PROPIEDADES DE ACEITES Y GRASAS Propiedades fisicas Solubilidad: Las grasas y aceites se caracterizan principalmente por su virtual inmiscibilidad en agua,

, sin embargo son miscibles en muchos solventes orgnicos no polares. La solubilidad depende de las propiedades termodinmicas del soluto y disolvente, y las fuerzas relativas de atraccin entre las molculas. La solubilidad ideal se puede calcular a partir de las propiedades termodinmicas, en todo caso la solubilidad real generalmente presenta desviaciones positivas. Tensin superficial e interfacial En este aspecto las grasas, aceites y cidos grasos estn separados. Los aceites comerciales tienden a tener ms baja tensin superficial e interfacial debido a la presencia de componentes polares de superficie activa, tales como monoglicridos, fosfolpidos y jabones. Los monoglicridos y jabones pueden reducir la tensin interfacial entre agua y aceite. - Densidad Los valores de densidad para aceites estn, generalmente, en el rango comprendido entre 0,92 a 0,964 g/l. La densidad se incrementa cuando decrece el peso molecular e incrementa con la insaturacin. La densidad se incrementa aproximadamente en forma lineal con el incremento de la temperatura. Las densidades de grasas en estado slido son mucho ms altas, aproximadamente el valor de 1 g/l. Propiedades qumicas Muchas de las grasas y aceites tienen solo dos grupos funcionales reactivos: El ster que enlaza el cido graso al glicerol vertebral y el doble enlace en la cadena del alquil lateral. El doble enlace influye en la reactividad del tomo de carbono allico, particularmente cuando hay dobles enlaces mltiples presentes. La hidrlisis, metanlisis e interesterificacin son las principales reacciones qumicas de los TriAcilGliceridos (Belitz y Grosch, 1988) - Hidrlisis Por accin de los lcalis como KOH / CH3OH, se escinde la grasa, resultando como productos glicerol y una sal de cido graso (jabn), como se seala en la Figura 1. A partir de la sal resultante se obtienen los cidos grasos libres al ser acidificada, esta reaccin es relevante desde el punto de vista analtico. O-CO-R OH R-CO-O--- + 3KOH OH-- + 3RCOOK O-CO-R OH Figura 1. Reaccin de hidrlisis

Prediccin del nmero de cetano, viscosidad cinemtica y densidad del biodiesel metodologa para predecir el nmero de cetano, viscosidad cinemtica y densidad del biodiesel. Estas propiedades son muy importantes en los combustibles ya que se usan comnmente para definir su calidad. Las propiedades fsicas estimadas en este trabajo tienen una excelente concordancia con los valores experimentales reportados en la literatura debido a que se encontr una desviacin absoluta promedio de 3.6%, 1.1% y 0.4% en el nmero de cetano, viscosidad cinemtica y densidad del biodiesel. Teora Nuevas correlaciones empricas se derivaron para calcular el nmero de cetano, viscosidad cinemtica y densidad de los metil steres de cidos grasos que estn presentes en el biodiesel. Estas ecuaciones se obtuvieron al correlacionar una serie de datos experimentales compilados de diferentes fuentes bibliogrficas [113]. Las ecuaciones (1) a (3) se ajustaron con 21, 46 y 36 datos experimentales. Los parmetros que se presentan en este trabajo se estimaron numricamente con el software Design-Expert haciendo regresiones estadsticas para reproducir la variacin de las propiedades fsicas con respecto al peso molecular y grado de insaturacin de las molculas. En estas ecuaciones Mi representa a la masa molecular del i-simo metil ster, y N es el nmero de dobles enlaces, de tal manera que N es igual a cero, uno, dos y tres para los metil ster C18:0, C18:1, C18:2 y C18:3, respectivamente. El nmero de cetano se obtiene a partir de = -7,8 + 0,302 - 20 N

donde i es el nmero de cetano del i-simo metil ster. La viscosidad cinemtica expresada como una funcin de Mi y N es Ln( )= -12.503+ 2.496 ln ( )- 0.178 N

donde ni es la viscosidad cinemtica a 40 C del i-simo metil ester en mm2/s. la expresin para la densidad de los metil esteres saturados e insaturados es: = 0.8463 + + 0.0118 N

donde es la densidad a 20 C del i-simo metil ster en g/cm3. Las propiedades fsicas del biodiesel se estiman con la siguiente expresin general: = donde f representa a la propiedad fsica (los subndices b e i se refieren al biodiesel e i-simo metil ster, respectivamente), mientras que wi es la fraccin peso del isimo metil ster. La funcin fb se debe remplazar por las variables , ln( ) y para especificar al nmero de cetano, logaritmo natural de la viscosidad cinemtica y densidad del biodiesel , mientras que la funcin se debe intercambiar por las variables , ln( ) y para identificar alas propiedades fsicas de los metil esteres individuales. Para realizar la comparacin entre los valores experimentales y calculados, tanto de las propiedades fsicas de los metil esteres como del biodiesel, se utiliza la desviacin absoluta promedio definida como: AAD= ( ) ( |
( )( )

|)

donde n es el nmero de puntos experimentales que se estn comparando, mientras que f j,exp y f j,cal son funciones que representan las propiedades fsicas experimentales y calculadas de cada metil ster o del biodiesel. 3.1 Prediccin de las propiedades de los metil steres El peso molecular de cada metIl ster (Mi) y su concentracin en fraccin peso (wi) se muestran en la Tabla 1 para tres tipos de biodiesel reportados por Allen et al. [14]. Se puede observar que el metil linolenato (C18:2 metil ster) tiene la concentracin ms elevada en todos los casos. Metil ester , g/mol SF CO CT C 14:0 242.3975 0.001 0.000 0.008 C 16:0 270.4507 0.060 0.099 0.229 C 18:0 298.5038 0.059 0.031 0.031 C 18:1 296.4879 0.160 0.291 0.185 C 18:2 294.4721 0.714 0.568 0.542 C 18:3 292.4562 0.006 0.011 0.005 SF: biodiesel de aceite de girasol, CO: biodiesel de aceite de maz, CT: biodiesel de aceite de algodn

La prediccin del nmero de cetano, viscosidad cinemtica y densidad de catorce metil steres se muestra en la Tabla 2. Estos valores se estimaron por medio de las ecuaciones (1)(3). La desviacin absoluta promedio (AAD) que se obtuvo para el nmero de cetano, viscosidad cinemtica y densidad fue de 5.95 %, 2.57 % y 0.11 %, respectivamente. De manera general se puede establecer que el nmero de cetano y la viscosidad aumentan conforme aumenta el peso molecular de las molculas y estas propiedades disminuyen cuando el nmero de insaturaciones es mayor. En contraste, la densidad aumenta cuando el peso molecular disminuye y tambin si las molculas cuentan con ms insaturaciones. Comparacin entre las propiedades fsicas experimentales y calculadas de los metil esteres
Metil ester (exp.) (cal.) , /s (exp. a 40c) , /s (cal. a 40c) 1.15 , g/ (exp. a 20c) , g/ (calc. a 20c) 0.8773

C 8:0 C 10:0 C 12:0

40.0

, ,

48.5

1.72

0.8726

56.9

, ,

2.45

0.8692

C 65.4 3.33 0.8665 , , , 14:0 C 73.9 4.37 0.8644 , , , 16:0 a. Knothe [1], b. Knothe [2], c. Tong et al. [3], d. Papadopoulos et al. [4], e. Liew et al. [5], f. Pratas et al. [6], g. Yuan et al. [7], h. Knothe y Steidley [8], i. Pratas et al. [9], j. Extrapolado a partir de los valores reportados por Pratas et al. [9], k. Gouw y Vlugter [10], l. Hammomd y Lundberg [11], m. Extrapolado a partir de los valores reportados por Bonhorst et al. [12], n. Derivado a partir de la correlacin emprica propuesta por Gouw y Vlugter [10], o. Freedman y Bagby [13]

METODOS DE ANALISIS Determinacin de las gamas de composicin de cidos grasos mediante CGL Mtodo ISO 5508: 1990 y 5509: 2000 o AOCS Ce 2-66 (97), Ce 1e-91 (01) o Ce 1f-96 (02). Determinacin de cidos grasos libres AOCS Ca 5a-40 (97). Determinacin del ndice de perxido (IP) AOCS Cd 8b-90 (03) o ISO 3960: 2001 o AOCS Cd 8-53 (97).

DETERMINACIN DEL GRADO DE ACIDEZ 1. OBJETO Determinar los cidos libres en los aceites de oliva. El contenido en cidos grasos libres se expresa mediante la acidez calculada segn el mtodo convencional.

1.1. Principio Disolucin de la muestra en una mezcla de disolventes y valoracin de los cidos grasos libres mediante una solucin etanlica de hidrxido potsico. 1.2. Reactivos Todos los reactivos deben ser de calidad analtica reconocida y el agua utilizada debe ser agua destilada o de una pureza equivalente. 1.2.1. Mezcla de ter dietlico y etanol de 95% (V/V), en proporcin de volumen 1:1. Nota: El ter dietlico es muy inflamable y puede formar perxidos explosivos. Debe utilizarse tomando especiales precauciones. Debe neutralizarse exactamente en el momento de su utilizacin con la solucin de hidrxido potsico (1.2.2) en presencia de 0,3 ml de la solucin de fenolftalena (1.2.3) por cada 100 ml de mezcla. Nota: Si no es posible utilizar ter dietlico, puede sustituirse por una mezcla de disolventes formada por etanol y tolueno. Si fuera necesario, el etanol podra sustituirse, a su vez, por 2-propanol. 1.2.2. Solucin etanlica valorada de hidrxido potsico, = 0,1M o, en caso necesario, = 0,5M. Nota 1. Debe conocerse, y comprobarse inmediatamente antes de su utilizacin, la concentracin exacta de la solucin etanlica de hidrxido potsico. Debe utilizarse una solucin que haya sido preparada por lo menos cinco das antes y decantada en un frasco de vidrio marrn cerrado con tapn de goma. La solucin debe ser incolora o de color amarillo paja. Nota: Se puede preparar una solucin incolora y estable de hidrxido potsico de la manera siguiente: Llevar a ebullicin, y mantener sta a reflujo durante una hora, 1000 ml de etanol con 8 g de hidrxido potsico y 0,5 g de virutas de aluminio. Destilar inmediatamente.

Disolver en el destilado la cantidad requerida de hidrxido potsico. Dejar reposar durante varios das y decantar el lquido claro sobrenadante, separndolo del precipitado de carbonato potsico. La solucin tambin puede prepararse de la manera siguiente sin efectuar la destilacin: aadir 4 ml de butilato de aluminio a 1000 ml de etanol y dejar reposar la mezcla durante algunos das. Decantar el lquido sobrenadante y disolver en l la cantidad necesaria de hidrxido potsico. La solucin est lista para ser utilizada. 1.2.3. Solucin de 10 g/l de fenolftalena en etanol de 95-96% (V/V) o solucin de 20 g/l de azul alcalino (en caso de aceites de oliva muy coloreados) en etanol de 95-96% (V/V). reactivo Etanol de 95% (v/v) Etanol Etanol de 95-96% (v/v) ter dietilico Recomendacin PANREAC DENOMINACION Etanol 96% v/v PA

ter dietilico estabilizado con ~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO Hidrxido potasico Potasio hidrxido 85% lentejas PA 2-propanol 2- propanol PA-ACS-ISO Solucin de 10 gr/l de fenolftalena en Fenolftalena solucin 1% RV etanol de 95-96 % (v/v) Solucin etanlica valorada de Potasio hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) hidrxido potsico, = 0,1 M etanlica SV Solucin etanlica valorada de Potasio hidrxido 0,5 mol/l (0,5 N) hidrxido potsico, =0,5 M etanlica SV tolueno Tolueno PA-ACS-ISO Virutas de aluminio Aluminio, virutas, 99+% 1.3. Material Material habitual de laboratorio, y en particular: 1.3.1. Balanza analtica 1.3.2. Matraz erlenmeyer de 250 ml de capacidad 1.3.3. Bureta de 10 ml de capacidad, con graduacin de 0,05 ml

1.4. Procedimiento 1.4.1. Preparacin de la muestra para la prueba La determinacin se efectuar en una muestra filtrada. Si el contenido global de humedad e impurezas es inferior al 1%, se utilizar la muestra tal cual. 1.4.2. Muestra para la prueba Tomar la muestra, segn el grado de acidez previsto, de acuerdo con el cuadro siguiente: Grado de acidez previsto <1 1a4 4 a 15 15 a 75 >75 Peso de la muestra (en g) Precisin de la pesada de la muestra (en g) 20 0,05 10 0,02 2,5 0,01 0,5 0,001 0,1 0,0002

Pesar la muestra en el matraz erlenmeyer (1.3.2) 1.4.3. Determinacin Disolver la muestra (1.4.2) en 50 a 150 ml de la mezcla de ter dietlico y etanol (1.2.1), previamente neutralizada. Valorar, agitando, con la solucin de hidrxido potsico de 0,1M (1.2.2) (vase nota 2) hasta el viraje del indicador (la coloracin rosa de la fenolftalena debe permanecer al menos durante 10 segundos). Nota 1: La solucin etanlica valorada de hidrxido potsico (1.2.2) puede sustituirse por una solucin acuosa de hidrxido potsico o sdico siempre que el volumen de agua aadido no provoque una separacin de las fases. Nota 2: Si la cantidad necesaria de la solucin de hidrxido potsico de 0,1M supera los 10 ml, debe utilizarse una solucin de 0,5M. Nota 3: Si la solucin se enturbia durante la valoracin, aadir una cantidad suficiente de la mezcla de disolventes (1.2.1) para que la solucin se aclare. 1.5 Expresin de la acidez en porcentaje de cido oleico

La acidez, expresada en porcentaje de cido oleico es igual a: VxCx siendo: V : volumen en ml de la solucin valorada de hidrxido potsico utilizada. c : concentracin exacta, en moles por litro, de la solucin de hidrxido potsico utilizada. M: peso molecular del cido en que se expresa el resultado (cido oleico = 282). P: peso en gramos de la muestra utilizada. Se tomar como resultado la media aritmtica de dos determinaciones. DETERMINACIN DEL NDICE DE PERXIDOS 1. OBJETO La presente norma describe un mtodo para la determinacin del ndice de perxidos de los aceites y grasas. 2. MBITO DE APLICACIN La presente norma es aplicable a los aceites y grasas animales y vegetales. 3. DEFINICIN El ndice de perxidos es la cantidad (expresada en miliequivalentes de oxgeno activo por kg de grasa) de perxidos en la muestra que ocasionan la oxidacin del yoduro potsico en las condiciones de trabajo descritas. 4. PRINCIPIO La muestra problema, disuelta en cido actico y cloroformo, se trata con solucin de yoduro potsico. El yodo liberado se valora con solucin valorada de tiosulfato sdico. 5. APARATOS Todo el material utilizado estar exento de sustancias reductoras u oxidantes. Nota: No engrasar las superficies esmeriladas. x =

5.1. Navecilla de vidrio de 3 ml 5.2. Matraces con cuello y tapn esmerilados, de 250 ml de capacidad aproximadamente, previamente secados y llenos de gas inerte puro y seco (nitrgeno o, preferiblemente, dixido de carbono). 5.3. Bureta de 25 o 50 ml, graduada en 0,1 ml. 6. REACTIVOS 6.1. Cloroformo para anlisis, exento de oxgeno por borboteo de una corriente de gas inerte puro y seco. 6.2. cido actico glacial para anlisis, exento de oxgeno por borboteo de una corriente de gas inerte puro y seco. 6.3. Solucin acuosa saturada de yoduro potsico, recin preparada, exenta de yodo y yodatos. 6.4. Solucin acuosa de tiosulfato sdico 0,01N o 0,002N valorada exactamente; la valoracin se efectuar inmediatamente antes del uso. 6.5. Solucin de almidn, en solucin acuosa de 10 g/l, recin preparada con almidn soluble. reactivo Recomendacin PANREAC denominacion cido actico glacial para anlisis Acido Actico glacial PA-ACS-ISO Almidon soluble Almidn de Patata soluble PA Cloroformo para analisis Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO Solucin acuosa de tiosulfato sdico Prepararlo a partir de sodio tiosulfato 0,01 N 0,1 mol/l (0,1N) SV diluido convenientemente con agua Solucin acuosa de tiosulfato sdico Prepararlo a partir de sodio tiosulfato 0,002 N 0,1 mol/l (0,1 N) SV diluido convenientemente con agua Solucin de almidon en solucin acuosa Almidon solucin 1% RV de 10g/l Yoduro potasico Potasio Yoduro PA-ACS-ISO

7. MUESTRA La muestra se tomar y almacenar al abrigo de la luz, y se mantendr refrigerada dentro de envases de vidrio totalmente llenos y hermticamente cerrados con tapones de vidrio esmerilado o de corcho. 8. PROCEDIMIENTO El ensayo se realizar con luz natural difusa o con luz artificial. Pesar con precisin de 0,001 g en una navecilla de vidrio (5.1) o, en su defecto, en un matraz (5.2) una cantidad de muestra en funcin del ndice de perxidos que se presuponga, con arreglo al cuadro siguiente: ndice de perxidos que se supone (meq de /Kg) De 0 a 12 De 12 a 20 De 20 a 30 De 30 a 50 De 50 a 90 Peso de la muestra problema ( en g) De 5,0 a 2,0 De 2,0 a 1,2 De 1,2 a 0,8 De 0,8 a 0,5 De 0,5 a 0,3

Abrir un matraz (5.2) e introducir la navecilla de vidrio que contenga la muestra problema. Aadir 10 ml de cloroformo (6.1). Disolver rpidamente la muestra problema mediante agitacin. Aadir 15 ml de cido actico (6.2) y, a continuacin, 1 ml de solucin de yoduro potsico (6.3). Cerrar rpidamente el matraz, agitar durante 1 minuto y mantenerlo en la oscuridad durante 5 minutos exactamente, a una temperatura comprendida entre 15 y 25C. Aadir 75 ml aproximadamente de agua destilada. Valorar (agitando al mismo tiempo vigorosamente) el yodo liberado con la solucin de tiosulfato sdico (6.4) (solucin 0,002N si se presuponen valores inferiores a 12 y solucin 0,01N si se presuponen valores superiores a 12), utilizando la solucin de almidn (6.5) como indicador. Efectuar dos determinaciones por muestra. Realizar simultneamente un ensayo en blanco. Si el resultado del ensayo en blanco sobrepasa 0,05 ml de la solucin de tiosulfato sdico 0,01N (6.4), sustituir los reactivos. 9. EXPRESIN DE LOS RESULTADOS El ndice de perxidos (I.P.), expresado en miliequivalentes de oxgeno activo por kg de grasa se calcula mediante la frmula siguiente:

IP= siendo: V: ml de solucin valorada de tiosulfato sdico (6.4) empleados en el ensayo, convenientemente corregidos para tener en cuenta el ensayo en blanco. N: normalidad exacta de la solucin de tiosulfato sdico (6.4) empleada. P: peso, en gramos de la muestra problema. El resultado ser la media aritmtica de las dos determinaciones efectuadas. DETERMINACIN DE LOS CIDOS GRASOS SITUADOS EN LA POSICIN 2 DE LOS TRIGLICRIDOS DE ACEITES Y GRASAS 1. OBJETO La presente norma describe un mtodo para la determinacin de la composicin porcentual de cidos grasos que se encuentran esterificados en la posicin 2 (oposicin interna) de los triglicridos. 2. CAMPO DE APLICACIN La presente norma es aplicable a los aceites y grasas cuyo punto de fusin se sita por debajo de los 45C, debido a las caractersticas especiales de la accin de la lipasa pancretica. No es aplicable sin reservas a los aceites y grasas que contengan cantidades importantes de cidos grasos con 12 tomos de carbono o menos (aceites de coco y de palmiste, materias grasas butricas), de cidos grasos altamente insaturados (con ms de cuatro enlaces dobles) que tengan 20 tomos de carbono o ms (aceites de pescado y de mamferos marinos) o de cidos grasos que tengan grupos con funciones oxigenadas, adems del grupo cido. 3. PRINCIPIO Neutralizacin de los aceites y grasas si fuera necesario. Purificacin mediante tratamiento en columna de almina. Hidrlisis parcial de los triglicridos bajo la accin de la lipasa pancretica durante un tiempo determinado. Separacin de los monoglicridos resultantes mediante cromatografa en capa fina y metanlisis de estos monoglicridos. Anlisis de los steres metlicos mediante cromatografa gas-lquido. 4. EQUIPO 4.1. Matraz de fondo redondo de 100 ml. 4.2. Matraz de fondo redondo de 25 ml con boca esmerilada.

4.3. Refrigerante de aire de 1 m de longitud, adaptable al matraz 4.2. 4.4. Matraz erlenmeyer de 250 ml. 4.5. Vaso de precipitados de 50 ml. 4.6. Embudo de separacin de 500 ml. 4.7. Columna para cromatografa, de vidrio, con dimetro interior de 13 mm y longitud de 400 mm, provista de un disco de vidrio poroso y de una llave. Recomendacin Panreac: 727401 Columna para cromatografa "flash" con adaptador y vlvula de tefln. 20 mm ID x 400 mm longitud. 4.8. Tubo de centrfuga de 10 ml con tapn de vidrio esmerilado. 4.9. Bureta de 5 ml graduada en 0,05 ml. 4.10. Jeringa hipodrmica de 1 ml provista de una aguja fina. 4.11. Microjeringa que pueda dispensar gotas de 3-4 ml. 4.12. Aplicador para cromatografa en capa fina. 4.13. Placas de vidrio de 20 x 20 cm para cromatografa en capa fina. Recomendacin Panreac: 809013 Placa TLC. Slica gel standard. Vidrio. SIL G-25, 0,25 mm espesor, 20x20 cm. 4.14. Cubeta de desarrollo para cromatografa en capa fina, de vidrio, provista de una tapa de vidrio esmerilado, adecuada para las placas de 20 x 20 cm. Recomendacin Panreac: 704050 Cubeta de desarrollo ranurada con tapa 20x20 cm. 4.15. Pulverizador para cromatografa en capa fina. Recomendacin Panreac: 704054 Spray pulverizador. 4.16. Estufa regulada a 103 2C.

4.17. Termostato regulable a una temperatura comprendida entre 30 y 45C con precisin de 0,5C. 4.18. Evaporador rotatorio. 4.19. Vibrador elctrico, con el que pueda agitarse vigorosamente el tubo de centrfuga. 4.20. Lmpara ultravioleta para examinar las placas de capa fina. Recomendacin Panreac: 704048 Cabina de visualizacin UV. Falta aki DETERMINACIN DEL NDICE DE YODO 1. OBJETO La presente norma internacional especifica un mtodo para la determinacin del ndice de yodo de las grasas y aceites animales y vegetales, en lo sucesivo denominados grasas. 2. DEFINICIN A los fines de la presente norma internacional, se aplicar la definicin siguiente: 2.1 ndice de yodo: el peso de yodo absorbido por la muestra en las condiciones de trabajo que se especifican en la presente norma internacional. El ndice de yodo se expresa en gramos de yodo por 100 g de muestra. 3. PRINCIPIO Disolucin de la muestra problema y adicin de reactivo de Wijs. Una vez transcurrido el tiempo que se especifica, adicin de solucin acuosa de yoduro potsico y valoracin del yodo liberado con solucin de tiosulfato sdico. 4. REACTIVOS Todos los reactivos sern de calidad analtica reconocida. 4.1. Yoduro potsico, solucin de 100 g/l, exento de yodatos o de yodo libre. 4.2. Engrudo de almidn. Mezclar 5 g de almidn soluble con 30 ml de agua, aadir esta mezcla a 1 000 ml de agua en ebullicin, hervir durante 3 minutos y dejar enfriar. 4.3. Solucin volumtrica patrn de tiosulfato sdico.

c (Na2S2O3. 5H2O) = 0,1 mol/l, valorada como mximo 7 das antes de su uso. 4.4 Disolvente, preparado mezclando volmenes iguales de ciclohexano y cido actico. 4.5. Reactivo de Wijs, que contenga monocloruro de yodo en cido actico. Se utilizar reactivo de Wijs comercializado. Nota: El reactivo contiene 9 g de ICl3 + 9 g de I en cido actico. 5. MATERIAL Material ordinario de laboratorio y, en particular, lo siguiente: 5.1. Navecillas de vidrio, apropiadas para la muestra problema y que puedan introducirse en los matraces (5.2). 5.2. Matraces erlenmeyer de 500 ml de capacidad con boca esmerilada, provistos de sus correspondientes tapones de vidrio y perfectamente secos. 6. PREPARACIN DE LA MUESTRA QUE DEBER ANALIZARSE. Secar la muestra homogeneizada con sulfato sdico y filtrarla. 7. PROCEDIMIENTO 7.1. Tamao de la muestra El peso de la muestra vara en funcin del ndice de yodo previsto, como se indica en el cuadro 1. Cuadro 1 ndice de yodo Peso de la muestra previsto problema menos de 5 3,00 g 5 - 20 1,00 g 21 - 50 0,40 g 51 - 100 0,20 g 101 - 150 0,13 g 151 - 200 0,10 g Pesar la muestra problema con precisin de 0,1 mg en una navecilla cpsula de pesadas de vidrio 5.1. 7.2. Determinacin Introducir la muestra problema en un matraz de 500 ml (5.2). Aadir 20 ml del disolvente (4.4) para disolver la grasa. Agregar exactamente 25 ml del reactivo de Wijs (4.5), tapar el matraz, agitar el contenido y colocar el matraz al abrigo de la luz. No deber utilizarse la boca para pipetear el reactivo de Wijs.

Preparar del mismo modo un ensayo en blanco con el disolvente y el reactivo, pero sin la muestra problema. Para las muestras con un ndice de yodo inferior a 150, mantener los matraces en la oscuridad durante 1 hora; para las muestras con un ndice de yodo superior a 150, as como en el caso de productos polimerizados o considerablemente oxidados, mantener en la oscuridad durante 2 horas. Una vez transcurrido el tiempo correspondiente, agregar a cada uno de los matraces 20 ml de solucin de yoduro potsico (4.1) y 150 ml de agua. Valorar con la disolucin de tiosulfato sdico (4.3) hasta que haya desaparecido casi totalmente el color amarillo producido por el yodo. Aadir unas gotas de engrudo de almidn (4.2) y continuar la valoracin hasta el momento preciso en que desaparezca el color azul despus de una agitacin muy intensa. Nota: Se permite la determinacin potenciomtrica del punto final. 7.3. Nmero de determinaciones Efectuar 2 determinaciones de la muestra problema. 8. EXPRESIN DE LOS RESULTADOS El ndice de yodo se expresa del siguiente modo: ( )

siendo: c : valor numrico de la concentracin exacta, expresada en moles por litro, de la solucin volumtrica patrn de tiosulfato sdico (4.3) utilizada; V1: valor numrico del volumen, expresado en mililitros, de la solucin de tiosulfato sdico (4.3) utilizada para el ensayo en blanco; V2: valor numrico del volumen, expresado en mililitros, de la solucin de tiosulfato sdico (4.3) utilizada para la determinacin; p: valor numrico del peso, expresado en gramos, de la muestra problema (7.1). Se tomar como resultado la media aritmtica de las dos determinaciones, siempre que se cumpla el requisito establecido con respecto a la repetibilidad.