COSTOS DE RECUPERACION Y PURIFICACION DE METABOLITOS Las etapas de recuperacin y purificacin representan una parte muy importante en el proceso de obtencin

del compuesto de inters; se desea recuperar el mximo de producto, en el mnimo costo. Cliffe (1996) reporta que estas etapas pueden representar el 60% de los costos totales de produccin, excluyendo los costos de la materia prima. Si las etapas de recuperacin y purificacin no se manejan en forma adecuada, los costos pueden aumentar hasta ocasionar que el proceso no sea rentable.

Al finalizar la fermentacin, e caldo contiene una mezcla de compuestos, tales como: biomasa, restos de sustratos no utilizados por la clula y metablicos primarios y secundarios. El mtodo mas empleado para separar y purificar el compuesto deseado se escoge de acuerdo con los siguientes factores:

* El tipo y estabilidad del producto * La concentracin del producto * La presencia y la naturaleza de otras sustancias en el caldo de fermentacin * El grado de purificacin mnimo requerido * La localizacin del producto con respecto de la celular (extracelular o intracelular) * El uso que se le va a dar al producto y su precio de venta Con base en estos criterios, es ms sencillo definir el camino por seguir para obtener el producto purificado. Algunos de los procedimientos necesarios para recuperar y purificar el producto final son comunes a muchos de los procesos, mientras que otros son especficos. A continuacin se escriben los ms utilizados. La separacin liquido-solido. La separacin liquido-solido es necesaria cuando la fermentacin se lleva a cabo en un medio de cultivo liquido; consiste en separar los solidos (biomasa celular y compuestos insolubles) del caldo de fermentacin. En algunos casos, el compuesto de inters es el solido (la biomasa), mientras que, en otros, este se encuentra en el lquido. Se puede realizar por diferentes mtodos: La filtracin La centrifugacin La floculacin La flotacin.

La filtracion La filtracion es el metodo de separacion de una mezcla liquido-solido que se emplea con mas regularidad; consiste en hacer pasar la mezxcla por filtros con poros que retienen las particulas y dejan pasar el liquido. La eficiencia de la filtracion de pende de :

El tamao del microorganismo y su morfologia La presencia de capas mucosas en el microorganismo La viscosidad y en pH del caldo de fermentacion

Dos de los tipos de filtros mas utilizados para realizar esta operacin son el filtro prensa y el filtro rotatorio al vaco. La centrifugacin

La centrifugacin es una operacin en la que se separan sustancias por medio de la fuerza centrifuga. El mtodo se basa en la diferencia de densidad entre el solido y el lquido; tambin puede utilizarse para separar dos lquidos con densidades muy distintas. Es ms caro que la filtracin y se utiliza cuando esta ltima operacin es muy lenta. El xito de su aplicacin depende de la diferencia de densidad entre los solidos (la biomasa) y el lquido, la viscosidad del lquido y el tamao de las clulas del solido. Hay una gran variedad de centrifugas; la seleccin de una se realiza de acuerdo con el proceso especifico de recuperacin; sin embargo, las que se emplean con mayor frecuencia en los procesos de fermentacin son la centrifuga de disco y la centrifuga. La centrifuga de discos de utiliza para procesos de separacin a gran escala; esta compuesta por una serie de conos metlicos conocidos como discos, separados entre si por espacios muy pequeos. Es de mucha utilidad en la separacin de lquidos de diferente densidad. Durante la centrifugacin, los solidos, o el liquido mas denso, quedan retenidos en el borde de los discos y el liquido es eliminado por la parte superior de la centrifuga. La floculacin y la flotacin La floculacin y flotacin son mtodos de separacin de una mezcla lquido- solido empleados con menos frecuencia que los dos anteriores; generalmente, se aplican para aumentar la eficiencia en la filtracin o en la centrifugacin. La floculacin consiste en una separacin de solidos por agregacin y sedimentacin .El proceso se puede llevar a cabo calentando la suspensin o adicionando sustancias qumicas que actan como agentes floculantes, as, las clulas forman aglomerados que sedimentan. Este mtodo es til cuando las clulas son muy pequeas y no es posible esa separacin mediante centrifugacin o filtracin. En la flotacin, se introduce un gas en el caldo de fermentacin. Las clulas solidas se adsorben en las burbujas y suben a la superficie como una capa de espuma; ah son recolectadas. La desintegracin celular Esta etapa es imprescindible cuando el microrganismo no excreta el metabolito de inters al caldo de fermentacin. Consiste en romper la pared y la membrana celular del microrganismo. El mtodo por escoger va a depender de cuan fuerte es la pared celular: por ejemplo, las bacterias Gram positivas y las levaduras son mucho ms difciles de romper que las bacterias Gram negativas o los hongos filamentosos. La desintegracin celular se puede llevar a cabo por mtodos fsicos, qumicos o biolgicos; sin embargo, los ms utilizados son los fsicos. El dao mecnico a la pared celular de los microorganismos es uno de los mtodos ms comunes y se puede ejecutar con un molino de bolas. El principio de su funcionamiento radica en romper las clulas por efecto de la friccin que sufren al ser sometidas a altas velocidades de mezclado, en presencia de bolas de diferentes materiales (vidrio, cermica u otros). La homogeneizacin tambin es utilizada y consiste en someter la biomasa a altas presiones, provocando fuerzas de corte rompen las clulas y liberan los compuestos contenidos en ellas.

RENDIMIENTO