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Cincias da Natureza e Suas Tecnologias

Biologia
Prof. Claudio Ponte
n

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A BIOTECNOLOGIA NO MUNDO ATUAL


A Biotecnologia integra um conjunto de tecnologias habilitadoras que possibilitam utilizar, alterar e otimizar organismos vivos ou suas partes funcionantes, clulas, organelas e molculas, para gerar produtos e processos e servios especializados com aplicaes diversas nas reas de sade, agropecuria e meio ambiente. Neste contexto esto includas, entre outras, pesquisas sobre transgnese, genmica e protemica (www.mct.gov.bt). Tambm podemos defini-la simplesmente como uso racional de micro-organismos, bem como plantas e animais, para produzir materiais, tais como alimentos, medicamentos e outros produtos teis para o ser humano. Na prtica, um conjunto de processos tecnolgicos que permitem a utilizao de material biolgico de plantas e animais para fins industriais. A biotecnologia moderna, tambm conhecida como engenharia gentica ou tecnologia do DNA recombinante, envolve modificao direta do DNA, que representa o mateiral gentico de um ser vivo, de forma a alterar precisamente definidas caractersticas do organismo vivo ou introduzir novas caractersticas. Assim sendo, o uso da biotecnologia moderna implica, inicialmente, no conhecimento e isolamento de sequncias de DNA que correspondem a genes responsveis em conferir a caracterstica desejada (fentipo). O isolamento dos genes de interesse conduzido por meio de tcnicas de clonagem molecular que consiste em induzir um organismo vivo a amplificar a sequncia de DNA de interesse, em sistemas que permitem uma fcil purificao e recuperao do referido fragmento de DNA. Para isso, so utilizados vetores de clonagem (plasmdeos ou vrus), nos quais a sequncia de DNA de interesse inserida, utilizando a enzima DNA ligase. Quando necessrio, o fragmento de DNA de interesse pode ser liberado do vetor por meio de enzimas de restrio. Uma vez isolado o gene de interesse, estes fragmentos de DNA (genes) so incorporados por meio de engenharia gentica no genoma do organismo alvo, resultando em um organismo geneticamente modificado (OGM), cuja caracterstica adquirida passa a ser hereditria. Diversas tecnologias tm sido desenvolvidas para a insero de DNA exgenos no genoma de plantas por meio de engenharia gentica. Particularmente, para o caso de clulas vegetais, as tecnologias mais eficientes para transformao gentica consistem em (1) infeco por Agrobacterium tumefaciens, (2) eletroporao de protoplastos e (3) o mtodo biolstico. Todas estas tecnologias envolvem um sistema eficiente de cultura de tecidos e regenerao de plantas in vitro. (1) Agrobacterium tumefaciens uma bactria Gram-negativa encontrada no solo e induz formao de tumores em plantas.

A biotecnologia moderna, tambm conhecida como engenharia gentica ou tecnologia do DNA recombinante, envolve modicao direta do DNA, que representa o material gentico de um ser vivo, de forma a alterar precisamente denidas caractersticas do organismo vivo caractersticas. ou introduzir novas

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Os tumores so causados pelo plasmdeo Ti presente na bactria. Este plasmdeo tem sido amplamente estudado pelos engenheiros geneticistas de plantas por ser extremamente til para introduo de novos genes em plantas, uma vez que tem a capacidade de transferir um fragmento de DNA para o genoma da planta durante o processo de infeco. Os cientistas modificaram a regio do DNA de transferncia (regio T) do plasmdeo Ti, de forma a tornar possvel a insero de qualquer gene de interesse na planta. Este sistema constitui um sistema natural de transformao de plantas.

(3) O Mtodo biolstico consiste em introduzir o DNA na clula, rompendo a barreira da parede celular e da membrana plasmtica, sem o uso de vetores biolgicos. Para isso, microprojteis de ouro ou tungstnio, cobertos com molculas de DNA, so acelerados alta velocidade, o que possibilita sua penetrao em clulas intactas.
Antes
Tubo de acelerao

Depois

Membrana Partculas + DNA Tela de proteo

Plasmdeo

Tecido vegetal

(2) Eletroporao uma tcnica de transformao ou transfeco que consiste na exposio das clulas a pulsos de correntes de alta voltagem, o que torna a membrana plasmtica permevel, permitindo a penetrao do DNA. Protoplastos so clulas de plantas ou de fungos na qual a parede celular foi removida enzimaticamente, tornando-a mais acessvel para transfeco.

Produtos obtidos atravs da biotecnologia:


(a) Agricultura: adubo composto, pesticidas, silagem, mudas de plantas ou de rvores, plantas transgnicas, etc. Observa-se uma busca da proteo vegetal, buscando o controle de ervas daninhas, pragas e doenas, com a integrao de solues qumicas e genticas. O Laboratrio de Biologia Molecular Vegetal (LBMV), integrante do Centro de Biotecnologia da UFRGS, trabalha com genes potencialmente capazes de conferir a resistncia vegetal a insetos e a outras pragas e resistncia vegetal a molstias fngicas. Destacam-se no pas todo os produtos Bt, toxina com ao inseticida produzida pela bactria Bacillus thuringiensis, encontrada naturalmente no solo, e que empregada no controle de certos insetos-pragas que atacam as lavouras, sendo, no entanto, inofensiva para insetos no-alvo, bem como para seres humanos e animais em geral. (b) Alimentao: pes, queijos, picles, cerveja, vinho, protena unicelular, aditivos, etc. J na Antiguidade o homem fazia po e bebidas fermentadas enquanto uma das fontes de alimentos dos Astecas eram as algas que eles cultivavam nos lagos. Um exemplo atual o Golden Rice, desenvolvido para fornecer vitamina A. (c) Qumica: butanol, acetona, glicerol, cidos, enzimas, metais, etc. Dentre as hidrolases, as enzimas proteolticas, ou peptidases, ou proteinases, compreendem 50% das enzimas utilizadas industrialmente; tambm podem ser utilizadas na extrao de DNA de clulas de eucariontes. So empregadas na rea de farmacologia, como o caso da bromelina, enzima proteoltica extrada do abacaxi, que possui a propriedade anti-inflamatria, atividade fibrinoltica e inibio reversvel de agregao de plaquetas. (d) Eletrnica: biosensores. Um biosensor um dispositivo no qual se incorpora uma substncia (ex: uma enzima, um anticorpo, uma protena, DNA, etc) para poder medir de modo seletivo determinadas substncias. Um exemplo seria a medida da quantidade de chumbo ou de bactrias na gua, ou a quantidade de toxinas presentes nos alimentos.

Transfemina

Plasmdeo DNA complexo Transfemina/DNA condensado receptor para transfemina

citoplasma

citoplasma

citoplasma

citoplasma

endossomo

endossomo

queda do pH lise do endossomo

Liberao do complexo

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(e) Energia: etanol, biogs. O biogs obtido como produto da transformao da matria orgnica em gs metano e dixido de carbono, feita pelas bactrias anaerbicas em instalaes conhecidas como biodigestores. Teoricamente, qualquer resduo orgnico no esterilizado, sob condies anaerbicas adequadas, facilita o desenvolvimento de bactrias que atacam os slidos volteis (exceto lignina) da matria orgnica, decompondo-a. (f) Meio Ambiente: recuperao de petrleo, tratamento do lixo, purificao da gua. (g) Pecuria: o objetivo nessa rea a produo de animais transgnicos que apresentem caractersticas de importncia comercial, tais como: maior eficincia na converso alimentar, maior quantidade de protena na carne, maior taxa de crescimento corporal, maior produo de carcaa e resistncia a doenas. (h) Sade: hormnios, como somatotropina e insulina, interferon e anticorpos. Os projetos atualmente em desenvolvimento esto relacionados a doenas infecciosas endmicas no Brasil, como a doena de Chagas, leishmaniose, esquistossomose, febre amarela, malria, hepatite B, tuberculose e diarreia. Outros projetos incluem doenas genticas (sndrome de Down), drogas anti-inflamatrias, diferentes protenas associadas ao cncer, bem como metaloproteinases de matriz, desintegrinas, miotoxinas e neurotoxinas de venenos de serpentes brasileiras, modelos biolgicos para inflamao e sinalizao celular. Medicamentos como antibiticos e anti-inflamatrios so tambm produzidos pela tecnologia do DNA recombinante. Bactrias que vivem no intestino do homem e de animais so utilizadas como biorreatores e produzem esses frmacos com qualidade e quantidade superiores metodologia clssica, alm de serem produzidas a um preo inferior. Vacinas utilizando a tecnologia do DNA recombinante so alternativas s vacinas tradicionais e j existem muitas sendo comercializadas e outras tantas sendo testadas. Tais vacinas podem ser desenvolvidas eliminando ou destruindo genes do patgeno que causam a doena ou de suas subunidades (protenas). A terapia gnica (TG) um tratamento para doenas hereditrias que se caracteriza pela insero de um gene funcional dentro da clula humana a fim de conferir uma nova funo ou melhorar os efeitos de um gene anormal. Um estudo divulgado pela Universidade de Toronto, no Canad, intitulado Top Biotechnologies for Improving Global Health (Top da biotecnologia para a melhoria da sade global) estabeleceu as principais reas do setor em ordem de importncia. So elas: I. Tecnologia molecular para diagnsticos mais simples e baratos de doenas infecciosas; II. Tecnologia recombinante para o desenvolvimento de vacinas contra doenas infecciosas; III. Tecnologia em prol do meio ambiente (incluindo limpeza da gua e rea sanitria); IV. Tecnologia da sequncia de genomas patognicos para a compreenso de sua biologia e identificao de novos combates a microrganismos; V. Proteo contra doenas sexualmente transmissveis; VI. Bioinformtica para identificar medicamentos e para examinar interaes patgenos-hospedeiros; VII. Organismos geneticamente modificados para desenvolver nutrientes e combater deficincias especficas; VIII. Tecnologia recombinante para o desenvolvimento de produtos teraputicos mais baratos; IX. Combinaes qumicas para descoberta de drogas.

EXERCCIOS
01. Considere os seguintes processos usados para obteno de organismos: I. Substituir o ncleo de um vulo pelo ncleo de uma clula diploide do mesmo animal e implantar esse vulo no tero do animal para que se desenvolva; II. Obter estacas de um vegetal e plant-las para que enraizem e formem novas plantas; III. Semear os gros de milho para obter novos ps da planta. Constitui clonagem o que se faz somente em: A) I B) II C) I e II D) II e III E) I, II e III

02. Um floricultor, aps intenso trabalho de melhoramento gentico, obteve uma variedade de planta com flores de grande valor econmico. Visando a reproduo dessa variedade de planta com a manuteno das caractersticas selecionadas, o floricultor deve realizar: A) o retrocruzamento com plantas heterozigotas. B) o plantio de sementes hbridas. C) a retirada dos estames das flores. D) a propagao por sementes obtidas pelo cruzamento com plantas selvagens. E) a produo de mudas, atravs de mtodos assexuados. 03. Embrapa lana no mercado uvas sem sementes. As trs variedades foram criadas por meio de melhoramento gentico clssico.
Cincia Hoje, Vol 35, n 207, agosto 2004, p.37.

O melhoramento gentico clssico de que trata o texto refere-se a uma tcnica em que os pesquisadores: A) utilizam a obteno de transgnicos para eliminar as sementes. B) clonam sequncias de variedades diferentes e as inserem nas trs variedades. C) cruzam diferentes variedades produzindo uvas hbridas sem sementes. D) sequenciam o genoma das variedades e deletam o gene da produo das sementes. E) manipulam o genoma, inserindo, com um vetor, a sequncia que determina a no formao de sementes.

04. O desenvolvimento da Gentica tem gerado tecnologias muito teis humanidade. Sobre a Engenharia Gentica, assinale a afirmativa correta. A) A determinao da paternidade por meio da eletroforese em gel realizada a partir da anlise cromossmica das hemcias coletadas da criana, da me e do suposto pai. B) A clonagem molecular consiste em se incorporar ao plasmdeo bacteriano o segmento do cido ribonucleico que se deseja pesquisar. C) Organismos geneticamente modificados so aqueles que recebem e incorporam genes de outra espcie e a cpia de seu DNA obtida pela transcrio. D) A enzima de restrio (Eco RI) reconhece uma determinada sequncia de bases nitrogenadas e corta a dupla hlice de DNA entre nucleotdeos especficos. E) A determinao do genoma de vrus, importante para terapias gnicas, faz-se por meio de biblioteca de miclios.

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05. Em primeiro lugar, devemos dizer que o conjunto de tcnicas que possibilitam a transgenicidade so mal-chamadas de engenharia gentica. A engenharia fundamenta-se na fsica de Newton e como tal suas tcnicas tm preciso e previsibilidade de leis universais, o que no o caso das tcnicas de transplante e insero de genes. Mas, para inspirar respeito e segurana no mercado, elas recebem a denominao errnea de engenharia gentica. A qualidade nutricional dos alimentos da engenharia gentica pode ser diminuda e sua absoro ou metabolismo no homem podem ser modificados. Novas protenas que causam reaes alrgicas podem entrar nos alimentos. As pessoas normalmente sabem quais os produtos que as afetam. Entretanto, com a transferncia dos alergnicos de um produto para o outro, perde-se a identificao e a pessoa s vai descobrir o que lhe fez mal aps a ingesto do alimento perigoso. Cientistas usam genes antibitico-resistentes para selecionar e marcar os organismos modificados. Tais genes podem diminuir a efetividade de alguns antibiticos em seres humanos e nos animais. ..., o debate mal comeou, mas as empresas do setor j esto gastando bilhes de dlares em tecnologia e recursos humanos, numa corrida para renovar a produo de milho, soja e outros produtos, inclusive farmacuticos.
Revista do CREA-RJ,2000

No que se refere ao risco biodiversidade, representado pelos transgnicos, o evento mais significativo : A) esterilidade do hbrido. B) fluxo gnico com variedades nativas. C) disseminao descontrolada dos genes antibiticoresistentes. D) autofecundao, provocada pelo isolamento reprodutivo. E) surgimento de inmeros novos alergnicos.

GABARITO (V. 19) 1 B 2 B 3 E 4 D 5 C

Professor Colaborador: Ricelly

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OSG: 46739/11 Paulo 31/05/11 REV.: RM

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