Toma de muestra en mejilla con siembra en diferentes agares y medios bioqumicos

Introduccin
El siguiente procedimiento se realizo con el fin de poder identificar microorganismos que se encuentran y habitan la cavidad oral, esto se realizo siguiendo de manera adecuada cada uno de los pasos para la siembra de mejilla con el fin de tener los mejores resultados posibles.

Objetivos

Escoger los medios de cultivo ms favorables para la siembra de mejilla. Poder realizar de forma adecuada todos los procedimientos en la siembra de mejilla. Determinar e identificar de forma clara y concisa todos los microorganismos que habitan dentro de la cavidad oral.

Materiales
Enjuague bucal Vaso precipitado Guantes Delantal Mechero Fsforos Torulas estril Gradilla Tubo de ensayo con suero fisiolgico Agar sangre Agar manitol sal Incubadora de laboratorio Suero fisiolgico

Materiales utilizados: Segunda sesin

Pruebas bioqumicas: Muestras de mejillas, semana anterior Tincin Gram Microscopio Porta objeto Aceite de inmersin Guantes Mechero Torulas Gradilla Incubadora de laboratorio Plumn Agua 1 tubo de agar urea 1 tubo de agar manitol 1 tubo de agar TSI 1 tubo con agar citrato 1 tubo con agar sorbitol

Materiales utilizados: Tercera sesin

Antibiograma: Agar Mueller Hilton Disco antibitico Eritromicina Disco antibitico Penicilina Disco antibitico Clindamicina Disco antibitico Gentamicina Disco antibitico Oxacilina Mechero Guantes Tubo de ensayo con suero fisiolgico Plumn Torula Incubadora de laboratorio

Procedimiento: Primera sesin

Toma de muestra:

- 1: Se procedi a la eleccin del paciente al que se le realizara la toma de muestra. - 2: Se llevo a cabo el llenado de la ficha con los datos del paciente.
Ficha del paciente Nombre: Nicols Silva. Edad: 24 aos Sexo: Masculino Fecha: 16-10-13 Tipo de muestra: Mejilla Dieta predominante: una dieta rica en Protenas, Carbohidratos y Vegetales Hbitos de higiene oral (frecuencia, productos): - Cepillado 3 veces/da - Enjuague bucal 2 vez/da Presencia de enfermedades de base (cual): No presenta ninguna enfermedad Tratamientos previos y actuales: no presenta tratamiento Nivel socioeconmico: Medio Antecedentes de periodontitis familiar: No Tabaquismo: No Consumo de drogas (cual): No Otros

- 3: Al paciente se le indica enjuagarse su boca con Listerine sin alcohol durante 30

segundos y con suero fisiolgico.

- 4: Se realizo la toma de muestra de mejilla del paciente, con una Torula estril. -5: Se procedi a realizar la siembra de la muestra de mejilla obtenida, estas
siembras se realizaron en distintos medios de cultivo: Agar sangre, Manitol sal y Suero fisiolgico. La tcnica empleada fue de estra simple.

-6: Luego de realizar las siembras, estas fueron llevadas a una incubadora a 37C
durante 24 hrs.

RESULTADOS
Manitol sal: En esta siembra se formaron 2 colonias aisladas, las cuales resultaron ser de Staphylococcus Aureus, esto se produjo debido a que este medio es selectivo para bacterias gram positivas. Suero fisiolgico: no puede determinar crecimiento alguno. Agar sangre: Para este medio de cultivo se formo un amplio crecimiento bacteriano en el cual se identificaron colonias de Staphylococcos, el cual presento hemolisis gama.

FORMA: Cocos. AGRUPACION: Estafilococos. AUMENTO: 100X. TINCION: GRAM POSITIVO.

Procedimientos: Segunda sesin

-1: Luego de examinar las muestras de mejillas de la semana anterior y de escoger una muestra en la cual hubo mayor formacin de colonias de bacterias, para seguir con los siguientes procedimientos a realizar. -2: se realizo una descripcin macroscpica de la muestra escogida, en este caso agar sangre para determinar el tipo de hemolisis presente. -3: Se toma una muestra del agar sangre, la cual fue sometida a las diversas tinciones con el fin de identificarla en el microscopio, para saber de manera categrica el microorganismo a estudiar. -4: Luego de identificar el microorganismo, se toma una muestra del agar sangre y se procedi a sembrarlo en los diversos medios bioqumicos mediante puncin y estra simple. -5: Una vez realizada la siembra, se llevaron los distintos medios bioqumicos a una incubadora de laboratorio a 37C durante 24 hrs.

RESULTADOS: PRUEBAS BIOQUIMICAS.

Agar Urea: Medio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la actividad uresica. Se utiliza para identificar bacterias que hidrolizan urea, tales como enterobacterias y estafilococos. Fundamento: En el medio de cultivo, la triptena y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el rojo de fenol es el indicador de pH. Algunas bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima ureasa liberando amonaco y dixido de carbono. Estos productos alcalinizan el medio haciendo virar el rojo de fenol del amarillo al rojo. En este medio, la fermentacin de la glucosa activa la enzima ureasa, acelerando la velocidad del metabolismo en aquellos organismos que hidrolizan lentamente la urea, este resultado fue positivo. Resultados: para esta prueba bioqumica el resultado fue positivo como se describi anteriormente.

TSi: Medio universalmente empleado para la diferenciacin de enterobacterias, en base a la fermentacin de glucosa, lactosa, sacarosa y a la produccin de cido sulfhdrico.

Resultados: para esta prueba bioqumica el resultado fue negativo como se vio anteriormente. Ya que la lactosa, sacarosa y glucosa son hidratos de carbono fermentables.

Agar Manitol : Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciacin de estafilococos. Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patognicos a partir de muestras clnicas y otros

materiales de importancia sanitaria.

Resultados : para esta prueba bioqumica el resultado fue positivo como se observa en la imagen anterior, ya que las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y fermentan el manitol, producen cidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo.

Agar Sorbitol: Medio selectivo y diferencial utilizado para facilitar el aislamiento de Escherichia coli 0157 H7 a partir de heces, alimentos y otros materiales de importancia sanitaria. Fundamentos: La frmula es similar al Agar Mac Conkey pero la lactosa ha sido reemplazada por sorbitol. E. coli 0157 H7 no fermenta el sorbitol dando colonias transparentes mientras que la mayora de E. coli la fermenta, dando colonias rosadas. Resultados: para esta prueba bioqumica el resultado fue negativo, ya que no la fermenta.

Agar Citrato: Medio utilizado para la diferenciacin de enterobacterias, en base a la capacidad de usar citrato como nica fuente de carbono y energa. Fundamentos: Medio utilizado para la diferenciacin de enterobacterias, en base a la capacidad de usar citrato como nica fuente de carbono y energa. El cual se torna azul cuando es positivo y negativo si aun continua verde. Resultados: para esta prueba el resultado fue negativo ya que continua verde como se ve en la imagen

Procedimientos: Tercera sesin

Antibiograma: -1: Se observaron los resultados obtenidos la semana anterior -2: Se sembr en suero fisiolgico las muestras de la semana anterior -3: Se procedi a sembrar en agar mueller Hilton, mediante la tcnica de estra simple, esto se realizo desde la muestra hecha en el suero fisiolgico. -4: Se subdivido la siembra en agar mueller Hilton en 5 partes iguales y se coloco sensidiscos de antibiticos en cada uno de las divisiones -5: Se llevo la muestra de agar mueller Hilton a una incubadora de laboratorio a 37C durante un lapso de 16 a 24 hrs. -6: Se observaron los resultados obtenidos en el antibiograma.

RESULTADOS ANTIBIOGRAMA.
Oxacilina: La bacteria Staphylococcos Aureus es resistente a este tipo de antibitico, debido a que presento crecimiento alrededor de este sensidisco. Eritromicina: La bacteria Staphylococcos Aureus es resistente a este tipo de antibitico, debido a que presento crecimiento alrededor de este sensidisco. Clindamicina: La bacteria Staphylococcos Aureus es resistente a este tipo de antibitico, debido a que presento crecimiento alrededor de este sensidisco Penicilina: La bacteria Staphylococcos Aureus es resistente a este tipo de antibitico, debido a que presento crecimiento alrededor de este sensidisco Gentamicina: La bacteria Staphylococcos Aureus es sensible a este tipo de antibitico, debido a que presento un halo inhibicin superior a 15 mm de dimetro lo que nos indica que la bacteria es susceptible a este antibitico impidindole su crecimiento.

Conclusin
Gracias a los resultados obtenidos en las diversas pruebas microbiolgicas realizados, se pudo determinar que la bacteria que se formo en mayor cantidad fue el Staphylococcos Aureus, debido a que esta bacteria es comn que habite la cavidad oral y es parte de la flora bacteriana normal. Tambin se pudo concluir que para poder tener resultados realmente significativos es necesario realizar todas las pruebas microbiolgicas que sean pertinentes y de manera correcta para que los resultados que uno espera obtener no estn perturbados.