Gua: Factores que Afectan a los Microorganismos

ESCUELA DE SALUD

FACTORES QUE AFECTAN A LOS MICROORGANISMOS

DIRIGIDO A:
Alumnos de Escuela de Salud asignatura Biologa y Microbiologa

PRE- REQUISITO:
No tiene

Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110006

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INTRODUCCIN
Debido a su pequeo tamao y a su estilo de vida individual, las clulas procariticas sufren los cambios ambientales de un modo mucho ms directo e inmediato que las clulas de los organismos pluricelulares. A lo largo de miles de millones de aos, las bacterias han venido estando sometidas a diversas presiones ambientales, y han respondido evolutivamente creando numerosos mecanismos de adaptacin. Actualmente, las nicas formas de vida existentes en determinados ambientes extremos son exclusivamente procariticas. Desafiando a nuestras ideas preconcebidas de lo que es la vida "normal", encontramos extraordinarios seres vivos unicelulares viviendo a pH muy cidos o muy alcalinos, medrando en salmueras y salinas, o reproducindose a temperaturas de ms de 100C y a grandes presiones.

OBJETIVOS:
Al finalizar el alumno ser capaz de: Demostrar que no todos los microorganismos toleran del mismo modo un determinado factor ambiental Observar determinadas condiciones que son nocivas para una especie bacteriana, y neutras o beneficiosas para otra. Relacionar la importancia del comportamiento humano en las modificaciones del desarrollo microbiolgico que pueden causar, manipulando factores del ambiente

REALIZADO POR
Tecnlogo Mdico, Bioqumico de laboratorio clnico, Medico Laboratorista.

DURACIN:
90 minutos

NUMERO DE ALUMNOS POR DOCENTE

Mximo 20 alumnos

Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110006

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MARCO TERICO
Hasta ahora hemos venido considerando el crecimiento de las bacterias en funcin de su fondo gentico, en relacin con los nutrientes, y en unas hipotticas condiciones ideales (ptimas). Sin embargo, el trabajo experimental con microorganismos ha de tener en cuenta los factores ambientales, es decir, una serie de agentes fsicos y qumicos que 1. modifican la velocidad de crecimiento, provocando cambios que, a determinados valores de dichos factores pueden llegar a ocasionar la muerte de microorganismos; 2. condicionan la distribucin de los microorganismos en sus ecosistemas y hbitat naturales; 3. permiten a los humanos controlar el crecimiento microbiano, por medio de la fijacin de parmetros para: la mutagnesis, la esterilizacin y desinfeccin, la quimioterapia. Agentes fsicos 1.- TEMPERATURA La temperatura es uno de los parmetros ambientales ms importantes que condicionan el crecimiento y la supervivencia de los microorganismos. La temperatura afecta a la velocidad de crecimiento (y, por lo tanto al tiempo de generacin, g). Cada bacteria (y suponiendo que el resto de condiciones ambientales se mantienen constantes) muestra una curva caracterstica de tasa de crecimiento en funcin de la temperatura, donde podemos distinguir tres puntos caractersticos llamados temperaturas cardinales: a) temperatura mnima: por debajo de ella no hay crecimiento b) temperatura mxima: por encima de ella tampoco existe crecimiento. c) Temperatura ptima: permite la mxima tasa de crecimiento. El margen entre la temperatura mnima y la mxima se suele llamar margen de crecimiento, y en muchas bacterias suele comprender unos 40 grados. Por encima de la temperatura mnima la tasa de crecimiento va aumentando proporcionalmente hasta alcanzar la temperatura ptima, debido a que las reacciones metablicas catalizadas por enzimas se van aproximando a su ptimo. En dicha temperatura ptima las enzimas y reacciones se dan a su mxima tasa posible.

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Gua: Factores que Afectan a los Microorganismos Segn el rango de temperaturas al que pueden crecer las distintas bacterias, se pueden establecer tres tipos principales: a) psicrfilas o crifilas: crecen a partir de entre -5 a 5oC. b) Las mesfilas presentan temperaturas mnimas a los 10-15oC, ptimas a los 25-40oC y mximas entre 35 y 47oC. La mayor parte de las bacterias (incluyendo las patgenas) pertenecen a esta categora. c) Las termfilas presentan mnimos a 25oC, ptimos a 50-75oC y mximos entre 80 y 105oC. Veamos brevemente unos cuantos casos de bacterias (y algn microorganismo eucaritico) adaptado a medios con temperaturas extremas, y sus respectivas adaptaciones a dichas condiciones: Ejemplos de medios permanentemente fros son la mayor parte de las aguas ocenicas (cuya temperatura media es de unos 5oC, pero que en las profundidades alcanzan slo 1-2oC por encima de cero) y las reas permanentemente heladas del rtico y de la Antrtica. Algunas bacterias y hongos pueden crecer en alimentos (carne, leche, frutas y hortalizas) que se guardan en frigorficos, alterando las cualidades organolpticas e incluso, echndolos a perder (una experiencia que casi todos hemos tenido). Los hbitats naturales con temperaturas permanentemente altas (por encima de 45-50oC) estn restringidas a unas pocas zonas de la biosfera, normalmente relacionadas con fenmenos volcnicos: Se han aislado bacterias termfilas en medios artificiales, como calentadores de agua domsticos e industriales. Los microbios han estado por todas partes durante miles de millones de aos porque son capaces de adaptarse a cualquier cambio de ambiente. Pueden encontrar su hogar dondequiera y algunos de ellos viven en lugares en donde alguna vez cremos que NADA podra sobrevivir. Por ejemplo, los cientficos han descubierto microbios que viven en las aguas hirvientes de las fuentes termales en el Parque Nacional de Yellowstone. Estos microbios "comen" hidrgeno gaseoso y azufre y "respiran" sulfuro de hidrgeno (un gas que huele como los huevos podridos).

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Carl O. Wirsen/Visuals Unlimited

Otros microbios amantes del calor viven millas debajo de la superficie del ocano en grietas volcnicas donde no hay luz y el agua es una mezcla de arsnico venenoso, de sulfuro y otros qumicos desagradables. Las pequeas burbujas de la foto son bacterias que viven sobre la concha del mejilln alrededor de una salida volcnica llamada el respiradero de las Islas Galpagos.

Otros microbios viven en los hielos eternos de la Antrtica. Los microbios han sido hallados dentro de las piedras que componen las paredes de las viejas catedrales de Europa. Algunos cientficos incluso creen que existe la posibilidad de que las bacterias hayan vivido alguna vez en Marte. Esta fotografa, tomada a travs de un microscopio, muestra lo que algunos cientficos creen que pueden ser los fsiles de bacterias minsculas en una roca que se form en Marte hace cerca de 4.500 millones de aos (4.5 x 109 aos). La roca se estrell contra la Tierra como un meteorito hace millones aos.

Cortesa del NASA

2.- EFECTO pH La mayora de las bacterias pueden crecer dentro de un margen de pH de su medio, manteniendo al mismo tiempo su pH interno ptimo prcticamente constante. Por ejemplo, E. COLI puede crecer entre pH 6 y pH 8, pero su pH interno es siempre 7.6 o cercano a este valor. Segn el margen normal de pH a los que crecen las bacterias, estas se pueden clasificar en: Neutrofilas: si crecen de modo optima en torno a al neutralidad (pH entre 5.5 y 8). Acidofilas: si crecen de modo optimo entre pH 0 y 5. Alcalofilas: si crecen de modo optimo entre pH 8.5 y 11.5 La mayor parte de las bacterias son neutrfilas. Muchas bacterias neutrfilas modifican el pH del medio, y resisten entornos relativamente cidos o alcalinos. Por ejemplo, algunas bacterias fermentativas excretan cidos, mientras otras alcalinizan el medio, p. Ej., produciendo amonio a partir de desaminacin de Autores: TM. Soledad Caimanque E.U. Eliana Escudero DuocUC CODIGO: CEBMS110006

Gua: Factores que Afectan a los Microorganismos aminocidos.Aunque los microorganismos pueden crecer en un margen ms o menos amplio de pH (alrededor de un ptimo), los cambios bruscos pueden ser lesivos (afectando a la membrana y al transporte de solutos, e inhibiendo enzimas). Si el pH citoplsmico cae rpidamente hasta 5 o menos, la bacteria puede morir. BACTERIA ACOMODATICIA. Cada da nuestro estmago produce casi dos litros de jugo gstrico, que se compone principalmente de cido clorhdrico concentrado y de enzimas digestivos. Para las bacterias y virus, que ingerimos con la comida, esa mezcla constituye un verdadero bao mortal e incluso los alimentos, antes de su llegada al intestino, son degradados parcialmente por tal potente lquido. Entonces, cmo es posible que la Helicobacter pylori viva a sus anchas en un ambiente tan agresivo y hostil? y cmo puede ejercer sus efectos adversos patolgicos? La Helicobacter pylori es una bacteria espiraliforme que se localiza en el duodeno y sobre la superficie de las clulas de la mucosa gstrica, precisamente bajo la capa protectora del gel mucoso que las recubre, lo que evita su contacto directo con la gran acidez (pH 2,0) del jugo gstrico. La bacteria, para luchar contra la acidez, tambin cuenta con una enzima, la Ureasa, que acta sobre la urea, bastante abundante en estmago, haciendo que sta se descomponga en amonaco y bicarbonato, que son molculas alcalinas, con lo que se contrarresta la acidez gstrica. La posibilidad de supervivencia de la bacteria es grande, de modo que tras una infeccin aguda puede permanecer asintomtico en el estmago durante muchos aos.

3.- otros factores: a) desecacin b) radiaciones c) ondas sonoras d) presin e) desinfectantes y antispticos f) El hombre ha debido estudiar los diferentes comportamientos de las bacterias, con el fin de controlar su desarrollo desmesurado, sobre todo en el ambiente intrahospitalario, donde su proliferacin daara el estado de salud de los pacientes, que por lo general se encuentran con su sistema inmunolgico muy deprimido. Nota: El alumno deber traer al taller un anlisis de cada uno de estos factores descrito en una hoja carta (no mas que esto). Esto ser analizado en el grupo de taller

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INSUMOS Y EQUIPOS NECESARIOS PARA EL TALLER

Laboratorio de ciencias bsicas Hidrxido de sodio cido actico puro. pa Cultivos puros de bacilos y Cocaceas Tubos de ensayo taponados estriles (2 por alumno) Pipetas pasteur taponadas y estriles (2 por alumno) Chupetes gomas (uno por alumno) Estufa de cultivo a 37C Bao mara regulable Guantes Jabn desinfectante Toalla nova Caldo de cultivo Tripticase soya (distribuido en alcuota de 3 ml por tubo) Papel indicador de pH Tubos sometidos a proceso y con modificaciones Lpiz marcador

DESCRIPCIN DEL PROCEDIMIENTO

Actividad 1: El docente realiza y explica proceso de efecto temperatura, pH Actividad2: Los alumnos organizados en grupo realizan los procedimientos demostrados por el docente: EFECTO pH 1.- Se entregara a cada alumno un alcuota de cultivo puro. 2.- Inocular en dos tubos de caldo Tripticase soya. 3.- Cambiar el pH de uno de los caldos de cultivos (tubo prueba). Agregando solucin alcalina o cida segn corresponda .Medir pH y anotar y al otro solo inoculara el cultivo (tubo control). 4.- Incubar ambos tubos en estufa de cultivo a 37 C. 5.- Transcurridas 24 horas de incubacin proceder a analizar desarrollo bacteriano. ( se observaran tubos que han sufrido el proceso) EFECTO TEMPERATURA 1.- Se entregara a cada grupo una alcuota de cultivo puro. 2.- Inocular en dos tubos de caldo Tripticase soya. 3.- Tubo prueba se deber incubar en bao mara a 56C durante 24 horas 4.- Tubo control se deber incubar en estufa de cultivo a 37C

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Gua: Factores que Afectan a los Microorganismos 5.- Transcurridas las 24 horas se debiera analizar los resultados obtenidos en referencia, a visualizar desarrollo microbiano. (en estos talleres se observaran tubos que han sufrido el proceso)

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BIBLIOGRAFA
Buscador Google Accin de los agentes fsicos sobre las bacterias. Manual de laboratorio d tecnologa medica Universidad austral

METODOLOGA DE EVALUACIN:
Se realizar mediante un informe entregado por el alumno con todos sus resultados obtenidos, fundamentados en el marco terico y la aplicacin de una pauta.

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Nombre del alumno: Fecha: Puntaje: Factores que afectan a los microorganismos 1.Cumple con una correcta presentacin personal: -delantal -pelo tomado -uas cortas y limpias 2. Sigue indicaciones del profesor 3. Coopera en el trabajo en equipo 4. informe de los resultados a.- Descripcin del procedimiento b.- Cepa utilizada c.- Factor (temperatura, pH, etc.) d.- Resultado obtenido e.- Fundamento terico de sus resultados f.- Conclusin 5. Ordena y limpia su unidad al finalizar el taller C Nota: MC NC

C: Competente MC: Medianamente Competente NC: No

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