FUNDAO OSWALDO CRUZ ESCOLA POLITCNICA DE SADE JOAQUIM VENNCIO LABORATRIO DE EDUCAO PROFISSIONAL EM TCNICAS LABORATORIAIS EM SADE (LATEC)

Ana Carolina Freire de Castro Frana

PRPOLIS: propriedades no ser humano e in natura

Rio de Janeiro 2012

Ana Carolina Freire de Castro Frana

PRPOLIS: propriedades no ser humano e in natura

Trabalho de concluso de curso apresentado Escola Venncio Politcnica como de Sade Joaquim para requisito parcial

aprovao no curso tcnico de nvel mdio em sade com habilitao em Anlises Clnicas. Orientador: Flvio Henrique Marcolino da Paixo Co-orientador: Leandro Medrado

Rio de Janeiro 2012

Ana Carolina Freire de Castro Frana

PRPOLIS: propriedades no ser humano e in natura

Trabalho de concluso de curso apresentado Escola Venncio Politcnica como de Sade Joaquim para requisito parcial

aprovao no curso tcnico de nvel mdio em sade com habilitao em Anlises Clnicas.

Aprovado em: __/ __/ __

BANCA EXAMINADORA ___________________________________________________________________________ Me. Flvio Henrique Marcolino da Paixo FIOCRUZ / EPSJV / LATEC ___________________________________________________________________________ Me. Leandro Medrado FIOCRUZ / EPSJV / LATEC ___________________________________________________________________________ Dr. Selma Majerowicz FIOCRUZ / EPSJV / LATEC

Dedico este trabalho s minhas avs: Eunice Freire de Castro e Edyr vila de Frana.

AGRADECIMENTOS Talvez a melhor parte de um trabalho seja a parte de agradecimentos. Isso provavelmente pelo sentimento de alvio devido a finalmente concluir um projeto de trs anos (teoricamente) que aos trancos e barrancos chega ao fim. Depois de muitas dvidas, incertezas, questes existenciais, dificuldades de contedo, vontades de abandonar tudo, vontade de mudar de tema, semanas sem escrever uma linha, provas, trabalho, problemas e conflitos emocionais. Depois de muito dio e amor, tdio e excitao. Depois de muitas abelhas, mel, prpolis, abelhas, xadrez, Mahjong Titans, Futurama, Star Trek, facebook, livros, Kafka, poesia, desenho, Belle & Sebastian, Beatles, Blind Melon, Los Hermanos, Arctic Monkeys, The Strokes, The Smithis, Velvet Underground, Florence and Machine... Msica, msica, msica... TV... Filmes, filmes, filmes... Abelhas, abelhas, prpolis e muita procrastinao. Sim, o trabalho foi concludo! Para comear, quero agradecer a banda que me fez ter grande paixo pelo universo das abelhas, e me fez querer buscar um tema que se relaciona ao assunto. Portanto, obrigada Blind Melon, obrigada pela linda e adorada cano No Rain. Agradeo a todos os bilogos que me inspiraram na minha paixo pela biologia e consequentemente meu crescimento e busca por profisso. Obrigada, Wellington Santos (padrinho), Maria Fernanda (professora da sexta-srie), Flvio Paixo e Leandro Medrado (queridos orientadores), Jan Swammerdam e, claro, Charles Darwin. Devo tambm desculpas, por no continuar seguindo em biologia, a cada um de vocs. Tambm quero agradecer a todos os amigos e famlia, por todo o apoio e pacincia em todas as vezes que disse que no iria conseguir. Obrigada por aturarem minhas crises existenciais. Eu amo muito vocs. E especialmente agradeo a Jlia, Ceclia e Amanda pelos melhores momentos que eu jamais vou esquecer. Obrigada, abelhas.

Os leitores extraem dos livros, consoante o seu carter, a exemplo da abelha ou da aranha que, do suco das flores retiram, uma o mel, a outra o seu veneno. (Friedrich Nietzsche)

RESUMO Esta monografia apresenta uma reviso bibliogrfica sobre a utilizao da prpolis como remdio natural durante a histria, abordando aspectos histricos e a pesquisa cientifica de comprovao das atividades atribudas a este composto. So discutidas questes quanto a sua composio qumica, abordando a complexidade e variabilidade de seus compostos segundo questes fitogeogrficas e da espcie de abelha produtora. Dessa forma, tambm so abordadas a produo e utilizao natural da prpolis nas colmeias como agente antimicrobiano e isolante dos favos de mel. A discusso quanto s propriedades biolgicas da prpolis tem recorte nas aes antimicrobiana e imunomoduladora, abrindo uma discusso sobre o processo de produo de fitomedicamentos. Palavras-chave: Prpolis, Fitomedicamentos, Abelhas, Imunidade, Microorganismos.

LISTA DE ILUSTRAES Quadro 1 Cronologia das diferentes propriedades farmacolgicas pesquisadas .............13 Quadro 2 Principais componentes nas diversas origens geogrficas ...............................14 Quadro 3 Comparao de estudos e experimentos das propriedades biolgicas..............20 Quadro 4 Ao imunomoduladora relacionada aos componentes ativos .........................29

Grfico 1 Valores referentes espcie Apis mellifera L. .................................................16

Figura 1 Estrutura qumica bsica dos flavonides..........................................................17 Figura 2 Estrutura qumica dos principais tipos de flavonides........................................18 Figura 3 Estrutura qumica do cido cafico fenetil ster.................................................19

SUMRIO 1 INTRODUO .............................................................................................................9 2 HISTRICO: das colmeias indstria farmacutica ...............................................10 3 COMPOSIO QUIMICA ..........................................................................................14 4 A AO ANTIMICROBIANA E IMUNOMODULADORA DA PRPOLIS ......20 4.1 AO ANTIMICROBIANA .......................................................................................21 4.2 AO IMUNOMODULADORA ...............................................................................24 5 CONSIDERAES FINAIS ........................................................................................30 REFERNCIAS ................................................................................................................32 ANEXO A ..........................................................................................................................35

1 INTRODUO A prpolis um composto complexo, extrado pelas abelhas da seiva de flores e brotos de rvores. Podendo ser traduzida como em defesa da cidade ou em defesa da colmeia, a etimologia da palavra demonstra sua funo natural: a utilizao pelas abelhas para defender a colmeia. Assim como as abelhas, o homem vem utilizando as propriedades teraputicas da prpolis como remdio natural durante a histria e at os dias atuais, com antigas descries de seu emprego por assrios, gregos, romanos, incas e egpcios. Dentre as diversas atividades teraputicas, a prpolis j foi descrita como agente antissptico, antifngico, bacteriosttico, adstringente, anti-inflamatrio, anestsico e antioxidante. A propriedade de maior destaque a de imunomodulao, estando ligada estimulao e tambm a supresso de eventos da resposta imune. Essas diversas propriedades esto amplamente relacionadas composio qumica, e segundo estudos, se do pelo sinergismo dos diversos componentes. A composio da prpolis determinada principalmente pelas caractersticas fitogeogrficas existentes ao redor da colmeia, porm diversos fatores como a flora da regio, poca da colheita e a espcie da abelha influenciam para que haja variao de seus componentes. Esta variao reflete na diversidade farmacolgica, existem diversos tipos de prpolis. Por exemplo, em regies tropicais a amplitude das atividades farmacolgicas maior que nas regies temperadas, refletindo a diversidade vegetal destas regies. Com isso h grande dificuldade em determinar a composio da prpolis e suas propriedades de forma padronizada, sendo esse o maior problema para sua utilizao em fitoterapia (LUSTOSA et al, 2008). Contudo, este trabalho tem como objetivo analisar os componentes qumicos da prpolis relacionando-os a suas propriedades no organismo humano e na colmeia para averiguar seus efeitos como agente imunodulador e antimicrobiano. A metodologia consiste na reviso bibliogrfica de artigos e livros principalmente voltados rea de farmacologia. O tema se mostra de grande interesse visto que relaciona diversas reas como bioqumica, imunologia e biologia de forma a trabalhar o conhecimento de modo integrado de acordo com a proposta da escola politcnica. Alm disso, com o grande crescimento da resistncia de bactrias a antibiticos, a utilizao da prpolis como medicamento natural traz grandes benefcios: alm de no serem relatados efeitos colaterais, no demonstrada resistncia microbiana. Apesar de sua utilizao na medicina popular h milhares de anos, a falta de padres que avaliem de maneira precisa suas atividades farmacolgicas, dificulta a utilizao de seus produtos com garantia de eficcia e segurana segundo os parmetros cientficos hegemnicos. Assim necessrio o crescimento do desenvolvimento de pesquisas nessa rea.

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2 HISTRICO: das colmeias indstria farmacutica A utilizao de produtos naturais para o tratamento de doenas acompanha a histria da medicina. Esses produtos foram os principais componentes das farmacopeias por milhares de anos, sendo utilizados at fins do sculo XIX na forma de chs, infuses, e outras formulaes farmacuticas. O isolamento de produtos naturais em forma pura, no final do sculo XIX, foi um passo decisivo para a criao da indstria farmacutica, pois esses produtos naturais se constituram na principal fonte de insumos para a preparao de medicamentos (FONSECA, 2005). Contudo, a histria do desenvolvimento de novos frmacos ainda hoje segue os moldes dos processos que ocorriam no passado, principalmente ao se tratar de fitoterpicos. Primeiramente, a planta em questo extrada da natureza e utilizada na cultura popular de acordo com o senso comum. Observam-se propriedades de cura e tratamento atravs do consumo desse medicamento natural, e posteriormente sero realizadas pesquisas para averiguar o que leva a tal efeito. Uma vez que a cincia realiza tal pesquisa, so descobertas uma ou mais molculas bioativas que sero isoladas e utilizadas posteriormente para o desenvolvimento do frmaco pela indstria farmacutica (COSTA, 2009). Porm, a utilizao de produtos naturais bioativos como matria prima para o desenvolvimento de novos frmacos no to simples. Em geral, h baixas concentraes das substncias selecionadas nas fontes naturais, ou trata-se de compostos complexos em que existem vrios componentes qumicos agindo em conjunto para tal propriedade o que impede o isolamento de uma molcula especfica. Esses fatores muitas vezes inviabilizam a explorao comercial (COSTA, 2009). A prpolis como remdio natural, sofreu um processo semelhante at se tornar um produto to popular e comercializado. Atualmente, podemos encontr-la em produtos como balas, chocolates, doces, xampus, cremes para pele, solues anti-spticas, pastas de dente, spray, etc. Entretanto, deve-se observar a origem natural deste produto: trata-se de um composto complexo extrado da seiva de flores e brotos de rvores. As abelhas a utilizam para defender a colmeia: vedando as frestas entre os favos de mel (funcionando como uma espcie de cimento), isolando termicamente, protegendo contra microorganismos e outros invasores (LUSTOSA et al, 2008). Nas colmeias h a conhecida organizao social das abelhas em trs castas: rainha, responsvel pela postura de novos indivduos, zango com funo tambm ligada a reproduo, e operrias. As abelhas operrias desempenham funes diferentes de acordo com

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a idade, desenvolvimento glandular e necessidades da colmeia. So elas as produtoras da prpolis. As mais jovens realizam a limpeza dos alvolos e produo de geleia real, pois nesse perodo, de um a trs dias de vida, tem as glndulas hipofaringianas e mandibulares desenvolvidas; tempos depois (com idade de 4 a 20 dias) tem as glndulas hipofaringianas atrofiadas e as glndulas cergenas na parte ventral se tornaro desenvolvidas, assim as operrias passam a secretar cera, tendo funo no reparo e construo da colmeia; com 19 a 21 dias de vida passam a desenvolver o reservatrio de veneno preenchido, se tornando guardis da colmeia; e aps 21 dias de vida se tornam coletoras, buscando o alimento na flora ao redor da colmeia: plen, gua, nctar e prpolis (VIEIRA, 1989 apud SFORCIN, 2009). As abelhas so insetos de registro muito antigo: segundo estudos, h 125 milhes de anos estas j habitavam a terra de forma muito semelhante a atual e produziam mel. Foram encontrados pedaos de mbar transparente envolvendo abelhas em pesquisas arqueolgicas, e tambm registros de sua representao em arte rupestre, em Valncia (Espanha), datando do perodo neoltico; outra representao antiga est gravada na tumba da Ramss IX (MASSON, 1994). O sucesso evolucionrio permitiu que as abelhas explorassem diversos habitats da Terra, devido a sua organizao social, habilidades de voo, e a elaborao de produtos como mel, geleia real, plen, cera, veneno e a prpolis. Com o passar dos anos os produtos apcolas passaram a ser utilizados pelo ser humano, havendo a descoberta de inmeras propriedades vinculadas ao consumo dos mesmos. Existem relatos do uso de mel por Sumrios e outras civilizaes, por exemplo (BANKOVA, 2005). A utilizao desses produtos era de certa forma mistificada, muitos relatos sobre abelhas podem ser encontrados na mitologia e religio das antigas civilizaes, devido a suas caractersticas de vida em sociedade que sempre despertaram grande interesse e admirao. De acordo com a mitologia egpcia, as abelhas foram criadas quando as lgrimas do deus sol R caram na areia do deserto. H ainda relatos do mito do nascimento das abelhas atravs do cruzamento do zango com o sol. Kamadeva, o deus hindu do amor, carrega um arco feito de abelhas domsticas (MASSON, 1994). A atribuio de uma origem mstica e divina as abelhas no se restringe apenas a religio e mitologia. At o sculo XVII, apicultores e a sociedade em geral, acreditavam que as abelhas e outros insetos se reproduziam espontaneamente, de forma semelhante teoria da abiognese. Na dcada de 1660, Jan Swammerdam1 examinou uma abelha rainha por
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Jan Swammerdam (1637-1680), naturalista holands pioneiro na observao e em estudos microscpicos de plantas e animais.

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microscopia e descobriu rgos reprodutores femininos. Em 1668, Francesco Redi, colocou em questo a teoria da Abiognese com seus experimentos, o que futuramente proporcionou a noo de que insetos, incluindo as abelhas, se reproduziam por postura de ovos e no gerao espontnea (MAETERLINCK, 2002). A prpolis, como produto apcola, tem consequentemente sua utilizao descrita durante a histria. Seu uso data desde 300 a.C.,com inmeras propriedades descritas(GHISALBERTI, 1979 apud SFORCIN, 2007). Egpcios faziam uso das propriedades antiputrefantes para tratar de seus mortos no processo de mumificao; Gregos e Romanos a utilizavam como agente cicatrizante e Incas a empregavam como antipirtico (antitrmico) (SFORCIN & BANKOVA, 2010). Na Grcia citada por Hipcrates e, em Roma citada pelo historiador Plnio como medicamento para inchao e dores, o que reflete um efeito anti-inflamatrio. Ainda se encontram citaes de Aristteles, Dioscorides, e Galeno (CAPASSO & CASTALDO, 2002 apud LUSTOSA et al, 2008). Com o passar dos anos e o desenvolvimento da cincia e medicamentos, observa-se que os produtos apcolas, bem como a prpolis, passam a ter um carter mais relacionado a um medicamento de origem natural do que a um produto mstico. Mais recentemente, na frica do Sul na guerra ao fim do sculo XIX, e tambm em clnicas soviticas no perodo da Segunda Guerra Mundial, a prpolis foi utilizada como cicatrizante. Posteriormente foram realizados diversos estudos em medicina humana e veterinria na antiga URSS sobre suas propriedades, inclusive na utilizao do tratamento de tuberculose - Observou-se reduo dos problemas pulmonares e aumento do apetite (PEREIRA et al, 2002). Comeou a ser utilizada no tratamento de problemas de sade entre 1950 e 1960 no oeste europeu (Bulgria, Repblica Tcheca, Polnia, etc) e na antiga Unio Sovitica. A partir da dcada de 80 a prpolis se tornou um produto popular no leste europeu, na Amrica do Norte e do Sul e no Japo (SALATINO et al, 2005 apud LUSTOSA et al, 2008). O trecho a seguir demonstra os avanos crescentes na pesquisa da prpolis, que acabam por acompanhar o avano das pesquisas farmacuticas:
O termo prpolis j era descrito no sculo XVI na Frana e, em 1908 surgiu o primeiro trabalho cientfico sobre suas propriedades qumicas e composio, indexado no Chemical Abstracts (referncia n 192). Em 1968 surgiu no Chemical Abstracts o resumo da primeira patente utilizando a prpolis (Romena, para a produo de loes para banho). Historicamente o primeiro trabalho (indexado pelo Chemical Abstracts) sobre a prpolis foi publicado 10 anos depois que o professor

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Heinrich Dresser da Bayer, proclamou o surgimento da herona; 5 anos depois do surgimento do primeiro barbitrico e 14 anos antes do descobrimento da vitamina D, por McColumn e colaboradores, no leo de fgado de bacalhau (que evitaria e curaria o raquitismo), isolada na Alemanha por Windaus (agraciado por isso com o prmio Nobel.Em pouco mais de 90 anos, o nmero de trabalhos publicados citados no Chemical Abstracts totaliza 450, oriundos de 39 pases (dos cinco continentes), alm de 239 patentes (PEREIRA et al, 2002).

Com o crescente avano dos estudos e pesquisas, a prpolis vem sendo citada como possuidora de inmeras propriedades. Dentre essas descrita como agente antissptico, antifngico, bacteriosttico, adstringente, anticolrico, antiespasmoltico, anti-inflamatrio, anestsico, antioxidante (BURDOCK, 1997). Existem relatos ainda de suas atividades antineoplsicas, hepatoprotetoras, e regeneradoras de ossos e cartilagem atravs do estimulo da regenerao de condrcitos. Porm as propriedades de regenerao e cicatrizao esto provavelmente ligadas ao antioxidante, pois os compostos flavonides, presentes na prpolis, removem os radicais livres que naturalmente dificultariam a regenerao celular (MENEZES, 2005).

Quadro 1- Cronologia das diferentes propriedades farmacolgicas da prpolis j pesquisadas Fonte: Pereira et al., 2001

3 COMPOSIO QUIMICA

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As diversas propriedades atribudas prpolis, citadas de forma geral anteriormente, esto diretamente ligadas a sua composio qumica, sendo essa de grande complexidade e diversidade. A diversidade e grande nmero de componentes podem justificar o grande nmero de atividades biolgicas, porm estudos apontam que esses efeitos se do provavelmente pelo sinergismo dos diversos componentes e no pela ao individual dos mesmos, o que torna o mecanismo de ao da prpolis complexo e ainda no totalmente elucidado (KROL et al., 1993 apud MENEZES, 2005). Assim como observado em medicamentos de forma geral, a prpolis tem seus efeitos condicionados a fatores como a absoro, biotransformao e a propriedades qumicas de seus compostos. Como remdio natural, est condicionada ainda a biodisponibilidade desses diversos compostos (WALLE, 2004 apud SFORCIN 2009), que esto condicionados s caractersticas fitogeogrficas existentes ao redor da colmeia. Diversos fatores como a flora da regio, poca da colheita e a espcie da abelha influenciam para que haja variao de seus componentes, e dessa forma, existem diversos tipos de prpolis (LUSTOSA et al, 2008).
Para Bankova (2005), comparar amostras de prpolis de origens geogrficas distintas o mesmo que comparar extratos de duas plantas que pertencem a famlias diferentes, tal a sua variabilidade qumica e, consequentemente, suas propriedades farmacolgicas (FISCHER et al., 2008).

Os diferentes tipos de prpolis so identificados pela espcie de abelha e a flora da regio em que so coletados, o que pode ser observado no quadro abaixo.

Quadro 2- Principais componentes nas diversas origens geogrficas Fonte: SFORCIN, 2010.

Segundo Bankova (2005), essa variao interfere nas diversas propriedades farmacolgicas. Por exemplo, em regies tropicais a amplitude dessas atividades maior que

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nas regies temperadas, refletindo a diversidade vegetal. Sforcin (2009) reafirma que o efeito da sazonalidade sobre a composio qumica da prpolis sempre foi debatido em congressos e que em zonas temperadas do hemisfrio norte as abelhas produzem prpolis no vero, final da primavera e comeo do outono; j no Brasil a coleta realizada durante todo o ano com possveis variaes sazonais. Dessa forma, em determinadas estaes haveria maiores concentraes de componentes biologicamente ativos. Porm, segundo seus estudos 2, as variaes no so significantes qualitativamente, pois apesar de diferenas quantitativas, h concentraes desejadas de componentes biologicamente ativos em todas as estaes. Tambm no havendo diferenas qualitativas quanto a subespcie de abelha produtora. Sforcin (2009) afirma tambm que, apesar dos relatos de Bankova (2005), as origens geogrficas da prpolis no necessariamente levam a propriedades biolgicas diferentes. A prpolis europeia tem suas atividades antifngica e antibacteriana relacionada flavononas, flavonas, cidos fenlicos e steres, porm essas propriedades na prpolis brasileira esto ligadas aos cidos p-cumricos prenilados e diterpenos. Consequentemente, diferentes componentes podem estar associados a mesma atividade biolgica. Apesar das controvrsias a maior parte da literatura apresenta que a variao da composio qumica devido sazonalidade e diferenas geogrficas um fator que interfere nas diversas propriedades da prpolis. Contudo, a origem geogrfica e vegetal so de grande importncia na padronizao das amostras, bem como no controle da qualidade. O melhor indicador da origem botnica da prpolis anlise da sua composio qumica comparada com a provvel fonte vegetal (Park et al., 2002), apesar da grande complexidade deste processo devido ao grande nmero de componentes e sua grande variabilidade. A dificuldade em determinar a composio da prpolis de forma padronizada possivelmente o maior problema para sua utilizao em fitoterapia. Durante as ultimas 30 dcadas os estudos relacionados a suas propriedades vm evoluindo, porm necessrio que se aprofundem cada vez mais (PEREIRA, 2002). Os principais compostos qumicos isolados da prpolis at o momento so principalmente: cidos e steres alifticos, cidos e steres aromticos, acares, lcoois, aldedos, cidos graxos, aminocidos, esterides, cetonas, charconas e di-hidrocharconas, flavonides (flavonas, flavonis e flavononas), terpenides, protenas, vitaminas B1, B2, B6, C, E, alm de diversos minerais (MENEZES, 2005). Tambm podem ser encontrados elementos inorgnicos como cobre, mangans, ferro, clcio, alumnio, vandio e silcio.
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Estudo realizado atravs da coleta de amostras produzidas por abelhas africanas e europeias durante um ano, analisando a constituio e diferentes ensaios biolgicos (SFORCIN, 2009).

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Alguns componentes esto presentes em todas as amostras de prpolis, porm existem alguns particulares a espcie de planta de origem ou devido aos diversos fatores que influenciam na composio j citados (MARCUCCI, 1996). A numerosa lista de compostos j identificados na prpolis pode ser ilustrada pelos quadros presentes em anexo. Pode-se ainda fazer uma diviso menos detalhada da composio, referente espcie Apis mellifera L.(cuja prpolis a mais estudada) obtendo-se, em sua composio bsica, cerca de 50% de resinas vegetais, 30% de cera de abelha, 10% de leos essenciais, 5% de plen e 5% de detritos de madeira e terra (ver Grfico 1) (MONTI et al.; CIRASINO et al. apud MENEZES, 2005).

Grfico 1- Valores referentes espcie Apis mellifera L., cuja prpolis a mais estudada. Fonte: Produzido pelo autor atravs dos dados retirados de MENEZES, 2005.

O maior grupo de compostos isolados so pigmentos flavonides, que assim como os compostos aromticos simples encontrados na prpolis, tambm ocorrem comumente em plantas. Consequentemente, os flavonides isolados a partir de diferentes amostras correlacionam-se razoavelmente com os presentes nas plantas a partir das quais as abelhas recolhem prpolis. Algumas modificaes estruturais, assim como tem sido sugerido para algumas flavonas, se devem ao efeito de enzimas presentes na saliva das abelhas (GHISALBERTI, 1979 apud BURDOCK 1997). Flavonides so compostos fenlicos de grande importncia e amplamente encontrados no reino vegetal: em frutas, vegetais, sementes, cascas de rvores, razes, talos, flores e em seus produtos de preparao, tais como os chs e vinhos. Compreendem um amplo

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grupo de substncias: 4.000 diferentes j foram listadas. Por exemplo, tem-se apigenina, quercetina, hesperetina, rutina, luteolina,genisteina, daidzeina, antocianidina, kanferol, etc ( COUTINHO et al, 2009). Estruturalmente flavonides so substncias aromticas com 15 tomos de carbono em seu esqueleto bsico e possuem 3 anis aromticos C6-C3-C6. O esqueleto dos flavonides biogeneticamente derivado do fenil-propano (C6-C3) e trs unidades de acetato (C6). A grande diversidade estrutural dos flavonides se d pelas modificaes que tais compostos podem sofrer, como: hidroxilao, metilao, acilao,glicosilao, entre outras (KOES et al, 1994 apud LOPES et al,2000). As modificaes no anel central dessas substncias levam diferenciao em subclasses distintas, como: chalconas, flavanonas, flavanonis, flavonas, flavonis, isoflavonas, flavan-3-ols e antocianidinas (COUTINHO et al, 2009).

Figura1- Estrutura qumica bsica dos flavonides Fonte: Silva et al., 2003

Apesar de no serem sintetizados pela espcie humana, possuem uma srie de propriedades farmacolgicas que os fazem atuar sobre sistemas biolgicos: capacidade antioxidativa (esta constitui a atividade mais elucidada pelos estudos j desenvolvidos), atividades anti-inflamatria e de efeito vasodilatador, ao antialrgica, atividade contra o desenvolvimento de tumores, anti-hepatotxica, anti-ulcerognica,atuao antiplaquetria, ao antimicrobiana e antiviral (LOPES et al., 2000). Alm disso, interfere em diversos processos fisiolgicos: auxiliando na absoro e na ao de vitaminas, atuando nos processos de cicatrizao como antioxidantes e na atividade moduladora do sistema imune (WILLIAMS et al., 2004).

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Figura 2- Estrutura qumica dos principais tipos de flavonides Fonte: Coutinho et al., 2009

Por tanto, grande parte das propriedades atribudas prpolis esto relacionadas aos flavonides. Diversos outros compostos tambm so associados a suas propriedades medicinais, como o cido cafico fenetil ster (CAPE), um componente significativo da prpolis, identificado por respostas bioqumicas variadas, como anti-cancro, anti-viral, anticncer e anti-inflamatria (KUO et al., 2005). al., 2004). Porm a presena e a concentrao de flavonides so utilizadas como ndice de qualificao de amostras de prpolis (LUSTOSA et

Figura 3- Estrutura qumica do cido cafico fenetil ster

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Fonte: Kuo et al, 2005

Tal como acontece com um produto natural, h a possvel contaminao da prpolis por agentes ambientes. Segundo Burdock (1997), a anlise de diferentes amostras confirma a ausncia de hidrocarbonetos clorados, dados analticos mostram os nveis de chumbo em prpolis bruta igual ou inferior a 9 ppb e em tinturas abaixo de 5 ppb (podendo ocasionalmente haver valores maiores). Alm disso, no existe uma padronizao para os mtodos de extrao de prpolis bruta, havendo uma grande variabilidade dos nveis de toxidade em relao ao esperado (BURDOCK, 1997). Entretanto, segundo Burdock (1997), a prpolis no txica e a faixa DL50 3 de 2 a 7.3 g/ kg/dia em camundongos e para humanos de aproximadamente 70 mg por dia.

4 A AO ANTIMICROBIANA E IMUNOMODULADORA DA PRPOLIS Empiricamente a prpolis utilizada por sculos, sendo relatada como agente imunolgico. A lista de propriedades atribudas aos diversos tipos de prpolis numerosa como j citado anteriormente, porm ao decorrer deste captulo sero abordadas no recorte a ao antimicrobiana e imunomoduladora. Estas propriedades so de grande interesse visto que se apresentam como alternativas de tratamento a infeces tanto pela ao antibitica como
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DL50: Em toxicologia, dose letal mediana (DL50 ou LD50) a dose necessria de uma dada substncia ou tipo de radiao para matar 50% de uma populao em teste. (http://pt.wikipedia.org/wiki/Dose_letal_mediana)

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por imunoestimulao. Trata-se de um produto natural, que no apresenta efeitos colaterais demonstrados e que, alm disso, devido a sua grande complexidade no apresenta resistncia dos microorganismos (SFORCIN, 2009). Numerosas pesquisas que abordam estas propriedades, porm demonstram resultados contraditrios e divergentes. Provavelmente, isso se deve aos variados mtodos utilizados e a grande diversidade e complexidade de componentes qumicos presentes nos diferentes tipos de prpolis das amostras analisadas. Apesar da constante busca pela elucidao dos mecanismos de ao, no existem grandes comprovaes. Os diferentes testes sobre a ao antimicrobiana apresentam em sua maior parte resultados in vitro que divergem dos resultados in vivo. Quanto aos efeitos imunolgicos, proposta a ao por estimulao e supresso de eventos da resposta imune. Contudo, existem muitas contradies como ser abordado a seguir. O quadro abaixo ilustra a diversidade de estudos sobre as diversas propriedades da prpolis:

Quadro 3- Comparao de estudos e experimentos das propriedades biolgicas Fonte: Sforcin, 2010

4.1 AO ANTIMICROBIANA A ao antimicrobiana pode ser observada na funo natural da prpolis nas colmeias ao defender as abelhas da invaso e proliferao de microorganismos. Alm disso, numerosa a lista de publicaes que a denominam como antibitico natural por sua ao antifngica (fungisttica e fungicida), antibacteriana (bacteriosttica e bactericida) e at mesmo antiviral.

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Dessa forma, torna-se interessante observar esta propriedade aproveitada pelo ser humano (MARCUCCI, 1996). Quanto a ao antibacteriana, estudos de suas propriedades so principalmente voltados a rea mdica e veterinria, demonstrando eficiente atividade bacteriosttica e bactericida em relao a diversos gneros de bactrias Gram positivas e Gram negativas. Marcucci, 1996, relata a verificao da atividade in vitro contra as linhagens de bactrias Gram positivas: Bacillus brevis, B. cereus, B. cereus Var. mycoides, B. megatherium, B. polymyxa, Bpumilus, B. sphaericus, B. subtilis, Cellulomonas fimi, Nocardia globerula, Leuconostoc mesenteroides, Micrococcus lysodeikiticus, Sarcina ltea, Staphylococcus aureus e Streptococcus faecalis. Dentre as Gram negativas: Aerobacter aerogenes, Alcaligenes SP., Bordetella bronchiseptica, Escherichia coli, Proteus Vulgaris, Pseudomonas aeruginosa e Serratia marcescens. Dentre as 39 linhagens de bactrias testadas, o crescimento de 25 delas foi inibido concentraes de prpolis menores que 100 g/ml (MARCUCCI, 1996). Segundo pesquisas, a prpolis possui maior eficcia contra bactrias Gram-positivas em comparao a Gram-negativas, porm no h comprovaes de causa. Supe-se que este fenmeno ocorre pela complexidade e teor lipdico da parede celular de bactrias Gramnegativas, dificultando a entrada de componentes e sua ao (Vargas et al., 2004 apud LUSTOSA, 2008). Sforcin, (2009), apresenta em teste in vitro a verificao de maior resistncia em bactrias Gram-negativas. O efeito inibitrio encontrado sobre a bactria Gram-positiva S. aureus (CIM= 0,5% v/v) ocorreu aps seis horas de incubao, j o crescimento da bactria Gram-negativa E. coli foi inibido aps 24 horas e somente em concentrao mais elevada (CIM= 8% v/v). So atribudos prpolis diversos mecanismos de ao, como a inibio do RNApolimerase bacteriano pela possvel ao da flavona pinocembrina, flavonol galacina e ster feniletil do cido cafico e a ao sobre a membrana celular causando danos funcionais e estruturais por componentes como flavonides, cido cafico, cido benzoico e cido cinmico (SCAZZOCCHIO et al., 2005 apud LUSTOSA, 2008). Takaisi-kikuni e Schilcher (1994) apud Sforcin (2009) apontam a inferferncia na diviso celular de Streptococcus agalactiae, levando desorganizao do citoplasma e inibio da sntese proteica. Mizoeva et al. (1997) apud Sforcin (2009), observaram a alterao da permeabilidade inica da membrana bacteriana. Os efeitos da prpolis sobre a permeabilidade e potencial da membrana contribuem para a ao citotxica, cabendo observar a importncia do gradiente eletroqumico de prtons ao longo da membrana para a sntese de ATP e transporte de substncias. Sforcin

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(2009) esclarece ainda que segundo esses mesmos autores a prpolis inibe a motilidade bacteriana, devido a interao de compostos derivados do cido cinmico e flavonides, assim como ao sinergismo entre vrios componentes, agindo possivelmente como ionforos4. Contudo, a ao antibacteriana principalmente associada a grande concentrao de flavonides. Existem relatos de que a prpolis como substncia ativa termicamente estvel, conservando sua ao antibacteriana mesmo aps ser submetida temperatura de 100C por meia hora (PRADO et al., 1962 apud BIANCHINI, 1998) Cabe ainda relatar quanto ao sinergismo dos diversos componentes da prpolis, que j havia sido abordado anteriormente nesta monografia. A ao antimicrobiana tambm se relaciona a ao de diversas molculas, e no a uma especfica. Marcucci, 1996, aponta que em estudos de vrias fraes de um extrato etanoico de prpolis, suas fraes separadas no inibiram Staphylococcus aureus. Apenas com todas as fraes reunidas se obteve a inibio. A atividade antifngica da prpolis geralmente relatada atravs da sua combinao com drogas antimicticas. Sua combinao com antimicticos aumentou a sua atividade sobre Candida Albicans; extratos aquosos e alcolicos de 30 amostras de prpolis cubana, os extratos alcolicos apresentaram pequeno efeito sobre C. albicans. O sinergismo da prpolis com propilenoglicol apresentou um importante potencial antifngico contra Trichophyton e Microsporum (MARCCUCI, 1996). Dobrowolski et al. (1991) apud Sforcin ( 2009) verifica uma ao fungicida da prpolis principalmente voltada a agentes causadores de micoses superficiais. Leveduras tambm apresentam sensibilidade prpolis, revelando um papel fungicida e fungisttico (LELENBAUM & BARBOSA, 1994 apud SFORCIN, 2009). Em um estudo de comparao das atividades da prpolis em relao a sazonalidade, Sforcin et al. (2001) realizou a avaliao in vitro da ao de amostras coletadas nas quatro estaes do ano sobre Candida albicans e Candida tropicalis (isoladas de infeces humanas). Ambas foram suscetveis a baixas concentraes da prpolis: C. albicans CIM= 3,0% (v/v) e C. tropicalis CIM=3,8% (v/v). No sendo encontrados efeitos da sazonalidade sobra a concentrao inibitria mnima. Contra protozorios, sua ao foi observada em inflamaes provocadas por Trichomonas vaginalis. Uma soluo de 150 g/ ml de EEP exibiu efeito de 0% de

Ionforos: So molculas solveis em lipdios, geralmente sintetizadas por microorganismos para transportar ions atravs da bicamada lipdica da membrana celular. So definidas como ionforos substncias capazes de interagir passivamente com ctions (K+, Na+, Ca2+ e Mg2+), servindocomo um veculo de transporte para estes atravs de membranas celulares. Estes agem de forma seletiva sobre bactrias sensveis colorao Gram prejudicando o crescimento de Gram- positivas e favorecendo Gram-negativas. (http://eduep.uepb.edu.br/rbct/sumarios/pdf/19ruminantes.pdf).

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sobrevivncia na cultura deste protozorio aps 24 horas de crescimento. Tambm foi verificado o efeito em EEP sobre o crescimento de Giardia Lamblia (MARCUCCI, 1996). Estudos demonstram ainda a ao da prpolis contra infeces virais, como e.g. influenza, HIV, adenovirus e herpes simplex vrus. Tambm havendo relatos do auxilio no tratamento de infeces respiratrias em crianas e na herpes genital (NOLKEMPER, 2010). Um estudo interessante a ser considerado, que exemplifica as propriedades antivirais, a supresso do Herpes simplex vrus tipo 2 ( HSV-2). O efeito citotxico e anti-heptico foi analisado em cultura de clulas RC-37, mostrando inibio moderada, atravs da utilizao de extrato aquoso e de extrato etanoico especial GH 2002. Foi encontrada a concentrao inibitria de 50%, em placas com formao determinada a 0,0005% e 0,0004%, respectivamente. Em ensaios de suspenso viral, ambos os extractos de prpolis apresentaram nveis elevados de actividade antiviral contra o HSV-2. Em ensaios de suspenso viral, a infectividade foi reduzida em > 99%. Para determinar o modo de supresso de vrus por prpolis, os extractos foram adicionados em momentos diferentes durante o ciclo de infeco viral. Em clulas no infectadas antes da infeco ou clulas infectadas durante a replicao intracelular no houve nenhum efeito sobre a multiplicao do vrus. Contudo, ambos os extratos de prpolis exibiram atividade anti-herptica elevada quando os vrus foram prtratados com frmacos antes da infeco. ndices de seletividade foram determinadas a 80 e 42,5 para o extracto aquoso e etanlico, respectivamente. Deste modo os extratos de prpolis podem ser utilizados para terapia tpica na infeco herptica recorrente. Estudos apontam ainda que a prpolis pode apresentar efeitos sinrgicos com antimicrobianos. Oksuz et al.(2005) apud Sforcin (2010) verificaram uma atividade sinrgica entre a ciprofloxacina e prpolis no tratamento de ceratite experimental por Staphylococcus aureus. Orsi et al. (2006) apud Sforcin (2010), relataram que a reduo a resistncia da parede bactriana aos antibiticos amoxicilina, ampicilina e cefalexina e efeitos sinrgicos com antibiticos que atuam sobre o ribossoma (cloranfenicol, tetraciclina e neomicina). Entretanto, no foram encontrados resultados em relao a interao com antibiticos que atuam no DNA (Ciprofloxacina e norfloxacina) e cido flico (cotrimoxazol). 4.2 AO IMUNOMODULADORA Segundo os conceitos bsicos de imunologia, a resposta imunolgica dividida em resposta inata e adquirida. A resposta inata a primeira reao do organismo a um antgeno e representada pelas barreiras primrias: pele e mucosas; e pelas barreiras secundrias:

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protenas antimicrobianas, clulas fagocticas, clulas NK, inflamao e febre. A imunidade adquirida especfica e possui memria, sendo capaz de agir contra numerosas substncias microbianas ou no. Seus principais componentes so linfcitos e seus produtos (ABBAS, 2008). Os receptores celulares de conhecimento padro so muito importantes na resposta inata. Esto presentes em clulas como neutrfilos, macrfagos, clulas dendrticas, clulas endoteliais e linfcitos, sendo presentes na superfcie celular, em vesculas endossmicas e citoplasma. Atravs desses receptores h o reconhecimento de microorganismos, estando relacionados a vias de transduo de sinais intracelulares para ativao das respostas celulares como produo de citocinas (inflamatrias, citotxicas, etc). Dentre estes receptores, esto os tipos Toll (TLRs), onze j foram identificados e denominados, sendo muito importantes na ao antimicrobiana. Os principais fatores de transcrio ativados por TLRs so NF-kB ( fator nuclear kB), AP-1, IRF-3 e IRF-7. NK-kB de grande importncia na estimulao da expresso de genes da produo de citocinas inflamatrias (TNF e IL-1), quimiocinas, molculas de adeso e est tambm relacionado a produo de linfcitos(ABBAS, 2008). Dentre as citocinas da resposta imune, temos: TNF, IL-1 e quimiocinas agindo na inflamao; IFN- e IFN- ligadas a resistncia a infeco viral; IFN- a ativao de macrfagos; IL-12 a produo de IFN- pelas clulas NK e clulas T; IL-15 a peoliferao de clulas NK e IL-10; TGF- ao controle da inflamao (ABBAS, 2008). Os linfcitos, principais constituintes da resposta adquirida, tm como principais funes a defesa contra microorganismos intracelulares e ativao de outras clulas (como macrfagos e linfcitos B). A resposta linfocitria se divide em dois polos: Th1 que induz citotoxicidade e resposta inflamatria decorrente da produo de interleucinas como a IL-2, o interferon-gama (IFN-) e o fator de necrose tumoral alfa (TNF-), enquanto que a resposta Th2 produz citocinas como IL-4, IL-5, IL-6 e IL-10, que so importantes na formao de anticorpos. As citocinas na resposta adquirida apresentam os seguintes papis: IL-4 produo de IgE pelas clulas B e sinalizao para clulas TCD4 + de diferenciao para TH2, IL-2 e IL4 estimulam proliferao de clulas B, IFN- e TNF levam a aumento da expresso de molculas MHC classe 1 em vrios tipos de clulas, e IFN- e IL-10 levam respectivamente a ativao e a inibio de macrfagos(ABBAS, 2008). A principal forma de imunoestimulao da prpolis relada feita atravs dos macrfagos. Essas clulas so muito importantes na defesa do organismo, devido a diversas funes: fagocitose, gerao de radicais livres, mediao de processos inflamatrios e secreo de substncias como enzimas, citocinas e componentes do sistema complemento.

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Dentre as diferentes aes sobre os macrfagos esto o aumento da capacidade fagoctica, estimulao de citocinas como TNF- (fator de necrose tumoral ) e outras substncias como NO (xido ntrico) e espcies reativas do oxignio. Existem relatos da estimulao da produo da protena C1q (ativadora da via clssica do complemento) por macrfagos (FISCHER et al., 2008). Contrariamente, estudos in vitro demonstram tambm uma inibio das vias clssica e alternativa do sistema complemento, sendo C3 uma dos alvos. (Georgieva et al., 1997 apud SFORCIN, 2007). Pesquisas demonstraram ainda que seis compostos isolados de prpolis (identificados como cido derivados do cido cafeico) aumentaram a motilidade e propagao de macrfagos (Tatefuji et al., 1996 apud Sforcin, 2007). A ao antibactericida dos macrfagos, tambm estimulada pela prpolis. Esta possivelmente relacionada a produo de perxido de hidrognio (H 2O2) e xido ntrico (NO) (FISCHER et al., 2008). Os oxidantes produzidos por fagcitos assim como H 2O2 e espcies (intermedirias) reativas do oxignio esto relacionados aos possveis mecanismos atravs dos quais os macrfagos tornam-se microbicidas. A NADPH oxidase catalisa a reduo de oxignio molecular a nion superxido (O2-). A exploso respiratria paralela a um aumento do consumo de oxignio (Krol et al., 1995 apud SFORCIN, 2007). O2- o precursor de outros intermedirios de oxignio reactivos, incluindo o radical hidroxila (OH), hipoclorito (OCl-) e perxido de hidrognio (H2O2). Esses oxidantes produzidos por fagcitos podem destruir biomolculas importantes e tambm participar da fagocitose de microorganismos, estando envolvidos na leso do tecido associada com doenas inflamatrias (Moonis et al., 1992; Brown, 1995; Babior, 2000 apud SFORCIN, 2007). O xido ntrico (NO) apontado como importante mecanismo microbicida de macrfagos (CHAN et al., 1992 apud SFORCIN, 2009). NO e citrulina tem sua produo catalisada pela xido ntrico sintase (NOS) a partir da arginina, oxignio e NADPH (MACFARLANE et al., 1999; NOVELLI, 2005 apud SFORCIN, 2009). A iNOS5 ausente em clulas em repouso, porm sua expresso induzida em resposta a estmulos como lipossacrideos como IFN-, TNF- e IL-1. O NO torna-se importante na ao antimicrobiana por ser inibir a sntese de DNA, respirao mitocondrial e o transporte ativo da membrana de fungos e bactrias (CHAKRABORTY et al, 2006 apud SFORCIN, 2009).

A enzima NO sintase (NOS) catalisadora da reao de produo de NO atravs da convero de L-arginina a L-citrulina. A iNOS (NOS induzvel) um dos subtipos de NO sintase produzida por macrfagos e outras clulas ativadas por citocinas, como leuccitos a partir de fatores de transcrio proinflamatrios (como o NFkB) (DUSSE, 2003)

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Foi identificado o aumento da atividade de clulas Natural Killer (NK) no bao de camundongos testados com amostras brasileiras de prpolis. As NK so consideradas como primeiro mecanismo de defesa do organismo, tendo atividade citotxica sobre clulas tumorais e clulas infectadas por vrus. Sugere-se que essa ativao ocorra atravs da produo de citocinas como TNF- e interleucina 12 por macrfagos ativados, essas ao agirem com as clulas NK aumentariam sua atividade citotxica (VIVIER et al., 2004 apud FISCHER et al., 2008). A ao imunomoduladora da prpolis tambm observada na resposta humoral e imune celular. Apesar de no serem conhecidos os mecanismos de ao sobre as clulas imunes, um dos mecanismos possivelmente envolvidos o estimulo da produo de citosinas por macrfagos, que agiriam na amplificao dessas respostas (FISCHER et al., 2008). A administrao do extrato etanlico de prpolis verde brasileira (200 mg / kg) a camundongos durante trs dias aumentou a imunidade inata, ativando as etapas iniciais da resposta imune pela estimulao da expresso de TLR-2 e TLR-4 6, citocinas pr-inflamatrias (IL-1 e IL-6), produo de macrfagos e clulas do bao, contribuindo para o reconhecimento de microrganismos e para a activao de linfcitos por clulas apresentadoras de antgenos (ORSATTI et al., 2010 apud SFORCIN, 2010). A prpolis verde (2,5 e 5 mg / kg) tambm estimulou a produo de perxido de hidrognio (H2O2), favorecendo a ao microbicida (Orsi et al., 2000 apud SFORCIN, 2010). A ao da prpolis sobre a proliferao de linfcitos se apresenta na maioria dos ensaios como inibitria. Um dos mecanismos sugeridos a inibio por flavonides, sendo relatada a inibio da proliferao de linfcitos de camundongos in vitro (S-NUNES et al., 2003 apud FISCHER et al., 2008). A ativao de macrfagos por uma amostra de prpolis brasileira, tambm mostrou in vitro uma inibio da proliferao de linfcitos devido ao estimulo da produo de IFN- e NO. Altos nveis de IFN- estimulam a atividade da enzima xido ntrico sintetase induzvel (INOS) por macrfagos ativados, dessa forma tem-se a gerao de concentraes de NO prejudiciais a proliferao de linfcitos (GHERARD et al., 2000, apud SFORCIN,2008). O composto ativo da prpolis CAPE tambm pode levar a inibio de clulas T. O CAPE um inibidor especfico de NFkB, levando a inibio da proliferao de linfcitos, provavelmente devido a inibio da expresso gnica. O NFkB tem importante ao como fator de regulao da expresso de genes da resposta imune, estimulando a expresso de
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TLR-2 e TLR-4: Receptores do tipo Toll-like (TLR), TLR-2 e TLR-4 esto mais frequentemente envolvidos na resposta do hospedeiro contra fungos. (http://www.bv.fapesp.br/pt/projetos-regulares/24595/influenciareceptores-tlr-2-tlr/).

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citocinas inflamatrias, molculas do complexo de histocompatibilidade principal (MHC) e a adeso de molculas envolvidas na metstase de tumores ( ORBAN et al., 2000; BAEZARAJA; MUOZ-CNOVES, 2004 apud FICHER, 2008). Segundo FISCHER et al. (2008), o CAPE tambm capaz de inibir o fator nuclear de clulas T ativas (NFAT), levando a inibio da transcrio do gene de IL-2 e consequentemente a proliferao de clulas T. sugerido que alguns dos elementos constituintes da prpolis podem inibir clulas Th1 e Th2, uma vez que a prpolis mostrou-se capaz de inibir a produo das citocinas IL-12, IL-2 e IL-4 em teste. Em pesquisa com humanos foi inibida a produo de IL-12, IL-2, IL-4 e IL-10, ao passo que a produo de TGF-1 por clulas T reguladoras foi aumentada. A citocina TGF-1 influencia a diviso celular e pode diminuir a produo de outras citocinas e IL-12 age na regulao da diferenciao de clulas T para a clula de tipo Th1. O possvel mecanismo envolvido neste processo est na ao inibidora do CAPE sobre os fatores de transcrio NFkB e NFAT. Assim, CAPE inibe o gene de transcrio de IL-2, a expresso de IL-2R (CD25), e a proliferao de clulas T humanas (ANSORGE et al., 2003 apud SFORCIN, 2007). Dentre os diversos autores que abordam a ao anti-inflamatria da prpolis, Khayyal et al. (2003) apud Sforcin (2007) investigaram os efeitos de um extracto aquoso de prpolis (13%), administrada diariamente durante 2 meses como um adjuvante para a terapia de pacientes com asma leve a moderada. No fim do tratamento os pacientes mostraram uma reduo acentuada na incidncia e gravidade dos ataques noturnos e melhoria das funes de ventilao. Os resultados foram associados diminuio das prostaglandinas, leucotrienos, citocinas pr-inflamatrias (TNF-, IL-6, IL-8) e aumento de IL-10. Analisando estes dados se observa a possvel utilizao de substncias presentes na prpolis como imunosupressores e agentes anti-inflamatrios. A inibio de NFkB e estimulo da produo de NO mecanismo comum a ao de drogas como corticosterides. A vantagem da administrao da prpolis seria a no manifestao de efeitos colaterais. A inibio do NFkB pelo CAPE, levaria ainda a reduo da expresso de genes envolvidos na resposta inflamatria aguda, como a citocinas pr-inflamatrias IL- e TNF- (FISCHER et al., 2008). Uma pesquisa de grande destaque e interesse a de utilizao da prpolis como adjuvante em vacinas. FISCHER et al. ( 2007) realizaram estudos com extratos etanoicos da prpolis verde brasileira adicionados a Herpesvrus suno tipo 1 em uma vacina inativada, inoculada em camundongos. Foi observado incremento da resposta imune celular observandose aumento da expresso de mRNA de IFN-. Neste caso, no houve estmulo da resposta

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humoral. Com a adio de hidrxido de alumnio a vacina com prpolis verde brasileira e Herpesvrus suno tipo 1, houve aumento tanto da resposta celular quanto humoral em comparao a vacina que possua apenas hidrxido de alumnio como adjuvante. A ao da prpolis como adjuvante se deve possivelmente a grande concentrao de compostos fenlicos gerando incremento da resposta imune atravs do estmulo a proliferao de linfcitos. interessante observar que como adjuvante em vacinas a prpolis no mostrou ao supressora da resposta celular como visto anteriormente quando aplicada como medicamento. A prpolis pode, portanto, ser considerada um adjuvante no particulado, visto que de forma conceitual um adjuvante particulado considerado um imunomodulador, no dependendo de nenhuma partcula para sua atividade, e que se beneficia da associao com adjuvantes particulados (FICHER et al.,2007). O quadro a seguir acaba por resumir o grande nmero de aes imunomoduladoras da prpolis j abordadas e discutidas. Deve-se destacar e observar, que como havia sido explicitado no comeo deste captulo a prpolis apresenta sua ao atravs da potencializaro e supresso de eventos da resposta imune.

Quadro 4 - Ao imunomodulatria relacionada aos componentes ativos da prpolis. Fonte: Sforcin, 2007

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5 CONSIDERAES FINAIS Com a anlise dos estudos e testes revisados nessa monografia consegue-se observar a ao promissora da prpolis contra infeces ao estimular o sistema imune em sua ao microbicida. de relevncia observar que a ao direta da prpolis como droga antimicrobiana deve ser melhor esclarecida em pesquisas futuras. Como pode ser observado nos estudos abordados, existe uma ao in vitro demonstrada, porm em testes in vivo no se encontram nveis inibitrios satisfatrios. Provavelmente isso se d pela complexidade dos mecanismos de absoro desse composto, e a um problema relacionado a ingesto oral e aos processos digestivos. No foram encontrados estudos que abordem esse assunto, contudo existem numerosas citaes da comprovao do uso tpico da prpolis, demonstrando uma melhor ao local. A ao anti-inflamatria da prpolis tambm se mostra de grande destaque, devido a inibio ou supresso de eventos ligados a essa resposta, com principal destaque a inibio de linfcitos. Dessa forma, alguns usos acabam sendo comprovados como nos casos

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de auxlio no tratamento das dores de garganta, cuidados com machucados e queimaduras (tambm estando envolvida a ao antioxidante). O mais interessante ao se observar a utilizao da prpolis pelo ser humano a interao entre o homem e as abelhas. Trata-se de uma relao milenar de cooperao entre espcies, em que so utilizados os produtos apirios antes mesmo da comprovao de suas propriedades. A descoberta da prpolis como medicamento natural de grande interesse visto que esta possui uma gama de propriedades j citadas, apesar de no possuir todos os mecanismos de ao elucidados. Estas propriedades so potencializadas pela no apresentao de resistncia microbiana (demonstrada) e pela no presena de efeitos colaterais (MASSON, 1994). Entretanto, apesar de todo o avano das pesquisas sobre a prpolis preciso uma viso crtica sobre os objetivos e metas. Grande parte dos trabalhos busca uma molcula especfica deste composto responsvel pela propriedade de interesse, para observar seu mecanismo de ao. Com isto possvel observar uma busca tradicional da indstria farmacutica na obteno de uma molcula ativa que possa ser sintetizada para a produo de medicamentos e sua comercializao, obtendo direitos sobre a mesma. O que tem se mostrado no praticvel a prpolis. Como demonstrado em muitas pesquisas e como muitas vezes neste trabalho j foi abordado, existe uma ao de sinergismo dos diversos compostos da prpolis, mostrando que a ao de fraes isoladas no significativa. O efeito sinrgico desses componentes se mostra como uma grande vantagem devido quantidade de propriedades relacionadas e aos efeitos de ao intensificada, sendo possivelmente um dos motivos para a no resistncia microbiana (devido a grande complexidade). Dessa forma, seria de grande progresso um direcionamento de pesquisas para a comprovao de propriedades j citadas e a observao de novas utilizaes, mantendo a tradio da utilizao deste fitoterpico de forma aceita pelos parmetros cientficos hegemnicos.

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ANEXO

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ANEXO A- Quadro dos diversos componentes j encontrados na prpolis

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