UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO Disciplina: Bioqumica 1 Instituto de Bioqumica Mdica CCS UFRJ Prof. Vitor H.

H. Pomin 1 Periodo Farmcia Noturno Estudo dirigido de carboidratos 1) Explique com base nas diferenas de configurao D e L, e anomericidade e , como estas caractersticas estruturais podem influenciar em eventos biolgicos (0.1 pts). R: As molculas de acares naturais so quase todas classificadas como D-ismeros (diferentes dos aminocidos animais, que so L-ismeros). A especificidade de ligao para uma molcula quiral em um stio receptor quiral, s favorvel de uma maneira. Sendo assim, se a molcula ou stio biolgico receptor tiver a lateralidade errada, a resposta fisiolgica natural no ocorrer. Muitos medicamentos so quirais e, normalmente, uma forma de imagem especular fornece o efeito desejado, sendo a outra geralmente inativa. Outro exemplo o alimento ingerido, que constitudo de uma forma de imagem especular e se fosse consumido a outra forma no-natural, no haveria digesto. Os anmeros alfa e beta, assim como a configurao D- e L-, tambm determinam essa conformao estrutural dos carboidratos, influenciando na resposta fisiolgica natural. 2) Explique a variabilidade estrutural de carboidratos e por que esta variabilidade restrita na natureza em termos de ocorrncia (0.2 pts). R: Devido grande heterogeneidade nos nmeros de carbono (de 3 a milhares; mono, di, oligo e polissacardeos), tipos de ligao glicosdica, configuraes do carbono anomrico (alfa- e beta-), e linearidade de ramificaes, os carboidratos so biomolculas que mais apresentam variabilidade estrutural e, portanto, informao biolgica. Os carboidratos so restringidos pelas enzimas (protenas) que participam de diversas reaes metablicas, utilizando os carboidratos como substrato. 3) Cite duas funes biolgicas desempenhadas por glicoconjugados (0.2 pts).

R: Glicoconjugados so, por definio, carboidratos que esto ligados covalentemente a protenas ou lipdeos.. As glicoprotenas, glicolipideos, glicopeptideos e lipossacarideos so os principais glicoconjugados. As integrinas, glicoprotenas, so encontradas em plaquetas e em todas as clulas nucleadas dos mamferos. O termo 'integrina' apareceu, primeiramente, em meados dos anos 80 e tinha como objetivo nomear a molcula que integrava os meios extra e intracelular. Elas participam diretamente de vrios fenmenos biolgicos que envolvem adeso e migrao celular, atuam na organizao dos tecidos juntamente com outras molculas de adeso e so fundamentais na embriognese. No caso dos glicolipdeos, por exemplo, levando em considerao que este tipo de lipdeo armazena restos glicdicos, sua principal funo seria a de reserva nutritiva para a clula. 4) Qual a importncia farmacolgica do pentassacardeo de heparina (GlcNR6SGlcA GlcNS3,6S IdoA2SGlcNS6S) (0.2 pts). R: O pentassacardeo de heparina, uma heparina de baixssimo peso molecular correspondente ao stio de fixao da heparina anti-trombina III e farmacologicamente superior s heparinas no-fracionadas (HNF) devido ao fato de que suas cadeias de sacardeos no so suficientemente longas para inibir diretamente a trombina, por isso tem maior atividade apenas pelo fator Xa, o que reduz consideravelmente o risco de sangramentos; entre outros fatores como: Meia vida 2x maior (4H). Biodisponibilidade 90% contra 20% das HNF. Ligam-se menos s protenas plasmticas e s clulas endoteliais e, por isso, possuem taxa de eliminao, resposta dose e bioatividade mais previsveis que as HNF. Maior absoro subcutnea. Menor interao com as plaquetas.

5) Apresente um plano experimental de anlise estrutural de um carboidrato desconhecido (0.3 pts). R: Preparao das amostras: as amostras slidas devem ser modas em condies que causem a mnima mudana no contedo de umidade e que no afetem as propriedades e composio do alimento. Os lipdios e clorofila so geralmente removidos por extrao com

ter de petrleo, pois neste solvente os carboidratos so insolveis. Na determinao do contedo de carboidratos em alimentos, deve-se obter soluo aquosa dos acares, livres de substncias interferentes, para posterior identificao e quantificao. Estas substncias interferentes podem ser pigmentos solveis, substncias opticamente ativas (aminocidos etc.), constituintes fenlicos, lipdios e protenas. As substncias interferentes podem ser separadas por descolorao, tratamento com resina trocadora de ons, ou clarificao com vrios agentes clarificantes. A funo destes clarificantes de precipitar as substncias que iro interferir na medida fsica ou qumica do acar. Os mtodos quantitativos utilizados para determinao de acares totais e acares redutores utilizados em alimentos so: a) Munson-Walker: mtodo gravimtrico baseado na reduo de cobre pelos grupos redutores dos acares. b) Lane-Eynon: mtodo que utiliza a titulao e tambm est baseado na reduo de cobre pelos grupos redutores dos acares. c) Somogyi-Nelson: mtodo que utiliza a titulao e tambm est baseado na reduo do cobre. Os mtodos de reduo so empricos e as condies estabelecidas para cada um deles devem ser rigorosamente seguidas. Como reagente utiliza-se: Reagente de Fehling, que composto por uma Soluo A (sulfato de cobre cristalino em gua) e uma Soluo B (tartarato de sdio e potssio e hidrxido de sdio) em gua. Os resultados so expressos em: acares redutores, em glicose (%, p/p), acares noredutores, em sacarose (%, p/p).