Ala Conceptual Filosofia

O conhecimento cientifico sobre a natureza repousa na observao e na experimentao baseada em teorias que organizam os factos e o raciocnio do Homem, aprofundando a sua compreenso.

Como se classificam as bactrias quanto ao tipo de Gram?

Qual a relao entre esta classificao e a estrutura e composio qumica das suas paredes celulares?

Ala Metodolgica
Juzos de valor
Os resultados obtidos no permitiram uma boa distino entre os diferentes tipos de bactrias porque: A lavagem com etanol pode no ter sido eficiente, devido ao tempo de actuao ser, possivelmente, insuficiente; O lugol poderia no se encontrar nas condies adequadas para fixar e intensificar a cor da soluo de violeta-de-cristal; A concentrao da soluo de violeta-de-cristal poderia no estar na proporo adequada para corar as clulas bacterianas em estudo. A lavagem com etanol um passo muito importante, dada a sua aco sobre os lpidos e sobre a parede celular. Ou seja, o passo de diferenciao entre bactrias Gram + e Gram -. A observao das bactrias foi facilitada pela colorao das preparaes, que ajudou a individualiz-las do meio. Alm disso foi muito importante, pois o reduzido tamanho das bactrias dificulta a sua visualizao ao microscpio. (caso o resultado da experincia fosse positivo).

Teoria
As bactrias so seres procariontes unicelulares e pertencem ao reino Monera. Podem ser encontradas em diferentes habitats. Estes seres tm dimenses reduzidas, podendo apresentar formas muito distintas, tais como: cocos, bacilos, vibries e espirilos.Como todas as clulas procaritoicas, no apresentam ncleo, o seu DNA encontra-se sob a forma circular e disperso no citoplasma e ainda, no possuem organelos membranares. As bacterias podem viver isoladas ou em grupo.

Procedimentos
1. Efectuar trs preparaes, com os seguintes materiais: 1. Bactrias de iogurte; 2. Bactrias de pelcula de vinagre; 3. Mistura de ambas. 2. Colocar uma gota de gua destilada em cada uma das lminas. 3. Com uma agulha lanceolada, retirar uma poro de material a observar e dispor na lmina, sob a gota de gua, para formar o esfregao. 4. Passar levemente, at secar, todas as preparaes pela chama da lamparina. 5. Proceder colorao de Gram em cada uma das preparaes anteriores: a) Cobrir o esfregao com o corante bsico durante 1 minuto; b) Lavar com gua corrente evitando fazer incidir o jacto directamente sobre o esfregao; c) Cobrir com a soluo mordente durante 1 minuto; d) Lavar de igual modo; e) Cobrir com o agente descorante durante 20-30 segundos; f) Lavar de igual modo; g) Cobrir com o agente contrastante durante 40-50 segundos; h) Lavar de igual modo. 6. Secar suavemente sobre papel absorvente. 7. Observar ao microscpio, sem usar lamela, com as objectivas de menor ampliao. 8. Registar as observaes, em esquema simples. 9. Observar com a objectiva de 40 x.

Juzos cognitivos
De acordo com a colorao de Gram, as bactrias classificam-se em Gram + e Gram . As bactrias Gram + possuem uma parede celular mais espessa e com menor concentrao de lpidos que as Gram -. O etanol tem duas funes: dissolver os lpidos da parede celular e desidrat-la. A parede das Gram+ apresenta uma menor concentrao de lpidos, que ao serem dissolvidos formam pequenos poros, que posteriormente sero fechados por desidratao. Este facto impossibilita a sada da soluo de violeta-de-cristal e entrada da soluo de fucsina, da a cor violeta nas clulas destas bactrias. Nas Gram -, cuja parede apresenta uma maior concentrao de lpidos, formam-se poros de grandes dimenses, que por desidratao no fecham completamente. Ento, neste caso, a soluo de violeta-decristal sai das clulas, ficando estas coradas apenas com a soluo de fucsina. O soluto de Lugol fixa e intensifica a cor da soluo de violeta de cristal. Formam um complexo iodo-violeta de cristal, que tem uma cor mais intensa e que mais difcil de remover das clulas. As bactrias Gram + (iogurte) coram de prpura, enquanto que as bactrias Gram coram de vermelho (esfregao bucal). NOTA: o esfregao pode conter clulas eucarioticas. O mtodo de Gram til para diferenciar seres procariontes atravs das estruturas da parece celular.

Princpios/Leis
A Tcnica de Gram um dos mtodos de colorao mais aplicados em bacteriologia, essencial para a classificao e diferenciao de bactrias. Trata-se de um mtodo de colorao diferencial, permitindo classificar as bactrias em Gram+ e Gram - . A colorao de Gram til para avaliar a presena ou no de determinados microrganismos.

Conceitos
Clula Reino Monera Procariontes Cocos Baciloa Parede celular Menbrana plasmtica Peptidoglicano Esfregao Colorao Gram Bactrias Gram+ Bacterias Gram -

Ilustraes

Resultados
No que respeita preparao s com iogurte, apenas se observaram pequenos aglomerados de colorao prpura, conclui-se que no iogurte apenas existem bactrias Gram +. Na preparao que apenas continha o esfregao bucal foram dificilmente observados aglomerados de clulas coradas de vermelho, concluindo-se que existem clulas Gram negativas na nossa boca. Finalmente, na preparao que continha a mistura de ambos, s se observaram clulas Gram + (devido ao excesso de iogurte), mas deveriam existir dos dois tipos.

Escola Secundria Francisco Simes Ncleo de Estgio 08/09 - Laranjeiro 2008