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Las clulas requieren nutrientes del exterior y deben eliminar sustancias de desecho procedentes del metabolismo y mantener su medio interno estable. La membrana presenta una permeabilidad selectiva, ya que permite el paso de pequeas molculas, siempre que sean lipfilas, pero regula el paso de molculas no lipfilas. Los mecanismos de transporte pueden verse en el siguiente esquema:
1Transporte de molculas de baja masa molecular: 1.1 El transporte pasivo. Es un proceso de difusin de sustancias a travs de la membrana. Se produce siempre a favor del gradiente, es decir, de donde hay ms hacia el medio donde hay menos. Este tranporte puede darse por: 1.1.1DDifusin simple . Es el paso de pequeas molculas a favor del gradiente; puede realizarse a travs de la bicapa lipdica o a travs de canales protecos. 1.1.1.1Difusin simple a travs de la bicapa (1). As entran molculas lipdicas como las hormonas esteroideas, anestsicos como el ter y frmacos liposolubles. Y sustancias apolares como el oxgeno y el nitrgeno atmosfrico. Algunas molculas polares de muy pequeo tamao, como el agua, el CO2, el etanol y la glicerina, tambin atraviesan la membrana por difusin simple. La difusin del agua recibe el nombre de smosis 1.1.1.1Difusin simple a travs de canales (2).Se realiza mediante las denominadas protenas de canal. As entran iones como el Na +, K+, Ca2+, Cl-. Las protenas de canal son protenas con un orificio o canal interno, cuya apertura est regulada, por ejemplo por ligando, como ocurre con neurotransmisores u hormonas, que se unen a una determinada regin, el receptor de la protena de canal, que sufre una transformacin estructural que induce la apertura del canal.
Difusin facilitada (3). Permite el transporte de pequeas molculas polares, como los aminocidos, monosacridos, etc, que al no poder atravesar la bicapa lipdica, requieren queprotenas trasmembranosas faciliten su paso. Estas protenass reciben el nombre de protenas transportadoras o permeasas que, al unirse a la molcula a transportadora sufren un cambio en su estructura que arrastra a dicha molcula hacia el interior de la clula. 1.2eEl transporte activo (4). En este proceso tambin actan protenas de membrana, pero stas requieren energa, en forma de ATP, para transportar las molculas al otro lado de la membrana. Se produce cuando el transporte se realiza en contra del gradiente electroqumico. Son ejemplos de transporte activo la bomba de Na/K, y la bomba de Ca. 1.2.1 La bomba de Na+/K+ Requiere una protena transmembranosa que bombea Na+ hacia el exterior de la membrana y K+ hacia el interior. Esta protena acta contra el gradiente gracias a su actividad como ATP-asa, ya que rompe el ATP para obtener la energa necesaria para el transporte.
1.1.2
Por este mecanismo, se bombea 3 Na+ hacia el exterior y 2 K+ hacia el interior, con la hidrlisis acoplada de ATP. El transporte activo de Na+ y K+ tiene una gran importancia fisiolgica. De hecho todas las clulas animales gastan ms del 30% del ATP que producen ( y las clulas nerviosas ms del 70%) para bombear estos iones.
Para el transporte de este tipo de molculas existen tres mecanismos principales: endocitosis, exocitosis y transcitosis. En cualquiera de ellos es fundamental el papel que desempean las llamadas vesculas revestidas. Estas vesculas se encuentran rodeadas de filamentos proteicos de clatrina.
2.1 mediante una invaginacin de la membrana en la que se engloba la partcula a ingerir. Se produce la estrangulacin de la invaginacin originndose una vescula que encierra el material ingerido. Segn la naturaleza de las partculas englobadas, se distinguen diversos tipos de endocitosis. 2.1.1 Pinocitosis. Implica la ingestin de lquidos y partculas en disolucin por pequeas vesculas revestidas de clatrina. 2.1.2-Fagocitosis. Se forman grandes vesculas revestidas o fagosomas que ingieren microorganismos y restos celulares. 2.1.3-Endocitosis mediada por un receptor. Es un mecanismo por el que slo entra la sustancia para la cual existe el correspondiente receptor en la membrana. . Endocitosis: Es el proceso por el que la clula capta partculas del medio externo
Fagocitosis
Pinocitosis
contenido de la vescula al medio. Mediante este mecanismo, las clulas son capaces de eliminar sustancias sintetizadas por la clula, o bien sustancias de desecho.
En toda clula existe un equilibrio entre la exocitosis y la endocitosis, para mantener la membrana plasmtica y que quede asegurado el mantenimiento del volumen celular.
3.
Aqu tienes dos animaciones donde puedes ver como se deforma la membrana en los procesos de endocitosis y exocitosis
1 MEMBRANA CITOPLSMICA
1.1 COMPOSICIN QUMICA
La membrana citoplsmica bacteriana es la estructura de tipo bicapa proteo-lipdica que delimita al protoplasto. Su proporcin protenas: lpidos es superior a la de las membranas celulares eucariticas, llegando a alcanzar valores relativos de 80:20.
1.1.1
Las membranas procariticas, a diferencia de las de eucariotas, carecen de esteroles (con las salvedades de Cianobacterias, ciertas bacterias metilotrofas; adems, los micoplasmas presentan colesterol, pero lo secuestran de las clulas eucariticas a las que parasitan). Pero en cambio, en muchas bacterias existe una peculiar clase de compuestos policclicos, denominados hopanoides (triterpenoides pentacclicos) que parecen condicionar parte de la rigidez de las membranas citoplsmicas. Los hopanoides se sintetizan a partir del mismo tipo de precursores que los esteroles. (Por cierto, como dato curioso diremos que los sedimentos de combustibles fsiles como el petrleo presentan cantidades gigantescas de hopanoides, lo que confirma el papel que tuvieron las bacterias en su formacin).
1.1.2
LPIDOS
Abundan sobre todo los fosfolpidos derivados del cido fosfatdico: Fosfatidiletanolamina Fosfatidilglicerol cardiolipina (difosfatidilglicerol) En bacterias Gram-positivas, adems se encuentran glucolpidos y glucofosfolpidos. La composicin y proporcin concretas de los distintos tipos de lpidos son variables entre distintas cepas bacterianas, y dentro de cada cepa, en funcin de las condiciones de cultivo (temperatura, pH, etc.). Los cidos grasos esterificados con el glicerol en los fosfolpidos son principalmente: 1) saturados, como p. ej.: a) palmtico (16:0) b) mirstico (14:0) c) de cadena ramificada (muy frecuentes en muchas bacterias Gram-positivas) 2) monoinsaturados (sobre todo en Gram-negativas), como p. ej.: a) palmitoleico (cis-9, 16:1) b) cis-vaccnico (cis-11, 18:1) A diferencia de eucariotas, no existen cidos grasos poliinsaturados, con la excepcin de las Cianobacterias. Este grupo de bacterias fotosintticas tiene, adems, la capacidad de modificar mediante desaturasas el grado de saturacin de sus cidos grasos, lo que representa un mecanismo adaptativo frente a cambios de temperatura. Las bacterias pueden modificar la proporcin entre cidos grasos insaturados y saturados, con objeto de mantener un estado de fluidez adecuado en la membrana, como adaptacin a cambios de temperatura: a altas temperaturas, aumenta la proporcin de cidos grasos saturados, a bajas, aumenta la de los insaturados. Las bacterias psicrfilas (amantes del fro) presentan casi todos sus cidos grasos de tipo insaturado. En Arqueas, en lugar de los habituales lpidos a base de steres de cidos grasos con glicerol, existen lpidos a base de teres de alcoholes de cadena larga con glicerol (p. ej., difitanil-glicerol-diteres). Los alcoholes suelen ser derivados poliisoprenoides. Este tipo de membranas son ms rgidas que las de eubacterias. Incluso existen arqueas con
membranas a partir de tetrafitanil-diglicerol-tetratereres, que consituyen bicapas monomoleculares. Como ya vimos en el tema anterior, la membrana citoplsmica alberga un transportador lipdico de tipo politerpenoide, llamado undecaprenil-fosfato, presente en pequea cantidad (<1%). Igualmente se dan quinonas isoprenoides (como la menaquinona o la ubiquinona) que, como veremos en otro captulo, participan en cadenas de transporte de electrones. En algunas bacterias existen igualmente variedades de pigmentos carotenoides.
1.1.3
PROTENAS
Constituyen la mayor parte de la membrana bacteriana (hasta el 80% en peso seco). Existe una gran variedad de tipos de protenas en una misma bacteria (hasta 200), pero la composicin y proporcin concreta vara segn las condiciones de cultivo. Segn su localizacin en la membrana, y su grado de unin con la porcin lipdica, se distingue entre: protenas integrales de membrana (=endoprotenas): son protenas estrechamente unidas a la membrana, por lo general atravesadas en plena bicapa lipdica. Son difciles de extraer, tenindose que recurrir a detergentes y/o disolventes orgnicos para separarlas respecto de los lpidos. Las protenas integrales pueden desplazarse lateralmente en la bicapa lipdica, pero no son capaces de rotar, por lo que siempre presentan una determinada orientacin o polaridad. Algunas presentan hidratos de carbono que sobresalen hacia la superficie externa (glucoprotenas). Protenas perifricas (= epiprotenas): unidas a la superficie de la membrana, de forma ms dbil, por lo que son ms fciles de extraer y purificar. Incluso algunas establecen contactos slo transitorios con la membrana.
1.2 ESTRUCTURA
Mtodos de observacin y estudio A microscopio ptico, se recurre a la tincin con Azul Victoria. A microscopio electrnico, en cortes ultrafinos, se observan una estructura de unos 7 nm de grosor, con dos capas externas densas a los electrones limitando una capa central transparente. Los estudios mediante difraccin de rayos X y de resonancia magntica nuclear (RMN) demuestran una estructuracin bsica a base de cadenas de fosfolpidos en una bicapa, segn se describe a continuacin. Estructura Consiste en una bicapa lipdica, con los grupos polares (hidrfilos) hacia afuera, y las cadenas hidrofbicas de cidos grasos (o, en el caso de Arqueobacterias, de alcoholes) hacia adentro, ajustndose al modelo de mosaico fluido de Singer y Nicholson. Inmersas en esta bicapa se encuentran las abundantes protenas, que pueden moverse lateralmente en el
mosaico de molculas de lpidos, igualmente dotados de una rpida movilidad. Parece ser que no existe movilidad de lpidos entre las dos capas. La membrana citoplsmica es asimtrica (aunque no tanto como la membrana externa de Gram-negativas). Esto se traduce en el hecho de que muchos de los procesos que tienen lugar en la membrana sean vectoriales (tengan una direccin determinada).
1.3.1
Contiene todos los componentes requeridos para la transduccin de energa y la produccin de ATP, por procesos respiratorios. En el caso de una bacteria quimiotrofa, esto incluye: Deshidrogenasas cadenas de transporte de electrones (con quinonas, citocromos, etc.) ATP-asas (ATP sintasas/hidrolasas) Algunas bacterias fotosintticas anaerobias tambin incluyen este tipo de componentes en la membrana citoplsmica.
En un captulo posterior veremos en ms detalle cmo explica la teora quimiosmtica de Mitchell el acoplamiento entre el funcionamiento de las cadenas de transporte electrnico (o de la ATP-hidrolasa) y la generacin de un gradiente de protones a travs de la membrana (potencial electroqumico o fuerza protn-motriz), el cual a su vez puede: generar ATP (desarrollo de un trabajo qumico) promover transporte de ciertos nutrientes (trabajo osmtico) promover movimiento flagelar (trabajo mecnico).
1.3.4
BARRERA SELECTIVA
Mantiene la constancia del medio interno (impidiendo la salida de iones, metabolitos y macromolculas), pero simultneamente permite o promueve activamente la entrada de nutrientes y la salida de los productos de desecho o de ciertas molculas excretadas. La funcin de transporte de nutrientes ser tratada en detalle ms adelante en este captulo.
1.3.5
Se trata de un sistema por el que ciertas protenas son trasladadas a su localizacin definitiva en la membrana citoplsmica, por la intervencin de la protena YidC, que interacciona con zonas hidrofbicas de aquellas. Un ejemplo de protenas insertadas de este modo lo constituye la ATP-sintasa de eubacterias. Este sistema, al parecer filogenticamente primitivo, aparece en eubacterias, parte de arqueas (euriarqueas) y en mitocondrias (donde se denomina Oxa1) y cloroplastos (Alb3), pero no en eucariotas.
2) SISTEMA Sec
El sistema Sec es un sistema universal para la secrecin de protenas, es decir, aparece en los tres dominios de la vida, aunque con variantes en cada uno de ellos. Nosotros vamos a describir el caso de las eubacterias. Las protenas secretadas se sintetizan como pre-protenas dotadas en el extremo N-terminal de un pptido seal, de unos 20-30 aminocidos. Dicha zona consta a su vez de un extremo N-terminal cargado positivamente, seguida de un trecho hidrofbico, y termina con una zona ms polar dotada al final del sitio que va a ser roto por la peptidasa del lder. Cuando an est en el citoplasma, la pre-protena naciente se une a la protena SecB (una chaperona especfica de esta ruta), la cual impide que la pre-protena se pliegue totalmente. La protena SecA, que forma un homodmero, reconoce el complejo SecBpreprotena, y lo traslada al complejo de protenas de membrana SecYEG, que tiene un canal interior de unos 20-30 . (Al parecer el canal consta de 3-4 complejos SecYEG). Ahora, la protena SecA, con gasto de ATP, logra que los primeros 20-30 aminocidos de la pre-protena entren a travs del canal Sec, con lo que el pptido seal aparece por el lado exterior de la membrana. Una vez que el pptido seal asoma por el otro lado de la membrana, es cortado en el sitio especfico por la peptidasa lder, lo que ayuda a liberar al exterior la parte madura de la protena secretada.
3) SISTEMA SRP
El sistema SRP procaritico es mucho ms sencillo que el homlogo SRP que se encuentra en la membrana del retculo endoplsmico de eucariotas. En este sistema, el extremo Nterminal de la protena naciente es reconocido por la partcula de reconocimiento de seal, conocida por sus siglas SRP. La SRP eubacteriana consta de un pequeo ARN y una protena (Ffh). Una vez que la SRP reconoce el extremo N-terminal de la protena naciente, parece que provoca la detencin momentnea de la traduccin, y conduce a esa protena naciente hasta el receptor de la partcula SRP (SR), a nivel de membrana citoplsmica. A su vez esto provoca la interaccin del pptido naciente con el complejo Sec, que ser el que logre la secrecin o insercin en membrana de la protena madura.
4) SISTEMA Tat
Este sistema se ha empezado a caracterizar recientemente, y solo se ha descubierto en procariotas y en cloroplastos, pero no en mitocondrias ni en eucariotas. Se caracteriza por trasladar al exterior (o al espacio periplsmico de Gram-negativas) protenas ya en su configuracin nativa, y en su caso, dotadas ya de sus cofactores (grupos FeS,
molibdopterina, cofactores nucleotdicos, etc.). Es decir, a diferencia de los anteriores, las protenas se pliegan /y en su caso adquieren los cofactores) antes de ser trasladadas. Este sistema se llama Tat debido a que reconoce una secuencia seal en la que existen dos argininas gemelas (una a continuacin de otra, twin arginine transport). Consta de al menos tres tipos de protenas de membrana: TatA, TatB y TatC. Varias unidades de TatA atraviesan la membrana formando una empalizada que deja un gran canal de unos 60 . Cmo se logra el transporte a travs de este gran agujero en la membrana sin que se pierda su capacidad de barrera selectiva es una hazaa que se est investigando.
2 TRANSPORTE DE NUTRIENTES
Lo primero que tiene que hacer un microorganismo a la hora de su nutricin es captar los nutrientes que necesite desde el medio exterior. Debido a que la bicapapa lipdica acta como barrera que impide el paso de la mayor parte de las sustancias, esto significa que deben existir mecanismos especficos para lograr la entrada de los nutrientes. Adems, teniendo en cuenta que las bacterias suelen vivir en medios diluidos, deben realizar un trabajo para trasladar muchos de esos nutrientes en contra del gradiente de concentracin. Tradicionalmente se viene considerando tres mtodos principales de transporte de sustancias a travs de la membrana: transporte pasivo inespecfico (= difusin simple); transporte pasivo especfico (= difusin facilitada); transporte activo. Como veremos, los ms importantes en procariotas son los sistemas de transporte activo.
La difusin simple se produce por el paso de estas sustancias a travs de poros inespecficos de la membrana citoplsmica.
Aunque este sistema de transporte es muy comn en eucariotas, es muy raro encontrarlo en bacterias. La explicacin evolutiva es que los procariotas suelen vivir en ambientes con pocas concentraciones de nutrientes, y por lo tanto no es frecuente que se den gradientes adecuados. Una de las pocas excepciones la constituye el glicerol, que es transportado por difusin facilitada en una amplia gama de bacterias, tanto Gram-positivas como Gram-negativas. Conforme el glicerol entra, es rpidamente convertido a glicerolfosfato; por lo tanto, la concentracin interna de glicerol como tal es prcticamente nula, lo que facilita esta difusin incluso a bajas concentraciones exteriores de esta sustancia. EnZymomonas existe un facilitador de membrana que transporta glucosa.
Estudiaremos los siguientes tipos de transporte activo: transporte activo ligado a simporte de protones; transporte activo ligado a simporte de iones Na+ transporte activo dirigido por ATP transporte acoplado a translocacin de grupos.
2.3.1
Como se recordar, el simporte se puede definir como el transporte simultneo de dos sustratos en la misma direccin, por un mismo transportador sencillo. En el caso del transporte activo ligado a simporte de protones, lo que ocurre es que uno de los sustratos (H+) ha creado previamente un gradiente de concentracin, cuya disipacin es aprovechada por el otro sustrato para entrar con l. Este otro sustrato puede ser: una molcula de carga negativa: en este caso, su simporte ligado a protones tiende a disipar slo el gradiente de concentracin. Ejemplos: transporte de iones fosfato, de glutamato, etc. una molcula neutra: en este caso, su simporte tiende a disipar no slo el gradiente de concentracin, sino tambin el gradiente elctrico. Ejemplo: en Escherichia coli, la lactosa usa una -galactsido-permeasa, que es una de las permeasas bacterianas ms intensamente estudiadas. Por otro lado, ciertas molculas catinicas (iones K+, lisina), son transportadas directamente a travs de permeasas, en ausencia de simporte de protones.
realizan este transporte suelen ser protenas integrales de membrana provistas de unos 12 segmentos transmembranosos en configuracin de -hlice.
2.3.3
El tipo paradigmtico de este tipo de transporte se denomina de transportadores ABC o ATPasas de trfico, y se conocen muchos ejemplos en eubacterias y arqueas. Vamos a describir el caso de un sistema ABC en enterobacterias (como E. coli). Se trata de un sistema de varios componentes, en el que existen protenas periplsmicas que captan el sustrato con gran afinidad, y lo llevan hasta unas protenas de membrana, las cuales acoplan el paso de dicho sustrato hasta el citoplasma (sin alteralo qumicamente) con la hidrlisis de ATP.
La denominacin de "transportadores ABC" se debe a que en todos ellos existe una o dos protenas perifricas de membrana citoplsmica que poseen un dominio (de unos 200 aminocidos) conservado evolutivamente, denominado "cassette de unin a ATP" (las iniciales de ATP-binding cassette generan la sigla "ABC"). Al parecer este dominio ABC conservado es muy antiguo, y parece que ya exista antes de la divergencia evolutiva entre procariotas y eucariotas. Existen muchos ejemplos de protenas ABC, tanto en procariotas como eucariotas (de hecho constituyen la mayor familia de protenas filogenticamente relacionadas de todo el mundo vivo). Los primeros ejemplos de esta gran familia estaban implicados en transportar sustancias a uno u otro lado de la membrana. En otro tema veremos ejemplos de transportadores ABC que funcionan "al revs" de los de este tema: son "exportadores" de protenas recin sintetizadas que deben insertarse en las envueltas bacterianas o ser excretadas al medio. Pero se ha descubierto que la gran familia de protenas ABC est implicada en otros procesos (regulacin gentica, reparacin de ADN, patogenicidad, etc).
Elementos de este tipo de sistema: Porinas u otras protenas de membrana externa para lograr la difusin del sustrato desde el medio hasta el espacio periplsmico. Protena(s) solubles de espacio periplsmico que se unen al sustrato con gran afinidad. Un heterodmero formado por dos protenas integrales de membrana (cada una de ellas posee 5 o 6 trechos en -hlice que atraviesan la membrana citoplsmica), que son la permeasa propiamente dicha del sistema (el canal por donde pasa el sustrato). Dos protenas perifricas de membrana citoplsmica, adosadas al lado citoplsmico, que incluyen el mdulo conservado ABC que acopla la hidrlisis de ATP con el transporte unidireccional del sustrato a travs de la membrana. Modelo del mecanismo de este sistema: 1. El sustrato exgeno normalmente entra al periplasma a travs de algn canal inespecfico o porina de membrana externa (por ejemplo, en enterobacterias se pueden usar las porinas generales conocidas como OmpF y OmpC).
2. La protena periplsmica especfica, antes de su unin al sustrato tiene una determinada configuracin (denominada abierta), con dos grandes lbulos globulares unidos formando un ngulo (la forma recuerda una almeja a medio abrir). Cuando el sustrato pasa al periplasma, la correspondiente protena de unin periplsmica se une a l con gran afinidad (0.1-1 M), y al unirse cambia de conformacin. En esta configuracin, llamada cerrada, el sustrato se encuentra enterrado entre los dos lbulos de la protena (almeja cerrada). 3. Mientras tanto, el dmero de protenas integrales de membrana (antes de la unin con la protena periplsmica) se encuentra en un estado energizado pero incapaz de transportar sustrato. En esta situacin, puede unirse (por la parte que da al periplasma) al complejo formado por la protena periplsmica (en configuracin cerrada) ligada al sustrato. Al hacer esto, el heterodmero de membrana cambia de conformacin, de modo que ahora muestra mayor afinidad hacia la protena periplsmica y se abre su canal para dejar entrar el sustrato. 4. Entonces, el complejo de membrana alcanza su estado de mnima energa, y con ello descarga el sustrato en el citoplasma y se logra la separacin de la protena periplsmica (que vuelve a su configuracin abierta). 5. Finalmente, la hidrlisis de ATP catalizada por las protenas perifricas ABC (adosadas a la membrana y asociadas a las protenas integrales) suministra la energa para que el heterodmero de membrana vuelva a su estado energizado inicial, preparado as para otro ciclo de transporte.
El sistema ABC de bacterias Gram-negativas, queda puesto de manifiesto cuando lo impedimos por algn procedimiento que altere o elimine la membrana externa (conversin a
esferoplastos): Por ejemplo: tratemos E. coli con el quelante EDTA en una solucin tamponada isotnica (con un 20% de sacarosa). Centrifugamos y el sedimento de clulas lo resuspendemos en una solucin de MgCl2 en fro (0C). El resultado es que las protenas del periplasma escapan al medio externo. Esto es un caso de tratamiento por choque osmtico que origina prdida de contenidos del periplasma. Se comprueba que ciertos sistemas de transporte quedan inutilizados, debido a que requieren para su funcionamiento, amn de protenas de membrana citoplsmica, otras especficas del espacio periplsmico. Por contra, este sistema no se ve afectado por los agentes ionforos. Por esta razn, a este sistema en Gram-negativas se le ha llamado durante mucho tiempo transporte activo sensible a choque osmtico.
Los sistemas ABC de bacterias Gram-positivas estn menos estudiados, pero en general se parecen a los de Gram-negativas, salvo que carecen del transportador libre periplsmico. En su lugar existe una protena con funciones equivalentes (captar el nutriente del exterior), pero que est anclada al lado externo de la membrana citoplsmica, cerca del heterodmero integral de membrana (la unin es mediante su cistena N-terminal, que se une a un fosfolpido). Existen muchos ejemplos de transportadores procariticos de tipo ABC, y cada uno de ellos est especializado en transportar un sustrato especfico o varios sustratos parecidos. Ejemplo de sustratos transportados de esta forma: Monosacridos como arabinosa, galactosa, maltosa, ribosa, xilosa, etc. Oligosacridos Iones orgnicos e inorgnicos Aminocidos como histidina, glicina, leucina, etc. Oligopptidos Algunas vitaminas y metales. Siderforos con hierro
2.3.4
Es un sistema de transporte que acopla la entrada del sustrato con su modificacin qumica por unin covalente con un grupo qumico. Estrictamente hablando, no es un transporte activo, porque no funciona en contra de un gradiente de concentracin, pero se considera de hecho como activo, ya que la concentracin del sustrato modificado dentro de la clula supera con creces a la del sustrato sin modificar en el exterior. Este sistema supone un ahorro de energa metablica: aunque en el transporte se gasta un enlace rico en energa, el sustrato queda modificado en su paso a travs de la membrana en la forma que la bacteria emplea como primer intermediario de su ruta metablica. Es decir, con un solo proceso se cumplen dos funciones distintas: transporte y preparacin qumica para la ruta, que de todas formas habra que realizar. No es de extraar que este tipo de transporte haya sido seleccionado frecuentemente en la evolucin bacteriana, y que hoy lo encontremos en muchos procariotas, especialmente en bacterias anaerobias o aerobias facultativas que recurren a fermentaciones (recordar que las fermentaciones tienen un rendimiento energtico menor que los procesos respiratorios; por lo tanto, es lgico que se seleccionen mecanismos ahorradores como el descrito).
El caso mejor estudiado de esta clase de transporte lo constituye el llamado sistema de fosfotransferasa de azcares (segn las casi inevitables iniciales inglesas: PTS). En E. coli el sistema PTS permite el transporte de glucosa, manosa, fructosa y los polioles sorbitol y manitol. Consta de varios componentes que funcionan como una cadena de transportadores del grupo fosfato de alta energa del fosfoenolpirvico (PEP) hasta el azcar a transportar en cuestin. Las dos primeras protenas son inespecficas respecto del azcar (son comunes a los diversos sustratos a transportar), tienen localizacin citoplsmica y su sntesis es constitutiva. Se conocen como Enzima-I (EI) HPr (esta ltima es una pequea protena termoestable, rica en histidina). El otro componente, llamado Enzima II (EII) es especfico de cada azcar, y su sntesis es inducible por el correspondiente sustrato: Suele estar compuesto por tres subunidades o dominios: EIIA (hasta hace poco llamado EIII) es citoplsmico y soluble; EIIB es un dominio perifrico de membrana: aunque es hidrfilo, se liga al lado citoplsmico de la membrana a travs de EIIC. EIIC es una protena integral de membrana Veamos cmo funciona el sistema: 1. Por un lado, el azcar se une al enzima EIIC especfico, pero ste por s mismo no puede liberar al azcar sin modificar en el interior celular. 2. Mientras tanto, la EI cataliza (en presencia de Mg++) la transferencia del fosfato de alta energa del PEP a la HPr. 3. La HPr fosforilada (HPr-P) transfiere el fosfato al enzima IIA especfico del azcar [p. ej., la glucosa (EIIAGlc ) o el manitol (EIIAMtl)]. 4. La EIIA-P rpidamente, y en presencia de Mg++, transfiere el fosfato a la enzima-IIB especfica con la que se asocia (p. ej., EIIBGlc), que a su vez fosforila el azcar (en el caso de la glucosa convirtindola en glucosa-6-P): en este momento la EIIC pierde su afinidad por el azcar modificado, que de esta forma entra en el citoplasma, preparado ya para actuar como sustrato de la primera reaccin del catabolismo de este azcar. Otros ejemplos de transporte acoplado a translocacin de grupos: Entrada de cidos grasos mediante un sistema de transferencia de Coenzima A, que los transforma en acil-CoA.
Entrada de purinas y pirimidinas, mediante un sistema de fosforribosiltransferasas: purina o pirimidina (exterior) + PRPP NMP (interior) + P (PRPP = fosforribosil-pirofosfato) (NMP = nuclesido monofosfato) En bacterias es frecuente encontrar varios sistemas de transporte para un mismo nutriente (p. ej., Escherichia coli posee cinco sistemas para transportar la galactosa y tres sistemas para algunos de los aminocidos. Los diversos sistemas se diferencian en cuanto a su requerimiento energtico, su afinidad, su regulacin, etc. Lgicamente, la evolucin ha debido seleccionar esta redundancia de sistemas de transporte con objeto de permitir que el microorganismo sobreviva bajo diversas circunstancias ambientales.
A microscopio ptico se pueden detectar con tincin negativa con cido fosfotngstico. A microscopio electrnico se observa que, por lo general, el mesosoma se ubica en determinadas localizaciones: sitios donde se inicia la divisin celular; tabiques transversales en crecimiento (incluyendo los que delimitan el compartimento de la endospora); zonas cercanas a los nucleoides (cuerpos nucleares). Desde hace mucho tiempo se viene discutiendo si los mesosomas son en realidad estructuras autnticas de la bacteria, o como dicen otros, meros artefactos de las tcnicas microscpicas empleadas. El debate an no est apagado, segn algunos destacados microbilogos. Estructura y composicin: Los mesosomas ms caractersticos y patentes son los de bacterias Gram-positivas. Su aspecto al microscopio electrnico es el de repetidas invaginaciones de la membrana: una invaginacin primaria en forma de sculo irregular, de la que surge una invaginacin secundaria, llamada tbulo mesosmico, que rellena el hueco de la invaginacin primaria. El tbulo mesosmico suele consistir en un conjunto de pequeas vesculas arrosariadas, o tbulos, conectados entre s, a veces con aspecto de cebolla. Los mesosomas de Gram-negativas son menos conspicuos y menos complejos: se manifiestan como pequeas invaginaciones de la membrana, con forma laminar o a base de tubos dispuestos de forma verticilada. Funciones: La porcin de membrana del mesosoma correspondiente a la invaginacin primaria (pero no as a la secundaria) posee una composicin semejante a la de la membrana citoplsmica, por lo que se le pueden aplicar los papeles que ya hemos estudiado (transporte de electrones, sntesis de componentes de las envueltas...). Probable papel en la sntesis del septo transversal, quiz regulando las autolisinas implicadas en la divisin celular (vase tema 5bis). Puntos de anclaje del cromosoma bacteriano (y quiz de algunos plsmidos), actuando en la segregacin de los cromosomas hijos a las clulas hermanas (y en el caso de las bacterias esporuladas, en la segregacin de los cromosomas a los compartimentos de la clula madre (esporangio) y de la preespora. Zonas de secrecin de ciertas exoenzimas (p. ej., penicilinasa en Bacillus).
3.2 CROMATFOROS
Son invaginaciones de la membrana citoplsmica de las bacterias purpreas (un grupo de bacterias fotosintticas anoxignicas) que albergan su aparato fotosinttico. Dependiendo de las especies, pueden adoptar formas variadas: A modo de vesculas huecas; capas de repliegues concntricos, a modo de lminas paralelas, cercanas a la membrana citoplsmica;
formando tbulos, aislados o en haces. Los cromatforos suponen obviamente una adaptacin para aumentar la superficie de membrana til capaz de realizar las funciones propias de la fotosntesis.
3.4 TILACOIDES
Son sacos membranosos aplastados presentes en las cianobacterias, que no estn en continuidad con la membrana citoplsmica; en su cara externa se disponen filas de ficobilisomas (vase captulo 7). El conjunto de membrana tilacoidal + ficobilisomas es el responsable de la fotosntesis oxignica en este grupo de procariotas.
BIBLIOGRAFA
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