2 PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 2.1 Materiais Tubos de ensaio Pipetas de 1,0; 2,0 e 5,0 mL 2.

L 2.2 - Reagentes Clara de ovo Gelatina (sem sabor) a 2% Soluo de NaOH a 2,5 M; 6,0 M e a 4% Soluo de acetato de chumbo a 10% Reativo de Millon Reativo de Hopkins Cole Soluo alcolica de alfa-naftol a 0,4% Soluo de hipoclorito de sdio a 6,0-7,0% Reativo de biureto Soluo de ninhidrina a 0,1% cido ntrico concentrado cido sulfrico concentrado cido actico concentrado 2.2 Experimental

Esta prtica foi realizada com o intuito de observar a presena dos aminocidos em compostos orgnicos. A mesma foi dividida em sete partes: Reao de biureto, reao de ninhidrina, reao de aminocidos sulfurados, reao de Millon, reao de Sakagushi, reao de Hopkins-Cole e reao xantoproteica. Esta prtica teve inicio primeiramente com a reao de biureto, esta reao caracterstica para identificao de protenas. Usando trs tubos de ensaio, adicionou-se 1,0 mL de clara de ovo no tubo 1, no tubo 2 adicionou 1,0 mL de soluo de gelatina e no tubo 3, 1,0 mL de gua destilada. Em seguida, 1,0mL do reativo de biureto foi adicionado em cada tudo, finalmente os trs tubos foram aquecidos na chama do bico de Bunsen. No segundo experimento, reao da ninhidrina, que ocorre pela presena do amino grupo livre. Novamente, usando trs tubos de ensaio, colocou 1,0 mL da soluo

de clara de ovo, 1,0 mL da soluo de gelatina e 1,0 mL de gua destilada nos tubos 1, 2 e 3 respectivamente. Em seguida, acrescentou 3,0 mL da soluo de ninhidrina a 0,1% a cada um dos tubos, os mesmos foram levados ao banho-maria por dois minutos. No terceiro experimento, reao de aminocidos sulfurados, que mostra a presena de enxofre no radical das aminas. Utilizando apenas dois tubos, no adicionou 1,0 mL de clara de ovo no tubo 1 e no tubo 2, adicionou-se 1,0 mL da soluo de gelatina. Finalmente acrescentou-se, 1,0 mL de soluo de NaOH a 6,0 M, levando os tubos a chama do bico de Bunsen. No quarto experimento, a reao de Millon foi apresentada, ela indica presena de aminocidos fenlicos. Novamente com dois tubos de ensaio, adicionou-se 1,0 mL de clara de ovo no primeiro tubo e 1,0 mL da soluo de gelatina no segundo tubo. Logo aps, a cada um dos tubos foi adicionado 1,0 mL do reativo de Millon, foram assim aquecidos por 30 segundos em chama direta. O quinto experimento, foi a reao de Sakagushi que usada para detectar arginina, iniciou-se usando dois tubos de ensaio, nos quais foram colocados 1,0 mL de clara de ovo em um tubo e 1,0 mL de gelatina em outro. Adicionou-se 1,0 mL de NaOH 2,5 M em cada um dos tubos, em seguida acrescentou tambm 0,5 mL de alfa-naftol a 0,4% e 1,0 mL da soluo de hipoclorito de sdio. A reao de Hopkins-Cole, executada na sexta reao, muito utilizada para detectar se existe triptofano no meio, teve inicio adicionando a dois tubos de ensaio 1,0 mL de clara de ovo em um dos tubos e 1,0 mL da soluo de gelatina no outro. Acrescentou-se tambm s solues 3,0 mL do reativo de Hopkins-Cole a cada um dos tubos, em seguida, adicionou-se 2,0 mL de cido sulfrico concentrado, nesse reao foi importante que os tubos de ensaio estivessem inclinados, para que o cido pudesse passar pelas paredes dos tubos. No stimo, e ultimo, experimento, a reao xantoproteica, que indica a presena de tirosina, usando dois tubos de ensaio, a reao comeou com a adio de 1,0 mL de clara de ovo no primeiro tubo e 1,0 mL da soluo de gelatina no segundo tubo. Foi adicionado tambm 0,5 mL de HNO3 e ambos foram levodos ao banho-maria por dois minutos. Aps o resfriamento dos tubos observou a colorao adquirida e, em seguida, acrescentou 4,0 mL de NaOH a 20% a cada um dos tubos.