El ADN

Freidrich Miescher en 1869 aisl una molcula blanca, azucarada, ligeramente cida y contena fsforo. Posteriormente se perdi inters en ella porque no estaba implicada en el metabolismo celular

Experimentos de Griffith (1829): el factor transformante

Cepa de Streptococcus pneunoniae con cpsula es virulenta y produce neumona. Cepa lisa o sin cpsula no produce la enfermedad. La mezcla de bacterias muertas encapsuladas + vivas sin cpsula, genera un factor transformante que transfiere algo a las vivas para que formen cpsulas y se vuelvan virulentas.

Composicin de los nucletidos y ADN

Levene (1909): nuclena (ADN) puede ser degradada a un grupo fosfato, un azcar de cinco carbonos llamada y cuatro bases nitrogenadas. Chargaff (1940): proporciones de purinas son idnticas a las pirimidinas[A]=[T], [G]=[C]
Hershey y Chase (1952) prueban que la informacin gentica de todos los organismos es ADN

Nucleotidos del ADN o desoxinucletidostrifosfatos

Deoxy TTP (deoxythymidine Triphosphate)

Timine

Proporcin de nucletidos: Chargaff

El modelo de Watson y Crick

1953: el zologo Watson (izquierda) y el fsico Francis Crick (derecha) describieron la estructura en doble hlice de la molcula de ADN.
Examinan los datos existentes sobre el ADN y los sintetizan de manera significativa Premio Nobel de Fisiologa y Medicina (1962) compartido con Maurice Wilkins.

Informacin Disponible

ADN: molcula grande, Bombardeo con rayos X DNA larga y delgada. cristalizado Proporcin de purinas A=T y C=G son iguales en una misma especie). Difraccin de los rayos-x de Franklin y Wilkins: patrones reflejan giros de la doble hlice . Los trabajos de Linus Pauling sobre protenas (forma de hlice mantenida por puentes hidrgeno), quin sugiri para el ADN una estructura semejante.

Watson y Crick describieron la estructura del ADN

El ADN es una doble hlice, con las bases dirigidas hacia el centro, perpendiculares al eje de la molcula (como los peldaos de una escalera caracol). Las unidades azcar-fosfato a lo largo de los lados de la hlice, como las barandas de la escalera.
Los peldaos estn formados por dos bases.

Siempre se une Adenina con Timina y Guanina se une con citocina.

Estructura del ADN

Estructura del ADN

Las bases son complementarias: el orden de las bases en una cadena -TTCAG- determina el orden de las bases en la otra cadena -AAGTC.
Las cadenas son antiparalelas en sentido 5-3.

Doble enlace
TA

Triple enlace C-G

Replicacin del ADN

Replicacin semiconservativa del ADN

La ruptura de los puentes de hidrgeno que unen las bases, separa las cadenas de ADN. Cada una de las cadenas originales sirve luego como molde para la formacin de una cadena complementaria de ADN nueva.

Materiales requeridos para la replicacin del ADN

- ADN molde, de la clula madre - Desoxinucletidos 3P libres - Un ARN iniciador:
La ADN polimerasa solamente puede agregar nucletidos a un cadena de nucletidos y necesita un extremo 3libre para poder comenzar a polimerizar. No puede INICIAR la sntesis de una cadena de novo. Quien le va a dar ese extremo 3libre? Otra enzima la ADN primasa sintetiza una pequea porcin de ARN que recibe el nombre de iniciador o cebador , de unos 10 nucletidos de longitud que va a dejar el extremo 3 libre.

Materiales requeridos para la replicacin del ADN (cont)

Enzimas y otras protenas: - Helicasa: rompe puentes de H que unen las bases complementarias - Topoisomerasas, girasas: cortan y reconectan las cadenas de ADN para que giren y se desenrollen. - Protenas de unin a cadena simple: mantienen separadas cadenas de ADN evitando que se enrollen - ADN polimerasas : Sntesis de ADN, correccin y reparacin (p. ej. ADN polimerasa III: remueve fragmentos de Okasaki) - ADN ligasas: unen fragmentos de Okasaki

Proteinas que ayudan a desestabilizar la doble hlice

3 5

5 3

Topoisomerasas o Girasas

Orgenes de replicacin
La molcula de ADN es larga, pero existen mltiples orgenes de replicacin para hacer la duplicacin mas rpida (si lo hiciera a partir de un extremo, tardara 30 das). En estos abundan las secuencias GATC. Helicasas, Topoisomerasas, etc. los reconocen.
...ACGTGATCGGGCTA....ACCGATCACATCGG.....AGGCGATCTTACG... ...TGCACTAGCCCGAT....TGGCTAGTGTAGCC .... TCCGCTAGAATGC...

FASE DE INICIACION
Se inicia con la enzima PRIMASA, que coloca en cada horquilla hebras cortas de ARN complementarias llamadas CEBADORES en el sentido 5 a 3. Posteriormente, la ADN polimerasa comienza la sntesis aadiendo nucletidos en 3 el extremo 3 5
PRIMASA
5 3

ADN polimerasa
CEBADOR ADN COMPLEMENTARIO

3 3 5

La hebra que vemos arriba crece de forma continua, mientras que la otra lo va a hacer de forma discontinua

FASE DE ELONGACIN
La horquilla de replicacin se sigue abriendo y contina la copia de ADN La hebra de arriba lo hace de manera continua (adelantada). Para que la de abajo siga creciendo se debe sintetizar de nuevo 3 cebadores, por tanto crece discontinua (rezagada). 5
5 3
ARN Fragmento de OKAZAKI

3 5

La sntesis discontinua genera los fragmentos de Okasaki en la cadena rezagada

FASE DE ELONGACIN Seguidamente las ADN polimerasas continuan en esta hebra colocando desoxirribonucletidos, llegando hasta sustituir al primer cebador. 3
5

5 3
ARN Fragmento de OKAZAKI

3 5

Las ADN polimerasas colocan desoxirribonucletidos complementarios de la hebras moldes (3a 5) y tambin sustituyen los ribonucletidos de las cadenas cortas de ARN del cebador (5a 3), pero no une los nucleotidos vecinos de la misma hebra.

FASE DE ELONGACIN
Para que los nucletidos de la hebra de crecimiento discontinuo tengan continuidad hace falta la accin de un enzima llamado LIGASA.
3
Ligasa

5 3

3 5

FASE DE ELONGACIN

Apreciamos como el resultado final son dos molculas en doble hlice de ADN
5 3 3 5

5 3

3
5

Lectura de prueba La lleva a cabo la misma ADN pol, con su act. Exonucleasa 3-5)

Sistema por nucleasa reparadora, ADN polimerasa y ADN ligasa

Sistema de escicion- reparacin