ESTUDO DIRIGIDO MICROBIOLOGIA 1) DESCREVA A ESTRUTURA BSICA DE UMA CLULA PROCARITICA.

As clulas procariticas so caractersticas dos organismos dos Domnios Bacteria e Archea, razo porque estes so designados procariontes. Os organismos procariontes so unicelulares, mas muitos deles formam colnias de forma linear ou em pequenos grupos. A clula procaritica apresenta um envoltrio externo rgido, a parede celular, que determina a forma celular e protege contra agresses fsicas do ambiente. Sob a parede celular est a membrana plasmtica, semelhante s membranas das clulas eucariticas. A membrana delimita o citoplasma, onde h milhares de pequenos grnulos, os ribossomos, responsveis pela produo das protenas, e o nucleide, que a massa emaranhada de DNA que constitui o cromossomo bacteriano. 2) QUAL A RELAO DO TAMANHO DA CLULA COM O METABOLISMO BACTERIANO? Razo superfcie-volume. A superfcie sempre deve ser maior que o volume, se isso inverter a clula morre. Quanto menor o tamanho, maior o potencial de crescimento. 3) QUAIS AS PRINCIPAIS FORMAS BACTERIANAS E OS ARRANJOS FORMADOS POR ELAS? O QUE DEFINE UM ARRANJO MICROBIANO? Formas comuns: 1. Cocos: clulas redondas, ovais ou levemente achadas nas extremidades (Enterococcus). 2. Bacilos: clulas em formato de basto, com as extremidades arredondadas ou retas (Escherichia). Formas incomuns: 1. Espirais: clulas bacilares curvas, com aspecto helicoidal. Vibries: formato de vrgula (Vibrio) Espirilos: helicoidais, corpo rgido (Spirillum) Espiroquetas: helicoidais, corpo flexvel (Leptospira) 2. Apendiculares: clulas com extenses na forma de tubo ou pednculo. 3. Filamentosas: clulas longas e delgadas em cadeia Arranjo microbiano: associaes celulares dependentes do nmero e direo dos planos de diviso celular. A. Cocos: 1. Diplococos: aos pares (Neisseria) 2. Estreptococos: em cadeia (Streptococcus) 3. Ttrades: grupos de 4 (Micrococcus) 4. Sarcinas: grupos de 8 (Sarcina) 5. Estafilococos: em cachos (Staphylococcus) B. 1. 2. 3. Bacilos Diplobacilos: aos pares (Bacillus) Estreptobacilos: em cadeia (Bacillus) Paliada: lado a lado (Corynebacterium)

4) DE

QUE FORMA PODEMOS RELACIONAR A MEMBRANA PLASMTICA DE BACTRIAS COM A MEMBRANA INTERNA DA MITOCNDRIA?

Acredita-se que as mitocndrias das clulas eucariticas tenham se originado de uma bactria fotossintetizante que perdeu a sua capacidade de realizar fotossntese e ficou apenas com a sua cadeia respiratria. As mitocndrias e bactrias so basicamente do mesmo tamanho. As mitocndrias possuem dupla membrana, assim como muitas bactrias. A diviso mitocondrial parece com a reproduo bacteriana. 5) DIFERENCIE BACTRIAS GRAM (-) DE GRAM (+). Gram-positiva: clula procaritica cuja parede celular consiste principalmente em peptideoglicano; no possui a membrana externa de clulas gram-negativas. Gram-negativa: clula procaritica cuja parede celular contm quantidades relativamente pequenas de peptideoglicano; possui uma membrana externa composta por lipopolissacardeos, lipoprotenas e outras macromolculas complexas. 6) QUAL
A IMPORTNCIA DA TRANSPEPTIDAO NA FORMAO DA PAREDE CELULAR BACTERIANA?

A transpeptidao um processo que corresponde formao das ligaes peptdicas cruzadas entre os resduos de cido murnico de cadeias adjacentes de glicano. A transpeptidao possui importncia mdica visto que corresponde reao inibida pelo antibitico penicilina. A transpeptidao envolve a formao de uma ligao peptdica de um entre vrios aminocidos distintos, conforme a estrutura da parede celular do organismo em questo. 7) DEFINA E DE A FUNO DE CADA UM DOS TERMOS ABAIXO: a) Cpsula: camada densa, bem definida, de natureza polissacardica ou protica, que envolve a clula. Funes: Proteo contra a dessecao, pois altamente hidratada. Adeso aos substratos. Proteo contra a fagocitose. b) Pili: apndices filamentosos mais longos que as fmbrias. Funes: Envolvidos em eventos de conjugao-transferncia de DNA de uma clula para outra. Tambm podem participar de eventos de adeso em tecidos. Permitem a adeso de bacterifagos. c) Fmbrias: apndices semelhantes a pelos, mais curtos, mais retos e mais finos que flagelos. So mais numerosos que os flagelos, formados pela protena pilina. Funes: Fixao: bactrias em pedras de rios com correnteza. Biofilmes. Fixa ode bactrias patognicas em tecidos. d) Flagelo: longos apndices filamentosos que do motilidade s clulas bacterianas. O filamento formado pela protena flagelina com caractersticas antignicas. O gancho te ma funo de conectar o filamento ao corpo basal.

e) Endosporos: estruturas de latncia, exclusiva de bactrias Gram-positivas. Altamente desidratadas e resistentes ao calor. Grande quantidade de Ca 2+ e acido dipicolnio, maior resistncia. Resposta escassez de nutrientes ou a condies adversar. 8) DEFINA METABOLISMO. A soma de todas as reaes qumicas dentro de um organismo vivo. As reaes de metabolismo requerem uma grande quantidade de energia de ativao. 9) QUAL O PAPEL DO ATP NA GERAO DE ENERGIA NAS CLULAS? A energia fica armazenada na molcula de ATP nas suas ligaes fosfato de alta energia. Assim, a energia liberada pelos processos catablicos fica conservada como energia qumica na estrutura molecular do ATP. 10) DIFERENCIE FERMENTAO DE RESPIRAO. Na respirao o aceptor final dos eltrons da cadeia transportadora uma molcula inorgnica diferente do O2. A fermentao o processo de obteno de energia onde o aceptor final dos eltrons uma molcula orgnica. 11) QUAL A IMPORTNCIA DO CICLO DE KREBS? O ciclo de Krebs importante porque consegue remover hidrognios e a energia associada a esses hidrognios de vrios combustveis metablicos. Liberao gradativamente energia pela oxidao do piruvato durante a formao dos compostos intermedirios no ciclo. A energia fica retida nas coenzimas NADH e FADH2. Ocorre no citoplasma de procariotos e na matriz mitocondrial de eucariotos. 12) A PARTIR DE QUATRO CLULAS BACTERIANAS POR ML, EM UM MEIO DE CULTURA RICO, COM UMA FASE LAG DE UMA HORA E TEMPO DE GERAO DE 20 MIN, QUANTAS CLULAS EXISTIRO EM 1 L DESSA CULTURA AO FINAL DE 1 H? APS 2 H SE UMA DAS CLULAS INICIAIS ESTIVESSE MORTA? N=N0 X 2N. OBS. ESSA QUESTO IR SUBSTITUIR UMA QUESTO QUE VOC ERROU OU DEIXOU DE FAZER.

13) EXPLIQUE

RESUMIDAMENTE O QUE ACONTECE EM CADA UMA DAS FASES EM UMA CURVA DE CRESCIMENTO BACTERIANO.

Existe um perodo inicial no qual parece no haver crescimento em termos do aumento do nmero de clulas (fase lag). Embora as clulas no estejam se dividindo durante a fase lag, ainda so metabolicamente ativas, reparam os danos celulares e sintetizam enzimas. A fase lag seguida por um perodo de rpido crescimento balanceado (a fase de log ou exponencial). A seguinte a fase estacionria durante a qual nenhum crescimento novo evidente; e, finalmente, existe um declnio na populao vivel at que todas as clulas microbianas morram (a fase de declnio, ou morte). Entre cada uma destas fases h um perodo de transio no qual representa o tempo que leva antes que todas as clulas entrem em uma nova fase. 14) DIFERENCIE E DE EXEMPLOS DE AVALIAO DIRETA E INDIRETA DO CRESCIMENTO MICROBIANO. Mtodos diretos: avalia diretamente as clulas. 1. Contagem em Placas: (contagem de Colnias). Quantifica clulas viveis. 2. Filtrao: baseia-se na filtrao da amostra em membrana. Quantifica clulas viveis. 3. Nmero Mais Provvel (NMP): um mtodo estatstico, usado para microrganismo que no necessitam de isolamento ou que no cresceriam. Quantifica clulas viveis e representa um mtodo rpido. 4. Contagem Direta no Microscpio: Emprega a cmara de Petroff-Hausserlmina de vidro com 25 quadrantes, numa rea de 1mm 2. Quantifica clulas viveis e clulas mortas. Mtodos indiretos: no avalia diretamente as clulas. 1. Turbidimetria: utilizao do fotocolormetro ou do espectrofotmetro. 2. Atividade Metablica: determinao do CO2 ou cidos produzidos. 3. Peso Seco: filtrao, pesagem e secagem. til na avaliao de crescimento de fungos. 15) DEFINA OS SEGUINTES TERMOS: a) Esterilizao: destruio de todas as formas de vida microbiana. b) Desinfeco: controle voltado para destruio de microrganismos nocivos. c)Anti-sepsia: tratamento de destruio aos microrganismos, dirigido ao tecido vivo. 16) QUAL O EFEITO NAS CLULAS DA RADIAO IONIZANTE E DA NO-IONIZANTE? Radiao Ionizante: radicais (partculas) reagem diretamente com componentes orgnicos celulares, DNA, destruindo a clula. No-Ionizante: radiao danifica o DNA das clulas expostas, produzindo ligaes entre as bases de piramidinas adjacentes. 17) UM ML DE UMA AMOSTRA FOI DILUDO 10.000X E CULTIVADA EM PLACA DE GAR NUTRIENTE PODE-SE CONTAR 250 COLNIAS. QUANTAS UFCS EXISTEM EM 100 ML DESTA AMOSTRA? 250 x 10.000 (fator de diluio) = 2500000 (UFC) 250.0000 UFC 0,1mL x = 25000000UFC/mL x 1m

18) CITE 3 EXEMPLOS DE MTODOS FSICOS DE CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO, EXPLICANDO OS DANOS QUE CADA UM CAUSA NAS CLULAS. Ressecamento: retirada de gua diminuio do crescimento. Ineficiente contra endsporos e alguns vrus. Fungos so bastante resistentes. Aumento de Presso Osmtica: altas concentraes de sair e aucares sada de gua das clulas. Fungos em geral so naturalmente resistentes, bem como bactrias halfilas, halotolerantes e osmofilas. Baixas Temperaturas: Refrigerao: diminuio do metabolismo celular efeito bacteriosttico. Psicrfilos e psicrotolerantes podem ser resistentes. Congelamento: formao de cristais de gelo e ruptura celular efeito bactericida. 19) QUAIS OS NUTRIENTES QUE DEVEM ESTAR PRESENTES EM UM MEIO DE CULTURA? QUAL A FUNO DE CADA UM? gua: um componente importante e sempre presente em altas quantidades. Todas as clulas requerem gua no meio para que os nutrientes de baixo peso molecular possam atravessar a membrana celular. Fonte de energia: as atividades metablicas das clulas s podem ocorrer se houver energia disponvel na clula. Compostos orgnicos ou inorgnicos. Fonte de carbono: compostos orgnicos presente no meio (acares, aminocidos). Fonte de nitrognio: protenas, aminocidos, NO3-, NO2- e NH4+. Fatores de crescimento: vitaminas. Minerais: P, K, S, Mg, Zn.
LABORATRIO VOC FOI INCUMBIDO DE AVALIAR A CAPACIDADE DE UM DETERMINADO MICRORGANISMO, DIVIDINDO-SE POR FISSO BINRIA, FORMAR COLNIAS EM UM MEIO DE CULTURA COM DIFERENTES CONCENTRAES DE UM DETERMINADO NUTRIENTE. EM RELAO A COMPOSIO ESPECFICA E A CONSISTNCIA, QUE TIPO DE MEIO DE CULTURA VOC DEVE UTILIZAR?

20) NO

Meio seletivo: favorece o crescimento de uma determinada bactria de interesse, impedindo o crescimento de outras bactrias.

Universidade Estadual de Ponta Grossa Engenharia de Alimentos Microbiologia

Jhonatan Soultovski de Lima R.A. 091040425

Ponta Grossa Setembro/2012

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS MADIGAN, M.T., MARTINK, J.M., PARKER, J. Microbiologia de Brock. So Paulo: Prentice Hall, 2004. PELCZAR, M.J., CHAN, E.C.S., KRIEG, N.R. Microbiologia, So Paulo: Makron Books, 1996. TORTORA, G.J., FUNKE, B.R., CASE, C.L. Microbiologia. Porto Alegre: Artmed, 2000. NOGUEIRA, J.M.R., MIGUEL, L.F.S. Bacteriologia. Disponvel <http://www.epsjv.fiocruz.br/upload/d/cap3.pdf> Acesso em:26 set. 2012. em: