONDRIA
Transaminaciones Transaminaciones
Rxs catalizadas por enz. Aminotransferesas.
Fosfato de piridoxal: Coenzima.
Existen aminotransferasas especficas para
sntesis de todos AAs de protenas -
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sntesis de todos AAs de protenas -
cetocidos correspondientes. Excepto la
treonina y la lisina.
Debido a incapacidad de sintetizar los -
cetocidos existen los AAs esenciales.
TRANSAMINACIN TRANSAMINACIN
El grupo prosttico (coenzima) de todas las aminotransferasas es el
FOSFATO DE PIRIDOXAL: acepta un grupo amino
(base de Schiff) el cual es transferido a un aceptor.
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Que caractersticas debe tener la enzima para realizar la
catlisis?
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Segunda mitad de la transaminacin:
(en el sitio activo) se acerca un
segundo - cetocido reacciona con el
complejo E-fosfato de piridoxamina, (E-
PMP),
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Produce un segundo AA y se regenera el
complejo (PLP-E)
AA
1
+ E-PLP -cetocido
1
+ E-PMP
-cetocido
2
+ E-PMP AA
2
+ E-PLP
Aspartato aminotransferasa Aspartato aminotransferasa
tridimensional 2 subunidades tridimensional 2 subunidades idnticas idnticas
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Mecanismos generales de degradacin
de AA.
Aminotransferasas catalizan la
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Aminotransferasas catalizan la
transferencia de un -
aminogrupo de un AA a un -
cetocido.
Desaminacin oxidativa +
Transaminacin
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DESAMINACIN
POR DESHIDRATASAS
La deshidratacin precede a la
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La deshidratacin precede a la
desaminacin
Serina deshidratasa (PLP grupo prosttico)
SerinaPiruvato + NH4
+
+ H2O
Serin deshidratasa
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Thr deshidratasa (PLP grupo prosttico)
Treonina cetobutirato + NH4
+
+ H2O
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Los AAs esenciales cmo llegan a la dieta?
Flujo del nitrgeno en los AAs: Reduccin del
N
2
atmosfrico a NH
3
Slo algunas bacterias y cyanobacteria pueden
convertir N2 atmosfrico en NH
3
.
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convertir N2 atmosfrico en NH
3
.
Esta conversin se llama fijacin de nitrgeno
El proceso industrial (Harper, 1910) empleado en
la produccin de fertilizantes
N
2
+ 3 H
2
<=> 2 NH
3
CICLO DEL NITRGENO
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Mecanismos control control del N.
1. Formacin de Urea
Ciclo de la urea heptico
2. Glutamina sintasa
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2. Glutamina sintasa
Glutmico + NH
4
+
+ ATP Glutamina + ADP
3. Excrecin urinaria de NH
4
+
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Glutamina sintasa Glutamina sintasa
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Ciclo de la rea
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07/11/2013 43
07/11/2013 44
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BIOSNTESIS
DE
AMINOCIDOS
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AMINOCIDOS
BIOSNTESIS DE
AMINOCIDOS
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07/11/2013 59
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07/11/2013 62
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BIOSNTESIS DE BIOSNTESIS DE
PROTENAS PROTENAS PROTENAS PROTENAS
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SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS Tipos Tipos de ARN de ARN
ARN ARN mensajero mensajero oo ARNm ARNm:: lleva lleva las las instrucciones instrucciones para para hacer hacer una una
protena protena en en particular, particular, desde desde el el ADN ADN en en el el ncleo ncleo hasta hasta los los
cromosomas cromosomas..
ARN ARN de de transferencia transferencia oo ARNt ARNt:: lleva lleva los los aminocidos aminocidos aa los los
ribosomas, ribosomas, se se encuentra encuentra en en el el citoplasma citoplasma..
ARN ARN ribosomal ribosomal oo ARNr ARNr:: forma forma parte parte de de los los ribosmas ribosmas..
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
El ARN mensajero El ARN mensajero
Lleva Lleva la la informacin informacin para para la la sntesis sntesis..
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Lleva Lleva la la informacin informacin para para la la sntesis sntesis..
Determina Determina el el orden orden de de unin unin ((Aas Aas))..
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
El ARN mensajero
La informacin est codificada en
forma de tripletes.
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forma de tripletes.
Cada 3 bases Codn 1 AA.
Las reglas de correspondencia entre
codones y aminocidos constituyen:
cdigo gentico.
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
Cuatro reglas siguen las clulas para la sntesis de
protenas.
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1. Protenas estn compuestos por un
nmero limitado de subunidades: 20 AA.
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
2. Durante el proceso de polimerizacin, las
subunidades son aadidas una a una: La sntesis
empieza en el grupo NH
2
del aminocido inicial y
continua hasta el -COOH del aminocido terminal.
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3. Cada cadena tiene un punto especfico de
iniciacin y el crecimiento procede en una
direccin hasta una terminacin tambin
especificada. Esto requiere unas seales de inicio
y de fin.
4. El producto biosinttico primario no es
usualmente empleado como tal sino que es
modificado.
Mediante una serie de enzimas, las cadenas de
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
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Mediante una serie de enzimas, las cadenas de
proteinas experimentan una serie de
transformaciones (rotura, unin a otra cadena,
entrecruzamiento, etc)
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
Describir la sntesis de protenas dentro de una clula es
como describir un crculo: el DNA dirige la sntesis del
RNA; el RNA dirige la sntesis de protenas y, finalmente,
una serie de protenas especficas catalizan la sntesis
tanto del DNA como del RNA.
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tanto del DNA como del RNA.
Las instrucciones para construir las protenas estn
codificadas en el DNA y las clulas tienen que traducir
dicha informacin a las protenas. El proceso consta de
dos etapas
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
1. TRANSCRIPCION:
Proceso durante el cual la informacin gentica contenida
en el DNA es copiado a un RNA de una cadena nica
llamado RNA-mensajero.
La transcripcin es catalizada por una enzima llamada
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La transcripcin es catalizada por una enzima llamada
RNA-polimerasa.
El proceso se inicia separndose una porcin de las
cadenas de DNA: una de ellas, llamada hebra sentido es
utilizada como molde por la RNA-polimerasa para
incorporar nucletidos con bases complementarias
dispuestas en la misma secuencia que en la hebra anti-
sentido, complementaria de la hebra sentido inicial. .
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
La nica diferencia consiste en que la timina del
DNA inicial es sustituida por uracilo en el RNA
mensajero.
As, secuencia ATGCAT de la hebra sentido del
DNA producir: UACGUA.
Adems de las secuencia de nucletidos que
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Adems de las secuencia de nucletidos que
codifican protenas, el RNA mensajero copia del
DNA inicial unas regiones que no codifican
protenas (Intrones).
Las partes que codifican protenas (Exones).
RNA transcrito contiene Exones e Intrones.
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
Antes de que abandone el ncleo para dirigirse al citoplasma
donde se encuentran los ribosomas:
RNA es procesado, operaciones de "corte y empalme",
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RNA es procesado, operaciones de "corte y empalme",
eliminndose Intrones y unindose entre s los Exones.
RNA-m maduro emigra al citoplasma.
Un nico gen puede codificar varias protenas si el RNA-m
inicial puede ser cortado y empalmado de diversas formas.
Por ej, durante la diferenciacin celular las operaciones de
corte y pegado permite producir diferentes protenas.
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
Adems de utilizarse como molde para la sntesis del RNA-m,
el DNA permite la obtencin otros dos tipos RNA:
1.El RNA de transferencia (t-RNA) que se une
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especficamente a cada uno de los 20 aminocidos y los
transporta al ribosoma para incorporarlos a la cadena
polipeptdica en crecimiento.
2. El RNA ribosmico (r-RNA) que conjuntamente con las
protenas ribosmicas constituye el ribosoma.
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
2. TRADUCCIN:
El RNAm maduro contiene la informacin para
que AAs que constituyen una protena se vayan
aadiendo segn la secuencia correcta.
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aadiendo segn la secuencia correcta.
Cada triplete de nucletidos consecutivos (codn)
especifica un AA. Dado que el m-RNA contiene 4
bases, el numero de combinaciones, posibles de
grupos de 3 es de 64, nmero ms que suficiente
para codificar los 20 aminocidos.
Un AA puede ser codificado por varios codones.
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
La sntesis de protenas tiene lugar as La sntesis de protenas tiene lugar as: :
Iniciacin Iniciacin::
Un Un factor factor de de iniciacin, iniciacin, GPT GPT yy metionil metionil--tRNA tRNA[[Met Met]] forman forman
un un complejo complejo que que se se une une aa la la subunidad subunidad ribosmica ribosmica
grande grande..
El El mm--RNA RNA yy la la subunidad subunidad ribosmica ribosmica pequea pequea se se unen unen al al
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El El mm--RNA RNA yy la la subunidad subunidad ribosmica ribosmica pequea pequea se se unen unen al al
encontrar encontrar esta esta ltima ltima el el codn codn de de iniciacin iniciacin que que lleva lleva el el
primero primero..
AA continuacin continuacin ambas ambas subunidades subunidades ribosmicas ribosmicas se se unen unen..
El El metionil metionil--tRNA tRNA[[met met]] est est posicionado posicionado enfrente enfrente del del
codn codn de de iniciacin iniciacin ((AUG AUG))..
El El GPT GPT yy los los factores factores de de iniciacin iniciacin de de desprenden desprenden
quedando quedando el el tRNA tRNA[[Met Met]] unido unido al al ribosoma ribosoma..
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
Elongacin:
Un segundo aminoacil-tRNA (en el ejemplo Phe-tRNa[Phe]) se
coloca en la posicin A de la subunidad grande del ribosoma.
Un complejo activado por GPT se ocupa de formar el enlace
peptdico quedando el pptido en crecimiento unido al aminoacil-
tRNA entrante.
El primer t-RNA se separa del primer AA y del punto P del
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El primer t-RNA se separa del primer AA y del punto P del
ribomosa.
El ribosoma se mueva un triplete hacia la derecha, con los que el
peptidil-tRNA[Phe] queda unido al punto P que haba quedado
libre.
Un tercer aminoacil-tRNA (en el ejemplo Leu-tRNA[Leu]) se coloca
en la posicin A y se repite el proceso de formacin del enlace
peptidico, quedando el pptido en crecimiento unido al Leu-
tRNA[Leu] entrante. Se separa el segundo t-RNA del segundo
aminoacido y del punto P del ribosoma.
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
Terminacin:
El m-RNA que se est traduciendo lleva un codn de
terminacin (UAG). Cuando el ribosoma llega a este
codn, la protena ensamblada es liberada y el ribosoma se
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codn, la protena ensamblada es liberada y el ribosoma se
fragmenta en sus subunidades quedando listo para un
nuevo proceso.
El ribosoma se desplaza a lo largo de una hebra de m-RNA
leyendo los tripletes de uno en uno.
La sntesis de protenas progresa a razn de 15
aminocidos/segundo.
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
Dada la longitud del m-RNA, varios ribosomas pueden ir
leyendo codones y sintetizando protenas. El conjunto se
denomina poliribosoma
A partir del anterior proceso se puede definir como gen un
conjunto de nucletidos de una molcula de DNA que sirve
como molde para la produccin de una protena o una
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como molde para la produccin de una protena o una
familia de protenas si se producen operaciones de corte y
empalme en el RNA.
Como usualmente una protena tiene entre 100 y 1000
aminoacidos, el m-RNA maduro contendr entre 300 y
3000 nucletidos. El tamao del gen depender, de los
intrones que tenga.
SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
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SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
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SNTESIS DE PROTENAS SNTESIS DE PROTENAS
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Schematic Schematic to to illustrate illustrate cell cell--free free protein protein synthesis, synthesis, (from (from JJ..R R.. Swartz, Swartz,
Curr Curr.. Opin Opin.. Biotechnol Biotechnol.. ((2001 2001)) 12 12::195 195))..
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