XVIII Verano de la Investigacin Cientfica y Tecnolgica del Pacfico Nuevo Vallarta, Nayarit Agosto 2013

EFECTO DEL ATP SOBRE LA CAPACIDAD MIGRATORIA Y PROLIFERATIVA EN LA LINEA CELULAR MDA-MB231 DE CANCER DE MAMA
Anglica Martnez Lpez. Instituto de Fisiologa. Benemrita Universidad Autnoma de Puebla. angelicamarlo22@gmail.com. Asesor Dr. Eduardo Monjaraz Guzmn. Instituto de Fisiologa. Laboratorio de Neuroendocrinologa, Puebla. emguzman360@hotmail.com.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Las purinas como el ATP (adenosina- 5`-trifosfato) y la adenosina (ADO) se pens por mucho tiempo que se restringan al compartimiento intracelular, participando principalmente en el balance energtico y en la sntesis de cidos nucleicos. Sin embargo, existen mltiples evidencias de que participan en diversos procesos patolgicos celulares, como es el caso del desarrollo y progresin del cncer. La adenosina ha demostrado ser un potente inmunosupresor y un modulador del crecimiento celular que acta al unirse a cuatro diferentes receptores (A1,A2A, A2B y A3) Mientras que el ATP por su parte, es considerado una molcula proinflamatoria, inmunosupresora, y un agente promotor del crecimiento, la cual ejerce sus funciones al unirse a dos grandes grupos de receptores, tipo metabotrpico (P2Y) y tipo ionotrpico (P2X). Hasta el momento se desconoce la participacin de estos dos grupos de receptores en la progresin y metstasis del cncer de mama, por lo que el objetivo principal del presente proyecto es iniciar dicho estudio. METODOLOGA Se realizaron ensayos de proliferacin en la lnea celular MDA-MB231 de cncer de mama, evaluando la incorporacin de 3H-Timidina. Las clulas fueron tratadas a diferentes concentraciones de ATP (0.5, 1, 2, y 5 mM) durante 72 horas. Al final del tratamiento, las clulas fueron fijadas con cido tricloroactico por 30 minutos, lavadas con etanol absoluto y posteriormente solubilizadas con una solucin de SDS al 10% en NaOH 0.1M. Al lisado celular se agreg lquido de centelleo para posteriormente cuantificar la 3H-Timidna que fue incorporada en las clulas. Dicha incorporacin es una medida indirecta de la capacidad proliferativa de las clulas. Las cuentas por minuto obtenidas fueron analizadas, normalizadas y graficadas con el programa SigmaPlot 11.0. De manera paralela, se realiz ensayos de RTPCR de las clulas MDA-MB 231 con el fin de evaluar los niveles de expresin del ARNm que codifica para los diferentes receptores purinrgicos (P2X y P2Y). CONCLUSIONES En base a los resultados obtenidos, el ATP ejerce un efecto estimulador sobre la capacidad proliferativa en la lnea tumoral MDA-MB 231, proveniente de cncer de mama, y se espera obtener resultados similares en el caso de metstasis celular.