Aniele Thomaz Silva Francisca Rayane Nascimento de Aguiar Jssica Dias Ferreira Silveira Josivaldo Arajo Silva Marcelle

Celestino Duarte

Vrus da Raiva
Biomedicina Turma: 4AN Disciplina: Virologia Professora: Vanessa Moreira Assunto: ATPS Atividades Prticas Supervisionadas Tema: Vrus da Raiva Alunos: Aniele Thomaz Silva RA: 3226023588 Francisca Rayane Nascimento RA: 3233543333 Jssica Dias Ferreira Silveira RA: 3219519204 Josivaldo Arajo Silva RA: 3240558529 Marcelle Celestino Duarte RA: 3205497256

Faculdade Anhanguera de Braslia Braslia DF, 2013

Sumrio

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11.

Principais Caractersticas das Infeces.............................................................................. 3 Etiologia do Vrus ................................................................................................................ 3 Estrutura e Morfologia Bsica do Vrus .............................................................................. 4 Material Gentico ............................................................................................................... 5 Mecanismos de Replicao................................................................................................. 6 Viabilidade do Vrus no Meio Ambiente ............................................................................. 7 Patogenicidade no Ser Humano ......................................................................................... 7 Principais Sinais Clnicos ..................................................................................................... 8 Diagnstico ......................................................................................................................... 9 Preveno e Controle ....................................................................................................... 10 Referncia Bibliogrfica .................................................................................................... 10

1. Principais Caractersticas das Infeces

Dentre o vrus da raiva temos suas distines, vrus de rua refere-se s cepas selvagens que tenham sofrido modificaes caracterizada por apresentar perodo de incubao varivel podendo ser prolongada com capacidade de invadir glndulas salivares. Vrus fixos faz referncia s cepas adaptativas e animais de laboratrio por passagens seriadas no crebro dos mesmos. As cepas so caracterizadas por seus perodos de incubao variveis, prolongados e por uma grande capacidade de invadir as glndulas salivares. (SANTOS et. al., 2008) Temos dois tipos de infeces no hospedeiro, natural em quase todos os mamferos, e experimental em animais de laboratrio. O vrus pode ser propagado em embries de galinha e de camundongos, so utilizados para isolamento de cepas selvagens cultura de hamsters, porcos e etc. Particularmente a BHK-21, (clula de rim de hamsters recm-nascido), so utilizados para propagao viral. Geralmente os vrus no causam destruio celular. Nenhuma resposta humoral ou celular pode ser detectada durante a fase de deslocamento do vrus, desde o stio de entrada at o SNC (sistema nervoso central). (XAVIER, 2005) Aps a infeco disseminada acontece a deteco de anticorpos e os sinais clnicos da doena so estabelecidos. Os anticorpos induzidos pela vacinao desempenham um papel importante de defesa que neutraliza as partculas virais antes da interao com os receptores celulares, dessa forma o vrus fica limitado de ir at o SNC. Pois com a vacinao ocorre uma barreira para o vrus chegar ao sistema nervoso central. (XAVIER, 2005)

2. Etiologia do Vrus
A posio taxonmica na ordem Mononegavirales, na famlia Rhabdoviridae, existe trs gneros de vrus com importncia animal, o Visiculovirus, o Ephemorovirus e o Lyssavirus, este responsvel pela raiva (DUARTE & DRAGO, 2005). Anteriormente pensava-se que somente um vrus causava a raiva, mas aps o desenvolvimento de mtodos de estudos sorolgicos, antignicos e genticos foi possvel identificar a existncia de sete gentipos diferentes. (XAVIER, 2005)

3. Estrutura e Morfologia Bsica do Vrus

O vrus da raiva composto por um envelope viral, pelas protenas: N, L, NS e G, detalhadas adiante, e uma molcula de RNA. Sua estrutura tem forma cilndrica, com uma das extremidades arredondada e a outra plana, semelhante a um projtil de revlver. Apresentando em mdia 75nm de dimetro e 180nm de comprimento. (SANTOS et. al., 2008) (Fig. 1)

(Figura 1: Estrutura do Vrus da Raiva. Fonte: SANTOS, N. S. de O.; ROMANOS, M. T. V.; WIGG, M. D. Introduo a Virologia Humana. 2 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008. p. 357-371.)

O envelope viral adquirido da clula hospedeira, portanto formado por uma dupla membrana fosfolipdica, na qual se encontram 400 espculas virais, estas so compostas por trmeros de glicoprotenas G, ou seja, protena G, que variam de 5 a 10nm de comprimento por 3nm de dimetro. (SANTOS et. al., 2008) Os antigenes especficos so determinantes pela protena G que so responsveis por induzir a produo de anticorpos neutralizantes (DUARTE & DRAGO, 2005). Determinantes antignicos para linfcitos B e T, j foram identificados nesta. E a maior parte das vacinas antirrbicas sintetizadas baseada nas especificaes da protena G (XAVIER, 2005). Revestido pelo envelope viral incrustado com espculas de protena G, est o complexo ribonucleoprotico RNP o genoma viral (DUARTE & DRAGO, 2005), que apresenta forma simtrica helicoidal formando um cilindro de 35 voltas. (SANTOS et. al., 2008)

4. Material Gentico
A associao entre as protenas: N, NS, L e o RNA que formado por uma fita simples no segmentada, no infecciosa, de polaridade negativa (SANTOS et. al., 2008). A apresentao dos genes do genoma viral na ordem 3 -N-NS-M-G-L-5 (DUARTE & DRAGO, 2005), sendo estes responsveis pela transcrio de cinco RNAs mensageiros que se traduzem em cinco protenas: N, NL, M, G e L. (SANTOS et. al., 2008) (Fig. 2)

(Figura 2: RNA Material Gentico. Fonte: SANTOS, N. S. de O.; ROMANOS, M. T. V.; WIGG, M. D. Introduo a Virologia Humana. 2 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008. p. 357-371.)

A nucleoprotena N o principal componente do complexo ribonucleoprotico RNP, apresenta-se em grande quantidade no vrus e potencialmente imunognica (SANTOS et. al., 2008). Sendo o alvo principal dos linfcitos T-helpes (XAVIER, 2005). Responsvel tambm pela proteo do RNA pela ao de ribonucleases e a configurao correta do genoma para a transcrio. (SANTOS et. al., 2008) A protena no estrutural NS ou P formada por 297 a 303 aminocidos (SANTOS et. al., 2008). altamente fosforilada, mas os stios de fosforilao ainda no foram determinados precisamente (XAVIER, 2005). um dos componentes da polimerase viral, embora no tenha uma funo bem definida. (SANTOS et. al., 2008) A protena de matriz M est localizada entre o envelope viral e o nucleocapsdeo produzindo uma ponte entre a protena G e o complexo RNP (SANTOS et. al., 2008). a menor e mais simples dentre as protenas virais apresentando 202 aminocidos (XAVIER, 2005). Sua funo biolgica parece estar relacionada com a biossntese durante a montagem e o brotamento do vrus. (SANTOS et. al., 2008) A protena L, polimerase viral multifuncional, a maior protena viral constituda por 2127 a 2142 aminocidos, suas funes so transcrio, replicao, capeamento, metilao e a poliadenilao do RNA. (SANTOS et. al., 2008)

5. Mecanismos de Replicao
Inicia-se o processo infeccioso adsorvente sua protena G a um receptor celular, podendo ser diferentes receptores utilizados pelo vrus. Uma vez adsorvido o vrus ao receptor, ele e imediatamente endocitado, simultaneamente ou logo aps esse evento ocorre penetrao do vrus por fuso do envelope viral com a membrana endoctica, sendo esse evento dependente da reduo do PH no compartimento endoctico. Isso ocorre catalisado pela protena G e resulta na liberao do nucleocapsdeo no citoplasma celular. (SANTOS et. al., 2008) Aps ocorrer a entrada e liberao do cido nuclico, o primeiro evento que ocorre a transcrio do RNA viral, havendo transcrio pelo RNA polimerase - RNA dependente viral, em 5(cinco) RNA sm e 1 (uma) fita positiva de RNA (antigenoma) que servir de molde para o genoma de novas partculas, do qual ocorrer a replicao. (SANTOS et. al., 2008) (Fig. 3)

(Figura 3: Replicao. Fonte: SANTOS, N. S. de O.; ROMANOS, M. T. V.; WIGG, M. D. Introduo a Virologia Humana. 2 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008. p. 357-371.)

A transcrio produz uma sequncia de RNA sm que codificam com as protenas N, NS (ou P), M, G e L. A replicao requer a sntese dessas protenas virais, sendo sintetizados em ribossomas livres, comeando a sntese pela protena G, entretanto, a concluso da sntese e a glicosilao dessa protena ocorrem na reticulo
6

endoplasmtico e no Golgi. J as protenas N, P e L so sintetizados com RNA genmico nascente, formando o complexo ribonucleoprotico (RNP). Aps essa sntese de protena existe a replicao, sendo uma fita positiva. (SANTOS et. al., 2008)

6. Viabilidade do Vrus no Meio Ambiente

Em temperatura ambiente ou na geladeira, a infecciosidade do vrus da raiva cai rapidamente, pois assim como a maioria dos vrus envelopados na ausncia da albumina ou de protenas dos tecidos e do soro a sobrevivncia destes se torna invivel. J a partcula viral inativada ao ser submetida a calor, radiao ultravioleta, raios X, fenol, desinfetantes, detergentes, entre outros. Porm, se for conservado em tecidos mantidos em glicerina neutra a inativao mais lenta. (SANTOS et. al., 2008)

7. Patogenicidade no Ser Humano

Pela mordedura de um animal raivoso que dispe de saliva infectada com vrus no interior dos msculos e tecidos, o ser humano poder ser infectado atravs da membrana, mucosa, olhos, boca e pela inalao. (SANTOS et. al., 2008) A infeco de uma clula susceptvel ao vrus da raiva, que quando atingido o sistema nervoso central tem alteraes inflamatrias no crebro e na medula ssea podendo se expandir para diversos rgos e infectar glndulas, causando a liberao de fatores corticais que controlam o comportamento sendo caracterizado como raiva furiosa. Em seguida, espalha-se, atingindo as reas adjacentes, ao atingir o neurocrtex, o quadro clnico alterado para a forma da raiva muda. (SANTOS et. al., 2008) A patognese da raiva sem dvida notvel, o vrus se espalha pelo SNC, e o paciente apresenta os sinais clnicos com o mnimo de resposta imunolgica. Provavelmente ocorre pelo fato de que muito pouco antgeno esteja sendo liberado e apresentado ao sistema imune. Quando a mordida na cabea provavelmente as medidas para o tratamento no sero eficcias e o tratamento no funciona. (XAVIER, 2005) (Fig. 4)

(Figura 4: Ciclo Patognico. Fonte: SANTOS, N. S. de O.; ROMANOS, M. T. V.; WIGG, M. D. Introduo a Virologia Humana. 2 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008. p. 357-371.)

8. Principais Sinais Clnicos

As caractersticas da raiva so semelhantes na maioria das espcies afetadas. Seguida de fazes, sendo elas: um perodo prodrmico, uma faze neurolgica, uma fase neurolgica aguda e o coma seguido de morte. H uma enorme diferena entre os indivduos. O tempo de encubao relativo e ir depender de vrios fatores. (SANTOS et. al., 2008) No homem o estgio de encubao se altera bastante, de 10 dias a vrios e meses ou anos. Esse estgio vai depender do tipo de leso, do inoculo, da gravidade das laceraes e da distncia percorrida pelo vrus at o crebro. (SANTOS et. al., 2008) A enfermidade comea com a fase prodrmica. Ela pode ter durao de 2 a 10 dias com sintomas bem inespecficos, tal qual: mal estar, anorexia, fotofobia, diarreia, cefaleia, nusea, vmito, dores muscular entre outras. (SANTOS et. al., 2008) Aps o estado prodrmico desenvolve-se um quadro neurolgico agudo e progressivo. Durante a fase, os pacientes se apresentam com: excitao, mostrando sinais de disfuno do SN com, desorientao, alucinao, paralisia, aerofobia,

espasmos da faringe entre outros. Andar sem direo, no falar coisas compreensveis, so sintomas comuns da raiva. (SANTOS et. al., 2008) Os que sobrevivem excitao aguda passam para a fase paraltica, sendo as principais caractersticas: apatia, paralisia progressiva, induzindo ao coma e levando a morte, horas depois. (SANTOS et. al., 2008)

9. Diagnstico
O diagnstico de raiva no ser humano est ligado histria clnica do paciente, se for identificado casos de mordeduras de animais, deve-se fazer o possvel para localizar o animal para que no caso de morte quando este estiver em quarentena, a cabea e o pescoo devem ser levados para diagnstico laboratorial. Caso o animal no seja localizado iniciar o tratamento antirrbico. (DUARTE & DRAGO, 2005) As coletas nos seres humanos podem ser da saliva; liquor, bipsia de pele da regio occipital do couro cabeludo, impresses de crnea e sangue. Aps o bito indicado coleta do crebro e do cerebelo. Os mtodos existentes para o diagnstico so: histopatologia, imunofluorescncia direta (IF), isolamento em cultura celular, inoculao intracerebral em camundongos, sorologia e reao em cadeia da polimerase associada a reao de transcrio reversa (RT-PCR). (SANTOS et. al., 2008) Na histopatologia possvel encontrar atravs da colorao de Mann incluses intracitoplasmticas especficas nas clulas nervosas, sendo estas eosinoflicas arredondadas ou ovais, denominadas corpsculos de Negri. (XAVIER, 2005) Nas duas ou trs primeiras semanas da doena o isolamento do vrus mais fcil porque os anticorpos para o vrus da raiva esto ausentes ou em baixa quantidade. O isolamento pode ser realizado em linhagens celulares permissivas, ou inoculao intracerebral de camundongos. Sendo que preciso identificar o vrus, pelos seus antgenos por tcnicas imunolgicas ou pelos corpsculos de Negri e antgenos virais no tecido cerebral de animais inoculados. (SANTOS et. al., 2008) O teste de neutralizao (TN), os ensaios imunoenzimticos (EIA), a fixao de complemento (FC), ou a imunofluorescncia direta (IF), so empregados quando se
9

usa o soro e o liquor para detectar os anticorpos do vrus, na fase tardia da doena. (SANTOS et. al., 2008)

10. Preveno e Controle

Uma forma eficaz para o controle da doena deve conter medidas direcionadas a preveno da doena nos animais e no homem. Os relatrios apresentados pela Organizao Mundial da Sade OMS a respeito da raiva sugerem as seguintes medidas: imunizao profiltica compulsrias de animais domsticos com as vacinas Flury LEP e Flury HEP, registro de todos os ces, eliminao dos ces contaminados, isolamento e observao dos ces suspeitos. (SANTOS et. al., 2008) Ao administrar o tratamento profiltico em uma pessoa mordida por um animal suspeito de raiva, devem ser considerados alguns fatores. A vacinao uma prioridade que deve ser tomada o quanto antes possvel. (SANTOS et. al., 2008) Um fator importante a ser considerado, se antes houve alguma profilaxia antirrbica. Se houve, no ser indicado o uso do soro. Contudo, no h tratamento especfico para os sintomas da doena j estabelecidos. A terapia recomendada inclui: sedao, ventilao mecnica, reposio de fludos e eletrlitos, suporte nutricional e controle das doenas intercorrentes. (SANTOS et. al., 2008)

11. Referncia Bibliogrfica

SANTOS, N. S. de O.; ROMANOS, M. T. V.; WIGG, M. D. Introduo a Virologia Humana. 2 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008. p. 357-371. XAVIER, S. de M. Comparao dos Mtodos de Inoculao Intracerebral em Camundongos (Mus musculus) e de Inoculao em Cultura de Clulas BHK-21 (C13), no Diagnstico da Raiva. Rio de Janeiro: INCQS FIOCRUZ, 2005. DUARTE, L.; DRAGO, M. C. Virologia A Raiva. Portugual: Universidade de vora, 2005.

10