PROPAGACIN DE PLANTAS PLANTAS TILES De las decenas de miles de especies de plantas que han evolucionado sobre la superficie terrestre,

el ser humano contemporneo hace uso intenso de un nmero insignificante que no llega ni a 1% del total de las especies existentes. Una de las caractersticas del desarrollo de la sociedad moderna es precisamente la disminucin del nmero de especies de las cuales dependemos en nuestros procesos productivos. Un caso muy conocido es el del maz que a travs de su mejoramiento e industrializacin ha ido sustituyendo a especies productoras de aceites, azcares y hasta celulosa. Otro caso es el de las plantas de ornato que ms se cultivan en las oficinas y hogares de todo el mundo. Unas cuantas arceas, araliceas, morceas y palmas pueden encontrarse en cualquier oficina del mundo, mientras que existe una infinidad de plantas ornamentales que estn a punto de desaparecer en todos los desiertos y bosques tropicales del mundo sin que siquiera se las mencione. En el mundo existen innumerables especies de plantas tiles o potencialmente tiles cuya explotacin y cultivo nunca han sido emprendidos; por ejemplo, en las selvas hmedas del cinturn intertropical del mundo, el nmero de plantas con frutos comestibles deliciosos sobrepasa varios cientos; sin embargo, slo unas cuantas han sido objeto de domesticacin y cultivo comercial por los lugareos de cada regin tropical y son an menos las que se comercian a escala mundial. A pesar de que existen numerosos libros y publicaciones acerca de las virtudes de muchas especies olvidadas o poco utilizadas (como alimento, fuente de materias primas, elementos para reforestar o mejorar el suelo, etc.) no se ha puesto atencin en ellas. ESTRUCTURAS DE REPRODUCCIN: SEMILLAS Y MERISTEMOS Las plantas se regeneran, en forma natural, por alguna de las siguientes formas: 1) a partir de embriones de semillas, ya sean semillas recin dispersadas o latentes en el suelo; 2) a partir de rebrotes de la raz o el tallo de individuos sanos o daados; o 3) por medio de estructuras de reproduccin vegetativa. Incrementar nuestro conocimiento en cada una de estas posibilidades para saber cmo actuar es esencial para el manejo de las plantas. En la naturaleza existen bsicamente dos opciones de propagacin para la plantas, cada una con sus ventajas y limitaciones: 1) utilizar los propgulos de origen sexual de las plantas vasculares, o sea, las semillas, 2) utilizar tejidos vegetales que conserven la potencialidad de multiplicacin y diferenciacin celular para generar nuevos individuos a partir de partes vegetativas de la planta, o sea, lo que se conoce como propagacin clonal o vegetativa. Esta ltima tiene esencialmente cuatro variantes, que son: a) la propagacin por medio de los rganos de reproduccin vegetativa que producen algunas plantas, por ejemplo, bulbos o tubrculos; b) la propagacin a partir de segmentos o esquejes de las plantas con potencialidad de enraizar; c) la propagacin mediante injertos de segmentos de la planta que se desea propagar sobre tallos de plantas receptivas ms resistentes; y finalmente, d) la micropropagacin a partir de tejidos meristemticos en cultivo in vitro. Cada una de estas tcnicas tiene ventajas y desventajas, por lo que la seleccin de alguna de ellas debe hacerse tomando en cuenta cada caso en particular. Las semillas son el vehculo natural para la reproduccin de las plantas, as como para la recoleccin, transporte, manejo y almacenamiento de germoplasma, con la ventaja de que stas preservan la variabilidad gentica resultante de la reproduccin sexual. En condiciones precarias de trabajo, es decir, en ausencia de recursos econmicos y tcnicos, el uso de semillas para la propagacin de

plantas permite evitar las dificultades tcnicas y los gastos inherentes a otros mtodos de propagacin ms elaborados. Otra alternativa, las tcnicas de propagacin vegetativa, como la micropropagacin y el enraizamiento de segmentos de plantas ofrecen posibilidades valiosas cuando las semillas son difciles de obtener, preservar o germinar, o cuando es necesario o deseable seleccionar rpidamente caractersticas valiosas de las plantas y conservar una uniformidad gentica que garantice caractersticas similares o idnticas en el crecimiento y el desarrollo de las plantas y en la calidad de sus productos. Estas tcnicas estn bien desarrolladas y en la mayora de los casos son relativamente fciles de implementar, incluso cuando se cuenta con recursos modestos. La primera parte de este libro tratar acerca de las semillas como la principal estructura reproductiva de las plantas, as como de sus usos y limitaciones en la conservacin del germoplasma, la germinacin y la propagacin. La segunda parte tratar sobre las alternativas del uso de tejidos vegetales no diferenciados para promover el crecimiento de nuevos individuos. Ambas formas de propagacin vegetal estn basadas en los mecanismos de reproduccin que existen en la naturaleza: el sexual y el asexual. Los captulos de este libro no pretenden abarcar la abrumadora cantidad de informacin ya publicada sobre estos temas; tampoco se pretende describir todas las tcnicas que han sido desarrolladas para manipular las semillas y las partes vegetativas de las plantas con propsitos de propagacin. Para el lector que desee profundizar en algn tema presentamos una variada bibliografa. LA REPRODUCCIN DE LAS PLANTAS Para entender los mecanismos de reproduccin sexual y asexual en las plantas y su repercusin en la variabilidad gentica es necesario sealar, aunque en forma somera, los procesos celulares de la mitosis y la meiosis. En la figura 1 se ilustran con todo detalle los pasos que incluye cada proceso, por lo que slo diremos que la mitosis consiste en una divisin celular que genera dos clulas con idntica informacin gentica, es decir, con el mismo nmero de cromosomas (clulas diploides) que la clula predecesora; por otro lado, en la meiosis la informacin gentica se reduce a la mitad (clulas haploides), lo que da lugar a las clulas conocidas como gametos (masculinos o femeninos), que son las que participan en la reproduccin sexual. Durante la fecundacin estos gametos se unen y generan un nuevo organismo, el cual contiene la informacin gentica de ambas clulas (clula diploide). Figura 1. A) Etapas de la mitosis. Divisin celular que da como resultado dos clulas con el mismo nmero de cromosomas de la clula progenitora (2n). B) Etapas de la meiosis. Divisin celular en que previamente a la divisin ocurre un rearreglo cromosmico y un intercambio gentico que culmina con la formacin de cuatro clulas con la mitad de los cromosomas de la clula original (n).

La reproduccin sexual se inicia con la formacin de los rganos masculinos y femeninos en los conos de las gimnospermas y en las flores de las angiospermas. Las plantas presentan una diversidad muy amplia en cuanto a la distribucin de los sexos entre los individuos y a lo largo del tiempo. La anatoma de estas estructuras ha sido descrita con mucho detalle en innumerables publicaciones. Una sntesis de dichas estructuras se presenta en la figura 2.

Figura 2. Estructuras reproductoras masculinas y femeninas de la flor. Se aprecian los diferentes verticilos florales y sus nombres. El proceso de fecundacin, que va a dar origen al embrin, ocurre mediante la polinizacin. Sin embargo, no es necesario que siempre ocurra la polinizacin para que tenga lugar el desarrollo de la semilla; ste puede iniciarse espontneamente, a partir de una pseudofertilizacin o de una autntica fertilizacin del vulo por el polen de la misma planta (autopolinizacin) o de otra planta genticamente distinta (polinizacin cruzada), esta ltima permite la combinacin de genomas distintos. Todo esto hace que la informacin gentica contenida en las semillas sea muy variable. En ocasiones el genoma del nuevo individuo es idntico al de la planta madre, tal como ocurre en algunos de los procesos de reproduccin asexual. stos se conocen como apomixis, cuando reemplazan la reproduccin sexual. La apomixis incluye la reproduccin vegetativa y la agamospermia. La reproduccin vegetativa (vese captulo II) slo se considera un mecanismo de reproduccin asexual cuando sustituye en gran parte a la reproduccin sexual. La agamospermia, aunque presenta muchas variantes, incluye dos procesos bsicos: la formacin de embriones adventicios y la partenognesis. Los embriones adventicios se forman por la divisin mittica activa de las clulas del integumento (cubierta externa del vulo) que se introducen al saco embrionario, formando un embrin verdadero, idntico genticamente a su predecesor. En el caso de la partenognesis, o automixis, hay un proceso de pseudofecundacin de una clula del saco embrionario por otra clula, en forma equivalente a lo que ocurre con la autopolinizacin, lo que permite una variacin en la informacin gentica del nuevo individuo. Dependiendo del nmero cromosmico de las clulas que intervienen en la pseudofecundacin, los embriones resultantes pueden ser diploides o poliploides. Para los propsitos de este libro consideraremos a la reproduccin sexual como aquella que se lleva a cabo por medio de semillas, aunque, como hemos visto antes, stas no siempre tienen un contenido

gentico diferente al de la planta madre, debido a que algunas veces se forman sin que exista fecundacin. En los siguientes captulos nos referiremos en general a la semilla como aquella estructura que procede del desarrollo del vulo fecundado.

LAS SEMILLAS
LA SEMILLA es el principal rgano reproductivo de la gran mayora de las plantas superiores terrestres y acuticas. sta desempea una funcin fundamental en la renovacin, persistencia y dispersin de las poblaciones de plantas, la regeneracin de los bosques y la sucesin ecolgica. En la naturaleza la semilla es una fuente de alimento bsico para muchos animales. Tambin, mediante la produccin agrcola, la semilla es esencial para el ser humano, cuyo alimento principal est constituido por semillas, directa o indirectamente, que sirven tambin de alimento para varios animales domsticos. La semilla es uno de los principales recursos para el manejo agrcola y silvcola de las poblaciones de plantas, para la reforestacin, para la conservacin del germoplasma vegetal y para la recuperacin de especies valiosas sobreexplotadas. Las semillas pueden almacenarse vivas por largos periodos, asegurndose as la preservacin de especies y variedades de plantas valiosas. La ciencia de las semillas se ha desarrollado a lo largo de muchos aos, acumulndose hasta la fecha un importante volumen de conocimientos acerca de muchos aspectos de su biologa y manejo. Existen numerosas publicaciones cientficas y tcnicas en este campo y se conocen con detalle varias caractersticas de la biologa de las semillas de las plantas cultivadas ms importantes, y de algunos rboles de valor forestal; sin embargo, las semillas de las plantas tropicales y subtropicales no han corrido con igual suerte y su estudio se ha quedado muy rezagado. Como parte del estudio de las plantas es necesario intensificar la investigacin de las semillas, sus caractersticas fisiolgicas, sus mecanismos de latencia y germinacin, su longevidad (ecolgica y potencial) y su posible uso para la propagacin y conservacin de las plantas. ORIGEN DE LA SEMILLA La semilla es una unidad reproductiva compleja, caracterstica de las plantas vasculares superiores, que se forma a partir del vulo vegetal, generalmente despus de la fertilizacin. Se encuentra en las plantas con flores (angiospermas) y en las gimnospermas. En las angiospermas los vulos se desarrollan dentro de un ovario; en tanto que en las gimnospermas la estructura que los contiene es muy diferente, pues no constituye una verdadera flor; sin embargo, la estructura de las semillas de estas plantas es bsicamente similar a la de las plantas con flores. Para entender la ontogenia de la semilla, es decir, su formacin y desarrollo, se requiere cierto conocimiento de la estructura de las flores y de los rganos reproductivos masculinos y femeninos, En trminos generales, las flores consisten de varias capas de hojas modificadas que constituyen, de afuera hacia adentro, los spalos, los ptalos, los estambres y el ovario. Hay grandes variaciones entre especies en la forma, tamao y disposicin de estas estructuras. Hay tambin plantas que producen flores con sexos separados, ya sea masculinas con estambres o femeninas con ovarios. Los estambres producen granos de polen que contienen los gametos masculinos, y el ovario contiene los vulos que producirn a las semillas (figura 2). Los vulos de las plantas superiores son estructuras pluricelulares, relativamente complejas. En su interior, el vulo contiene

al saco embrionario y ste a su vez contiene varias clulas haploides, no claramente delimitadas, cuyo nmero vara entre los diferentes grupos taxonmicos. Al arribar el polen al pistilo, que es el rgano femenino, se produce la polinizacin, con la consecuente formacin del tubo polnico, que desciende por el estilo hacia el vulo. El tubo polnico lleva dos ncleos haploides: el gameto masculino que se fusionar con el ncleo del saco embrionario que funciona como cigoto o huevo, para originar un nuevo organismo diploide, y otro que se fusionar con los dos ncleos polares del saco embrionario para formar un tejido triploide, el endospermo. Este proceso se conoce como doble fecundacin. Tanto la estructura de estos rganos como la doble fecundacin, que caracteriza a las plantas, son complejas y escapa a los objetivos de este libro; sin embargo, estn descritas con mucho detalle en los textos de botnica. En la figura 3 se precisan las principales estructuras participantes y resultantes de la fecundacin.

Figura 3. Estructura del ovario de una flor. Se muestran las diferentes capas que lo componen y cmo se transforma despus de la fecundacin cada estructura en los diversos componentes morfolgicos de la semilla.

Al momento de la fertilizacin un vulo tpico de angiospermas est compuesto por una o dos capas protectoras y por el saco embrionario que contiene al ncleo que funciona como gameto. El vulo est unido a la pared del ovario por el funculo. Despus de la fertilizacin el huevo comienza a dividirse hasta formar el embrin de una nueva planta: las cubiertas exteriores o tegumentos originarn la cubierta de la semilla, como hemos visto, las otras clulas del tejido central en algunos casos originarn el endospermo, que contiene las reservas de la semilla que sern utilizadas en el desarrollo inicial de la nueva planta. En muchas especies el endospermo no se forma y es el embrin el que acumula las sustancias de reserva, generalmente en los cotiledones u hojas embrionarias, que pueden llenar todo el interior de una semilla. En la naturaleza se encuentran infinidad de variantes en la estructura de las semillas; por ejemplo, en las semillas pequeas el embrin puede poseer un cmulo de pocas clulas o tener ya la forma de una pequea planta en la que se distinguen claramente la radcula, los cotiledones u hojas

embrionarias, la plmula de la cual se desarrollar el tallo y el hipoctilo, conectando entre s todas las estructuras (figura 4).

Figura 4. Anatoma de la semilla de una dicotilednea y de una monocotilednea.

Las reservas energticas de la semilla son: grasas, carbohidratos y a veces protenas que sostendrn a la futura planta durante sus primeras etapas de vida. Estas reservas, como hemos dicho, pueden encontrarse en diferentes tejidos o en el embrin mismo, y todo esto est relacionado con la germinacin y el desarrollo de un nuevo individuo. PRODUCCIN DE LAS SEMILLAS Fenologa Las plantas presentan frecuencias de floracin y de subsecuente fructificacin que van desde la produccin continua de frutos a lo largo del ao, como ocurre en algunos pioneros, a la produccin sincrnica de frutos dentro de una generacin de plantas a intervalos de ms de un siglo, como ocurre en algunas especies de bamb. Entre estos extremos existen varios patrones de produccin de semillas. Uno muy frecuente es la fructificacin anual de duracin relativamente fija; sin embargo, el tamao de la cosecha de semillas de la poblacin de una especie, o de sta, entre plantas individuales, puede variar. El periodo de fructificacin cambia entre diferentes localidades, incluso dentro de una misma regin. Esta variabilidad se debe a variaciones en la disponibilidad de recursos para la reproduccin o a los ciclos endgenos que diferencian distintos niveles de esfuerzo reproductivo entre aos. Algunas regiones caracterizadas por un clima muy homogneo y poco estacional contienen poblaciones de plantas que presentan fructificacin masiva cada pocos aos seguidas por aos de baja o nula produccin de propgulos sexuales; mientras que en reas climticamente ms estacionales son caractersticos los periodos bien definidos de fructificacin. En el cuadro 2 se resumen los principales ciclos peridicos en la floracin. La regulacin fisiolgica de los diferentes patrones de reproduccin y los sensores que los regulan son pobremente conocidos, no obstante, las presiones del ambiente han inducido la seleccin de los diferentes comportamientos fenolgicos, los cuales han sido ampliamente analizados por muchos autores. La mayora de ellos est de acuerdo en que los patrones fenolgicos representan adaptaciones a presiones de tipo abitico y bitico. Entre los factores abiticos, el fundamental parece ser la estacionalidad en la disponibilidad de recursos, por ejemplo la estacin hmeda y la seca, adems de condiciones ambientales apropiadas para la reproduccin, como la disponibilidad de agua para la floracin y fructificacin y temperaturas favorables para la actividad de los

polinizadores. Las presiones biticas han sido objeto de mucha discusin y han generado diversas opiniones; sin embargo, la principal hiptesis acerca del origen de las diferentes periodicidades de floracin y fructificacin est basada en la idea de que stas reducen la competencia de las plantas por polinizadores y dispersores. CUADRO 2. Periodicidad de la floracin en zonas tropicales de acuerdo con los criterios de Alvim en 1974

Las especies de plantas compiten entre ellas para atraer polinizadores de flores y dispersores de semillas, por lo cual han desarrollado comportamientos que minimizan la sobreposicin fenolgica con otras plantas que dependen del mismo vector animal en cada comunidad vegetal. Cosecha de semillas La fotosntesis genera compuestos orgnicos que son invertidos en gasto respiratorio, crecimiento, reposicin de partes, tejidos y rganos, y finalmente en la reproduccin, por lo que la cantidad de semillas producidas por cada planta individual, en proporcin a su biomasa total y al rendimiento fotosinttico anual, es muy variable entre especies y poblaciones. Las plantas anuales colocan gran parte de su productividad fotosinttica anual en biomasa reproductiva porque tienen una sola oportunidad en la vida de dejar descendientes, pero la mayora de las plantas leosas producen propgulos muchas veces durante su vida, por lo que esta produccin se logra normalmente utilizando una menor proporcin de la productividad fotosinttica anual. Otro factor importante relacionado con el volumen de la cosecha es la frecuencia de la fructificacin. Se ha visto que las plantas que fructifican frecuentemente producen menos propgulos que aquellas que lo hacen espordicamente, y que las de fructificacin estacional ocupan una posicin intermedia. En el sureste de Asia existe el fenmeno conocido como fructificacin "mast", el cual consiste en la produccin masiva de frutos cada cierto nmero de aos, seguida de una produccin escasa en aos intermedios. Con gran frecuencia se observan aos buenos y aos malos en la produccin de frutos en muchas plantas tropicales. Durante los aos buenos las semillas son abundantes, sanas y con alta viabilidad, en tanto que en los aos malos stas son escasas, mal desarrolladas y de baja viabilidad. Esta variacin est ligada a la calidad de la estacin

favorable para la productividad fotosinttica y a factores biticos, como la abundancia de polinizadores o parsitos de flores y frutos. GERMINACIN La germinacin de las semillas comprende tres etapas sucesivas que se superponen parcialmente: 1) la absorcin de agua por imbibicin, causando su hinchamiento y la ruptura final de la testa (figura 5); 2) el inicio de la actividad enzimtica y del metabolismo respiratorio, translocacin y asimilacin de las reservas alimentarias en las regiones en crecimiento del embrin, y 3) el crecimiento y la divisin celular que provoca la emergencia de la radcula y posteriormente de la plmula. En la mayora de las semillas el agua penetra inicialmente por el micrpilo y la primera manifestacin de la germinacin exitosa es la emergencia de la radcula (figura 6).

Figura 5. Etapas de la germinacin que conducen a la emergencia de la radcula. Se inician con la absorcin de agua y la activacin metablica del embrin.

Figura 6. Semilla germinada que muestra la ubicacin y apariencia de la radcula.

Existen varias etapas de desarrollo de la plntula cuyas caractersticas varan, dependiendo del tipo de germinacin que presenta cada especie. Hay bsicamente dos tipos de germinacin (que a veces presentan algunas variantes), la germinacin epigea y la hipogea. En la germinacin epigea el hipoctilo se alarga y aleja a los cotiledones del suelo; en tanto que en la germinacin hipogea el hipoctilo no se desarrolla y los

cotiledones permanecen bajo el suelo o ligeramente sobre ste. En este caso las hojas cotiledonarias tienen slo una funcin almacenadora de nutrientes, en tanto que en la germinacin epigea estas hojas tambin tienen con frecuencia color verde y realizan funciones fotosintticas durante el crecimiento temprano de la plntula. La testa de la semilla puede permanecer cubriendo los cotiledones en el caso de la germinacin hipogea, en tanto que en la epigea se desprende, lo cual permite la expansin de las hojas cotiledonarias (figura 7).

Figura 7. A) Germinacin hipogea en haba. B) Germinacin epigea en frijol.

En el trpico las semillas presentan tipos de germinacin intermedios entre los dos descritos. Por ejemplo, en algunos casos los cotiledones son expuestos y fotosintticos pero permanecen al nivel del suelo, y en otros casos se elevan sobre el suelo, sin embargo, permanecen plegados dentro de la cubierta de las semillas. Cada una de estas variantes ha recibido nombres que varan segn los autores; la nomenclatura asignada a estas variantes hace hincapi en su carcter de presentacin intermedia de los mecanismos de germinacin. Germinacin de las semillas en el suelo La gran diversidad de las plantas se refleja en la multitud de posibilidades del desarrollo y la temporalidad de la germinacin de las semillas de diferentes especies. Existen plantas que diseminan sus semillas cuando ya han germinado en el fruto; en el otro

extremo, algunas semillas que son dispersadas estn provistas de una dura testa impermeable que slo permite la germinacin despus de muchos meses de desgaste. Cuando llegan las semillas al suelo, el recurso clave para iniciar los cambios fisiolgicos que conducen a la germinacin es el agua, que resulta indispensable para activar el metabolismo y el crecimiento de las clulas vivas de los tejidos de las semillas. La cantidad de agua que absorbe una semilla y la velocidad a la que lo hace no slo dependen de las caractersticas de la semilla, como la permeabilidad de sus cubiertas, la composicin qumica de sus reservas, su tamao y su contenido de humedad, sino que tambin estn determinadas por condiciones ambientales como la humedad del suelo, la humedad del aire y la temperatura. Muchos rboles del bosque tropical producen semillas con alto contenido de humedad, cuya germinacin se ve favorecida en ambientes hmedos y sombreados dentro del bosque. Es frecuente que estas semillas no puedan germinar bien en suelos desnudos que reciben insolacin directa, pues la prdida de agua de la superficie de la semilla a la atmsfera supera la cantidad absorbida en la interfase semilla-suelo, por lo que raramente alcanzan altas tasas de germinacin en suelos en los que la evaporacin es muy alta. Estas semillas, al igual que muchas otras de los bosques tropicales, tienden a germinar casi de inmediato que llegan al suelo, cuando las condiciones de humedad son adecuadas. Con frecuencia, en pocos das la radcula emerge de las cubiertas de la semilla y en pocas semanas ocurre la total germinacin de las semillas viables. El periodo que transcurre entre la liberacin de las semillas de los frutos y su llegada al suelo no se caracteriza por una latencia profunda, ya que el nico factor que determina la germinacin es la disponibilidad de agua. Por otra parte, algunas semillas pueden tolerar cierto grado de sequa cuando se encuentran en el suelo, perdiendo humedad y entrando en un estado quiescente (de reposo) hasta que se incrementa la humedad del suelo, al inicio de la estacin de lluvias. Las semillas del cedro y la caoba de Amrica tropical son dos ejemplos de semillas que son dispersadas por el viento en la estacin seca, que son liberadas con bajo contenido de humedad y que permanecen quiescentes en el suelo hasta que las primeras lluvias permiten su germinacin. La aparicin de multitud de plntulas de rboles en el suelo de los bosques tropicales al principio de la estacin lluviosa se explica por la presencia de muchas semillas quiescentes que se diseminaron durante la estacin seca. La germinacin de las semillas con frecuencia tiene lugar en la superficie del suelo, por lo que el equilibrio entre la ganancia de humedad del suelo y su prdida por transpiracin a la atmsfera determina el momento en que la semilla se satura de humedad y comienza a germinar. Algunas veces este equilibrio mejora cuando las semillas estn parcialmente enterradas en la hojarasca. LATENCIA Una vez que la semilla ha completado su desarrollo se inician los cambios que darn lugar al establecimiento del reposo en las semillas (cuadro 3). Este reposo o reduccin del metabolismo se denomina quiescencia cuando la causa de que no ocurra la germinacin es fundamentalmente la falta de agua, como es el caso de las semillas almacenadas en condiciones artificiales, por ejemplo un frasco con frijoles en la alacena o las semillas que permanecen en los frutos unidos a la planta madre por largo tiempo.

En cambio, el reposo de las semillas se denomina latenca cuando la semilla no germina a pesar de encontrarse en un lugar ptimo en cuanto a la temperatura y la humedad. Las causas por las que no germinan pueden deberse a la existencia de un periodo cronolgicamente regulado de interrupcin del crecimiento y de disminucin del metabolismo durante el ciclo vital. sta es una estrategia adaptativa de supervivencia frente a condiciones ambientales desfavorables que se presenta en algunos seres vivientes. En las plantas superiores puede existir latencia o interrupcin del crecimiento en el tejido meristemtico, por ejemplo en las yemas de crecimiento de las ramas, as como en las semillas. El establecimiento de la latencia est regulado por factores hereditarios que determinan los mecanismos fisiolgicos endgenos de las plantas, los cuales interactan con factores del ambiente en el que las plantas crecen; esto da lugar, a la larga, a cambios evolutivos en las plantas. Entre las condiciones ms importantes del ambiente se encuentran las variaciones climticas de temperatura y humedad, las variaciones microclimticas derivadas de aspectos fisiogrficos y biticos, como la calidad espectral de la luz y el termoperiodo, as como las caractersticas especficas del lugar a las que las plantas se han adaptado para establecerse y crecer. Las variaciones micro y macroclimticas, as como las condiciones hormonales y nutricionales de la planta progenitora tienen gran influencia en el establecimiento de la latencia de sus semillas durante su desarrollo, por lo cual pueden existir variaciones entre cosechas de semillas de una especie, segn la poca y el lugar de produccin. CUADRO 3. Pasos en el desarrollo del reposo en las semillas

Se han definido varios tipos de latencia que en sntesis se presentan en el cuadro 4. Nos ajustaremos aqu a la clasificacin que el eclogo britnico John Harper present en 1957, que toma en cuenta principalmente el comportamiento de este mecanismo fisiolgico en la naturaleza. Existen clasificaciones ms modernas, o con otro enfoque, que pueden consultarse en diversas obras. CUADRO 4. Clasificacin de los tipos de latencia de acuerdo con diferentes autores citados por Koslowski en 1972

Latencia innata o endgena Se presenta en el momento en el que el embrin cesa de crecer (cuando la semilla an est en la planta madre) y contina hasta que el impedimento endgeno cesa, en ese momento las semillas estn en condiciones de germinar en cuanto se presentan las condiciones ambientales adecuadas. La presencia de inhibidores qumicos de la germinacin en el embrin o la inmadurez de ste son probablemente las causas principales de esta latencia. La duracin de la latencia innata es muy variable segn la especie, en algunos casos, incluso puede variar entre las semillas de un mismo individuo. Algunos experimentos parecen indicar que en ciertas semillas tropicales existen procesos comparables a la posmaduracin, caracterstica de muchos rboles de climas templados, cuyas semillas slo germinan despus de haber transcurrido el invierno, de haber sido expuestas a bajas temperaturas en el laboratorio o mediante la aplicacin de hormonas vegetales, como el cido giberlico o almacenndolas en fro. Latencia inducida o secundaria Este tipo de latencia se produce cuando las semillas estn en condiciones fisiolgicas para germinar y se encuentran en un medio que presenta alguna caracterstica muy desfavorable, como poco oxgeno, concentraciones de CO2 mayores a las de la atmsfera, temperatura alta, etc., lo que puede producir alteraciones fisiolgicas reversibles en las semillas. En estos casos, las semillas pueden caer en un estado de latencia secundaria en el que ya no pueden germinar a pesar de continuar vivas. En algunos casos este tipo de latencia se rompe por medio de un estmulo hormonal. Algunas veces la latencia inducida tambin puede sumarse a otros tipos de latencia o sustituirlos. Latencia impuesta o exgena En la naturaleza esta latencia se presenta en semillas aptas para germinar en condiciones adecuadas de humedad y temperatura media, es decir, adecuadas al hbitat que ocupan, pero que continan latentes por falta de luz, requerimientos especiales de temperatura, oxgeno o de otro factor. Esta latencia est controlada por las condiciones fsicas del ambiente que rodea a la semilla, y se presentan en aquellas que se encuentran en el suelo y que germinan slo despus de una perturbacin que modifique el rgimen lumnico o el contenido de oxgeno. Germinacin retardada por una testa impermeable Muchas plantas producen semillas cuyo tegumento externo es duro impermeable al agua o a los gases, e incluso el micrpilo est provisto de una barrera que impide la penetracin de agua al embrin. Esta caracterstica es frecuente en varias familias de plantas, particularmente en las fabceas o leguminosas, las malvceas y bombacceas. En el suelo del bosque la cubierta de la semilla gradualmente se vuelve permeable por intemperismo, degradacin microbiana, factores del suelo como las saponinas o por el efecto de fluctuaciones de temperatura, y va germinando poco a poco. Este mecanismo de latencia pasiva es particularmente frecuente en los bosques tropicales secos, y puede haberse originado como un mecanismo de persistencia de las semillas en el suelo a lo largo de la estacin desfavorable de crecimiento.

Frecuentemente se dice que el trnsito a travs del tubo digestivo de animales es uno de los factores principales que rompen este tipo de latencia entre las semillas que son dispersadas por animales. Sin embargo, muchas de las especies que presentan testa dura no son ingeridas por animales; otras, aunque s sean ingeridas, son destruidas o no muestran mucha diferencia en su germinacin antes y despus de haber sido ingeridas por animales. PROBLEMAS EN EL USO DE SEMILLAS EN LA PROPAGACIN DE LAS PLANTAS La mayora de los rboles ms valiosos de los bosques templados se propaga por medio de semillas, en tanto que los rboles frutales y de ornato con frecuencia son propagados utilizando segmentos vegetativos o injertos. Ms recientemente se ha tenido xito con tcnicas de micropropagacin en algunas especies. Con respecto a los rboles tropicales, la mayora de las especies que se cultivan extensivamente se propaga por medio de semillas; sin embargo, no todas las especies valiosas producen semillas que puedan utilizarse fcilmente para este propsito. Muchos rboles tropicales florecen y fructifican espordicamente o producen cantidades pequeas de semillas. Con frecuencia stas son fuertemente daadas por parsitos y depredadores. Muchas de ellas son de tipo recalcitrante, de vida corta, frgiles y difciles de manejar o almacenar. Algunas requieren condiciones peculiares de germinacin que son desconocidas o difciles de obtener en un vivero o en una cmara de germinacin; adems, las plntulas que se obtienen de las semillas de los rboles tropicales a veces necesitan mucho tiempo para crecer y su maduracin puede tomar toda una vida. Un programa sobre conservacin y manejo de semillas tiene objetivos a corto y a largo plazo. Los de corto plazo se concentran en el desarrollo de una estrategia para la recolecta representativa de semillas y para cubrir la demanda de stas. Los objetivos a largo plazo son asegurar la existencia de una provisin sostenida de semillas de alta calidad y de larga viabilidad, y desarrollar plantas de mayor calidad mediante programas de mejoramiento y seleccin de las caractersticas genticas ms deseables de estas plantas. De esta manera, un programa bien equilibrado de manejo de semillas tiene esencialmente tres componentes: 1) la obtencin de las semillas, que es el conjunto de prcticas organizadas para obtener y conservar semillas de alta calidad y mantener una disponibilidad permanente de stas; 2) el mejoramiento de rboles, que es el conjunto de prcticas diseadas para obtener genotipos ms deseables de plantas para la reproduccin y propagacin, y 3) la conservacin de recursos genticos, que es el conjunto de prcticas diseadas para conservar el germoplasma a largo plazo y con cierto grado de variabilidad gentica para las demandas futuras. En prrafos anteriores hemos tratado ampliamente los aspectos de manejo y conservacin de semillas, por lo que slo resta tratar aqu el tema del mejoramiento gentico de una manera somera, ya que se trata de un asunto de suma complejidad. Obtener muestras de semillas mejoradas es una necesidad que puede resolverse de diferentes maneras. En especies de vida larga, en que se requieren muchos aos para que las plantas alcancen la edad reproductiva, las prcticas de entrecruza, hibridizacin y seleccin que se utilizan en los cultivos de plantas anuales son difciles de aplicar y slo se obtienen resultados a muy largo plazo. Por esta razn, en plantas leosas se

recurre frecuentemente a la seleccin clonal o vegetativa, de la que se habla ms extensamente en el siguiente captulo. Una de las tcnicas ms empleadas para asegurar una fuente constante y de buena calidad de semillas, sobre todo en el caso de rboles de valor forestal, es la creacin de rodales semilleros. Esto se lleva a cabo seleccionando rboles de alta calidad, buena forma y alta produccin de semillas viables. Con estas semillas se forman cultivos en reas de suelos y humedad adecuada y los individuos que aqu nacen constituyen una fuente valiosa de semillas, que son las que se utilizan para generar los viveros destinados a reforestacin y reemplazo de los rboles cosechados en los bosques. Sin embargo, no debe pensarse que las tcnicas de seleccin sexual no se han aplicado a plantas longevas. Las culturas con larga tradicin hortcola nos han legado rboles cultivados con propiedades alimentarias, o de otra ndole, muy valiosas, que indudablemente fueron el resultado de tcnicas de hibridizacin o entrecruza en las que se hizo gala de paciencia, una de las cualidades ms escasas de la modernidad.

LA PROPAGACIN VEGETATIVA
A DIFERENCIA de lo que sucede en los vertebrados, la semilla es liberada cuando an sus tejidos no se han diferenciado totalmente. La semilla contiene clulas embrionarias que darn origen a todos los tejidos de la nueva planta despus del proceso de germinacin; adems, muchas de las clulas de los tejidos vegetales ya maduros conservan la potencialidad de diferenciarse y dar origen a diversas estructuras; estas clulas forman parte de meristemos primarios y secundarios que pueden encontrarse en todos los rganos de las plantas. Gracias a esto es posible obtener plantas enteras a partir de tejidos de yemas, tallos, races y hasta hojas de casi cualquier planta. La propagacin clonal o vegetativa de plantas es una produccin a partir de partes vegetativas. Se utilizan tejidos vegetales que conserven la potencialidad de multiplicacin y diferenciacin celular para generar nuevos tallos y races a partir de cmulos celulares presentes en diversos rganos. Este tipo de propagacin tiene esencialmente tres variantes, que son: 1) la micropropagacin a partir de tejidos vegetales en cultivo in vitro; 2) la propagacin a partir de bulbos, rizomas, estolones, tubrculos o segmentos (esquejes) de las plantas que conserven la potencialidad de enraizar, y 3) la propagacin por injertos de segmentos de la planta sobre tallos de plantas receptivas ms resistentes. La propagacin vegetativa comprende desde procedimientos sencillos, conocidos de tiempos inmemoriales por los campesinos de todo el mundo, hasta procedimientos tecnolgicamente muy avanzados, basados en la tecnologa del cultivo de tejidos vegetales, mediante los cuales se puede lograr la propagacin masiva de plantas genticamente homogneas, mejoradas y libres de parsitos. Los procedimientos modernos permiten la obtencin de cultivares totalmente libres de agentes patgenos, incluyendo virus, e incluso la fabricacin de semillas artificiales por medio de la tcnica de embriognesis somtica y encapsulado. Adems de la propagacin, las tcnicas de cultivo de tejidos in vitro tambin permiten seguir procedimientos modernos de conservacin de germoplasma gracias al mantenimiento prolongado de cultivos de crecimiento lento y la criopreservacin de tejidos. ESTRUCTURAS DE PROPAGACIN VEGETATIVA Varias especies de plantas vasculares, en su mayora especies cultivadas, no producen semillas aunque tengan flores, su multiplicacin o propagacin vegetativa no implica la fusin de clulas germinativas. Esta forma de propagacin tambin se presenta en plantas que normalmente producen semillas, y slo se le considera como reproduccin asexual cuando sustituye en gran parte a la reproduccin sexual. Se trata de un proceso que implica el enraizamiento y la separacin de una parte de la planta original cuando mueren los tejidos vegetales que las semillas unan. De esta manera, las clulas, tejidos u rganos desprendidos se desarrollan directamente en nuevos individuos. Las zonas de abscisin pueden ser precisas, como sucede en la separacin de los bulbilos, o puede darse la fragmentacin de una planta debida al deterioro y muerte del individuo parental o bien de los tejidos de interconexin, como en el caso de los brotes de las races.

Las estructuras de propagacin vegetativa funcionan tambin como rganos de resistencia y de almacenamiento en las temporadas adversas, los cuales algunas veces son almacenados por tiempos prolongados. Estructuras de propagacin vegetativa en plantas no vasculares La propagacin vegetativa se presenta en todo el reino vegetal; por ejemplo, en algunas algas pluricelulares la propagacin vegetativa se realiza mediante su fragmentacin en dos o ms individuos. Las cianobacterias presentan a lo largo de sus filamentos unas clulas muertas, agrandadas y de pared gruesa, que se encuentran a intervalos a lo largo de sus filamentos, las cuales ayudan a la fragmentacin. Varios tipos de plantas no vasculares tienen estructuras especializadas relacionadas con la propagacin vegetativa. Las hepticas producen estructuras semejantes a las yemas llamadas propgulos, que al desprenderse de su pedicelo son arrastrados por la lluvia hasta sitios en los que se desarrollan como nuevas plantas, mientras que los lquenes producen cuerpos reproductores conocidos como soredios, integrados por masas de hifas fngicas y de clulas algales. Estructuras de propagacin vegetativa en plantas vasculares En virtud de la totipotencialidad del tejido vegetal, es decir, de su capacidad para formar yemas y races adventicias, casi cualquiera de los rganos de una planta vascular tiene relacin con su propagacin vegetativa al sufrir modificaciones anatmicas y funcionales que le permiten desarrollarse en un organismo vegetal completo e independiente, con las mismas caractersticas genticas de la planta progenitora. Las yemas, por lo general, se encuentran en las axilas de las hojas, en la porcin terminal del tallo, o bien se desarrollan en cualquier porcin del tallo y dan origen a races adventicias. Entre las estructuras de propagacin vegetativa algunas comparten semejanzas en su desarrollo, por lo que no siempre es posible hacer una diferenciacin muy clara entre ellas, sino que ms bien se ubican en un continuo de caractersticas. Sin embargo, algunos autores las clasifican tomando en cuenta los rganos vegetales de los cuales se originan. Con base en este criterio describiremos algunas de las ms comunes. Propagacin vegetativa por tallos y yemas Los tallos horizontales areos y subterrneos de varias especies silvestres y cultivadas se alargan y forman races adventicias en sus nudos. Mientras los tejidos se mantienen intactos se trata del crecimiento de una sola planta, como sucede en muchas especies de gramneas. A este individuo completo de extenso crecimiento se le conoce como genet o clon. Pero cuando el tejido de interconexin muere o es cortado, cada uno de los segmentos da lugar a un nuevo individuo al que se le conoce como ramet (figura 13A).

Figura 13. A) Separacin de los ramets individuales por muerte del tejido de interconexin; B) estolones; C) rizoma; D) el tubrculo (papa) se corta en piezas y cada una contiene una yema para que a partir de los tubrculos se propagen ms plantas.

Una modificacin de este tipo de propagacin ocurre cuando el extremo libre de un tallo largo alcanza el suelo y adems de desarrollar races adventicias, la yema de crecimiento da lugar a un tallo erecto, lo que se conoce como acodadura (figura 14); este proceso ocurre frecuentemente en la propagacin de las frambuesas y las zarzamoras.

Figura 14. Acodadura. Las ramas alcanzan el suelo y enraizan.

Por otro lado, los tallos areos de algunas hierbas y arbustos caen por su propio peso al suelo. La produccin de races adventicias y la muerte de las conexiones con el individuo parental permiten la generacin de plantas independientes. En otros casos, la sola fragmentacin de los tallos o de las ramas y su contacto continuo con el suelo es suficiente para que los segmentos formen races y se desarrolle un individuo completo. Este tipo de propagacin es comn en los cactos, los sauces y en la planta acutica conocida como elodea. Entre las principales estructuras de propagacin vegetativa originadas a partir de los tallos y de las yemas se encuentran las siguientes: Propagacin vegetativa por tallos 1) Estolones. Constan de secciones relativamente largas y delgadas de tallos areos horizontales con entrenudos largos y cortos alternados que generan races adventicias. La separacin de estos segmentos enraizados permite el desarrollo de plantas hijas. La

fresa es un ejemplo de las especies que comnmente presentan este tipo de propagacin (figura 13B). 2) Rizomas. Se generan a partir del crecimiento horizontal de un tallo subterrneo, por lo general ms robusto que el que da origen a un estoln. Las viejas porciones se degradan y se separan en fragmentos que debern enraizar de manera independiente. Este tallo subterrneo presenta hojas escamosas en las axilas, donde se pueden generar yemas axilares, adems de presentar races adventicias (figura 13C). Una vez formado el vstago principal se da un crecimiento continuo. Cada estacin de crecimiento presenta un crecimiento simpodial por medio de la yema axilar o monopodial por medio de la yema terminal. El rizoma funciona como rgano de almacenamiento de reservas. De esta manera se propagan especies de importancia econmica, tales como el bamb, la caa de azcar, el pltano, as como algunos pastos. 3) Tubrculos. Son estructuras gruesas, suculentas, que actan tambin como estructuras de reserva. Se forman en el extremo de tallos subterrneos delgados. Un ejemplo muy conocido lo constituye la papa. Los tubrculos presentan en su superficie nudos con hojas escamosas, arreglados de manera espiral, y cada uno de ellos consta de una o ms yemas pequeas. Cuando se inicia el crecimiento del vstago principal las races adventicias se desarrollan en la base del tubrculo y las yemas horizontales se alargan y producen tallos etiolados en forma de estolones. A partir de los tubrculos que han formado ramas horizontales se forman tubrculos nuevos (figura 13D). Los tubrculos y los rizomas son muy semejantes y en algunos casos es casi imposible distinguirlos. Sin embargo, una caracterstica distintiva de un rizoma verdadero es que presenta un grosor uniforme en toda su longitud, sobre la cual crecen races adventicias, las cuales no existen en los nudos de los tubrculos. Otra diferencia entre estas estructuras consiste en que el rizoma formar el vstago principal de la nueva planta, mientras que el tubrculo forma ramas laterales (figura 13C y 13D). 4) Brotes. Se definen como ramas o tallos que desarrollan races adventicias sin que sean independientes de la planta progenitora. Se desarrollan en las axilas de las hojas escamosas o de las yemas adventicias sobre las races. En la pia comestible los brotes se desarrollan en las axilas de las hojas inferiores que son cubiertas por el suelo. Propagacin vegetativa por yemas. A partir de la produccin de las yemas axilares con orientacin vertical en los tallos de algunas plantas (figura 15A) y de su posterior desprendimiento y cada al suelo, se producen estructuras de propagacin vegetativa tales como los bulbos que se presentan en la cebolla, el tulipn y el lirio o los cormos del gladiolo y el azafrn. Ambas estructuras, una vez liberadas, se establecen de manera subterrnea pero forman ramas que dan lugar a nuevas plantas.

Figura 15. A) Yemas axilares; B) cormo; C) cormelo; D) bulbo.

1) Cormos. Se forman en las yemas de las axilas de las hojas de un tallo robusto y suculento que proporciona los nutrientes necesarios para la nueva estructura, la cual se desprender del progenitor y se desarrollar subterrneamente como un tallo corto, erecto y slido con nudos y entrenudos. Los cormos tienen forma de esferas aplanadas dorsoventralmente, como los del gladiolo y el azafrn. Estn envueltos en delgadas hojas escamosas que los protegen del dao fsico y de la prdida de agua, pero que no funcionan como estructuras de almacenamiento, a diferencia de las escamas de los bulbos. Cuando se desprenden las escamas marcan crculos alrededor del cormo. ste desarrolla races adventicias ventrales o basales. El pice del cormo es un vstago terminal que se desarrollar en las hojas y en un vstago floral terminado por una inflorescencia, y en cada uno de los nudos se producen las yemas axilares (figura 15B). El cormo se multiplica ramificndose simpdicamente, y si se corta un cormo, manteniendo una yema en cada seccin, cada uno de estos segmentos desarrollar un cormo nuevo. 2) Cormelos. Sobre el extremo inferior del cormo se producen pequeas estructuras semejantes a los estolones conocidos como cormelos (figura 15C). La muerte del cormo parental permitir la separacin de los cormos hijos, los cuales pueden ser almacenados durante el invierno y plantados durante la temporada favorable para el crecimiento. 3) Bulbos. Se desarrollan sobre tallos cortos y engrosados, a partir de yemas axilares de hojas carnosas. De stas obtienen elementos de reserva, a diferencia de los cormos que las obtienen a partir del tallo, lo cual les permite producir rpidamente races adventicias. Se desarrollan subterrneamente en forma de tallos carnosos, cubiertos con hojas engrosadas a manera de escamas que funcionan como rganos de reserva (figura 15D). Es posible que se produzca ms de un bulbo a partir de cada yema. En algunos casos se desarrollan masas de bulbos en el extremo del tallo, cada uno de ellos llamados bulbilos, los cuales pueden ser dispersados lejos del bulbo parental. En el centro de los bulbos existe un meristemo vegetativo o un vstago floral.

Por su consistencia existen dos tipos de bulbos: 1) los tunicados, que estn cubiertos por escamas secas y membranosas que protegen al bulbo y le dan una estructura ms o menos slida. A esta clase pertenecen la cebolla y el tulipn; 2) los no tunicados, que no presentan la cubierta seca y sus escamas estn separadas y unidas a la placa basal. Este tipo de bulbos daa fcilmente por lo que deben ser manejados con cuidado. 4) Pseudobulbos. Esta estructura vegetativa se da en la familia de las orqudeas. Son crecimientos tuberosos del tallo completo o de parte de ste o de las ramas. En las axilas de las escamas de la base de los pseudobulbos se forman vstagos nuevos o pseudobulbos en serie que conectan segmentos del tallo (figura 16A).

Figura 16. A) Pseudobuldo, y B) produccin de nuevas plantas en el margen de la hoja, como en la planta millonaria.

5) Turiones. Se presentan generalmente en especies acuticas como estructuras de resistencia a condiciones ambientales adversas; se conocen tambin como yemas de invierno y se forman a partir de yemas que se desprenden del tallo o que persisten cuando el resto de la planta muere. Las hojas del turin contienen elementos de reserva y cuando se restablecen las condiciones favorables se inicia la produccin de las races adventicias. 6) Chupones. Son estructuras que se forman en las axilas de las hojas escamosas de los tallos subterrneos y de los rizomas, o de las yemas adventicias de las races. El chupn forma varios entrenudos cortos; despus de formar uno o ms nudos desarrolla races adventicias y puede formar una nueva planta. El pltano y el bamb forman chupones. Propagacin vegetativa por races Una forma extensa de propagacin de las plantas se da mediante numerosos brotes que crecen de sus races horizontales. Tales brotes se forman slo si la raz es daada, entonces los brotes se diferencian en un tejido calloso. Las races carnosas y

aglomeradas de los camotes, las dalias y las peonias son tambin un medio de propagacin vegetativa. Propagacin vegetativa por hojas Este tipo de propagacin no es tan frecuente en la naturaleza como los dos anteriores. Sin embargo, es posible encontrarlo en las hojas de algunos helechos, que forman una especie de acodadura al entrar en contacto con el suelo; en otras especies, entre las que se encuentran las violetas africanas, se forman nuevos individuos a partir de las hojas que se desprenden y caen al suelo y que posteriormente desarrollan races adventicias (figura 16B). Propagacin vegetativa por estructuras florales En algunas plantas los meristemos apicales que normalmente se desarrollaran como flores se convierten en yemas vegetativas asociadas con races adventicias. Estas estructuras crecern independientemente al ser liberadas de la planta progenitora. La produccin de yemas vegetativas en lugar de flores se conoce como prolificacin o falsa viviparidad. Los bulbilos son yemas axilares de consistencia carnosa que almacenan reservas. En algunas especies de cebolla los bulbilos se forman en lugar de las flores, mientras que en algunas especies de agave las inflorescencias son reemplazadas por cientos de bulbilos. El nombre de estas estructuras de propagacin vegetativa se debe a que visualmente se parecen a los bulbos, pero su color es verde; cuando estn sobre la planta progenitora carecen de races adventicias, las cuales se desarrollan cuando los bulbilos son liberados. PROPAGACIN VEGETATIVA INDUCIDA Como hemos visto, la potencialidad de las plantas para generar nuevos individuos a partir de segmentos de su organismo est distribuida ampliamente en las plantas de muchos ambientes. Para muchas especies la reproduccin asexual predomina sobre la sexual, y es que las condiciones de su ambiente hacen muy improbable que la semilla llegue a generar una planta capaz de establecerse debido a las limitaciones de recursos fundamentales como el agua, la luz o la competencia con las plantas establecidas. Un caso bien conocido en nuestro pas es el de las cactceas y otras plantas de las zonas ridas que presentan muchas de las estructuras reproductivas antes citadas. Por ejemplo, los nopales se reproducen fcilmente en forma natural a partir de segmentos del tallo, que tienen una forma muy peculiar y se les conoce como pencas, y en trminos botnicos como cladodios. stos se desprenden espontneamente o a consecuencia de algn hecho traumtico y enraizan en forma natural, lo que constituye en muchos casos el principal mecanismo de reproduccin de estas plantas (figura 17).

Figura 17. Propagacin vegetativa por medio de los cladodios de plantas de nopal (segmentos del tallo).

Con base en la potencialidad presente en la naturaleza en lo que respecta a la propagacin vegetativa de las plantas, se han desarrollado mtodos de propagacin inducida, cuya complejidad va desde las tecnologas ms rsticas hasta los mtodos ms tecnificados. ENRAIZAMIENTO DE SEGMENTOS Esta tcnica de propagacin tiene muchas ventajas y se emplea exitosamente sin necesidad de gran inversin econmica. La tcnica ms comn es la induccin de la formacin de races en una seccin del tallo o de la rama, de manera que se origine una planta independiente. En los casos en que se ha experimentado propagar rboles mediante la enraizacin a partir de segmentos se ha tenido xito en ms de 80 por ciento. Segn la parte de la planta de donde se obtienen los segmentos (cortes o fragmentos) se ha dividido en cortes de: hojas, de brotes o renuevos, de raz y de ramas. La seleccin de cualquiera de ellos depende bsicamente de las caractersticas inherentes a cada especie, de las facilidades para obtener y manipular los cortes (en funcin del estado fenolgico de la planta), del propsito de la propagacin y de la disponibilidad de recursos econmicos. A continuacin se mencionan algunas de las caractersticas de los diferentes tipos de cortes: 1) Cortes de hojas. Algunas especies herbceas, como las violetas africanas y las peperomias, producen races a partir de sus hojas y posteriormente tallos; sin embargo, esto no ocurre con facilidad en la mayora de los rboles. Los cortes que incluyen adems de la hoja una yema axilar y un fragmento de rama son adecuados para propagar algunas plantas como las camelias y los rododendros, que son especies leosas y tambin se utilizan para propagar rboles cuando la cantidad disponible de otro tipo de segmentos es escasa. 2) Cortes de raz. La capacidad de muchos rboles de producir ramas a partir de sus races (en condiciones adecuadas de crecimiento) se utiliza para propagar algunas plantas, como los pltanos y los guayabos. 3) Cortes de ramas. La propagacin vegetativa mediante segmentos de ramas o brotes es uno de los mtodos ms usados para propagar plantas leosas en vivero. Segn las

caractersticas de madurez de la madera de donde se obtienen las ramas o brotes, los cortes se han dividido en cortes son: de maderas duras, semiduras y suaves. Aunque las diferentes fases de maduracin se presentan de manera continua, generalmente se distinguen por la forma y el color de las hojas y por los cambios de coloracin del tallo o ramas. Las tcnicas de propagacin de rboles por medio de cortes de ramas se dividen en dos tipos bsicos: de segmentos foliados y de segmentos defoliados. Cada uno de stos utiliza cortes de madera con un grado de maduracin diferente, y como proceden de rboles de contrastante ciclo fenolgico, esta diferencia se relaciona con la acumulacin de reservas en los tejidos del tallo. En los rboles caducifolios, de los cuales se obtienen los segmentos defoliados, antes de la cada de las hojas hay acumulacin de reservas, las cuales estn destinadas a formar posteriormente hojas nuevas. A partir de estas reservas se generan las races y las hojas en el segmento; en cambio, los segmentos foliados por lo general proceden de rboles de hoja perenne, que no acumulan reservas en el tallo y que deben continuar fotosintetizando para producir los recursos necesarios para generar nuevo crecimiento. Enraizamiento de segmentos defoliados Esta tcnica de reproduccin vegetal se da espontneamente en la naturaleza cuando una rama o fragmento de una planta cae al suelo y logra enraizar otra vez y producir as un nuevo individuo. Tambin se le ha empleado desde tiempos inmemoriales por los horticultores para la propagacin de rboles de ornato y frutales; un ejemplo de este mtodo son las cercas vivas de palo mulato o colorn, que vemos alrededor de potreros y cultivos en el trpico mexicano. Para la construccin de estas cercas los campesinos cortan los segmentos o ramas al efectuar los desmontes, los almacenan en un lugar fresco y sombreado y los plantan al principio de la poca de lluvias. Los rboles que ms fcilmente se propagan de esta manera son los que presentan una fase fenolgica de defoliacin y latencia meristemtica al final de la poca favorable para el crecimiento, como muchos rboles de las selvas bajas caducifolias y subcaducifolias, los cuales tienen la posibilidad de enraizar a partir de segmentos defoliados; por ejemplo, el cacahuananche, el palo mulato, el ciruelo amarillo de tierra caliente y el colorn, entre otras. En ocasiones, esta forma de propagacin tambin es adecuada para algunas leosas no deciduas de hojas angostas. El mtodo consiste bsicamente en cortar ramas o pencas y plantarlas en el suelo hmedo para provocar su enraizamiento. Este ocurre fcilmente sin necesidad de emplear sustancias enraizadoras, ya que al encontrarse en un estado de latencia meristemtica, al volver al estado de crecimiento los propios cambios hormonales que ocurren en el segmento desencadenan la produccin de races en la superficie que est en contacto con el suelo. Los cortes se obtienen de ramas de crecimiento de la estacin anterior y se realizan cuando la etapa de crecimiento cesa y la abscisin de hojas se ha presentado (finales de otoo o en el invierno). Debido al tamao de los segmentos y a las condiciones de lignificacin de la madera (madera dura), los cortes no se deshidratan y conservan la humedad el tiempo suficiente para generar un nuevo crecimiento de races y ramas.

A continuacin se enumeran los pasos y criterios que se deben considerar para realizar esta actividad: 1) Seleccionar donantes vigorosos y sanos con alta cantidad de reservas alimenticias, preferentemente de un banco de plantas donantes que han crecido en condiciones de completa iluminacin y que por lo tanto contienen alta cantidad de reservas alimenticias. 2) Elegir los segmentos basales o centrales de la rama, que son los que tienen ms reservas alimenticias necesarias para el desarrollo de las nuevas races, pues de ellos se derivan las ramificaciones secundarias. Por ello no se deben elegir ramas con entrenudos muy largos o de ramas pequeas y dbiles. 3) El tamao de los segmentos vara entre 15 y 75 cm de largo, el criterio adecuado para elegirlo depende de la especie, ya que se requiere que se incluyan por lo menos dos nudos, aunque lo recomendable es de cuatro a seis, sobre todo cuando los entrenudos son muy cortos. El dimetro de las ramas en que se realizan los cortes puede ser de 0.6 a 5 centmetros. 4) El corte basal se hace justo abajo de un nudo (sitio donde preferentemente se forman races adventicias) y el corte superior se realiza de 1.3 a 2.5 cm arriba del otro nudo. El corte puede ser de mazo (incluye una seccin del tallo de madera ms vieja), de taln o tacn (la porcin de madera vieja es ms pequea) y el recto (no incluye madera vieja) (figura 18).

Figura 18. Se sealan en la parte superior las partes de una estaca y en la porcin inferior los tipos de corte utilizados para la obtencin de estacas: a) recto, b) taln o tacn y c) mazo.

5) Empaquetar las estacas cuidando su orientacin, para mantener su polaridad y permitir que el flujo de savia siga su direccin normal. Por eso se marca la base con un corte sesgado o se baa la base con cera, lo cual ayuda tambin a evitar la prdida de humedad, que podra propiciar enraizamientos pobres. 6) El enraizamiento de segmentos defoliados ocurre fcilmente, ya que el propio ciclo fenolgico hace coincidir la produccin de hormonas de crecimiento con el periodo de enraizamiento y crecimiento de yemas del segmento. Aun as, se favorece notablemente el enraizamiento si se emplean hormonas y algunos procedimientos para asegurar el desarrollo rpido de los segmentos. Las sustancias ms usadas para acelerar el enraizamiento son el cido naftalenactico (ANA) y el cido indolbutrico (AIB), de los cuales se hablar posteriormente. El enraizamiento tambin se favorece colocando los segmentos a temperatura baja (5-8C) por algunas semanas, ya que esto estimula la sntesis de hormonas en plantas que proceden de climas en los que hay una estacin fra. Finalmente, para lograr un buen enraizamiento hay que escoger los segmentos con las caractersticas ptimas de madurez de la madera y que carezcan de hojas. 7) Para la siembra se eligen terrenos que renan las caractersticas sugeridas en el captulo III. Algunas opciones para preparar y manipular las estacas antes de la plantacin se presentan en el cuadro 22. CUADRO 22. Mtodos de preparacin y manipulacin de los segmentos o cortes defoliados previos a su plantacin definitiva.

Enraizamiento de segmentos foliados Segn las condiciones de lignificacin de la madera los segmentos foliados se dividen en: cortes de maderas blandas (meristemos), cortes de maderas semiduros (parcialmente maduros) y cortes de maderas duras siempre verdes (lignificados). Cualquiera de stos llevan hojas o brotes meristemticos (material fisiolgicamente juvenil) y su tamao es mucho mas pequeo que los defoliados. Las especies que se propagan con esta tcnica son la caoba, el zapote negro, el chicozapote y el bar, entre muchos otros ms. Debido a la presencia de hojas que continan transpirando activamente y a las condiciones diferenciales de madurez en las ramas jvenes, los segmentos pueden deshidratarse muy fcilmente. Por esto, es necesario mantenerlos en compartimientos sombreados y hmedos hasta que enraizan y toman del suelo suficiente agua. Siempre es necesario emplear sustancias enraizadoras como el cido indolbutirico (AIB) o el naftalenactico (ANA) y con frecuencia es indispensable mantener los segmentos recin plantados bajo agua nebulizada para evitar la deshidratacin. Segmentos foliados de maderas blandas Los cortes se seleccionan en la estacin de crecimiento, antes de que se presente la lignificacin, y son tomados de los renuevos tempranos o de ramas jvenes generadas a finales de la primavera y principios del verano. Esto significa que las ramas se encuentran en crecimiento activo, por lo que en su acopio y manipulacin se deben tener cuidados especiales. La clave para el xito es mantener los cortes turgentes, desde el periodo de colecta hasta que son puestos a enraizar en dispositivos diseados especialmente para que las estacas mantengan la turgencia. Se ha encontrado en varias especies que los segmentos provistos de meristemos cercanos al tronco principal, o al eje de crecimiento apical tienen mayores probabilidades de enraizar que las puntas de las ramas distantes. Otras veces, los ejes de crecimiento que surgen de un pice podado son los que presentan mayor potencial de enraizamiento. Esto vara en funcin de la especie y de la tcnica utilizada, por lo que se debe probar cul es la fuente de material que origina las estacas juveniles (suculentas), no lignificadas, ms adecuadas. Pueden ser: rebrotes de tocones, rebrotes basales de rboles en pie, rebrotes de plantas jvenes y pices de rboles podados. En cualquiera de estos casos se produce cierto nmero de brotes laterales con crecimiento vertical (los que no presentan crecimiento vertical deben desecharse), que se utiliza como fuente de estacas. Se deben considerar tres aspectos para realizar este tipo de propagacin: a) la eleccin y manejo de la planta donante, b) la obtencin de las estacas y c) el enraizamiento y establecimiento del segmento. A continuacin se detallan estos puntos: Eleccin y manejo de la planta donante Las plantas donantes deben ser vigorosas, sanas y estar sujetas a un buen manejo para asegurar la produccin continua y prolongada de gran nmero de estacas de fcil enraizamiento.

Se pueden cosechar brotes de una misma planta donante cada dos o tres meses, pero no se recomienda hacer cosechas muy frecuentes, pues se afectaran las reservas alimenticias de la planta, su sistema radicular y la fertilidad del suelo. La planta donante debe ser fertilizada con regularidad y mantener por lo menos una rama con hojas que pueda continuar fotosintetizando y que de esta manera sirva como brote alimentador para la planta donante. Tambin debe mantenerse en la sombra, al menos por unas semanas, lo cual favorecer el futuro enraizamiento de las estacas, ya que en esta situacin la planta no padece estrs hdrico. Obtencin de estacas Para obtener y manipular adecuadamente las estacas deben tomarse en cuenta varios factores: la alta humedad del aire, la intensidad moderada de luz, con temperaturas estables, un medio favorable de enraizamiento, y una proteccin adecuada contra el viento, las pestes y las enfermedades. Sobre todo debe evitarse la deshidratacin, pues los cortes con hojas pierden rpidamente agua por medio de la transpiracin, aun cuando exista una alta humedad relativa. Y es que, como no tienen races, la absorcin de agua es mucho ms lenta, y esto afecta el estado de hidratacin de la estaca. A continuacin presentamos unas recomendaciones para obtener los cortes de la planta donante: 1) La obtencin de ramas de la planta donante debe realizarse por la maana o por la tarde (antes de las 10 am o despus de las 4 pm), con la finalidad de evitar la prdida de agua durante las horas de mayor insolacin. 2) Es conveniente que la poda de las ramas elegidas (con crecimiento vertical) se realice a la altura de los 10 nudos o menos, como en el caso de los brotes obtenidos de tocones. Cuando se dificulte distinguir el nmero de nudos es recomendable tomar como criterio una altura del brote o rama, desde 10 cm hasta 1 m, para asegurar una mayor capacidad de enraizamiento (figura 18). 3) Las hojas de las ramas de donde se obtendrn los cortes deben tener entre 8 y 10 cm de largo, de lo contrario hay que reducir el rea foliar, debido a que hojas muy grandes favorecen la prdida de agua y las muy pequeas no producen suficientes carbohidratos u otras sustancias necesarias para que el corte sobreviva. Se puede reducir el rea foliar cortando las hojas con unas tijeras y cuidando que el tejido no se dae por machacamiento o estrujamiento (figura 19).

Figura 19. Proceso de obtencin de estacas de la planta donante y manipulaciones de los cortes. Las estacas ms fcilmente enraizables son las que se obtienen de rebrotes en troncos cortados. Hay formas correctas e incorrectas de resegmentar los rebrotes que se muestran a la izquierda. Es importante mantener hmedos los segmentos durante su transporte.

4) Ya cortados los brotes se marcan con el nmero de la planta donante (nmero de clon), se introducen lo ms rpidamente posible en bolsas de plstico con algn material que retenga bastante agua y se cierran para evitar la prdida de humedad. Deben mantenerse en un sitio fresco y sombreado y en cuanto sea posible se trasladan al rea de enraizamiento del vivero. 5) Al extraer los brotes para hacer los cortes deben mantenerse hmedos y frescos, exponindolos lo menos posible al viento, ya que ste incrementa la prdida de humedad. Los cortes deben hacerse con instrumentos filosos, en forma oblicua por arriba del nudo, o bien rectos para evitar que el sistema radicular se forme de un slo lado. La longitud ptima de las estacas es usualmente entre 3 y 10 cm. Independientemente del tipo de corte o tamao, stos siempre debern contar al menos con una hoja en la punta de la estaca, para que sta proporcione nutrientes y otras sustancias necesarias para el enraizamiento. Enraizamiento y establecimiento El rea donde se colocarn las estacas para el enraizamiento debe ser fresca y sombreada. La temperatura ptima para que ocurra se encuentra entre los 20 y 25C. Cuando las temperaturas suben arriba de 30C la humedad relativa de la atmsfera o contenido de vapor de agua presente en el aire tendr que ser muy alto (ms de 90%) para impedir que las plantas pierdan demasiada agua al incrementarse su transpiracin y terminen marchitndose. La sombra se puede producir con materiales de origen vegetal como hojas de palma, paja, ramas secas, o con mallas plsticas especiales diseadas para ese propsito. Es importante que el material utilizado transmita una luz que sea apropiada para activar la fotosntesis de las plantas.

1) Induccin del enraizamiento Como se mencion, no todas las plantas tienen la capacidad de enraizar espontneamente, por lo que a veces es necesario aplicar sustancias hormonales que provoquen la formacin de races. Las auxinas son hormonas reguladoras del crecimiento vegetal y, en dosis muy pequeas, regulan los procesos fisiolgicos de las plantas. Las hay de origen natural, como el cido indolactico (AIA), y sintticas, como el cido indolbutrico (AIB) y el cido naftalenactico (ANA). Todas estimulan la formacin y el desarrollo de las races cuando se aplican la base de las estacas. La funcin de las auxinas en la promocin del enraizamiento tiene que ver con la divisin y crecimiento celular, la atraccin de nutrientes y de otras sustancias al sitio de aplicacin, adems de las relaciones hdricas y fotosintticas de las estacas, entre otros aspectos. La mayora de las especies forestales enraizan adecuadamente con AIB, aunque se ha observado que para algunos clones la adicin de ANA resulta ms benfica. Un mtodo sencillo es la aplicacin de la hormona por medio del remojo de la base de las estacas (de 2 a 3 cm) en soluciones acuosas y con bajas concentraciones de auxina (de 4 a 12 horas), segn las instrucciones de los preparados comerciales. Sin embargo, este mtodo es lento y poco exacto, difcil de realizar cuando los cortes son numerosos y algunas veces las hojas se marchitan durante el proceso; entonces se puede recurrir a las auxinas disponibles en aerosol. Para las especies forestales tropicales se recomienda la inmersin de la base de las estacas en soluciones de AIB al 4% en alcohol etlico como solvente, por periodos muy cortos (5 segundos). Posteriormente se acomoda la base de la estaca en aire fro para evaporar el alcohol, antes de colocarlas en el propagador (figura 20).

Figura 20. Aplicacin de auxinas solubilizadas en alcohol a los segmentos, evaporacin del alcohol de los segmentos y siembra en el propagador rstico.

2) Propagadores y medios de enraizamiento. El ambiente en el cual las estacas son puestas a enraizar es de vital importancia. Los propagadores deben reunir caractersticas que eviten cualquier desecacin en las estacas. Un propagador es una construccin que evita la prdida de agua del medio que rodea a las estacas. Su funcin es similar a la de un almcigo, pues ambos propician las condiciones ambientales adecuadas para la germinacin y establecimiento de las plntulas o para el enraizamiento de las estacas, segn sea el caso de que se trate. Hay propagadores con sistemas de aspersin de alto costo que regulan automticamente la frecuencia y la intensidad de la aspersin. Se instalan en invernaderos con control de luz y humedad. Sin embargo, la humedad tambin se puede controlar de manera sencilla en un compartimiento que tenga una tapa transparente para permitir el paso de la luz y evitar la prdida de humedad; el fondo del compartimiento se cubre con una mezcla de arena y grava saturadas de agua, sobre la cual se pone el medio de enraizamiento. Adicionalmente se debe reducir la insolacin del dispositivo y dar aspersiones manuales peridicas (figura 21).

Figura 21. Aspecto del propagador rstico y composicin del medio de enraizamiento para las estacas.

3) Sustrato de enraizamiento. Un buen medio de enraizamiento se obtiene con arena gruesa o grava fina, que debe estar limpia (aunque no necesariamente estril) hmeda

y bien aereada. Si su capacidad de retencin de agua es baja se puede mejorar adicionando aserrn (no demasiado fresco), turba, vermiculita u otros materiales (vase el captulo III). En el caso de haber inicios de pudrimiento en las estacas ser necesario aplicar algn fungicida al medio de enraizamiento. 4) Siembra de las estacas en el propagador. Las estacas ya preparadas se siembran rpidamente pero tomando en cuenta las siguientes indicaciones: los cortes deben colocarse a una profundidad de 2 a 3 cm; para asegurar que queden firmes es necesario compactar un poco el sustrato de enraizamiento; cuando se utilizan estacas multinodales con varias hojas se debe evitar que las hojas inferiores queden en contacto con el medio de enraizamiento para evitar la putrefaccin. 5) Trasplante y acondicionamiento de las estacas. En varias especies propagadas vegetativamente se ha observado que el enraizamiento de las estacas se inicia despus de dos semanas, y est lo suficientemente desarrollado despus de 4 a 6 semanas (cuando las races miden de 1 a 2 cm) (figura 22). Las estacas que enraizan en tiempos ms largos son dbiles y no deben conservarse. El trasplante de las estacas tiene que hacerse inmediatamente despus de ser removidas del medio de enraizamiento. Al sacar las estacas de su medio hay que tener cuidado de no daar las races, despes se verifica que el sistema radical tenga tres races como mnimo y que su distribucin sea radial. Cuando las estacas presenten una o dos races, o bien cuando el sistema radical se forme slo de un lado se deben desechar, para no poner en riesgo el vigor o una adecuada forma de crecimiento.

Figura 22. Segmento foliado enraizado.

Posteriormente se pasan a recipientes que contengan sustrato aereado y con buena fertilidad. Es recomendable agregar tierra del sitio donde naturalmente crece la especie para as favorecer la inoculacin de la microflora apropiada. Es necesario estabilizar los trasplantes adecuadamente, para lo cual los envases deben llenarse con el medio de crecimiento aproximadamente a la mitad de su capacidad. La estaca se coloca en el envase en posicin correcta (con la yema al ras del suelo y en su mayor parte dentro del medio del envase) y se termina de llenar. Esto ayuda a que no queden espacios de aire en su base y a que las races no se daen, lo que asegura que stas queden bien distribuidas en el envase (sin curvaturas o enrollamientos). Cuando hay ms de una yema se recomienda eliminar algunas con el fin de asegurar la formacin de plantas con un slo eje y favorecer que el eje se desarolle en forma recta (figura 23).

Figura 23. Proceso de trasplante de estacas del propagador a los envases de crecimiento.

Algunas estacas recin enraizadas se deshidratan al pasarlas directamente al medio externo, por lo que se recomienda dejar los envases unos das ms en el propagador, protegiendo a ste con plstico para evitar su contaminacin con el material de los envases. En el periodo en que las estacas se aclimatan a las condiciones ambientales que existen fuera del propagador es conveniente colocarlas primero en un ambiente sombreado y hmedo por dos o tres semanas, y despus exponerlas paulatinamente a condiciones decrecientes de humedad y crecientes de luz y temperatura. Segmentos foliados de maderas semiduras y segmentos foliados de maderas duras siempre verdes La diferencia entre este tipo de segmentos y los de maderas blandas estriba en las condiciones de lignificacin de las ramas y en la poca del ao en que stas se obtienen de la planta donante. El uso de esta tcnica es muy importante en la propagacin vegetativa de varias especies de pino, las especies siempre verdes de hoja angosta con maderas duras, y en la propagacin de rboles siempreverdes de hoja ancha. Para el enraizamiento de este tipo de segmentos hay que seguir las mismas indicaciones que se mencionaron para el manejo y seleccin de brotes en las plantas donantes de maderas blandas, as como tambin para la manipulacin y cuidado de los cortes y evitar as el estrs hdrico en las estacas. Sin embargo existen algunas diferencias en el manejo de los cortes de especies siempreverdes de hoja ancha y de hoja angosta. Especies siempreverdes de hojas anchas En el caso de los segmentos de maderas semimaduras, las ramas de especies siempreverdes de hojas anchas se obtienen en el verano, cuando el crecimiento empieza a declinar y la madera se encuentra parcialmente madura. Los cortes pueden tener longitudes de 7.5 a 15 cm, y las hojas de la punta de la estaca se conservan, si stas son muy grandes se debe disminuir su tamao (figura 24).

Figura 24. Segmentos foliados siempre verdes de hojas angostas y de hojas anchas.

Segmentos de maderas duras siempre verdes de hojas angostas Para los segmentos de maderas duras siempre verdes de hojas angostas el enraizamiento toma mucho tiempo (desde varios meses hasta un ao) y es muy importante evitar que las estacas sufran estrs hdrico durante este periodo. Los cortes se obtienen de plantas donantes jvenes, ya que este factor es determinante para tener xito. Generalmente los cortes se realizan en ramas terminales, de la poca de crecimiento pasada, a finales de otoo o bien en invierno. La longitud de las estacas vara de 10 a 20 cm, y hay que tener cuidado de remover las hojas de la mitad de la estaca hacia la base (figura 24). A diferencia de los segmentos foliados de maderas blandas estos dos ltimos tipos de cortes requieren un medio de enraizamiento que incluya mezclas de vermiculita, y turba en proporcin 1:1, o bien de perlita y vermiculita que proporcionan nutrientes y mayor humedad. Adems, el enraizamiento se puede favorecer aplicando calor a la base de las estacas (24 a 26.5C). Esto es particularmente favorable para las especies de hoja angosta. Asimismo, para estos ltimos cortes la aplicacin de AIB a altas concentraciones es usualmente benfico para incrementar la velocidad y porcentaje de enraizamiento, adems de favorecer el desarrollo de sistemas radiculares robustos. Ambos tipos de cortes, los de hojas anchas y angostas, enraizan mejor en invernaderos con sistemas de aspersin automticos o bajo propagadores rsticos, en condiciones de alta iluminacin y humedad relativa, o bien, bajo ligeras nebulizaciones. INJERTO La tcnica de injerto consiste en tomar un segmento de una planta, por lo general leosa, e introducirlo en el tallo o rama de otra planta de la misma especie o de una especie muy cercana, con el fin de que se establezca continuidad en los flujos de savia bruta y savia elaborada, entre el tallo receptor y el injertado (figura 25). De esta manera, el tallo injertado forma un tejido de cicatrizacin junto con el tallo receptor y queda perfectamente integrado a ste, pudiendo reiniciar su crecimiento y producir hojas, ramas y hasta rganos reproductivos. Esta tcnica es muy antigua y ya era practicada por los horticultores chinos desde tiempos remotos. Tiene grandes ventajas, sobre todo para el cultivo de rboles frutales y de ornato, pues permite utilizar como base de injerto plantas ya establecidas que sean resistentes a condiciones desfavorables y enfermedades, utilizndolas como receptoras de injertos de plantas ms productivas y con frutos de mejor calidad y mayor produccin. }

Figura 25. Existen diversas tcnicas de injerto que permiten la unin de segmentos de dos individuos diferentes: a) injerto de una rama sobre una incisin lateral de un tallo, b) injerto de una yema en la corteza de un tallo, c) injerto de un tallo sobre otro.

Al contrario de lo que generalmente se cree, el injerto no produce una combinacin de caractersticas entre la planta receptora y la injertada. Los frutos de la planta injertada no cambian sus propiedades ni su sabor, la nica ventaja es que el injerto permite utilizar bases ya desarrolladas, lo que acelera la produccin de frutos. Tambin se aprovecha la resistencia (a enfermedades o condiciones desfavorables) de variedades de rboles frutales de menor calidad, para injertar en ellos variedades de mayor calidad pero menos resistentes. El injerto es una forma particular de reproduccin asexual por segmentos que se utiliza en gran escala en la fruticultura. Una de las industrias que recurren con mayor frecuencia a esta tcnica es la vitivinicultura o cultivo de la vid. Con gran frecuencia las plantas productoras de uvas de baja calidad, pero muy resistentes a la sequa y a las enfermedades, son injertadas con segmentos de vides de alta produccin y calidad. Esta tcnica es muy empleada para mejorar la produccin de viedos antiguos ya establecidos desde hace mucho tiempo. Las tcnicas de injerto son muy variadas y existe un mtodo ptimo para cada propsito y tipo de planta. En esencia todos los procedimientos consisten en tener a la disposicin buenas plantas receptculo y buenos segmentos que injertarle. La tcnica se inicia haciendo un corte en el tallo receptor y otro en el segmento a injertar, para que hagan contacto los tejidos vasculares del injerto con sus equivalentes en la planta receptora. Una vez realizado el injerto se protege la herida con una cera especial y se cubre con tela o con una cuerda para evitar que se desprenda. El tejido injertado por lo general est defoliado y es conveniente que el injerto coincida con la poca de primavera para que, al reiniciar el crecimiento de los tejidos, los estmulos hormonales que caracterizan ese momento de la vida de la planta induzcan el establecimiento de una conexin apropiada entre los tejidos de ambas partes.

Para que un segmento pueda injertarse sobre otra planta, como ocurre en los animales que reciben injertos de rganos, tiene que haber una afinidad entre los tejidos que van a ponerse en contacto para que el injerto no sea rechazado. Por esto el injerto slo es posible entre plantas de una misma especie, aunque sean de diferentes variedades o razas. A veces es posible el injerto entre especies diferentes, siempre y cuando stas sean muy cercanas entre s, o sea, que por lo menos pertenezcan al mismo gnero. MICROPROPAGACIN El desarrollo de las tcnicas de cultivo de tejidos vegetales, aunadas al descubrimiento de las hormonas de crecimiento y diferenciacin de las plantas auxinas y citoquininas , permiti el desarrollo de varias tcnicas de cultivo orientadas hacia la propagacin de plantas que son ahora de uso corriente en muchos laboratorios de investigacin del mundo y tambin en empresas de propagacin comercial. Estas tcnicas estn basadas en el hecho de que los tejidos vivos de las plantas conservan la potencialidad de dar origen a un organismo completo. Las clulas que conservan mejor esta potencialidad son las que estn menos diferenciadas hacia una funcin especfica, como las que estn presentes en las yemas y en otros tejidos primarios de las plantas, por ejemplo los extremos de las races, los segmentos nodales, las semillas, el parnquima del tejido vascular foliar, el cambium y algunas partes florales. La tcnica de cultivo de tejidos se inicia con la toma de segmentos de plantas en crecimiento que se esterilizan y se cultivan en soluciones nutritivas especiales, con frecuencia gelificadas. A estos medios se incorporan combinaciones adecuadas de hormonas de crecimiento para obtener una proliferacin celular en el segmento. A partir de esta proliferacin puede ocurrir la formacin directa de races y tallos que originen una o varias plantas nuevas completas (figura 26). Tambin es posible inducir la multiplicacin de las clulas germinales del explante para formar un cmulo de tejido poco diferenciado llamado callo o una estructura peculiar carente de paredes celulares llamada protoplasto, cada uno de los cuales se emplea en diversos procedimientos de propagacin.
Figura 26. Del explante (a) se obtienen yemas (b) que se desarrollan formando tallos adventicios (c, d, e). Estos tallos pueden aislarse para lograr su diferenciacin y despus trasplantarse a recipientes con suelo (f-j).

El cultivo de tejidos y clulas vegetales tiene otras aplicaciones ms o menos relacionadas con la propagacin clonal. Entre stas se encuentra la obtencin de lneas de plantas genticamente muy uniformes, con fines experimentales; el almacenamiento o transporte de germoplasma vegetal (de lo cual trataremos ampliamente ms adelante); el control cada vez ms importante de infecciones sistmicas crnicas en las plantas mediante la obtencin de propgulos libres de virus y otros agentes infecciosos. En la ingeniera gentica moderna el cultivo de tejidos tiene importancia en los procesos de transgnesis, hibridacin interespecfica y en la generacin y seleccin de variantes genticas de las plantas. Cada uno de estos temas es de gran complejidad y se necesitara una obra mucho ms extensa para hablar de ellos, lo cual no es el propsito de este libro. Aqu se vern los aspectos relativos al cultivo de clulas y tejidos vegetales exclusivamente en lo que respecta a las tcnicas ms sencillas de micropropagacin de rboles actualmente en uso en laboratorios de tecnologa sencilla en muchos lugares del mundo. Por mucho tiempo las tcnicas de micropropagacin han sido consideradas demasiado complicadas para convertirse en una opcin viable para la propagacin de rboles en regiones tropicales subdesarrolladas. Sin embargo, tal punto de vista es poco realista ya que existen mtodos de micropropagacin que slo requieren recursos tcnicos e instalaciones mnimas. La bibliogrfia cientfica moderna contiene innumerables trabajos que describen tcnicas de cultivo de tejidos y rganos vegetales en medios complejos y finamente formulados, colocados en condiciones ambientales controladas con mucha precisin. Esto no sucede con las tcnicas sencillas de micropropagacin que rara vez se describen en los libros especializados disponibles. Yesto es un grave error, pues una vez que se ha probado que una especie de planta puede ser micropropagada exitosamente, los procedimientos de micropropagacin se simplifican y se vuelven accesibles para las instalaciones sencillas que se encargan de la propagacin de plantas. Los procedimientos ms usados por los laboratorios de micropropagacin son cuatro mtodos diferentes para multiplicar plantas in vitro: 1) la activacin de la ramificacin axilar, 2) los segmentos nodales, 3) los tallos adventicios y 4) las embriognesis somticas. De los cuatro, este ltimo es el que se utiliza menos. Las tcnicas que dan los mejores resultados varan dependiendo de las especies y del propsito por el cual se propagan. 1) Activacin de la ramificacin axilar (figura 27A). Quiz sea el mtodo ms frecuentemente usado; en l se emplean meristemos tanto terminales como axilares del tallo para establecer los cultivos. Manipulando el cultivo mediante cambios en su ambiente qumico (hormonas) y en el fragmento que se cultiva, se suprime la dominancia apical y se induce la ramificacin axilar. Subsecuentes subdivisiones del cultivo en fragmentos permiten multiplicar los explantes hasta alcanzar el nmero deseado de tallos. A pesar de que la multiplicacin inicial es lenta, se incrementa rpidamente permitiendo varios subcultivos. Los tallos seccionados del cultivo pueden enraizar in vitro o directamente en el suelo. 2) Segmentos nodales (figura 27B). El mtodo de los segmentos nodales tiene la ventaja de que genera poca variacin gentica en las muestras, ya que en ningn momento se forma tejido calloso. Se inicia escindiendo segmentos de tallo con su correspondiente

yema axilar. En el cultivo las yemas crecen y se alargan produciendo nuevos segmentos nodales susceptibles de ser a su vez escindidos. En un momento determinado los segmentos nodales producidos pueden dar origen a tallos y races ya sea in vitro o en el suelo, mediante una alteracin de la composicin hormonal del medio. Muchas plantas no pueden ser propagadas exitosamente de esta manera.

Figura 27. Tipos de propagacin por cultivo de tejidos: A) activacin de la ramificacin axilar, B) segmentos nodales, C) tallos adventicios y embriognesis somtica.

3) Tallos adventicios (figura 27C). Pueden ser inducidos a partir de callos originados por explantes de ramas u hojas y continuarse cultivando hasta obtener un gran nmero de callos, simplemente cambiando el ambiente hormonal en el que se desarrolla el callo original o subsecuentes fragmentos de ste. Los tallos obtenidos pueden enraizar in vitro o en el suelo. De todos los mtodos de propagacin ste es el que genera ms variabilidad gentica debido a que se utiliza un estadio calloso intermediario, por lo que no se recomienda para la micropropagacin de plantas en las que la integridad gentica es muy importante. Al formarse el callo ocurre una desdiferenciacin completa del tejido vegetal, que frecuentemente conlleva a la alteracin gentica, lo cual induce variabilidad en la informacin gentica entre las clulas del callo. 4) Embriognesis somtica (figura 27D). Embriones somticos o asexuales pueden resultar de un proceso de diferenciacin directa o indirecta a partir de clulas, rganos o estados callosos intermedios de una planta. Muchas veces los embriones somticos proliferan y producen embriones secundarios a partir de meristemos somticos, como las yemas axilares, partes de las flores o de semillas. Estos embriones adquieren una morfologa y comportamiento similar a los embriones naturales de origen sexual de las plantas y, como ellos, pueden germinar en el suelo. La embriognesis somtica puede convertirse en la forma ms eficiente de propagacin, ya que tericamente se obtendran millones de plantas a partir de una cantidad pequea de tejido en cultivo. La produccin de embriones somticos se ha estudiado a fondo slo en un nmero muy pequeo de especies. Los embriones obtenidos de esta manera pueden utilizarse para

producir semillas artificiales por medio del encapsulado con testas artificiales. Esta tcnica es muy prometedora, ya que potencialmente se incrementara de manera significativa la disponibilidad de propgulos de plantas valiosas de cultivo, se acortara el ciclo de crecimiento y se desarrollaran nuevos mtodos de conservacin y almacenamiento de germoplasma. La tcnica para producir embriones somticos se inicia con la produccin de un tejido calloso que, mediante el uso de combinaciones especiales de sustancias qumicas, da origen a un protoplasto en el que han desaparecido las paredes de la clula, asemejndose a un saco embrionario floral. Al colocar los protoplastos en el medio adecuado de cultivo comienzan a desarrollarse los embriones somticos a partir del protoplasto. Esta tcnica ha sido aplicada con xito a ciertos rboles tropicales, como el caucho, el mango y otros. Los embriones somticos pueden incluso encapsularse en testas artificiales para originar semillas sintticas que se cultiven en el suelo o utilizarse para la conservacin de germoplasma vivo por mucho tiempo, utilizando tcnicas de deshidratacin y vitrificacin, y conservacin en nitrgeno lquido. Esto es posible incluso en plantas que originalmente producen semillas recalcitrantes. Las tcnicas de cultivo de tejidos requieren instalaciones y precauciones con cierto nivel de complejidad. La higiene y desinfeccin son muy importantes para evitar la contaminacin microbiana de los cultivos. La formulacin de los medios de cultivo es variada, sin embargo, stos contienen fundamentalmente sales minerales de los macroelementos y oligoelementos como: calcio, potasio, magnesio, nitrgeno, fsforo, azufre, manganeso, hierro, cloro, sodio, zinc, boro, molibdeno y cobre, los cuales son indispensables para el crecimiento de las plantas. Adems, algunos medios incorporan compuestos orgnicos sencillos como fuentes de carbono (generalmente carbohidratos), reguladores hormonales del crecimiento (auxinas, citoquininas y giberelinas), otros reguladores del crecimiento (aminocidos y vitaminas) y a veces antioxidantes (cido ascrbico). En la figura 28 se indican todas las alternativas biotecnolgicas que surgen a partir del cultivo de tejidos.

Figura 28. Opciones biotecnolgicas para la propagacin de plantas que se originan a partir del cultivo de tejidos, en las que se incluyen tambin tcnicas de modificacin gentica.

SELECCIN CLONAL La micropropagacin y la propagacin vegetativa permiten emplear tcnicas de seleccin y mejoramiento de las caractersticas favorables de las plantas por medio de la seleccin clonal. Las caractersticas que pueden mejorarse cubren un amplio rango de posibilidades; por ejemplo, la resistencia de las plantas a la temperatura, a la sequa, a crecer en suelos pobres o con caractersticas desfavorables, como acidez o alcalinidad excesiva, salinidad alta o saturacin de humedad; tambin puede mejorarse el rendimiento del forraje y frutos, su sabor y calidad nutricional, la velocidad de crecimiento, la calidad de la madera producida y la concentracin de compuestos secundarios valiosos como sustancias qumicas, ltex, gomas, etc. A continuacin describimos brevemente las dos tcnicas bsicas de seleccin clonal: 1) Se buscan en la naturaleza las plantas que presenten la caracterstica deseada en forma ptima (por ejemplo, los frutos ms deliciosos y grandes), y se toma de ese individuo los meristemos o segmentos que se vayan a utilizar para la propagacin vegetativa, para as obtener muchos individuos con la caracterstica deseada. 2) Se recolectan semillas, segmentos o meristemos de muchos individuos de una o varias poblaciones de la especie que se desea propagar. Con este material se producen muchas plantas pequeas en un vivero y se someten a las condiciones desfavorables para las que se desea que tengan mayor resistencia; tambin se puede comparar su velocidad de crecimiento, su produccin de forraje o cualquier otra cualidad que se desee

resaltar. Se escogen los individuos que muestren las caractersticas ptimas segn el caso y se utilizan para propagarlos vegetativamente y obtener as individuos mejorados. Esta tcnica incluye la exploracin de las diversas poblaciones de una especie en el medio natural, ya que en el rea natural de distribucin geogrfica de una especie existe gran variacin en muchos de los atributos deseables de la especie. Siguiendo la segunda tcnica descrita ha sido posible obtener cultivos de rboles tropicales con caractersticas muy favorables. Por ejemplo, especies de acacia resistentes a la salinidad o al suelo cido; mezquites ornamentales resistentes al fro; especies de guaje productoras de abundante forraje de alta calidad y con rpido crecimiento en suelos pobres y, por ltimo, rboles maderables cuyo crecimiento est determinado por una fuerte dominancia apical. Esto permitir repoblar las selvas con individuos que producen un fuste o tronco recto y alto, muy apropiado para seguir tcnicas ptimas de aserrado y uso en ebanistera, como es el caso del nogal africano y la caoba americana (figura 29).

Figura 29. Seleccin clonal. En este caso se eligen los segmentos enraizados que muestran la mayor dominancia apical, es decir, los que tienden a crecer en un solo eje, y se desechan los que tienden a ramificar. De esta manera se obtienen rboles con un fuste recto que permite un mejor uso industrial.