1.

INTRODUO
Na cromatografia gasosa, os componentes de uma amostra vaporizada

so separados em conseqncia de sua partio entre uma fase mvel gasosa e uma fase estacionria lquida ou slida contida dentro da coluna. Ao realizarse uma separao por cromatografia gasosa, a amostra injetada e vaporizada na cabea da coluna cromatogrfica. A eluio feita por um fluxo de fase mvel gasosa inerte. Em contraste, com muitos outros tipos de cromatografia, a fase mvel no interage com as molculas do analito; sua nica funo transportar o analito atravs da coluna. Dois tipos de cromatografia gasosa so encontrados: cromatografia gslquido (CGL) e cromatografia gs-slido (CGS). A cromatografia gs-lquido encontra amplo uso em todas as reas da cincia; seu nome geralmente abreviado para cromatografia gasosa (CG). A cromatografia gs-slido baseada em uma fase estacionria slida na qual a reteno dos analitos ocorre por adsoro. A cromatografia gs-slido tem aplicao limitada em virtude da reteno semipermanente de molculas polares ativas e efeito de cauda severo nos picos de eluio (como conseqncia da natureza no-linear do processo de adsoro). Assim, essa tcnica no encontrou ampla aplicao exceto na separao de certas espcies gasosas de baixo peso molecular. A cromatografia gs-lquido baseada na partio do analito entre a fase mvel gasosa e uma fase lquida imobilizada na superfcie de um material slido inerte de recheio ou nas paredes de um tubo capilar. O conceito de cromatografia gs-lquido foi enunciado pela primeira vez em 1941 por Martin e Synge, que foram tambm responsveis pelo desenvolvimento da cromatografia de partio lquido-lquido. Contudo, mais de uma dcada se passou antes que o valor da cromatografia gs-lquido fosse demonstrado experimentalmente e que essa tcnica passasse a ser empregada como uma ferramenta rotineira no laboratrio. Em 1955, o primeiro instrumento comercial para a cromatografia gs-lquido surgiu no mercado. Desde essa poca, o crescimento nas aplicaes dessa tcnica tem sido fenomenal. Atualmente, muitas centenas de milhares de cromatgrafos a gs esto em uso em todo o mundo.

1.1 Sistema Gs de Arraste

A fase mvel em cromatografia gasosa denominada gs de arraste e deve ser quimicamente inerte. O hlio a fase mvel gasosa mais comum, embora o argnio, o nitrognio e o hidrognio sejam tambm empregados. Esses gases esto disponveis em cilindros pressurizados. Reguladores de presso, manmetros e medidores de vazo so necessrios para se controlar a vazo do gs.

Figura 1 - Diagrama de blocos As vazes so normalmente controladas por um regulador de presso de dois estgios no cilindro do gs e algum tipo de regulador de presso ou regulador de fluxo montado no cromatgrafo. As presses de entrada situamse na faixa de 10 a 50 psi (libras/polegada 2) acima da presso ambiente, o que produz vazes de 25 a 150 mL min1 em colunas recheadas e de 1 a 25 mL min1 para as colunas capilares de tubo aberto. Geralmente, admite-se que as vazes sero constantes se a presso de entrada permanecer constante. As vazes podem ser estabelecidas por meio de um rotmetro colocado na cabea da coluna; esse dispositivo no to exato como um medidor de bolhas simples. Normalmente, o medidor de vazo est localizado no final da coluna, como indicado na Figura1. Um filme de sabo formado no caminho do gs quando um bulbo de borracha contendo uma soluo aquosa de sabo ou detergente pressionado; o tempo necessrio para que esse filme se mova entre duas graduaes em uma bureta medido e convertido em vazo volumtrica.
2

1.2 Sistema de Injeo da amostra

A eficincia da coluna requer que a amostra seja de tamanho adequado e introduzida como uma zona estreita de vapor; a injeo lenta ou de amostras muito volumosas causa o espalhamento das bandas e uma resoluo pobre. Seringas calibradas so empregadas para a injeo de amostras lquidas por meio de diafragmas ou septos de silicone em uma porta de admisso da amostra aquecida localizada na cabea da coluna. A porta de admisso da amostra (Figura 2) ordinariamente mantida a cerca de 50C acima do ponto de ebulio do componente menos voltil da amostra. Para as colunas analticas recheadas normais, o tamanho da amostra pode variar de poucos dcimos de microlitro at 20 mL. As colunas capilares necessitam de amostras menores por um fator de 100 ou maior. Um divisor de amostra freqentemente necessrio com colunas capilares para desviar para a coluna uma pequena frao conhecida (1:100 a 1:500) do volume injetado, enviando o restante para o descarte. Os cromatgrafos a gs comerciais, desenhados para empregar colunas capilares, incorporam esses divisores; tambm permitem a injeo sem diviso de fluxo quando colunas recheadas so empregadas.

1.3 Configuraes de Colunas e Fornos para as Colunas

Dois tipos gerais de colunas so encontrados em cromatografia gasosa: colunas recheadas e colunas tubulares abertas, ou colunas capilares. No passado, a ampla maioria das anlises cromatogrficas empregava as colunas Figura 2 - Vista da seco transversal de um injetor vaporizador direto tipo microflash. recheadas. Para a maioria das aplicaes atuais, as colunas recheadas tm sido substitudas pelas colunas tubulares abertas, mais eficientes e mais rpidas. As colunas cromatogrficas variam em comprimento desde menos que 2 m at 50 m ou mais. So construdas de ao inoxidvel, vidro, slica fundida ou Teflon. Para serem inseridas nos fornos para termostatizao, as colunas so geralmente enroladas em bobinas com dimetro de 10 a 30 cm. A temperatura da coluna uma varivel importante que deve ser controlada dentro de poucos dcimos de grau para se obter boa preciso. Assim, a coluna normalmente abrigada em um forno termostatizado. A temperatura tima da coluna depende do ponto de ebulio da amostra e do grau de separao requerido. Grosseiramente, uma temperatura igual ou ligeiramente superior ao ponto de ebulio mdio da amostra proporciona tempos de eluio razoveis (2 a 30 min). Para as amostras com uma ampla faixa de ponto de ebulio, freqentemente desejvel que se empregue uma programao de temperatura, pela qual a temperatura da coluna aumentada, quer seja continuamente quer em etapas, medida que a separao se processa. A Figura 3 mostra a melhoria que se consegue em um cromatograma por meio da programao de temperatura.

Geralmente, a resoluo tima est associada com uma temperatura mnima; o preo de se reduzir a temperatura, contudo, um aumento no tempo de eluio e, portanto, no tempo necessrio para se completar a anlise.

Figura 3 - Efeito da temperatura nos cromatogramas a gs. (a) Isotrmico a 45C; (b) isotrmico a 145C; (c) programado de 30C a 180C.

1.4 Caractersticas de um Detector Ideal

O detector ideal para a cromatografia gasosa apresenta as seguintes caractersticas: 1. Sensibilidade adequada. Em geral, as sensibilidades nos detectores atuais situam-se na faixa de 108 a 1015 g do soluto/s. 2. Boa estabilidade e reprodutibilidade. 3. Resposta linear aos solutos que se estenda a vrias ordens de grandeza. 4. Faixa de temperatura desde a ambiente at pelo menos 400 C. 5. Um tempo de resposta curto e independente da vazo.

6. Uma alta confiabilidade e facilidade de uso. O detector deve, na medida do possvel, tolerar a ao de operadores inexperientes. 7. Similaridade de resposta a todos os solutos ou, alternativamente, uma resposta altamente previsvel e seletiva a uma ou mais classes de solutos. 8. No deve destruir a amostra. desnecessrio dizer que nenhum detector existente atualmente exibe todas essas caractersticas. Alguns dos detectores mais comuns so listados na tabela abaixo:

2. OBJETIVO
Determinao da concentrao de metanol e/ou etanol em amostra de biodiesel utilizando-se a tcnica de padronizao interna por cromatografia gasosa de alta resoluo.

3. PARTE EXPERIMENTAL

3.1 Equipamento
- Cromatgrafo a gs : Varian Star 3400CX com detector de ionizao de chama - Coluna: Carbowax 30 m x 0,53 mm x 1m

3.2 Materiais e Reagentes

- Microsseringa de 10 L - Bales Volumtricos de 10 ml - Pipeta Pasteur - Pipetas automticas de 20 a 1000 L - Bquer de 25 ml - Padres: Metanol e Etanol P.A. - Padro Interno: 1-butanol P.A. - Solvente : Pentanol P.A. - Soluo estoque 1% (m/v) de metanol e etanol

3.3 Condies cromatogrficas:

Temperatura da coluna: 50C3 minrampa de 5C/min 190C 20 min Temperatura do injetor : 160C Temperatura do detector : 225C Gs de arraste: nitrognio Vazo do hidrognio: 30 ml/min
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Vazo do nitrognio + Make up: 10 ml/min Vazo do ar sinttico: 300 ml/min Volume injeo da amostra: 0,5 L

3.4 Procedimento

Curva analtica - Partindo da soluo estoque 1% (m/v) de metanol e etanol preparar

solues diludas nas concentraes de 0,05; 0,1; 0,15; 0,2; 0,25; 0,3; 0,35 % (m/v). - Preparar as diluies em bales volumtricos de 10 ml, completando com pentanol. - Adicionar 800 L do padro interno - Identificar os picos de etanol, 1-butanol e pentanol e seus tempos de reteno - Obter as reas dos picos de metanol e/ou etanol e 1-butanol (Padro interno) - Calcular a razo das reas e traar a curva analtica da razo das reas em funo da concentrao.

Preparo da amostra - Pesar 2g de biodiesel e acrescentar 800 L da soluo padro de 1-

butanol - Injetar a amostra de biodiesel com padro interno.

4. RESULTADOS E DISCUSSES

4.1 Grficos e tabelas

Tabela 1- Etanol

Concentrao ETANOL 0,0005282 0,0010564 0,0015846 0,0021128 0,002641 0,0031692 0,0036974

rea 5823 17859 22383 26062 38548

PI 12627 14705 13867 11456 14320

A/PI 0,461155 1,214485 1,61412 2,274965 2,691899

Tabela 2 - Metanol

Concentrao METANOL 0,00060079 0,00120158 0,00180237 0,00240316 0,00300395 0,00360474 0,00420553

rea 4688 15012 18047 21065 31262

PI 12627 14705 13867 11456 14320

A/PI 0,371268 1,020877 1,301435 1,838774 2,183101

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4.2 Cromatograma do biodsel:

Clculo da concentrao de etanol

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Grfico 1- Etanol

Etanol
3.0

2.5

Razo de reas

2.0

1.5

1.0

0.5

0.0005

0.0010

0.0015

0.0020

0.0025

0.0030

0.0035

0.0040

Concentrao

Equao da reta: Y = A+BX Y =0,10831+611,5015X 0,2915 = 0,10831+611,5015X X = 3,0.10-4 % m/v

Os seguintes clculos foram feitos para comparar se o teor de metanol e etanol est dentro do permitido (0,20% m/m).

3,0.10-4 %m ____________ 1 mL X ____________ 5 mL

X = 1,5.10-3 % m/v

1,5.10-3 % _____________ 2g Y _____________ 1g

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Y= 7,5.10-4 % m/m

Ento, para calcular a porcentagem de etanol no biodiesel: 0,00075 g -------------X 1g --------------------100g

x = 0,075 % m/m de etanol

Clculo da concentrao de metanol Grfico 2 - Metanol

2.5

Metanol

2.0

Razo de reas

1.5

1.0

0.5

0.0 0.0005 0.0010 0.0015 0.0020 0.0025 0.0030 0.0035 0.0040 0.0045

Concentrao

Equao da reta: Y = A+ BX Y=0,09984+492,70496X 0,2852 = 0,09984+492,70496X X= 3,76.10-4

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3,76.10-4 %m ____________ 1 mL X ____________ 5 mL

X = 1,88.10-3 % m/v

1,88.10-3 % _____________ 2g Y _____________ 1g

Y= 9,4.10-4 % m/m

Ento, para calcular a porcentagem de metanol no biodiesel: 0,00094 g -------------X 1g --------------------100g

x = 0,094 % m/m de metanol

4.3 Detector de ionizao de chama

O detector de ionizao em chama (DIC) o mais empregado em aplicaes da cromatografia gasosa em geral. Em um detector como o apresentado a seguir, o efluente da coluna dirigido para uma pequena chama de ar/hidrognio. A maioria dos compostos orgnicos produz ons e eltrons

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quando pirolizados temperatura de uma chama ar/hidrognio. A deteco envolve o monitoramento da corrente produzida pela coleta desses portadores de carga. Poucas centenas de volts so aplicadas entre a ponta do queimador e um eletrodo, localizado acima da chama, serve para coletar os ons e eltrons. A corrente resultante (~1012 A) medida com um picoampermetro. A ionizao de compostos de carbono na chama um processo ainda pouco compreendido, embora tenha sido observado que o nmero de ons produzidos grosseiramente proporcional ao nmero de tomos de carbono reduzidos na chama. Uma vez que o detector de ionizao em chama responde ao nmero de tomos de carbono que entram no detector por unidade de tempo, ele um dispositivo sensvel massa em vez da concentrao. Em conseqncia, esse detector apresenta a vantagem de que a alterao da vazo da fase mvel exerce um pequeno efeito sobre a sua resposta. Grupos funcionais como carbonila, lcool, halognicos e amnicos produzem poucos ou nenhum ons na chama. Alm disso, o detector insensvel para gases no combustveis como H 2O, CO2, SO2 e NOx. Essas propriedades tornam o detector de ionizao em chama muito mais til para a anlise de amostras orgnicas, incluindo aquelas contaminadas com gua e com xidos de nitrognio e enxofre. O detector de ionizao exibe uma sensibilidade alta (~10 13 g s1), larga faixa linear de resposta (~107) e baixo rudo. Geralmente robusto e fcil de se usar. Uma desvantagem do detector de ionizao em chama que ele destri a amostra durante a etapa de combusto.

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4.4Temperatura Cromatograma Rampa de Aquecimento

Padro Isotrmico

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Os cromatogramas podem ser obtidos usando temperatura constante, porm existem desvantagens que decorrem das operaes isotrmicas. Compostos com pontos de ebulio elevados no so detectados, particularmente no caso de mistura de compostos desconhecidos com grande faixa de pontos de ebulio. A solubilidade dos componentes de alto ponto de resoluo na fase estacionaria muito alta, o que faz com que eles permaneam retidos no inicio da coluna, especialmente quando a temperatura de operao baixa. Os picos iniciais so finos e pouco espaados, mostrando pequena resoluo nesta regio. Os picos finais so baixos, largos e pouco espaados, apresentando resoluo excessiva. Essas conseqncias da operao isotrmica podem ser evitadas utilizando-se a cromatografia com fase gasosa em programao de temperatura. O programa envolve um perodo isotrmico inicial, um perodo de aumento linear da temperatura e um isotrmico final. Como a velocidade do aumento da temperatura pode variar muito, busca-se um compromisso entre a necessidade da velocidade de troca lenta para manter a resoluo mxima e a de troca rpida para reduzir o tempo de anlise. A cromatografia com fase gasosa em temperatura programada permite a separao de componentes cujos pontos de ebulio so muito diferentes com rapidez maior que a operao isotrmica, sendo a melhor opo neste caso.

4.5 Padro Interno

A rea e a altura dos picos cromatogrficos so afetados pela quantidade de amostra e, tambm, pelas flutuaes de vazo de gs de arraste e pelas temperaturas da coluna e do detector, isto , por alteraes nos fatores que influenciam a sensibilidade e a resposta do detector. Ao se adicionar uma pequena quantidade de uma substncia de referncia amostra a ser analisada pode-se minimizar esses efeitos. Sabemos que o padro interno adequado quando: os picos completamente resolvidos cuja eluio ocorra nas vizinhanas dos componentes a serem analisados; rea e altura do pico correspondente semelhante dos picos dos componentes a serem analisados; aspectos
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qumicos semelhantes s substancias que sero analisadas, mas no devem estar presentes na amostra original. O padro interno que usamos foi adequado, pois podemos observar todas as caractersticas listadas acima.

5.CONCLUSO
A CG quantitativa est baseada na comparao da altura ou da rea de um pico analtico com aquele de um ou mais padres. Se as condies so controladas adequadamente, ambos os parmetros variam linearmente com a concentrao. Com esse experimento podemos perceber que a cromatografia gasosa muito til em analises de compostos orgnicos, conseguimos analisar o biodiesel e pelo cromatograma apresentado conseguimos indentificar a quantidade de metanol e etanol. Conclumos tambm que, de acordo com os clculos, a concentrao % m/m de etanol e metanol esto dentro do limite permitido para o biodiesel.

5.

BIBLIOGRAFIA
- Skoog, D. A., Holler, F. J., Nieman T. A., Princpios de Anlise

Instrumental, 5 edio, 2002. - D.C. Harris, Anlise Qumica Quantitativa, 6 Edio, Rio de Janeiro, LTC, 2005, p. 483-502. - Vogel, J. Mendham, R.C Denney, J.D Barnes, M. Thomas, Anlise Qumica Quantitativa, 6 Edio, Rio de Janeiro, LTC, 2002, p. 325-342.

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