PROCARIONTES FITOPATGENOS

Dra. Delia Gamarra

CONTENIDO

Introduccin
Caractersticas de las bacterias fitopatgenas. Sntomas y signos ms comunes Proceso de diagnstico de una enfermedad

bacteriana. Taxonoma y nomeclatura.

INTRODUCCIN
4500 millones de aos 3500 millones de aos 1500 millones de aos 500 Millones de aos formacin de la tierra primeros seres vivos, clulas procariotas aparecen clulas eucariotas periodo cambriano, sistemas multicelulares

El estudio de los procariontes han tenido avances importantes durante el siglo pasado. En la ltima dcada han habido cambios significativos en la taxonoma, filogenia, fisiologa y gentica, muchos miembros fueron reubicados en otros reinos.

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D O M I N I O S
1. Lipidos de membrana con cadenas alifticas ramificadas con enlaces ter

Carl Woose University of Illinois (1993) Estudiaron el RNAr para agrupar todos los organismos vivos en
2.RNA de tranferencia sin timidina en el brazo T 3. RNApols especficas 4. Ribosomas de dif. Forma y composicin

Acido murmico

Sin cido murmico

ENFERMEDADES CAUSADAS POR PROCARIONTES

Organismos que tienen mayor evolucin, (3500 millones de antigedad) ampliamente distribuidos en la naturaleza Material gentico, no se encuentra rodeado de una membrana nuclear. Pueden estar rodeado de una pared y membrana celular o solamente poseer ste ltimo elemento. Ribosomas pequeos (70s). Presentan forma diversas o son pleomrficos. Dos categoras de procariontes son responsables de causar enfermedades en las plantas: las bacterias y los mollicutes,

Organismos procariontes

Bacterias * Bacterias fitopatgenas * Bacterias fastidiosas vasculares

Con pared celular

Mollicutes
* Fitoplasmas * Spiroplasmas
Sin pared celular

BACTERIAS
Fueron reconocidas hace 100 aos aprox. La mayora son saprofitas e intervienen en procesos

de mineralizacin de materia orgnica, ciclo del carbono, nitrgeno y azufre. Respecto a las bacterias, se conocen alrededor de 1600 especies. Un mnimo porcentaje son patgenas del hombre, animales y plantas. Se reportan mas de 200 especies de bacterias fitopatgenas, la mayora son saprofitas facultativas y algunas son bacterias fastidiosas. Su importancia radica en la rapidez con que causan infeccin.

Caractersticas generales de las bacterias fitopatgenas

Procariotas unicelulares, baciliformes y flageladas.
Sin endosporas pero con una cubierta de polisacridos sobre la pared celular que le da resistencia. La mayora son G(-) negativas y aerobias estrictas. Saprfitas facultativas. Se reproducen por fisin binaria y poseen mecanismos de conjugacin y transduccin que les permite generar variabilidad gentica.

ESQUEMA DE UNA CELULA BACTERIANA

Ultraestructura de una bacteria fitopatgena

Invasin de bacterias a travs de un estoma

TAMAO DE LA CELULAS BACTERIANAS

La mayora oscila entre 0,2 u y 2.0 um de dimetro. Dimetro aproximado o anchura x longitud (nm) Oscillatoria

7000 (5,4 veces el dimetro de E. coli)

1300 x 4000 475 230 x 320 15 x 300

E. coli

Rickettsias
Poxvirus Virus del mosaico del tabaco

Carecen de los siguientes organelos

Mitocondrias Microtbulos Plastidios

PARTES DE UNA CELULA BACTERIANA

CAPSULA. Denominada Glicocalix, es la cubierta exterior mucilaginosa, que recubre y protege a la clula de la desecacin, algunas lo poseen otras no. Se asocia con la patogenicidad. Estn compuestas de: a. Carbohidratos con y sin nitrgeno (glucosamina, galactosamina, polimeros de glucosa: dextrosa) Fructuosa: fructosomas, galactosa: galactosomas b. Protenas y pptidos c. ADN

FIMBRIAE O PILI. Estructura filamentosa de bacterias GRAM (-), su dimetro es de 80 A, nace del citoplasma y sale al exterior a travs de la pared celular. Est compuesta por la pilina, protena en forma helicoidal, permite la adsorcin a la superficie del husped e intercambio de material gentico entre bacterias compatibles o parientes. FLAGELO. Nace a travs de un grnulo (BLEFAROPLASTO), son prolongaciones delicadas y finas (0,02 0,03 m de dimetro), ms larga que la bacteria misma. Permite la movilidad a corta distancia.

Su nmero y posicin varan en las diferentes especies. De acuerdo a su disposicin las bacterias pueden ser:

TRICAS : (a = privativa; tricx = pelo), sin flagelo MONOTRICAS : Poseen un solo flagelo LOFOTRICO : Presencia de un mechn de pelo en cualquiera de los polos. ANFITRICAS : Un grupo de flagelos en cada polo PERITRICAS : Flagelos sobre toda la superficie de la bacteria

PARED CELULAR. Es la encargada de dar forma a las bacterias, es resistente y plstica, acta como membrana selectiva. Esta compuesto de: Mucopeptido: formado por cido murmico, 3-galaoxietil, galactosamina, glucosamina. - Aminocidos: Lisina, alanina, cido glutminico - Lpidos, protenas, polisacridos. CITOPLASMA. Es refringente, rico en protenas, grasas, hidratos de carbono, sustancias de reserva como la VOLUTINA, vacuolas y generalmente cuerpos nucleares.

Arquitectura de la pared celular de bacterias G(-)

MEMBRANA CITOPLASMTICA. Regula la entrada de material del exterior hacia le interior de la clula. Esta compuesto de lipoprotenas, enzimas, RNA RIBOSOMAS. Son partculas ribonucleoproteicas de 10 a 20 um de dimetro. Tiene un coeficiente de 70s. Estn formados por dos subunidades: 16 s (RS) (tiene 4 dominios o regiones)

23 s

(RL)

Son los encargados de sintetizar las protenas y polipptidos. ENDOSPORAS. Son estructuras que permiten la sobrevivencia, en bacterias fitopatgenas no han sido encontradas.

CARACTERISTICAS DE BACTERIAS FITOPATOGENAS

MORFOLOGIA. Forma de bastn rgidas o ligeramente curvas, con la nica excepcin de Streptomyces, que es filamentosa. Actualmente se reporta la fase L de las bacterias (Pleomorphic phase), en el cual la bacteria se queda rodeada por su membrana. Los bastones son cortos y cilndricos (long. 0,6 3,5 m y 0,5 1,0 m de dim.). En ocasiones se dan variaciones a formas de una maza, una "Y" o una "V" y otras formas ramificadas, incluso algunas bacterias, pueden encontrarse dispuestas en pares o en cadenas cortas.

MATERIAL GENTICO Es un gran cromosoma circular largo de DNA, que constituye el principal armazn del material gentico de las bacterias y aparece como un corpsculo esfrico, elipsoidal dentro del citoplasma. Con frecuencia, las bacterias, tambin tienen copias individuales o mltiples de otros cromosomas circulares ms pequeos denominados plsmidos, (2-30 genes), los cuales pueden transferirse entre bacterias o entre bacterias y plantas, como es el caso de la agalla de la corona (Agrobacterium tumefaciens)

REPRODUCCIN
REPRODUCCIN ASEXUAL. a. FISIN BINARIA: La clula adulta da lugar a clulas hijas, formando un tabique de separacin

REPRODUCCIN SEXUAL No existe, solamente se acepta que la bacteria recibe ADN de otra bacteria o del medio ambiente o llevado por un bacterifago No produce mitosis, no hay nucleolo, no hay membrana nuclear, histonas ni protaminas.

1. CONJUGACIN. Dos bacterias se ponen en contacto y una pequea parte del material gentico de una bacteria es transferida a otra

TRANSFORMACIN. Las clulas bacterianas se transforman genticamente al absorber o incorporar en sus propias clulas material gentico secretado por otras bacterias compatibles o liberado durante la ruptura de la misma.
2.

3. TRANSDUCCIN. Se realiza cuando un virus bacteriano (bacterifago), transfiere el material gentico de la bacteria en que se forma a la siguiente bacteria que infecta.

ECOLOGIA La mayora son saprofitos facultativos y pueden cultivarse artificialmente en medios nutritivos, conteniendo minerales y una adecuada fuente de carbono, y otros factores de crecimiento, por ejemplo. Medio Czapek (extracto de levadura, peptona). Su habitat es el suelo (rizosfera y rizoplano) o el aire (filoplano), pueden desarrollarse epifticamente. A un pequeo grupo de bacterias se les conoce como bacterias fastidiosas, estn circunscritas al xilema de las plantas y son difciles de aislar

Diagnstico
Deteccin de sntomas Aislamiento y obtencin de cultivo puro Deteccin e Identificacin (diversas tcnicas) Test de patogenicidad Re aislamiento Re identificacin Informe del diagnstico

Test de microcorrida
Portaobjeto gota de agua trozo de mancha

En el microscopio se observa la difusin de la bacteria desde la mancha o sus bordes al agua. Se visualiza con aspecto de turbidez

Gneros de bacterias fitopatgenas

Test de Gram
Gram positivas Gram negativas

Clavibacter Curtobacterium

Agrobacterium Erwinia Pseudomonas Xanthomonas Xylella

Test de flujo
Se aplica en el caso de marchitamientos, tizones y obstruccin vascular. La turbidez que difunde al agua es la masa bacteriana: o zooglea

Seccin de tallo

Aislamiento
Materiales necesarios:
Muestra Mortero Mechero Ansa Medio de cultivo

Mortero

Procedimiento:
Desinfeccin superficial de la muestra. Corte de trozos de tejido afectado. Desinfeccin y enjuagado de los mismos. Macerado con buffer. Estriado en el medio de cultivo. Incubacin.

Identificacin
Reaccin de Gram. Morfologa de colonia Test de hipersensibilidad Test de causalidad o patogenicidad

YDC Extracto de levadura 10 g Dextrosa 20 g Carbonato de Ca 20 g Agar 15 g Agua destilada 1 l

Test bioqumicos.

Serologa

(Tcnica de ELISA)
PCR Hibridacin de ADN

Tcnicas moleculares:

Sintomas y signo de bacteriosis

Manchas necrticas con halo

Marchitez vascular

Exudacin en haces vasculares

Necrosis en nervaduras

Manchas acuosas

Cancros

Agallas o tumores

Podredumbres blandas

PATOGENESIS DE UNA ENFERMEDAD BACTERIANA

Inculo: la masa bacteriana o zooglea Fuentes de inculo /sobrevivencia: material vegetal herramientas ropas plantas huachas enfermas malezas contaminadas Dispersin: rganos vegetativos, semillas, mov. tierra, etc) por lluvias, rocos Riego, podas lluvias o neblinas con vientos animales e insectos

Penetracin:
por aberturas naturales por heridas de diverso origen. determina la distribucin de sntomas

Colonizacin:
lisando los tejidos que colonizan parnquima intercelularmente haces vasculares

Produccin de inculo:
con temperaturas medias a altas en presencia de humedad las bacterias se reproducen logartmicamente

Nomenclatura bacteriana
Gnero especie raza pv subsp

raza

(R)

patovar (pv)

biovar (bv) subespecie (subsp)

variacin fisiolgica variacin patognica variacin fisiolgica taxa inferior a especies

Pseudomonas

Reaccin Gram (-) Abastonada Flagelos polares (Loftrico o montrico) Produce pigmento fluorescentes, amarillo-verdosas, solubles al agua, los que se difunden en el medio de cultivo. Producen manchas foliares

Ralstonia

Reaccin Gram (-) Abastonada Flagelos polares (loftrico o montrico) No producen pigmentos fluorescentes Producen marchiteces

Xanthomonas

Reaccin Gram (-) Abastonada Montricas Colonias amarillas en medio de cultivo. Pigmento producido no es soluble Producen manchas foliares, pudricin del pie en la col. Incluye slo especies fitopatgenas

Xylella

Reaccin Gram (-) Abastonada muy pequea (0,2 0,5 micrones) Atricas Limitados al xilema, requiere de vectores para su transmisin (Cicadelidae y Cercopidae) Se le conoca como RLOS u organismos parecidos a las Rickettsias. Produce necrosis en hojas, denominadas scroch-type

Agrobacterium

Reaccin Gram (-) Abastonada Pertricas Forma cpsula (polisacridos) Produce agallas

Erwinia (Pectobacterium)

Reaccin Gram (-) Abastonada Pertricas Aero-anaerobio facultativas Se dividen en dos grupos: Grupo Carotovora y Grupo Amylovora Carotovora produce pudriciones blandas (Pectobacterium) Amylovora produce marchiteces, manchas foliares, tizones, cancros, enanismos, agallas. (Erwinia)

Pectobacterium

Erwinia

Clavibacter

Reaccin Gram (+) Abastonada Atricas Obligados aerobios Se le conoca como Corynebacterium Produce marchiteces

Streptomyces
Reaccin Gram. (+) Filamentosos Produce esporas Aerobios Produce lesiones costrosas denominadas sarna

Borreli