COMO ESTUDIAMOS LAS CELULAS? COMO ESTUDIAMOS LAS CELULAS?

LOS PRINCIPALES AVANCES LOS PRINCIPALES AVANCES USO DE LA MICROSCOPIA (PERMITE VISUALIZAR POR PRIMERA VEZ LA CELULA) USO DE LA CENTRIFUGACION (PERMITE AISLAR Y ESTUDIAR COMPARTIMENTOS CELULARES) DESARROLLO DEL CULTIVO CELULAR (PERMITE OBTENER EN LABORATORIO CELULAS AISLADAS Y POR ELLO SISTEMAS DE ESTUDIO LIMPIOS) HOY: CULTIVO DE CELULAS MADRES TECNICAS DE SEPARACION DE MACROMOLECULAS (PERMITEN AISLAR MACROMOLECULAS Y ANALIZAR SU ESTRUCTURA Y FUNCION)

DESARROLLO DE LA MICROSCOPIA Y LA TEORIA CELULAR

Microscopio compuesto realizado por los hermanos Hans y Zacharias Jensen en 1590, en Midelburg, HOLANDA. Se considera el primer microscopio compuesto de la historia. Este microscopio se hace segn una copia del original de los HH. Jensen, aparecida en un anticuario de Paris en 1891, hoy da se cuestiona su autenticidad. Microscopio compuesto de Galileo Galilei 1612 ITALIA. (12 cm). Aunque Galileo Galilei no destac por sus estudios microscpicos, si lo hizo por la aplicacin de las lentes en diversos aparatos como el telescopio.

Microscopio simple realizado por Antoni van Leeuwenhoek, 1632, en Leyden, HOLANDA. (10 cm). Con este microscopio simple se consiguen imgenes de mayor calidad que con el microscopio compuesto de los HH Jensen, lo que permiti a Leeuwenhoek hacer los descubrimientos de infusorios, eritrocitos, etc. pioneros en los hallazgos microscpicos

APARECE EL CONCEPTO DE CELULA

Microscopio compuesto construido por Christopher Cock segn diseo de Robert Hooke, 1670. INGLATERRA. (50 cm). A Robert Hooke se debe la utilizacin del vocablo "clula" al denominar as a las celdillas del corcho observadas probablemente con un microscopio como este cuyo original se conserva en "La Court Collection in the Science Museum at South Kensington, England"

LA MICROSCOPIA ( para ver lo pequeo ) Tapa del libro Micrographia de Robert Hooke publicado en 1665 Concepto de clula por primera vez LA MICROSCOPIA ( para ver lo pequeo ) Tapa del libro Micrographia de Robert Hooke publicado en 1665 Concepto de clula por primera vez

APARECE LA TEORIA CELULAR

Robusto microscopio con soporte de tres barras de metal. (30 cm). Este tipo de microscopios se fabric en Viena y fue utilizado entre otros por el eminente patlogo alemn Rudolph L. Virchow y el bacteriologo alemn Robert Koch, entre 1850 y 1875

La microscopia y la TEORIA CELULAR La microscopia y la TEORIA CELULAR Mathias Schleiden (1838) concluy de que todos los tejidos vegetales estaban formados por clulas. Theodor Schwann extendi las conclusiones de Schleiden hacia los animales y propuso una base celular para toda forma de vida. Rudolf Virchow (1858) al hacer estudios sobre citognesis de los procesos cancerosos llega a la siguiente conclusin: "las clulas surgen de clulas preexistentes" o como lo deca en su axioma "ommni cellula e cellula". 1. En principio, todos los organismos estn compuestos de clulas. 2. En las clulas tienen lugar las reacciones metablicas de organismo. 3. Las clulas provienen tan solo de otras clulas preexistentes. 4. Las clulas contienen el material hereditario.

"ommni cellula e cellula". Virchow era antagonista a la Teora de origen de las especies de Darwin, solo la considero como una hiptesis. En este sentido y en forma de ancdota, fue contrario a la idea de que el HOMBRE DE NEANDERTAL (descubierto en 1856) fuese un humano primitivo, ya que lo consider un individuo deforme (idiota, por la forma de su crneo, raqutico y artrtico por la forma de sus huesos Die cellularpathologie in ihrer Begrndung auf physiologische und pathologische Gewebenlehre (Patologa celular basada sobre Histologa patolgica y fisiolgica

EL DESARROLLO DE LA MICROSCOPIA USO DE COLORANTES, TINCIONES Y SUSTANCIAS FLUORESCENTES PARA VISUALIZAR LA CELULA QUE ES TRANSPARENTE

TRES TIPOS DE MICROSCOPIA: OPTICA, ELECTRONICA DE TRANSMISION, ELECTRONICA DE BARRIDO (SCANNING)

Microscopio ptico, limitado por la longitud de onda de la luz visible ( solo permite visualizar estructuras cuyo tamao no sea superior o inferior a la longitud de onda de fuente de luz, para la luz visible entre 0,4 um (400-700 nm). Microscopio ptico, limitado por la longitud de onda de la luz visible ( solo permite visualizar estructuras cuyo tamao no sea superior o inferior a la longitud de onda de fuente de luz, para la luz visible entre 0,4 um (400-700 nm).

la a 0,7

la a 0,7

La resolucin del microscopio ptico La resolucin del microscopio ptico

Obtencin de muestras de un tejido (el ultramicrtomo) Obtencin de muestras de un tej ido (el ultramicrtomo) CRIOSTATO

La resolucin de la microscocopia ptica depende de tres factores: Fuente de luz Grosor de la muestra Tincin Antes de cortar debo fijar (ceras o resinas) o congelar. Cada una de estas tcnicas tiene sus inconvenientes y ventajas

MICROSCOPIO OPTICO DE FLUORESCENCIA MICROSCOPIO OPTICO DE FLUORESCENCIA

Uso sondas fluorescentes Uso sondas fluorescentes

Triple marcaje en microscopa de fluorescencia Triple marcaje en microscopa de fluo rescencia MTs: verde Centrmeros: rosa DNA: azul

Cuatro tipos de microscopa ptica De campo claro De contraste de fases De contraste de fases interferencial De campo oscuro

Uso de procesamiento electrnico de imgenes

Permiten visualizar imgenes que no es posible hacerlo a luz ptica utilizando el anlisis computacional de imgenes. Se utiliza una luz de menor intensidad por un tiempo ms prolongado sin afectar la muestra. MICROSCOPIA EN CONTRASTE DE FASES

MICROCINEMATOGRAFIA MICROCINEMATOGRAFIA http://www.youtube.com/watch?v=DD3IQk nCEdc&feature=youtu.be

LA MICROSCOPIA ELECTRONICA DE TRANSMISION

Utiliza un haz de electrones atraviesa la muestra. Los electrones que atraviesan la muestra forman una imagen sobre una placa fotogrfica o sobre una pantalla sensible al impacto de los electrones. Esta se lleva a un computador. Los microscopios electrnicos producen imgenes sin color, puesto que este es una propiedad de la luz y no hay una forma posible de reproducir este fenmeno mediante los electrones; sin embargo, es posible colorizar las imgenes posteriormente, aplicando tcnicas de retoque digital a travs del computador. El primer microscopio electrnico fue diseado por Ernst Ruska y Max Knoll entre 1925 y 1930

Caractersticas principales del microscopio ptico y del electrnico

Microscopia de un alga roja antes de formar su pared Microscopia de un alga roja antes de formar su pared MICROSCOPIO ELECTRONICO DE TRANSMISION SIEMMENS

LAS CELULAS TIENEN DIFERENTE FORMA SEGN SU FUNCION

CELULAS HEPATICAS CELULAS DEL TEJIDO ADIPOSO (HEPATOCITOS) (ADIPOCITOS)

El microscopio electrnico de barrido o de scanning

MICROSCOPIO ELECTRONICO DE BARRIDO NIKON-ZEISS

MICROSCOPIA ELECTRONICA DE BARRIDO CONFOCAL: EL MUNDO TRIDIMENSIONAL

MICROSCOPIA DE MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA FLUORESCENCIA DE BARRIDO

IMAGEN OBTENIDA CON UN MICROSCOPIO DE BARRIDO

ACAROS DE LA PIEL VISTOS CON MICROSCOPIA ELECTRONICA DE BARRIDO

IMAGEN DE ERITROCITOS HUMANOS OBTENIDA CON MICROSCOPIA ELECTRONICA DE BARRIDO

IMGENES OBTENIDAS CON MICROSCOPIO DE BARRIDO

UN LEUCOCITO (GLOBULO BLANCO) UN GRANO DE POLEN

UN MACROFAGO FAGOCITANDO BACTERIAS

IMAGEN DE MICROSCOPIA DE BARRIDO DE UN TUMOR CANCEROSO

CELULAS SANGUINEA CELULAS DE LA PIEL (LINFOCITOS) (FIBROBLASTOS)

LA CENTRIFUGACION

DESARROLLO DEL FRACCIONAMIENTO SUBCELULAR

ULTRACENTRIFUGA PREPARATIVA

SEPARACION DE FRACCIONES SUBCELULARES MEDIANTE LA CENTRIFUGACION DIFERENCIAL HOMOGENIZACION

USO DE COMPARTIMENTOS CELULARES PARA ESTUDIAR SU FUNCIN Y ESTADO EN EL DESARROLLO DE LAS FUNCIONES BIOLOGICAS EJ: ESTUDIO DE SISTEMAS DE DETOXIFICACIN EN MICROSOMAS HEPATICOS (CONOCIMIENTO EN METABOLISMO DE FARMACOS)

EL CULTIVO CELULAR

Cultivo de clulas animales

DR. ALEXIS CARREL (1873 1944) CELULAS EN CULTIVO PRIMARIO (PREMIO NOBEL 1912)

CHARLES LINDBERGH Y ALEXIS CARREL CON SU DISEO DE UNA BOMBA DE PERFUSION, PRECURSORA DE LAS UTILIZADAS EN EL TRANSPLANTE DE ORGANOS

CAMPANA DE FLUJO LAMINAR

ESTUFAS DE CULTIVO O2/CO2 MEDIOS DE CULTIVO

SRA. HENRIETTA LACKS (1920-1951) LAS CELULAS INMORTALES SRA. HENRIETTA LACKS (1920-1951) LAS CELULAS INMORTALES CELULAS HeLa

Inmunofluorescencia de clulas HeLa teidas con anti-tubulina MF convencional

Confocal

Lneas celulares Lneas celulares

CELULAS MADRES O CELULAS EMBRIONARIAS

TOTIPOTENCIALIDAD Y MULTIPOTENCIALIDAD DE LAS CELULAS MADRES

DIFERENCIACION DE LAS CELULAS MADRES FRENTE A DIFERENTES ESTIMULOS LLAMADOS FACTORES DE CRECIMIENTO

CULTIVO DE CELULAS MADRE (STEM CELLS, PLURIPOTENCIALES, TOTIPOTENCIALES), DESCUBIERTAS EN 1963 POR ERNEST McCULLOCH Y JAMES TILL EN CANADA * * * LA TECNICA DE REVERSION DE CELULAS DIFERENCIADAS A PLURIPOTENCIALES DESCUBIERTA POR DOUGLAS MELTON DE HARVARD (2008) ABRE ESPECTACULARES POSIBILIDADES DE CURA DE DIABETES, PARKINSON, CARDIOVASCULARES, ETC.

Clonacin teraputica

Una nia supera un cncer de cerebro tras ser tratada con clulas madre de su cordn umbilical Alba, entre sus padres, posando en su domicilio de Cabra. | Madero Cubero, ESPAA

Produccin de clulas hbridas o hibridomas

Preparacin de hibridomas para una funcin especfica

DECLARACION DE HELSINKI Adoptada por la 18 Asamblea Mdica Mundial Helsinki, Finlandia, Junio 1964 y enmendada por la 29 Asamblea Mdica Mundial Tokio, Japn, Octubre 1975 35 Asamblea Mdica Mundial Venecia, Italia, Octubre 1983 41 Asamblea Mdica Mundial Hong Kong, Septiembre 1989 48 Asamblea General Somerset West, Sudfrica, Octubre 1996 y la 52 Asamblea General Edimburgo, Escocia, Octubre 2000 La Declaracin de Helsinki ha sido promulgada por la Asociacin Mdica Mundial (WMA) como un cuerpo de principios ticos que deben guiar a la comunidad mdica y otras personas que se dedican a la experimentacin con seres humanos.

ESTRUCTURACION DE UN COMIT DE ETICA BIOMEDICA CUEID: Comisin universitaria de tica de la investigacin y la docencia CEISH: Comit de tica para las Investigaciones relacionadas con Seres Humanos CEIAB: Comit de tica en la Investigacin con agentes biolgicos y organismos modificados genticamente

El ratn como modelo de anomalas genticas del desarrollo humano