UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA FACULTAD CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES INSTITUTO DE QUIMICA Greis Gmez: 128474228 RESUMEN DEL ARTICULO: TRENDS

IN QUALITY IN THE ANALYTICAL LABORATORY. II. ANALYTICAL METHOD VALIDATION AND QUALITY ASSURANCE. TENDENCIAS EN LA CALIDAD DEL LABORATORIO ANALITICO. II. MTODO DE VALIDACION ANALITICO Y CONTROL DE CALIDAD. Actualmente y a nivel mundial se reconoce la importancia de la validacin de los mtodos analticos en los laboratorios ya que a travs de estas metodologas se obtienen datos que reflejan la calidad y la competencia de los respectivos laboratorios. La validacin de las metodologas analticas es abarcada en un amplio contexto de control de calidad y de anlisis de las caractersticas que permiten desarrollar y dar funcionamiento al mtodo analtico. El control de calidad analtico es el conjunto completo de las medidas de un laboratorio, las cuales deben garantizar la obtencin de datos de alta calidad. Los diferentes niveles que componen el control de calidad analtico son: la validacin, el control de calidad interno, los ensayos de aptitud y la acreditacin, los cuales estn esquematizados en la figura 1. La validacin, la cual es el primer nivel para el control de calidad analtico es un mtodo de investigacin analtico el cual nos permite obtener resultados analticos con un aceptable nivel de incertidumbre; por lo tanto, es el instrumento utilizado para demostrar que un mtodo analtico especfico mide lo que se necesita y de una manera adecuada para una finalidad particular. Al cambiar algn factor en un mtodo de validacin para un sistema analtico especfico o cuando las especificaciones establecidas por el mtodo no son desarrolladas adecuadamente se da como consecuencia la revalidacin. La validacin de un nuevo mtodo analtico requiere de dos niveles; el primero es la pre-validacin, dirigido a fijar el alcance de la validacin y el segundo es la validacin completa realizada a travs de pruebas y ensayos en varios laboratorios. Luego de la validacin sigue el control de calidad interno (vigilancia continua del funcionamiento del mtodo y de los resultados obtenidos, con el objetivo de decidir si estos son lo suficientemente confiables), siendo este necesario para los esquemas PT (evaluacin peridica de la competencia y veracidad de los resultados analticos obtenido en cada uno de los laboratorios para as verificar que los resultados son confiables) y

siendo este ultimo necesario para la acreditacin (reconocimiento formal de que un laboratorio competente para llevar a cabo anlisis especficos o calibraciones). Para los diferentes niveles de calidad que se presentan en la figura 1, se describen detalladamente los requisitos y las directrices por varios organismos reguladores, grupos de normalizacin y grupos de trabajo. Tenindose en la tabla 1 una descripcin general de los organismos reguladores europeos e internacionales y sus directrices y las diferentes normas con relacin al control de calidad analtico. Dentro de estas organizaciones estn: Eurachem, CITAC, EA, CEN, IUPAC, ISO, entre otras. El propsito de un mtodo analtico es la entrega de un resultado cualitativo y/o cuantitativo con un nivel aceptable de incertidumbre. En general, la validacin del mtodo se realiza mediante una serie de caractersticas acerca del funcionamiento del mtodo, como: precisin, exactitud, selectividad, especificidad, lineabilidad, rango de operacin, recuperacin, lmite de deteccin, lmite de cuantificacin, sensibilidad, aplicabilidad y trazabilidad. Las medidas de incertidumbre (MU) son parmetros generales que abarcan todas las fuentes de error. Los MU han dado lugar a dos diferentes enfoques para la validacin de mtodos analticos. El enfoque tradicional el cual es el enfoque de criterios se basa en identificar el cumplimiento especfico de los parmetros y asignar valores numricos a estos. El valor numrico representa valores de corte que el parmetro debe cumplir para que as el mtodo pueda ser aceptable. El enfoque alternativo se centra en la adecuacin al propsito y en las medidas de incertidumbre. La adecuacin al propsito sobre todas las MU se estiman como una funcin de la concentracin del analito. Las MU estas relacionadas con los enfoques de validacin modular, la cual es una validacin paso a paso de un procedimiento conjunto teniendo en cuenta los factores de incertidumbre en cada nivel del procedimiento. La eleccin de los parmetros de desempeo a ser evaluados en el mtodo analtico depende del estado y la experiencia del mtodo. Esta validacin est definida en si por el requisito analtico, esto es: teniendo en cuenta las normativas existentes o las especificaciones del cliente. En la tabla 3 encontramos las definiciones, formas de expresin y criterios aceptables para cada parmetro de validacin, en donde los trminos y las frmulas son tomadas de la nomenclatura IUPAC para la representacin de los resultados de los anlisis qumicos. Los criterios de validacin ms importantes para la estimacin de los MU son: medidas de precisin, las cuales a su vez se dividen en: medidas de repetitividad de precisin (s o SD), reproducibilidad de precisin intra-laboratorio (SD y RSD) y reproducibilidad de precisin inter-laboratorio (s o SD y RSD); dentro de las medidas de precisin tambin estn los intervalos de confianza, en donde todas las medidas se encuentran con una cierta probabilidad. En la tabla 4 se muestran los coeficientes de variacin aceptados para una determinada concentracin de analito, sin importar la naturaleza de este, la matriz o el mtodo usado

por dos entidades diferentes; una es por medio de la ecuacin de Horwits (relacin emprica entre la precisin del mtodo analtico y la concentracin del analito) y la otra es AOAC PVM. En ambos casos vemos que el porcentaje RSD es mayor a medida que el porcentaje de analito disminuye y esto puede ser debido a que una pequea concentracin de analito aumenta la incertidumbre en las medidas y se pierde sensibilidad en el mtodo. El mtodo de veracidad entrega los datos con una tendencia o porcentaje de error. La tendencia o el sesgo es la diferencia entre el valor principal determinado para el analito de inters y el valor realmente aceptado. Se tiene que el sesgo persistente es el que afecta a todos los datos, durante largos periodos de tiempo, siendo relativamente pequeo pero siempre constante. Los MRC son herramientas tiles que sirven para lograr la trazabilidad de las mediciones analticas, tambin para calibrar el equipo y los mtodos. No obstante, el uso de la MRC no garantiza la veracidad de los resultados, por lo tanto la mejor manera de evaluar el sesgo es por anlisis repetitivos de muestras con concentraciones conocidas, como la RM. Si para el mtodo analtico no hay RM, entonces se puede utilizar una matriz con un blanco de la muestra, la cual puede ser enriquecida con una cantidad conocida de sustancia pura. La recuperacin se calcula como el porcentaje de la medida de la matriz de la muestra con relacin a la matriz con el blanco. Cuanto menor sea el porcentaje de recuperacin mayor ser el sesgo que est afectando el mtodo. La Eurachem, IUPAC, ISO y la AOAC Internacional afirman que los valores de recuperacin siempre deben establecerse como parte del mtodo de validacin. La tabla 5 nos muestra los porcentajes aceptables de recuperacin en funcin de la concentracin del analito. Se observa que a medida que disminuye la concentracin del analito en la muestra aumenta el rango de recuperacin aceptable. Un mtodo especfico produce una respuesta para un solo analito, mientras que un mtodo selectivo es aquel que produce respuestas para las diferentes entidades qumicas las cuales se pueden distinguir unas de otras. Para el mtodo selectivo, se tiene que este, es capaz de medir con precisin un analito en presencia de interferencias. El lmite de deteccin (LOD) es la menor cantidad de un analito en una muestra que puede ser detectada pero no necesariamente cuantificada como un valor exacto. Se tiene que la cuantificacin no es imposible de lograr por debajo del lmite de deteccin, pero en estos niveles tan bajos la medicin es superior al valor real. El lmite de cuantificacin (LOQ) es la cantidad de analito cuantificable con un coeficiente de variacin no superior al 10%. La sensibilidad se refiere a la pendiente de la curva de calibracin. Esta ltima se utiliza para el clculo de los lmites de deteccin. Se tiene que un mtodo es sensible cuando una pequea variacin en la concentracin del analito provoca un gran cambio en la medicin.