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TEMA 4.

ANLISIS DE ORINA Y SANGRE

TEMA 4. ANLISIS DE ORINA Y SANGRE

TEMA 4. ANALISIS DE ORINA Y SANGRE

ANALISIS DE ORINA
Formacin de la orina:

RIN

NEFRONA

TEMA 4. ANLISIS DE ORINA Y SANGRE

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ANALISIS DE ORINA
1. Inters del anlisis de orina 2. Recogida de la orina 3. Caractersticas y parmetros medibles en la orina: color, olor turbidez

ANALISIS DE ORINA
4. pH

5. Relacin volumen/tiempo

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ANALISIS DE ORINA
6. Densidad a. Urinmetro o densmetro

ANALISIS DE ORINA
6. Densidad b. Refractometra de lquidos

Haz incidente

probeta
Lquido Vidrio

Haz incidente de energa radiante monocromtica Vaco i.r.=N1 Material pticamente Transparente con i.r. = N2

Interfase lquido-vidrio

Muestra de orina

Lquido

2 N2 = sen 1 = v1 N1 sen 2 v2
Haz refractado

Interfase

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ANALISIS DE ORINA
Refractometra de lquidos. Refractmetro de ngulo crtico

ANALISIS DE ORINA
Medidor de slidos totales

N2 = sen 1 N1 sen 2 1.66 = 1 N1 sen c N1= 1.66 sen c

1= 90 2= c

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ANALISIS DE ORINA
Pruebas con tiras reactivas

ANALISIS DE ORINA
Pruebas con tiras reactivas. Fotometra de reflectancia

Reflectancia difusa Dr = - log R - Rnegro Rblanco

Reflectmetro

Nitritos

Bilirrubina

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Sensibilidad, especificidad y eficiencia en el desarrollo de una prueba


SENSIBILIDAD: Probabilidad de que el resultado de una prueba sea positivo cuando est presente la enfermedad que la prueba detecta Sensibilidad = PV x 100 PV + NF

ANALISIS MICROSCPICO DE LA ORINA


1. CRISTALES. Precipitan compuestos inorgnicos como carbonatos y fosfatos, tambin uratos y cristales de cistina.

ESPECIFICIDAD: Probabilidad de que el resultado de una prueba sea negativo cuando no est presente la enfermedad que la prueba detecta Especificidad= NV x 100 NV + PF

2. ORGANISMOS. Su presencia representa anomalas en la orina. BACTERIAS: infeccin del tracto urinario. Presencia de nitritos y leucocitos. HONGOS: Diabetes, ingestin de anticonceptivos, tratamiento con antibiticos.

EFICIENCIA: Prueba estadstica que determina el valor diagnstico de una prueba, relacionando el n total de resultados correctos con el n total de participantes Eficiencia = PV + NV x 100 PV + PF +NF + NV
PV es el n de resultados positivos verdaderos NF es el n de resultados negativos falsos. NV es el n de resultados negativos verdaderos PF es el n de resultados positivos falsos.

PARASITOS: contaminacin vaginal o fecal. CELULAS INFECTADAS POR VIRUS: cambios celulares.

ANALISIS MICROSCPICO DE LA ORINA


3. CELULAS.

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ANALISIS MICROSCPICO DE LA ORINA

TEMA 4. ANLISIS DE ORINA Y SANGRE

HEMATIES: lesin vascular, trastornos renales o del tracto urinario inferior. LEUCOCITOS: condiciones inflamatorias o del tracto urinario. CELULAS DEL EPITELIO TUBULAR RENAL: clulas viejas o enfermas o de los tbulos del nefrn. CUERPOS GRASOS OVALES: sndrome nefrtico y diabetes mellitus. CELULAS DEL EPITELIO DE TRANSICIN: inflamacin, cateterizacin o proceso patolgico maligno. CELULAS EPITELIALES ESCAMOSAS: contaminacin vaginal o metaplasia escamosa de la vejiga. FRAGMENTOS TISULARES: necrosis papilar renal o tumores de la vejiga. ESPERMATOZOIDES: eyaculacin coito. No se informa. CILINDROS RENALES: pueden ser fisiolgicos o patolgicos (enfermedad renal).

El sedimento urinario ser clasificado de anormal cuando tenga uno de los siguientes caracteres: 1. Ms de 5 hemates por campo de elevado aumento (x400). 2. Ms de 2 clulas tubulares renales por campo de elevado aumento (x400). 3. Ms de 3 cilindros hialinos, ms de 1 cilindro granuloso, o la presencia de cualquier cilindro patolgico por campo de escaso aumento (x100). 4. Ms de una bacteria por campo de elevado aumento (x400). 5. Presencia de hongos, parsitos o clulas con inclusiones virales. 6. Presencia de cristales patolgicos (como los de cistina) de gran n de cristales no patolgicos (ac.rico).

EXAMEN MICROSCPICO DE LA ORINA

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ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN ORINA


1. NITRITOS (NO2-) Mtodo indirecto para la deteccin de bacterias en orina. Gneros como Escherichia, Klebsiella, Proteus y Pseudomas contienen enzimas que reducen el nitrato urinario a nitrito a. Prueba con tira reactiva b. Confirmacin por microscopia de la presencia de bacterias

Se recomienda un examen microscpico de la orina donde se observe hematuria, proteinuria o una prueba positiva de nitritos. Reconocimiento temprano de condiciones infecciosas, inflamatorias y neoplsicas que afectan al sistema urinario.

A. Microcopia de campo claro sin coloracin B. Microscopia de campo claro con coloracin supravital 2. LEUCOCITOS

a. Prueba con tira reactiva b. Confirmacin por microscopia

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ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN ORINA


3. PROTENAS (Existencia de enfermedad renal) Valor normal 0.1 g/da excretados Proteinuria: baja < 0.5 g/ da moderada 0.5- 4 g/ da alta > 4 g/ da a. Prueba con tira reactiva

ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN ORINA


4. BILIRRUBINA Y UROBILINGENO (Existencia de enfermedad heptica) Valores normales en orina: Bilirrubina directa 0.02 mg / 100 mL urobilingeno 0.5 3 mg /24 horas Valores normales en sangre: Bilirrubina total 15 mg / L

b. Prueba del cido sulfosaliclico a. Determinacin de urobilingeno por tira reactiva c. Prueba de la protena de Bence-Jones (asociada a la presencia de mielomas) b. Determinacin de bilirrubina: - Mtodos qumicos - HPLC

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ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN ORINA


5. GLUCOSA (Existencia de diabetes) Glicosuria o glucosuria: presencia de cantidades detectables de glucosa en orina. Puede deberse a: - Condicin benigna: despus de una comida fuerte o estrs emocional - Estado patolgico: diabetes mellitus. Supone un aumento en sangre. Valores normales en sangre: 600 1100 mg/ L a. Mtodos de reduccin b. Mtodos enzimticos c. Sensores qumicos

ESQUEMA GENERAL DE UN SENSOR QUMICO

MUESTRA

SENSOR

RESPUESTA

SEAL

RECEPTOR

TRANSDUCTOR

REGIN DONDE TIENE LUGAR LA REACCIN QUMICA SELECTIVA

CONVIERTE LA MAGNITUD DE LA SEAL EN UNA MEDIDA DE LA CANTIDAD DE ANALITO

SEAL PRIMARIA ELECTROQUMICA PTICA TRMICA MSICA

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SENSOR DE GLUCOSA Membrana sensora:


Superficie electrodo (transductor) H2O2 H2O2

ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN ORINA


6. CUERPOS CETNICOS (Problema metabolismo hidratos de carbono) Cetonuria: presencia de cuerpos cetnicos en orina. Puede deberse a: ayuno prolongado, presencia de diabetes, aumento en la utilizacin de grasas lo que da lugar a una combustin incompleta de ac. grasos. Aparecen cido - hidroxibutrico (78%), cido acetoactico (20%) y acetona (2%) Valores normales en sangre: cuerpos cetnicos 1.7 4-2 mg / 100 mL ac. Acetoactico < 2 mg / 100 mL a. Mtodos qumicos

Acetato de celulosa GLUCOSA OXIDASA policarbonato

disolucin
Capa de biorreconocimiento: Glucosa oxidasa Transductor

Glucosa + O2

Glucosa oxidasa

cido glucnico + H2O2

b. Mtodos enzimticos c. Cromatografa de gases

H2O2 +

2OH-

O2 + 2H2O +

2e30

i Cglucosa

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ANALISIS DE SANGRE

ANALISIS DE SANGRE
HEMATOGRAMA COMPLETO: HEMATOCRITO: Proporcin del volumen total de glbulos rojos eritrocitos respecto al volumen sanguneo. Suele ser del 40-45%. El 55-60% restante lo forma el plasma ya que la contribucin de glbulos blancos y plaquetas es mnima. Para determinarlo se centrifuga sangre entera, estabilizada con anticoagulante, en un tubo de dimetro uniforme. La altura del paquete de clulas en el tubo se divide por la altura de la sangre total. El valor resultante, mayor que cero y menor que uno se denomina hematcrito. ERITROCITOS: Tienen una alta concentracin de hemoglobina. Transportan O2 desde los pulmones a los tejidos corporales. La concentracin de hemoglobina se determina lisando los eritrocitos de un volumen de sangre conocido. La solucin roja homogenea resultante se mide por espectroscopa visible, expresando el resultado en g/l. LEUCOCITOS: Existen leucocitos de diferentes tipos: linfocitos, monocitos, neutrfilos, eosinfilos y basfilos. Controlan infecciones. PLAQUETAS: Mantiene la hemostasia. Forman un tapn y cierran la herida para prevenir una excesiva hemorragia.

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ANALISIS DE SANGRE
HEMATOGRAMA COMPLETO: RBC: Recuento de glbulos rojos. WBC: Recuento de glbulos blancos. VCM: Volumen corpuscular medio. Expresado en femtolitros. VCM = Hematocrito n eritrocitos/l HCM: Hemoglobina corpuscular media. Expresado en picogramos por clula. HCM = Hemoglobina en g/l n eritrocitos/l CHCM: Concentracin de hemoglobina corpuscular media. CHCM = Hemoglobina en g/l Hematocrito CBC: Recuento completo de sangre: incluye el n de leucocitos, hematcrito, hemoglobina, medida diferencial de leucocitos, VCM, HCM y n de plaquetas (a veces).

ANALISIS DE SANGRE
Medidores pticos del tiempo de coagulacin

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ANALISIS DE SANGRE
Medidores conductimtricos del tiempo de coagulacin

ANALISIS DE SANGRE
Perfiles del tiempo de coagulacin

Tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPA) normal de 30 segundos

Tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPA) en un plasma deficiente en facto IX: el Tiempo de coagulacin es de 102 s

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ANALISIS DE SANGRE
Contadores de clulas basados en medidas de la resistencia elctrica

ANALISIS DE SANGRE
Contadores de clulas basados en medidas pticas

Recuento en millares

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ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN SANGRE


1. CIDO RICO (Evaluacin de la funcin renal) Compuesto nitrogenado no proteico. Resultante del metabolismo de las nucloeprotenas. La insuficiencia renal crnica avanzada produce un incrementeo progresivo del nivel de cido rico en el plasma. Gota: depsito de uratos en los tejidos Valores normales en sangre: varones 36 77 mg / L mujeres 25 - 68 mg / L a. Mtodos espectrofotomtricos

ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN SANGRE


2. COLESTEROL (Evaluacin de la existencia de hiperlipidemia y de riesgo de enfermedades cardiovasculares) Se encuentra presente en todas las lipoprotenas plasmtica. Cuando un exceso de lpidos no se elimina o utiliza, se deposita en tejidos y paredes arteriales, obstruyendo el flujo de sangre a rganos vitales. Se obstruye la circulacin dando lugar, por ejemplo, al infarto de miocardio Valores normales en sangre: colesterol 1.20 2.20 g / L colesterol HDL hombres 0.40 1.10 g / L mujeres 0.50 1.20 g / L a. Mtodos en 1, 2, 3 4 etapas para determinar colesterol

b. Mtodos enzimticos b. Determinacin del colesterol unido a las HDL c. Mtodo polarogrfico d. HPLC

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ALGUNAS SUSTANCIAS ANALIZADAS EN SANGRE


3. ENZIMAS (Evaluacin de la funcin heptica) - Alanina aminotransferasa (ALT) - Fosfatasa alcalina (ALP) - Aspartato aminotransferasa (AST) - Gamma glutamiltransferasa (GGT) Determinacin de ALT Valores normales en sangre: 0 55 U / L

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