3

1. INTRODUO


A espectroscopia pode ser definida como a interao de qualquer
radiao eletromagntica com uma determinada amostra. So utilizados
conceitos como o de espectro de absoro ou emisso e frequncia. A
absoro espectroscpica no ultravioleta visvel (UV-Visvel) decorrente de
uma mudana de energia do eltron na molcula (transio eletrnica). Ela
utiliza luz na faixa do visvel, do ultravioleta (UV) prximo e do infravermelho
prximo. O instrumento que mede esta absoro chamado espectrofotmetro
ou fotocolormetro. Sendo a amostra inserida no caminho ptico do aparelho, a
luz UV e/ou visvel em certo comprimento de onda, passada pela amostra. O
espectrofotmetro mede a quantidade de luz que foi absorvida pela amostra.
Neste trabalho sero apresentados os resultados para determinao de um
lambda () mximo de uma soluo padro de ferro, e dos grficos de
absorbncia em funo do comprimento de onda e das concentraes das
solues, permitindo-nos calcular a absortividade molar do complexo.














4

2. REVISO BIBLIOGRFICA


2.1 DISCUSSO GERAL

Para Vogel, a variao da cor de um sistema, com a modificao da
concentrao de um certo componente, constitui a base do que os qumicos
denominam anlise colorimtrica. A cor provocada pela formao de um
composto corado, resultante da adio de um reagente apropriado, ou pode ser
intrnseca ao constituinte analisado. A intensidade da cor pode ser comparada
com a que se obtm pelo tratamento idntico de uma quantidade conhecida da
substncia e conforme Olga M. R. Peres:

Uma grande diferena entre alguns compostos a presena de cor.
Desta forma quinina amarela, clorofila verde, derivados de
aldedos e cetonas da 2,4-dinitrofenilhidrazona apresentam
coloraes que vo do amarelo claro ao vermelho intenso,
dependendo da relao entre a estrutura e a cor destas molculas.
Desta forma, o olho humano funciona como um espectrmetro
analizando a luz refletida da superfcie de um slido ou passando
atravs de um lquido. Embora vejamos a luz do sol como uma luz
uniforme e homognea, ela composta de uma ampla gama de
comprimentos de onda, que vo da regio do ultravioleta (UV), visvel
e infravermelho (IV). Estes componentes podem ser separados
passando esta luz branca atravs de um prisma.

A colorimetria visa a determinar a concentrao de uma substncia
pela medida da absoro relativa de luz, tomando como referncia a absoro
da substncia numa concentrao conhecida. Na colorimetria visual usa-se, em
geral, como fonte de luz, uma fonte natural ou artificial de luz branca. As
determinaes so feitas num instrumento simples, denominado colormetro,
ou comparador de cores. Quando a vista for substituda por uma clula
foteltrica (o que elimina em grande parte os erros devido s caractersticas
pessoais de cada observador), o instrumento um colormetro foteltrico.


5

Neste instrumento emprega-se a luz que est numa banda estreita de
comprimentos de onda, que se consegue pela passagem da luz que est numa
banda estreita de comprimentos de onda, que se consegue pela passagem da
luz atravs de filtros, isto , de materiais coloridos na forma de placas de vidro,
ou de gelatina etc., que s transmitem a luz numa regio espectral limitada. O
instrumento chamado, s vezes, fotmetro de filtro.
Na anlise espectrofotomtrica a fonte de radiao emite at a
regio ultravioleta do espectro. Desta radiao selecionam-se comprimentos de
onda definidos que constituem bandas, com largura menor que 1nm. Este
procedimento necessita de um instrumento mais complicado, e por isso mais
caro. O instrumento um espectrofotmetro.
Um espectrmetro tico um instrumento que dispe de um sistema
tico que pode provocar a disperso da radiao eletromagntica incidente, e
com o qual se podem fazer medidas da radiao transmitida num certo
comprimento de onda da faixa espectral. Um fotmetro destina-se a medir a
intensidade da radiao transmitida ou uma funo desta intensidade. Um
espectrmetro e um fotmetro, combinados num espectrofotmetro, podem
gerar um sinal que corresponde a diferena entre a radiao transmitida por um
material tomado como referncia e a radiao transmitida pela amostra
analisada, num certo comprimento de onda (Vogel, 1992))


2.2 FOTMETROS E ESPECTROFOTMETROS

Os instrumentos utilizados para medidas de absoro de radiao UV-
Vis, geralmente so compostos das seguintes partes: uma fonte contnua; um
dispositivo para monocromar as radiaes contnuas; um recipiente para a
amostra; um detector para converter a energia que irradiada em sinal eltrico
e um mostrador ou registrador deste mesmo sinal. A escolha do aparelho a ser
utilizado em uma anlise vai de encontro qualidade de resultado que o
analista deseja e o custo que ele pode prover.


6

Para a anlise de absoro de radiao UV-Vis, tm-se os fotmetros e
os espectrofotmetros. Os fotmetros so ferramentas mais simples e
relativamente baratas para se fazer anlises por absoro (SKOOG, HOLLER,
NIEMAN;2002, p. 290), so de maior facilidade de manipulao do que os
espectrofotmetros, apresentam uma maior emisso de energia radiante, e
assim uma boa relao sinal-rudo com os transdutores e circuitos baratos e
simples. Anlises quantitativas realizam-se com tanta exatido, porm com
menor pureza, em um fotmetro quanto com instrumentao mais complexa.
Os espectrofotmetros so mais complexos, um pouco mais caros e
obtm-se um grau de pureza das anlises maior. Alguns so projetados
apenas para a regio do visvel, outros para a regio do ultra-violeta e visvel,
podendo alcanar at a regio do infravermelho.


2.3 ESPECTROS DE ABSORO NO UV-VISVEL


A absoro de radiao ultravioleta ou visvel geralmente resulta da
excitao de eltrons de ligao; como consequncia, os comprimentos de
onda dos picos de absoro podem ser correlacionados com os tipos de
ligaes nas espcies em estudo. A espectroscopia de absoro molecular ,
portanto, valiosa para identificar grupos funcionais em uma molcula. Mais
importantes, no entanto, so as aplicaes da espectroscopia de absoro
ultravioleta e visvel na determinao quantitativa de compostos contendo
grupos absorventes (Vogel, 1992)
Segundo Olga M. R. Peres, para entender o motivo de alguns
compostos serem coloridos e outros no, devemos compreender as diferentes
caractersticas de grupos funcionais presentes nas molculas e suas possveis
transies eletrnicas. A regio do visvel compreende ftons com energias
entre 36-72 kcal/mol, e a regio do ultravioleta prximo, abaixo de 200 nm,
energias em torno de 143 kcal/mol. A radiao ultravioleta que apresenta
comprimentos de onda menores que 200 nm de difcil manuseio e no


7

utilizada como uma ferramenta de rotina para elucidao estrutural de
molculas.
Entretanto, as energias da regio do visvel so suficientes para
promoverem (ou excitarem) eltrons de valncia para orbitais de maior energia.
Consequentemente, a espectroscopia de absoro nesta regio normalmente
chamada de espectroscopia eletrnica.



Figura 1 Diagrama com diferentes tipos de transio.
Fonte: Olga M. R. Peres, p. 3.


Das seis transies apresentadas, somente as duas de menor
energia (esquerda) representam energias em torno de 200 - 800 nm no
espectro eletromagntico. Quando uma molcula exposta luz com energia
que seja suficiente para uma transio eletrnica, uma poro desta luz ser
absorvida para a promoo do eltron a um orbital de maior energia.
O tipo de transio que cada composto ir apresentar ir depender
da sua estrutura. Em todos os compostos com exceo dos alcanos pode
haver mais de um tipo de transio, como mostrado abaixo:







8


Figura 2 Tipos de transio.
Fonte: Olga M. R. Peres, p. 4.


Se um composto possuir mais de uma transio de energia, a
transio de menor energia a mais importante, por exemplo, a acetona que
tem duas transies * (189 nm), n * (280 nm). A transio de menor
energia e de maior comprimento de onda a mais importante.


2.4 ESPECTROS DE UV


Conforme Olga M. R. Peres, um espectrmetro de UV-Vis registra
em qual comprimento de onda esta transio ocorre junto com o grau de
absoro de cada comprimento de onda relacionada a esta transio. O
espectro resultante um grfico onde so relacionados a absoro em
unidades de absorbncia (A) versus comprimento de onda (nm).
Os espectros de absoro de UV-Vis so obtidos a partir da
passagem de luz de um determinado comprimento de onda atravs de uma
soluo diluda da substncia em um solvente no-absorvente. A intensidade
de absoro medida atravs da porcentagem de luz incidente que passa
atravs da amostra:
% Transmitncia =
0
I
I
x 100%,
onde:
I = intensidade da luz transmitida


9

I
0
= intensidade da luz incidente

Devido a absoro de luz ser funo da concentrao das molculas
absorventes, um modo mais preciso de apresentar a intensidade de absoro
(A) utilizando a lei de Lambert-Beer:
Absorbncia= cl
I
I
c =
|
|
.
|

\
|

0
log ,
onde:
e=absortividade molar (lmolcm
-1
)
c= concentrao molar do soluto
l=caminho ptico da cubeta (cm)

A absortividade relaciona a absorbncia observada (A) em um
comprimento de onda especfico () com a concentrao em quantidade de
matria (C) da amostra e o comprimento (l) em cm do caminho do feixe de luz
atravs da clula da amostra. A relao entre absorbncia e concentrao
linear at valores de A=1.


2.5 DISCUSSO DO MTODO DA 1,10-FENANTROLINA


De acordo com Vogel, o ferro (II) reage com a fenantrolina para
formar um complexo vermelho alaranjado [(C
12
H
8
N
2
)
3
Fe]
+2
. A intensidade da
cor independente da acidez no intervalo de pH 2 a 9 e estvel durante
longos perodos. O ferro (III) pode ser reduzido com o cloreto de hidroxilamnio
ou com 1,4 benzenodiol (quinol). Interferem seriamente a prata, o bismuto, o
cobre, o nquel, e o cobalto, e tambm os percloratos, cianetos, molibdatos e
tungstatos. O complexo do ferro com a fenantrolina (na forma de perclorato)
pode ser extrado pelo nitrobenzeno e medido a 515 nm (filtro verde azulado)
contra um branco do reagente.
O ferro (II) e o ferro (III) podem ser determinados
espectrofotometricamente. O complexo laranja avermelhado do ferro (II)


10

absorve a 515 nm, e o complexo amarelo do ferro (III) e o completo do ferro (II)
absorvem identicamente a 396 nm, e a absoro aditiva. A
soluo,ligeiramente cida com cido sulfrico, tratada pela 1,10-fenantrolina
e tamponada, no pH 3,9, por soluo de hidrogenoftalato de potssio; a leitura
a 396nm d o ferro total, e a 515 nm, o ferro (II).






























11

3 MATERIAIS E REAGENTES


Abaixo sero apresentados os materiais e reagentes necessrios
para a realizao dos experimentos.


3.1 MATERIAIS

MATERIAIS QUANTIDADE
Balo Volumtrico 6
Pipeta 2
Pipetador 1
Cubetas 4
Bquer 1
Tabela 1: Materiais utilizados no experimento.
Fonte: Os Autores, 2013.


3.2REAGENTES


REAGENTES QUANTIDADE
Soluo Padro de Ferro 15 mL
gua deionizada O suficiente
Soluo Tampo

60 mL
Soluo de Cloridrato de Hidroxilamina 60 mL
Soluo 1,10 Fenantrolina 60 mL
Tabela 2 Reagentes utilizados no experimento.
Fonte: Os Autores, 2013.



12

4. METODOLOGIA

A seguir ser apresentada a metodologia das diferentes anlises
realizadas em laboratrio.


4.1 DETERMINAO DO LAMBDA () MXIMO


Adicionou-se 5 mL de soluo padro de ferro (inicialmente j
preparada) em um balo volumtrico, em seguida acrescentou-se 10 mL de
soluo tampo para manter o pH entre 3,0 e 9,0. Adicionou-se 10 mL de
soluo de cloridrato de hidroxilamina e esperaram-se aproximadamente 5
minutos para que a reduo se completasse. Aps o tempo de espera
acrescentou-se 10 mL de soluo 1,10 fenantrolina e diluiu-se at a marca.
Esperou-se 10 minutos para que a soluo pudesse desenvolver a cor
vermelha.
Por fim, mediu-se a absorbncia entre 400 e 600 nm, com variao
de 10nm a cada leitura. A partir dos dados traou-se o grfico de absorbncia
em funo do comprimento de onda e determinou-se o mximo.


4.2 PREPARAO DA CURVA DE CALIBRAO

Seguiu-se a mesma metodologia citada acima, sendo desenvolvida
com 0, 1, 2, 3, 4 e 5 mL de soluo padro de ferro. Mediu-se a absorbncia
das solues no comprimento de onda mximo selecionado, e desenvolveu-se
o grfico de absorbncia em funo da concentrao dos padres. Calculou-se
a absortividade molar do complexo, atravs da curva de calibrao.






13

5 RESULTADOS E DISCUSSES


5.1 DETERMINAO DO LAMBDA () MXIMO


De acordo com o grfico 01, pode-se verificar a absorbncia em
diferentes comprimentos de onda para assim determinar o mximo de
absorbncia.



Grfico 1- Comprimentos de ondas absorvidos pela amostra
Fonte: Os autores, (2013).

Desta forma, observou-se que o valor de absorbncia mximo
possui valor igual a 1,049 e corresponde a um comprimento de onda () de
510m logo, este o comprimento de onda que deve ser utilizado para a
construo da curva de calibrao.


1.049
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
400 430 460 490 520 550 580
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Comprimento de Onda (m)


14

5.2 PREPARAO DA CURVA DE CALIBRAO



Grfico 2 - Curva de Calibrao para comprimento de onda de 510m
Fonte: Os autores, (2013).



Conforme grfico 02 observou-se a absorbncia das solues
preparadas que correspondem a 0, 1, 2, 3, 4 e 5 ppm de ferro. Conforme, curva
de calibrao verificou-se a linearidade dos pontos atravs do valor de R, onde
este apresenta um fator de correlao bem prximo a 1 (R=0,998).
Sendo assim, esta curva respeita a lei de beer e pode ser utilizada
para anlises de ferro comparando a absorbncia obtida na anlise com as da
curva e assim determinar a concentrao de ferro, ou atravs da frmula y=
0,204x + 0,016 sendo x a concentrao e y a absorbncia.


5.2.1 Clculo das concentraes das solues preparadas

0
0.227
0.451
0.625
0.83
1.038
y = 0.2049x + 0.0161
R = 0.9986
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
0 1 2 3 4 5 6
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Concentrao (ppm)


15

a) 1mL da soluo de concentrao 100ppm diludos para 100mL
100 ppm x 1 mL = C
2
x 100 mL C
2
= 1ppm
b) 2mL da soluo de concentrao 100ppm diludos para 100mL
100 ppm x 2 mL = C
2
x 100 mL C
2
= 2ppm
c) 3mL da soluo de concentrao 100ppm diludos para 100mL
100ppm x 3mL = C
2
x 100mL C
2
= 3ppm
d) 4mL da soluo de concentrao 100ppm diludos para 100mL
100 ppm x 4 mL = C
2
x 100 mL C
2
= 4ppm
e) 5mL da soluo de concentrao 100ppm diludos para 100mL
100 ppm x 5 mL = C
2
x 100 mL C
2
= 5ppm


5.2.2 Clculo da absortividade molar do complexo





a) Soluo de 1ppm
0,227 = x 1cm x 1 ppm = 0,227 L. mol
-1
.cm
-1

b) Soluo de 2ppm
0,451 = x 1cm x 2 ppm = 0,226 L. mol
-1
.cm
-1

c) Soluo de 3ppm
0,625 = x 1cm x 3 ppm = 0,208 L. mol
-1
.cm
-1

d) Soluo de 4ppm
0,830 = x 1cm x 4ppm = 0,208 L. mol
-1
.cm
-1

e) Soluo de 5ppm
1,038 = x 1cm x 5ppm = 0,208 L. mol
-1
.cm
-1







16

Concentrao Soluo (ppm) Absortividade Molar do Complexo (A)
1 0,227 L. mol
-1
.cm
-1

2 0,226 L. mol
-1
.cm
-1

3 0,208 L. mol
-1
.cm
-1

4 0,208 L. mol
-1
.cm
-1

5 0,208 L. mol
-1
.cm
-1

Tabela 3 Absortividade Molar do Complexo
Fonte: Os autores, 2013.


5.3 ABSORBNCIA DAS SOLUES PADRES PREPARADAS


Padro A
1 0,2307
2 0,4679
3 0,6570
4 0,8942
5 1,1442
Tabela 4 Absorbncia encontrada nas solues padres.
Fonte: Os autores, 2013.



5.4 DADOS OBTIDOS DO ESPECTROFOTMETRO DE FEIXE DUPLO




17


Grfico 3 Dados obtidos no espectrofotmetro de feixe duplo.
Fonte: Os Autores, 2013.


Comparando as curvas de calibrao do grfico 2 e a do grfico 3,
possvel perceber uma faixa de linearidade semelhante, porm, observou-se
que com os dados obtidos no espectrofotmetro de feixe duplo a curva
apresentou maior linearidade, a este propsito grficos, tais como este, que
so lineares em um intervalo de concentrao significativo (a faixa dinmica)
geralmente so obtidos e almejados porque esto menos sujeitos a erros do
que curvas no-lineares. (SKOOG, HOLLER, NIEMAN;2002, p. 290).


5.4.1 Clculo da absortividade molar do complexo



a) Soluo de 1ppm:
0,2307 = x 1cm x 1 ppm = 0,2307 L. mol-1.cm-1
b) Soluo de 2ppm:
0
0.2307
0.4679
0.657
0.8942
1.1442
y = 0.2257x + 0.0013
R = 0.9989
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
0 1 2 3 4 5 6
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Concentrao (ppm)


18

0,4679 = x 1cm x 2 ppm = 0,2340 L. mol-1.cm-1
c) Soluo de 3ppm:
0,6570 = x 1cm x 3 ppm = 0,219 L. mol-1.cm-1
d) Soluo de 4ppm:
0,8942 = x 1cm x 4ppm = 0,2236 L. mol-1.cm-1
e) Soluo de 5ppm:
1,1442 = x 1cm x 5ppm = 0,2288 L. mol-1.cm-1



Concentrao Soluo (ppm) Absortividade Molar do Complexo(A)
1 0,2307 L. mol
-1
.cm
-1

2 0,2340 L. mol
-1
.cm
-1

3 0,219 L. mol
-1
.cm
-1

4 0,2236 L. mol
-1
.cm
-1

5 0,2288 L. mol
-1
.cm
-1

Tabela 4 Absortividade Molar do Complexo
Fonte: Os autores, 2013.


















19

6. CONCLUSO


Atravs do experimento tivemos a oportunidade de aprender como
se utiliza um espectrofotmetro com o objetivo de determinar um mximo
para as amostras. Tambm foi possvel observar na prtica a interao dos
vrios tipos de radiao com a matria, sendo que cada composto absorve
radiao em comprimentos de onda caractersticos, o que possibilita sua
identificao pelo mtodo espectroscpico. De acordo com o que foi estudado,
a partir do momento que a espectroscopia permite observar e obter dados, que
no so possveis a olho nu, a aplicao mostra fundamental importncia para
os mtodos da anlise instrumental.






















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REFERNCIAS


Olga M. R. Peres, Espectroscopia de absoro no Ultravioleta-visvel (UV-
Vis), 23 fls. Universidade Estadual do Oeste do Paran, Centro de Engenharias
e Cincias Exatas CECE, Paran.
SKOOG, Douglas A.; HOLLER, F. James; NIEMAN, Timothy A. Princpios de
anlise instrumental. 5. ed. Porto Alegre: Bookman, 2002.
VOGEL, Arthur Israel; BASSETT, J. Vogel anlise inorgnica quantitativa. 4.
ed. Rio de Janeiro: Guanabara Dois, 1981. 690 p.