Conocer los mtodos para la cuantificacin de Bacillus cereus a partir de alimentos.

Conocer el fundamento de los medios de cultivo utilizados para el recuento de B. cereus. Conocer la morfologa colonial caracterstica de B. cereus en los medios de cultivo utilizados. Conocer el fundamento de las pruebas bioqumicas utilizadas para la identificacin de B. cereus.

Aerobio* Mvil

10-45C ptima 30-35C

pH 4.99.3

Formador de esporas

Bacilo Gram positivo

Bacillus cereus

0.95

Alimentos crudos de origen vegetal. Vegetales frescos y/o mnimamente procesados. Cereales y derivados (principalmente el arroz). Especias. Leche cruda y pasteurizada. Derivados lcteos. Carnes (crudas y derivados).

Habilidad para crecer en alimentos con alto contenido de almidn

Resistencia de las esporas a procesos de deshidratacin y tratamientos trmicos

Sobrevivencia en alimentos principalmente secos

Adherencia a superficies

Bacillus cereus

Toxiinfeccin

Intoxicacin

Consumo de clulas viables y posterior produccin de toxina

Consumo de la toxina

Sndrome diarreico Perodo de incubacin

Sntomas

Sndrome emtico 1-5 horas

Nauseas, vmito y malestar

8 16 horas
Dolor abdominal, tenesmo rectal, nauseas y diarrea Gastroenteritits

Condicin Dosis infectiva Toxina

105 -106
Hemolisina, Enterotoxina no hemoltica y Citotoxina K Recuperacin de 6 -24 horas. Lquidos. Alimentos inadecuadamente refrigerados

>105
Cereulide Recuperacin de 12-24 horas. Lquidos Arroz frito contaminado

Tratamiento Causas

Sndrome emtico
Toxina Cereulide
Afecta al nervio vago ocasionando dao celular al actuar como un ionforo de potasio.

NMP. AOAC Recuento directo en placa. APHA Recuento de B. cereus Tcnica de GleenAntillonGarca

Permite la estimacin del nmero de microorganimos por gramo de muestra, mediante el recuento de UFC en placa.

Medio KG
Kim y Goepfert

Medio MYP
Manitol Yema de Huevo - Polimixina

Medio diagnstico selectivo utilizado para el aislamiento y recuento de Bacillus cereus en alimentos. Las colonias tpicas a las 24 horas tienen un color turquesa rodeado por un precipitado de hidrlisis de yema de huevo. A las 48 horas de incubacin presentan el color con centro grisceo.

Emulsin de Yema de Huevo Piruvato de sodio Manitol

Proporciona la lecitina
Incrementa la produccin de lecitinas

Fuente de carbono
Indicador de pH, pone de manifiesto la utilizacin del manitol

Azul de Bromotimol

Polimixina B Inhibe el crecimiento de biota acompaante

Incubacin En aerobiosis, a 35-37 C durante 24 horas.

Medio diagnstico, utilizado para el aislamiento y recuento de Bacillus cereus en alimentos.

Manitol
Fuente de Carbono

Incubacin En aerobiosis, a 35-37 C durante 24-48 horas.

Rojo de Fenol
Indicador de pH, demuestra la utilizacin del manitol
Bacillus cereus presenta colonias de tamao aproximado de 5 mm, rojas, rugosas y secas, con halo de precipitacin sobre fondo rosa-prpura.

Emulsin de Yema de Huevo

Proporciona las lecitinas

Polimixina B
Inhibe el crecimiento de biota acompaante

Pre-enriquecimiento en Caldo Soya Tripticasa

Medio KG y Medio MYP

Prueba Catalasa Movilidad Reduccin de nitratos Hidrlisis de almidn Reaccin de la yema de huevo Voges Proskaeuer Licuefaccin de la gelatina Glucosa

Comportamiento + +/+/+/-* + + + A

Sacarosa Glicerol Salicina Manitol Leche peptonada

A A A Peptonizacin

Determinar la capacidad de un organismo de fermentar un carbohidrato incorporado a un medio, produciendo cido y/o gas en una campana de Durham; el medio es lquido y como indicador contiene rojo de fenol.

Carbohidratos

Glucosa Sacarosa Salicina Manitol

Positivo

Sin inocular o negativo

Capacidad de las bacterias para reducir los nitratos convirtindolos en nitritos o en nitrgeno, es decir presencia de nitrato reductasa y nitrito reductasa. Medio de Cultivo Caldo Nitratos Para revelar la presencia : Reactivo A (cido sulfaminico al 0.8% en cido actico glacial) Reactivo B (-naftilamina al 0.5% en cido actico glacial 5N)

Prueba positiva: color rojo en el tubo Prueba negativa :sin cambio de color en el tubo

Permite diferenciar organismos sobre la base de sus mltiples reacciones metablicas en un medio lcteo. La leche contiene lactosa, casena, lactoalbmina y lactoglobulina, por lo tanto, un organismo puede mostrar una o varias propiedades metablicas en la leche tornasolada ayudando as a la identificacin bacteriana: 1. Fermentacin de lactosa 2. Reduccin del tornasol 3. Formacin de cogulo 4. Peptonizacin (digestin) 5. Formacin de gas

Se basa en la deteccin de acetona como producto final neutro derivado del metabolismo de la glucosa.

Reactivos: a) Alfa naftol al 5%, intensificador del color b) Hidrxido de potasio 40%, agente oxidante

La gelatina es una protena que tiene la capacidad de gelificar, cuando es hidrolizada por la gelatinasa en los aminocidos que la componen pierde su caracterstica de gelificar.

Gelatina Nutritiva Sustrato: Gelatina (protena). Enzima: Gelatinasa (Proteasa).

Gelosa Almidn
Produccin de la enzima amilasa

Glicerol
Produccin de la enzima lipasa Utilizacin