DESINFECCIN DE AGUA MEDIANTE RADIACIN SOLAR Karina REYES OLIVAS, Luis A. GOMEZ, Ma.

Teresa LEAL ASCENCIO y Silvia GELOVER SANTIAGO Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua Paseo Cuauhnhuac 8532, Tel y fax 777-3293664, tereleal@tlaloc.imta.mx Palabras clave: Fotocatlisis Solar, SODIS, coliformes, huevos de helminto. RESUMEN La desinfeccin solar (SODIS) es un proceso que utiliza la radiacin solar para la desinfeccin de agua. Este tratamiento est destinado a zonas rurales que carecen de sistemas de conduccin de agua potable. En este trabajo se presenta una alternativa que mejora el proceso SODIS a travs de la incorporacin de un proceso de fotocatlisis solar con TiO2 inmovilizado, para la desinfeccin de agua contaminada con bacterias y parsitos. Las pruebas bacteriolgicas, se realizaron utilizando agua de una fuente natural con [2x103] en coliformes totales y [9x102] en fecales, ambos expresados en NMP/100 mL. Para las pruebas con parsitos se inocul el agua con un nmero conocido de huevos de helminto (HH) previamente aislados e identificados. La desinfeccin mediante fotocatlisis solar con TiO2 requiri de 30 minutos para reducir la concentracin de coliformes a cero, mientras que el proceso SODIS requiri ms de 60 minutos para lograr el mismo efecto. No se observ recrecimiento durante siete das para las muestras tratadas con fotocatlisis solar con TiO2, mientras que las muestras con SODIS mostraron recrecimiento a partir del primer da de almacenamiento. En la inactivacin de parsitos, las pruebas de viabilidad de las muestras control (blanco) presentaron una capacidad de formacin larvaria de 77 %. Como resultado de la exposicin a fotocatlisis solar con TiO2, la viabilidad de los HH se redujo a cero con seis horas de tratamiento. En contraste, las muestras tratadas con SODIS mostraron un remanente de la concentracin original encontrndose un 10% de viabilidad de HH, despus del mismo tiempo de tratamiento. INTRODUCCIN Segn datos de la Organizacin Mundial de la Salud (OMS), cada ao mueren, aproximadamente, tres millones y medio de seres humanos, en su mayora nios, por enfermedades diarreicas que frecuentemente estn asociadas a la carencia de agua potable debido a la falta de mtodos eficaces de desinfeccin (Wegelin 2000). La OMS ha estimado que en el mundo existen 3,5 billones de personas afectadas por helmintos, de las cuales 450 millones desarrollarn enfermedad. Los parsitos que ms frecuentemente tienen repercusin sobre el crecimiento y desarrollo fsico y cognitivo en los nios son Ascaris lumbricoides, Necator americano, Ancylostoma duodenalis, Trichuris trichura y Esquistosoma (OMS 1996). Las enfermedades infecciosas del tracto gastrointestinal se transmiten principalmente a travs de las excretas de animales de sangre caliente incluyendo al hombre, por ello es importante determinar si el agua contiene contaminacin fecal para estimar su calidad
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desde el punto de vista de higiene (Organizacin Panamericana de la Salud 1995). El proceso SODIS emplea la energa solar para destruir los microorganismos patgenos que causan enfermedades transmitidas por el agua y de esa manera mejora la calidad del agua utilizada para el consumo humano. Los microorganismos patgenos son vulnerables a dos efectos de la luz solar: la radiacin en el espectro de luz UV-A y el calor (que causa un incremento en la temperatura del agua). SODIS es ideal para desinfectar agua en el hogar. El agua contaminada se coloca en botellas de PET (polietilen-tereftalato) de 2 L, que se llenan a 75% de su capacidad y son agitadas vigorosamente para aumentar el contenido de oxgeno en el agua, ya que un mayor contenido de oxgeno mejora el proceso de desinfeccin. Finalmente, las botellas se exponen a la luz solar durante seis horas (Mercado et al. 2005). En el Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua (IMTA) a partir de 1998, se prob la desinfeccin bacteriana solar del agua (SODIS) en botellas de plstico PET utilizando un concentrador solar de paredes planas forradas de papel aluminio para reflejar la radiacin solar (Martn et al. 2000). El uso de concentradores, implic una disminucin en los tiempos de insolacin en 30 %. A pesar de ello, hay todava desventajas como la necesidad de cuatro horas de exposicin al sol, as como la presencia de recrecimiento despus de 24 o 48 horas de almacenamiento de la muestra, luego de la desinfeccin (Corts et al. 2000). Existe un proceso capaz de aprovechar la energa solar conocido como fotocatlisis solar con dixido de titanio (TiO2). En este proceso se incluyen una gran variedad de reacciones de oxidacin con especies como OH, O2-, OOH lo que, en organismos vivos, daa la membrana externa y finalmente permite la desinfeccin, de manera ms efectiva que la lograda con slo radiacin UV (Huang et al. 2000). Las aplicaciones potenciales de esta tecnologa incluyen degradacin de materia orgnica y desinfeccin de agua. La fotocatlisis solar con TiO2 ha sido propuesta como una de las mejores tecnologas porque no es peligrosa a la salud, adems de que no forma compuestos halogenados mal olientes, a diferencia de otras tcnicas de desinfeccin y utiliza un catalizador de bajo costo y energa solar (Ibez et al. 2003). MATERIALES Y MTODOS Las muestras para los experimentos de desinfeccin bacteriana se tomaron de una fuente natural de agua (manantial) con una concentracin aproximada de 2x103 en coliformes totales y 9x102 NMP/100 mL en coliformes fecales. La Irradiacin solar por medio de ambos procesos SODIS y fotocatlisis solar con TiO2 inmovilizado (Gelover et al., 2004), se realiz en botellas PET de 2 L en concentradores solares de paredes planas (figura 1), durante tiempo suficiente para llevar la concentracin de coliformes totales y fecales a cero. La cuantificacin de coliformes antes y despus de los procesos de desinfeccin se llev a cabo mediante la tcnica del sustrato cromognico (APHA 1998). Al trmino de la exposicin solar, las muestras de agua eran almacenas dentro de sus recipientes de prueba de uno a siete das bajo condiciones de luz y temperatura ambiente, para monitorear el grado de recrecimiento bacteriano durante este tiempo. La cuantificacin del recrecimiento durante el almacenaje se realiz mediante la tcnica del sustrato cromognico. La recuperacin de las bacterias con capacidad de recrecimiento se hizo en medios selectivos (XLD,

EMB, McConkey y SS), para su posterior identificacin a travs de pruebas bioqumicas miniaturizadas tipo API 20-E (Juang y Morgan 2001). Para las pruebas de desinfeccin con huevos parsitos se realiz un trabajo previo de aislamiento y conteo. Para el aislamiento, se ocup una muestra de una corriente de agua natural contaminada (barranca). Muestras de 5 L fueron concentradas hasta un volumen final de 5 mL de acuerdo a los criterios establecidos por la NMX-AA-113-SCFI-1999. Despus de concentrar las muestras, la identificacin de los huevos de helminto se realiz distribuyendo alcuotas de 1 mL en una celda de Sedgwich-Rafter, para su observacin al microscopio de contraste de fases. Las muestras muy sucias eran diluidas con H2SO4 para facilitar su observacin al microscopio en aumentos de 10x y 40x. Al mismo tiempo que se observaron e identificaron los huevos, stos fueron cuantificados para obtener un pequeo concentrado de aproximadamente 30 a 40 huevos para cada ensayo de desinfeccin. Los gneros utilizados en los experimentos de desinfeccin fueron: Ascaris, Himenolepis y algunas veces Toxocara y Trichuris, siendo en su mayora huevos pertenecientes al gnero Ascaris spp. Cada concentrado (30 a 40 huevos) fue inoculado dentro de una botella de plstico PET, que contena 2 Litros de agua de manantial, utilizada con la intencin de proporcionar un medio donde los huevos de helminto pudieran permanecer y evitar en lo posible la prdida de los mismos. Las botellas fueron colocadas dentro de concentradores solares simples, una botella para el proceso SODIS y la otra para la desinfeccin por fotocatlisis con TiO2 inmovilizado (como se ejemplifica en la figura 1). Siempre manteniendo una muestra control a la sombra. Los concentradores solares se inclinaron 19 sobre el suelo, sobre la direccin norte-sur, segn la latitud local del sitio de prueba. El tiempo de exposicin de las muestras fue de 6 horas.

Figura 1. Irradiacin de muestras de agua conteniendo coliformes o huevos de helminto

Una vez terminada la exposicin solar, se repitieron los pasos de la metodologa anteriormente mencionada. Para la recuperacin de los huevos de helminto. Posteriormente, se realiz la observacin al microscopio de contraste de fases para cuantificar la cantidad de huevos de helminto recuperados despus de los tratamientos. La viabilidad de los huevos de helminto slo se determin para el gnero Ascaris spp, debido a que este genero fue el ms abundante, mediante incubacin de los concentrados finales, a 26 C, en medio cido, durante 30 das (NMX-AA-113-SCFI-1999). Al finalizar el periodo de

incubacin, se realiz una observacin final al microscopio de contraste de fases para determinar la viabilidad de los huevos de helminto, tomando como positivos aquellos que presentaron una larva en su interior (figura 2).

Figura 2. Huevos de Ascaris spp. Sin larva a la izquierda y larvado a la derecha

RESULTADOS A) Desinfeccin bacteriana El tratamiento de fotocatlisis solar con dixido de titanio requiri de 30 minutos para reducir la concentracin de coliformes totales a cero, mientras que el proceso SODIS a ese tiempo an presenta 43% de remanencia (figura 3a). Para el caso de coliformes fecales la fotocatlisis solar requiri de 15 minutos para reducir la carga inicial bacteriana a cero. En el caso del proceso SODIS el tiempo necesario para reducir la concentracin a cero fue de 60 minutos (figura 3b).

Figura 3a. Inactivacin de coliformes totales en funcin del tiempo de

Figura 3b. Inactivacin de coliformes fecales en funcin del tiempo de

irradiacin B) Recrecimiento bacteriano

irradiacin

Los resultados del almacenamiento de las muestras despus de la desinfeccin, mostraron que no hubo recrecimiento de coliformes totales ni coliformes fecales durante siete das para las muestras tratadas con fotocatlisis solar. En contraste, en las muestras tratadas mediante SODIS, el recrecimiento de coliformes totales se present a partir del primer da de almacenamiento con una concentracin bacteriana de 40 NMP/100 mL hasta 250 NMP/100 mL al quinto da de almacenamiento (figura 4a). En el caso de los coliformes fecales el mximo recrecimiento encontrado en las muestras tratadas por SODIS correspondi a 2 NMP/100 mL al quinto da de almacenamiento (figura 4b).

Figura 4a. Recrecimiento de coliformes totales

Figura 4b. Recrecimiento de coliformes fecales

C) Identificacin bacterina Se identific como bacterias responsables del recrecimiento a las especies de: Enterobacter cloacae, Rhanella aquatilis, Aeromonas hidrofila, Serratia odorifera, Klebsiella ornitolitica y Klebsiella terrigena. D) Desinfeccin parasitaria En la observacin al microscopio se encontraron huevos tpicos frtiles, los cuales presentaron un tamao natural de aproximadamente 40 a 80 m de longitud y de 25 a 50 m de ancho, con formas comunes de los huevos de helmito (Ascaris spp, Toxocara spp, Trichuris spp, Himenolepis nana e Hymenolepis diminuta). En ocasiones, en el interior se observ una larva en segundo estadio o un ncleo en forma de masa amorfa (estos huevos se desecharon). La observacin al microscopio despus de los tratamientos no revel cambios en la estructura morfolgica de los huevos. El desempeo de los tratamientos fue evaluado a travs de la permanencia de huevos de helminto tras la desinfeccin y de la viabilidad. La recuperacin de los HH en promedio fue de 90 % en las muestras control, mientras que en las muestras sometidas a los tratamientos de desinfeccin fue de 80 y 85% para SODIS y fotocatlisis solar respectivamente (figuras 5a y 6a). La viabilidad se determin de acuerdo al nmero de huevos larvados de Ascaris spp. Las muestras control presentaron una capacidad de formacin larvaria del 81 %, en promedio (figuras 5b y 6b). En contraste, como resultado de la exposicin a fotocatlisis solar, la viabilidad de los HH se redujo a cero con seis horas de tratamiento. Por su parte, las muestras tratadas con SODIS mostraron un remanente de huevos de helminto viables, equivalente al 10% del valor inicial (figuras 5b y 6b). Este ltimo dato es de gran importancia mdica, si se toma en cuenta que la dosis infectiva para los humanos es de 1 a 10 huevos.

Figura 5a. porcentaje de recuperacin de Huevos de helminto

Figura 5b. porcentaje de viabilidad de Huevos de helminto

Figura 6a. porcentaje de recuperacin de Huevos de helminto

Figura 6b. porcentaje de viabilidad de Huevos de helminto

DISCUSIN Y CONCLUSIONES De acuerdo con los resultados obtenidos, el uso de la fotocatlisis solar con dixido de titanio permite reducir los tiempos de exposicin al sol, a 15 y 30 minutos para eliminar coliformes fecales y totales, respectivamente. Esto para concentraciones bacterianas tpicamente encontradas en los cuerpos de agua superficiales de nuestro pas. El uso del dixido de titanio tiene la ventaja adicional de evitar el recrecimiento, segn ha sido mostrado y su uso no representa riesgos ya que no es txico. El tiempo tan corto de tratamiento permite el uso de la desinfeccin solar en sitios con periodos muy breves de insolacin o con altas cargas microbianas. Trabajar con parsitos represent un reto para los sistemas de desinfeccin probados, puesto que estos organismos son muy resistentes a los tratamientos de desinfeccin convencionales. Los porcentajes de recuperacin de HH despus de los tratamientos, fueron favorables, ya que se consigui recobrar ms del 80% de los huevos de helminto inicialmente inoculados. La fotocatlisis mostr excelente desempeo al lograr reducir a cero la viabilidad de los huevos de helminto. Estos resultados constituyen un buen sustento para considerar que muy pronto se podr recomendar la adopcin de este tipo de sistema como alternativa a los mtodos tradicionales de desinfeccin, ya que es de fcil aplicacin, efectivo y ayudara a la disminucin de la alta tasa de enfermedades gastrointestinales hidrotransmisibles que aquejan a los pases en vas de desarrollo como el nuestro.

REFERENCIAS APHA (1998) Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th edn. Washington, DC: Amercan Public Health Asociation/American Water Works Association and Water Enviroment Federation. Corts, J., Martn, D. A., Vzquez, V. S., Fonseca, M. O. y Gonzlez, H. A. (2000). Radiacin solar para desinfectar agua en comunidades rurales. IMTA, Coordinacin de Tratamiento y Calidad del Agua, Subcoordinacin de Potabilizacin. Jiutepec, Mor. 50. Gelover S., Monroy P. y Jimnez A. (2004). Titanium dioxide sol-gel deposited over glass and its application as a photocatalyst for water decontamination. J. Photochemistry and Photobiology A:Chem. 165, 241-246 Huang, Z., Maness, P-C., Blake, D. M., Wolfrum, E. J., Smolinski, S. L. y Jacoby, W. A. (2000). Bactericidal mode of titanium dioxide photocatalysis. Journal of Photochemistry and Photobiology 130, 163-170. Ibez, J. A., Litter, M. I., y Pizarro, M. A. (2003). Photocatalytic bactericidal effect of TiO2 on Enterobacter cloacae Comparative study with other Gram (-) bacteria. Journal of Photochemistry and Photobiology 157, 81-85. Juang, Der-Fong. y Morgan, J. M. (2001). The applicability of the API 20E and API Rapid NFT systems for the identification of bacteria from activated sludge. Journal of Biotechnology 4, 11-17. Martn, A., Corts, J. E., Rodrguez, M. A., Mundo, Vzquez, S. y Estrada, C. (2000). Desinfeccin del agua con radiacin solar. Memorias del XXIV Congreso de la Asociacin Nacional de Energa Solar. Mxico, D. F. 22-25. Mercado, A., Romero, A. M. y Coronado, O. (2005). Desinfeccin solar del agua en bolivia: proyecto piloto sacabamba y difusin inicial (1996-2000). Desinfeccin Solar de Agua, de la investigacin a la aplicacin. Serie de publicaciones tcnicas No. 1. Cochabamba, Bolivia. Centro de Aguas y Saneamiento Ambiental, Universidad Mayor de San Simn. Norma oficial mexicana (NMX-AA-113-SCFI-1999). Anlisis de agua determinacin de huevos de helminto mtodo de prueba. OMS (Organizacin Mundial de la Salud). (1996). de informacin sobre prescripcin de medicamentos. Medicamentos utilizados en enfermedades parasitarias. Segunda edicin. O.M.S. Ginegra. Organizacin panamericana de la salud. (1995). Guas para la calidad del agua potable, 2 edn. Organizacin Mundial de la Salud. Wegelin, M. (2000). EAWAG News 48, 11-12.