MODULO 3

DETERMINACION DE LA PRESENCIA DE CAFEINA, pACETILAMINOFENOL Y ACIDO ACETILSALICILICO SINTETIZADOS EN

ANALGESICOS COMERCIALES.
Productos Comerciales : Aspirina, Cafiaspirina, Panadol, Paracetamol, Trigsico.
Productos Patrones : Acido Acetilsaliclico, p-Acetilaminofenol, Cafena, obtenidos
en laboratorios previos.
Tcnicas de Laboratorio : -Extraccin discontinua slido-liquido
-Cromatografa en Capa Fina (CCF)
Objetivo : Empleando la tcnica de CCF detectar la presencia de los productos obtenidos en los laboratorios previos en analgsicos comerciales.
CROMATOGRAFIA.
Fundamento:
Tcnica que permite separar los componentes de una mezcla de
compuestos orgnicos (Separacin Cromatogrfica) mediante la distribucin de los
componentes en dos fases. La separacin se logra empleando un sistema bifsico
constitudo por una FASE ESTACIONARIA donde se fijan los componentes a
separar y una FASE MOVIL que los desplaza en forma diferenciada a travs de la
fase estacionaria.
Clasificacin:
A.- Segn la naturaleza fsica de las fases :
1.- Cromatografa Slido-Lquido : Fase estacionaria slida
Fase mvil lquida.
a) Cromatografa de columna (CC)
b) Cromatografa en Capa Fina (CCF o TLC)
+

2.-Cromatografa Lquido-Lquido (HPLC) : Fase estacionaria lquida adsorbida

sobre un soporte slido
Fase mvil lquida.
3.- Cromatografa Lquido-Gas (GC) : Fase estacionaria lquida adsorbida sobre
un soporte slido
Fase mvil gaseosa
B.- Segn el tipo de interaccion de los componentes de la mezcla con la fase
estacionaria y mvil
1.- Cromatografa de Adsorcin : interacciones polares entre los componentes de la
mezcla, la fase estacionaria slida y la fase mvil lquida.
2.- Cromatografa de particin o de reparto : interacciones entre los componentes
de la mezcla con una fase estacionaria lquida y una fase mvil lquida basadas en
la diferente solubilidad de los componentes en ambas fases.
CROMATOGRAFIA SOLIDO_LIQUIDO.
- La mezcla de componentes son adsorbidos por la fase estacionaria slida y luego
son separados selectivamente por la fase lquida mvil.
- Las interacciones que se producen entre los componentes, la fase estacionaria y
la fase mvil estn basadas en la polaridad que ellos presentan
Fase estacionaria : Adsorbente

Fase mvil : Eluyente

Por lo general el adsorbente es Silicagel (SiO2) o Almina (Al2O3)

Dos tipos :
a.- Cromatografa en columna : la fase estacionaria slida est contenida en una columna de vidrio, se fija la mezcla en la parte
superior y la fase mvil lquida pasa a travs de ella desde arriba hacia abajo.

b.- Cromatografa en capa fina : la fase estacionaria est adherida sobre una placa
de vidrio, aluminio o plstico. La mezcla se
adsorbe con un capilar a una cierta distancia del
borde inferior y luego se coloca en posicin
vertical en el interior de una cmara
cromatogrfica que contiene al eluyente (fase
lquida). Al ascender por capilaridad, el eluyente
va provocando la separacin de los componentes
en funcin de su diferente polaridad, hasta llegar
a las cercanas del borde superior. Se saca la placa
y luego se revelan las manchas separadas. Ello se
puede hacer por visualizacin directa, empleando
yodo (I2) o con una lmpara ultravioleta.
Cuanto ms polar sea un compuesto mayor ser su retencin en la fase
estacionaria.
Para un mismo compuesto, un aumento en la polaridad de la fase mvil hace
que se desplace con ms facilidad por la fase estacionaria
Para compuestos poco polares, que se retienen poco en el adsorbente, se
utilizan eluyentes apolares o poco polares como, por ejemplo, hexano
Para compuestos muy polares, que quedan muy retenidos en el adsorbente,
se emplean eluyentes muy polares como, por ejemplo, metanol o mezclas
Metanol/Diclorometano
Para compuestos de polaridad media se emplean eluyentes de polaridad
intermedia y son muy aconsejables en estos caso las mezclas en distintas
proporciones de Hexano/Acetato de etilo
Orden de polaridad de eluyentes :
Agua > Alcoholes > Acetonitrilo > Acetato de
Etilo > Tetrahidrofurano(THF) > Diclorometano > Cloroformo > Tetracloruro de
Carbono > Hexano.

ELUYENTE
Es un solvente o una mezcla de solventes que separa a los componentes en funcin
de su polaridad.
Orden de polaridad de eluyentes :
Compuestos poco polares : Hexano
Compuestos muy polares : Metanol, Metanol/Diclorometano
Compuestos de polaridad Intermedia : Hexano/Acetato de Etilo.
Cada uno de los componentes separados queda caracterizado por su Factor de
Retencin (Rf)
Rf (Rate Factor) :
Distancia recorrida por compuesto/ Distancia recorrida por el eluyente.

Aplicaciones :

1.- N de componentes
2.- Pureza del componente
3.- Identificacin de componente
4.- Progreso de reaccin
5.- Progreso de cromatografa en columna.

 Pasos para hacer una cromatografa en capa fina

1. Preparacin de la cmara cromatogrfica

2. Preparacin de placa

3. Preparacin de la solucin:
(muestra y patrones), disuelta en la mnima cantidad de solvente voltil

4. Aplicacin de la muestra
Con microcapilar gotear cuidadosamente una pequea gota sobre la marca realizada, secar y
aplicar
nuevamente

5. Desarrollo del cromatograma

Colocar la placa dentro de la cmara cromatogrfica que contiene el solvente, esperar y marcar
el frente del solvente

6.

Visu
aliza
cin
o
revelado del cromatograma
Si el compuesto es coloreado es fcilmente visualizado
Si no lo es se debe revelar con cmara de I2 o con radiacin UV

7. Anlisis: Rf, factor de retencin