TCNICAS ESPECTROSCPICAS

Espectrofotometra de visible y ultravioleta Tipos de espectrofotometra ESPECTROMETRA DE ABSORCIN La espectrometra de absorcin es una tcnica en la cual la energa de un haz de luz se mide antes y despus de la interaccin con una muestra. Cuando se realiza con lser de diodo ajustable, se la conoce como espectroscopia de absorcin con lser de diodo ajustable. Tambin se combina a menudo con una tcnica de modulacin, como la espectrometra de modulacin de longitud de onda, y de vez en cuando con la espectrometra de modulacin de frecuencia a fin de reducir el ruido en el sistema. ESPECTROMETRA DE FLUORESCENCIA La espectrometra de fluorescencia usa fotones de energa ms elevada para excitar una muestra, que emitir entonces fotones de inferior energa. Esta tcnica se ha hecho popular en aplicaciones bioqumicas y mdicas, y puede ser usada con microscopa confocal, transferencia de energa entre partculas fluorescentes, y visualizacin de la vida media de fluorescencia. ESPECTROMETRA DE RAYOS X Cuando los rayos X con suficiente frecuencia (energa) interaccionan con una sustancia, los electrones de las capas interiores del tomo se excitan a orbitales vacos externos, o bien son eliminados completamente, ionizndose el tomo. El "agujero" de la capa interior se llena entonces con electrones de los orbitales externos. La energa disponible en este proceso de excitacin se emite como radiacin (fluorescencia) o quitar otros electrones menos enlazados del tomo (efecto Auger). La absorcin o frecuencias de emisin (energas) son caractersticas de cada tomo especfico. Adems, para un tomo especfico se producen pequeas variaciones de frecuencia (energa) que son caractersticas del enlace qumico. Con un aparato apropiado pueden medirse estas frecuencias de rayos X caractersticas o energas de electrones Auger. La absorcin de rayos X y la espectroscopia de emisin se usan en qumica y ciencias de los materiales para determinar la composicin elemental y el enlace qumico. La cristalografa de rayos X es un proceso de dispersin. Los materiales cristalinos dispersan rayos X en ngulos bien definidos. Si la longitud de onda de los rayos X incidentes es conocida, se pueden calcular las distancias entre planos de tomos dentro del cristal. Las intensidades de los rayos X dispersados dan informacin sobre las posiciones atmicas y permiten calcular la organizacin de los tomos dentro de la estructura cristalina. ESPECTROMETRA DE LLAMA Las muestras de solucin lquidas son aspiradas en un quemador o una combinacin de nebulizador/quemador, desolvatadas, atomizadas, y a veces excitadas a un estado electrnico de energa ms alta. El uso de una llama durante el anlisis requiere combustible y oxidante, tpicamente en forma de gases. Los gases combustibles comunes que se usan son el acetileno (etino) o el hidrgeno. Los gases de oxidante suelen ser el oxgeno, el aire, o el xido nitroso. Estos mtodos son a menudo capaces de analizar elementos metlicos en partes por milln, billones, o posiblemente rangos ms bajos de concentracin. Son necesarios detectores de luz para detectar la luz con informacin que viene de la llama. * Espectrometra de emisin atmica. Este mtodo usa la excitacin de la llama; los tomos son excitados por el calor de la llama para emitir luz. Este mtodo suele usar un quemador de consumo total con una salida de incineracin redonda. Se utiliza una llama de temperatura ms alta que la usada en la espectrometra de absorcin atmica para producir la excitacin de tomos de analito. Ya que los tomos de analito estn excitados por el calor de la llama, no es necesaria ninguna lmpara elemental especial. Puede usarse un policromador de alta resolucin para producir una intensidad de emisin contra el espectro de longitud de onda por encima de un rango de longitudes de onda que muestran lneas de excitacin de

elementos mltiples. O bien puede usarse un monocromador en una longitud de onda determinada para concentrarse en el anlisis de un solo elemento en una cierta lnea de emisin. La espectrometra de emisin de plasma es una versin ms moderna de este mtodo. * Espectrometra de absorcin atmica (a menudo llamada AA). Este mtodo usa un nebulizador prequemador (o cmara de nebulizacin) para crear una niebla de la muestra, y un quemador en forma de ranura que da una llama de longitud de ruta ms larga. La temperatura de la llama es lo bastante baja como para no excitar los tomos de la muestra de su estado basal. El nebulizador y la llama se usan para desolvatar y atomizar la muestra, pero la excitacin de los tomos de analito se realiza mediante lmparas que brillan a travs de la llama en varias longitudes de onda para cada tipo de analito. En la absorcin atmica, la cantidad de luz absorbida despus de pasar por la llama determina la cantidad de analito en la muestra. Suele usarse un horno de grafito para calentar, desolvatar y atomizar la muestra con el fin de obtener una mayor sensibilidad. El mtodo del horno de grafito tambin puede analizar algn slido o muestras mezcladas. A causa de su buena sensibilidad y selectividad, es un mtodo que todava se usa para el anlisis de ciertos microelementos en muestras acuosas (y otros lquidos). * Espectrometra de fluorescencia atmica. Este mtodo usa un quemador con una salida de incineracin redonda. La llama se usa para solvatar y atomizar la muestra, y una lmpara emite luz a una longitud de onda especfica en la llama para excitar los tomos de analito. Los tomos de ciertos elementos pueden entonces fluorescer, emitiendo luz en diferentes direcciones. La intensidad de esta luz fluorescente sirve para cuantificar la cantidad del elemento analizado en la muestra. Tambin puede usarse un horno de grafito para la espectrometra de fluorescencia atmica. Este mtodo no es tan comn como el de absorcin atmica o el de emisin de plasma. ESPECTROMETRA DE EMISIN DE PLASMA Es similar a la emisin atmica por llama, y la ha sustituido en gran parte.

* Espectrometra de plasma de corriente contnua (DCP). Un plasma de corriente contnua se crea por una descarga elctrica entre dos electrodos. Es necesario un gas de apoyo al plasma, y el ms comn es el argn. Las muestras pueden ser depositadas en uno de los electrodos. * * Espectrometra Espectrometra de de emisin emisin ptica por descarga acoplada luminiscente inductivamente (GD-OES) (ICP-AES)

plasma-atmica

* Espectrometra de ruptura inducida por lser (LIBS), tambin llamada espectrometra de plasma inducida por lser (LABIOS) * Espectrometra de plasma inducida por microondas(MIP) ESPECTROMETRA DE CHISPA O ARCO Se usa para el anlisis de elementos metlicos en muestras slidas. Para materiales no conductores, se usa polvo de grafito para hacer conductora la muestra. En los mtodos de espectroscopia de arco tradicionales se usa una muestra slida que es destruida durante el anlisis. Un arco elctrico o chispa se pasan por la muestra, calentndola a alta temperatura para excitar los tomos. Los tomos de analito excitado emiten luz en varias longitudes de onda que pueden ser detectadas mediante mtodos espectroscpicos comunes. Ya que las condiciones que producen la emisin por arco no son controladas cuantitativamente, el anlisis de los elementos es cualitativo. Hoy da, las fuentes de chispa con descargas controladas bajo una atmsfera de argn permiten que este mtodo pueda ser considerado eminentemente cuantitativo, y su uso est muy extendido en los laboratorios de control de produccin de fundiciones y aceras. ESPECTROMETRA VISIBLE

Muchos tomos emiten o absorben la luz visible. A fin de obtener un espectro lineal fino, los tomos deben estar en fase gaseosa. Esto significa que la sustancia tiene que ser vaporizada. El espectro se estudia en absorcin o emisin. La espectroscopia de absorcin visible a menudo se combina con la de absorcin ultravioleta (espectroscopia UV/Vis). Aunque esta forma pueda ser poco comn al ser el ojo humano un indicador similar, todava se muestra til para distinguir colores. ESPECTROMETRA ULTRAVIOLETA Todos los tomos absorben en la regin ultravioleta (UV) ya que estos fotones son bastante energticos para excitar a los electrones externos. Si la frecuencia es lo bastante alta, se produce la fotoionizacin. La espectrometra UV tambin se usa para la cuantificacin de protenas y concentracin de ADN, as como para la proporcin de protenas y ADN en una solucin. En las protenas se encuentran generalmente varios aminocidos, como el triptfano, que absorben la luz en el rango de 280nm. El ADN absorbe la luz en el rango de 260nm. Por esta razn, la proporcin de absorbancia 260/280nm es un buen indicador general de la pureza relativa de una solucin en trminos de estas dos macromolculas. Tambin pueden hacerse estimaciones razonables de la concentracin de ADN o protenas aplicando la ley de Beer. ESPECTROMETRA INFRARROJA La espectrometra infrarroja ofrece la posibilidad de medir tipos diferentes de vibraciones en los enlaces atmicos a frecuencias diferentes. En qumica orgnica, el anlisis de los espectros de absorcin infrarroja indica qu tipo de enlaces estn presentes en la muestra. ESPECTROMETRA RAMAN La espectrometra Raman usa la dispersin inelstica de la luz para analizar modos vibracionales y rotatorios de las molculas. Las "huellas digitales" que resultan son una ayuda para el anlisis. ESPECTROMETRA DE RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR (RMN) La espectrometra de resonancia magntica nuclear analiza las propiedades magnticas de ciertos ncleos atmicos para determinar diferentes ambientes locales electrnicos del hidrgeno, carbono, u otros tomos en un compuesto orgnico u otro compuesto. Se usa para determinar la estructura del compuesto. ESPECTROMETRA DE FOTOEMISIN La fotoemisin puede referirse a: * Emisin de electrones a partir de la materia despus de la absorcin de fotones energticos (efecto fotoelctrico). * Emisin de fotones a partir de los semiconductores y metales cuando los electrones que fluyen en el material pierden energa mediante deceleracin o recombinacin. ESPECTROMETRA MSSBAUER La espectrometra de transmisin o conversin electrnica (CEMS) de Mssbauer prueba las propiedades de los ncleos de istopos especficos en ambientes atmicos diferentes, analizando la absorcin resonante de rayos gamma de energa caracterstica, lo que se conoce como efecto de Mssbauer.

MANTENIMIENTO DEL ESPECTROFOTOMETRO. Los espectrofotmetros, en general, son equipos muy especializados y costosos. Su conservacin depende en gran medida de la forma de instalacin y utilizacin. El medio ambiente que los rodea y la calidad de los servicios de electricidad constituyen factores de primordial importancia, para que los equipos puedan prestar los servicios de acuerdo con las especificaciones para los que fueron fabricados. Las rutinas de mantenimiento que pueden llegar a requerir varan en complejidad, van desde la limpieza cuidadosa de sus componentes hasta procedimientos especializados, que solo deben realizar tcnicos o ingenieros que hayan recibido la capacitacin correspondiente y dispongan de la informacin tcnica desarrollada por los fabricantes El mantenimiento preventivo del espectrofotmetro debe responder a las rutinas y frecuencias recomendadas por el fabricante. A continuacin, se presenta un grupo de rutinas bsicas que puede ser realizada en el laboratorio. 1. Limpiar externamente el espectrofotmetro, incluyendo los controles, pantallas o metros de medicin. Esto se puede realizar con una pieza de tela fina similar a la textura de los pauelos humedecida con agua destilada. 2. Inspeccionar y limpiar el cable de alimentacin elctrica. 3. Verificar que la lmpara est limpia y en buen estado. Si no funciona, instalar una nueva, con las mismas especificaciones de la original. En los espectrofotmetros modernos, el estado de la lmpara es detectado automticamente mediante el software que controla el estado y el funcionamiento del equipo, por lo que es fcil determinar en qu momento es necesario cambiar la lmpara. Efectuar el cambio de la lmpara y realizar el ajuste posterior siguiendo el procedimiento recomendado por el fabricante. 4. Revisar el fusible de proteccin. Antes de abrir el alojamiento del fusible, comprobar que el espectrofotmetro est apagado y que sus contactos se encuentren limpios y en buen estado. Si es necesario reemplazarlo, colocar uno nuevo con las mismas caractersticas del recomendado por el fabricante. 5. Colocar el instrumento en la configuracin operacional. 6. Accionar el interruptor de encendido para permitir un funcionamiento por cinco (5) minutos. Verificar lo siguiente: a) Si las lmparas o indicadores piloto funcionan. b) Si el indicador de lectura permanece en cero (0). c) Si la luz de la fuente funciona. 7. Realizar una prueba de corriente de fuga en las posiciones de encendido y apagado. a) Verificar el polo a tierra y la polaridad correcta. b) Verificar la polaridad correcta sin polo a tierra. c) Verificar la polaridad inversa sin polo a tierra. 8. Calibrar el panel frontal del espectrofotmetro siguiendo las instrucciones del fabricante. 9. Medir la sensibilidad del equipo. 10. Realizar una prueba siguiendo la ley de Beer.

11. Regresar el espectrofotmetro a la configuracin inicial, si la calibracin se ha efectuado con xito. PROPIEDADES FISICOQUIMICAS DE SUSTANCIAS A UTILIZAR EN LA PRACTICA

N02 Peso Molecular: 46.05 g/mol

Fase Slida Punto de fusin : -11.2 C Calor latente de fusin (1,013 bar, en el punto triple) : 159.41 kJ/kg Fase lquida Densidad del lquido (1.013 bar en el punto de ebullicin) : 1443 kg/m 3 Equivalente Lquido/Gas (1.013 bar y 21 C (70 F)) : 424 vol/vol Punto de ebullicin (1.013 bar) : 21.1 C Calor latente de vaporizacin (1.013 bar en el punto de ebullicin) : 430.4 kJ/kg Presin de vapor (a 20 C o 68 F) : 1 bar Punto Crtico Temperatura Crtica : 157.8 C Presin Crtica : 101.32 bar Fase gaseosa Densidad del gas (1.013 bar en el punto de ebullicin) : 3.4 kg/m 3 Factor de Compresibilidad (Z) (1.013 bar y 15 C (59 F)) : 0.992 Gravedad especfica (aire = 1) (1.013 bar y 15 C (59 F)) : 1.59 Volumen Especfico (1.013 bar y 21 C (70 F)) : 0.512 m3/kg Capacidad calorfica a presin constante (Cp) (1.013 bar y 24.3 C (76 F)) : 0.036 kJ/(mol.K) Viscosidad (1.013 bar y 20 C (68 F)) : 0.000132 Poise Conductividad Trmica (1.013 bar y 50 C (122 F)) : 167.47 mW/(m.K)

ACIDO SULFANILICO
Formula Qumica : C6H7NO3S Estado Fsico : Slido. Apariencia : Cristales transparentes o polvos blancos. Olor : Sin olor. pH : Acido. Temperatura de Ebullicin : Se descompone. Temperatura de Fusin : 288C (se descompone). Densidad (Agua1) : 1.485 kg/L a 20C (cido Glico Anhidro). Presin de Vapor : No reportado. Densidad de Vapor (Aire1) : No reportado. Solubilidad : Ligeramente solubilidad en Agua (1 g por 100 ml de Agua a 20C).

-naftilamina
1-Aminonalfataleno C10H9N Masa molecular: 143.2
ESTADO FISICO; ASPECTO Cristales blancos, de olor caracterstico. Vira a rojo por exposicin al aire, a la luz y a la humedad. Punto de ebullicin: 300.8C Punto de fusin: 50.0C Density: 1.12g/cm3 Solubilidad en agua: ninguna Presin de vapor, Pa a 20C: 0.53 Densidad relativa de vapor (aire = 1): 4.93 Punto de inflamacin: 157C c.c.C Temperatura de autoignicin: 460C Coeficiente de reparto octanol/agua como log Pow: 2.25