Universidades de Alcal, Complutense y S Pablo-CEU Doctorado Interuniversitario QUIMICA MEDICA

Metodologas qumicas en el descubrimiento de nuevos frmacos RESOLUCION

Juan Jos Vaquero
1

FUENTES DE MOLECULAS QUIRALES Fermentacin Fermentacin

QUIRALES

CEP

AQUIRALES

Aislamiento de de Aislamiento fuentes naturales fuentes naturales Semisntesis Semisntesis

Sntesis Sntesis asimtrica asimtrica

FUENTES DE MOLECULAS QUIRALES

RESOLUCIN
X B
X B Y Y A (+) X B

A (-)

A (-)

X Y A (+) B

FUENTES DE MOLECULAS QUIRALES

RESOLUCIN
Directa: Reacciones enantiodiferenciadoras
X B X B Y Y A (+) Y A (+) B X B X Y

A (-)

A (-)

Va formacin de diastereomeros:Reacciones diasterereodiferenciadoras

4

RESOLUCION
RACEMICOS
RESOLUCIN VIA FORMACIN DE DIASTEREOMEROS

RESOLUCIN DIRECTA
RESOLUCION CROMATOGRAFICA

RESOLUCIN CINETICA

CRISTALIZACION
Quimica Enzimatica

CROMATOGRAFICA

CRISTALIZACIN

Recproca

Cristalizacion simultanea

Resolucion reciproca

Cristalizaciontransformacion asimtrica inducida

Purificacion de enantiomeros parcialmente resueltos

Clsica Transformacin inducida

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1. RESOLUCIN POR CRISTALIZACION

+
Racmico (+)/(-)

R1 R

+
Mezcla diastereomeros

Separacin Diastereomeros (CRISTALIZACIN)

R2

= CEP
6

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1.1. RESOLUCIN CLASICA

+
Racmico (+)/(-)

+ R1 p
T

Mezcla diastereomeros

Diagrama de fase para mezclas diastereomericas que forman eutctico

T

P p

M 1:1

E n

P p

M 1:1 Eutectico favorable

E n

Eutectico desfavorable

p=diastereisomero formado por los dos enatiomeros con el mismo signo de rotacin n=diatereoisomero formado por dos enantiomeros con signos opuestos de rotacin

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1.1. RESOLUCIN CLASICA
CAPACIDAD DE RESOLUCION : EL PARAMETRO S DE FOGASSY

Kp-Kn = Kxt=
1/2Co

S 1/2Co-Kn S= 1/2Co 1/2Kp-Kn S= 1/2Co

Kn

Kp

1/2

Co

RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1.1. CRISTALIZACIN CLASICA Estadstica de disolventes empleados en la separacin de diastereoisomeros
(820 resoluciones)

EtOH+otro Otros Cloroformo Eter Dioxano 1 Benceno EtOAc Agua Acetona Alcoholes Metanol 0 100 200 300 400 Etanol
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RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1.1. CRISTALIZACIN CLASICA

Agentes de resolucin
O CO2H H OH HO H CO2H H H CO2H OH H CO2H CO2H CO2H Acido canfrico H O CO2H Me O SO3H X Acido canfosulfnico H CO2H Me Acido hidratpico X N Brucina: X = OMe Estricnina: X =H O N

Acido tartrico Acido mlico H CO2H OH Acido mandlico

Acido fenoxipropionico

N X N

H OH

H Me NH2 -Metilbencilamina

H H Me H NH2 Anfetamina

H H Me HO NHMe Efedrina

Quinina: X = OMe Cinchonidina: X = H

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RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1.1. RESOLUCIN CLASICA
DERIVATIZACIONES PARA RESOLUCION

Amidas

AMINAS: R-NH2

Ureas Carbamatos Esteres

Alcoholes: R-OH

Carbonatos Carbamatos Esteres

Acidos: R-CO2H

Amidas

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RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1.1. CRISTALIZACIN CLASICA

Propiedades de un buen agente de resolucin

El agente de resolucin debe de ser qumica- y opticamnete estable en las condiciones de resolucin Los dos enntiomeros del agente de resolucin deben ser asequibles y baratos El agente de resolucin debe ser recuperable despus del proceso de resolucin y reutilizable El peso molecular del debe de ser los ms bajo posible. El centro estereogneo debe de estar lo ms prximo posible al grupo funcional responsable de las caractersticas fsicas del compuesto La sal diastereomrica debe de tener una estructura molecular rgida Bases y cidos fuertes generan mejores resultados que los dbiles
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RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1.1. CRISTALIZACIN CLASICA
O N O N O O N HO2C O N O HO2C O Ph R Ph
OH

Ph H HO2C CO2H H

Ph

Ph N

O N

Ph

(+)/(-)
O

(+)-Efedrina

(-)
O N H S CO2H N H HO2C

Ph

Ph

Ph N

O N

Ph

O O

(-)-BIOTINA

(+)

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RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1.1. CRISTALIZACIN CLASICA

O2 N

NH2 OH OH

CO2H + )-crisantemico (_

Cristalizacion

CO2H

Br

Deltametrin

Br O

O H CN

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RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1.2. RESOLUCIN RECPROCA La idea de que los dos enantiomeros de un agente de resolucin pueden servir para la resolucin de un racmico fue propuesta por vez primera en 1896 por Marckwald. Por ejemplo, si un cido racmico se resuelve con una amina, la amina racmica frecuentemente se resuelve con el cido (resolucin recproca).

Racmico (+)/(-)

Compuesto ms insoluble

+
Racmico (+)/(-)

+
Siembra Compuesto ms soluble (lquidos madre)

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RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1.2. RESOLUCIN RECPROCA
H OH (dl)-AB NH2 + H (dl)-M CO2H OH (dl)-AB + (dl)-M LIQUIDOS MADRE 1. Formacin de la sal 2. Siembra con (d)-AB-(d)-M 3. Cristalizacin CO2 OH Precipita (d)-AB-(d)-M OH NH + 3

Siembra con (l)-AB-(l)-M

H CO2 OH

OH NH + 3

LIQUIDOS MADRE

Precipita (l)-AB-(l)-M

etc....

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RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.1.3. EPIMERIZACIN INDUCIDA
En aquellos casos frecuentes- en los que slo interesa uno de los dos enantiomeros para conseguir un rendimiento superior al 50% se puede recurrir a la epimerizacin espontnea o inducida del diastereisomero que queda en disolucin. El proceso global se denomina cristalizacin-transformacin asimtrica inducida o interconversin de diastereosmeros.
Me N Me N N O
SO3H O

H
+

SO3 O

Precipita la sal de la amina S

NH3

H NH2

Me N (+) Amina R N

pKa=20

Me Ar-CHO N N

pKa=10

H NH2

H N

Ar

R
Resolucin Resolucin Rendimiento:92% Rendimiento:92%

DISOLUCIN

Me N N

H NH2

-Ar-CHO

Me N N

H N

Ar

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RESOLUCION
1.RESOLUCION VIA FORMACION DE DIASTEREOISOMEROS 1.2. RESOLUCIN CROMATOGRFICA
El desarrollo de la cromatografa en columna y las tcnicas analticas instrumentales de separacin (p.e. HPLC) permiti llevar a cabo la separacin de diastereoisomeros en aquellos casos en que estos no eran slidos o sindolo no eran fcilmente separables por cristalizacin. Inicialmente se utilizaron fases estacionarias aquirales pero el desarrollo de fases quirales para la resolucin directa de racematos tambin ha propiciado el empleo de este tipo de fases para la separacin de mezclas diastereomricas.
RR SR

EN COLUMNA

Separacion via formacion de diastereoisomeros

CROMATOGRAFIA

ANALITICA

Separacion via formacion de diastereoisomeros

INSTRUMENTAL
Separacion directa

PREPARATIVA

FEQ*
R S

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RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA 2.1. RESOLUCIN CROMATOGRFICA
RR SR

EN COLUMNA

Separacion via formacion de diastereoisomeros

CROMATOGRAFIA

ANALITICA

Separacion via formacion de diastereoisomeros

INSTRUMENTAL

CG, HPLC, MPLC

PREPARATIVA Separacion directa

FEQ*
R S

SEPARACION DIRECTA: Enlaces por puente de hidrogeno Atracciones dipolares Atracciones y repulsiones hidrofobicas Atracciones y repulsiones estericas Complejos de transferencia de carga

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RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA 2.1. RESOLUCIN CROMATOGRFICA
COOPERATIVA: conjunto de subunidades actuando de forma tal que consigan el "reconocimiento quiral " FASES ESTACIONARIAS QUIRALES
COOPERATIVAS

INDEPENDIENTE : molecula capaz de conseguir por si misma el " reconicimiento quiral"

monomero de polimerizacion compuesto enantiomericamente puro POLIMERIZACION

INDEPENDIENTES

DESPOLIMERIZACION SELECTIVA

c
A A B C C A

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RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA 2.2. CRISTALIZACION

Racmicos 85-90% Racematos

(+)

Estructura cristalina

(-)

(-) (-)
Estructura cristalina

Conglomerados 10-15%

En un conglomerado la mezcla 1:1 se comporta como un eutctico porque cada enantiomero baja el punto de fusin del otro. Los conglomerados pueden resolverse por cristalizacin directa.

2.RESOLUCION DIRECTA 2.2. CRISTALIZACION

RESOLUCION

Diagrama del punto de fusin de racematos

T T

R/S

R/S

R
Conglomerado

R
Racmico

(+)
21 22

(-)

(+)

(+)

2.RESOLUCION DIRECTA 2.2.1. CRISTALIZACION SIMULTANEA

RESOLUCION

Siembra con D

Siembra con L

D+L

t2 t1>t2

t2 P
Cristalizacin CN directa NHAc Me MeO HO CN NHAc Me HO HO

t1

CO2H

MeO HO

NHAc Me

Metil-L-dopa (Merck)

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RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA 2.2.1. CRISTALIZACION PREFERENTE

O2N

Se aaden 5 Kg de D
NH2 OH OH

Se Seobtiene obtiene10 10Kg Kgde de cristales cristalesde deD D Se Seobtiene obtiene10 10Kg Kgde de cristales cristalesde deLL

CONGLOMERADO 31.5 Kg D/L 141 mL HCl 300 mL agua

En Ensolucin solucin 10.75 10.75Kg KgD D 15.75 15.75Kg KgLL

Se aaden 10 Kg de D/L

En Ensolucin solucin 15.75 15.75Kg KgD D 10.75 10.75Kg KgLL

Se aaden 10 Kg de D/L

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RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA 2.2.1. CRISTALIZACION PREFERENTE
Diagrama de fase para la cristalizacion preferente de D/L-Lisina p-aminobenceno sulfonato

Isomero D SOBRESATURACION R Q

S
P

40

Solubilidad T

20

T
UNSATURACION

Isomero L

20

40

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RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA 2.2.2. CRISTALIZACION-TRANSFORMACIN ASIMETRICA INDUCIDA (DESRACEMIZACIN)
Esta tcnica se emplea cuando slo se requiere uno de los dos enantiomeros del conglomerado recurriendo a la racemizacin in situ del enantiomero que queda en exceso en disolucin. En algunos casos la racemizacin es espontnea y en otros inducida.
H N Br O F (R) N O RACEMIZACION Br O F N H N O
Cl Cl H

H O

O CN

Cristalizacin Preferente

(S)
Cl H Cl

Cristalizacin Preferente

O CN

O H

> >90% 90%ENANTIOMERO ENANTIOMEROPURO PURO

(Epimerizacin catalizada por FK)

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RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA 2.2.3. PURIFICACION DE ENANTIOMEROS PARCIALMENTE RESUELTOS

QA QB
K K

QR QA

QR

E M R

R
Conglomerado

Racmico

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RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA 2.2.3. PURIFICACION DE ENANTIOMEROS PARCIALMENTE RESUELTOS

E G G F E F

RM
Eutctico E=0.6) Eutctico(X (X E=0.6) Rendimiento RendimientoEF/EG EF/EG==75% 75%

RM
Eutctico E=0.85) Eutctico(X (X E=0.85)

Eutctico E=0.5) Eutctico(X (X E=0.5) Rendimiento RendimientoEF/EG EF/EG==80% 80%

Rendimiento RendimientoEF/EG EF/EG==30% 30%

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RESOLUCION
2.RESOLUCION DIRECTA 2.2.3. PURIFICACION DE ENANTIOMEROS PARCIALMENTE RESUELTOS

O H

Me CO2H

(R)-Fenoxipropionico obtenido con un 75-80% ee

R
R-NH2

100% 100%ee ee

Recristalizacin

O H

Me CO2

+ H3N-R

S
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2.RESOLUCION DIRECTA 3. RESOLUCION CINETICA

RESOLUCION

Resolucin cintica es un proceso en el cual uno de los enantiomeros de una mezcla racmica es transformado en un nuevo compuesto de forma ms rpida que el otro enantiomero. El producto resultante puede ser otro compuesto quiral o una entidad aquiral (desde un punto de vista formal esto es irrelevante). Hasta la introduccin de la catlisis quiral la resolucin cintica era del dominio de enzimas y microorganismo (biocatlisis).

kR kS
Resolucin Resolucin cintica cintica kk S= R =kk
S R

Racmico (+)/(-)

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RESOLUCION 1.RESOLUCION DIRECTA 3. Resolucin cintica

Enantioselective Synthesis of Cyclopentenones via Rhodium-Catalyzed Kinetic Resolution and Desymmetrization of 4-Alkynals Ken Tanaka and Gregory C. Fu J. Am. Chem. Soc.; 2002; 124(35) pp 10296 10297

Kinetic Resolution of Allylic Alcohols Using a Chiral Phosphine Catalyst Edwin Vedejs and James A. MacKay Org. Lett.; 2001; 3(4) pp 535 - 536;

Novel Catalytic Kinetic Resolution of Racemic Epoxides to Allylic Alcohols Arnaud Gayet, Sophie Bertilsson, and Pher G. Andersson Org. Lett.; 2002; 4(22) pp 3777 - 3779; (1) Li-salt of (1S,3R,4R)-3-(pyrrolidinyl) methyl-2-azabicyclo [2.2.1] heptane 1

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RESOLUCION 1.RESOLUCION DIRECTA 3. Resolucin cintica

Parallel Kinetic Resolution of 4-Alkynals Catalyzed by Rh(I)/Tol-BINAP: Synthesis of Enantioenriched Cyclobutanones and Cyclopentenones Ken Tanaka and Gregory C. Fu J. Am. Chem. Soc.; 2003; 125(27) pp 8078 - 8079;

Dynamic Kinetic Resolution via Asymmetric Conjugate Reduction: Enantio- and Diastereoselective Synthesis of 2,4-Dialkyl Cyclopentanones Valdas Jurkauskas and Stephen L. Buchwald J. Am. Chem. Soc.; 2002; 124(12) pp 2892 - 2893

Effective Nonenzymatic Kinetic Resolution of ()-trans-2-Arylcyclohexanols Using 3 Acetoxyetienic Acid, DCC, and DMAP Masato Matsugi, Yuri Hagimoto, Masatomo Nojima, and Yasuyuki Kita Org. Process Res. Dev.; 2003; 7(4) pp 583 - 584;

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RESOLUCION 1.RESOLUCION DIRECTA 3. Resolucin cintica

Highly Enantioselective Dynamic Kinetic Resolution of 1,2-Diarylethanols by a Lipase-Ruthenium Couple Mahn-Joo Kim,* Yoon Kyung Choi, Sol Kim, Daeho Kim, Kiwon Han, Soo-Byung Ko, and Jaiwook Park*

A practical procedure has been developed for the dynamic kinetic resolution of 1,2-diarylethanols. This procedure employs a highly enantioselective lipase from Pseudomonas stutzeri (trade name, lipase TL) as the resolution catalyst and a ruthenium complex as the racemization catalyst. Sixteen 1,2-diarylethanols have been efficiently resolved to provide their acetyl derivatives with good yields (95-97%) and high enantiomeric excesses (96-99%).

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RESOLUCION 1.RESOLUCION DIRECTA 3. Resolucin cintica

Homobenzotetramisole: An Effective Catalyst for Kinetic Resolution of Aryl-Cycloalkanols Vladimir B. Birman* and Ximin Li

Homobenzotetramisole (HBTM), a ring-expanded analogue of the previously reported catalyst BTM, displays higher catalytic activity and a different structure-selectivity profile. It displays good enantioselectivities in kinetic resolution of secondary benzylic alcohols but is particularly effective for 2-aryl-substituted cycloalkanols

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