Muchas de las propiedades de las disoluciones verdaderas se deducen del pequeo tamao de las partculas dispersas.

En general, forman disoluciones verdaderas las sustancias con un peso molecular inferior a 10 4 dalton. Algunas de estas propiedades son funcin de la naturaleza del soluto (color, sabor, densidad, viscosidad, conductividad elctrica, etc.). Otras propiedades dependen del disolvente, aunque pueden ser modificadas por el soluto (tensin superficial, ndice de refraccin, viscosidad, etc.).

Sin embargo, hay otras propiedades ms universales que slo dependen de la concentracin del soluto y no de la naturaleza de sus molculas. Estas son las llamadas propiedades coligativas. Las propiedades coligativas no guardan ninguna relacin con el tamao ni con cualquier otra propiedad de los solutos. Son en funcin slo del nmero de partculas y son resultado del mismo fenmeno: el efecto de las partculas de soluto sobre la presin de vapor del disolvente (Ver Figura superior). Las cuatro propiedades coligativas son:

descenso de la presin de vapor del disolvente elevacin ebulloscopia descenso crioscpico presin osmtica

DESCENSO DE LA PRESION DE VAPOR DEL DISOLVENTE: La presin de vapor de un disolvente desciende cuando se le aade un soluto no voltil. Este efecto es el resultado de dos factores:

1. la disminucin del nmero de molculas del disolvente en la superficie libre 2. la aparicin de fuerzas atractivas entre las molculas del soluto y las molculas del disolvente, dificultando su paso a vapor Cuanto ms soluto aadimos, menor es la presin de vapor observada. La formulacin matemtica de este hecho viene expresada por la observacin de Raoult (foto de la izquierda) de que el descenso relativo de la presin de vapor del disolvente en una disolucin es proporcional a la fraccin molar del soluto. ELEVACION EBULLOSCOPICA: La temperatura de ebullicin de un lquido es aqulla a la cual su presin de vapor iguala a la atmosfrica (Figura de la derecha). Cualquier disminucin en la presin de vapor (como al aadir un soluto no voltil) producir un aumento en la temperatura de ebullicin (Ver Figura de la tabla). La elevacin de la temperatura de ebullicin es proporcional a la fraccin molar del soluto. Este aumento en la temperatura de ebullicin (DT e) es proporcional a la concentracin molal del soluto: DTe = Ke m La constante ebulloscpica (Ke) es caracterstica de cada disolvente (no depende de la naturaleza del soluto) y para el agua su valor es 0,52 C/mol/Kg. Esto significa que una disolucin molal de cualquier soluto no voltil en agua manifiesta una elevacin ebulloscpica de 0,52 C.

DESENSO CRIOSCOPICO: La temperatura de congelacin de las disoluciones es ms baja que la temperatura de congelacin del disolvente puro (Ver Figura de la tabla). La congelacin se produce cuando la presin de vapor del lquido iguala a la presin de vapor del slido. Llamando Tc al descenso crioscpico y m a la concentracin molal del soluto, se cumple que: DTc = Kc m Siendo Kc la constante crioscpica del disolvente. Para el agua, este valor es 1,86 C/mol/Kg. Esto significa que las disoluciones molales (m=1) de cualquier soluto en agua congelan a -1,86 C.

PRESION OSMOTICA: La presin osmtica es la propiedad coligativas ms importante por sus aplicaciones biolgicas, pero antes de entrar de lleno en el estudio de esta propiedad es necesario revisar los conceptos de difusin y de smosis. Difusin es el proceso mediante el cual las molculas del soluto tienen a alcanzar una distribucin homognea en todo el espacio que les es accesible, lo que se alcanza al cabo de cierto tiempo. En Biologa es especialmente importante el fenmeno de difusin a travs de membranas, ya que la presencia de las membranas biolgicas condiciona el paso de disolvente y solutos en las estructuras celulares.

La presencia de una membrana separando dos medios diferentes impone ciertas restricciones al proceso de difusin de solutos, que dependern fundamentalmente de la relacin entre el dimetro de los poros de la membrana y el tamao de las partculas disueltas. Las membranas se clasifican en cuatro grupos:

impermeables: no son atravesadas ni por solutos ni por el disolvente. semipermeables: no permiten el paso de solutos verdaderos, pero s del agua. dialticas: son permeables al agua y solutos verdaderos, pero no a los solutos coloidales. permeables: permiten el paso del disolvente y de solutos coloidales y verdaderos; slo son impermeables a las dispersiones groseras.

En Biologa y en Fisiologa, al hablar de disolvente nos referimos al agua, pero los solutos pueden ser:

coloidales (protenas, polisacridos) verdaderos de tipo molecular (glucosa, urea) verdaderos de tipo salino (NaCl, KHCO3)

smosis es la difusin de lquidos a travs de membranas. Supongamos una disolucin de NaCl separada del disolvente por una membrana semipermeable que, como hemos visto, permite el paso del agua pero no de la sal (Figura izquierda de la tabla). El agua tiende a atravesar la membrana, pasando de la disolucin ms diluda a la ms concentrada (Figura central de la tabla), o sea, en el sentido de igualar las concentraciones. Esta tendencia obedece al segundo principio de la termodinmica y se debe a la existencia de una diferencia en la presin de vapor entre las dos disoluciones. El equilibrio se alcanza cuando a los dos lados de la membrana se igualan las concentraciones, ya que el flujo neto de agua se detiene.

Se define la presin osmtica como la tendencia a diluirse de una disolucin separada del disolvente puro por una membrana semipermeable (Figura central de la tabla). Un soluto ejerce presin osmtica al enfrentarse con el disolvente slo cuando no es capaz de atravesar la membrana que los separa. La presin osmtica de una disolucin equivale a la presin mecnica necesaria para evitar la entrada de agua cuando est separada del disolvente por una membrana semipermeable (Figura derecha de la tabla). Para medir la presin osmtica se utiliza el osmmetro (Figura de la derecha), que consiste en un recipiente cerrado en su parte inferior por una membrana semipermeable y con un mbolo en la parte superior. Si introducimos una disolucin en el recipiente y lo sumergimos en agua destilada, el agua atraviesa la membrana semipermeable y ejerce una presin capaz de elevar el mbolo hasta una altura determinada. Sometiendo el mbolo a una presin mecnica adecuada se puede impedir que pase el agua hacia la disolucin, y el valor de esta presin mecnica mide la presin osmtica. Las leyes que regulan los valores de la presin osmtica para disoluciones muy diludas (como las que se manejan en Biologa) son anlogas a las leyes de los gases. Se conocen con el nombre de su descubridor Jacobus H. Van t'Hoff (fotografa de la izquierda), premio Nobel de Qumica en 1901, y se expresan mediante la siguiente frmula: p= m R T

Donde p representa la presin osmtica, m es la molalidad de la disolucin, R es la constante universal de los gases y T es la temperatura absoluta. Si comparamos la presin osmtica de dos disoluciones podemos definir tres tipos de disoluciones:

disoluciones isotnicas son aqullas que manifiestan la misma presin osmtica que la disolucin de referencia disoluciones hipotnicas son aqullas que manifiestan menor presin osmtica que la disolucin de referencia disoluciones hipertnicas son aqullas que manifiestan mayor presin osmtica que la disolucin de referencia

La membrana del eritrocito puede considerarse como una membrana semipermeable, que permite el paso del agua, pero no de las sales. En un medio isotnico (de igual presin osmtica), el eritrocito permanece inalterable. Si el eritrocito se introduce en agua destilada o en un medio hipotnico el agua atravesar la membrana hacia el citoplasma, con lo que aumenta el volumen celular, distendiendo la membrana hasta que llega un punto en que sta se rompe. Este fenmeno se conoce con el nombre de hemolisis. Si el eritrocito se pone en un medio hipertnico (de mayor presin osmtica), el agua sale del eritrocito hacia el exterior, con lo cual su volumen disminuye, y la membrana se retrae, de forma que ofrece al microscopio un aspecto estrellado.

Resulta, por tanto, vital para la clula mantener constante la presin osmtica del medio intersticial. Cuando la clula se encuentra en un medio donde la osmolaridad es distinta a la de su medio interno, tanto su funcionamiento como su propia integridad se encontrarn amenazados.
MICROSCOPIA DE CAMPO OSCURO:

El microscopio de campo oscuro utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espcimen. El objeto iluminado dispersa la luz y se hace as visible contra el fondo oscuro que tiene detrs, como las partculas de polvo iluminadas por un rayo de sol que se cuela en una habitacin cerrada. Por ello las porciones transparentes del espcimen quedan oscuras, mientras que las superficies y partculas se ven brillantes, por la luz que reciben y dispersan en todas las direcciones, incluida la del eje ptico que conecta el espcimen con la pupila del observador. Esta forma de iluminacin se utiliza para analizar elementos biolgicos transparentes y sin pigmentar, invisibles con iluminacin normal, sin fijar la muestra, es decir, sin matarla. Tambin es bastante utilizado en la observacin de muestras metalogrficas para la observacin de detalles en superficies con alta reflectancia. El objetivo recibe la luz dispersa o refractada por las estructuras del espcimen. Para lograrlo, el microscopio de campo oscuro est equipado con un condensador especial que ilumina la muestra con luz fuerte indirecta. En consecuencia el campo visual se observa detrs de la muestra como un fondo oscuro sobre el cual aparecen pequeas partculas brillantes de la muestra que reflejan parte de la luz hacia el objetivo. El efecto es similar a las partculas de polvo que se ven en el haz de luz emanado de un proyector de diapositivas en una habitacin oscura. La luz reflejada por las partculas de polvo llegan hasta la retina del ojo, lo que las hace visibles. La luz dispersa permite incluso distinguir partculas ms pequeas que el poder separador del sistema ptico usado por transparencia. Los condensadores que se emplean en Microscopa de campo oscuro son de dos tipos: del tipo paraboloide (tiene una superficie espejada), y los del tipo cardioide, con dos superficies espejadas. El empleo de uno u otro es indistinto, mediante

cualquiera de ambos, la luz no incide directamente en el objetivo (este es el objetivo de estos condensadores), sino que incide con una apertura numrica mayor al del objetivo.
MICROSCOPIA ELECTRONICA DE TRANSMISION:

Un microscopio electrnico de transmisin (TEM, por sus siglas en ingls, o MET, en espaol) es un microscopio que utiliza un haz de electrones para visualizar un objeto, debido a que la potencia amplificadora de un microscopio ptico est limitada por la longitud de onda de la luz visible. Lo caracterstico de este microscopio es el uso de una muestra ultrafina y que la imagen se obtenga de los electrones que atraviesan la muestra. Los microscopios electrnicos de transmisin pueden aumentar un objeto hasta un milln de veces.

Comparacin de la formacin de la imagen en un microscopio de transmisin ptica, un microscopio electrnico de transmisin (TEM), un microscopio electrnico de barrido (SEM) y un tubo de rayos catdicos (CRT) de pantalla de TV.

MICROSCOPIA DE FUERZA ATOMICA:

El Microscopio de fuerza atmica (AFM, de sus siglas en ingls Atomic Force Microscope) es un instrumento mecano-ptico capaz de detectar fuerzas del orden de los nanonewtons. Al rastrear una muestra, es capaz de registrar continuamente su topografa mediante una sonda o punta afilada de forma piramidal o cnica. La sonda va acoplada a un listn o palanca microscpica muy flexible de slo unos 200 m. El microscopio de fuerza atmica ha sido esencial en el desarrollo de la nanotecnologa, para la caracterizacin y visualizacin de muestras a dimensiones nanomtricas ( ).

Comparacin del AFM con otros microscopios

Microscopio ptico El microscopio ptico es una herramienta muy til para obtener imgenes de muestras orgnicas e inorgnicas, pero est limitado para una resolucin de 1mm a 1 micra. Microscopio electrnico El microscopio electrnico tiene una resolucin entre 1mm y 1nm. Es, por lo tanto, idneo para la determinacin de estructuras a nivel molecular y atmico. La resolucin no est limitada por la difraccin, pero s por las lentes. El microscopio de campo cercano tiene una resolucin todava mayor: entre 1m y 1. TEM El Microscopio electrnico de transmisin, tiene las siguientes caractersticas que lo hacen muy til:

Resolucin atmica. Puede determinarse estructuras en 2 dimensiones. Interaccin electrones a electrones.

SEM El Microscopio electrnico de barrido tiene las siguientes caractersticas:

Resolucin atmica. Requiere vaco. Debe cubrirse a menudo el espcimen. Permite caractersticas superficiales.

STM El microscopio de efecto tnel (STM) es un instrumento que permite visualizar regiones de alta o baja densidad electrnica superficial, y de ah inferir la posicin de tomos individuales o molculas en la superficie de una red. La observacin atmica se ha vuelto una tarea comn en muchos laboratorios debido al bajo costo de este tipo de microscopa en comparacin con la microscopa electrnica. Las tcnicas de microscopa de barrido por sondeo (SPM: Scanning probing microscopy) que incluyen al STM y al AFM se utilizan en reas de la ciencia que van desde la biologa hasta la fsica del estado slido. Consideraciones

Las muestras deben ser conductoras. Algunas superficies parecen demasiado lisas al STM, la altura aparente o corrugacin es de 1/100 a 1/10 dimetros atmicos. Entonces, para resolver tomos individuales la distancia entre punta y muestra debe mantenerse constante a menos de 1/100 de dimetro atmico o hasta 0.002 nm., por ello el STM debe aislarse de las vibraciones. Debe tomarse en cuenta que el resultado es una visualizacin que permite conocer caractersticas de la muestra. No es una fotografa de los tomos en la superficie. Los tomos parecen tener superficies slidas en las imgenes de STM, pero en realidad no las tienen. Sabemos que el ncleo de un tomo est rodeado de electrones en constante movimiento. Lo que parece una superficie slida es en realidad una imagen de un conjunto de electrones. Las imgenes tambin dependen de ciertos mecanismos de interaccin punta-muestra que no se entienden bien hasta la fecha.

Aun cuando no necesita alto vaco para su operacin, es deseable para eliminar contaminacin y adems una cmara de vaco asla de vibraciones externas.

Recientemente (4 de junio de 2007) un equipo liderado por el Consejo Superior de Investigaciones Cientficas (CSIC) ha perfeccionado la tcnica empleada por los microscopios atmicos. La nueva tcnica, denominada Phase Imaging AFM, est basada en la microscopa de fuerzas, y permite realizar medidas tanto en aire como en medios lquidos o fisiolgicos. El desarrollo de esta tcnica podra tener aplicaciones en reas diferenciadas, como la biomedicina, la nanotecnologa, la ciencia de materiales o estudios medioambientales.
http://www.ehu.es/biomoleculas/agua/coligativas.htm