MINI-APOSTILA DE BIOLOGIA CELULAR Membranas Celulares

Tudo que existe, e que indivualizado, precisa se separar do seu meio exterior por algum envoltrio. Por exemplo, uma casa separada do meio externo por paredes, pelo piso e pelo teto. Imagine agora uma clula sem um envoltrio. Como seria sua composio? Certamente, semelhante quela encontrada ao seu redor. Sem esse envoltrio, provavelmente a clula nem existiria. Assim, o papel principal da membrana plasmtica delimitar a clula, em outras palavras, separar o contedo citoplasmtico do meio em que ela se encontra. Por isso, comearemos nosso estudo sobre as estruturas que formam a clula pela membrana plasmtica. Quais as substncias que formam a membrana plasmtica? Antes de responder a esta pergunta importante lembrar que tanto o interior da clula quanto o seu exterior possui grande quantidade de gua. Voc j pode ter observado o que acontece quando pinga uma gota de leo sobre a gua. O leo no se mistura. Os lipdeos, substncias oleosas, so as principais molculas presentes na membrana plasmtica e o fato deles no se misturarem com a gua ajuda no papel da membrana plasmtica de separao da clula do seu meio externo. Os lipdeos da membrana so chamados de fosfolipdeos e se organizam em uma bicamada (duas camadas justapostas). Os fosfolipdios possuem uma cabea polar, formada por fsforo (que pode ficar em contato com a gua) e caudas apolares (que no tem afinidade por gua) que ficam voltadas para o interior da membrana. Alm dos fosfolipdeos a membrana tambm possui protenas, que funcionam como portas e janelas da clula, e acares ligados aos lipdeos e s protenas.Ou seja, a composio da membrana plasmtica ... principalmente lipoprotica ( lipdios + protenas). O modelo mais aceito atualmente foi proposto por Singer e Nicholson e conhecido como modelo do mosaico fluido, como mostra a figura abaixo.

O que aconteceria com a clula se a membrana plasmtica no permitisse a passagem de nenhuma substncia atravs dela? Assim como, por exemplo, um carro precisa de portas para as pessoas entrarem e sair, as clulas tambm possuem mecanismos que permitem a entrada e a sada de substncias. Dizemos que a membrana plasmtica seleciona a passagem destas substncias e que ela possui, desta forma, uma permeabilidade seletiva. A camada fosfolipdica da membrana plasmtica funciona como uma barreira fluida (malevel) e permite a passagem de substncias diretamente atravs dela. Voc acha que tudo consegue atravessar essa barreira fosfolipdica? A resposta no. Atravessar a barreira apenas as substncias pequenas que consigam se entremear atravs dos fosfoslipdeos. Essas substncias precisam ter afinidades por lipdeos, seno no conseguiriam se "misturar" com eles para atravessar a membrana. Por outro lado no so apenas substncias com afinidades por lipdeos que atravessam a membrana plasmtica. As substncias que no conseguem atravessar diretamente a camada fosfolipdica podem entrar ou sair da clula atravs de suas portas e janelas, que so as protenas. A passagem das substncias de pequeno porte atravs da membrana pode ocorrer passivamente ou ativamente Antes de entender as duas formas principais de transporte na membrana, o passivo e o ativo, necessrio que compreenda muito bem o processo de difuso. Voc j deve ter observado o que acontece quando uma pessoa passa um perfume

forte e permanece em um ambiente fechado. Em poucos instantes toda a sala fica com o cheiro do perfume. J parou para se perguntar por que isso ocorre? Lembra que dois corpos no ocupam um mesmo lugar no espao? Isso significa dizer que quando uma "partcula" se move, ela acaba "tomando o lugar" de uma outra partcula que se encontra ao seu lado. O ar composto de diversas "partculas" flutuantes diferentes, ou seja, de gases, como o oxignio, gs carbnico e nitrognio, que se movem, e que esto sempre trocando de lugar uns com os outros. O perfume feito por um lquido muito voltil, que se torna um gs facilmente. Quando os gases perfumados so adicionados ao ar, eles tambm iro se mover e trocar de lugar com os outros tipos de gases. Isso faz com que depois de um tempo tenhamos gases de perfume espalhados por todo o ambiente fechado. As molculas presentes dentro de lquidos tambm possuem capacidade de movimento. Dentro da clula e em seu exterior existe grande quantidade de lquidos. Ento, quando uma molcula qualquer se move dentro desses lquidos elas devero tambm trocar de lugar com as molculas que esto ao seu redor. Agora, responda a seguinte pergunta: Uma pessoa est parada numa estao final de trem esperando para embarcar. O trem chega lotado de passageiros e abre as portas. A pessoa conseguir entrar com facilidade? Voc j deve ter percebido que esta pessoa ter grande dificuldade de entrar no trem porque haver um grande fluxo de passageiros saindo dele. O mesmo acontece com as substncias que entram e saem de uma clula. Se existe maior quantidade de substncias de um lado ou do outro, haver maior fluxo de passagem para o lado que a substncia estiver em menor quantidade. Assim, a difuso pode ser entendida como um maior fluxo de movimento de molculas em direo a uma regio onde as mesmas se encontram em menor quantidade. a) Transporte Ativo Movimento de entrada ou sada de substncias em uma clula com gasto de energia. Ex: bomba de sdio e potssio. Para entender o transporte ativo, pense em nosso exemplo acima e imagine o caso da pessoa que est do lado de fora do trem. Para entrar no trem esta pessoa ter que "vencer" a direo natural de movimento de passageiros. E, ao fazer isso, ter que se movimentar contra um "gradiente" de passageiros e se esforar bastante. Em outras palavras, ela ter que gastar energia. Para ocorrer a passagem de uma molcula contra um gradiente de concentrao tambm ser necessrio o gasto de energia. b) Transporte Passivo Movimento feito sem gasto de energia, ou seja, respeitando o gradiente de condentrao. Ex: osmose. Osmose a difuso da gua, ou seja, a passagem de gua de um meio hipotnico (onde ela se encontra em maior quantidade) para um meio hipertnico (onde ela se encontra em menor quantidade). Em um meio hipotnico existe maior quantidade de gua e menor quantidade de sal dissolvido. O contrrio ocorre em um meio

hipertnico. Difuso facilitada a passagem de macromolculas atravs de protenas especiais denominadas permeases, que formam poros na membrana. A membrana plasmtica possui a capacidade de englobar substncias de maior porte atravs da endocitose Endocitose Transporte de molculas em grande quantidade. Existem dois tipos de mecanismos para esse transporte: a) Fagocitose Englobamento de partculas slidas por meio da emisso de pseudpodes pela membrana plasmtica. b) Pinocitose Englobamento de gotculas lquidas por meio de invaginaes da membrana plasmtica.

Citoesqueleto
Introduo As clulas eucariontes possuem uma complexa rede citoplasmtica de microtbulos e microfilamentos situada predominantemente prxima membrana celular e envolvida em quase todos os aspectos que envolvem a forma e movimento celulares. Essa rede chamada de CITOESQUELETO. O citoesqueleto desempenha um papel mecnico, de suporte, mantendo a forma celular e a posio de seus componentes. Ele estabelece, modifica e mantm a forma das clulas. responsvel por movimentos celulares como contrao, formao de pseudpodes e deslocamento intracelular de organelas, cromossomos, vesculas e grnulos diversos. O citoesqueleto deve ser considerado como um complexo de tbulos, microfilamentos longos (actina), filamentos curtos (miosina), filamentos intermedirios e acromolculas proticas diversas que formam um conjunto dinmico. Os microtbulos so estruturas cilndricas de 24 nm, composto por fibrilas longitudinais que contribuem para os movimentos intracelulares; so feixes ordenados de cilindros delgados e longos formados por protenas (a e b tubulina) que constituem os clios e flagelos, as fibras do ster e o fuso (na diviso celular), os centrolos e os corpsculos basais. Os microfilamentos so estruturas de 4 a 6 nm de dimetro e so formados pela actina, miosina ou outras protenas contrteis. Participam ativamente nos movimentos celulares. Os filamentos intermedirios tem 10 nm de espessura e contm diversas protenas fibrosas no contrteis que desempenham um papel mecnico. H vrios tipos de filamentos intermedirios: filamentos de queratina, neurofilamentos, filamentos gliais e filamentos heterogneos.

Como o citoesqueleto muito dinmico, ele est envolvido em vrios movimentos. Estes podem ocorrer em clulas no-musculares ou em clulas musculares. Nas clulas no-musculares os clios, os flagelos, a ciclose (tipo de movimento de gerao de correntes citoplasmticas por ao de microfilamentos) e o movimento amebide (que um tipo de locomoo no qual a clula troca de forma ativamente, enviando pseudpodes citoplasmticos na direo do movimento) so responsveis pela locomoo. E nas clulas musculares a movimentao celular e conseqente contrao muscular ocorre no interior dos sarcmeros. Os sarcmeros so unidades estruturais da miofibrila (estruturas delgadas cilndricas e contrteis do tecido muscular estriado) onde h a participao de protenas contrteis como a actina, a miosina e outras. A capacidade que as clulas eucariticas possuem de adotar uma variedade de formas e de executar movimentos coordenados e direcionados depende de uma rede complexa de filamentos de protenas filamentosas que se estendem por todo o citoplasma. Esta rede chamada de citoesqueleto. O citoesqueleto composto por vrios tipos de filamentos de protenas visveis ao microscpio eletrnico que cruzam a clula eucaritica formando uma rede tridimensional interligada em todo o citoplasma. uma estrutura altamente dinmica que se reorganiza continuamente sempre que a clula altera a forma, se divide ou responde ao seu ambiente. Ele poderia ser chamado de "citomusculatura", pois responsvel por movimentos como deslocamento de clulas sobre um substrato e contrao muscular; fornecendo tambm maquinaria necessria para movimentos intracelulares, como o transporte de organelas de um lugar a outro no citoplasma e a segregao dos cromossomos na mitose. O citoesqueleto est ausente nas bactrias e ele pode ter sido um fator crucial na evoluo das clulas eucariticas. Suas diferentes atividades dependem de trs tipos de filamentos proticos: filamentos de actina, microtbulos e filamentos intermedirios que fornecem estrutura, organizao e forma celular. Cada um dos tipos do componente do citoesqueleto composto por subunidades proticas simples que se polimerizam para formar filamentos de espessura uniforme. Esses filamentos no so estruturas permanentes, pois sofrem constantes desmontagens em suas subunidades monomricas e remontagens em filamentos. Sua localizao na clula no rigidamente fixa e pode alterar-se com a mitose, citocinese ou alteraes na forma da clula. Todos os tipos de filamentos se associam com outras protenas que interligam filamentos entre si ou a outros, influenciam na montagem e desmontagem ou movem organelas citoplasmticas ao longo dos filamentos. Particularmente, os filamentos de actina e microtbulos so os principais produtores da movimentao das organelas e de toda a clula. A actina e miosina so duas protenas geradoras de foras. A tropomiosina e troponina C ( que ocorrem no msculo) tm funo reguladora. A a actinina participa das interaes entre o filamentos de actina e a membrana celular, porm existem outras protenas fixadoras de actina que podem formar ligaes transversais com filamentos de actina.

Filamentos de actina tendem a formar feixes paralelos com regio em que a clula contata com um substrato slido (isto pode ser visto quando a clula se distende). Esses feixes so chamados de fibras de tenso ou estresse. 2 - Organizao Estrutural dos Elementos do Citoesqueleto 2.1 Microtbulos Os microtbulos so estruturas presentes no citoplasma de todas as clulas eucariontes. As primeiras observaes dessas estruturas foram realizadas por De Robertis e Franchi em 1953, no axoplasma de fibras nervosas. Devido ao fato de que a maioria dos microtbulos so muito lbeis e no resistentes ao efeito de muitos fixadores, s a partir de 1963, com a introduo do glutaldedo com fixao para a microscopia eletrnica, a sua presena pode ser identificada. Os microtbulos citoplasmticos apresentam dimenses uniformes por volta de 25 nm de dimetro externo e vrios micrmeros de comprimento e so notavelmente retilneos. Em corte transversal apresentam uma parede densa de aproximadamente de 6 nm de espessura, e uma regio central mais clara. A parede do microtbulo est constituda por estruturas filamentosas, lineares ou em espiral, que apresentam um dimetro aproximado de 5 nm. Em corte transversal observam-se geralmente 13 filamentos, separados por uma distncia de 4,5 nm de centro a centro. Os microtbulos so compostos por unidades proticas bastante semelhantes, mesmo quando diferentes tipos celulares so analisados. O termo tubulina utilizado para designar a principal protena dos clios, flagelos e microtbulos citoplasmticos. A tubulina um dmero de 110.000 a 120.000 daltons. Na maioria dos casos, podem ser identificados dois monmeros de tipos diferentes de tubulina, as a e tubulinas embora apresentem pesos semelhantes. O espao de 8 nm que se observa ao longo do eixo longitudinal do microtbulos reflete provavelmente o pareamento dos dois tipos de monmeros de tubulina. Cada dmero de tubulina pode-se ligar a uma molcula de cochicina, propriedade esta que permite fazer a determinao da protena tubulina. A montagem dos microtbulos a partir dos dmeros de tubulina um processo especificamente orientado e programado. A quantidade de tubulina a ser polimerizada varia conforme as necessidades da clula. Em condies normais, os microtbulos se encontram em equilbrio com a quantidade de tubulina livre. A polimerizao dos microtbulos favorecida por uma proteinoquinase dependente de AMP cclico que promove a fosforilao dos monmeros de tubulina. A montagem de monmeros de tubulina um fenmeno polarizado, isto , dmeros se unem a um dos extremos dos microtbulos enquanto se desprendem um do outro. Quando a colchicina se fixa a tubulina, o processo de montagem inibido, porm a desmontagem ou despolimerizao continua ocorrendo. Deste modo, eventualmente, os microtbulos

podem ser completamente despolimerizados. A vimblastina, atua despolimerizando os microtbulos j formados e, numa segunda etapa, agrega as subunidades de tubulina formando estruturas paracristalinas. Os microtbulos so polmeros rgidos formados por molculas de tubulina. Eles se organizam pela adio, s suas extremidades livres, de molculas de tubulina contendo GTP, sendo que uma das extremidades (extremidades "mais") cresce mais rapidamente do que a outra. A hidrlise do GTP em GDP acontece depois da ligao da tubulina e enfraquece as pontes que mantm os microtbulos unidos. Os microtbulos de crescimento lento, so instveis e sujeitos a desagregao "catastrfica", pela colchicina, mas, podem ser estabilizados por associao com outras estruturas que bloqueiam suas duas extremidades. Os centros organizadores de microtbulos, tais como os centrossomos, protegem as extremidades "menos" e iniciam continuamente a formao de novos microtbulos, que crescem em direes aleatrias. Qualquer microtbulo que, casualmente, encontrar uma estrutura que estabilize sua extremidade livre ser seletivamente mantido, enquanto os demais despolimerizaro. Este processo seletivo determinaria a posio dos conjuntos de microtbulos numa clula. A falta de GDP detm a agregao da tubulina. Em situao in vivo, a polimerizao da tubulina est regulada pela clcio e pela protena fixadora de clcio, a calmodulina. Quando ambos formam um agregado, a polimerizao inibida. As subunidades de tubulina nos microtbulos (tubulinas alfa e beta) seletivamente estabilizados , so modificadas por acetilao e detirosinao. Estas alteraes marcariam os microtbulos como "maduros" e produziriam stios para a ligao de protenas especficas associadas a microtbulos (MAPs), que promovem uma estabilizao adicional contra a desagregao. As protenas motoras constituem uma classe importante de MAPs que usam a energia da hidrlise do ATP para se mover unidirecionalmente ao longo dos microtbulos, deslocando um carregamento especfico . Em geral, as dinenas movem o seu carregamento em direo da extremidades "mais", enquanto a maioria das quinesinas se movem com o carregamento em direo da extremidade "menos". Tais protenas motoras so responsveis, em grande parte, pela organizao espacial e pelos movimentos direcionados das organelas no citoplasma. Na clula, existem stios de organizao, tais como o centrolo e os corpsculos basais dos clios, a partir dos quais o processo de polimerizao de certa maneira orientado. Freqentemente os microtbulos se dispem radialmente a partir do ncleo da clula e aparecem como filamentos retos ou curvos que parecem terminar perto da superfcie celular. Esses filamentos desaparecem aps o tratamento com Colcemid (um derivado da colchicina) ou por esfriamento, reaparecendo se situao revertida. Estas observaes demonstraram que os microtbulos se originam das proximidades dos ncleos, a partir de um dos pontos focais correspondentes regio do cromossoma (ou seja, que contm o centrolo) ou centrosfera. Muitos dessas

observaes sugeriram que a centrosfera o principal centro organizador dos microtbulos. Nas clulas prestes a entrar em mitose, os microtbulos citoplasmticos desaparecem e so substitudos por aqueles que integram o fuso e os steres. Em clulas transformadas por um vrus ou por certas substncias qumicas, os microtbulos esto desorganizados e s vezes desaparecem por completo. A participao dos microtbulos no citoesqueleto foi bem estudada, tomando-se como modelo os heliozorios. Estes protozorios so envoltos por expanses muito finas do citoplasma, os axonemas, que se dispem radialmente na clula. Nas micrografias eletrnicas, observavam-se que os axonemas contm numerosos microtbulos, dispostos ordenadamente em espiral. Interessante que, submetendo-se esses protozorios ao da uria, os axonemas entram em colapso e se retraem. Retirando a uria do meio, os axonemas regeneram-se em menos de meia hora. O estudo deste fenmeno com o microscpio eletrnico mostrou que, durante o colapso dos axonemas, ocorre uma despolimerizao dos microtbulos, com acmulo das molculas globosas de tubulina no citoplasma. Com a retirada da uria ocorre a repolimerizao dos microtbulos e o reaparecimento dos axonemas. As funes dos microtbulos so as seguintes: Funo Mecnica: Tem-se relacionado a forma de algumas protuberncias ou prolongamentos celulares com a orientao e distribuio dos microtbulos. Os microtbulos so considerados como uma armao que determina a forma e distribuio dos constituintes da clula. A integridade dos microtbulos necessria para manter a forma caracterstica de muitas clulas e a rigidez das estruturas mais amplas. Como exemplo de tais tipos de estruturas temos os axnios e os dendritos dos neurnios. Morfognese: O papel que os microtbulos desempenham na aquisio da forma durante a diferenciao celular est relacionado com a sua funo mecnica. Um exemplo interessante proporcionado pelas mudanas morfogenticas que ocorrem durante a espermiognese. O aumento do ncleo da espermtide ocorre simultaneamente com a produo de um conjunto ordenado de microtbulos que se dispe em torno do mesmo. Polarizao e motilidade celulares: A determinao da polaridade intrnseca de certas clulas tambm est relacionada com a funo mecnica dos microtbulos. O tratamento com Colcemid determina mudanas na motilidade. Quando algum tipo de movimento persiste, o deslocamento direcionado da clula substitudo, por exemplo, por um movimento ao acaso. Circulao e transporte: Os microtbulos podem intervir tambm no transporte de macromolculas no interior da clula. provvel que para tal finalidade formem "canais" no citoplasma. Um exemplo da correlao entre os microtbulos e o transporte de partculas fornecido pelo melancito, no qual se observa o movimento

dos grnulos de melanina entre os canais criados, na matriz citoplasmtica, pelos microtbulos. Transudao sensorial: Nos receptores sensoriais encontram-se com freqncia conjuntos de microtbulos organizados de maneira bastante regular. Postula-se sua possvel funo na transudao de energia. 2.2 Microfilamentos Os microfilamentos so estruturas delgadas formados por duas cadeias em espiral de monmeros globosos da protena actina G (lembrando dois colares de prolas enroladas) que se associam formando uma estrutura quaternria fibrosa (actina F). Observados ao Microscpio Eletrnico, mostram-se como estruturas finas de 6 a 8 nm de dimetro. Subunidades individuais de actina se polimerizam para formar filamentos de actina. A protena filamina segura dois microfilamentos quando eles se cruzam em ngulo reto. Os filamentos so unidos atravs de ligaes cruzadas por uma outra protena, a fodrina, formando agregados ou feixes lado-a-lado. Os microfilamentos de actina so muito abundantes em clulas musculares e tambm existem em plantas (apesar da ausncia de msculos). A actina constitui 5 a 30% de todas as protenas do citoplasma. Diferentes estudos tm sugerido que esses filamentos representem sistemas contrteis. Este conceito tem sido confirmado pela demonstrao de que as protenas contrteis do msculo (actina e miosina) se encontram amplamente distribudas na maioria das clulas. Abaixo da membrana plasmtica h feixes de filamentos constitudos por actina, os quais esto em continuidade com um retculo de filamentos semelhantes que atravessam o citosol. Os canais ou espaos criados nesse retculo ou trama trabecular so de 50 a 100 nm e, na clula viva, permitem a difuso de lquidos e metablitos por todo o citosol. Os filamentos dessa trama se encontram em contato com as vesculas do retculo endoplasmtico, com microtbulos e com polissomas, os quais parecem estar todos contidos e sustentados por essa trama. O fato de que essa trama pode ser armada e desarmada facilitaria tambm pequenos movimentos das organelas contidas no citoesqueleto. A exemplo dos microtbulos, que so despolimerizados pela colchicina, os microfilamentos so despolimerizados pela citocolasina B. Tem sido demostrado que essa droga inibe diversas atividades celulares onde participam alguns tipos de microfilamentos, por exemplo, a contrao do msculo liso, a migrao celular, a endocitose, a exocitose e outros processos, destruindo a organizao regular dos microfilamentos associados com algumas dessas funes. Essa inibio pode ser tanto pela destruio quanto pela estabilizao de microfilamentos, mostrando que o dinamismo entre os monmeros de actina dos microfilamentos e os do pool citoplasmtico essencial para seu funcionamento. Sem dvida, nem todos os

microfilamentos so sensveis a citocolasina B. Conclui-se que os filamentos sensveis a citocolasina B constituem a maquinaria contrtil das clulas no musculares. No msculo estriado os microfilamentos de actina reagem com os filamentos de miosina promovendo a contrao muscular. Nesse tipo de msculo, os filamentos de actina e os de miosina apresentam um grau muito elevado de organizao espacial. Nas clulas musculares lisas encontradas, por exemplo, no tubo digestivo , nos vasos sangneos, no tero, etc, a contrao tambm se deve interao actina-miosina. Os microfilamentos de actina so muito abundantes nos msculos e so encontrados, embora em menor nmero, no citoplasma de todas as clulas mas filamentos longos de miosina s foram encontrados nas clulas musculares estriadas. Nas clulas musculares lisas e nos demais tipos celulares, a miosina est presente como filamentos curtos ou bastonetes finos que, em cooperao com o microfilamento de actina so responsveis pela contrao. Portanto, a contrao celular tem como base a interao actina- miosina. Nas clulas musculares estriadas, que so especializadas para contrao rpida e forte, a organizao das duas protenas (actina-miosina) atinge um grau muito elevado, o que no acontece e nem necessrio para outras clulas. Muitos movimentos celulares como a citocinese (diviso citoplasmtica), a endocitose, fenmenos como o fenmeno do capuz, a fuso celular e a mobilizao dos receptores requerem a interao dos microfilamentos com a membrana celular. Essa interao se estabelece atravs de ligaes estveis como o ATP e por 5 protenas especiais, como a vinculina. Alguns distrbios nas clulas podem provocar a fosforilao da vinculina contribuindo para a desorganizao do citoesqueleto unido membrana celular. As desorganizaes do microfilamento alteram a forma da clula. 2.3 - Filamentos Intermedirios Os filamentos intermedirios so polmeros fortes parecidos a cabos e so constitudos de polipeptdios fibrosos resistentes ao estiramento, desempenhando um papel estrutural na clula. Sua principal funo a de resistir tenso mecnica, ou seja, proporcionar estabilidade mecnica s clulas. So chamados de "intermedirios" porque seu dimetro aparente (10 nm de espessura) est entre o dos filamentos de actina e o dos filamentos de miosina; sendo seu dimetro tambm intermedirio ao dos filamentos de actina e dos microtbulos . Esses filamentos intermedirios so muito heterogneos quando se consideram suas propriedades bioqumicas, porm, quanto morfologia e localizao, possvel agruplos em apenas 4 tipos principais. Os filamentos intermedirios formam retculos que interconectam o ncleo superfcie celular. Inserem-se no envoltrio nuclear formando uma espcie de rede ao redor do ncleo, irradiando-se pelo citoplasma. Todos os filamentos intermedirios so constitudos pela agregao de molculas alongadas, cada uma formada por 3 cadeias polipeptdicas enroladas em hlice.

A presena dos filamentos intermedirios se d em grande nmero no epitlio ligando as clulas entre si por junes especializadas, nas clulas nervosas ao longo do comprimento dos axnios e em todos os tipos de clulas musculares. Os tipos de filamentos intermedirios so: Filamentos de queratina: So encontrados exclusivamente em clulas epiteliais e estruturas derivadas como plos, unhas e chifres. Denominados tambm de tonofilamentos, filamentos de pr- queratina ou de citoqueratina constituem a classe mais complexa de filamentos intermedirios. Esses filamentos so ancorados superfcie da clula onde tendem a convergir sobre os desmossomas. As citoqueratinas de mamferos so protenas alfa fibrosas que so sintetizadas nas camadas vivas da epiderme e formam a maior parte da camada morta de extrato crneo. Neurofilamentos: Junto com os microtbulos so os principais elementos estruturais dos axnios, dos dendritos e do pericrio dos neurnios. Contm 3 polipeptdeos e so muito sensveis presena do clcio. Formam um emaranhado tridimensional que faz do axoplasma um gel altamente estruturado. Filamentos Gliais: Encontram-se dispersos no citoplasma dos astcitos por uma protena que apresenta propriedades muito cidas. A glia (ou neurglia) encontrada no tecido nervoso do sistema nervos central e constituda por alguns tipos celulares, todos com ramificaes. Filamentos Heterogneos: Incluem-se os filamentos intermedirios de morfologia e localizaes similares, porm que contm diferentes protenas. Como a Desmina, a Vimentina e a Sinemina (peso molecular 55000) so as mais freqentes, encontrados nos fibroblastos e em todas as clulas de origem mesenquimal. Por meio de imunofluorescncia possvel observar que apresentam uma disposio ondulada (vimentus-ondeado). Os filamentos de DESMINA (peso molecular 55000) so encontrados nas clulas musculares lisas e nas linhas Z e M das clulas estriadas que constituem os msculos esquelticos e a musculatura cardaca. As micrografias tm mostrado que os filamentos intermedirios podem ligar-se aos microtbulos atravs de pontes delgadas de um material ainda desconhecido. Isto particularmente evidente em certos prolongamentos (axnio) das clulas nervosas. Esta associao tambm foi demonstrada por imunocitoqumica. A dissoluo dos microtbulos de fibroblastos por meio de colchicina modifica a posio dos filamentos de vimentina. Enquanto os microtbulos esto intactos, os filamentos de vimentina percorrem todo o citoplasma, mas aps a desmontagem dos microtbulos pela colchicina, os filamentos de vimentina, aglutinam-se em volta do ncleo de fibroblasto. Os monmeros de vrios tipos de filamentos intermedirios diferem na seqncia de aminocidos e possuem pesos moleculares muito diferentes. Porm, todos possuem um domnio central homlogo, na forma de um basto, que apresenta uma estrutura

estendida e enrolada quando a protena forma dmero. Dois dmeros se associam entre si e formam um tetrmero simtrico, organizando-se em grandes conjuntos sobrepostos formando filamentos intermedirios no polimerizado. Os Domnios em forma de basto das subunidades constituem a estrutura central do filamento intermedirio, enquanto os domnios de ambas as extremidades projetam-se para fora. Uma funo dos domnios terminais variveis pode se permitir que cada tipo de filamento se associe com outros componentes especficos, a fim de posicion-lo de forma adequada para cada tipo de clula. 3 - Estruturas Compostas por Microtbulos Vrias estruturas celulares derivam de grupos especiais de microtbulos. Alguns deles, com steres do fuso, constituem organelas transitrias que surgem e desaparecem de acordo com os ciclos mitticos e meiticos. Outros, tais como os clios e flagelos, corpos (ou corpsculos) basais e centrolo, so do tipo mais permanente. 3.1 -O aparelho mittico O ster aparece como um grupo de microtbulos radiais que convergem para o centrolo, em volta do qual se observa freqentemente uma zona clara denominada de microcentro ou centrossoma. Pouco se sabe da funo dos steres, alm de que nas clulas animais geralmente o fuso se forma entre eles, durante a mitose. O fuso tambm composto por microtbulos, podendo ser convenientemente estudado atravs da microscopia eletrnica. (O fato de que tanto os microtbulos das ster como os do fuso apresentam uma propriedade fsica denominada birrefringncia positiva permite observ-los ao microscpio de polarizao e de interferncia, em clulas vivas). Tem-se reconhecido dois tipos de aparelho mittico; um que depende da presena de steres (fuso astral) e outro que independem desses (fuso anastral). Nas clulas vegetais no se encontram nem centrolos nem steres. Nestas clulas, a formao dos microtbulos no est relacionada com os plos, mas sim com os cinetcoros, que so regies especiais dos centrmeros dos cromossomas. Estudos imunocitoqumicos tm mostrado que os centrolos, o fuso e o cinetocoros contm tubulina, sugerindo que estas estruturas podem ser intermedirias na montagem da tubulina em microtbulos. Inicialmente, as fibras do fuso foram dividas em 3 tipos: cromossmicas, que unem os cromossomas aos plos; contnuas, que se estendem de plo a plo; interzonais, que so observadas na anfase e na telfase entre os cromossomas filhos. Entretanto, a microscopia eletrnica demonstrou a existncia de outros tipos: microtbulos cinetocricos, que como o nome indica, se originam nessa regio dos cromossomas; microtbulos polares, que se originam nos plos; e microtbulos livres. Estudos quantitativos excluram a existncia das chamadas fibras contnuas, uma vez que geralmente os microtbulos no se estendem de um plo ao outro.

Um dos aspectos que mais chamam a ateno no fuso a facilidade com que se arma e desarma, tanto "in vivo" como em respostas a tratamentos diversos, pois normalmente a clula contm um gene "pool") de monmeros de tubulina que se encontram em uma espcie de equilbrio dinmico com microtbulos polimerizados. Durante a mitose , tambm produzido um ciclo de polimerizao e despolimerizao tanto nos microtbulos citoplasmticos quanto naqueles incorporados ao fuso. Acredita-se que a concentrao intracelular de clcio tenha um importante papel nesse ciclo. Recentemente estabeleceu-se uma relao entre a funo desse on e uma protena de baixo peso molecular, fixadora de clcio. 3.2 - Clios e Flagelos Os clios so estruturas com aspecto de pequenos plos com 0,25 micrmeros de dimetros constitudos por um feixe de microtbulos dispostos paralelamente e envoltos por uma membrana. Os clios so curtos, mltiplos. Estendem-se a partir da superfcie de muitos tipos de clulas e so encontrados na maioria das espcies animais, em muitos protozorios e em algumas plantas inferiores. Tm como funo primria a de movimentar fluido sobre a superfcie celular ou deslocar clulas isoladas atravs de um fluido. Os flagelos dos espermatozides de muitos protozorios possuem grande semelhana com clios, porm muito mais longos. Os flagelos so geralmente nicos e bem longos. No corpo humano esto situados apenas nos espematozides. Na cauda do espermatozides j foram verificadas mais de 200 tipos de protenas. Os corpsculos basais se reproduzem por mecanismo pouco conhecido. Estes processos em geral iniciam-se por aglomerao de substncias eletrondensas, o material pericentriolar, que podem ocorrer perto de centrolos preexistentes ou, ento, livre no citoplasma, independentemente de centrolos. O movimento de um clio ou de um flagelo produzido pela curvatura de seu ncleo chamado axonema. O axonema composto por microtbulos e suas protenas associadas. Tanto clios como flagelos so feixes de microtbulos. Os microtbulos esto dispostos nesta forma: nove microtbulos duplos especiais formam um anel ao redor de um par de microtbulos simples. Este arranjo caracterstico de quase todas as formas de clios e flagelos eucariticos desde protozorios at humanos. Enquanto o par central formado por microtbulos completos e separados; os pares externos ou perifricos so compostos por um microtbulo completo e outro parcial, mantidos unidos . Descrevem-se ainda , nos clios e flagelos , pequenos braos que partem de um dos microtbulos dos pares perifricos ligando-se aos pares vizinhos: so formados por uma protena , a nexina. Alm desta estrutura , descrevem-se pequenas pontes que unem-se aos pares de microtbulos perifricos. Sabe-se que os pequenos braos so constitudos por uma protena de pequena atividade ATPsica chamada dinena. Uma

srie de experincias realizadas com flagelos isolados de cauda de espermatozide demonstraram que os pares de microtbulos deslizam entre si durante a contrao e que a fora motriz para este movimento deriva da interao dos braos de dinena com microtbulos vizinhos. A dinena uma molcula grande (400.000 dltons). Ela estabelece contato com a tubulina dos microtbulos vizinhos e gera fora da mesma intensidade que a miosina com a actina. Essas foras promovem movimentos de deslizamento entre pares de microtbulos vizinhos, provocando o deslizamento de um par em relao ao outro. Este deslizamento limitado por protenas que prendem os pares de microtbulos aos outros. O resultado da ao destas foras contidas leva a um dobramento dos clios. Portanto a dinena que dirige os movimentos dos clios e flagelos em clulas no musculares. Vrias observaes sugerem que o ATP fornece energia para o movimento ciliar e flagelar. Por exemplo, a queda do teor de ATP nos espermatozides diminui sua motilidade: a adio de ATP a clulas ciliadas e flagelos isolados e previamente tratados por detergentes ( para remover a membrana e facilitar a entrada de ATP) promove rigorosos movimentos dos clios e flagelos. Nas clulas do epitlio ciliado, as mitocndrias dispem-se principalmente no plo apical, em situao ideal para fornecer aos clios ATP por elas induzido. Fenmeno anlogo ocorre nos espermatozides dos mamferos, cujos flagelo envoltos por uma espiral de mitocndrias na sua poro inicial. Os clios e flagelos so estruturas complexas constitudas por mais de 30 protenas diferentes, vrias das quais so imprescindveis para a sua movimentao. Recentemente , estudando os flagelos de pessoas estreis, verificou-se que a doena de Manes-Kartagener descrita h vrias dcadas e caracterizada por esterilidade e infeco respiratria crnica causada pela ausncia de braos de dinena nos clios e flagelos, o que impede a sua movimentao impossibilitando o movimento de espermatozides e o batimento celular responsveis pela eliminao contnua de poeiras que penetram na rvore respiratria. Recentemente, foram descritas outras doenas de sintomatologia semelhante, causadas pela ausncia de outras protenas dos clios e flagelos que tambm participam de sua movimentao, criando assim um complexo de enfermidades: sndrome dos clios imveis. Os flagelos e clios crescem a partir de corpsculos basais ou cinetossomas semelhantes aos centrolos que possuem nove grupos de trs microtbulos fundidos em tripletes e formam a parede do mesmo. Durante a formao ou regenerao de um clio cada par de microtbulos do axonema se forma a partir de dois dos microtbulos do triplete do corpsculo basal. Freqentemente os corpsculos basais apresentam prolongamentos de estriaes transversais que se dirigem para o centro do citoplasma, formando as chamadas razes dos clios, que teriam a funo de sustentar e ancorar os clios na clula.

3.3 - Centrolos e Corpsculos Basais Os centrolos so estruturas cilndricas que medem 0,2 mm x 0,5 mm, podendo alcanar at 2 mm no eixo longitudinal. Apresentam as extremidades abertas, a menos que o centrolo carregue um clio. Nesse caso, as duas estruturas se encontram separadas por uma placa ciliar. A parede do centrolo possui 9 grupos de microtbulos dispostos em crculo. Cada grupo formado por um conjunto de 3 microtbulos (em vez de 2 observados nos clios), os quais esto inclinados em direo ao centro. Os tbulos so designados como subfibrilas A, B e C, a partir do centro para a periferia. Tanto a subfibrila A como a B atravessam a placa ciliar e se continuam como as subfibrilas correspondentes do axonema; a subfibrila C termina prximo da placa ciliar. Nos centrolos no existem microtbulos centrais nem braos especiais. Os centrolos se apresentam nas clulas em par. Os centrolos-irmos deste par dispem-se perpendicularmente entre si e um par j duplicado de cada centrolo (consistindo em um centrolo recm-formado e o seu genitor, se acha em cada plo do fuso da metfase. Os dois membros de cada par vo se separar no perodo da intrfase subseqente. O centrolo cresce a partir do extremo distal e, no caso dos cinetossomas (corpsculos basais), os clios se formam a partir desta extremidade. Os procentrolos, que se formam em ngulo reto em relao ao centrolo, esto localizados perto da extremidade proximal. Existem atualmente vrios indcios de que os centrolos poderiam se originar por diferentes mecanismos. Os centrolos destinados a formar fusos mitticos se originam diretamente da parede do centrolo preexistente. Os centrolos filhos aparecem primeiro sob a forma de estruturas anulares (procentrolos) que crescem at se converter em cilindros. Os grupos de 3 tbulos originam-se em grupos simples ou duplos que aparecem primeiro na base do procentrolo. Quando atingem metade do seu crescimento, os centrolos filhos so liberados no citoplasma, onde se completa a sua maturao. O outro mecanismo de formao do centrolo d origem aos centrolos que so destinados a se transformar em corpsculos basais, como no caso do epitlio ciliado. Essas estruturas se organizam progressivamente a partir de um material fibrogranular precursor localizado no citoplasma apical. Os cinetossomas recm formados se aliam em fileiras abaixo da membrana celular, e cada um deles pode ento produzir satlites ao seu lado, uma raiz a partir da base e um clio a partir do pice. O desenvolvimento do clio comea com o surgimento de uma vescula que adere ao extremo distal do cinetossoma. Ao crescer, o corpo do clio empurra para fora a parede da vescula, a qual se constitui em uma bainha ciliar temporria at que se forme a permanente.

4 - Papis Funcionais em Clulas No-Musculares A base molecular da contrao nos sistemas no-musculares se encontra ainda no terreno das hipteses, porm o modelo que est se desenvolvendo , de certa maneira, semelhante ao do msculo, uma vez que se baseia na interao dos filamentos de actina e miosina, como conseqente produo de uma fora de deslocamento. O sistema de contrao em clulas no-musculares muito lento quando comparado as clulas musculares. Provavelmente isto ocorre porque as protenas que constituem o sistema nomuscular apresentam uma distribuio mais ao acaso e tambm por possurem uma concentrao muito menor de miosina. Para que possa ocorrer vrios dos movimentos das clulas no-musculares (extenso e troca na forma das clulas, locomoo, formao de pseudpodes) a superfcie celular e o sistema contrtil devem estar intimamente acoplados. Esse acoplamento poderia ser estabelecido pelas molculas de alfa actina que ligam a actina membrana celular . Diferente dos msculos que possuem os filamentos de actina estveis, a maioria das clulas no-musculares contm filamentos ou estruturas transitrias que podem aparecer e desaparecer em menos de um minuto. Portanto deve haver um mecanismo que controla a montagem e desmontagem dos monmeros de actina e a formao de fibras de tenso. Alguns exemplos dessas estruturas transitrias podem ser: o anel contrtil, um feixe de filamentos de actina e de filamentos de miosina II em forma de cinturo. Este anel aparece sob a membrana plasmtica durante a fase M do ciclo celular; foras geradas por ele buscam a membrana para dentro e assim contraem a parte mediana da clula, levando a separao de duas clulas filhas, num processo conhecido como citocinese. Outro exemplo de estruturas contrteis temporrias dos filamentos de actina e miosina II so as fibras tensionais, componentes importantes do citoesqueleto de fibroblastos. Mas nem todas as estruturas contrteis de filamentos de actina e miosina encontradas nas clulas no-musculares so transitrias. Aquelas associadas com junes intercelulares chamadas cintures de adeso, por exemplo, so freqentemente mais duradouras. Os cintures de adeso so encontrados prximos superfcie apical de clulas epiteliais. Entre suas funes parecem ter um papel importante no dobramento das camadas epiteliais durante a embriognese. Protenas fixadoras de actina: So protenas que possuem interao com as protenas de actina. Baseando-se em sua possvel funo, pode-se classificar essas protenas em: (A) aquelas que tendem a produzir unies transversais, favorecendo a formao de gis (gelificao); (B) aquelas que produzem o efeito oposto (solao), ou seja a diminuio da viscosidade, fragmentando os filamentos de actina e formando um capuz "cap", e (C) aquelas que tendem a estabilizar a actina em sua formao monomrica (actina G) e que tambm levam formao do estado sol.

A calmodulina uma protena com afinidade para o on Ca? e quando forma um complexo com o mesmo (complexo calmodulina) ativa a cinase da cadeia leve da miosina, enzima que catalisa a fosforilao da miosina. Em conseqncia muda a conformao das cabeas de miosina, resultando no deslizamento dos microfilamentos de actina adjacentes, causando a contrao nas clulas no-musculares. Existem basicamente 2 tipos de motilidade celular, nos quais ocorrem com a participao dos microfilamentos e as interaes entre a actina e miosina. A ciclose um tipo de movimento das clulas no-musculares. Esse tipo de movimento caracterizado pela gerao de correntes citoplasmticas provocadas por ao de microfilamentos e que atravs dessas correntes contnuas deslocam grnulos citoplasmticos. A corrente citoplasmtica ou ciclose pode ser facilmente observada em clulas vegetais. Nestas clulas, em geral, o citoplasma est circunscrito a uma capa prxima parede celulsica e as finas trabculas que atravessam o grande vacolo central e possvel observar-se correntes contnuas que deslocam os cloroplastos e outros grnulos citoplasmticos. O experimento clssico sobre ciclose foi realizado em grandes clulas cilndricas de Niella, as quais possuem uma capa protoplasmtica delgada rodeando o vacolo central. Esta capa protoplasmtica est subdividida em uma regio cortical de citoplasma estruturado, no qual esto includos cloroplastos imveis, e uma capa isolada de citoplasma (endoplasma) onde a ciclose ocorre. O conjunto est rodeado pela membrana celular, abaixo da qual se observa uma faixa nica de microtbulos. Na regio cortical, abaixo dos cloroplastos, existem feixes de filamentos de actina cuja direo paralela direo da ciclose. Acredita-se que a fora impulsora inserida dada pelo mecanismo de interao de actina - miosina que ocorreria na regio de limite entre o citoplasma esttico e o endoplasma mvel. O movimento amebide um outro tipo de sistema de contrao das clulas nomusculares. Este tipo de movimento est presente nos protozorios (amebas) e em clulas animais (leuccitos, fibroblastos, macrfagos). Ele se realiza atravs da extenso, pela clula, de prolongamento da camada cortical do citoplasma muito rica em actina. Esse prolongamento denominado pseudpodos, e, ao se fixar num substrato, parece puxar o resto da clula em sua direo. Embora esta forma de locomoo possa ser melhor observada na amebas, tambm existem muitos outros tipos celulares, como, por exemplo, nos leuccitos. Em um cultivo formado por uma monocamada de clulas observa-se, s vezes, um tipo de movimento amebide ruffling (folho, pregueado). Este movimento feito atravs da emisso de prolongamentos da superfcie, que estabelece contato intermitente com a superfcie no vidro. Por meio da aderncia e separao alternadas deste prolongamento pregueado, a clula consegue deslocar-se sobre uma superfcie de suporte e movimentarse ativamente at a zona de migrao do cultivo.

Acredita-se geralmente que os microfilamentos participem no movimento amebide. Tm sido observados, em amebas, filamentos de actina e de miosina mais espessos, e parece no haver dvidas de que a interao actina-miosina proporciona a fora motora. Entretanto, as opinies esto divididas no que se refere ao local mais provvel da contrao. Enquanto que alguns pesquisadores consideram a regio posterior da ameba que avana como a mais ativa, outros do maior importncia maior extremidade anterior. As microvilosidades so projees digitiformes encontradas na superfcie de muitas clulas animais. So particularmente abundantes em algumas clulas epiteliais que necessitam de uma grande rea de superfcie para desempenhar eficientemente suas funes. O estudo destas microvilosidades por microscopia eletrnica revelou a presena de actina, miosina e alfa-actina, protenas relacionadas com a contrao, mas que nas microvilosidades possuem a funo de sustentao da forma alongada das microvilosidades. Esto presentes 40 microfilamentos de actina no interior das microvilosidades. Estes microfilamentos se prendem em espessamentos que ocorrem nas extremidades dos microvilos e que se ligam entre si e com a membrana plasmtica por meio de vrias protenas. As clulas ciliares presentes no organismo humano (na rvore respiratria e trompa uterina) encontram-se associadas a clulas que secretam muco e tm como conseqncia o transporte unidirecional de uma camada delgada de muco que reveste a superfcie interna destas estruturas. Desta maneira a poeira que atinge a rvore respiratria captada pelo muco e transportada para a cavidade bucal, enquanto que na trompa ocorre um fluxo de muco para o tero, o que facilita o transporte dos vulos. J nos espermatozides seu movimento flagelar ocorre por um abalo tipo vaivm devido a uma contrao na sua base que se transmite ao longo de sua extenso em uma regio rica em mitocndrias, perto do ncleo do espermatozide. A atividade do flagelo movimenta o espermatozide para frente. Como j foi estudado na parte 3.2 Clios e Flagelos, estes tem grande participao nos processos de movimentao de clulas no-musculares. Existe tambm microtbulos no s nos clios e flagelos mas tambm no citoplasma. Os microtbulos citoplasmticos se encontram em constante reorganizao, crescendo em ema parte graas a polimerizao local dos dmeros de tubulina (parte "mais") e diminuindo em outra graas a despolimerizao da tubulina (parte "menos"). As principais funes desses microtbulos so: processos de mudana de forma celular, transporte intra-citoplasmtico de partculas e para os movimentos cromossmicos na mitose. Os microtbulos tambm participam do transporte intracelular de partculas em clulas no-musculares, como no caso do fluxo que ocorre nos axnios e no transporte e

exocitose dos grnulos de secreo nas clulas glandulares. Nestas situaes, os microtbulos no se associam como ocorre nos clios e flagelos, no apresentam os braos de dinena e esta protena substituda por outra chamada cinesina (Fig 3.2.G), que tambm apresenta atividade ATPsica. Na realidade, o funcionamento dos microtbulos extremamente complexo, j que apresentam inmeras protenas que se associam a eles. 5 - Papis Funcionais em Clulas Musculares O tecido muscular responsvel pelos movimentos corporais. constitudo por clulas alongadas caracterizado pela presena de grande quantidade de filamentos citoplasmticos responsveis pela contrao. De acordo com sua classificao morfolgica dividido em msculo liso, msculo estriado esqueltico e estriado cardaco. As clulas musculares so to diferenciadas que seus componentes receberam nomes especiais. A membrana chamada de sarcolema, o citoplasma (preenchido principalmente de fibrilas paralelas - as miofibrilas) recebe o nome de sarcoplasma, o retculo endoplasmtico chamado de retculo sarcoplasmtico, e as mitocndrias recebem o nome de sarcossomas. A clula muscular estriada apresenta um alto grau de especializao para realizar movimentos. Na vida embrionria, as clulas musculares precursoras se fundem formando as fibras musculares estriadas esquelticas, que agrupam-se em feixes cujas extremidades so presas a tendes inseridas nos ossos. Estas fibras contm um feixe de delgadas estruturas cilndricas denominadas miofibrilas. As miofibrilas so cilndricas, apresentam um dimetro de 1 a 2 mm e correm longitudinalmente fibra muscular, preenchendo quase que completamente seu interior. Cada miofibrila apresenta alternadamente bandas I e bandas A. As miofibrilas so formadas por unidades repetidas, denominadas sarcmeros. Cada unidade desta (sarcmero) limitada por duas estrias finas e eletrondensas denominadas estrias Z. O sarcmero constitudo por filamentos de dois tipos. Em um dos tipos os filamentos so finos, dirigem-se medial mente, porm no atingem o centro do sarcmero e so constitudas por actina. No outro tipo os filamentos so grossos, encontram-se no centro do sarcmero e so constitudos por protenas fibrilares chamadas miosina . As miofibrilas do tecido muscular estriado contm basicamente 4 tipos bsicos de protenas: miosina, actina, troponina e tropomiosina. MIOSINA: uma molcula grande tendo forma de basto sendo formada por 2 peptdeos enrolados em hlice. Em uma de suas extremidades a miosina apresenta uma salincia globular ou cabea, que possui locais especficos para combinao com o ATP e dotada de atividade ATPsica. Quando submetida a ligeira protelise, a molcula de miosina pode ser dividida em 2 fragmentos: meromiosina leve e

meromiosina pesada. O fragmento leve corresponde maior parte da poro do basto da molcula, enquanto que a pesada contm a salincia globular (cabea). ACTINA: Apresenta-se sob forma de polmeros longos (actina F) formados por duas cadeias de monmeros globulares (actina G) torcidas uma sobre a outra. Uma caracterstica importante das molculas de actina G a sua assimetria estrutural. Quando elas se polimerizam para formar a actina F, frente a um monmero combinase com a parte posterior do outro produzindo um filamento polarizado. TROPONINA: um complexo por 3 subunidades: TnT, que se liga fortemente a tropomiosina; TnC, que tm grande afinidade para os ons clcio; e TnI, que cobre o stio ativo da actina onde ocorre a interao entre a actina e a miosina. Cada molcula de tropomiosina tem um local especfico onde se prende um complexo (trs subunidades) de tropomiosina. TROPOMIOSINA: uma molcula longa e fina , com cerca de 40 nm de comprimento, contendo duas cadeias polipeptdicas, uma enrolada na outra. As molculas de tropomiosina unem-se umas s outras pelas extremidades, para formar filamentos longos que se localizam ao longo do sulco existente entre os dois filamentos de actina F. O sarcmero em repouso consiste em filamentos finos(actina) e grossos(miosina) que se sobrepem parcialmente. Durante o ciclo de contrao os dois tipos de filamentos conservam seus comprimentos originais. Se a contrao no devido ao encurtamento dos filamentos, deve ser conseqncia de um aumento na zona de sobreposio entre os filamentos. A principal funo desempenhada pelas estruturas do citoesqueleto nas clulas musculares a movimentao celular, que resulta na contrao muscular. A contrao muscular ocorre pelo deslizamento dos filamentos de actina sobre os filamentos de miosina para o interior do sarcmero, isso provoca a aproximao das estrias Z. Comparando-se o msculo contrado com o distendido, nota-se que no contrado os filamentos finos de actina ficam menos visveis graas ao seu eslizamento por entre os filamentos grossos de miosina. A contrao se inicia na faixa A, onde os filamentos finos e grossos se sobrepem. Durante o ciclo de contrao a actina e miosina interagem da seguinte maneira: Durante o repouso, ATP liga-se ATPase das cabeas da miosina. Para atacar a molcula de ATP e liberar energia, a miosina necessita da actina que atua como um cofator. No msculo em repouso a miosina no pode associar-se a actina devido represso do local de ligao do complexo troponina-tropomiosina fixado sobre o filamento de actina F. Todavia, quando h disponibilidade dos ons clcio estes combinam-se com a unidade TnC da troponina. Isto muda a configurao espacial das trs subunidades de troponina e empurra a molcula de tropomiosina mais para dentro do sulco da hlice de actina. Em conseqncia , ficam expostos os locais de ligao dos componentes globulares da actina e esta fica livre para interagir com a cabea da molcula de miosina. A

combinao dos ons clcio com a TnC corresponde fase em que o complexo miosinaATP ativado. Como resultado da ponte entre a cabea da miosina e a subunidade de actina G do filamento fina, o ATP convertido em ADP+P e energia. Esta atividade leva a uma deformao da cabea e de parte do segmento em basto da miosina, aumentando a curvatura da cabea. Como a actina est combinada com a miosina , o movimento da cabea da miosina empurra o filamento da actina, promovendo seu deslizamento sobre o fino filamento de miosina. Embora os filamentos grossos possuam um elevado nmero de cabeas de miosina, em cada momento da contrao apenas um pequeno nmero de cabea alinha-se com os locais de combinao da actina. medida em que as cabeas de miosina movimentam a actina, novos locais para formao das pontes actina- miosina aparecem. No existindo o ATP, o complexo actina-miosina torna-se estvel; isto explica a rigidez muscular muito intensa que ocorre aps a morte (rigor motriz).

Comunicao e sinalizao celular

Do simples para o complexo, molculas organizadas formam as clulas, que unidas formam os tecidos, que unidos formam os rgos, os quais unidos formam os sistemas orgnicos que criam e mantm a vida.

A vida de todos os organismos pluricelulares baseia-se na comunicao e nas interaes entre as clulas que os compem Assim pensando, a vida depende basicamente do bom funcionamento de suas clulas, tanto de forma individual como de forma coletiva. De forma individual as clulas devem ter aparatos que permitam garantir a normalidade estrutural e bioqumica, e de forma coletiva devero se relacionar atravs de sistemas de comunicao e sinalizao. Essa comunicao poder ocorrer por contato direto ou por intermdio de molculas de sinalizao. Comunicao por Contato direto: Junes comunicantes: Permitem a passagem direta de molculas pequenas (<1500Da) entre as clulas tais como os eletrlitos e os 2 mensageiros.

Molculas de aderncia: So glicoprotenas transmembrana que pertencem a cinco grandes famlias: 12345- Molculas ricas em leucina Integrinas Caderinas Selectinas Imunoglobulinas

As molculas de aderncia celular desempenham papis importantes tanto durante o desenvolvimento embrionrio quanto nos fenmenos de reparao tecidual e combates a invases tumorais na vida adulta. Comunicao por Molculas de sinalizao: As molculas de sinalizao de origem celular podem pertencer a vrias famlias de substncias bioqumicas e atuaro como mensageiras entre duas clulas mais ou menos distantes entre si.

Famlias das molculas de sinalizao Neurotransmissores Hormnios e neuro-hormnios Citocinas Imunoglobulinas Eicosanides (derivados do c. aracdnico) Gases (ON, CO) Dentre os diferentes tipos de comunicao celular que envolvem molculas de sinalizao destacam-se: Comunicao endcrina Torna possvel a ligao de clulas distantes atravs de sinais qumicos. As molculas sinalizadoras so os hormnios. Atingem a clula alvo atravs da circulao sangunea.

Comunicao parcrina Comunicao entre clulas vizinhas que no utiliza a circulao. Ex: clulas endoteliais-musculatura lisa vascular, onde o xido ntrico atua como modulador do tnus. Comunicao neurcrina Semelhantemente parcrina, essa comunicao ocorre entre clulas prximas. A diferena existe no tipo de ligao, tendo em vista que a comunicao neurcrina somente liga uma clula nervosa a outra, ou a uma clula muscular. O mecanismo bsico a sinapse (neuro-neuronal ou neuro-muscular). Comunicao autcrina Ocorre quando o sinal age sobre a clula que o emitiu. Muito utilizado com a inteno de amplificar sinais, como a retroalimentao positiva. Pode tambm atuar na retroalimentao negativa, inibindo sua prpria sntese. Vale ressaltar, que h necessidade de que a clula que produz a substncia, tambm possua receptor para a mesma. Comunicao intrcrina Forma especializada de comunicao autcrina. Visa atuao dentro da prpria clula, no chegando a haver exteriorizao do sinal. Faz-se necessrio um receptor intracelular. Comunicao justcrina As molculas sinalizadoras participantes possuem baixo peso molecular, alm das molculas de aderncia. A proximidade no contato entre molculas de aderncia vizinhas na superfcie celular, possibilita a transmisso As trocas de informaes entre as clulas condicionam e regulam o funcionamento dos rgos e determinam a homeostase de todo o organismo. As informaes so transmitidas de clula a clula sob a forma de molculas. De acordo com a natureza qumica das molculas de sinalizao ocorrero respostas celulares diferentes em diferentes locais. As molculas podem ser classificadas em:

Hidrossolveis So pequenas molculas derivadas dos aminocidos, as catecolaminas, ou peptdeos, molculas de grande peso. So os neuro-transmissores ou hormnios. Lipossolveis Molculas de pequeno tamanho, cuja capacidade de difuso atravs da membrana celular as caracteriza. Podem ser derivadas do colesterol (esterides), derivadas de aminocidos (tireideos) ou compostos gasosos (ON e CO). Para que haja resposta a uma determinana molcula sinalizadora a clula dever ter a capacidade de reconhecer a substncia. Este reconhecimento feito atravs dos receptores localizados na membrana celular, no citosol ou no ncleo. Os mecanismos de homeostase envolvem ao de diversos receptores distribudos nos vrios compartimentos orgnicos. Na medida em que voc for aprofundando seus conhecimentos nas diversas sees dessa WebQuest voc ser informado sobre os diferentes receptores envolvidos em respostas que visam o equilbrio e manuteno do ambiente interno, ou seja, a homeostase. Molculas sinalizadoras e seus receptores A - Molculas de sinalizao ativas nos receptores da membrana 1 - Hormnios peptdicos - Hipotalmicos (TRH, CRH, GH-RH, GnRH, etc) - Adeno-hipofisrios (GH, TSH, ACTH, prolactina, LH, FSH) - Neuro-hipofisrios (ADH, ocitocina) - Tireideos (Calcitonina) - Paratormnio (PTH) - Pancreticos (Insulina e glucagon) - Fatores endoteliais (endotelina) 2 - Citocinas 3 - Eicosanides (prostaglandinas e tromboxanos) 4 - Neurotransmissores (norepinefrina, acetilcolina, serotonina, etc) e neuropeptdeos

B - Molculas de sinalizao ativas nos receptores intracelulares (citoslicos e/ou nucleares) 1 - Hormnios esterides - Glicocorticides e mineralocorticides - Sexuais (testosterona, estrognios, progesterona) - Vitamina D 2 - Hormnios tireideos (T3/T4) 3 - CO, ON COMUNICAO CELULAR As clulas em um organismo multicelular, precisam se comunicar umas com as outras de modo a direcionarem e regularem seu crescimento, desenvolvimento e organizao. Clulas animais se comunicam secretando substncias qumicas que sinalizam clulas distantes. Sinais endcrinos ocorrem quando substncias chamadas hormnio so secretadas pelas clulas e viajam atravs da corrente sangunea at clulas-alvo. Na sinalizao parcrina, a clula secreta mediadores qumicos locais que ajem somente em clulas vizinhas. Molculas de sinalizao parcrina so rapidamente internalizadas, destruidas ou imobilizadas. A sinalizao sinptica ocorre quando molculas so liberadas de vesculas em junces neuronais chamadas sinapses. Estas molculas, os neurotransmissores, se difundem atravs da fenda sinptica e vo agir

somente na clula-alvo ps-sinptica. Todas estas substncias qumicas se ligam receptores de dentro ou de fora da clula-alvo iniciando a resposta celular. O mecanismo de recepo varia de acordo com a solubilidade de cada tipo de molcula (endcrina, parcrina ou neurotransmissor) em gua. Molculas hidrofbicas precisam ser carregadas pela corrente sangunea ligadas a protenas transporte e por isso sua meia-vida na corrente sangunea de horas ou dias, ao contrrio de molculas hidroflicas que so degradadas rapidamente. Portanto, molculas de sinalizao que so solveis em gua usualmente medeiam respostas de curta durao, enquanto molculas de sinalizao que no so solveis em gua medeiam respostas bem mais longas. Receptores intracelulares Pequenas molculas hidrofbicas de sinalizao (hormnios esterides e tireoideanos) atravessam a membrana da clula-alvo para se ligarem a receptores intracelulares localizados no citoplasma ou no ncleo desta clula. O complexo hormnio-receptor sofre uma mudana conformacional que leva a um aumento da afinidade do receptor pelo DNA regulando a transcrio de genes especficos, tal ligao, leva ativao ou supreso destes genes. O produto de alguns genes, ainda, podem servir de ativadores de outros genes produzindo um efeito secundrio. Receptores celulares ligados membrana Todas as molculas hidroflicas e as prostaglandinas efetuam sua resposta celular por se ligarem a receptores proteicos especficos localizados na membrana da clula-alvo. Estes receptores se ligam a molculas sinalizadoras com grande afinidade e transduzem o sinal em sinais intracelulares que afetam o desenvolvimento celular. Receptores de membrana no regulam a expresso gnica diretamente. Estes receptors transmitem o sinal atravs da membrana e a resposta da clula-alvo vai depender de molculas secundrias, denominadas segundo mensageiro (ex: cAMP, fosfato de inositol ou clcio). Existem trs tipos de receptores de membrana, baseados no mecanismo de transduo de sinal. Receptores associados a canais: estes so canais de ions involvidos na sinalizao sinptica ( tecido nervoso ou juno neuromuscular).Um transmissor especfico pode rapidamente abrir ou fechar os canais de ions por se ligarem a receptores associados a estes canais, mudando, assim, a permeabilidade da membrana celular a certo on. Receptores catalticos: estes receptores se comportam como enzimas quando ativados por um ligante especfico. A maioria destes receptores apresentam uma regio citoplasmtica cataltica que se comporta como uma tirosina quinase. Uma protenas-alvo fosforilada em resduos especficos de tirosina, mudando, assim, sua conformao (ex: receptor para insulina). Receptores associados a protena-G: quando ligados a um ligante especfico estes receptores, indiretamente, ativam ou inativam uma enzima ou um canal inico ligados a membrana celular, esta interao mediada por uma protena associada a uma molcula de GTP. Protenas-G associadas a receptores iniciam uma cascata de

eventos qumicos dentro da clula-alvo que geralmente altera a concentrao de mensageiros intracelulares como cAMP ou trifosfato de inositol, estes mensageiros intracelulares alteram o comportamento de protenas intracelulares. O efeito destes mensageiros so rapidamente revertidos quando o sinal extracelular removido. MITOCONDRIAS As mitocndrias (do grego mito: filamento e chondrion: grnulo) esto presentes no citoplasma das clulas eucariticas, sendo caracterizadas por uma srie de propriedades morfolgicas, bioqumicas e funcionais.Geralmente, so estruturas cilndricas com aproximadamente 0,5micrmetros de dimetro e vrios micrmetros de comprimento. Uma clula heptica normal pode conter de 1.000 a 1.600 mitocndrias, enquanto alguns ovcitos podem conter at 300.000. Microfilmagens em intervalos de clulas vivas mostram que as mitocndrias so organelas notavelmente mveis e plsticas, mudando constantemente suas formas e mesmo fundindo-se umas com as outras e se separando novamente. Possuem organizao estrutural e composio lipoprotica caractersticas, e contm um grande nmero de enzimas e coenzimas que participam das reaes de transformao da energia celular.

A mitocndria de acordo com a figura acima organizada em: Matriz: a matriz contm uma mistura altamente concentrada de centenas de enzimas, incluindo aquelas necessrias oxidao do piruvato e cidos graxos e para o ciclo de Krebs. A matriz contm tambm vrias cpias do DNA mitocondrial, ribossomos mitocondriais essenciais, RNAt, e vrias enzimas requeridas para expresso dos genes mitocondriais. Membrana Interna: a membrana interna desbobrada em numerosas cristas que aumentam grandemente a sua rea superficial total. Ela contm protenas com trs tipos de funes: 1. aquelas que conduzem as reaes de oxidao da cadeia respiratria 2. um complexo enzimtico chamado ATPsintetase, que produz ATP na matriz 3. protenas transportadoras especficas, que regulam a passagem para dentro e fora da matriz. Uma vez que um gradiente eletroqumico estabelecido, atravs dessa membrana pela cadeia respiratria, para direcionar a ATPsintetase, importante que a

membrana seja impermevel a maioria dos pequenos ons. Membrana Externa: devido ao fato de conter uma grande protena formadora de canais (chamada de porina), a membrana externa permevel a todas as molculas de 5.000daltons ou menos. Outras protenas existentes nesta membrana incluem as enzimas envolvidas na sntese de lipdeos mitocondriais e enzimas que convertem substratos lipdicos em formas que possam ser subseqentemente metabolizados na matriz. Espao Intermembrana: esse espao contm vrias enzimas que utilizam o ATP proveniente da matriz para fosforilar outros nucleotdeos.

Eletromicrografia de uma mitocndria de uma clula pancretica Eletromicrografia de uma mitocndria de uma clula pancretica mostrando a membrana externa lisa e as numerosas invaginaes da membrana interna chamadas de cristas. Notar tambm grnulos escuros de alta densidade no seio da matriz com dimetro de 30 a 50 nm provavelmente constitudo por um arcabouo protico ou lipoprotico ao qual se prendem ons de metais (clcio e magnsio). Alm desse componemtes distingue-se com certa dificuldade no interior da matriz regies filamentosas constitudas por filamento de DNA e ribossomos medindo 15nm de dimetro. Funo da mitocndria: A mitocndria realiza a maior parte das oxidaes celulares e produz a massa de ATP ( energia celular) das clulas animais. Na mitocndria o piruvato e os cidos graxos so convertidos em acetil-CoA que so oxidados em CO2, atravs do ciclo de Krebs (ciclo do cido ctrico). Grandes quantidades de NADH e FADH2 so produzidas por essas reaes de oxidao. A energia disonvel, pela combinao do oxignio com os eltrons reativos levados pelo NADH e pelo FADH2, regulada por uma cadeia transportadora de eltrons na membrana mitocondrial interna denominada de cadeia respiratria. A cadeia respiratria bombeia prtons ( H+) para fora da matriz para criar um gradiente eletroqumico de hidrognio transmembrana. O gradiente transmembrana,

por sua vez, utilizada para sintetizar ATP e para dirigir o transporte ativo de metablitos especficos atravs da membrana mitocondrial interna. A combinao dessas reaes responsvel por uma eficiente troca ATP-ADP entre a mitocndria e o citosol de tal forma que o ATP pode ser usado para prover muitas das reaes celulares dependentes de energia.

Gif animado ilustrando a formao do gradiente de Hidrognio As mitocndrias so organelas presentes em todas as clulas eucariticas podendo ter formas e tamanhos variados, possuem grande mobilidade, localizando-se em stios intracelulares onde h maior necessidade de energia, pois sua funo principal a produo de ATP.

Esse compartimento formado por duas camadas de membrana, uma externa, altamente permevel que possui protenas formadoras de poros (porinas) que permitem o trnsito livre de molculas, e uma interna, altamente especializada e mais fina que se dobra formando pregas chamadas cristas. Dentro da membrana interna existe uma substncia amorfa onde esto os ribossomos, o DNA mitocondrial e as enzimas, responsveis pelas vrias funes da mitocndria. E entre as membranas est o espao intermembrana, que contm vrias enzimas e onde acumula prtons transportados da matriz

Nos sabemos que para realizar a maioria dos trabalhos ns precisamos de energia. Essa energia pode ser luz, calor, barulho ou outras coisas. Felizmente, essas coisas no ficam soltas por a, mas armazenadas em substncias e resevatrios. Atravs de certas reaes, ns podemos liberar essa energia armazenada e utiliz-la. Se voc acende uma fogueira, voc est fazendo o oxignio do ar reagir com o carbono da fogueira e liberar o gs carbnico e energia na forma de luz e calor. claro que meio difcil acender fogueiras dentro de ns, mas possvel realizar a combusto (queima) de algumas substncias e obter energia atravs disso. Para realizar este trabalho, nossas clulas tem uma organela chamada mitocndria. A mitocndria vai trabalhar os "combustveis" (principalmente acares) e retirar a maior parte da energia deles. Essa energia armazenada na forma de ATP (adenosina trifosfato) que vai ser como um reservatrio da energia. Esse ATP pode ento ir at um certo local e liberar a energia nele armazenada. As mitocndrias parecem um amendom, tendo dentro de si uma membrana altamente pragueada (dobrada) formando o que chamamos de cristas mitocondriais. Entre as cristas existe um lquido chamado de matriz. As mitocndrias so pequenos orgnulos presentes apenas em clulas de eucariontes. Relacionam-se com os processos energticos. Podem existir centenas ou at milhares numa nica clula. Apesar de seu tamanho reduzido (de 2 a 8 m de comprimento e 1,5 m de dimetro), as mitocndrias so visveis ao microscpio ptico, podendo ser coradas em clulas vivas. Entretanto, foi o microscpio eletrnico que permitiu uma maior compreenso da estrutura das mitocndrias. Cada mitocndria tem duas membranas, uma externa e outra interna, de constituio e espessura semelhantes membrana plasmtica. A

membrana interna apresenta dobras, formando as chamadas cristas mitocondriais, mais ou menos numerosas. O interior da mitocndria repleto de um material de consistncia fluida, chamado matriz mitocondrial. O papel da mitocndria se relaciona com a liberao de energia indispensvel para o trabalho celular. Para seu funcionamento, elas usam oxignio e substncias orgnicas, que lhes servem de combustvel. As molculas orgnicas, como acares, por exemplo, so oxidadas e liberam energia. A esse processo chamamos de respirao celular. A energia liberada utilizada nas diversas formas de trabalho celular: movimento, produo de calor, sntese de macromolculas, transporte ativo etc. Quanto mais ativa for a clula, maior ser o nmero de mitocndrias encontradas nela; a quantidade de cristas parece tambm ser proporcional atividade celular. Alm disso, o acmulo de mitocndrias numa certa regio celular indica uma grande atividade no local Funes da Mitocndria Produo de Energia; Respirao Celular atravs do Ciclo de Krebs e da Cadeia Respiratria. A mitocndria um dos mais importantes organelas celulares. Presente na maioria dos eucariontes, exceto em um grupo de protistas chamado Archezoa, entretanto a anlise genmica desses organismos indica que eles podem ter perdido a mitocndria ao longo da evoluo. A principal evidncia disso que alguns genes codificadores de protenas mitocondriais tm sido encontrados no genoma nuclear desses protistas (Bui & Bradley, 1996). Foi descrita por Altmann, em 1894 (que as denominou "bioblastos"), sugerindo sua relao com a oxidao celular. Seu nmero varia entre as clulas, sendo proporcional atividade metablica de cada uma, indo de quinhentas, mil ou at dez mil dessas estruturas por clula. Apresenta duas membranas fosfolipdicas, uma externa lisa e outra interna que se dobra formando vilosidades, chamadas cristas. A regio limitada pela membrana interna conhecida como matriz mitocondrial, onde existem protenas, ribossomas e DNA que codifica protenas necessrias respirao celular. A presena de material gentico na mitocndria fez emergir teorias sobre sua origem. Muitos bilogos argumentam que a mitocndria um dia teria sido um organismo bacteriano fagocitado por uma clula eucariota, passando a partir da a viver em simbiose com seu hospedeiro. Seja qual for sua origem, sua funo vital para a clula, sem a qual h morte celular - e morte da prpria mitocndria. Sendo assim, as mitocndrias foram selecionadas como entidades com baixo ndice de mutaes.

Geneticistas aproveitam essa propriedades para examinar, atravs do DNA mitocondrial, as relaes de parentesco entre os grandes grupos de seres vivos. Tendo-se como funo a liberao de energia, a mitocndria se faz excessivamente presente em clulas do sistema nervoso e no corao, uma vez que estes apresentam uma demanda maior de energia. A mitocndria apresenta forma esfrica ou de bastonete, parecido com um pozinho. As mitocndrias evoluem 20 vezes mais rpido do que as clulas normais. A nossa relao com elas so: as nossas clulas fornecem oxignio para a organela e elas retribuem com energia. Apenas suponhamos, se as mitocndrias encontrassem outra fonte de oxignio ou desenvolvessem um modo de produzi-lo, as nossas clulas morreriam. Mas este processo levaria milnios e at l o nosso organismo j teria desenvolvido tambm uma forma alternativa de conseguir energia para a clula.