Nueva Plataforma Universal para la Inmunoterapia del Cncer Investigadores de la Escuela Perelman de Medicina en la Universidad de Pennsylvania reportan este

mes en Investigacin del Cncer un acercamiento universal a la terapia personalizada de cncer basndose en clulas T. Es la primera vez que ha sido propuesto un sistema en el que una clula T modificada, es diseada para atacar tipos especficos de tumores, dependiendo cuales protenas anmalas, llamadas antgenos estn expresadas, por las celulas del tumor de un paciente. Por ahora, el sistema esta siendo refinado en experimentos usando celulas T de un donador sano y modelos animales de cncer humano, con el objetivo de introducir las celulas personalizadas a los pacientes en el futuro, explica el autor Daniel J. Powell Jr., Ph.D., profesor asistente de investigacin de Patologa y Medicina de Laboratorio en el Centro de Investigacin de Cancer de Ovario de Pennsylvania. Los antgenos tumorales son el blanco potencial de una respuesta inmune, e identificar qu antgenos expresan las celulas tumorales de un paciente seria de gran ayuda para designar una terapia para ese individuo en particular. Cualquiera protena mutada producida en una celula tumoral puede actuar como un antgeno tumoral. Muchas celulas tumorales tienen protenas de superficie que son expresadas inapropiadamente para el tipo celular, o estn solo presentes normalmente durante el desarrollo embriognico. Aun as, otras celulas tumorales muestras protenas de superficie que son raras o que estn ausentes en la superficie de celulas sanas y son las responsables de activar las vas moleculares que causan una replicacin descontrolada de celulas. En la mayora de los cnceres, no todos los pacientes tienen celulas tumorales que expresan en mismo antgeno, y aveces celulas tumorales de un mismo paciente pueden expresar diferentes antgenos. Debido a esta complejidad, es importante que se elija apropiadamente que antgeno ser el blanco en una terapia de cncer. Celulas T modificadas para expresar un antgeno diseado, llamado receptor antignico quimrico (CAR), ofrece una estrategia atractiva para dirigir la terapia hacia un antgeno y as tratar un cncer especifico, dice Powell. Los CAR son receptores modificados que insertan, por ejemplo, una porcin de un anticuerpo especifico para el tumor a la celula inmune. Esto permite que las celulas T del paciente reconozcan los antgenos tumorales y maten las celulas tumorales que las expresan. Para la terapia, un gran numero de celulas T con CAR especifico para un tumor, pueden ser generadas en un laboratorio especializado usando las

celulas T del mismo paciente, que les son luego regresadas. Este acercamiento ha mostrado resultados prometedores en pacientes cuyos tumores expresan todos el mismo antgeno. New Universal Platform for Cancer Immunotherapy Researchers from the Perelman School of Medicine at the University of Pennsylvania report this month in Cancer Research a universal approach to personalized cancer therapy based on T cells. It is the first time a system for making an adaptable, engineered T-cell to attack specific tumor types has been proposed, depending on which abnormal proteins, called antigens, are expressed by individual patients' tumor cells. For now, the system is being refined in experiments using healthy donor T cells and animal models of human cancer, with the aim to introduce the personalized cells into patients in the future, explains senior author Daniel J. Powell Jr., Ph.D., a research assistant professor of Pathology and Laboratory Medicine with Penn's Ovarian Cancer Research Center. Tumor antigens are potential targets of an immune response, and identifying which antigens a patient's tumor cells express would be helpful in designing cancer therapy for that individual. Any mutated protein produced in a tumor cell can act as a tumor antigen. Many tumor cells have surface proteins that are inappropriately expressed for the cell type, or are only normally present during embryonic development. Still other tumor cells display cell surface proteins that are rare or absent on the surfaces of healthy cells and are responsible for activating molecular pathways that cause uncontrolled replication of cells. In most cancers, not all patients have tumor cells that express the exact same antigen, and sometimes tumor cells from a single patient can express different antigens. Because of this complexity, it is important to properly choose which antigen to target with cancer therapy. T cells engineered to express an engineered antigen, called a chimeric antigen receptor (CAR), offer an attractive strategy for targeting antigens and treating cancer, says Powell. CARs are engineered receptors that graft, for example, the portion of a tumor-specific antibody onto an immune cell. This allows the patients' T cells to recognize tumor antigens and kill their tumor cells. For therapy, a large number of tumor-specific, cancer-fighting CAR T cells can be generated in a specialized lab using patients' own T cells, which are then infused back into them. This approach has shown promising results in patients whose tumors all express the same antigen.

A pesar de estos descubrimientos esperanzadores, los CAR que se han hecho actualmente, tienen especificidad por un solo antgeno, lo cual significa que solo un tipo de antgeno tumoral puede ser atacado a la vez. Celulas tumorales que carecen de ese antgeno especifico pueden escaparse de ser reconocidos por celulas inmune y seguir replicndose, limitando lo que de otra forma pudo haber sido una terapia efectiva si multiples antgenos tumorales pudieran ser atacados. Por esta razn, el equipo busc crear una estructura de receptor ms generalizado que fuera capaz de producir celulas T capaces de dirigirse a muchos antgenos tumorales. Para ese fin, el equipo desarrollo una nueva plataforma desde la cual podran eventualmente apuntar hacia una variedad de antgenos tumorales, tanto simultneamente como secuencialmente. Hasta el momento, han diseado celulas T contra antgenos de mesotelina, presentes en varios tipos de celulas tumorales; epCAM, presente en canceres de celulas epiteliales; folato alfa, presente en celulas de cncer de ovario; y ms recientemente, CD19 en celulas de linfomas. El receptor inmune universal reconoce molculas adheridas a antgenos tumorales en la superficie de celulas tumorales. Cuando esto ocurre, las celulas T producen protenas de respuesta inflamatoria llamadas citoquinas y otras protenas formadoras de poros. Esas protenas causan la liberacin de enzimas a travs de esos poros hacia las celulas tumorales, matndolas. Las nuevas celulas T diseadas, descritas en Investigacin del Cncer reconocen y se unen exclusivamente a celulas cancergenas marcadas con molculas de biotina, como por ejemplo anticuerpos. Biotina es una vitamina del complejo B necesaria para el crecimiento celular que puede ser enlazada por una molecula llamada avidina, que est contenida en el receptor inmune universal. Como casi cualquier molecula puede ser considerada como biotina, el numero de antgenos que pueden ser identificados por las celulas T que tienen el receptor inmune que enlaza biotina es casi infinito. La versatilidad que este receptor da, permite la identificacin de combinaciones de antgenos diferentes a la misma vez, e incluso uno despus del otro, aclara Powell. Estos descubrimientos demuestran que una celula T universal puede extender significativamente los usos convencionales de CAR, permitiendo al equipo generar celulas T de ilimitada especificidad antignica. Este proceso esta preparado para hacer la terapia de celulas T disponible para los pacientes y mejorar la efectividad de las inmunoterapias en el cncer. Katarzyna Urbanska, Ph.D. contina optimizando este enfoque a los receptores universales, buscando diferentes formas de mejorar la interaccin de celulas T con celulas tumorales, y formas de dirigir mejor las celulas T y las molculas biotina hacia las celulas tumorales en el cuerpo.

Despite these encouraging findings, currently made CARs have a fixed antigen specificity, which means only one type of tumor antigen can be targeted at a time. Tumor cells that lack that selected antigen can then escape recognition by immune cells and replicate, limiting what might otherwise have been an effective therapy if multiple tumor antigens had been targeted. For this reason, the team sought to make a more generalized receptor framework that is able to produce T cells capable of targeting large panels of known tumor antigens. To that end, the team developed a new platform from which they could eventually target a variety of tumor antigens, either simultaneously or sequentially. So far, they have engineered T cells against the antigens mesothelin, present on several tumor cell types; epCAM, present on epithelial cell cancers; alpha folate, present on ovarian cancer cells; and, more recently, CD19 on lymphoma cells. The universal immune receptor recognizes molecules attached to tumor antigens on the surface of tumor cells. When this happens, the T cells produce inflammatory response proteins called cytokines and pore-forming proteins. Those proteins cause the release of enzymes through those pores into tumor cells, thereby killing them. The new engineered T cells described in the Cancer Researchpaper recognize and bind exclusively to cancer cells pre-targeted with biotin- labeled molecules, such as antibodies. Biotin is a B complex vitamin necessary for cell growth that can be bound by a molecule called avidin, which is contained in the universal immune receptor. Since nearly any molecule can be biotin labeled, the number of antigens that can be targeted by T cells carrying the biotin-binding immune receptor is nearly infinite. The versatility afforded by this biotin-binding receptor permitted the targeting of a combination of distinct antigens all at once, and even one after another, notes Powell. The findings demonstrate that a universal T cell can significantly extend conventional CAR approaches, allowing the team to generate T cells of unlimited antigen specificity. This process is geared to make T cell therapy more available to patients and to improve the effectiveness of T-cell immunotherapies for cancer. First author post-doctoral fellow Katarzyna Urbanska, Ph.D. continues optimization of the universal receptor approach by looking for different ways to improve the interaction of T cells with tumor cells, and how to better direct the T cells and the biotin-labeled molecules to tumor cells in the body.

En el future, Powell y sus colegas, predicen una plataforma altamente personalizada para las terapias de cncer que comenzar cuando los pacientes con tumores sean analizados para conocer la expresin de antgenos especficos en el nuevo Centro de Diagnsticos Personalizados del Departamento de Patologa y Medicina de Laboratorio. Cuando los antgenos expresados por las celulas tumorales de un paciente sean determinados, sus clulas T sern modificadas para expresar el receptor inmune universal, y luego se les sern devueltas, en combinacin con molculas de biotina, para que stas se adhieran a los antgenos del tumor del paciente y as lograr una terapia individualizada. Otros co-autores son Eyripidis Lanitis, Mathilde Poussin, Rachel Lynn, Brian P Gavin, Sander Kelderman, Jason Yu y Nathalie Scholler, todos de Penn. Este trabajo fue apoyado por contribucin de la Beca de Investigacin en Bioingeniera Exploratoria y de Desarrollo del Instituto Nacional de Salud.

In the future, Powell and colleagues predict a highly personalized platform for cancer therapy that begins when patient tumors are analyzed for their expression of specific antigens at the Department Pathology and Laboratory Medicine's new Center for Personalized Diagnostics. When the antigens expressed by a patient's tumor cells are determined, their T cells will be engineered to express the universal immune receptor, which will be given back to them in combination with biotin-labeled molecules to attach to patients' tumor antigens for an individualized tumor attack. Other co-authors are Evripidis Lanitis, Mathilde Poussin, Rachel Lynn, Brian P Gavin, Sander Kelderman, Jason Yu, and Nathalie Scholler, all from Penn. This work was supported by an R21 Exploratory/Developmental Bioengineering Research Grant from the National Institutes of Health.