Introduccin Las sulfonamidas fueron los primeros frmacos usados efectivamente para combatir las infecciones las cuales

junto con los antibiticos formaron un gran campo de estudio contra las enfermedades infecciosas. Debido a la aparicin de resistencia bacteriana y al descubrimiento de frmacos ms activos y menos txicos, las sulfas fueron dejadas de lado por mucho tiempo. Sin embargo actualmente, con la recuperacin de la sensibilidad de algunas bacterias y la aparicin de la trimetoprima que se puede combinar con las sulfas y actuar sinrgicamente con ellas, las sulfas han reconquistado algunas indicaciones importantes en quimioterapia antimicrobiana. Se han sintetizado muchos compuestos y solo algunos tienen valor teraputico. Todas tienen el mismo mecanismo de accin, y sus diferencias son generalmente farmacocinticas. En el presente trabajo se reportan resultados los cuales indican la biodisponibilidad de sulfas en cada uno de los rganos involucrados en la distribucin y metabolizacin de sulfas; el medicamento fue administrado a travs de 3 vas las cuales fueron i.p, i.m, s.c. La va de administracin de un medicamento es de suma importancia ya que de ella depende las concentraciones de frmaco que lleguen a torrente sanguneo y posteriormente su distribucin por todo el organismo para llegar a su metabolizacin y causar el efecto teraputico deseado Marco terico. FARMACOCINETICA Absorcin: Con excepcin de las sulfas de accin local en el tracto gastrointestinal, el resto se absorbe rpidamente por va oral (70-100 %), apareciendo en orina a los 30minutos. El intestino delgado es el principal sitio de absorcin, pero parte de la droga, se absorbe en estmago; la absorcin desde otros sitios, como vagina, tracto respiratorio, piel, o mucosa bucal, es insegura, pero puede penetrar al organismo y producir reacciones txicas o de sensibilizacin alrgica. Distribucin: En el plasma, se unen a protenas, el grado de fijacin es variable, entre un 20-90 %. Las sulfas se distribuyen en todos los tejidos, entran fcilmente en el lquido pleural, peritoneal, sinovial, LCR, y SNC, pudiendo alcanzar concentraciones de 50-80% de la concentracin plasmtica. Pasan fcilmente a travs de la placenta y llegan a la circulacin fetal, pudiendo producir efectos txicos en el feto.

Objetivos. Determinar que va de administracin es ms eficiente. Determinar la cantidad de frmaco presente e cada uno de los rganos de metabolizacin y distribucin. Realizar de manera adecuada las administraciones del medicamento. Realizar una curva de calibracin como estndar.

Mtodo. Parte I. Preparacin de soluciones y curva de calibracin.

Preparar las siguientes soluciones: 500 ml de solucin de hidrxido de sodio 0.1N 100 ml de cido tricloroactico al 15% Solucin de nitrito de sodio al 0.1% Solucin de sulfamato de amonio al 0.5% Solucin de n-naftiletilendiamina al 0.1%

Curva de calibracin. A partir de la solucin de sulfacetamid ofteno (sulfacetamida 100 mg/ml) preparar 50 ml de un stock de 0.2 mg sulfacetamida/ml (solucin A). Se toman 0.1 ml de la solucin oftlmica.

A partir de la solucin A preparar 100 ml de una solucin estndar que contenga 10 g sulfacetamida/ml (solucin B). Se toman 5 ml de la solucin A y se aforan a 100 ml.

Utilizando la solucin B preparar la siguiente curva de calibracin (etiquetar los tubos como B, 1, 2, 3, 4, 5):

Tubo B 1 2 3 4 5

ml solucin B 0 1 2 3 4 5

ml agua destilada 5 4 3 2 1 0

Concentracin de sulfacetamida (g/ml) 0 2 4 6 8 10

Desarrollo de color: En cada tubo agregar lo siguiente: a) b) c) d) Una gota de HCl concentrado 1 ml de nitrito de sodio al 0.1%. Agitar y dejar reposar 3 min 1 ml de sulfamato de amonio al 0.5%. Agitar y dejar reposar 3 min 1 ml de n-naftiletilendiamina al 0.1%. Agitar y dejar reposar 3 min.

Determinar la absorbancia de las soluciones a 545 nm en un espectrofotmetro o en un colormetro.

Parte II. Administracin de sulfacetamida, obtencin de muestras y cuantificacin. 1. Hacer una dilucin 1:1 (sulfacetamid ofteno: SSF). Susana Rivera 2. Administrar una dosis de 200mg/kg a una rata va intraperitoneal (la mitad de los equipos) y va oral (la otra mitad). 3. 25 min despus de la administracin, anestesiar a la rata con pentobarbital sdico va i.p. a una dosis de 50 mg/kg. 4. 5 min despus de la administracin del anestsico hacer incisin en Y en la cavidad tracico-abdominal de la rata y extraer 1 ml de sangre por puncin cardiaca (al terminar, desangrar a la rata). 5. Observar si la vejiga contiene orina y extraerla. 6. Extraer los siguientes rganos (obtener una porcin de 0.5-1g de cada rgano y colocarlo sobre un vidrio de reloj, pesando el vidrio ms el rgano, luego quitar el fragmento de rgano y por diferencia obtener el peso de dicho fragmento): hgado, rin, corazn, primera porcin del intestino delgado (aproximadamente 1.5 cm, es importante antes de pesarlo lavarlo con solucin salina para eliminar el contenido intestinal). Una vez pesado cada fragmento de tejido se coloca en un tubo de ensayo.

7. Para el procesamiento de las muestras llevar a cabo el siguiente procedimiento: A) Sangre. a) Diluir un ml de sangre con 9 ml de agua destilada (sangre diluida) b) A un ml de sangre diluida adicionar 15 ml de agua destilada y 4 ml de cido tricloroactico al 15%. c) Agitar y filtrar d) Separar 5 ml del filtrado para la reaccin de desarrollo de color. B) Orina a) A 0.2 ml de orina agregar 3.8 ml de agua destilada (orina diluida) b) A 0.2 ml de orina diluida agregar 5.8 ml de agua destilada y 2 ml de cido tricloroactico al 15%. c) Agitar y filtrar d) Separar 5 ml del filtrado para la reaccin de desarrollo de color. C) Muestras de tejido a) Desmenuzar cada muestra de tejido en un homogenizador de vidrio. b) Agregar 10 ml de NaOH 0.1N c) Agitar los tubos 3 veces en un periodo de tiempo de 10 minutos y dejarlos reposar 15 min. d) Tomar dos ml del sobrenadante y trasladarlos a otro tubo. e) Agregar 6 ml de agua destilada y 2 ml de cido tricloroactico al 15%. f) Agitar y filtrar g) Separar 5 ml del filtrado para la reaccin de desarrollo de color. 8. Seguir el procedimiento marcado en el apartado de desarrollo de color. 9. Registrar las absorbancias de todas las muestras e interpolarlas en la curva de calibracin de la parte I de esta prctica. 10. Obtener las concentraciones correspondientes de sulfacetamida en g/ml de sangre u orina y en g/g de tejido en las muestras restantes tomando en cuenta las diluciones que se llevaron a cabo en todo el procedimiento. 11. Registrar los datos de todos los equipos y comparar todas las muestras segn la va de administracin.

RESULTADOS Va oral Tabla para curva de calibracin. Tubo B 1:2 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 4 3 2 1 0 2 4 6 8 10 ml sol. B 0 ml H2O destilada. 5 Concentracin 0 Absorbanci a 0.003 0.0080 0.338 0.664 0.992 1.298 1.741

Datos de concentraciones Tejido Corazn Hgado Rin Intestino Orina Sangre Concentracin (g/ml) 1.174323551 1.209092717 6.279596118 6.963389719 5.723289459 1.707450766 Absorbanci a (nm) 0.17 0.176 1.051 1.169 0.955 0.262 Resultado 93.94588409 g de frmaco/g de tejido 96.72741739 g de frmaco/g de tejido 3014.206136 g de frmaco/g de tejido 557.0711775 g de frmaco/g de tejido 9065.690503 g de frmaco/ml de orina 546.3842451 g de frmaco/ml sangre

Concentracin Absorbancia g/ml (nm) 0.66 2 4 6 8 10 0.077 0.335 0.661 0.989 1.295 1.738

GRAFICAS Grafica 1: concentracin de frmaco en el duodeno por las diferentes vas (g/gr).

Grafica 2: concentracin de frmaco en el hgado por las diferentes vas (g/gr).

Grafica 3: concentracin de frmaco en el corazn por las diferentes vas (g/gr).

Grafica 4: concentracin de frmaco en el rin por las diferentes vas (g/gr).

Grafica 5: concentracin de frmaco en la sangre por las diferentes vas (g/ml).

Grafica 6: concentracin de frmaco en la orina por las diferentes vas (g/ml)

Anlisis de resultados Administramos por va oral una dosis de 0.76mL que contena 38.4mg de sulfacetamidofteno en solucin salina con una dilucin 1:1 a una rata de 192g. La rata fue anestesiada por va i.p. con 0.152ml de pentobarbital, pero al no obtener efecto anestsico se aplic 2 inyecciones ms de pentobarbital dando un resultado de 0.45mL de anestsico que contenan 28.8mg de pentobarbital. Despus de evaluar que la rata haba quedado anestesiada por completo se hizo una incisin en forma de Y en la cavidad torcica abdominal de esta, y se extrajo por puncin cardiaca 1mL de sangre. De la vejiga se obtuvo 0.04mL de orina. Se extrajeron los rganos de la rata, los cuales fueron rin que peso 29.652g, hgado 36.212g y corazn 39.702g. De los cuales solo se utiliz 1 gramo de cada uno. Para guardar las muestras se sigui el procedimiento indicado, en el cual hubo algunos cambios por la cantidad de orina y de sangre que obtuvimos. Se prepar la solucin stock de sufacetamina para poder realizar nuestra curva de calibracin y de esta sacar nuestra solucin B la cual fue la que se ocup para la curva. Se volvi a seguir el mismo procedimiento solo cambiando la cantidad de volumen ocupado para realizar las soluciones. Se determin la absorbancia a 545nm de las muestras preparadas con la solucin B, as como tambin se determinaron las absorbancias de nuestras muestras de rganos. Las sulfonamidas se administran por va oral, intravenosa, intraperitoneal y tpica. Se absorben en el aparato digestivo y alcanzan una concentracin mayor en lquido extraplasmtico. Se distribuyen fcilmente en todos los tejidos atravesando la barrera placentaria y hematoenceflica 1 Se acetilan en el hgado en mayor porcentaje y se excretan principalmente por los riones. 2 Despus de haber determinado las absorbancias se observ que las concentraciones de sulfacetamida fueron significativas por la via oral; la mayor cantidad de frmaco se absorbe en el rin con 3014.206136 g de frmaco/g de tejido encontrados una proporcin alta. La distribucin del frmaco es amplia en los diferentes rganos, por lo que se cree que la concentracin teraputica fue mayor en plasma debido a la va de administracin, ya que las sulfonamidas pueden ser absorbidas y alcanzar niveles sanguneos detectables. En la orina se detect que la concentracin de frmaco era muy alta de 9065.690503 g de frmaco/ml debido a que ya se haba eliminado gran cantidad de frmaco.

Con base en los resultados obtenidos en las grficas de cada uno de los rganos por diferentes vas se not que por la va que tarda ms en absorberse es por la va oral, a lo que pensamos que fue porque esta va es la ms lenta en distribucin. Respecto a la grfica de duodeno la concentracin de sulfacetamida fue ms elevada en la va oral con 557,071178 g de frmaco/g de tejido en comparacin con la va subcutnea que fue de 112,6601532 g de frmaco/g de tejido y la intraperitoneal de 147,4341665 g de frmaco/g de tejido. En la grfica de hgado la concentracin ms elevada fue obtenida por va intraperitoneal con 134,365957 g de frmaco/g de tejido, debido a que esta va es ms rpida su absorcin en comparacin con la oral (96.72741739 g de frmaco/g de tejido) y la subcutnea (66.37604397 g de frmaco/g de tejido) y esta procede con mayor facilidad la metabolizacin del frmaco en el hgado. En la grfica del corazn por va oral se muestra un resultado con una concentracin de 137,629295 g de frmaco/g de tejido, ya que esta va es muy lenta y su efecto es muy prolongado. La concentracin del frmaco en la va intraperitoneal por el rin 490.9345137 g de frmaco/g de tejido es muy baja ya que la mayor parte del frmaco ya ha sido expulsado por que por esta va el frmaco es absorbido ms rpido Los valores mostrados en la grfica de sangre nos indican que la va oral con una concentracin de 546.3842451 g de frmaco/ml es la va de absorcin ms lenta con respecto a las otras 2 vas ya que es la que an tiene mucho frmaco acumulado en la sangre. En cuanto a los resultados revelados en la grfica de orina se detect de nuevo que la concentracin del frmaco era muy alta en la va oral (9065,6905 g de frmaco/g de tejido) con respecto a la i.v. 908.0913461 g de frmaco/ml y la subcutnea 3539.060663 g de frmaco/ml lo que nos hace darnos cuenta que de nuestras 3 vas utilizadas es la ms lenta por la gran cantidad de frmaco eliminado. Conclusin Tomando en cuenta los promedios totales de los resultados de cada va se puede decir que la va de absorcin del frmaco ms rpida fue la intraperitoneal en la cual la mayora tuvo concentraciones bajas comparadas con la de las otras vas, tomando en cuenta que la parte del rin casi no contena frmaco, esto quiere decir que la mayor parte de este frmaco ya haba sido expulsado. Comparando con la bibliografa ocupada donde nos dice que la va ms rpida de absorcin es la va intraperitoneal, se puede concluir que nuestros resultados fueron los correctos.

Bibliografa 1. http://www.veterinaria.uabjo.mx/manuales/MANUAL%20DE%20PRACTICAS %20DE%20FARMACOLOGIA.pdf 2. http://books.google.com.mx/books? id=5SGJ4ezraG4C&pg=PA1801&lpg=PA1801&dq=distribucion+de+sulfonamidas& source=bl&ots=0K95l9yDKd&sig=rb4EGmyQ4LIhNhPGZEWWZEeZPaA&hl=es&s a=X&ei=UK-xUa_9KsekqAGQIHoBw&ved=0CDIQ6AEwAQ#v=onepage&q=distribucion%20de %20sulfonamidas&f=false