TALLER DE BIOCATLISIS

Nicols Tovar Mayor

Cdigo: 6101437
Bioqumica
Nomenclatura Enzimtica

-Cules Son las 6 Clases (EC) en que se clasifican las enzimas?

1.
2.
3.
4.
5.
6.

Oxidoreductasas
Transferasas
Hidrolasas
Liasas
Isomerasas
Ligasas

-Cuntas subclases hay en las transferasas y que caracteriza cada una de ellas?
Hay 10 subclases de transferasas y son las siguientes:
Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos de un solo carbono.
Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos aldehdos o cetona.
Son enzimas que catalizan la transferencia del grupo funcional acilo.
Son enzimas que actan como catalizadores en la transferencia de un
monosacrido de un nucletido de azcar activado a una molcula, normalmente
alcohol, aceptador de glicosil.
Son enzimas que catalizan la transferencia de los grupos alquilo o arilo.
Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos funcionales que contienen
nitrgeno.
Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos funcionales que contienen
fsforo.
Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos funcionales sulfurados.
Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos funcionales que contienen
Selenio.
Son enzimas que catalizan la transferencia de grupos funcionales que contienen
Molibdeno y Tungsteno.
-Cul es la reaccin catalizada?

-Cul es el nombre sistemtico de esta enzima?

ATP: D-Hexosa 6-Fosfotransferasa
-Adems del ATP quines pueden actuar como donadores de fosforilo?
Pueden Actuar CTP, ITP, UTP.

Las hexoquinasas son un grupo de enzimas, tipo quinasas, que pueden transferir un
grupo fosfato desde una molcula de alta energa a otra, actuar como receptora del
mismo fosfato, denominndose sustrato.
HEXO quiere decir que permite fosforilar a cualquier monosacrido que sea una hexosa,
es decir, fructosa, glucosa, etc. Por esta razn es una enzima de baja especifidad. Su
mecanismo en la clula es variado, se encuentra asociada al metabolismo celular y
especficamente su mayor importancia es la gluclisis, es decir, el camino principal para la
obtencin de energa en los seres vivos. El cofactor de esta enzima es el ATP en su gran
mayora, tambin cuenta con inhibidores como: 1-5 Anhidro-D-glucitol-fosfato, altas
concentraciones en el in Cloruro, Concentraciones altas de D-glucosa, D-Glucosa-6Fosfato, D-glucosa-1,6-Difosfato. Tambin es importante decir que trabaja bajo un rango
de pH 7 a 9 y el peso molecular va de 50000 a 118000 g/mol.

CINTICA ENZIMTICA
Es aquella que estudia la velocidad de las reacciones qumicas que son catalizadas por
las enzimas, esto permite explicar los detalles de su mecanismo cataltico, en el papel que
cumple dentro del metabolismo.
La reaccin qumica catalizada por una enzima utiliza la misma cantidad de sustrato y
genera la misma cantidad de producto que una reaccin no catalizada. Al igual que ocurre
en otros tipos de catlisis, las enzimas no alteran el equilibrio de la reaccin entre sustrato
y producto.
La actividad enzimtica puede verse seriamente afectada por los siguientes factores
fsico-qumicos:

Temperatura
pH
Concentracin Salina

Qu diferencias Existen entre Velocidad y Rapidez?

La velocidad es un vector y la Rapidez una magnitud escalar; la velocidad depende de la
trayectoria sobre cantidad de tiempo, la rapidez depende de la distancia total recorrida
desde un punto A, a un punto B, en cierta cantidad de tiempo.
-Las enzimas alteran los niveles energticos de sustratos o productos?
Las enzimas no cambian los niveles energticos, disminuyen la barra energtica para que
un sustrato se convierta en un producto.
-Segn la grfica (Expuesta en el Taller) qu parmetro es el ms visiblemente
alterado?

La energa libre de activacin.

-En qu otra forma pueden expresarse la ecuacin de Michaelis, bajo qu

condiciones es vlida?
La ecuacin de Michaelis tiene cuatro formas de expresarse, las cuales son:
Sistema de Lineweaver-Burk
Sistema de Hanes
Sitema de Hofstee
Sistema de Eisenthal-Cornish-Bouden
El modelo de Michaelis es vlido cuando la concentracin de sustrato es mayor que la
concentracin de la enzima, en condiciones de estado estacionario. La velocidad (V)
indica el nmero de molculas del sustrato que se convierten en producto por segundo, es
imposible medir exactamente la concentracin de sustrato (Vmax), la concentracin de
sustrato se conoce como constante de Michaelis (Km).
t (min) moles de producto
0,0
0,0
0,5
10,0
1,0
19,0
1,5
27,1
2,0
34,4
2,5
41,0
3,0
46,9
3,5
52,2
4,0
57,0
4,5
61,3
5,0
65,1

Mtodo
Lineweaver

Pendiente

Interseccin

Ka

Vm

-Pendiente

Interseccin

Hanes
Hofstee

[A] mM Vo moles/min
0,0
0,0
2,0
16,7
2,8
21,0
3,9
28,2
5,5
31,5
7,7
43,4
10,8
57,0
15,1
60,1
21,1
67,8
29,5
74,7
41,3
80,5

Lineaweaver:

1/a
0,5
0,35714286
0,25641026
0,18181818
0,12987013
0,09259259
0,06622517
0,04739336
0,03389831
0,02421308

1/v0
0,05988024
0,04761905
0,03546099
0,03174603
0,02304147
0,01754386
0,01636661
0,01474926
0,01338688
0,01242236

0,08
0,06
1/V0

0,04
0,02
0
0

0,1

0,2

y = 0,102x + 0,009
R = 0,992

0,3
1/[A]

0,4

0,5

0,6


[A]
0
2
2,8
3,9
5,5
7,7
10,8
15,1
21,1
29,5
41,3

Hanes:
[A]/vr
0
0,11976048
0,13333333
0,13829787
0,17460317
0,17741935
0,18947368
0,24713584
0,31120944
0,39491299
0,51304348

Hotstee:

vr
0
16,7
21
28,2
31,5
43,4
57
61,1
67,8
74,7
80,5

vr/s
0
8,35
7,5
7,23076923
5,72727273
5,63636364
5,27777778
4,04635762
3,21327014
2,53220339
1,94915254

Tipo de inhibidor
Competitivo

Pendiente

interseccin

Acompetitivo
No competitivo

[I] mM
[A]
mM

0
1/[A]

V0
mol/
min

6
1/v0

V6
mol/
min

12
1/v6

V12
mol/
min

24
1/v12

V24
mol/
min

1/v24

6,4

0,15625

39

0,025641026

37

0,027027027

35,3

0,028328612

32,2

0,0310559

12,8

0,078125

66,9

0,014947683

61,3

0,016313214

56,5

0,017699115

49

0,02040816

25,6

0,0390625

104,0

0,009615385

91,1

0,010976948

81

0,012345679

51,2

0,01953125

144,0

0,006944444

120,4

0,008305648

103,4

0,00967118

80,6

0,01240695

102,4

0,00976563

178,3

0,005608525

143,4

0,006973501

120

0,008333333

90,4

0,01106195

204,8

0,00488281

202,4

0,004940711

158,6

0,00630517

130,4

0,007668712

96,2

0,01039501

409,6

0,00244141

217,0

0,004608295

167,5

0,005970149

136,3

0,007336757

99,4

0,01006036

809,2

0,00123579

225,2

0,004440497

172,3

0,005803831

139,5

0,007168459

101,1

0,0098912

1638,4

0,00061035

229,5

0,004357298

174,8

0,005720824

141,1

0,007087172

101,9

0,00981354

0,01506024

0mM:

Y= 0,136732246*x + 0,004273166 con un R2=1

6mM:

Y= 0,136862997*x + 0,005634462 con un R2=1

12mM:

Y=0,136554527*x + 0,007005453 con un R2=1

24mM:

Y=0,136523314*x + 0,009730345 con un R2=1

Cuando la concentracin del inhibidor es 0:

[I] mM
Kii mM
6
18,83425017
12
18,76742481
24
18,79285643
[I]
mM
[A]
mM
0
8
16
32
64
128
256
512
1024
2048

0
1/[A]

V0
M/min

0
0,125
0,0625
0,03125
0,015625
0,0078125
0,00390625
0,00195313
0,00097656
0,00048828

0
33,3
57,1
88,9
123,1
152,4
173,0
185,5
192,5
196,2

4
1/v0

0,03003003
0,017513135
0,011248594
0,008123477
0,00656168
0,005780347
0,005390836
0,005194805
0,00509684

V4
M/min
0
30,4
51,6
79,3
108,4
132,7
149,5
159,7
165,2
168,2

8
1/v4

0,032894737
0,019379845
0,01261034
0,009225092
0,007535795
0,006688963
0,006261741
0,006053269
0,005945303

16

V8
M/min

1/v8

V16
M/min

1/v16

0
27,9
47
71,6
96,8
117,6
131,7
140,1
144,7
147,2

0
0,035842294
0,021276596
0,01396648
0,010330579
0,008503401
0,007593014
0,007137759
0,00691085
0,006793478

0
24
39,9
59,9
79,8
95,7
106,3
112,6
116
117,8

0
0,04166667
0,02506266
0,01669449
0,01253133
0,01044932
0,00940734
0,00888099
0,00862069
0,00848896

0mM:

Y= 0,200248614*x + 0,004997263 con un R2=1

4 mM:

Y= 0,216453883*x + 0,005843034 con un R2=1

8 mM:

Y= 0,233318505*x + 0,006682083 con un R2=1

16 mM:

Y= 0,266549778*x + 0,008366128 con un R2=1

[I] mM
Kis mM
4
49,4280259
8
48,4425208
16
48,3246089

[I] mM
Kii mM
4
49,4280259
8
48,4425208
16
48,3246089

[I]
mM
[A]
mM
0
7,8
15,6
31,2
62,4
124,
8
249,
6
499,
2
998,
4
199
6,8

0
1/[A]

V0
mol/
min

0
0,128205
128
0,064102
564
0,032051
282
0,016025
641
0,008012
821
0,004006
41
0,002003
205
0,001001
603
0,000500
801

0
54,3
93,1
144,9
200,6
248,4
281,9
302,4
313,7
319,8

3
1/v0

0,01841
620
0,01074
113
0,00690
131
0,00498
504
0,00402
576
0,00354
735
0,00330
687
0,00318
775
0,00312
695

V3
mol/
min
0
51,5
89
139,8
195,7
244,5
279,5
300,9
313
319,4

6
1/v3

0,01941
747
0,01123
595
0,00715
307
0,00510
986
0,00408
998
0,00357
781
0,00332
336
0,00319
488
0,00313
087

12

V6
mol/
min

1/v6

V12
mol/
min

1/v12

0
49

0
0,02040
816
0,01175
088
0,00740
740
0,00523
834
0,00415
282
0,00361
010
0,00333
889
0,00320
307
0,00313
577

0
44,5

0
0,02247
191
0,01275
510
0,00791
139
0,00549
148
0,00427
899
0,00367
376
0,00337
040
0,00321
853
0,00314
366

85,1
135
190,9
240,8
277
299,5
312,2
318,9

78,4
126,4
182,1
233,7
272,2
296,7
310,7
318,1

0 mM:

Y= 0,119720416*x + 0,003066759 con un R2=1

3 mM:

Y= 0,127515664*x + 0,003066758 con un R2=1

6 mM:

Y= 0,135282012*x + 0,003069504 con un R2=1

12 mM:

Y= 0,151321214*x + 0,003065637 con un R2=1

[I] mM
Kis mM
3
46,0743834
6
46,159949
12
45,4623006

CONCLUSIONES:
La Cintica enzimtica tiene como importancia explicar cmo funciona una enzima y
permite predecir cmo se comportar esa enzima en vivo.
Las constantes definidas anteriormente, son los pilares fundamentales a la hora de
interpretar el funcionamiento de las enzimas en el control del metabolismo.