ESPECTROMETRA DE ULTRAVIOLETA Y RADIACIN VISIBLEINSTRUMENTACIN

Se debe disponer de una fuente de radiacin, con requisitos propios para cada regin espectral. Todos los espectrofotmetros poseen alguna forma de descriminar entre las diferentes frecuencias de radiacin mediante el uso de filtros, prismas o redes de difraccin. Los mtodos no dispersivos, como los de transformada de Fourier, no se utilizan en las regiones visible y ultravioleta, aunque actualmente existen algunos instrumentos accesibles para estas regiones. Puesto que los mtodos de transformada de Fourier son ampliamente utilizados para la regin infrarroja. La muestra absorbe una porcin de la radiacin incidente; el resto de ella es transmitida hasta un detector, en donde se transforma en una seal elctrica y se visualiza, generalmente despus de ser amplificada, en un medidor, un registrador en papel o algn otro tipo de dispositivo de lectura.

FUENTES DE RADIACIN
Las fuentes de radiacin para la espectrofotometra de absorcin poseen dos condiciones bsicas. Primeramente deben proporcionar la suficiente energa radiante a lo largo de toda la regin de longitudes de onda en la que se medir la absorcin. Y segundo, deben mantener una intensidad constante por encima del intervalo de tiempo durante el que se realicen las medidas. Si la intensidad es baja en la regin donde se determina la absorcin, el interva lo de longitudes de onda que pasa a travs de la muestra, debe ser relativamente amplio, a fin de obtener el rendimiento necesario de energa. Esta amplia variedad de longitudes de onda puede producir errores en las mediciones de absortividad. Generalmente, en las regiones ultravioleta y visible del espectro, la intensidad de las fuentes no constituye un problema. Pero para consideraciones de diseo, se debe recordar que la densidad de flujo radiacional (en J/cm2) vara con el cuadrado de la distancia desde la fuente para hace; no colimados y no enfocados. Las fuentes lser no son utilizadas en instrumentos comerciales para cubrir estas regiones ya que son costosas y cualquiera de ellas, aun las fuentes de tinte ajustable, cubren solamente un intervalo limitado de longitudes de onda.

Lmparas de descarga de Hidrgeno o de Deuterio

Los trabajos en las regiones de ultravioleta se realizan principalmente con lmparas de descarga de hidrgeno o de deuterio operadas a bajas presiones y bajo voltaje. Los ctodos calientes realizan la funcin esencial de mantener la descarga, la cual tiene una caracterstica negativa de temperatura en funcin de resistencia, de modo que se requiere una fuente de corriente regulada para su operacin. Uno de los aspectos vitales de estas lmparas se encuentra en el claro entre el ctodo y el nodo, el cual reduce la descarga a una ruta estrecha. Normalmente el nodo se dispone

cerca de la salida de la fuente, con lo que se crea una intensa bola de radiado cerca de 0.6-1.5 mm del lado catdico de la salida. El uso de deuterio en vez de hidrgeno aumenta ligeramente el tamao de sta bola radiante pero intensifica el brillo, o sea luminancia (en candelas por unidad de rea) de tres a cinco veces.

Lmparas de Filamento Incandescente

Las mediciones arriba de 350 nm hasta el infrarrojo generalmente se realizan con lmparas de filamento incandescente que dan un espectro continuo en todo e intervalo. En esas lmparas se calienta un filamento de alambre, generalmente de tungsteno, hasta la incandescencia por medio de corriente elctrica. El filamento se encuentra en un bulbo de vidrio hermticamente sellado al vaco o con gas inerte. Los filamento generalmente se enrollan para aumentar su emisividad, eficacia y luminancia media. Las lmparas incandescentes son unidades robustas, de bajo costo y lo suficientemente brillantes para casi todos los trabajos de absorcin en las regiones visible y del ultravioleta cercanos. Las lmparas de tungsteno y halgeno representan una clase especial de lmparas incandescentes que contienen yodo aadido a los gases normales de relleno. La distribucin espectral de un filamento incandescente es, bsicamente, la de un radiador de cuerpo negro. De aqu que mediciones muy lejanas de la longitud de onda de pico sean susceptibles a los efectos de la luz difusa debido a la gran intensidad de la radiacin de otra longitud de onda. La lmpara de tungsteno emite mucha de su energa en el infrarrojo cercano, con un mximo en 1000 nm, y cae rpidamente en la regin ultravioleta a 1/100 de ese valor, a 300 nm. Slo 15% de la energa radiante cae en la regin visible cuando se utiliza una lmpara a la temperatura de color aparente (o sea aquella a la cual la radiacin obtenida es igual a la de un cuerpo negro perfecto) de 2850 K). A menudo se inserta un filtro endotrmico o un espejo dicroico fro (un divisor de haz de interferencia de multicapas que transmite radiaciones de longitudes de onda grandes y refleja las radiaciones de longitudes de onda cortas) entre la lmpara y el portamuestra para eliminar la radiacin infrarroja sin disminuir notablemente la energa radiante de menor longitud de onda. Las cubiertas de vidrio absorben fuertemente por debajo de 350 nm. Las lmparas incandescentes son fuentes muy importantes para aplicaciones espectromtricas debido a su excelente estabilidad, ms que debido a su radiancia espectral.

Estabilidad de las fuentes

Se requiere una gran estabilidad a corto plazo en las fuentes incandescentes o de descarga para los espectrofotmetros de un solo haz. La intensidad de la radiacin de una fuente incandescente o de descarga es proporcional al voltaje de la lmpara elevado a una potencia superior a la unidad (de tres o cuatro para las lmparas incandescentes). A fin de estabilizar la corriente fotoelctrica dentro de 0.2%, que representa la precisin espectrofotomtrica asequible, el voltaje de las fuentes para las lmparas incandescentes se debe regular dentro de unos cuantos miles de volts. La estabilidad de la fuente se logra utilizando transformadores de voltaje constante y reguladores de potencial electrnicos.

Colocando un segundo detector en la ruta ptica y muestreando una porcin de la energa radiante, puede utilizarse la seal observada para corregir la salida de la lmpara. Esto se logra retroalimentando la seal a una fuente de energa programable y as aumentar o disminuir la corriente de salida, como se requiera. De esta forma se pueden reducir las ondulaciones pticas hasta 0.1 % de pico a pico en un plazo corto. Este orden de estabilidad resulta imposible de lograr cuando se utilizan lmparas de descarga de gas o de arco.

Formas de Operacin por Modulacin o Pulsacin

Con el uso de ciclos de retroalimentacin es posible modular o pulsar las fuentes de potencia de las lmparas. La modulacin con una fuente de voltaje externo permite programar el sistema de la lmpara para que siga una funcin senoidal, cuadrtica o de rampa dentro de los lmites establecidos para los parmetros de operacin de las diferentes lmparas. Utilizando la retroalimentacin ptica y la modulacin externa, es posible obtener muy poca distorsin en la seal ptica. Puesto que la fuente se ha incorporado a la ruta de retroalimentacin total, se podr compensar cualquier no linealidad en las caractersticas d la lmpara. Estos niveles tan bajos de distorsin son casi imposibles de lograr si se utilizan obturadores mecnicos {choppers) debido a los requisitos exactos en la forma de apertura del obturador o cortador con respecto a la geometra del haz. A diferencia de la modulacin, la operacin pulsante consiste en aumentar las condiciones de operacin de una lmpara por arriba de sus condiciones normales. La corriente base se establece inicialmente en un valor bajo y, durante el pulso, esta corriente se incrementa rpidamente por encima de las condiciones normales de operacin de la lmpara, con lo que resulta una salida ptica muchas veces superior a la alcanzable en condiciones normales. El mayor incremento se observa en la regin del ultravioleta, mientras que en el infrarrojo su efecto es el menor. La duracin mnima del pulso es de 300 pis; el pulso mximo puede ser de varios segundos o mayor, dependiendo del tipo de lmpara utilizada. Como consecuencia, ambos mtodos de modulacin o de pulsacin conducen a una disminucin en la vida o duracin de las lmparas.

SELECCIN DE LA LONGITUD DE ONDA

Los mtodos espectrofotomtricos generalmente requieren el aislamiento de bandas discretas de radiacin. La ley de Beer, que es la base de todos los trabajos cuantitativos, presume el uso de radiaciones monocromticas. Adicionalmente, en el modo de operacin de emisin, se deber seleccionar la razn de seales ms favorables entre el fondo y las lneas de emisin analticas. Para aislar una banda estrecha de longitudes de onda, se utilizan filtros, monocromadores o ambos. En la actualidad, algunos mtodos no dispersivos, particularmente los de tranformadas de Fourier, estn cobrando importancia. Como ya antes se mencion, esos mtodos se utilizan comn mente en otras regiones del espectro, en especial en el infrarrojo.

Filtros
Los filtros proporcionan alto rendimiento de radiacin, con una eficiencia aproximada de 50% a 80%. El montaje de los instrumentos de filtro es relativamente fcil para, quiz, hasta cinco longitudes de onda. El paso de banda, o sea el intervalo total de longitudes de onda transmitidas cuando se utilizan filtros de interferencia, puede ser igual al que se obtiene con montajes de redes de 0.25 m. Filtros de absorcin En estos filtros los efectos se derivan de las interacciones totales de la radiacin con el material. Algunos tipos se basan en dispersiones selectivas y en otros predomina la absorcin verdaderamente inica. La transmisin de radiacin es una funcin que decrece uniformemente con el espesor y se describe por la ley exponencial de la absorcin. Los filtros de absorcin se fabrican en una gran variedad de materiales base como: gelatina, vidrio, lquidos y materiales plsticos. Los filtros de vidrio son ampliamente utilizados en los equipos automticos de anlisis qumico y en colorimetra. Los de tipo dispersivo dependen de los cristales de dispersin que se forman dentro de la masa de vidrio, mediante tratamientos reductivos y trmicos. Las longitudes de onda ms cortas se dispersan y absorben en el material, mientras que las longitudes de onda mayores resultan inafectadas. Los otros filtros del tipo de absorcin alcanzan su efectividad a travs de la absorcin de bandas especficas de radiacin mediante iones o molculas contenidas en disoluciones verdaderas. Los filtros de corte y los de corte agudo son ampliamente utilizados como filtros de bloqueo para suprimir algunas rdenes espectrales indeseables, que resultan de los filtros de interfe rencia o de las redes de difraccin. Unos filtros de corte agudo permiten el paso de longitudes de onda grandes, o sea las series roja y amarilla. Otros filtros son para longitudes de onda grandes y permiten el paso de las series azul y verde. Los filtros de absorcin de vidrio combinados se construyen con dos filtros de corte agudo. La separacin espectral entre el 50% de los puntos de corte y de corte agudo en la curva de transmitancia contra longitud de onda, vara de 20 a 70 nm. Este intervalo de longitudes de onda transmitidas por el filtro, se conoce como anchura de banda o la amplitud total.

Existe una gran variedad de filtros de plstico, de corte agudo y del tipo de anchura de banda intermedia, y se pueden obtener introduciendo colorantes directamente en la masa o por tratamiento superficial con colorantes sobre una base clara de polmero. Los filtros de tipo de corte, a diferencia de su contrapartes en vidrio, no exhiben fluorescencia en la regin visible del espectro. Filtros de interferencia Como su nombre lo indica, estos filtros se basan en el fenmeno de interferencia ptica. Un filtro simple de interficie doble (tipo Fabry-Perot) consiste en una pelcula espaciadora dielctrica insertada entre dos pelculas paralelas de metal parcialmente reflejante, generalmente plata. El espesor de la pelcula dielctrica es controlado para tener solamente una, dos o tres medias ondas y se denominan como filtros de primero, segundo o tercer orden, respectivamente. Una parte de la radiacin normal incidente llega al filtro (haz 1) y pasa a travs (haz 2), mientras que otra parte (haz 3) es reflejada desde la superficie B hasta la superficie A. Otra porcin de esta radiacin nuevamente es reflejada desde la superficie A, pasando por la superficie dielctrica y sale del filtro como haz 4, que resulta paralelo (y coincidente) con el haz 2. De esta manera, la distancia recorrida por el haz 4 es mayor que la correspon diente al haz 2 en el doble del producto del espesor dielctrico y de su ndice de refraccin. Cuando el espesor de la capa b es la mitad de la

longitud de onda de la radiacin a transmitir dentro del ndice de refraccin y del medio dielctrico, los haces 2 y 4 se encontrarn en fase y se interferirn constructivamente. La expresin para las longitudes de onda centrales en las que ocurrir el refuerzo total es:

En donde m es el nmero de orden. Puesto que para otras diferencias en las trayectorias slo ocurre un refuerzo parcial, el filtro transmite nicamente una banda de energa radiante. Aun ms, el ngulo de incidencia de la radiacin debe ser de 90. Cualquier desplazamiento de la fase de reflexin ser ignorado. Para este tipo de filtros, la anchura

de banda es de 10-15 nm, o sea el ancho total a la mitad del mximo (FWHM) y la transmisin mxima generalmente alcanza el 40%. La transmisin de bandas no deseadas se puede eliminar usando los filtros apropiados de corte o de corte agudo, como los que se incluyen en una de las cubiertas de vidrio protectoras. Un filtro de bloqueo excelente es uno de interferencia cuyo primer orden se ajusta a la banda deseada, cuando se utilizan las longitudes de onda centrales de rdenes mayores del filtro primario. Las bandas de segundo y tercer orden son ms estrechas, y muchos filtros de interferencia se disponen para transmitir slo una de ellas. Sin embargo, a medida que se incrementa el orden del filtro, el paso de banda y la anchura de sta se acortan. La transmisin de radiacin en los filtros del tipo Fabry-Perot es de 10 a 100 veces superior a las obtenidas con monocromadores con anchura de banda equivalente. La longitud de onda del centro de la banda, o sea la longitud de onda nominal, vara con la temperatura del filtro y con el ngulo de incidencia de la radiacin por filtrar. La transmisin de la banda se desplaza a mayores longitudes de onda, cuando se aumenta la temperatura en la mayora de los filtros. En el espectro visible, este desplazamiento es aproximadamente 0.01 nm/C. Al aumentar el ngulo de incidencia, la longitud de onda del centro de la banda se desplaza hacia longitudes de onda ms cortas. Un filtro de cua consiste en una pieza cuneiforme de material dielctrico depositada entre un par de capas metlicas semirreflejantes, con lo que se obtiene una interferencia de transmisin continuamente variable. En cada punto a lo largo del filtro se transmite una longitud de onda diferente debido a los cambios de espesor. Las diferentes longitudes de onda se seleccionan moviendo la cua con respecto a una rendija fija, o moviendo la rendija a lo largo del filtro. Tambin se puede construir un filtro de cua circular y utilizarse para barrer continuamente las diferentes longitudes de onda y hacerlas pasar a travs del conjunto de la rendija. Al reemplazar las pelculas metlicas por pilas de pelculas totalmente dielctricas, como se hace en los filtros de multicapas, se logra un funcionamiento altamente mejorado. Puesto que la absorcin en las capas dielctricas es casi nula, se produce una considerable variedad de anchuras de banda, manteniendo una alta transmisin a la vez que un bajo fondo. La pila reflejante de pelculas es comprimida entre capas alternas de pelculas con alto y bajo ndice de refraccin, cada una con un espesor ptico de un cuarto de onda. Cuando un tren de ondas choca contra ese recubrimiento ptico, el haz se divide en cada interficie pelicular en una serie de componentes reflejados y transmitidos. A medida que las longitudes de onda se alejan de la banda central, en cualquier direccin, rpidamente las capas dielctricas dejan de considerarse con un espesor de un cuarto de la longitud de onda deseada y ocurre transmisin general. Esas "alas" de transmisin deben eliminarse por encima de la regin espectral cubierta por el detector, utilizando filtros de bloqueo auxiliar insertados separadamente en el filtro o, ms directamente, como substrato de la multicapa. Se han desarrollado diseos de capas extremadamente complejos, que contienen de 5 a 25 capas, y actualmente se desarrollan filtros de este tipo con anchuras de banda inferiores a 0.1 nm para regiones particulares de longitud de onda (generalmente es de 1 a 5 nm) y con una transmisin de fondo interior a 10- 6. Es comn el uso de filtros totalmente bloqueados con transmisiones de 80%, y la transmisin de 55-60% de la radiacin incidente se considera como estndar. Los filtros de interferencia de multicapas pueden obtenerse sobre la regin de longitudes de onda que vara desde 180 nm en el ultravioleta hasta 35 m en el infrarrojo. Pueden resultar problemas graves si la radiacin incidente es altamente convergente o divergente. Primero, la longitud de onda que se transmite en cualquier punto del filtro obviamente es funcin del ngulo de incidencia de la radiacin, y

se observa tanto el ensanchamiento de la anchura de banda y la disminucin de la transmisin del pico. Segundo, no obstante que slo se considera el ndice efectivo, en realidad las capas de alto y bajo ndice de refraccin desplazan la radiacin independientemente y un desacuerdo en el espesor efectivo de las capas ocasiona consecuentes efectos perjudiciales.

Un tipo de filtro de interferencia para paso de ondas largas (tambin llamado dicroico) se ha diseado para transmitir longitudes de onda superiores a la longitud de onda de corte deseada. Es costumbre referirse a la longitud de corte como aquella a la que el filtro alcanza 5% de la transmisin absoluta. Las propiedades de inters primordial para el usuario consisten en la inclinacin de ascenso desde la regin de baja transmisin hasta la de alta transmisin, el valor de transmisin en el paso de banda y la transmisin de fondo. Generalmente los filtros de paso de ondas largas exhiben una pendiente inferior al 5 %, aunque se pueden lograr pendientes ms acentuadas a costa de la transmisin uniforme en el paso de banda. La transmisin del paso de banda generalmente no es llana y presenta oscilaciones debido a las bandas de reflexin secundarias. La mayor longitud de onda que trasmite el filtro se encuentra gobernada por la absorcin inherente al material del substrato escogido y, en muchos casos, los materiales de las pelculas son no absorbentes dentro de un intervalo muy amplio de longitudes de onda. La transmisin de fondo generalmente es de 10 -3 o inferior.

Monocromadores
Un monocromador consiste, en general, de (1) una rendija de entrada que proporciona una imagen ptica estrecha de la fuente de radiacin, (2) un colimador que hace paralela la radiacin procedente de la rendija de entrada, (3) una red o prisma para dispersar la radiacin incidente, (4) otro colimador para reformar las imgenes de la rendija de entrada sobre la rendija de salida y (5) una rendija de salida para aislar la banda espectral deseada, bloqueando toda la radiacin dispersada excepto la del intervalo deseado. Despus de considerar cada uno de estos elementos, se presentarn algunos montajes pticos tpicos. La funcin primordial de un monocromador es proporcionar un haz de energa radiante con una longitud de onda nominal y una anchura de banda dada. La salida espectral de cualquier monocromador usado con una fuente de radiacin continua, independientemente de su distancia focal y anchura de rendijas, consiste en una gama de longitudes de onda con un valor promedio de longitud que se presenta en el indicador del monocromador. La funcin secundaria de un monocromador consiste en el ajuste del rendimiento de energa. El flujo lumnico que emerge de la rendija de salida puede variarse ajustando el ancho de la rendija. Sin embargo, puesto que tal dimensin tambin controla la anchura de banda espectral, una rendija excesivamente amplia, con anchuras de bandas espectrales consecuentemente grandes, producir desviaciones respecto a la ley de Beer . Por lo contrario, los anchos de rendija excesivamente pequeos provocan rendimientos de baja energa, afectando la sensibilidad analtica como resultado de la degradacin de la razn seal-ruido, la cual es provocada por los altos voltajes aplicados a los dnodos del fotomultiplicador y que se requieren para detectar seales dbiles.

Los requisitos bsicos de un monocromador son: simplicidad de diseo, resolucin, gama espectral, pureza de la radiacin de salida y dispersin. La seleccin de las fuentes de radiacin as como de los detectores se correlacionan muy cercanamente. Se utilizan espejos o lentes para colectar radiacin procedente de una fuente y dirigirla a la rendija de entrada del monocromador. Cuando la fuente se sita en uno de los focos del espejo y la rendija de entrada en el otro, la radiacin colectada segn un gran ngulo slido quedar enfocada sobre la rendija. Funcionamiento del Monocromador El funcionamiento de un monocromador comprende tres factores correlacionados: resolucin, poder de captacin de luz y pureza de la radiacin de salida. La resolucin depende de la dispersin y perfeccin en la formacin de la imagen, mientras que la pureza est determinada principalmente por la cantidad de radiacin dispersada. Se requiere una gran dispersin y un alto poder resolutivo en un monocromador, para medir con precisin las lneas discretas en los espectros de emisin o las bandas de absorcin ntidas, mientras que las bandas de emisin o la aparicin de bandas anchas de absorcin se mostrarn en aquellos instrumentos que posean dispersin media. Dispersin. Se define como la distribucin de longitudes de onda en el espacio, o sea la separacin de una mezcla de longitudes de onda en sus monocomponentes. Esto se logra en un monocromador por medio de un prisma (fenmeno de refraccin) o con una rejilla (fenmeno de difraccin). La dispersin recproca lineal, D- 1, se define como la gama de longitudes de onda por distancia unitaria en el plano focal del monocromador.

Las dimensiones se dan en nanometros por milmetro. La relacin entre la dispersin angular, el intervalo angular d sobre el que se distribuye una d correspondiente, y la dispersin lineal est dada por: Resolucin

La resolucin, o el poder de resolucin, de un monocromador, es su aptitud para distinguir como entidades separadas aspectos espectrales adyacentes, como las bandas de absorcin o las lneas de emisin. La resolucin est determinada por el tamao y las caractersticas dispersivas de la rejilla o el prisma, el diseo ptico que contiene a este dispositivo dispersor y el ancho de la rendija del monocromador. En los espectrofotmetros registradores, la

resolucin tambin es funcin del sistema de registro y de la velocidad de barrido. En donde I es la longitud de onda promedio entre las dos lneas resueltas, d es la diferencia de longitudes de onda entre las lneas y w es el ancho efectivo de la apertura. Haciendo a un lado la definicin, cul es el criterio que permite decir que dos lneas espectrales adyacentes han sido resueltas?. Generalmente se prefiere un valle que se extienda hasta la seal de fondo (la lnea base) entre dos lneas de emisin discretas, sin establecer nada relativo a las intensidades de las lneas; esto es, que las bases de las funciones de rendija de dichas lneas podrn tocarse pero no sobreponerse. En este caso, la resolucin ser la misma que la anchura de la base de una funcin de rendija. La resolucin de un monocromador generalmente es inferior al valor terico debido a las aberraciones pticas, imperfecciones, efectos de difraccin y otros efectos destructivos. Los efectos de las anchuras de banda espectrales sobre las formas de banda observadas. Las resoluciones muy deficientes disminuyen las alturas de los picos con el aumento de las anchuras de banda correspondientes. La separacin de las dos bandas se encuentra menos definida y aparecen incertidumbres debido a los aumentos en las alturas de los picos, como dependencia de los cambios menores en los anchos de las rendijas. Por otra parte, con demasiada resolucin, aparece demasiado ruido innecesario sobrepuesto a las seales, sin que resulte evidente un aumento en las altu ras de los picos o la separacin de las dos bandas. Obviamente, existe una anchura de banda espectral ptima. Cuando sta es un dcimo del ancho de banda natural o verdadero del pico, las desviaciones de la altura verdadera del pico resultan inferiores a 0.5%. El sistema ptico de un monocromador produce una curvatura inherente en la imagen de la rendija que resulta evidente cuando la altura de la misma excede de unos 3 mm. En los instrumentos de precisin, la prdida de resolucin por agrandamiento de las rendijas, algunas veces se disminuye dndole a la rendija de entrada un radio de curvatura, opuesto al que se produce pticamente.

Poder de captacin de radiacin

Cuando se trata de anchuras de banda muy estrechas, se pueden resolver algunas seales espectrales muy cercanas. Ser necesario que una cantidad suficiente de radiacin llegue al detector para que se pueda distinguir la seal por encima del fondo. El poder de captacin de radiacin de un instrumento resulta crtico en este caso. El llamado nmero f, o velocidad de un espectrmetro, es una medida de la capacidad del espejo colimador para captar o colectar la radiacin que procede de la rendija de entrada y se expresa por:

En donde fc y dc representan la distancia focal y el dimetro del espejo colimador, respectivamente. Cuanto menor sea el nmero, tanto mayor ser la capacidad de coleccin o captacin de radiacin del instrumento.

Rendijas
En la espectrofotometra prctica, el mdulo del monocromador no es capaz de aislar una sola longitud de onda de radiacin del espectro continuo emitido por la fuente. Por lo contrario, es una banda definida de radiacin la que pasa por el monocromador. Esta banda finita procede de las distribuciones de las rendijas. La entrada o apertura de un monocromador es una rendija larga y estrecha cuyo ancho es generalmente ajustable. Las rendijas mayores de 3 mm pueden tener lados curvos pero, por simplicidad, hablaremos del rectngulo brillante de radiacin formado por la rendija de entrada cuando es iluminada por la fuente. Dentro del monocromador, los rayos divergen desde la rendija de entrada e iluminan el espejo colimador, el cual los hace paralelos y los enfoca sobre el elemento dispersante. Despus del colimador, el haz de rayos paralelos es una versin ampliada de la rendija de entrada. Este rectngulo de radiacin debe ser lo suficientemente grande para iluminar el lado completo del prisma, o toda la longitud de la rejilla de difraccin. Posteriormente, la unidad dispersante separa la radiacin policromtica incidente en una red de

rectngulos monocromticos, cada uno de los cuales sale de la unidad dispersante a un ngulo ligeramente distinto, sin excluir la sobreposicin de ellos. El haz disperso es interceptado por un segundo espejo colimador similar al primero (o puede tratarse de un segmento del primero), el cual se utiliza para enfocar y reducir cada rectngulo a una imagen de la rendija de entrada, esas imgenes finales caen en un plano llamado plano focal, en el que se localiza una rendija estacionaria de salida. La distancia entre el segundo colimador y la rendija de salida se conoce como distancia focal del monocromador. Dos espejos de 45 permiten que tanto la entrada como la salida se encuentren alineadas. Al eliminar uno o ambos espejos, pueden lograrse configuraciones de entrada y salida paralelas o en ngulo recto. Suponiendo que la radiacin es de intensidad igual a travs de la imagen, se puede utilizar el anlisis de Buc y Stearns y de Hogness y cols. para la dependencia de la intensidad en la rendija de salida, a un valor de longitud de onda establecido, cuando se utilizan distribuciones simtricas de rendijas Por lo general, las rendijas se caracterizan nicamente por su amplitud. La anchura de banda espectral se puede definir rigurosamente, como el intervalo de longitudes de onda de la radiacin que sale de la rendija de salida de un

monocromador, entre los lmites establecidos a la mitad del nivel de potencia radiante, entre la seal de fondo continuo y el pico de una banda de absorcin, que posea una anchura intrnseca despreciable. En forma ms simple, la anchura de banda espectral es la diferencia en los valores de longitud de onda entre los puntos en donde la transmitancia alcanza la mitad del mximo, o la anchura de banda que contiene 75% de la energa radiante que sale del monocromador. La regin espectral aislada (a lo largo de la lnea base), o paso de banda, ser la suma de la amplitud de la imagen y la de la rendija de salida, expresada en unidades de longitud de onda. El paso de banda o la regin espectral aislada, corresponde a la distancia del punto 1 al 5.

Distribucin La anchura de banda se puede expresar en trminos de la abertura o amplitud de las rendijas, W, y la dispersin lineal recproca del monocromador. Anchura de banda = W D 1 El paso de banda, , de lafuncin de rendijas esta dado por: = 2 W D 1
El seleccionar una anchura de rendijas constituye, bsicamente, un compromiso entre la intensidad de la radiacin y la resolucin. Para el barrido de espectros moleculares, el ancho de rendijas debe ajustarse de modo que la anchura de banda espectral corresponda a un dcimo de la anchura de banda natural de la porcin espectral a registrar. Para el caso de espectros atmicos de lneas, las lneas registradas son realmente funciones de rendija (curvas de intensidad contra frecuencia para la radiacin que sale de la rendija de salida) cuyo ancho medio es igual a una anchura de banda espectral. De modo que el escoger una amplitud de rendijas depender de la separacin de las lneas espectrales o del aislamiento o separacin, de la lnea analtica deseada, del resto de las lneas adyacentes.

Espejos y lentes
Dentro de un monocromador, la colimacin y los enfoques necesarios se logran utilizando espejos de superficie frontal. Al no usar lentes, se eliminan las aberraciones cromticas. La aberracin cromtica se refiere a las diferentes distancias focales para radiacin de diferentes longitudes de onda. Cuando la radiacin pasa de un medio a otro con distinto ndice de refraccin, una parte de aqulla es reflejada en la superficie de frontera. Esta prdida, para la incidencia normal de un haz en un medio puramente dielctrico, se puede expresar como: Puesto que, por lo general, el primer medio es aire ( 1 = 1), la prdida resulta ser una funcin directa y nica del ndice del substrato. La prdida en materiales de alto ndice, como los que se utilizan en la regin infrarroja, es ms severa y puede conducir a una atenuacin extrema en sistemas de multicomponentes. Aun para vidrio de bajo ndice, la prdida total puede resultar grave si se utilizan varios componentes pticos en la ruta. Al examinar un espectrofotmetro tpico, se revelan muchas interficies vidrio aire entre los espejos y las ventanas. En cada interficie vidrio a aire, existe una prdida por reflexin de 4% (2 = 1.52 para el vidrio). La reflexin desde la superficie de un vidrio puede modificarse aplicando un dielctrico o un recubrimiento de pelculas metlicas delgadas. En muchos casos resulta suficiente utilizar una sola capa cuyo espesor ptico sea igual

a un cuarto del valor de la longitud de onda de la radiacin de inters. La reflectancia normal cuando un haz incide sobre esos recubrimientos con espesor de un cuarto de onda est dada por: En donde f es el ndice de refraccin de la pelcula, a ,es el del medio que lo rodea y g es el ndice del substrato. La aplicacin de recubrimientos antirreflej antes a cada una de las superficies de vidrio utilizados en las rutas pticas, reduce la reflectancia a 0.2% aproximadamente para cada superficie.

Los prismas como Dispositivos Dispersores El efecto de un prisma depende de la refraccin de la radiacin producida por el material del prisma. El poder dispersivo depende de la variacin del ndice de refraccin con la longitud de onda. A fin de minimizar el astigmatismo del prisma y lograr una mejor definicin, se debe iluminar con una radiacin paralela, con la rendija dispuesta en forma tambin paralela al borde del prisma, y deber pasar a travs del prisma en forma simtrica, de modo que los haces incidente y emergente formen ngulos iguales con las caras; de esta forma el prisma presentar una desviacin mnima. La imagen de la rendija de entrada se proyecta sobre la de salida como una serie de imgenes distribuidas unas despus de otras, ya que las radiaciones de menor longitud de onda sufrirn mayores desviaciones que las correspondientes a mayor longitud de onda. La escala de longitudes de onda que se obtiene tendr caractersticas no lineales. Para un monocromador con un prisma de cuarzo y una distancia focal de 600 nm, se tienen los siguientes valores para la dispersin recproca lineal: 0.6 nm/mm a 230.0 nm; 1.04 nm/mm a 270.0 nm; 1.56 nm/mm a 310.0 nm; 2.9 nm/mm a 370.0 nm; 5.4 nm/mm a 450 nm, y 12.0 nm/mm a 600.0 nm. El vidrio flint presenta una dispersin tres veces mejor que el cuarzo o la slice fundida, y constituye el material de seleccin para las regiones de infrarrojo cercano y visible del espectro. El cuarzo o la slice fundida son los materiales requeridos para los trabajos en la regin ultravioleta.

En donde t es el ancho de la base del prisma. El poder de resolucin est limitado por la anchura de la base del prisma as como por el poder dispersivo del material, d /d. Este ltimo trmino no es un valor constante del prisma ya que se incrementa desde longitudes de onda grandes hasta longitudes de onda ms cortas. Se requiere el conocimiento del ndice de refraccin del material dispersante y su intensidad de

variacin con respecto a la longitud de onda, o sea la dispersin lineal con respecto a la longitud de onda. El proveedor de cada instrumento debe proporcionar una grfica que presente la informacin anterior. Uno de los diseos de monocromadores ms ampliamente utilizados es el montaje de Littrow. Las ventajas particulares de este montaje son un alto grado de dispersin logrado en una distribucin compacta, un solo espejo colimador que sirve para colimar el haz de entrada y enfocar el haz disperso, y la ausencia de doble refraccin si se utiliza un material anisotrpico como el cuarzo. Los prismas son muy utilizados actualmente en sistemas monocromadores dobles, particularmente en los de tipo prisma-rejilla, en donde el prisma acta, como selector de orden y como dispositivo dispersor en el primer monocromador.

El montaje de Littrow comprende tambin variantes de diseo: un prisma de 30 respaldado por una superficie reflejante, un prisma de 60 y un espejo Littrow separado, y una red de difraccin plana, las cuales sern discutidas en la siguiente seccin. La fuente ilumina un espejo condensador el cual enfoca el haz reflejado, sobre el plano de la rendija de entrada del monocromador. La imagen de esta rendija es colimada por un espejo parablico y dirigida hacia el dispositivo dispersor. El haz refractado o difractado regresa al mismo espejo colimador, pero a una altura diferente, y es enfocado luego hacia la rendija de salida, la cual selecciona una parte del espectro dispersado para transmitirla a travs de la muestra y hasta el detector. Las partes superiores o inferiores de las mismas rendijas se utilizan como rendijas de entrada y de salida, con lo que se logra una correspondencia perfecta entre los anchos de rendija. El sistema de rendijas se puede ajustar contiguamente o mantenerlo en una posicin fija. En la disposicin de 30, el prisma se hace girar mediante, un montaje conectado al sistema gua de longitudes de onda. En la de 60, el espejo (plano) de Littrow que se encuentra detrs del prisma, refleja el haz y lo regresa nuevamente a travs del citado prisma, con lo que se duplica la dispersin. El espejo se mueve un pequeo ngulo, para obtener as las diferentes longitudes de onda en la rendija de salida.

Uso de redes o rejillas como dispositivos de dispersin En esencia, una rejilla o red consiste en un gran nmero de rendijas equidistantes que reflejan o transmiten radiacin. nicamente a ciertos ngulos definidos la radiacin, a un valor de longitud de onda dada, se encontrar en fase: A cualquier otro ngulo, las ondas procedentes de las rendijas se interferirn destructivamente. Virtualmente, todas las rejillas (o redes) son del tipo de reflexin. Una rejilla de difraccin usual consiste en un gran nmero de estras paralelas y equidistantes, que se marcan con una herramienta rayadora de diamante, sobre una superficie perfectamente pulida. La calidad de la rejilla est muy relacionada con el grado de precisin con que se controlan la rectitud, el paralelismo y la equidistancia de las rayas o estras. La forma de stas, la determina el fin al que se destinar la rejilla. Esta forma debe mantenerse constante desde la primera hasta la ltima estra, dentro de distancias requeridas de rayado que varan de 10 a 25 cm. El rayado de una rejilla maestra es un proceso lento y arduo que requiere experiencia, habilidad y gran paciencia. La destreza para producir varias rplicas a partir de una rejilla maestra, ha hecho posible que las rejillas de difraccin se encuentren disponibles ampliamente.El proceso para duplicar una rejilla maestra implica: (1) aplicar una pelcula de agente desmoldante sobre la superficie de la rejilla maestra, (2) depositar al vaco una capa de aluminio y (3) unir una base de vidrio o de cuarzo a la capa de aluminio con un cemento epxico. Despus de un intervalo de tiempo apropiado, se separa o desmoldea la rplica o duplicado. Cada estra de la rejilla posee una cara amplia que se expone a la radiacin incidente. Esta es difractada en cada estra (esto es, dispersada) segn un gran nmero de ngulos. En ciertos valores de ngulo ocurre un refuerzo, o interferencia constructiva, como lo establece la siguiente frmula b(sen i sen r) = m En donde b, la constante de la rejilla, representa la distancia entre 2 estras adyacentes, i es el ngulo de incidencia, r es el ngulo de difraccin y m designa al orden. El signo positivo se aplica en la frmula cuando los haces incidentes y difractados se encuentran en el mismo lado de una red normal. El nmero de estras vara desde 20 estras/mm utilizadas en el infrarrojo lejano, hasta 3600 estras/mm o ms para las regiones visible y ultravioleta.

La frmula de la red o rejilla muestra que la energa incidente se difracta en varios rdenes La particin de la energa en esos rdenes depender de la forma de las estras. Las rejillas modernas poseen un perfil de ranura orientada (con sesgo especial de fulgencia) y, como consecuencia, pueden concentrar la mayor parte de la energa incidente en un solo orden. El ngulo de la estra es controlado de modo que disperse, o concentre, la mxima energa en la regin (angular) de longitudes de onda que se pretende utilizar. Aproximadamente la eficiencia se agudiza en la direccin y a la longitud de onda en donde el ngulo de

difraccin es igual al ngulo de reflexin especular desde la cara de la estra difractante. Este ngulo se denomina ngulo de orientacin fulgente y la longitud de onda a la que ocurre, longitud de onda de la orientacin fulgente. La mayora de las redes se utilizan en el primer orden ya que se tiene una eficiencia alta por encima de una gama muy amplia. La porcin de la radiacin incidente que slo es reflejada especularmente por la rejilla o red, forma el orden cero de la imagen directa.

En un montaje de tipo Littrow, el ngulo de incidencia es igual al ngulo de difraccin. Cuando esto ocurre, lo que resulta muy comn, la ecuacin de la red se simplifica a: m= 2b sen i El intervalo de longitudes de onda tiles de un monocromador de red lo determina, esencialmente, el hecho de que la eficiencia, expresada como la relacin de la radiacin reflejada a la radiacin incidente, caiga en cualquier lado de la longitud de onda de brillo. La mxima eficiencia en la longitud de onda de orientacin fulgente es inferior a 70%. La intensidad cae a la mitad de la intensidad mxima en la longitud de onda mencionada, cuando el ngulo de difraccin es casi la mitad del ngulo de orientacin en la regin de longitudes de onda cortas o casi tres veces el ngulo de orientacin fulgente en el lado de longitudes de onda grandes. Esto es equivalente al intervalo del primer orden, que se extiende desde los dos tercios hasta el doble de la longitud de onda de brillo. El paso de banda se encuentra limitado por la densidad de las estras, la distancia focal y la anchura de las rendijas. Por ejemplo, un montaje de 0.25 m, con una red de 1200 estras/mm y rendijas de 1.0 mm produce un paso de banda de, aproximadamente, 4 nm. El paso de banda se puede mejorar limitando los anchos de las rendijas de entrada y de salida, pero sacrificando el rendimiento de la radiacin de salida. Por otra parte, una rejilla plana hologrfica (ver ms adelante) de 2400 estras/mm, puede mejorar el paso de banda hasta 2 nm sin cambio en el rendimiento o en la radiacin dispersa. En los monocromadores de rejilla el nivel de ruido (radiacin indeseable) posee dos nombres y orgenes diferentes: fantasmas y radiacin parsita. Los fantasmas estn relacionados con los errores peridicos en la posicin de las estras que resultan, ya sea del tornillo de la mquina de rayado o de las vibraciones peridicas que se originaron fuera de la mquina durante el proceso de rayado. La radiacin parsita resulta de los errores no peridicos debidos a los espaciamientos de las estras o a las imperfecciones en la planicie de las superficies reflejantes de las estras. Sin embargo, el nivel de la radiacin parsita en un monocromador de red, generalmente es inferior al de un fotmetro de filtro. Las redes estriadas o las rejillas hologrficas planas pueden requerirse en donde se necesita cumplir condiciones ms estrictas. De forma que un monocromador de red posee una dispersin casi constante a lo largo del espectro y, consecuentemente, una escala lineal para las longitudes de onda. Este aspecto es una de las ventajas ms importantes de las redes o rejillas sobre los prismas. Cuando el orden m se considera fijo, se obtiene una gran dispersin con el uso de redes con un gran nmero de estras por milmetro. Es claro que para una longitud de onda dada, la dispersin ser funcin, nicamente de la tangente de r. Los cambios en el espaciamiento y en el nmero de estras no tienen efecto en la resolucin y en la dispersin cuando una red se utiliza a un ngulo dado.

Las rejillas de escalera (o Echelle, escalera en francs) son redes que poseen muy pocas estras por milmetro (tpicamente 80 estras/mm), pero que se utilizan en un orden muy alto - por ejemplo, en el 75o. orden. Redes con tan pocas lneas y utilizadas con ordenes tan altos poseen sobreposiciones agudas de rdenes espectrales. Se utiliza otro tipo de red o prisma que dispersa en ngulo recto con la escalera para

dispersar la radiacin antes de que caiga sobre la echelle, con lo que se obtiene un espectro en dos dimensiones. En un monocromador de rejilla o red, la apertura efectiva simplemente es el espesor de una estra particular, b, multiplicado por el nmero total de estras o rayas, N, y por cos r; es decir, bN cos r. Considerando que es pequeo el ngulo entre los rayos incidentes y difractados, la resolucin terica de cualquier red es descrita por cualquiera de las siguientes frmulas: En donde r es el ngulo entre el rayo difractado y la normal a la red y W es la anchura del rayado de la red. Ambas ecuaciones son correctas y equivalentes; la segunda se escribi para el modo de operacin autocolimante (Littrow). La ecuacin implica que para un orden dado, m, la resolucin aumenta con el nmero de lneas o rayas de la rejilla. La ecuacin claramente establece que para una red de anchura W y a una longitud de onda dada, la resolucin es funcin del seno del ngulo de difraccin. En las redes ordinarias este ltimo es de 10 a 15, pero muchas redes de escalera operan a 63. La regin rayada de una red debe ser lo suficientemente grande para interceptar toda la radiacin incidente, aun cuando se encuentre girada en su posicin angular extrema. Cualquier disminucin en esta rea reduce la radiacin til del espectro, desperdicia lo que pierde la red y aumenta la radiacin parsita. Como ya se estableci, la manufactura de una red maestra es un proceso largo, tedioso y de alto costo. En los ltimos aos se ha desarrollado un proceso de produccin de redes por medios fotogrficos y utilizando lseres o lseres. Las rejillas as obtenidas se conocen como redes hologrficas. Para obtener dichas redes, se utilizan dos haces de radiacin lser monocromtica que producen marcas de interferencia sobre un material fotosensible, que ha sido depositado sobre vidrio ptico puro. El vidrio puede ser plano o cncavo. La porcin de la resina expuesta a los haces de lser que se interfirieron constructivamente, es lavada, con lo que se produce una estructura estriada en relieve. La red posteriormente se recubre con una capa reflectora apropiada, y se puede utilizar de la misma forma que una red comn. Debido a que las redes hologrficas son los registros de un fenmeno ptico, no presentan fantasmas en absoluto y dan menores niveles de radiacin parsita que las redes ordinarias. Se puede producir redes hologrficas hasta con 6000 estras/mm en un espacio de 600 x 400 mm. Al cambiar las longitudes de onda de los haces de lser, se obtienen diferentes espaciamientos entre las estras; el factor limitante es la disponibilidad de lseres de diferentes longitudes de onda. Cuando se utilizan con haces

paralelos de radiacin incidente, no existen aberraciones. Aun con configuraciones de haces no paralelos, algunas veces se puede eliminar las aberraciones. Una red hologrfica cncava, cuando se ilumina a travs de una rendija de entrada, crea por rotacin, una imagen perfecta o casi perfecta sobre una rendija fija de salida. La rejilla de difraccin cncava constituye, en s, un monocromador. No se requieren otros componentes pticos, con lo que se eliminan todos los dems elementos y la necesidad de alinear esos componentes con respecto a la red. Comparada con las rejillas de rayado planas, la eficiencia de una red hologrfica generalmente es inferior, pero su rendimiento es muy uniforme a lo largo del espectro. Se han construido sistemas de alto rendimiento que incorporan redes hologrficas con aperturas de f/5 a f/l y pasos de banda de 0.4-4 nm, en configuraciones fsicas ms pequeas que muchos sistemas de red de 0.25 m. Todas las dimensiones y geometras se obtienen mediante computadoras en la manufactura de las redes y se proporcionan al cliente. No obstante que la red se puede utilizar en un montaje rotatorio, el montaje ms simple para aquellas aplicaciones que implican un nmero finito de longitudes de onda, es el espectrogrfico, en donde la red se mantiene fija y el fotodetector se coloca en el plano de la rendija de salida para cada longitud de onda de inters. Lo anterior produce un sistema ptico sin partes mviles, capaz de detectar una o varias longitudes de onda simultneamente. Este tipo de montajes se encontrarn en la descripcin de instrumentos espectrogrficos y en instrumentos para el monitoreo de efluentes en cromatografa de lquidos. Sistemas monocromadores con rejillas o redes. Los sistemas de redes ms utilizados generalmente involucran alguna variante de las configuraciones de los monocromadores de Ebert o de Littrow. No obstante que pueden sintonizarse continuamente, estn diseados para transmitir una sola longitud de onda a la vez. Por lo que son menos tiles con sistemas de deteccin de multicanal, ya que generalmente tienen efecto de vieta (vignette) esto es, hay desvanecimiento en el fondo y no producen contornos bien definidos de la imagen. Este efecto disminuye las intensidades de las longitudes de onda laterales, debido a que los medios pticos no son lo suficientemente grandes para evitar la prdida de radiacin en los bordes. Un aumento en el nmero f/ reduce el vieteo. La prdida de radiacin por tal efecto no est completamente fuera de la imagen; en vez de ello, reaparece como radiacin parsita, limitando las caractersticas de funcionamiento seal/ruido del espectrmetro.

Montaje de Ebert. Los aspectos pticos del montaje de tipo Ebert se presentan. Las rendijas de entrada y salida se encuentran en el mismo lado de la red. Utiliza un solo espejo esfrico cncavo como colimador y de enfoque. La radiacin que penetra al monocromador llega al lado izquierdo del espejo y es colimada y reflejada hacia la rejilla o red. La radiacin difractada por la red viaja hacia la mitad derecha del mismo espejo y es enfocada en la rendija de salida. Normalmente al utilizar espejos fuera de eje se introducen

efectos de astigmatismo en la imagen. Dicho astigmatismo resulta cuando las lneas verticales de un objeto se enfocan en un punto diferente de las lneas horizontales. El astigmatismo de la primera reflexin del espejo en el montaje de Ebert es casi completamente compensado por la reflexin de la mitad opuesta del espejo y durante la segunda reflexin. Puesto que los haces de entrada y difractado utilizan porciones diferentes del espejo, no se producen dispersiones en la ruta ptica desde el espejo. El diseo de Ebert ofrece una unidad de gran apertura en un tamao relativamente pequeo. La longitud de onda se selecciona simplemente pivoteando la red en su eje vertical. El diseo Fastie-Ebert se utiliza comnmente en espectrofotmetros pequeos. Ofrece gran apertura, es compacto, generalmente con f/3 a f/5, y produce poco o ningn astigmatismo. Montaje Czerny- Turner. En el montaje de lado a lado de Czerny-Turner, dos espejos cncavos reemplazan el espejo grande del montaje de Ebert. Todas las ventajas del Ebert tambin persisten en ste. El diseo de Czerny-Turner posee baja apertura, generalmente y puede ser ms difcil de alinear. Se utiliza generalmente en sistemas de ms costo por sus mejores caractersticas de radiacin parsita y de resolucin.

Montaje de rejilla de Littrow. La configuracin de Littrovv requiere un solo espejo para enfocar y colimar. Se utiliza generalmente en espectrofotmetros pequeo. En esta configuracin autocolimante, el eje de la red es paralelo y en el plano de las estras. An ms, el eje de rotacin se interseca con la radiacin en ngulo recto. Como resultado, los ngulos de incidencia y de difraccin estn en el mismo lado de la normal de la

red y son casi iguales, de modo que la ecuacin de rejilla resulta m = 2b sen . Este montaje asegura gran eficiencia de red, buena alta pureza espectral, aberraciones pequeas y un tamao reducido. En el montaje de Littrow, la fuente ilumina un solo espejo en su porcin superior. El haz es colimado y dirigido hacia la red en donde el haz se dispersa. El haz difractado regresa a la porcin inferior del mismo espejo, en donde se enfoca hacia la rendija de salida. Las porciones superior e inferior del mismo conjunto de la rendija se utilizan como rendijas de entrada y de salida, por lo que aportan correspondencia perfecta en las anchuras de rendija, las cuales pueden estar fijas o variarse continuamente. Otros montajes de rejilla. Se han utilizado muchos otros montajes para monocromadores de red. Entre estos se encuentran el de Seya-Namioka, el de Wadsworth, el de Eagle y el montaje circular de Rowland Doble Monocromacin Un monocromador doble consiste en dos sistemas dispersores utilizados en serie. La rendija til simplemente es la de salida del primer monocromador y la de entrada del segundo. Ambas guas de longitud de onda deben corresponder perfectamente. En algunos monocromadores dobles se utilizan diferentes elementos dispersivos en cada mitad; por lo general, el primer es un prisma y el segundo una red. El prisma de cuarzo acta como un seleccionador de orden que presenta un orden nico al segundo monocromador de rejilla o red. La geometra de muestreo es un doble haz. Al utilizar dos monocromadores idnticos en forma sucesiva o secuencial, la dispersin y la resolucin aproximadamente se duplican y la radiacin parsita se reduce sensiblemente. Por ejemplo, si la intensidad de la radiacin parsita en cada monocromador es 0.1% de la del haz primario, situacin usual en las regiones de ultravioleta y visible, entonces la doble monocromacin la reducir a 0.00,01% (o sea el 0.1% de 0.1%). En la regin del infrarrojo cercano, la reduccin de la radiacin parsita es inferior, cerca del 0.1% del total. Por supuesto, el factor de transmisin en un monocromador doble es casi la mitad del de cualquier otro monocromador. Si se desea, el incremento en la resolucin puede cambiarse por una ganancia en el rendimiento de energa. Por ejemplo, al abrir las rendijas al doble de la abertura necesaria, si se estuviera utilizando un solo monocromador puede asegurarse una resolucin comparable a la de un solo dispositivo y, al mismo tiempo, cuadruplicar la energa en la rendija de salida del segundo monocromador. Tambin es posible obtener el efecto de la doble monocromacin haciendo pasar la radiacin dos veces por el mismo elemento dispersor.

CELDAS Y DISPOSITIVOS DE MUESTREO

Para el trabajo ms preciso, las celdas (o cubetas) que contienen las soluciones de la muestra y de la referencia debern tener sus ventanas perfectamente paralelas y perpendiculares al haz de radiacin. Las celdas cilndricas algunas veces se utilizan en instrumentos de bajo costo pero, en estos casos, se debe cuidar la posicin de stas a fin de lograr una buena reproducibilidad. Las celdas utilizadas en espectrofotometra ultravioleta-visible, por lo general tienen 1 cm de espesor, aunque se puede utilizar celdas desde 0.1 o menos hasta 10 cm o ms. Tambin se encuentran disponibles comercialmente insertos transparentes que permiten acortar los espesores de celdas de 1 cm hasta 0.1 cm. En la regin del infrarrojo, los espesores de las celdas son mucho ms pequeos, desde 0.1 mm a 1 mm, debido a que la mayora de los disolventes absorben apreciablemente en el infrarrojo.

Las celdas deben construirse con materiales que no absorban la radiacin en la regin de inters. La slice fundida o el cuarzo es transparente desde 190 nm en la regin del ultravioleta hasta cerca de 3 a 4 m en la regin infrarroja. Los vidrios de borosilicato pueden utilizarse desde 350 nm hasta 2-3 m. Existen celdas de material plstico, de bajo costo, que se utilizan en la regin visible. Para obtener buenos datos de absorbancia, las celdas debern manejarse por pares y se pueden obtener, como tales, de los fabricantes pero siempre es mejor verificar el par analizando muestras idnticas en cada celda y reservar una para la solucin de la muestra y la otra para el disolvente solo. Las celdas deben limpiarse escrupulosamente antes y despus de ser utilizadas. Se recomienda el uso de cido ntrico o de agua regia para su limpieza. Las soluciones de dicromato no debern utilizarse debido a su tendencia a ser absorbidas por el vidrio. Despus de su limpieza, las celdas debern enjuagarse completamente y secarse evitando el uso de estufas de secaso o de flama, ya que puede existir variacin en el espesor de las mismas. Las caras de las celdas nunca deben tocarse con los dedos cuando se manejan ya que las huellas digitales, los residuos de grasa y la pelusa pueden provocar cambios notables en la transmitancia de la celda. Se encuentran disponibles comercialmente varios cambiadores automticos de muestras para ser utilizados cuando se investiga un gran nmero de ellas. Consulte la informacin de los fabricantes para ver la descripcin de los cambiadores de muestras y de los dispositivos de muestreo automtico. Fibras pticas Los haces de fibras pticas estn constituidos por numerosas fibras de vidrio o de material plstico fundido en sus extremos. Una sola fibra transmite la radiacin y un haz de stas puede transmitir tanto radiacin como imgenes. Las fibras pticas transmiten la radiacin por reflexin interna total. La reflexin total ocurre cuando un rayo, al viajar por un medio transparente interacta con una interficie formada por otro medio de menor ndice de refraccin, suponiendo que el ngulo de incidencia es mayor que un valor crtico conocido como ngulo crtico. Este ngulo se define por un rayo que es refractado paralelamente a la interficie. Por lo tanto, una fibra ptica debe consistir en un cuerpo central de alto ndice de refraccin rodeado por una cubierta de menor ndice. La radiacin colectada, dentro de un cono limitado por los ngulos de aceptacin en un extremo de la fibra, sale por el otro extremo con el mismo ngulo. La amplitud de ese cono, tambin conocida como apertura numrica (NA de numerical aperture) est dada por NA = 3 Sen w = (12 - 22)1/2 En donde 1, es el ndice de refraccin del material que constituye el centro de la fibra, 2, es el ndice de la cubierta o envolvente, 3 es el ndice del medio que la rodea y w es el ngulo medio de aceptacin mxima. En las fibras se escogen los dos vidrios no slo para obtener la apertura numrica requerida, sino con puntos de fusin y coeficientes de dilatacin compatibles. Algunas fibras tpicas poseen un ndice en el material central de 1.64 y una cubierta con un ndice de 1.53, con lo que se obtiene una apertura numrica de 0.54, que equivale a un ngulo total de 66. Los dimetros tpicos varan desde 10 hasta 150 m. En las fibras plsticas, el corazn es de polimetacrilato de metilo ( = 1.49) rodeado por una cubierta transparente

de otro polmero con un ndice de 1.39. Los dimetros interiores de estas fibras varan de 0.01 hasta 1.0 mm. Las fibras pticas son tiles cuando el material a investigar no puede colocarse en una celda estndar, por ejemplo, cuando se requiere medir la absorbancia de una solucin que fluye. El haz incidente se puede llevar hacia la solucin mediante fibras pticas y el haz transmitido puede regresar al espectrofotmetro con el uso de otro haz de fibras pticas. Algunas veces se utilizan tales fibras para conducir la radiacin, despus de la dispersin, e incidir sobre uno de los elementos de un dispositivo lineal de diodos.

DETECTORES
Un detector es un transductor que convierte la radiacin electromagntica en un flujo de electrones y, posteriormente, en una corriente o voltaje en el circuito de lectura. En muchos casos, la fotocorriente requiere amplificacin, particularmente cuando se miden bajos niveles de energa radiante. Existen detectores de un solo elemento como los fotodiodos de estado slido, los tubos fotoemisores y los tubos fotomultiplicadores y otros detectores de elementos mltiples, como los detectores con configuracin de estado slido. Las caractersticas ms importantes para cualquier tipo de detector son: sensibilidad espectral, respuesta a la longitud de onda, ganancia y tiempo de respuesta. Tubos Fotoemisores Los tubos fotoemisores al vaco son combinaciones simples de fotoctodo-nodo alojados en una cubierta al vaco. El fototubo de vaco de un solo paso contiene un ctodo sensible a la radiacin, con forma de medio cilindro metlico recubierto en su superficie receptora por una capa de material sensible a la radiacin (generalmente un metal alcalino), y un nodo con forma de alambre dispuesto en el eje del cilindro o como un alambre de configuracin rectangular que enmarca el ctodo. El fotoctodo opera segn el principio de que se emiten electrones desde algunos materiales en proporcin directa al nmero de fotones que inciden en su superficie.

Para una eficiencia ptima, la superficie del fotoctodo debe tener el mximo coeficiente de absorcin posible para la radiacin incidente. El material que recubre la superficie tambin deber tener baja funcin de trabajo con objeto de extender su cobertura espectral hacia mayores longitudes de onda. Un detector fotoemisivo no puede responder a la radiacin cuyos fotones posean energa inferior a la funcin de trabajo, puesto que sta ltima representa la energa necesaria para liberar un electrn desde la superficie del material. El fotoctodo de transmisin para un tubo fotomultiplicador), el cual es superior desde el punto de vista de la ptica electrnica, puede ser al mismo tiempo lo suficientemente grueso para absorber la mayor parte de la radiacin incidente, y lo suficientemente delgado para permitir que lo atraviesen los fotoelectrones generados, manteniendo una energa tal que supere la barrera de la funcin de trabajo en la interficie del vaco.

En forma similar, en el fotoctodo opaco o de reflexin, los fotones que son profundamente absorbidos en el material, generan fotoelectrones que no se pueden retener en la superficie y escapan. La sensibilidad espectral para algunos tipos de materiales de fotoctodos. El parmetro de eficiencia cuntica (QE, de quantum efficiency} catdica mostrado en la ilustracin, representa el nmero promedio de fotoelectrones emitidos por el fotoctodo, dividido entre el nmero de fotones incidentes. Existen esencialmente 11 composiciones qumicas en los fotoctodos, que se ofrecen en formas semitransparentes u opacas, y que producen respuestas diferentes. Cualquier tipo fsico puede combinarse con cerca de 10 materiales de ventanas, para obtener la mayora de los dispositivos comerciales. Las composiciones de ctodos ms sensibles son las de tipo bialcalino (K-Cs-Sb), el cual produce respuestas de millones de amperes por watt de intervalo. La respuesta roja se logra con el tipo Ag-O-Cs, que es utilizable hasta 1.1 m. Para alcanzar el extremo ultravioleta del espectro puede obtenerse una respuesta excelente al acoplar, virtualmente, cualquier tipo de ctodo con una ventana transparente apropiada. Los ctodos de Cs-Te, del tipo pantalla solar (es decir, insensible a la radiacin en las regiones del visible y del ultravioleta cercano del espectro), opera desde 120 hasta 350 nm.

Una respuesta plana se logra con las series de Ga-As; esta composicin genera un tubo utilizable desde 200 hasta 940 nm, con una variacin en la respuesta

absorcin del material de la cubierta. El lmite de corta longitud de onda es cerca de 350 nm cuando se utiliza una cubierta de vidrio o de 200 nm si se utiliza slice. De esta manera, la respuesta espectral es funcin de la composicin del ctodo y del material utilizado en la cubierta. Cuando un tubo fotoemisivo opera en la oscuridad, todava existir un flujo de corriente. Esta corriente se atribuye a emisin termoinica, emisin de campo, fuga hmica y a la emisin producida por la radiactividad natural del
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K presente en la cubierta de vidrio. Los tubos fotoemisivos limitan su sensibilidad

por esta corriente de oscuridad y por los bajos niveles de corriente producidos por niveles bajos de radiacin. No obstante que es posible amplificar corrientes tan pequeas como de 10 pA, existe mucha dificultad para amplificar corrientes menores, las cuales pueden llegar a ser inferiores a la fuga hmica a travs de la cubierta de vidrio que desva la resistencia de carga. La constante de tiempo del circuito amplificador (el tiempo requerido para alcanzar \/e de su respuesta final) puede resultar lo suficientemente grande para degradar el tiempo de respuesta efectivo del detector. La fuente primaria de ruido en los detectores fotoemisivos, a temperatura ambiente, generalmente es el ruido de descarga. Este ruido es causado por la naturaleza fundamentalmente discontinua de la radiacin y de la corriente elctrica. Los fotones llegan al ctodo en forma aleatoria, no obstante que la intensidad total de la radiacin es constante. Por lo tanto, los fotoelectrones emitidos por el ctodo llegan al nodo aleatoriamente y, sin embargo, la rapidez a largo plazo de los pulsos fotoelectrnicos en el nodo es constante y proporcional a la potencia radiante. Los electrones termoinicos emitidos desde el ctodo tambin ocurren en forma aleatoria. Para lograr una precisin de 1 % o mejor, se requiere una curva de calibracin para superar la ligera falta de linealidad en la dependencia de la fotocorriente sobre la iluminacin, a menos que se pueda utilizar convenientemente un mtodo de ajuste a cero. La ganancia, por supuesto, es unitaria. La constante de tiempo es de casi de 150 ps. Los tubos fotoemisivos se utilizan principalmente para auxiliar a las fuentes de baja velocidad de repeticin y alta intensidad. Tubos Fotomultiplicadores Los fototubos multiplicadores de electrones, o tubos fotomultiplicadores (PMT, de photo-multiplier tube) como se les llama comnmente, son una combinacin de un ctodo fotoemisivo y una cadena interna de dnodos multiplicadores de electrones. Los dos diseos ms populares, el de caja circular y el de configuracin en lnea. La radiacin incidente expulsa fotoelectrones del ctodo. Estos fotoelectrones son

enfocados por un campo electrosttico y acelerados hacia un electrodo curvo, que corresponde al primer dnodo, el cual est recubierto con un compuesto (BeO, GaP o CsSb) que expulse varios electrones como resultado del impacto de un electrn de alta energa. La forma redondeada de los dnodos hace converger a los electrones en una sola dimensin, mientras que el campo formado en los bordes o cerca de los extremos de los dnodos, los hace converger en una segunda dimensin. Repitiendo este proceso multiplicador electrnico a lo largo de una serie de dnodos sucesivos que se mantienen a altos voltajes, se produce una corriente de avalancha que finalmente arriba al nodo. De esta forma se logra la amplificacin de la corriente interna, produciendo la llamada ganancia. La seal de salida del tubo puede, por supuesto, amplificarse posteriormente. Para evitar el deterioro de las superficies de los dnodos por efecto de calentamiento localizado y para prevenir la fatiga del tubo, la corriente del nodo debe mantenerse por debajo de 1 mA. Esto requiere que el voltaje entre el dnodo final y el nodo sea inferior o igual a 50 V. El tiempo de respuesta en tubos con superficies dindicas de GaP es de aproximadamente 0.5 ns, mientras que con otros materiales este tiempo cae entre 1 y 2 ns. Una cadena de resistores divide el voltaje de operacin de forma que la diferencia de potencial entre dnodos adyacentes sea de 75-100 V. El potencial entre electrodos ms importante en un fotomultiplicador es el voltaje entre el ctodo y el primer dnodo, el cual se debe mantener siempre en el valor recomendado por el fabricante del tubo. Esto se puede lograr utilizando un diodo de voltaje constante (diodo Zener) en vez de la resistencia divisora entre el ctodo y el primer dnodo. Idealmente, la ganancia total G de un tubo fotomultiplicador que posee n pasos y un factor f de emisin secundaria en cada paso es G = (f)". El valor exacto de f depende tanto de la naturaleza del material emisor secundario del dnodo como del potencial elctrico impuesto. En los materiales utilizados en dnodos antiguos, el valor de/vara de 3 a 10. Con los recubrimientos de GaP se alcanza fcilmente 50, de modo que el nmero total de dnodos se puede reducir y alcanzar todava una ganancia alta. Como resultado de la gran amplificacin interna, los tubos fotomultiplicadores slo se pueden usar a bajos niveles de potencia, entre 10
-14

y 10

-4

lmenes (Un lumen es el flujo lumnico por estereoradin que emana de una fuente

puntual con una intensidad de 1 candela. Una candela es la intensidad luminosa de 1 /60 de un centmetro cuadrado del rea proyectada de un cuerpo negro en el punto de solidificacin del platino. Un lumen equivale aproximadamente a 0.00147 W). Una de las mayores ventajas de los tubos fotomultiplicadores es la capacidad que poseen de cambiar la sensibilidad en un intervalo muy amplio, simplemente cambiando el voltaje de alimentacin. Puesto que la corriente de oscuridad tambin produce una corriente amplificada en la salida, ello establece un lmite inferior en la potencia radiante que puede detectarse directamente. La corriente de oscuridad trmica se minimiza enfriando el tubo fotomultiplicador. Debido a que la corriente de oscuridad representa un componente muy estable, se puede compensar automticamente mediante un arreglo de potencimetros de ajuste a cero o bien restarse directamente de la seal de salida.

Fotodiodos

Los fotodiodos operan segn un principio completamente distinto al de los detectores anteriormente descritos. La construccin de un diodo de silicio plano con unin p-n. El proceso comienza con un material de silicio que posee resistividad intrnseca muy alta, posteriormente se realizan difusiones p y n muy superficiales en las caras superior e inferior respectivamente y la superficie superior se protege con un recubrimiento de SiO,. Se forman contactos metlicos en las superficies superior e inferior para permitir las conexiones elctricas. Las regiones p difusas determinan la unin y el rea pticamente activa. Un fotn debe llegar al rea activa (o intrnseca) para producir flujo de corriente en el circuito externo. Una unin semiconductora p-n posee una polarizacin inversa, de modo que no existe flujo de corriente. Cuando un fotn interacta con el diodo, los electrones son llevados hasta la banda de conduccin en donde pueden actuar como portadores de cargas. De esta manera, la corriente generada es proporcional a la potencia radiante incidente. La mayora de estos dispositivos detectan nicamente radiacin visible y en el infrarrojo cercano. La responsividad de los diodos es de 250-500 mA/W en el espectro visible. Esto es, por lo menos, un orden de magnitud superior que los tubos fotoemisivos al vaco, pero muchos rdenes de magnitud menos que los tubos fotomultiplicadores, los cuales poseen ganancias tan altas como se ha indicado previamente. La fotocorriente de salida es lineal hasta 10 dcadas en funcin del nivel de iluminacin. En general, la velocidad del fotodiodo est limitada por la constante de tiempo formada entre la impedancia de entrada del amplificador y la capacitancia en derivacin intrnseca de 2-5 pF. Para mantener la capacitancia lo ms baja posible, se utilizan dispositivos extremadamente pequeos y la seal ptica se acopla a los dispositivos por medio de lentes o fibras pticas. Los tiempos de ascenso varan poco menos de 1 ns hasta ms de 10 s. Muchos fotodiodos pequeos se pueden ensamblar en disposiciones lineales o bidimensionales, en los cuales cada diodo capta una seal en forma simultnea. Un capacitor pequeo se acopla a cada diodo y se carga hasta un nivel dado antes de que ocurra la iluminacin en el diodo. Al iluminarlo la carga produce escape en el capacitor. Despus de que se obtienen las seales, se barre cada elemento del arreglo, se registra la prdida de carga y se recarga el capacitor. De esta forma se obtienen datos en una y aun en dos dimensiones. Por ejemplo, se puede situar cada diodo de modo que obtenga la intensidad de un intervalo estrecho de longitudes de onda de un espectro disperso o la intensidad de la luz procedente de una imagen dibimensional. Los sistemas de estado slido tienen una estabilidad excelente, existe muy poca dispersin de la carga de un diodo a otro adyacente, lo que constituye un factor importante cuando se tienen diferencias marcadas en intensidad. Los dispositivos de fotodiodos lineales se encuentran disponibles comercialmente y contienen desde 128 hasta 4096 elementos en cada arreglo.

MDULOS DE LECTURA
En los instrumentos ms simples se producen seales de corriente directa (CD) que se amplifcan mediante amplificador de CD v se repipiran en medidores analgicos (de lectura). Registradores, voltmetros digitales o en monitores de sistemas de computacin. Los amplificadores de alta ganancia estn sujetos a errores de deriva (drift) y a errores de desplazamiento, sin embargo, la presencia de ruido de baja frecuencia (l/f) en la seal restringe severamente el grado en que se puede mejorar la relacin seal-ruido por medio de filtros simples de paso bajo. Por esas razones, es a menudo deseable

modular la seal y transformarla en una frecuencia de corriente alterna (CA) lo suficientemente alta que impida los problemas de deriva y los problemas de ruido l/f. Despus de la amplificacin, realizada en un amplificador de CA, la seal se convierte a CD por medio de un desmodulador o rectificador, ya que todos los dispositivos de registro comnmente utilizados requieren seales de CD. La corriente generalmente se convierte en un voltaje antes de ser visualizada o registrada. La modulacin se realiza usualmente interrumpiendo en forma pulsante el haz de radiacin que llega al detector mediante un disco de sector rotatorio ptico, dependiendo de la aplicacin. o modulando el haz de radiacin como ya antes se describi. Si se utiliza un obturador o trozador {chopper), se puede ubicar en varios lugares del sistema

INSTRUMENTOS PARA LA FOTOMETRA DE ABSORCIN

Histricamente se han utilizado monocromadores de barrido con detectores de un solo canal en sistemas sencillos o en complicadas disposiciones de doble haz para realizar medidas de absorbancia en la gama espectral de 190 a 800 nm. Estos sistemas espectromtricos se utilizan a menudo con el clculo analgico de transmitancia y absorbancia. Tambin se pueden acoplar a microprocesadores para simplificar la reduccin de datos. Actualmente, una nueva generacin de instrumentos que incorporan los avances ms recientes en la tecnologa de detectores de multicanal, redes hologrficas cncavas y microcomputadoras est apareciendo con capacidades antes inasequibles. Consiste simplemente de una fuente, un sistema de enfoque ptico, un portamuestras, un dispositivo aislador de longitud de onda y un detector con su amplificador y sistema de registro. Desde el punto de vista de ingeniera es deseable que este tipo de sistemas esten limitados por el detector; o sea, que el factor limitante debe ser el ruido generado por el detector. Cualquier cosa que se realice para aumentar los niveles de seal en el detector es, por consiguiente, deseable. La medida del funcionamiento se define, por lo general como la precisin o la exactitud fotomtrica. En trminos de su construccin se puede reconocer la diferencia entre las rutas de radiacin de simple y de doble haz, y si el mdulo del fotmetro est diseado para lectura directa o si utiliza un circuito de balance. Algunos aspectos especiales incluyen doble cremacin y sistemas de longitudes de onda duales. En la seleccin final de un instrumento se deben considerar los conceptos de costo inicial, costo de mantenimiento, flexibilidad de operacin, caractersticas de resolucin, intervalo de longitudes de onda, precisin y, quiz, la disponibilidad de equipo auxiliar para desarrollar otras reas de aplicacin. Algunos diseos de instrumentos se han concentrado en desarrollar medidas secuenciales rpida y automticamente con el uso de accesorios de muestreo rpidos. Los accesorios son capaces de llenar y evacuar rpidamente las celdas portamuestra haciendo posible el anlisis de muchas muestras por hora segn una base rutinaria. Se dispone de espectrofotmetros para realizar anlisis de velocidades de reaccin o para analizar varios ingredientes simultneamente en una solucin. Muchas de las ventajas actuales de los espectrofotmetros son resultado directo de la capacidad de los microprocesadores utilizados en la automatizacin de instrumentos. Por ejemplo, existen instrumentos comerciales completamente digitalizados y acoplados a calculadoras estadsticas programables que realizan la adquisicin de datos sin intervencin del analista, los almacenan, calculan espectros de primera y segunda derivada, localizan la posicin del pico e integran su rea.

Los instrumentos para fotometra de absorcin se pueden clasificar como espectrofotmetros (si incluyen un monocromador en su diseo) o como fotmetros de filtro. Los espectrofotmetros dispersivos resultan costosos pero ofrecen la ventaja de tener una seleccin continua de la longitud de onda. Su limitacin estriba en el rendimiento de radiacin, la dispersin de la luz y su tamao. Un monocromador es un dispositivo ineficiente para transferir energa ptica, por lo que la prdida de energa en estos intrumentos es considerable. Por ejemplo, si la anchura de una rendija de salida es de 0.1 mm con altura de 10 mm, la apertura resultante para el detector es del orden de 10
-6

mm2. Para detectar una pequea cantidad de

energa que llegue al detector, se requiere un tubo fotomultiplicador. El ruido del tubo degrada la relacin de seal a ruido y establece demandas severas sobre los sistemas amplificadores y de registro, cuando se ha de obtener una muy alta precisin. Los fotmetros de filtro ofrecen una ventaja econmica sobre los instrumentos dispersivos, adems de incrementar la luminosidad, particularmente cuando se utilizan filtros del tipo de interferencia. Por supuesto, los filtros se pueden obtener para todos los intervalos de longitud de onda que se desee. Si un anlisis requiere una medicin a una longitud de onda para la que no existe un filtro especfico, se debe aceptar una sensibilidad inferior a la mxima utilizado otro filtro semejante. En estos equipos generalmente se obtiene una mayor relacin de seal a ruido que con un monocromador. Se utilizan detectores menos sensibles puesto que los niveles de radiacin son superiores. En algunos anlisis rutinarios o repetitivos, la estabilidad de los filtros ofrece algunas ventajas. Es posible seleccionar un filtro presionando simplemente un botn ya que no existe peligro en los ajustes correctos de las longitudes de onda. A pesar de estas ventajas, los intrumentos dispersivos modernos tienen muchas otras y resultan ms verstiles que los fotmetros de filtro, los cuales actualmente, ya no se encuentran con tanta facilidad en los laboratorios analticos. Instrumentos de un solo haz El tipo ms simple de espectrmetro de absorcin se basa en la operacin con un solo haz, en el cual la muestra se examina para determinar la cantidad de radiacin absorbida a una longitud de onda dada. Los resultados se comparan contra los de una referencia (generalmente contra los del disolvente solo) que se obtiene en una determinacin separada. Los cambios en la intensidad de la fuente y en la sensibilidad del detector contra la longitud de onda son los factores limitantes en los intrumentos de un solo haz cuando se realizan medidas, por comparacin, a un solo valor de longitud de onda. Estos intrumentos se utilizan bsicamente para la determinacin cuantitativa de un solo componente cuando s analiza un gran nmero de muestras similares. Al utilizar estos intrumentos de un solo haz, se deber conocer con anticipacin el valor mximo de absorcin para el analito y establecer la longitud de onda correspondiente a este valor. El material de referencia (prueba en blanco del disolvente solo) se coloca en el trayecto de la radiacin y el intrumento se ajusta a 0% en transmitancia con el obturador bloqueando por completo la radiacin hacia el detector y, al retirar el obturador, el valor de transmitancia se deber ajusfar hasta 100%. Una vez realizados esos ajustes, se posiciona la muestra en la trayectoria del haz y se lee el valor de transmitancia. La concentracin se determina utilizando una curva de calibracin o mediante clculos algebraicos. Dependiendo del instrumento utilizado, la lectura se puede realizar por observacin directa de la deflexin en un medidor analgico, al establecer una escala de "balance nulo", mediante el trazo en un registrador o

en una impresin de valores digitales. El requisito obvio de los instrumentos de un solo haz es el alto grado de estabilidad, tanto en la fuente como en el detector ya que cualquier fluctuacin produce errores en la comparacin de las dos lecturas, la de la muestra y la del disolvente. En el trabajo rutinario, en donde los errores de 1% resultan insignificantes, la estabilidad del instrumento no constituye un factor limitante. Fotmetros de Filtro Se puede disear un fotmetro de absorcin, de bajo costo e incapaz de realizar barridos de longitudes de onda, con un juego de filtros de absorcin. Estos instrumentos resultan adecuados en muchos mtodos, especialmente para aquellos sistemas que presentan bandas de absorcin anchas. Al tener un alto rendimiento de energa proporcionado por el filtro y una gran apertura (a menudo de espectrofotmetros de un solo haz. Espectrofotmetros La versin moderna de un espectrofotmetro de un solo haz se presenta en la Fig. Una fraccin pequea de la energa proveniente de la fuente es separada mediante un divisor de haz y utilizada como haz de comparacin para compensar cualquier variacin en la salida de la lmpara, fluctuaciones en el voltaje de lnea e inestabilidades electrnicas. Se utilizan dos fuentes de radiacin: una lmpara de halgeno de l/f), resulta innecesario el uso de amplificadores de seal. Los fotmetros de filtro se operan como los

cuarzo para el intervalo visible y una lmpara de deuterio para el ultravioleta. El medio dispersivo con siste en una red hologrfica Bausch & Lomb. El detector es un tubo fotomultiplicador que cubre la mayor parte de la regin ultravioleta-visible, adems de un sensor de estado slido de silicio que se utiliza para la regin roja del espectro. El equipo Spectronic 1001 posee un intervalo de 190 a 950 nm y una anchura de banda espectral de 2 nm. Contiene dos microprocesadores interconstruidos, uno para cubrir las funciones principales del instrumento y otro para controlar el monocromador. Los resultados se presentan como registros alfanumricos en el instrumento, en una impresora opcional o en una computadora optativa acoplada al equipo, y pueden presentarse como valores de transmitancia, absorbancia o de concentracin (despus de una calibracin con estndares). La microcomputadora permite realizar operaciones como: relaciones de absorbancia, clculos estadsticos y determinaciones a diferentes longitudes de onda para la misma muestra. Se encuentran disponibles muchos accesorios, como soportes para varias celdas de muestras, para celda semimicro de flujo, celdas con control termosttico o de control por temperatura, celda de paso largo, acoplamientos (interfaces) para registradores en tira de papel, para computadoras y para equipos de muestreo automtico. Instrumentos de Doble Haz En los instrumentos de doble haz la radiacin monocromtica se divide en dos componente' con potencias radiantes similares. Un haz pasa a travs de la muestra, y el otro a travs de la solucin de referencia o del blanco. Sin embargo, la potencia radiante en el haz de referencia vara con la energa de la fuente, la transmisin del monocromador, la transmisin a travs del material de referencia y la respuesta del detector, factores que varan tam bien con la longitud de onda. Si la salida del haz de referencia se puede mantener constante entonces la transmitancia de la muestra puede registrarse directamente como la salida de haz de la misma. Existen varias formas de mantener la salida del haz de referencia constante (1) crear un ciclo de control para regular la sensibilidad del fotodetector a travs del voltaje de los dnodos, (2) controlar el ancho de la rendija del monocromador mediante servomotores y guas mecnicas de rendijas, y (3) instalar una cua ptica en la trayectoria de le radiacin para aumentar o disminuir automticamente la cantidad de radiacin que llegan al detector. El control automtico de ganancia es la opcin ms econmica de las tres anteriores ya que involucra nicamente un circuito de control electrnico sin componentes mecnicos Cuando se utiliza un monocromador de red permite mantener un ancho de rendija constante y, por consiguiente, un poder de resolucin constante durante el barrido. Sin embargo el nivel de ruido del fotodetector vara con la ganancia y no permanece constante durante dicho barrido. El control automtico de rendijas es mucho ms costoso, ya que implica el uso de complicadas guas de rendijas mecnicas. Y, aunque la ganancia y el nivel de ruido permanecen constantes, al variar las anchuras de rendijas, se vara consecuentemente la resolucin.

Los sistemas de cua ptica poseen una utilidad intermedia. Se requieren sistemas mecnicos de guas menos complicados que los de las rendijas. La ganancia del fotodetector as como la resolucin, permanecen constantes durante el barrido. Con excepcin del sistema de cua ptica, que se utiliza en los procedimientos de "cero ptico" que se describirn posteriormente, no es necesario controlar la potencia del haz que pasa por la solucin de referencia en la operacin de doble haz verdadero. Durante esta operacin, el espectro de absorcin es corregido automticamente en cuanto a la res puesta del instrumento como funcin de la longitud de onda, midiendo continuamente la relacin de P/Po. Puesto que la inestabilidad de la fuente as como las variaciones de amplificador afectan a ambos haces en forma similar, sus efectos se deben cancelar. La absorcin debida al disolvente se resta automticamente si se le coloca en el haz de referenca. Otro beneficio lo constituye la potencialidad de obtener la absorbancia diferencial de dos muestras colocadas en cada haz, lo cual reduce el manejo manual de datos. En este tipo de determinaciones slo es posible registrar diferencias espectrales en las muestras. Espectrofotmetros de barrido de Doble Haz Los espectrofotmetros de este tipo presentan un cambio continuo en funcin de la longitud de onda. Uno de los haces se destina, permanentemente, a la solucin de referencia o al objetivo o blanco, y el otro a la muestra. A medida que se barre el intervalo de longitudes de onda, se realiza una comparacin automtica de las transmitancias de la muestra y de la referencia. La relacin de los valores de la muestra a los de la referencia, despus de convertirlos a valores de absorbancia si se desea, es graficada en un registrador como funcin de la longitud de onda. La operacin automtica elimina muchos ajustes manuales que consumen tiempo, especialmente en los anlisis cualitativos donde se deben trazar curvas complejas a lo largo de una amplia gama espectral. En el dispositivo ptico denominado de doble haz en tiempo, el haz de radiacin de la fuente, visible o ultravioleta (A) entra al monocromador de red en la configuracin Czerny-Turner a travs de la rendija de entrada (C). Los filtros de banda ancha contenidos en el rotor (B) se posicionan automticamente a los valores de longitudes de onda requeridos para reducir la cantidad de radiacin parsita y eliminar los rdenes indeseables de la red de difraccin. La rejilla consiste realmente en dos redes adosadas cuya rotacin permite posicionar la regin a investigar.

El haz pasa por las rendijas intermedias (D1, y D2) y regresa a la red para una segunda dispersin. El haz ptico que emerge a travs de la rendija (E) se dirige, alternativamente, hacia las celdas de la muestra y de la referencia (G1 y G2) por accin de un espejo de sectores rotatorio (espejo obturador) (F) y los espejos de esquina. La parte abierta del sector deja pasar el haz directamente hacia una trayectoria, mientras que la parte reflejante del espejo lo enva por una segunda trayectoria. Esta es la base de la designacin de doble haz en tiempo. Cada haz consiste en un pulso de radiacin que es separado, en el tiempo, por un intervalo oscuro; posteriormente se dirige hacia el tubo multiplicador (H) para deteccin en las regiones de ultravioleta-visible o hacia el detector de sulfuro de plomo (I) para la regin del infrarrojo cercano, segn un procedimiento en tiempo compartido. El espectrofotmetro Vanan UV-Vis-NIR (Ratio Recording/Scanning Double-Beam) (para registro y barrido de doble haz), tiene una gama de longitudes de onda de 185 hasta 3152 nm, diez velocidades de barrido que varan de 0.01 hasta 10 nm/s y anchuras de banda espectrales desde 0.07 a 3.6 nm para el intervalo ultravioleta-visible, y de 0.16 hasta 14.4 nm para la regin del infrarrojo cercano. Los detectores, las fuentes y las redes se controlan automticamente. Incluye una impresora digital de 18 caracteres. Los microprocesadores interconstruidos permiten seleccionar los formatos de salida, la calibracin automtica de cero, la reduccin de datos, el tratamiento estadstico de estos, las rutinas de clculo de concentraciones con grficas lineales o no lineales, las determinaciones cinticas y muchas otras alternativas. Se encuentran disponibles muchos accesorios como: celdas termostticas, programadores automticos de cinco celdas, adaptadores para microceldas y un accesorio para reflectancia. En el procedimiento de cero ptico, los dos haces separados (entrecortados) (chopped) caen en un solo detector. Si sus intensidades son idnticas, el amplificador presentar una seal de salida de DC. Cualquier diferencia entre las intensidades de los haces producir una seal de AC con la frecuencia del obturador. La seal desbalanceada se amplifica posteriormente y sirve para dirigir el atenuador ptico hacia dentro o

hacia afuera del haz de referencia. La fraccin del espacio abierto que da el atenuador al haz de referencia, comparado con el espacio que da cuando la muestra de referencia se encuentra en ambos haces, corresponde al porcentaje de transmitancia de la muestra. Un enlace entre el servomotor que acciona al atenuador y la plumita del registrador permite obtener el grfico de la transmitancia. Espectrofotmetro de Doble Longitud de Onda La espectrofotometra de doble longitud de onda se refiere a la investigacin fotomtrica de un material, cuando pasa radiacin de dos longitudes de onda diferente a travs de la misma muestra, antes de llegar al detector. La muestra se dispone cerca del detector para compensar cualquier turbidez o dispersin que ocurra. La radiacin proveniente de la fuente entra a un monocromador del tipo Czerny-Turner por la rendija 5, para formar una imagen de la mascarilla sobre las redes La espectrofotometra de doble longitud de onda aporta informacin de dos longitudes de onda por unidad de tiempo. Con todos los dems factores constantes, los resultados obtenidos deben ser ms tiles que los obtenidos por una determinacin de absorbancia de doble haz. Este es Espectrofotmetro ptica de En la inversa onda HP en la Diodo tcnica de ptica todas las longitudes de pasan a travs de la muestra. En el equipo 8450A que se muestra Fig., el haz de radiacin procedente o una de espejo de las lmparas de ultravioleta visible es dirigido por las cinco posiciones del director de haz, regresa mediante un juego de espejos hacia otra de haz y entrada Un precisin director mayor de esquina seccin del espejo director luego es proyectado a la del monocromador. servomecanismo de de

Inversa y Configuracin

controla la posicin del de haz, con una precisin que 3 segundos de arco, y

puede interrumpirse de una posicin de una muestra a otra en menos de 146 ms. Pueden utilizarse desde 2 hasta las 5 posiciones de la celda. La microcomputadora registra las posiciones que se han utilizado y controla consecuentemente al director de haz. El haz que penetra por la rendija del monocromador es centrado sobre la rendija de 0.06 mm por medio de una retroalimentacin provocada por la luz reflejada por cada borde de la rendija, hacia dos fotodiodos que reciben los reflejos luminosos de cada borde. A la radiacin que pasa a travs de la rendija la dispersan dos redes hologrficas sobre un substrato, dando dos espectros independientes que se enfocan en dos arreglos de fotodiodos, uno para la regin visible y otro para el ultravioleta. Cada configuracin de diodos cuenta con 211 (de los cuales slo se utilizan 201) cubriendo los intervalos de 200-400 nm en el ultravioleta y 400-800 nm en el visible; cada diodo cubre 1 nm en el intervalo de ultravioleta y 2 nm en el visible. Durante el procedimiento de encendido de la lmpara, la ganancia de cada diodo se fija en uno de 16 valores, de modo que la salida del convertidor analgico a digital no exceda de 15/16 del intervalo total cuando convierta la seal del diodo a un valor digital para su medicin y almacenamiento. El instrumento hace pasar radiacin por las celdas de la muestra y de la referencia dos veces en cada perodo de medicin de un segundo y tambin determina la corriente de oscuridad de cada detector, por lo menos, una vez por segundo. Para compensar cualquier irregularidad en las celdas de las muestras, todas las celdas deben llenarse con un disolvente y realizar una medida de balance. Posteriormente, el instrumento registrar y almacenar el espectro de balance para utilizarlo en la correccin de medidas subsecuentes. La absorbancia se calcula como sigue: En donde S y R representan las potencias radiantes que llegan al detector despus de haber pasado por las soluciones de muestra y de referencia, respectivamente; D es el valor de corriente de oscuridad y B es la correccin de balance. La microcomputadora permite almacenar hasta 7 espectros completos o 12 espectros parciales de sustancias estndar y un anlisis problema que contenga hasta 12 componentes, permitiendo la adicin de cada espectro.