Figure 9.

12

RNA ssDNA

ss

MS2

ds

174

fd, M13

dsDNA

T3, T7 Mu

VIRUS 2da. parte : BACTERIFAGOS 2012 Pearson Education, Inc.

Lambda

T2, T4

VIRUS MODELOS:
Fagos de la serie T y fago lambda

Bacterifago T4
-Simetra: compleja -Hospedador: Escherichia coli -Es virulento: desencadena ciclos lticos

DNA:
- bicatenario -codifica algunos de sus propios tRNA -Tiene repeticiones terminales y presenta permutacin circular -Tiene la base 5-hidroximetilcitosina (en lugar de citosina) que se glicosila y permite resistir ataque por ENDONUCLEASAS DE RESTRICCION del hospedador.

Pared de E. coli

Figura 9.10 Adhesin del bacterifago T4 a la pared de Escherichia coli e inyeccin de DNA. (Brock. Cap. 9. XIII Ed. 2012).

Figure 9.13

DNA tiene repeticiones terminales y presenta permutacin circular

Nearly replicated copies of T4 genome

Endonuclease cuts

One headful of T4 DNA

Recombination

T4 genomes generated

Concatemer cut by endonuclease

2012 Pearson Education, Inc.

Evolucin de la infeccin por bacterifago T4

BACTERIFAGO LAMBDA

Bacterifago LAMBDA
-Simetra: compleja -Hospedador: Escherichia coli

DNA:
-Predomina la expresin de un represor de lisis (cI) -Por eso se llama FAGO ATEMPERADO o PROFAGO: se integra al DNA de la bacteria que infecta y produce ciclos lisognicos. -Las bacterias lisogenizadas presentan nuevas propiedades, por ej. pueden producir toxinas.

CARACTERSTICAS DEL FAGO LAMBDA

-Las bacterias infectadas por fago lambda son inmunes al ataque por partculas similares -Puede revertir a fago virulento: la inactivacin del represor de lisis (cI) induce el CICLO LTICO debido al aumento de la expresin de la protena Cro. -El DNA es lineal bicatenario con extremos 5 cohesivos formados por 12 nucletidos complementarios: sitio cos. Al entrar al hospedador se aparean y el DNA pasa a ser circular. -Se integra al cromosoma de Escherichia coli por el sitio att .

GENOMA DE LAMBDA

CICLO LTICO O LISOGNICO ?

cI > Cro => LISOGENIA

Cro > cI => LISIS

LISOGENIA
Integracin de ADN de lambda en el hospedador

Bacteria hospedadora expresa nuevas propiedades

Ej: toxinas

Replicacin de lambda por el crculo rodante

primers

CICLO LTICO

FAGO LAMBDA: CICLO LISOGNICO o LTICO ? Ciclo lisognico: -Sntesis activa de cI (represor de ciclo ltico) -Genoma de fago lambda est integrado en el DNA del hospedador -No hay produccin de protenas tardas Ciclo ltico: -Sntesis de grandes cantidades de Cro -Cro reprime protenas cII y cIII que inducen sntesis de cI -Proteasa FtsH del hospedador degrada cII. Esto afecta a cI.

http://www.blackwellpublishing.com/trun/artwork/Animati ons/Lambda/lambda.html

CURIOSIDADES DE OTROS BACTERIFAGOS

Fago MS2
-SOLAPAMIENTO DE GENES -HOSPEDADOR: E. coli F+ (con plsmido conjugativo), tiene pili sexuales donde el fago se une.

Fagos M13, fd, f1

Pared de la bacteria

-No produce lisis de la bacteria, se libera por GEMACION

M13 se usa como vector de clonacin en Ingeniera Gentica.

GEMACIN

Fago M13

Regin intergnica de M13:

-promotor lacP -gen lacZ de beta-galactosidasa - un sitio de clonado mltiple Placas de lisis por M13 sin inserto: azules Placas de lisis por M13 con inserto: incoloras

M13

DNA forneo (inserto)

bacteria sensible

Sustrato: X-gal

Bacterifago Mu (mutador)
-Acetilacin de residuos de adenina para eludir los sistemas de restriccin del hospedador
-FAGO ATEMPERADO: Se integra dentro de genes del hospedador e induce MUTACIONES en el genoma del hospedador -Puede revertir A CICLO LTICO -Se replica POR TRANSPOSICIN

Fago Mu se usa en Ingeniera Gentica para generar fenotipos bacterianos mutantes.

Mu y la regin invertible G: determina especificidad de hospedador

Especificidad de hospedador segn fibras de cola: G+ (lee SU): E. coli K12

G- (lee SU): otros hospedadores

METODOS COMUNES PARA INACTIVAR VIRUS

A. ESTERILIZACIN - vapor a presin, calor seco, xido de etileno, rayos gamma B. DESINFECCIN DE SUPERFICIES - hipoclorito de sodio, glutaraldheido, formaldheido, cido peractico C. DESINFECCIN DE LA PIEL - clorhexidina, etanol al 70% D. PRODUCCIN DE VACUNAS - formaldheido, beta-propiolactona, psoraleno + UV