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UFSC Departamento de Qumica QMC 5119 Introduo ao Laboratrio de Qumica 2011/1 Prof. Marcos Aires de Brito Prof. Fbio Peres Gonalves Prof. Jos Carlos Gesser

EXPERINCIA 05: CROMATOGRAFIA EM PAPEL

1. Questes de estudo - A tinta de canetas hidrocor uma substncia ou uma mistura de substncias? Como responder esta questo com o auxlio de um experimento? 2. Cromatografia Uma das tcnicas de separao de mistura bastante utilizada a cromatografia. Esta tcnica foi desenvolvida por Michael Tswett (botnico russo), no comeo do sculo XX, passando atravs de uma coluna cromatogrfica, preenchida com carbonato de clcio (CaCO3), pigmentos extrados de plantas. A cromatografia pode ser utilizada para a anlise de misturas em seus componentes. utilizada para separar e identificar (mediante a comparao com padres) substncias no trabalho policial-qumico, por exemplo, drogas e narcticos podem ser identificados na urina ou em uma amostra do sangue. Existem vrios tipos de tcnicas cromatogrficas: cromatografia em coluna, HPLC (High Performance Liquid Choromatography), TLC (Thin Layer Choromatography), GLC (Gas Liquid Choromatography)e cromatografia em papel. O conhecimento sobre a polaridade das molculas das substncias muito importante na cromatografia em papel. Sabe-se que as substncias cujas molculas so polares interagem mais intensamente com solventes polares. As substncias apolares tm mais afinidade com solventes apolares. Assim, variando a polaridade do solvente, ou misturas de solventes, podem-se separar os componentes de uma amostra.
Na cromatografia em papel se marca no papel com um lpis o ponto de partida da amostra a ser aplicada no papel que colocado em um bquer fechado (cuba cromatogrfica), com solvente suficiente para molhar apenas a parte inferior do papel, no tocando a amostra, conforme a Figura 1. O solvente sobe, por capilaridade, pelo papel separando os componentes da mistura (Figura 2). As manchas dos componentes da mistura que so menos adsorvidos ao papel deslocam-se mais do que os componentes mais adsorvidos ao papel.

Grampo Origem Solvente

Fig.1: Representao da montagem experimental da cromatografia em papel.

A seguir se apresenta a definio de alguns termos utilizados na cromatografia em papel: - suporte: papel sobre o qual fica retida a fase estacionria; - fase mvel: lquido ou mistura de lquidos que sobe por capilaridade pelo papel arrastando os solutos aplicados no papel. Este lquido ou mistura de lquidos o que se denominou acima de solventes; - cromatograma: papel que apresenta as substncias separadas - revelador ou agente cromognico: agente fsico ou qumico que possibilita visualizar substncias separadas pela cromatografia em papel A razo entre a distncia percorrida pelo composto (da origem ao centro da mancha) e a distncia percorrida pelo solvente constante e denotado por Rf, ou seja,
Rf = C S

C = distncia percorrida pelo composto, da origem ao centro da mancha. S = distncia percorrida pelo solvente da origem a linha superior (linha do solvente). Rf = razo de frente do solvente/ fator de retardamento (valor caracterstico de uma determinada substncia) A Figura 2 representa um cromatograma em papel com 4 compostos (A, B, C e D) e com 4 misturas desses compostos (i, ii, iii e iv).

Fig.2: Representao de (em) um cromatograma em papel. A separao dos componentes de uma mistura neste tipo de cromatografia est baseada nas diferenas de solubilidade dos seus componentes na fase mvel e estacionria. Os componentes com menor solubilidade na fase estacionria tm um deslocamento mais rpido ao longo do papel. De outra parte, os componentes com maior solubilidade na fase estacionria sero consequentemente retidos e tero uma movimentao mais lenta.

Portanto, o processo de separao envolve a interao dos solutos com as duas fases. Existem outros fatores que influenciam nas interaes do soluto com as duas fases, como: adsoro na superfcie da fase estacionria e carga do composto. Resumindo, temos que os vrios componentes de uma mistura, devido a diferentes interaes com a fase estacionria e mvel, so separados em seus componentes, mas para se reproduzir a anlise cromatogrfica precisamos utilizar as mesmas condies experimentais. 3. Pr-laboratrio 1. Apresente uma escala de polaridade de solventes, iniciando com gua (mais polar) e finalizando com tetracloreto de carbono (menos polar). 2. Quais os fatores envolvidos na separao de uma mistura de compostos por cromatografia? 5. Faa um comentrio do arquivo apresentado no site http://www.yesmag.ca/projects/paper_chromaBW.html 4. Em relao s tintas de caneta hidrocor marque a opo a abaixo que expressa a sua hiptese em relao sua constituio: a) ( ) a tinta de canetas hidrocor formada por apenas um composto qumico. b) ( ) a tinta de caneta hidrocor formada pela mistura de diferentes compostos. c) ( ) Outra:______________________________________________________ 5. Por que se utiliza lpis grafite (e no caneta) para marcar no papel.? 6. O que significa capilaridade? 7. Qual a composio qumica do papel? Cite exemplos. Como ele fabricado? 8. Seria possvel separar uma mistura de ons metlicos em soluo pela tcnica da cromatografia em papel? 4. Procedimentos: A. Utilizao da tinta de caneta hidrocor Utilizando uma rgua, trace uma linha reta com um lpis a 1,5 cm das extremidades do papel. Marque, em uma das extremidades, seis pontos eqidistantes com um lpis ao longo da reta, numerando-os de 1 a 6. Faa pequenos pontos com cada uma das canetas seguindo a ordem das cores (vermelho, verde, amarelo...). Enrole o papel na forma de um cilindro e coloque grampos para manter a forma de cilindro (veja a figura acima). Obs: deixe um pequeno espao ( 1mm) entre as duas extremidades de forma a no se tocarem. Coloque esse cilindro de papel no bquer contendo a mistura de solventes na proporo 1:1:1 de etanol/1-butanol/amnia 2 mol L-1 (esta ser a fase mvel utilizada neste experimento). Cubra o bquer com um plstico e amarre com uma liga de borracha, para evitar a evaporao da mistura de solventes.

- Quando a linha do solvente atingir a marca superior no papel, remova-o do bquer.

- Remova os grampos e deixe-o secar naturalmente. - Depois de seco faa um circulo com um lpis ao redor de cada mancha e calcule todos os Rf. B. Utilizao de ctions em soluo - Utilizando outro papel e aps marcar com um lpis a linha para as duas extremidades, faa pequenos pontos com as solues dos ons metlicos e com a soluo desconhecida, usando um tubo capilar (um capilar para cada soluo). Grampeie o papel na forma de um cilindro, como voc fez para o cromatograma anterior e coloque no bquer contendo a mistura HCl/acetona (7 mL de HCl 6 mol L-1/ 25 mL de acetona). Cubra o bquer, como anteriormente, com um plstico para evitar a evaporao da mistura solvente.

- Quando a linha do solvente atingir a marca superior no papel, remova-o do bquer. Seque o cromatograma dos ons metlicos, ao ar quente utilizando um secador de cabelos. Circule com um lpis qualquer mancha no cromatograma e anote a cor. Para revelar todas as cores desse cromatograma, coloque-o aberto sobre o bquer (na capela qumica com o exaustor ligado) que contm amnia 6 mol L-1 e cubra-o com um vidro de relgio por 5 minutos (repita o mesmo procedimento para a outra metade do cromatograma). Este processo de revelao se constitui de reaes entre os ctions com molculas de amnia (NH3). Seque o cromatograma novamente demarcando e anotando a cor de cada mancha. Marque a posio de qualquer mancha nova que aparecer, anote qualquer mudana observada e calcule todos os Rf..

5. Cromatografia em Giz? Leia o artigo indicado abaixo sobre uma possibilidade didtica a ser explorada no ensino mdio de desenvolvimento de cromatografia em giz. Com os devidos cuidados, voc pode realizar facilmente este experimento em casa. Para tanto, voc precisa de barra de giz branco para fazer o experimento. preciso ter a disposio ainda, pelo menos, lcool etlico e caneta hidrocor. Compare o resultado obtido no experimento com aquele da cromatografia em papel feito em sala de aula. Qual a sua opinio sobre a utilizao didtica do experimento de cromatografia em giz? Coloque fotos deste experimento realizado por voc no relatrio. Artigo sobre cromatografia em giz: PALOSCHI, Rosilia; ZENI, Mara; RIVEROS, Raul. Cromatografia em giz no ensino de qumica: didtica e economia. Qumica Nova na Escola, n.7, p.35-36, 1998. Disponvel em: http://qnesc.sbq.org.br/online/qnesc07/exper1.pdf.

6. Questionrio 1. Atravs dos cromatogramas que voc obteve: Indique quais os pigmentos que constituem a cor preta. Calcule o Rf para cada pigmento que compe a tinta das canetas hidrocor com diferentes cores. Calcule o Rf para cada on metlico, a partir do cromatograma obtido. Qual a composio da amostra desconhecida? Se no cromatograma da questo anterior, a frente do solvente chegasse somente at a metade da altura, ou seja, se deixssemos um tempo menor com a parte inferior imersa no solvente, o valor do Rf correspondente a cada on seria diferente? Justifique a resposta. Os valores do Rf de compostos polares tenderiam a aumentar ou a diminuir com o aumento da polaridade do solvente? Justifique a sua resposta. Por que conveniente fazer manchas bem pequenas para a obteno de um cromatograma? Ao se fazer uma cromatografia em papel de uma determinada amostra, que estavamos suspeitando que seria de ons cobre ou mangans, obtivemos um valor de Rf igual a 0,6. Pergunta-se: i) ii) Se a distncia do limite superior que a mistura solvente chegou mancha que corresponde a posio da amostra foi de 2,0 cm, qual a distncia desta mancha posio de partida? Qual o procedimento para se tirar a dvida se a amostra desconhecida contm ons cobre ou mangans? i) ii)

2. 3.

4. 5. 6.

Ateno: Voc deve anexar as respostas s questes do pr-laboratrio da experincia 6 as respostas ao questionrio desta experincia. Portanto, para esta experincia, consideramos como relatrio as respostas ao questionrio.