Martnez Meja Gabriela 6FM1 EQUIPO 3 PRACTICA 4.

Determinacin de acetaminofn en tabletas por HPLC

OBJETIVOS. o Llevar a cabo la identificacin del principio activo. Paracetamol en una forma farmacutica

comercial slida, mediante el tiempo de retencin obtenido en HPLC. o Determinar la concentracin del principio activo presente en la forma farmacutica

proporcionada, para lo cual se utilizara las reas bajo la curva obtenidas con la sustancia de referencia y muestra. RESULTADOS Y ANALISIS DE RESULTADOS replica tR rea bajo la curva Estndar a) b) c) Muestra 1 a) b) Muestra 2 a) b) 3.227 3.227 3.233 3.233 3.233 3.240 3.233 1597976 1598490 1599042 1676733 1686639 1660476 1699248 X=1681686 DER.= 0.416 X= 1679862 DER.=1.632 X=1598502.667 DER.= 0.033

Se pesaron 10 tabletas con peso promedio de 590.27 mg por cada una. Entonces si las tabletas son de Paracetamol 500 mg: 590.27 mg de tableta ---------500 mg de Paracetamol Si se pesan para las muestras: M1= 29.9 mg de tableta Entonces: 590.27 mg de tableta ---------500 mg de Paracetamol 29.9 mg de tableta -----------M1 g de paracetamol M1= 25.3272 mg de Paracetamol 590.27 mg de tableta --------500 mg de Paracetamol 29.8 mg de tableta ----------M2 g de paracetamol M2= 25.2426 mg de Paracetamol M2= 29.8 mg de tableta

Pero se tena 99.8% de pureza del paracetamol: 1 mg de paracetamol comercial ----------0.998 mg Paracetamol puro 25.3272 mg Paracetamol comercial----------M1 mg Paracetamol puro M1= 25.2766 mg de Paracetamol puro 1 mg de paracetamol comercial---------- 0.998 mg Paracetamol puro 25.2426 mg Paracetamol comercial ----------M2 mg Paracetamol puro M1= 25.1921 mg de Paracetamol puro Una vez que se sabe exactamente cunto se pes de paracetamol se prepararon las soluciones: M1 25.2766 mg --------50 ml FM ----------1ml ---------50 ml ---------- 0.01011 mg/ml M2 25.1921 mg ---------50 ml FM ---------1ml ---------50 ml----------- 0.01007 mg/ml

Para el estndar St 10.3 mg --------10 ml FM------- 1ml --------10 ml FM ---------5 ml ------50 ml---------- 0.0103 mg/ml Para la M1 ABC [ ] terica ABC Para la M2 [ ] terica

St 1630573.667--------0.01011 mg/ml M1 1685170.5------------ X1 X1= 0.0104 mg/ml

St 1630573.667 -------------0.01007 mg/ml M2 1679427.5 ------------------X2 X2 = 0.0103 mg/ml

Concentracin real de Paracetamol: 0.01035 mg/ml 0.01011 mg/ml-------100% 0.0104 mg/ml--------- X% M1= 102.86 % 0.01007 mg/ml---------100% 0.0103 mg/ml-----------X% M2= 102.28 %

% de Paracetamol en la muestra: 102.57 % A partir de estos resultados puede decirse que las tabletas contenan un poco ms de 500 mg. Entonces puede decirse que este mtodo cuenta con una buena eficiencia y resolucin adems de que es aplicable a frmacos no voltiles o termosensibles sin que se descompongan, es de fcil manejo ya que puede programarse y pueden analizarse varias muestras y tener un estndar. Puede observarse en el cromatograma que se obtuvo un pico alto y estrecho, y en las diferentes muestras TR cercanos entre s, con una variacin mnima. La eficacia de este mtodo pudo haberse dado por diversos factores, entre ellos que se utiliz un reservorio de FM que fue previamente filtrada atravez de una membrana de nylon con tamaos de poro de .45 micrmetros y sometida a un

ultrasonido que adems solubilizo al analito, bombas que suministraron y dosificaron la fase mvil, el inyector introdujo las muestras sin interrumpir el caudal de la FM, se utiliz una columna de 15 cm con C18 lo cual nos dio mayor superficie de FE y esta poda interactuar mas con el analito que fu el acetaminofn. La separacin efectuada por HPLC fue de fase reversa ya que se utiliz una C18 como FE y como FM polar agua metanol.

CONCLUSIONES El mtodo de HPLC nos permite determinar concentraciones de diversos frmacos con resultados reproducibles, con buena resolucin. El xito para para una buena separacin de HPLC depende de la preparacin de la muestra, tipo de columna, FM, longitud y dimetro de la columna, velocidad de flujo de la FM, tipo de deteccin entre otros factores. En esta tcnica se lleva a cabo una migracin diferencial, un equilibrio entre la distribucin en la FE y la FM. A partir del cromatograma puede identificarse al analito. La separacin puede llevarse a temperatura ambiente. CUESTIONARIO 1. Define los siguientes trminos.

Volumen de elucin (Ve). Se define como el volumen de lquido necesario para extraer una determinada sustancia. Presenta el inconveniente de depender fuertemente del volumen total de la columna. Volumen de columna: Volumen total de gel que se empaqueta en una columna cromatogrfica. Tiempo muerto: tiempo que transcurre desde la aplicacin de la muestra al inicio del primer pico de un compuesto no retenido. Tiempo de retencin: el tiempo que transcurre desde el momento de aplicacin de muestra, hasta que aparece el mximo de un pico de un compuesto retenido. Tiempo de retencin relativo: es la diferencia del tiempo relativo menos el tiempo muerto. Lnea base: Volumen total de gel que se empaqueta en una columna cromatografica.

Resolucin: medida cuantitativa de la capacidad de una columna para separar dos analitos. Eficiencia: seccin terico-transversal en la cual se realiza el equilibrio de particin durante el flujo de fase mvil. Cuanto mayor sea el nmero de platos terico (N) mayor ser la eficiencia de la columna. 2. Proporcione ejemplos de 3 frmacos que puedan determinarse por HPLC.

Ranitidina, omeprazol, warfarina, procainamida, propanolol, trimetroprim, sulfametoxazol 3. Qu sensibilidad de deteccin puede alcanzar este mtodo?

De 3 microgramos 4. Qu contaminante puede encontrarse presente en paracetamol (acetaminofn) materia

prima como producto de degradacin? Pueden encontrase trazas de p-aminofenol as como polmeros de los excipientes utilizados para comprimir la tableta 5. Porque se requieren disolventes de alta pureza grado HPLC, en cromatografa de lquidos de

alta resolucin? Para que no haya contaminaciones y obtengamos resultados errneos, adems debe de cuidarse que no reaccione con el empaque de la columna ya que la composicin de la fase mvil influencia significativamente la eficiencia cromatografica y la resolucin de los componentes de una mezcla que est siendo separada. 6. Qu se entiende por un sistema isocrtico y uno en gradiente?

En un sistema isocrtico el eluyente no vara y se mantiene a concentraciones constantes, en un sistema en gradiente hay variacin en el eluyente as como en sus proporciones y se disminuyen tiempos de anlisis.

REFERENCIAS Vilasoa. M. Desarrollo de mtodos analticos para la valoracin nutricional del cangrejo de las nieves, Chionoecetes Opilio. Universidad Santiago de Compostela 43-46

Harold F.W. Analisis Quimico e Instrumental Moderno Editorial Reverte 1983 Pag. 323 - 344