Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biologicas

Sistema nico de Sade Estado de Santa Catarina Secretaria de Estado da Sade Laboratrio Central de Sade Pblica
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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO
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MANUAL DE ORIENTAO PARA COLETA, ACONDICIONAMENTO E TRANSPORTE DE AMOSTRAS BIOLGICAS
Elaborado por Marlei Pickler Debiasi dos Anjos Rita de Cssia Campos Bertoncini Verificado por Cristine Ferreira Fabiana Girardi Sandra Bianchini Fernandes Aprovado por Cristine Ferreira Eliane Bressa Dalcin Referendado por Gilberto Alves
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Data 29/10/2012 29/10/2012 Data 30/10/2012 30/10/2012 30/10/2012 Data 30/10/2012 30/10/2012
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Data 30/10/2012
Rua Felipe Schmidt, 788 - Centro - CEP 88010-002 - Florianpolis/SC Tel: (0XX 48 3251 7800) - Fax: (0XX 48 3251 7900) e-mail: lacen@saude.sc.gov.br
Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC

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Seo: 03 Requisito: 7.5
Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas
Objetivo CPIA NO Campo de aplicao CONTROLADA Definies Siglas Condies gerais Condies especficas Responsabilidades Referncias Anexos A DOC MCT 01 - 01 Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas OBJETIVO
Padronizar e estabelecer regras e recomendaes quanto coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas para o Lacen. 2 CAMPO DE APLICAO
Este manual aplica-se coleta, acondicionamento e transporte de amostra biolgica nas unidades de sade do estado, encaminhadas para a gerncia de biologia mdica do Lacen. 3 DEFINIES
Para efeito deste POP aplicam-se as seguintes definies: a) Amostra biolgica Parte do material biolgico de origem humana utilizada para anlises laboratoriais. b) Amostra rejeitada Amostra biolgica fora das especificaes determinadas pelo Lacen. c) Requisio de Exame Formulrio que contm informao suficiente para identificar o paciente e o requisitante autorizado e fornecer os dados clnicos pertinentes. d) Unidade de Sade Estabelecimento de sade destinada a realizar assistncia sade, a uma populao determinada (hospitais, clnicas, postos de sade, vigilncia epidemiolgica, etc.). e) Laboratrios de Referncia ou Apoio Laboratrio de sade pblica e/ou clnico que executa exames em amostras enviadas por outros laboratrios. f) Caixa trmica Caixa para transporte de amostra biolgica (tipo geladeira porttil) de polietileno ou similar, lavvel, resistente desinfeco e portando a identificao de Infectante ou Risco Biolgico.

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g) Amostra sob refrigerao Amostra biolgica conservada na temperatura de 2 a 8C. h) Amostra congelada Amostra biolgica conservada em temperatura abaixo de 20C negativos. i) Amostra em temperatura ambiente Amostra biolgica conservada na temperatura de 17 a 27C. 4 SIGLAS Equipamento de Proteo Individual Equipamento de Proteo Coletiva Boletim de Produo Ambulatorial Individualizado Sistema de Informao de Agravos de Notificao Vigilncia Epidemiolgica Reao em cadeia da Polimerase Imunofluorescncia Indireta Imunofluorescncia Direta Trypticase Soy Broth gar chocolate No se aplica
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EPI EPC BPA-I SINAN VE PCR IFI IFD TSB ACH NA 5
CONDIES GERAIS
A qualidade dos resultados dos exames laboratoriais est intimamente relacionada fase pr-analtica, que se inicia desde o preenchimento correto da requisio, preparao do paciente, coleta e identificao da amostra, armazenamento temporrio da amostra no local de coleta, transporte ao laboratrio, at o recebimento e cadastramento das amostras no Lacen. Esta fase deve ser criteriosamente definida e constantemente monitorada em razo do impacto significativo das atividades realizadas durante este processo sobre a qualidade do resultado liberado. 5.1 Requisies
Toda amostra biolgica deve ser encaminhada ao laboratrio acompanhada da requisio para exames do LACEN devidamente preenchida, acompanhada da Ficha de notificao do SINAN, quando se fizer necessrio. Todas as requisies esto disponveis na home page do Lacen, no seguinte endereo eletrnico: http://lacen.saude.sc.gov.br. As requisies, solicitaes mdicas ou Laudo Mdico para emisso de BPA-I (quando aplicvel) devem conter as seguintes informaes: a) dados da Unidade requisitante ou de procedncia da amostra - instituio solicitante (VE municipal, hospital, clnica, profissional solicitante) com n do CNES, nome do municpio, telefone para contato;

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b) dados do paciente - nome completo, n do Carto Nacional de Sade, data de nascimento, sexo, raa, municpio de residncia, nome da me ou responsvel, endereo e nmero da notificao, quando aplicvel; c) dados da amostra biolgica coletada; d) data e hora da coleta da amostra; e) exame(s) solicitado(s); f) dados complementares condio clnica/epidemiolgica controle de tratamento, se comunicante ou contato, manipulador de alimentos, sintomas clnicos e data inicial dos sintomas, dados vacinais recentes, uso de antibiticos ou antivirais, histrico de viagem recente, resultado de exames anteriores; g) data da solicitao do exame; h) identificao do profissional solicitante (assinatura e carimbo). Nota: em caso de solicitao dos testes de quantificao da carga viral do HIV e contagem de linfcitos T CD4+/CD8+, o mdico deve estar cadastrado no Sistema de Controle de Exames Laboratoriais (SISCEL). 5.1.1 Exames que devem vir acompanhados das respectivas Fichas de Notificao de Surto - SINAN: a) Conjuntivite bacteriana; b) Faringite estreptoccica / escarlatina; c) Botulismo. 5.1.2 Exames que devem vir acompanhados do Boletim de Produo Ambulatorial (Individualizado) BPA-I: a) Contagem de Linfcitos T CD4+/CD8+; b) Quantificao de cido Nuclico - Carga Viral do HIV; c) Quantificao de RNA do vrus da Hepatite C; d) Genotipagem do HCV; e) Genotipagem do HIV; f) Pesquisa de anticorpos contra o vrus da Hepatite C (Anti-HCV). Nota: em todos os BPA I devem constar assinatura e carimbo do mdico solicitante. 5.2 Solicitao de kits para coleta e transporte de amostras A solicitao dos kits para coleta e transporte das amostras biolgicas fornecidos pelo Lacen dever ser feita mediante solicitao prvia Diviso de Controle da Rede por meio do fax (48) 3251-7952. A retirada do kit no Lacen de responsabilidade da Regional de Sade ou VE de cada municpio. Para a retirada do material de coleta no Lacen, o solicitante dever encaminhar caixa de transporte contendo gelo reciclvel para o acondicionamento dos kits.
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A caixa de transporte no deve ser a mesma onde tenham sido encaminhadas amostras biolgicas de qualquer espcie. CPIA NO ATENO CONTROLADA 5.3 Horrio de recebimento das amostras no Lacen O horrio de recebimento de amostras biolgicas no Lacen das 07h00 as 19h00 de segunda sexta-feira. Para anlises de urgncia (meningites bacterianas, malria, H1N1, e em caso de surtos, dentre outros) o Lacen trabalha em regime de sobreaviso durante os dias da semana no perodo das 19h00 as 07h00 e em regime de planto (07h00 as 19h00) nos finais de semanas e feriados. 5.4 Informaes complementares
Informaes complementares sobre coleta, transporte e encaminhamento de amostras podem ser obtidas por meio do telefone (48) 3251-7815 - Setor de Recepo, Avaliao e Cadastro de Amostras - ou nos setores tcnicos pelos telefones: Setor Geral PABX Gerncia Tcnica Bacteriologia Biologia Molecular Doenas Tropicais Virologia 5.5 Telefone (48) 3251-7800 (48) 3251-7813 (48) 3251-7824 (48)3251-7847 /7846 (48) 3251-7834 (48) 3251-7829 Setor SOBREAVISO Controle da Rede Imunologia Micologia Tuberculose Telefone (48) 9121-7495 (48) 3251-7833 (48) 3251-827/7828 (48) 3251-7839 (48) 3251-7841
Envio das amostras biolgicas ao Lacen
O envio da amostra ao laboratrio deve ser feito em tempo hbil e em condies adequadas, para que no haja alterao da amostra durante o transporte. Ver anexo A DOC MCT 01 - Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas. 5.5.1 Acondicionamento da amostra para transporte No transporte de amostras biolgicas deve-se obedecer rigorosamente as normas de biossegurana vigentes no pas. Para tanto, deve-se observar o que segue: a) a temperatura adequada ao transportar cada tipo de amostra. Quando for necessria refrigerao, as amostras devem ser acondicionadas juntamente com gelo reciclvel. Se necessrias temperaturas inferiores, utilizar gelo seco; b) as amostras devem ser encaminhadas dentro de sacos plsticos e acondicionadas em caixas trmicas impermeveis e higienizveis que garantam a estabilidade das mesmas at a chegada ao laboratrio (Fig.1); c) a caixa trmica deve portar a identificao de Infectante ou Risco Biolgico; d) no colocar as amostras soltas dentro da caixa trmica. Utilizar frasco com parede rgida para acondicionamento (Fig.2);

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e) acondicionar as amostras de forma a evitar vazamento e contaminao; f) quando forem enviadas muitas amostras de sangue na mesma remessa, deve-se acondicion-las em estantes (Fig 3) e envolv-las em papel amassado ou plstico bolha, de maneira que as amostras no fiquem em contato direto com o gelo. As amostras devem ser colocadas na estante na mesma ordem das requisies; g) enviar as amostras de escarro, fezes in natura e urina no frasco original de coleta (Fig 4); h) as lminas para anlise e/ou superviso devem vir acondicionadas em porta-lmina plstico (Fig 5 e 6). No devem vir em caixas de madeira ou enroladas em papel; i) documentos como: ofcios, solicitaes de exames, fichas epidemiolgicas encaminhados junto com as amostras devem ser colocados em envelope com destinatrio e o remetente. Estes envelopes devero ser acondicionados em saco plstico e colados na FACE EXTERNA da tampa, ou na lateral da caixa trmica. Nunca coloc-los dentro da caixa; j) caixa trmica deve ser hermeticamente fechada e deve conter a identificao do destinatrio e remetente, como no exemplo: Destinatrio: Laboratrio Central de Sade Publica LACEN SC Rua: Felipe Schmidt, 788, Centro Florianpolis/SC CEP: 88010-002 Remetente: Secretaria Municipal de Sade ou unidade hospitalar, seguida do endereo completo do municpio, nome da pessoa responsvel pelo envio e telefone para contato.
Figura 1: Modelo de caixa para transporte de amostras biolgicas (caixa trmica)
Figura 2: Modelo do frasco com parede rgida
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Figura 3: Modelo de estante para transporte de tubos
Figura 4: : Modelo de frasco para coleta de amostras biolgicas como escarro, fezes, urina
Figura 5: Modelo de caixa plstica para transporte de lminas para superviso (tuberculose, hansenase, malria)
Figura 6: : Modelo de frasco para transporte de lminas minas CPIA NO CONTROLADA
5.5.2 Condies de transporte O transporte de amostras biolgicas em veculos com circulao de pessoas deve ser feito em condies de segurana e em m rea separada dos passageiros, sendo que deve ser observado o que segue: a) as s caixas trmicas devem vir bem vedadas e fixadas para no virar durante o transporte e protegidas do sol e de umidade; b) o motorista deve ser orientado de como proceder em caso de acidente com as amostras amostras. Para isso, o veculo o deve conter um kit com EPI: guarda-p, guarda p, luvas de procedimento, uma p com escova (caso tenha que recolher material derramado), pano de limpeza, um frasco com lcool 70% para limpeza do local e das mos, saco para lixo infectante e fita adesiva; c) em caso o de acidente com as amostras, todos os materiais recolhidos e utilizados na operao devem ser colocados os no saco para lixo infectante bem fechado com a f fita adesiva, para que sejam esterilizados dos e descartados adequadamente. Neste caso, a pessoa responsvel l pela remessa das amostras, cuja identificao deve estar na caixa de transporte (ver item 5.7.1), deve ser avisada do ocorrido.

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MCT 01 6 CONDIES ESPECFICAS
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A coleta de amostra biolgica bem feita uma etapa muito importante no processo de realizao do exame pelo laboratrio. Tem como finalidade obter um resultado preciso e de qualidade, fundamental para uma orientao epidemiolgica e/ou clnica correta. 6.1 Coleta, preparo e identificao da amostra biolgica
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A fase anterior coleta deve ser objeto de ateno por parte de todas as pessoas envolvidas no atendimento com a finalidade de se prevenir a ocorrncia de enganos. A coleta de amostras de material humano deve ser realizada rigorosamente dentro das normas de biossegurana vigentes no pas, ocasio em que se deve observar o que segue: a) ao iniciar o procedimento de coleta, o profissional de sade deve organizar todo o material de acordo com as amostras a serem coletadas, conferir todos os dados da requisio e solicitar ao paciente que diga seu nome completo para confirmao dos dados da requisio; b) na etiqueta de identificao da amostra deve constar o nome completo do paciente, tipo de exame e data de coleta; c) em tubos de sangue deve-se, preferencialmente, utilizar a etiqueta prpria do tubo com caneta que no borre ou apague; d) na requisio do exame deve constar o nome completo e telefone do profissional que efetuou a coleta ou que recebeu a amostra de forma a garantir a rastreabilidade. 6.1.1 Coleta de sangue No necessrio jejum prolongado para coleta dos exames enviados ao Lacen. Para evitar lipemia das amostras deve-se obedecer a um jejum de pelo menos 3 a 4 horas antes da coleta de sangue. Para as tcnicas de coleta recomendamos seguir as orientaes dos Cursos Telelab: Tcnicas para Coleta de Sangue e Coleta de Sangue - Diagnstico e monitoramento das DST, Aids e Hepatites Virais. a) Sangue total Coletar o sangue com o anticoagulante recomendado para a realizao do exame, logo aps a coleta homogeneizar suavemente e identificar corretamente o tubo. o material de escolha para Contagem de Linfcitos T CD4+/CD8+ e Malria. Ver orientaes especficas para cada tipo de exame neste manual e no DOC MCT 01 - 01 (anexo A). b) Soro Coletar o sangue em tubo sem anticoagulante. Recomendamos a utilizao de TUBO COM GEL SEPARADOR e ativador de cogulo (tampa amarela) Este contm uma barreira de gel que est presente no fundo do tubo.

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Aps a coleta, manter o tubo, verticalmente por 30 minutos a temperatura ambiente, no refrigerar o sangue logo aps a coleta para evitar hemlise, esta etapa muito importante para que ocorra a coagulao do sangue e retrao do cogulo, evitando a formao de fibrina e hemlise da amostra. Apos este perodo centrifugar o tubo com sangue entre 2.500 a 3.000 rpm por 10 minutos para obteno do soro (sobrenadante). O tempo entre a coleta e a centrifugao no deve exceder uma hora.
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Durante a centrifugao a barreira de gel move-se para cima at a interface entre o soro e o cogulo, onde forma uma barreira estvel que separa o soro da fibrina e das clulas. Neste caso, o soro pode ser utilizado pelo laboratrio diretamente no tubo de coleta, eliminando a necessidade de transferncia de um tubo para outro. Aps a centrifugao, os tubos com gel devem permanecer por uma hora na posio vertical, para minimizar o risco de danificar a barreira formada pelo gel, atravs dos movimentos de vibrao durante o transporte. Manter as amostras centrifugadas no tubo original de coleta com gel separador sob refrigerao (2 a 8C) at o acondicionamento correto (sob refrigerao) para envio ao Lacen. Este tubo pode permanecer por at cinco dias refrigerados. Excepcionalmente, se necessrio manter armazenado no local de coleta por perodo maior que cinco dias, mas nunca mais de 30 dias, recomendamos fracionar o soro para outro tubo de vidro ou polietileno tamanho 12x75 mm, congelar o soro fracionado (- 20C) e enviar soro congelado. c) Plasma O sangue total deve ser coletado em tubo com anticoagulante. Seguir a tcnicas de coleta e homogeneizao adequada do sangue, para evitar hemlise. a amostra de escolha para a realizao de testes moleculares como Carga Viral do HBV e HIV. Obedecer s orientaes de coleta, envio no tubo primrio ou se necessrio separao de plasma para envio, nas informaes especficas para cada exame que seguem neste manual e no DOC MCT 01 - 01 (anexo A). Nota: No sero aceitas amostras com as seguintes caractersticas: hemlise, lipemia e hiperbilirrubinemia; mal conservadas (sem refrigerao), transportadas inadequadamente (tubos quebrados, derramados), e Tubos sem identificao. 6.1.2 Coleta das demais amostras biolgicas As orientaes para a coleta das demais amostras biolgicas como escarro, fezes, lquor, lquido pleural, lavado bronco-alveolar, sangue para hemocultura, secrees e outras amostras esto descritos no DOC MCT 01 (anexo A) e mais detalhadamente no item 6.2, de acordo com as orientaes dos setores tcnicos e peculiaridades de cada tipo de exame.

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Para estas amostras, etiquetar o frasco com nome completo e legvel do paciente, data e hora da coleta, tipo de exame e amostra biolgica; A etiqueta deve ser colocada no corpo do frasco coletor, nunca na tampa. Todas as amostras biolgicas devem ser armazenadas at o momento do envio de forma adequada, obedecendo s orientaes do laboratrio, para que no haja interferncia em seus constituintes. 6.2 Orientaes especficas para a coleta e transporte das amostras biolgicas
As orientaes para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas esto descritas no DOC MCT 01 - 01 (anexo A). As informaes abaixo complementam o DOC MCT 01. O DOC MCT 01 01 est estruturada em ordem alfabtica por patologia, visando facilitar a consulta. Para cada patologia est disponvel o nome dos exames realizados no Lacen ou em Laboratrios de Referncia, a(s) amostra(s) biolgica(s) utilizadas na realizao de cada exame, volume necessrio para realizao do exame, acondicionamento e temperatura de transporte, o perodo ideal da coleta e o tempo crtico para a chegada da amostra no Lacen e prazo mximo de liberao dos exames. No item a seguir, as patologias com os respectivos exames esto agrupadas por Setor Tcnico que realiza o exame e as informaes sobre coleta esto descritas detalhadamente. 6.2.1 Setor de Bacteriologia UO BACTO Cancro mole Material necessrio para coleta: swab de algodo, haste plstica, estril (swab comum); lmina de microscopia nova, limpa e desengordurada; Coleta da leso genital a amostra colhida com swab, do centro da leso, obtendo-se maior quantidade possvel de secreo ou pus. com o prprio swab da coleta, preparar dois esfregaos em 2 lminas e identific-las; deixar secar em temperatura ambiente. acondicionar as lminas em porta-lminas de plstico rgido para evitar quebra e exposio poeira e insetos e a luz solar. Coqueluche Material necessrio para coleta swab ultrafino com haste flexvel, estril e alginatado; meio de transporte: Meio de Regan-Lowe com antibitico (gar carvo com antibitico). no momento de uso o meio de transporte deve estar em temperatura ambiente, sendo necessrio retir-lo do refrigerador pelo menos 30 minutos antes;
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Coleta da secreo do nasofaringe antes de iniciar a coleta, lavar as mos, colocar a mscara e calar as luvas; retirar o excesso de muco nasal e iniciar a coleta; introduzir o swab em uma narina do paciente, at encontrar resistncia na parede posterior da nasofaringe (neste momento o paciente lacrimeja) girar o swab por alguns segundos, ver Figura 7. introduzir o swab no tubo com o Meio de transporte Regan-Lowe com antibitico, deixando-o submerso totalmente no meio de cultura. Fechar firmemente o tubo. identificar o tubo com os dados do paciente
Notas:
1) O swab deve ser armazenado, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco. 2) O meio de transporte deve ser armazenado, antes de sua utilizao, em refrigerador, observando sempre a data de vencimento. O meio tem validade de 2 meses partir da data de fabricao (como o meio de cultura contm sangue e antibitico, o prazo de validade dever ser seguido rigorosamente). 3) Na solicitao de exames dos contatos/comunicantes, acrescentar o nome do doente ao qual est vinculado. 4) Por ser doena de transmisso respiratria, o uso de mscara e luvas de procedimento essencial para a proteo do profissional que realiza a coleta e devem ser utilizadas tanto para caso suspeito como para os comunicantes sadios.
Colonizao de Estreptococo do grupo B em gestante Material necessrio para coleta swab estril alginatado; meio de transporte utilizado: Meio de Amies com carvo.
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Antes de iniciar a coleta, lavar as mos, calar as luvas e iniciar a coleta. Coleta da secreo vaginal no deve ser utilizado espculo a amostra colhida introduzindo o swab no tero distal da vagina, fazendo movimentos giratrios por toda a circunferncia da parede vaginal introduzir o swab com a amostra no Meio de transporte Amies com carvo identificar o tubo com os dados do paciente. Coleta de raspado anorretal introduzir o swab no orifcio anal e fazer movimentos giratrios por toda a parede distal do reto caso o swab toque as fezes, repetir o procedimento com novo swab introduzir o swab com a amostra no Meio de transporte Amies com carvo identificar o tubo com os dados do paciente.
Notas:
1) O swab deve ser armazenado, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco. 2) O meio de transporte deve ser armazenado, antes de sua utilizao, em refrigerador, observando sempre a data de vencimento.

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Conjuntivite bacteriana * exame realizado somente em situaes de surto de conjuntivite bacteriana, quando solicitado pela VE. Material necessrio para coleta CONTROLADA swab estril meio de transporte utilizado: tubo com meio de cultura agar chocolate no momento de uso o meio de cultura agar chocolate deve estar em temperatura ambiente, sendo necessrio retir-lo do refrigerador pelo menos 30 minutos antes. Coleta da secreo da conjuntiva antes de iniciar a coleta, lavar as mos, colocar a mscara, calar as luvas e iniciar a coleta com um swab estril, colher a amostra da regio prxima ao saco conjuntival, no canto interno do olho, evitando movimentos circulares. conveniente manter, por alguns segundos, o swab no saco conjuntival, o que ir promover o lacrimejamento e absoro da secreo pelo algodo com o swab que foi coletada a amostra, inocular imediatamente no tubo de agar chocolate, nas condies mais asspticas possveis (abrindo o tubo de agar chocolate prximo chama do bico de Bunsen) e semear rolando o swab na superfcie inclinada do meio. Desprezar o swab como resduo infectante. Fechar imediatamente o tubo com a tampa de borracha e a tampa metlica identificar o tubo com os dados do paciente e enviar a Ficha de Investigao de Surto com as informaes clnicas e epidemiolgicas correspondentes ao caso.
Notas: 1) O swab deve ser armazenado, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco. 2) O meio de transporte deve ser armazenado, antes de sua utilizao, em refrigerador, observando sempre a data de vencimento. CPIA NO
Difteria Material necessrio para coleta 2 swab um para coleta do nasofaringe (swab ultrafino com haste flexvel, estril) e outro para coleta do orofaringe (swab com haste plstica, estril) 1 abaixador de lngua 2 tubos com Meio de Transporte Amies com carvo no momento de uso os meios de transporte devem estar em temperatura ambiente, sendo necessrio retir-los do refrigerador pelo menos 30 minutos antes. Coleta de secreo de nasofaringe e orofaringe identificar os tubos com meio de transporte, com N (nariz) e G (garganta) para facilitar o manuseio e evitar trocas antes de iniciar a coleta, lavar as mos, colocar a mscara, calar as luvas e iniciar a coleta; Para o nariz (N) - introduzir o swab ultrafino flexvel e estril na narina do paciente at encontrar resistncia na parede posterior da nasofaringe (Figura 7). Realizar movimentos rotatrios. Utilizar o mesmo swab para ambas as narinas imediatamente aps a coleta, introduzir o swab no meio de transporte Amies com carvo. Ateno para que o swab fique submerso no meio de cultura. Fechar firmemente o tubo;

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Para a garganta (G) com auxlio de um abaixador de lngua, pressionar a lngua para baixo e com swab estril, fazer a coleta no redor da superfcie da garganta, passando o swab pelas amgdalas, vula e toda a parede da garganta (Figura 8). Na coleta em doentes, o swab deve ser passado cuidadosamente apenas ao redor das leses, para que no haja descolamento da placa (pseudomembrana) imediatamente aps a coleta, introduzir o swab no meio de transporte Amies com carvo. Ateno para que o swab fique submerso no meio de cultura. Fechar firmemente o tubo.
Notas: 1) Os swab devem ser armazenados, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco. 2) O meio de transporte deve ser armazenado, antes de sua utilizao, em refrigerador, observando sempre a data de vencimento. 3) Na solicitao de exames dos contatos/comunicantes, acrescentar o nome do doente ao qual est vinculado. 4) Por ser doena de transmisso respiratria, o uso de mscara e luvas de procedimento essencial para a proteo do profissional que realiza a coleta e devem ser utilizadas tanto para caso suspeito como para os comunicantes sadios.
Figura 7: coleta de secreo de nasofaringe
Figura 8: coleta de secreo de orofaringe
Doena bacteriana invasiva amostra biolgica: lquidos orgnicos estreis (lquido pleural, peritoneal, asctico) procedimento mdico. Doena diarrica bacteriana (Doena Transmitida por Alimento ou gua, clera) Material necessrio para coleta swab estril frasco coletor, rgido, boca larga e tampa rosquevel meio de transporte: Meio de Transporte Cary-Blair.
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Coleta das Fezes in natura coletar de 2 a 4 g de fezes (equivalente a 1 colher de sobremesa) em frasco limpo, seco, de boca larga e com tampa de rosca, dar preferncia s partes mucopurulentas e com sangue. Coleta com swab fecal em Meio de Transporte Cary-Blair coletar de 2 a 4 g de fezes em frasco limpo, seco, de boca larga mergulhar o swab no frasco contendo as fezes, dando preferncia s partes mucopurulentas e com sangue e a seguir introduzir no meio de transporte Cary-Blair. Fechar firmemente o frasco.

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Coleta com swab retal em meio de transporte Cary-Blair introduzir o swab no esfncter anal ( 2 cm), fazendo movimentos rotatrios suaves por alguns segundos para que haja absoro do material. Retirar o swab e introduzir no Meio de Transporte Cary-Blair. Fechar firmemente o frasco.
Notas: 1) A coprocultura de rotina realizada no LACEN inclui a pesquisa de Salmonella spp, Shigella spp, Escherichia coli enteropatognicas. 2) A pesquisa de Vibrio cholerae e outros vbrios, E. coli enterohemorrgica O157, Aeromonas spp e Plesiomonas shigeloides, deve ser solicitada separadamente, pois esses agentes necessitam de mtodos especiais para seu isolamento e identificao. 3) Quando a coprocultura for realizada no laboratrio local e houver isolamento de Salmonella spp, Shigella spp, Escherichia coli patognicas e Vibrio cholerae, o microrganismo isolado deve ser encaminhado ao Lacen para confirmao e encaminhamento da cepa para o Laboratrio de Referncia Nacional.
Faringite estreptoccica / Escarlatina * exame realizado somente em situaes de surto, quando solicitado pela Vigilncia Epidemiolgica. Material necessrio para coleta swab de dracon ou rayon, flexvel, estril, com haste de plstico. No usar swab de algodo comum ou alginatado CPIA NO meio de transporte: Meio de Transporte Amies com carvo. CONTROLADA Coleta de secreo de orofaringe antes de iniciar a coleta, lavar as mos, colocar a mscara, calar as luvas e iniciar a coleta; introduzir na orofaringe do paciente, um swab de dracon ou rayon, evitar tocar outras reas da cavidade oral com swab, para prevenir contaminao com a flora da orofaringe coletar a secreo orofarngea, realizando na rea posterior da faringe e na superfcie das tonsilas, movimentos rotatrios com o swab introduzir o swab coletado em meio de transporte Amies com carvo identificar o tubo com os dados do paciente e enviar a Ficha de Investigao de Surto com as informaes clnicas e epidemiolgicas correspondentes ao caso.
Notas:
1) O swab deve ser armazenado, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco. 2) O meio de transporte deve ser armazenado, antes de sua utilizao, em refrigerador, observando sempre a data de vencimento.
Febre tifide a) Exames: Hemocultura e Coprocultura b) Volume ideal sangue: adultos: 5 mL de sangue em cada puno (para frasco com 45 mL de meio de cultura frasco adulto); criana: 1 mL de sangue em cada puno (para frasco com 9 mL de meio de cultura frasco peditrico). Deve ser respeitada a quantidade de sangue de 1:10 em relao ao meio de cultura. fezes: coletar 2 a 4 g de fezes in natura, swab fecal ou swab retal . c) Perodo ideal de coleta sangue: coletar nas 2 semanas iniciais da doena. Fazer a coleta antes da ascenso

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da temperatura (evitar o pico febril). Paciente com febre constante, fazer a coleta em qualquer horrio. Paciente em uso de terapia antimicrobiana, colher antes da prxima dose do antibitico; fezes: coletar a partir da 2 semana at a 5 semana do incio dos sintomas, no estgio de convalescena e na pesquisa de portador.
CPIA NO
CONTROLADA d) Nmero de amostras de sangue e intervalo da coleta recomenda-se a coleta de 2 a 3 amostras de sangue; deve existir um intervalo de 15 a 20 minutos entre as coletas, intercalando os stios da puno (ex.: brao direito, brao esquerdo).
e) Nmero de amostras de fezes e intervalo da coleta recomenda-se a coleta de 3 amostras com intervalo de 3 dias cada uma; no caso de portadores assintomticos, particularmente aqueles envolvidos na manipulao de alimentos: 7 amostras em dias seqenciais. sete dias aps o trmino do tratamento com antimicrobiano, realizar 3 (trs) coproculturas com intervalos de 30 dias. Caso uma delas seja positiva, essa srie pode ser suspensa e o indivduo deve ser novamente tratado. f) Procedimento para a coleta de sangue: identificar os frascos de meio de cultura lquido (TSB ou BHI) com o nome do paciente, data e hora da coleta e nmero da amostra (se 1, 2 ou 3 amostra); retirar a parte superior (circular) do lacre metlico dos frascos; realizar a desinfeco da tampa de borracha com lcool 70%, e deixar sobre a rolha uma gaze ou algodo embebido com lcool a 70%. Manter o algodo sobre o frasco at o momento da puno; realizar a anti-sepsia rigorosa do local da puno, deixar agir por 1 minuto. Evitar tocar no local da puno; colher a amostra, com seringa e agulha descartveis e transferir para o frasco, sem trocar a agulha. Coletar um volume de sangue correspondente a aproximadamente 5 10% do volume do meio de cultura; homogeneizar delicadamente o frasco por inverso. g) Procedimento para coleta de fezes: ver orientaes sobre coleta de fezes no item DOENAS DIARRICAS Gonorria a) Amostras biolgicas paciente do sexo masculino: secreo uretral ou 1 jato urinrio. paciente do sexo feminino: secreo endocervical, secreo uretral ou, no caso de crianas e mulheres histerectomizadas, secreo do fundo do saco vaginal. outras amostras: secreo anal e secreo de orofaringe. b) Tipo de swab utilizado para coleta secreo uretral: swab de algodo alginatado ultrafino. secreo endocervical, orofaringe, anal e vaginal: swab de algodo alginatado. c) Meio de transporte meio de Transporte Amies com carvo.

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d) Orientaes para a coleta das amostras Preparo do paciente do sexo feminino: a coleta da secreo feminina deve ser feita aps 3 horas da ltima mico. A paciente deve estar em abstinncia sexual de 2 dias pelo menos. No estar fazendo uso de antisspticos locais ou cremes vaginais, antibiticos ou quimioterpicos e no estar menstruada. No ter realizado exames ginecolgicos com toque ou ultrasom transvaginal nas 48 horas que antecedem o exame. Preparo do paciente do sexo masculino: estar h pelo menos 3 horas sem urinar. Evitar relaes sexuais e medicamentos tpicos nas 24 horas que antecedem o exame. Preferencialmente no usar antibitico nos 3 dias que antecedem o exame.
Coleta da secreo uretral masculina solicitar ao paciente para retrair o prepcio; limpar a secreo emergente com gaze estril (no coletar a secreo emergente); introduzir o swab alginatado ultrafino, cerca de 2 cm, no canal uretral, atravessando a fossa navicular; girar o swab, delicadamente, de 8 a 10 vezes para absorver a secreo; retirar o swab; fazer um esfregao fino e homogneo em uma lmina identificada com o nome do paciente; proceder a nova coleta para cultura e inocular a amostra em meio de transporte Amies com carvo. Coleta da amostra de 1 jato urinrio caso o paciente no esteja com secreo aparente colher a primeira urina da manh ou reter a urina por pelo menos 3 horas antes de realizar o exame; realizar higiene prvia da regio genital; coletar os primeiros 10 mL de urina (1 jato urinrio) em frasco estril de boca larga com tampa de rosca.
CONTROLADA Coleta da secreo endocervical introduzir o espculo (no utilizar espculo lubrificado); limpar, com gaze estril, a secreo do fundo do saco vaginal e a que recobre o colo do tero; introduzir o swab alginatado cerca de 1cm no canal endocervical, girando-o delicadamente de 8 a 10 vezes, para absorver a secreo. Cuidado para no tocar a parede vaginal; retirar o swab; fazer um esfregao fino e homogneo em uma lmina identificada com o nome do paciente; proceder a nova coleta para cultura e inocular a amostra em meio de transporte Amies com carvo. CPIA NO
Coleta da secreo uretral feminina fazer a expresso da secreo das glndulas parauretrais pressionando a parede vaginal com o dedo mdio; introduzir o swab alginatado cerca de 2 cm na uretra; coletar a secreo girando delicadamente o swab de 8 a 10 vezes para absorver a secreo.

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retirar o swab; fazer um esfregao fino e homogneo em uma lmina identificada com o nome do paciente; proceder a nova coleta para cultura e inocular a amostra em meio de transporte Amies com carvo.
CPIA NO
Coleta da secreo de fundo de saco vaginal CONTROLADA introduzir o espculo; coletar a amostra do saco vaginal com auxlio de um swab alginatado; retirar o swab alginatado; fazer um esfregao fino e homogneo em uma lmina identificada com o nome do paciente; proceder a nova coleta para cultura e inocular a amostra em meio de transporte Amies com carvo. Coleta de secreo anal introduzir o swab alginatado no reto, cerca de 2 cm; fazer movimentos circulares junto parede retal raspando o material das criptas por 30 segundos, para absorver a secreo. Repetir o procedimento com novo swab, caso o swab toque as fezes; retirar o swab alginatado e inocular a amostra em meio de transporte Amies com carvo. Coleta de secreo de orofaringe com auxlio de um abaixador de lngua, pressionar a lngua para baixo e com swab estril alginatado, fazer a coleta passando o swab pelas amgdalas e faringe posterior; imediatamente aps a coleta, introduzir o swab no meio de transporte Amies com carvo. Ateno para que o swab fique submerso no meio de cultura. Fechar firmemente o tubo. Hansenase a) Materiais necessrios para a coleta lmina para microscopia, nova, limpa e desengordurada, com ponta fosca 26 x 76 mm; lamparina a lcool 90 GL ou bico de Bunsen, fsforo; lcool etlico 70GL ou 70%; gaze no estril e algodo hidrfilo; lpis ponta vdea; cabo de bisturi n. 3 e lmina de bisturi n. 15 ou bisturi descartvel; porta-lminas de plstico para o transporte da amostra; esparadrapo ou bandagem antissptica; EPI: luvas de procedimento, mscara, avental; pina de Kelly curva ou reta para fazer isquemia no local da inciso; recipiente para descarte do material utilizado. b) Stios de coleta do raspado intradrmico Em pacientes com leses cutneas visveis ou reas com alterao de sensibilidade, a coleta dever ser feita em lbulo auricular direito (LD), lbulo auricular esquerdo (LE), cotovelo direito (CD) e leso (L). Nas leses planas coletar no centro ou borda interna e nos ndulos, tubrculos e placas eritematosas marginadas por microtubrculos, coletar no centro.

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c) Tcnica de Coleta Para realizar a coleta necessrio que o procedimento ocorra em sala especfica. importante que ela seja arejada, limpa e com boa iluminao. Para realizao da coleta, seguir os passos descritos abaixo: acomodar o paciente confortavelmente; explicar o procedimento que ser realizado. No caso de criana explicar tambm para a pessoa responsvel; observar indicaes dos stios de coleta na solicitao mdica; manusear a lmina pelas bordas evitando colocar os dedos no local onde a amostra ser distribuda; identificar a lmina com as iniciais do nome do paciente, o nmero de registro da unidade e data da coleta; no momento de cada coleta fazer antissepsia com lcool a 70 GL ou 70%, dos stios indicados na solicitao mdica; com o auxlio da pina Kelly, fazer uma prega no stio de coleta, pressionando a pele o suficiente para obter a isquemia, evitando o sangramento. Manter a presso at o final da coleta tomando o cuidado de no travar a pina (Figura 9);
CPIA NO CONTROLADA
Figura 9: Pregueamento do stio de coleta (isquemia) e inciso para coleta do material
fazer um corte na pele de aproximadamente 5 mm de extenso por 3 mm de profundidade. Colocar o lado no cortante da lmina do bisturi em ngulo reto em relao ao corte e realizar o raspado intradrmico das bordas e do fundo da inciso, retirando uma quantidade suficiente e visvel do material. Se fluir sangue no momento do procedimento (o que no dever acontecer se a compresso da pele estiver adequada) enxugar com algodo; desfazer a presso e distribuir o material coletado na lmina, fazendo movimentos circulares do centro para a borda numa rea aproximadamente de 5 - 7 mm de dimetro, mantendo uma camada fina e uniforme; o primeiro esfregao dever ser colocado na extremidade mais prxima da identificao do paciente (parte fosca), e o segundo prximo ao primeiro observando uma distncia, de pelo menos 0,5 cm entre cada amostra e assim sucessivamente. Os esfregaos devem estar no mesmo lado da parte fosca da lmina (Fig 10); entre um stio e outro de coleta, limpar a lmina de bisturi e a pina utilizada com algodo ou gaze embebido em lcool 70 GL ou 70%, para que no ocorra a contaminao entre eles;

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fazer curativo compressivo e nunca liberar o paciente se estiver sangrando

I D E N T I F I C A O
LO
CE
Figura 10: Distribuio padro dos esfregaos na lmina
d) Fixao do esfregao a lminas, contendo os raspados intradrmicos, deve permanecer em superfcie plana e temperatura ambiente, durante 5 a 10 minutos at estarem completamente secos. aps esta etapa os esfregaos devem ser fixados passando-se as lminas 2 a 3 vezes, rapidamente, na chama de uma lamparina ou bico de Bunsen, com os esfregaos voltados para cima. Evitar o aquecimento da lmina durante a fixao, para que no haja alterao das caractersticas morfo-tintoriais do bacilo; em locais ou dias em que o ar esteja mais mido, o tempo de secagem do esfregao poder ser maior. Infeco de pele/ouvido/bipsia * quando solicitado pela Vigilncia Epidemiolgica p/ esclarecimento de surto. a) Bipsias procedimento mdico.
CPIA NO b) Leso aberta CONTROLADA no recomendada cultura de leses secas ou crostas; descontaminar as margens e a superfcie da leso; proceder nova limpeza com soluo fisiolgica estril; coletar o material purulento na parte mais profunda da leso utilizando seringa e agulha. Transferir a amostra para um frasco estril. Se no for possvel a coleta por puno, utilizar swab com meio de transporte Amies com carvo.
c) Abscesso fechado fazer anti-sepsia com produto adequado; aspirar o exsudato com agulha e seringa. Transferir a amostra para um frasco estril. No usar swab. d) Pstula e vescula selecionar uma pstula intacta. Fazer anti-sepsia com produto adequado e puncionar. Se a leso for seca, com crosta, sem vescula ou pstula evidente, remover o material superficial aps anti-sepsia e passar firmemente o swab estril sobre a leso. e) Secreo de ouvido externo usando um swab limpar o canal do ouvido com anti-sptico seguido de lavagem com soluo fisiolgica estril; com outro swab obter material fazendo rotao no canal do ouvido; introduzir o swab no meio de transporte de Amies.

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Infeco do Trato Urinrio (ITU) a) Coleta em pacientes do sexo feminino: paciente deve estar sem urinar, por pelo menos duas horas antes da coleta a paciente deve lavar bem as mos com gua e sabo neutro e sec-las com toalha de papel limpa e descartvel; deve despir-se, afastar os lbios vaginais e lavar bem a vulva e os lbios vaginais usando gua morna com sabo, sempre no sentido de frente para trs; deve enxaguar bem com gua morna, no secar com toalha; durante todo este processo a paciente deve manter os lbios vaginais separados, e no tocar a rea limpa com os dedos; urinar, desprezando a primeira parte do jato urinrio no vaso sanitrio; colher cerca de 30mL (aproximadamente a metade do frasco) de urina em um frasco estril, fechando assim que a urina for colhida; em seguida, a amostra colhida contida no frasco fechado, deve ser entregue a pessoa responsvel na recepo do Lacen. b ) Coleta em pacientes do sexo masculino: paciente deve estar sem urinar, por pelo menos duas horas antes da coleta o paciente deve lavar bem as mos; afastar o prepcio e desprezar no vaso sanitrio, uma pequena quantidade de urina; sempre segurando para trs o prepcio, colher cerca de 30mL de urina no frasco estril, fechando assim que a urina for colhida; em seguida, a amostra colhida contida no frasco fechado, deve ser entregue a pessoa responsvel na recepo do Lacen. Meningite bacteriana * Nos casos de suspeita de meningites bacterianas e/ou doena meningoccica SEMPRE deve ser coletado: LQUOR, SANGUE E SORO, mesmo que no haja sintomas de sepse. a) Coleta de lquor CONTROLADA procedimento mdico volume ideal: 3 a 5 mL ou coletar o maior volume que as condies clnicas permitirem; b) Coleta de sangue para hemocultura Tcnica de coleta: lavar as mos com gua e sabo, enxaguar bem, enxugar com papel toalha e calar as luvas; realizar a anti-sepsia rigorosa do local da puno, deixar agir por 1 minuto. Evitar tocar no local da puno; coletar assepticamente no mnimo 5mL de sangue de adulto e 1mL de criana, cuidar para que no haja bolhas de ar na seringa. Coletar um volume de sangue correspondente a aproximadamente 5 10% do volume do meio de cultura; no trocar de agulha antes de injetar o sangue no frasco. Volume de sangue para cada amostra adulto: 5 mL de sangue (p/ frasco com 45 mL de caldo TSB) criana (at 6 anos de idade): 1 mL (p/ frasco com 9 mL de TSB frasco peditrico).
CPIA NO

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Inoculao e incubao identificar os frascos de meio de cultura lquido (TSB ou BHI) com o nome do paciente, data e hora da coleta e nmero da amostra (se 1, 2 ou 3 amostra); retirar a parte superior (circular) do lacre metlico dos frascos; realizar a desinfeco da tampa de borracha com lcool etlico 70%, e deixar sobre a rolha uma gaze ou algodo embebido com lcool etlico a 70%. Manter o algodo sobre o frasco at o momento da puno; transferir o sangue coletado para o frasco, sem trocar a agulha; homogeneizar delicadamente o frasco por inverso.
CPIA NO
c) Soro p/ pesquisa de antgenos bacterianos e PCR CONTROLADA volume ideal: 3 a 5 mL ou no mnimo 1.0 mL; coletar o sangue sem o uso de anticoagulante e separar o soro. Para a realizao dos exames, o Lacen fornece um kit de meningite (Figura 11), onde se encontram as instrues de uso.
Figura 11: Kit de coleta de amostras para meningite
o kit deve ser conservado no refrigerador temperatura de 2 a 8C, antes do uso. observar a validade dos frascos e o aspecto do meio de cultura agar chocolate (aspecto mido, superfcie ntegra e sem contaminantes) e do TSB (sem precipitao, turvao ou contaminao). Caso o kit apresente alguma irregularidade separ-lo para ser devolvido ao Lacen, com justificativa e solicitao de novo kit. os kit no utilizados que estiverem vencidos ou prximos do prazo de vencimento devero ser devolvidos ao Lacen. encaminhar ao Lacen todos os meios semeados (com ou sem crescimento).
d) Orientao para o uso de kit de meningite no momento da semeadura, os meios de cultura devem estar a temperatura ambiente (se necessrio manter os frascos de gar chocolate e caldo TSB na mo fechada por alguns minutos); romper o lacre central dos frascos e fazer desinfeco das tampas de borracha com lcool etlico 70%; agar chocolate: com auxlio de seringa e agulha estreis, introduzir 5 a 10 gotas do lquor no frasco com meio de agar chocolate (frasco com tarja verde);

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lquor (LCR): colocar o restante do volume de LCR no frasco estril para o lquor (frasco com tarja azul); lmina: depositar sobre a lmina 1 gota de lquor centrifugado e deixar secar em temperatura ambiente. No usar chama do bico de Bunsen para a fixao do esfregao; frasco com meio de TSB (hemocultura): com auxlio de seringa e agulha estreis, introduzir 1 mL de sangue direto no frasco para coleta peditrica (frasco com tarja vermelha). No caso de frasco para coleta de adulto, com 45 mL de meio de cultura, introduzir 5 mL de sangue. Respeitar sempre a proporo da quantidade de sangue de 1:10 em relao ao meio de cultura. Soro: colocar 3 a 5 mL de soro no frasco estril para soro (frasco com tarja laranja).
Nota: Se o volume do lquor for muito pequeno, deve-se priorizar o inculo em gar chocolate para a preservao do microrganismo e colocar a gota do LCR sem centrifugar em lmina de vidro para a realizao da bacterioscopia pelo mtodo de Gram.
e) Orientao para o caso de envio de lquor in natura (sem kit do Lacen) CONTROLADA realizar puno lombar (procedimento mdico); identificar um frasco estril e uma lmina com o nome do paciente e tipo de amostra; acondicionar a amostra no frasco estril; conservar em temperatura ambiente; em uma lmina de microscopia nova, depositar 1 gota de lquor, de preferncia centrifugado e deixar secar a temperatura ambiente. No fazer esfregao. f) Orientao para encaminhamento de cepas bacterianas quando a cultura do LCR ou hemocultura for realizada no laboratrio local e houver crescimento de Neisseria meningitidis, Haemophilus spp e Streptococcus pneumoniae enviar o microrganismo isolado para confirmao no Lacen. realizar o repique do microrganismo isolado (cepa pura) no frasco de agar chocolate (frasco com tarja verde); na falta deste, usar um tubo ou placa de meio de cultura adequada (gar sangue ou gar chocolate, dependendo do microrganismo isolado). Incubar em estufa bacteriolgica a 34C - 36 C por 18-24 horas; identificar o tubo/placa com o nome do paciente e data do repique; fechar com fita crepe ou film plstico; encaminhar o tubo/placa em temperatura ambiente, imediatamente aps o perodo de incubao.
Notas: 1) As cepas enviadas devero ser provenientes de repiques recentes (24 horas de incubao) para evitar que haja perda da mesma por ressecamento. 2) Ao enviar cepas bacterianas para identificao, o laboratrio local dever especificar qual a amostra biolgica de origem (sangue ou lquor).
CPIA NO
g) Conservao das amostras at o envio incubar os 02 frascos (agar chocolate e frasco da hemocultura) em estufa bacteriolgica a 34C - 36 C por 18-24 horas, aps esse perodo, enviar imediatamente ao Lacen, em temperatura ambiente; lquor in natura e soro devero ser mantidos no freezer ou congelador (temperatura em torno de 20 C at a hora de serem enviados ao Lacen. O transporte dever ser feito com gelo reciclvel; cepas bacterianas: fechar o tubo/placa com fita crepe e manter a temperatura ambiente.

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h) Forma de acondicionamento para transporte amostra semeada em frasco de gar chocolate e frasco de hemocultura que j foram incubadas por 24 horas: acondicionar os frascos na caixa de transporte de amostras, em temperatura ambiente (informar esse dado na requisio encaminhada ao Lacen). Tempo crtico para a chegada destas amostras no Lacen at 48 horas aps a coleta; amostra semeada em frasco de gar chocolate e frasco de hemocultura que no foram incubadas por 24 horas: o transporte destas amostras dever ser realizado imediatamente aps a coleta ou no mximo at 2 horas aps a coleta, em temperatura ambiente; amostras de lquor in natura e soro devero ser encaminhadas em caixa trmica com gelo reciclvel; a lmina deve ser acondicionada em porta-lminas de plstico rgido para evitar quebra; cepas bacterianas: fechar o tubo/placa com fita crepe.
Nota: Os frascos que contm as amostras devem ser colocados dentro de um recipiente de paredes rgidas, a prova de vazamentos e inquebrvel contendo etiqueta com as caractersticas da amostra. Este recipiente deve ser colocado dentro de outra embalagem, como a caixa de trmica para transporte de amostras, que deve conter o rtulo de material infectante ou de risco biolgico.
Oftalmia gonoccica a) Material utilizado na coleta: swab de algodo alginatado; meio de transporte Amies com carvo. b) Orientaes para a coleta das amostras: afastar a plpebra e limpar a secreo acumulada nos cantos do olho; coletar material dentro da conjuntiva, com auxlio do swab; inocular o material, imediatamente, em meio de transporte Amies com carvo; encaminhar ao Lacen at 8 horas aps a coleta, em temperatura ambiente. Pneumonia bacteriana Amostra biolgica sangue (preferencialmente) escarro, lavado brnquico, lavado broncoalveolar
CPIA NO CONTROLADA
Nota: o escarro no considerado ideal para avaliao microbiolgica do trato respiratrio por ser uma mostra muito contaminada, portanto sangue, lavado brnquico ou lavado brocoalveolar pode fornecer resultado mais confivel.
a) Sangue ver procedimento em meningites bacterianas. b) Escarro colher, de preferncia, a primeira amostra da manh; orientar o paciente para enxaguar previamente vrias vezes a boca com gua para remover a flora bacteriana superficial dessa regio; respirar fundo vrias vezes e tossir profundamente, recolher a amostra diretamente em um frasco de boca larga (explicar ao paciente a diferena entre uma amostra obtida aps tosse profunda e a saliva, a fim de se obter um material de melhor qualidade).

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c) Lavado brnquico/ lavado broncoalveolar (LBA) procedimento mdico. Sfilis a) Coleta para exame microscpico aps colorao de Fontana Tribondeau limpar a rea em volta da leso com gaze estril embebida em soluo salina estril; friccionar a borda da leso com uma lmina de bisturi suavemente at obter uma linfa; colocar a linfa em 2 lminas previamente identificadas e confeccionar o esfregao. Deixar secar a temperatura ambiente; encaminhar ao setor de bacteriologia imediatamente ou at 2 horas aps a coleta. b) Coleta para exame microscpico em campo escuro limpar a rea em volta da leso com gaze estril embebida em soluo salina estril; fricionar a borda da leso com uma lmina de bisturi suavemente at obter uma linfa; colocar a linfa sobre uma lmina com uma gota de salina, colocar a lamnula; encaminhar ao setor de bacteriologia imediatamente aps a coleta.
Nota: no usar medicamento tpico na leso nas 12 horas que antecedem ao exame.
Tracoma * coleta somente em situaes de surto quando solicitado pela Vigilncia Epidemiolgica. a) Orientaes para a coleta e transporta da amostra: utilizar lmina prpria para imunofluorescncia direta (IFD): lmina com crculo central. limpar a secreo externa do olho com gaze estril. Descer a plpebra inferior de maneira a expor a conjuntiva. Com um swab umedecido, limpar a secreo acumulada nos cantos do olho. Descartar este swab. com outro swab estril, coletar a amostra girando o swab vrias vezes para obter clulas epiteliais em quantidade suficiente para o diagnstico. transferir a amostra coletada no swab para o crculo central da lmina para imunofluorescncia, rolando firmemente o swab, tendo o cuidado para no ultrapassar o crculo. deixar a lmina secar a temperatura ambiente por 5 a 10 minutos. Embalar a lmina em papel alumnio e acondicion-la em porta-lmina; transportar em caixa trmica com gelo; a lmina, com esfregao fixado, embalada em papel alumnio, pode ser conservada em geladeira (53C) por at 72 horas antes do envio ao Lacen. b) Quantidade de amostras a serem coletadas: Surtos at 30 doentes = 05 amostras Surtos acima de 30 doentes = 10% do total de doentes
CPIA NO CONTROLADA
Notas: 1) A lmina deve estar devidamente identificada com as seguintes informaes: nome completo do paciente, tipo de material coletado, data e hora da coleta. 2) A amostra deve vir acompanhada do formulrio de notificao de surto (SINAN/Net).

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Uretrite e cervicite no gonoccica Orientaes para a coleta (coleta realizada somente no Lacen). Preparo do paciente do sexo feminino: a coleta da secreo feminina deve ser feita aps 3 horas da ltima mico. A paciente deve estar em abstinncia sexual de 2 dias pelo menos. No estar fazer uso de antisspticos locais ou cremes vaginais, antibiticos ou quimioterpicos, no estar menstruada. No ter realizado exames ginecolgicos com toque ou ultrasom transvaginal nas 48 horas que antecedem o exame. Preparo do paciente do sexo masculino: estar h pelo menos 3 horas sem urinar. Evitar relaes sexuais e medicamentos tpicos nas 24 horas que antecedem o exame. Preferencialmente no usar antibitico nos 3 dias que antecedem o exame.
a) Pesquisa de Ureaplasma e Micoplasma genitais Amostras biolgicas paciente do sexo masculino: raspado uretral. paciente do sexo feminino: raspado endocervical e uretral. Swab raspado uretral: algodo alginatado, rayon ou dracon, ultrafino estril. raspado endocervical: algodo alginatado, rayon ou dracon estril. Meio de transporte caldo nutritivo (fornecido pelo Lacen).
CPIA NO CONTROLADA
Procedimento para a coleta do raspado uretral masculino solicitar ao paciente para retrair o prepcio; limpar a secreo emergente com gaze estril; introduzir o swab alginatado, de rayon ou dracon, cerca de 4 centmetros no canal uretral; girar o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para obter o maior nmero de clulas epiteliais possveis; retirar o swab; lavar bem o swab no frasco com caldo nutritivo e comprimir contra a parede do tubo; desprezar o swab e encaminhar o frasco com caldo nutritivo imediatamente ao setor de bacteriologia, em temperatura ambiente. Procedimento para a coleta do raspado uretral feminino fazer a expresso da secreo das glndulas parauretrais pressionando a parede vaginal com o dedo mdio; introduzir o swab alginatado, de dracon ou rayon cerca de 2 cm na uretra; coletar a secreo girando delicadamente o swab de 8 a 10 vezes para obter o maior nmero de clulas epiteliais possveis; retirar o swab; lavar bem o swab no frasco com caldo nutritivo e comprimir contra a parede do tubo; desprezar o swab e encaminhar o frasco com caldo nutritivo imediatamente ao setor de bacteriologia, em temperatura ambiente.

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Procedimento para a coleta do raspado endocervical introduzir o espculo; limpar com gaze a secreo do fundo do saco vaginal e a que recobre o colo do tero; introduzir o swab alginatado, de rayon ou dracon cerca de 1cm no canal endocervical, girando-o delicadamente de 8 a 10 vezes, para obter o maior nmero de clulas epiteliais possveis. Retirar o swab sem tocar as paredes vaginais; inocular o swab imediatamente no frasco com caldo nutritivo e comprimir contra a parede do tubo; desprezar o swab e encaminhar o frasco com caldo nutritivo imediatamente ao setor de bacteriologia, em temperatura ambiente.
CONTROLADA b) Pesquisa de Chlamydia trachomatis por IFD Amostras biolgicas paciente do sexo masculino: raspado uretral. paciente do sexo feminino: raspado endocervical e/ou raspado uretral CPIA NO
Swab swab de dracon ou rayon. Procedimento para a coleta do raspado uretral masculino e feminino e raspado endocervical Ver procedimento de coleta para pesquisa de Ureaplasma e Micoplasma genitais. Vaginite e vaginose bacteriana Orientaes para a coleta (coleta realizada somente no Lacen). a) Exame a fresco: introduzir o espculo; coletar a amostra do fundo do saco vaginal com auxlio de um swab de algodo haste plstica (swab comum); retirar o swab, introduzir em tubo com 1,0 mL de salina estril, previamente identificado. b) Cultura: a) introduzir o espculo; b) coletar a amostra do fundo do saco vaginal com auxlio de um swab de algodo haste plstica (swab comum); c) retirar o swab e inocular a amostra imediatamente no meio de transporte Amies com carvo, identificando o mesmo.

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6.2.2 Setor de Biologia Molecular UO BIMOL Deteco do vrus INFLUENZA A (engloba tambm H1N1pandmico 2009) A sensibilidade e especificidade do mtodo dependem da quantidade e qualidade de material enviado para a anlise. Por isso, sua coleta e transporte so essenciais para o diagnstico adequado. Perodo ideal de coleta: at o 3 dia do incio dos sintomas e eventualmente at o 7 dia. a) Swab combinado (nasofaringe e orofaringe): Na tcnica de swab combinado de nasofaringe e orofaringe, deve ser utilizado exclusivamente swab de rayon (fornecido no kit de coleta). No deve ser utilizado swab de algodo, pois o mesmo interfere nas metodologias moleculares utilizadas. Proceder a coleta utilizando trs swab que sero inseridos um na orofaringe e os dois outros, um em cada narina. CPIA NO Tcnica de coleta: inserir 1 swab na poro superior da faringe (aps a vula) e realizar movimentos circulares para obter clulas da mucosa, evitando tocar em qualquer parte da boca (Fig 13). proceder da mesma forma com os outros dois swab nasais que sero inseridos em cada narina at atingir o fundo da coana nasal (Fig 12). inserir os trs swab em um mesmo frasco contendo meio de transporte viral ou soluo estril de PBS 7,2 suplementado. quebrar ou cortar as hastes dos swab, fechar e identificar com nome completo do paciente de forma legvel e com caneta resistente a gua. manter refrigerado a 2 a 8C (no congelar) at o acondicionamento para transporte.
CONTROLADA
Figura 12: coleta de secreo de nasofaringe
Figura 13: coleta de secreo de orofaringe
b) Aspirado de Nasofaringe utilizar a tcnica de aspirado de nasofaringe quando a unidade de sade dispuser de frasco coletor de secreo, pois a amostra obtida por essa tcnica pode concentrar maior nmero de clulas.
Nota: frasco coletor de plstico descartvel acoplado com sonda n 6 e com controle de vcuo (tipo bronquinho).
A coleta de ANF um processo indolor podendo apenas provocar lacrimejamento reflexo. Coletores de muco plsticos descartveis ou equipo de soro acoplado a uma sonda so

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preferencialmente recomendados para a obteno do espcime. A sonda preconizada a uretral n 6 com apenas um orifcio na ponta. O calibre da sonda varivel segundo o fabricante, devendo ser dada preferncia de maior flexibilidade. A aspirao pode ser realizada com bomba aspiradora porttil, ou vcuo de parede do hospital; no utilizar uma presso de vcuo muito forte. Tcnica de coleta: inserir atravs da narina at atingir a regio da nasofaringe quando ento o vcuo aplicado aspirando secreo para o interior do frasco coletor ou equipo. O vcuo deve ser colocado aps a sonda localizar-se na nasofaringe, uma vez que se no momento da introduo da sonda houver o vcuo, poder ocorrer leso da mucosa. Este procedimento deve ser realizado em ambas as narinas, mantendo movimentao da sonda para evitar que haja presso diretamente sobre a mucosa provocando sangramento (Fig 14). alternar a coleta nas duas fossas nasais at obter um volume suficiente, aproximadamente 1 mL, de ANF. aps nebulizao com soro fisiolgico a secreo mais fluida e abundante, facilitando a obteno. No insistir se a coleta no alcanar o volume desejado (mais ou menos 1 mL), pois poder ocasionar leso de mucosa. aps aspirar a secreo nasofarngea com o coletor prprio, inserir a sonda de aspirao no frasco contendo 3 mL de meio de transporte viral ou em PBS pH 7,2 (fornecido pelo Lacen) e aspirar todo o meio para dentro do frasco coletor. manter refrigerado entre 2 a 8C (no congelar) at o acondicionamento para o transporte.
CPIA NO CONTROLADA
Figura 14: coleta de aspirado de nasofaringe
VIROSES RESPIRATRIAS Programa sentinela de Influenza As orientaes das tcnicas de coleta devem seguir as mesmas orientaes descritas acima para deteco do vrus Influenza A. a coleta deve ser realizada na fase aguda, at cinco dias do incio dos sintomas clnicos. Quanto mais cedo, maior a chance de detectar o vrus; o material coletado tem que ser processado at 24 horas aps a coleta por isso deve-se enviar a amostra para o Lacen logo aps a coleta, manter e transportar em temperatura de 2 a 8 C (refrigerao); atualmente esta coleta realizada somente nas Unidades Sentinelas: Em Florianpolis: UPA Sul, UPA Norte; Em So Jos: Unidade Sanitria Forquilhinhas

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Teste de Quantificao de Carga Viral do HIV a) Coleta da amostra no necessrio jejum ou qualquer preparo especial do paciente. Entretanto, deve-se evitar a coleta aps ingesto de alimentos gordurosos nas ltimas 3 horas; coletar 2 tubos de 5 mL contendo EDTA (K2 ou K3 tampa lils); em recm-nascidos, caso haja necessidade, dever ser utilizado tubos peditricos; Identificar os tubos com nome, data e hora da coleta; CPIA NO no utilizar tubos de EDTA COM GEL SEPARADOR; CONTROLADA nunca utilizar tubos de coleta reciclados; caso seja enviado sangue total, este deve ser conservado em seu tubo original e enviar: b) Preparo da amostra (plasma), conservao e transporte adotar precaues para evitar respingos nas luvas, bancadas ou qualquer outro material utilizado, evitando assim a contaminao pessoal e da amostra; todo material utilizado deve ser novo e estril (livre de RNAse ou DNAse) , uma vez que a menor contaminao por outra amostra pode ser amplificada e gerar falso resultado; para a obteno do plasma, centrifugar o sangue total a 2500 rpm durante 15 minutos. O plasma no pode ser separado aps repouso espontneo, obrigatria a centrifugao; o plasma no pode estar hemolisado e no pode haver vestgios de hemcias; no submeter o plasma a processos de filtrao ou centrifugao adicionais com o intuito de diminuir a turbidez; em seguida a centrifugao, transfira o plasma para tubos estreis (tampas rosqueveis ou em microtubo de polipropileno tipo eppendorf livres de enzimas (RNAse ou DNAse) em alquotas de no mnimo 1100 a 1200 ul com auxlio de ponteiras com barreiras e livre de enzimas, sem ressuspender as clulas; evitar mltiplos congelamentos-descongelamentos; para envio tem que ser observado o tempo de coleta de cada amostra. Portanto, quando houver vrias coletas, o tempo para o transporte deve ser calculado a partir da primeira amostra coletada;
Nota: Recomendamos nunca enviar amostras s sextas-feiras, sbados e domingos ou vsperas de feriado sem autorizao do Lacen.
Genotipagem do HIV o manuseio correto das amostras imprescindvel para proteger o RNA viral do HIV-1 de degradao; seguir as mesmas orientaes de coleta, preparao de amostra (plasma) da Carga Viral do HIV. Porm deve ser observado: Sempre transportar o plasma em gelo seco.
Nota: Recomendamos nunca enviar amostras s sextas-feiras, sbados e domingos ou vsperas de feriado sem autorizao do LACEN.
As amostras devem estar acompanhadas dos Formulrios A e B (disponveis no site www.aids.gov.br) devidamente preenchidos pelo mdico solicitante (formulrio A) e mdico de referncia em genotipagem (formulrio B).

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6.2.3 Setor de Doenas Tropicais UO DTROP Doena de Chagas Aguda (DCA) Exame microscpico (hemoparasitolgico) para pesquisa de Trypanosoma cruzi. (Ver Anexo A - DOC MCT 01 - 01). Este exame dever ser solicitado somente para suspeita de Doena de Chagas em casos agudos. Devido o Trypanosoma cruzi estar presente no sangue somente nos primeiros 30 dias do incio dos sintomas, necessita-se que aps este perodo sejam solicitados exames sorolgicos. Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) Todas as coletas devero ser realizadas em ambulatrio mdico referenciado pela Diretoria de Vigilncia Epidemiolgica. necessria a realizao do Teste de Montenegro como forma de Triagem. Leishmaniose Visceral Humana Para realizao da sorologia dever ser encaminhado o nmero de notificao do SINAN. Leishmaniose Visceral Canina Este tipo de exame realizado em ces de circulao em reas endmicas ou para fins epidemiolgicos. Em reas no endmicas necessrio consultar o Servio de Vigilncia Epidemiolgica. Leptospirose Os exames de microaglutinao somente sero realizados em pacientes com ELISA IgM leptospirose reagente ou inconclusivos. Os exames de PCR somente sero realizados em pacientes com suspeita de leptospirose que foram a bito at o 6 dia de incio dos sintomas. Malria Controle de Qualidade das lminas para pesquisa de Plasmodium sp: Transporte de lminas para Superviso Indireta:
CPIA NO CONTROLADA
todas as lminas positivas e todas as negativas devem ser encaminhadas ao Setor de Doenas Tropicais do Lacen para superviso indireta; devem ser transportadas em porta-lminas; os formulrios que acompanham as lminas para a superviso indireta no devem ser colocados junto com as lminas para evitar possveis contaminaes; importante colocar no formulrio o nome do laboratrio e o municpio de procedncia; colocar o formulrio de superviso junto ao porta-lmina, embrulhar e enviar ao Lacen, devidamente identificado com o endereo do remetente e destinatrio.
Nota: Os formulrios de superviso esto disponveis na home page do Lacen/SC no endereo eletrnico: http://lacen.saude.sc.gov.br.

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6.2.4 Setor de Imunologia UO IMUNO No necessrio jejum prolongado para os exames imunolgicos, porm recomendamos jejum de 3 a 4 horas para evitar lipemia. Amostras intensamente hemolisadas no sero aceitas. Para a realizao dos exames de sorologia que utilizam o mesmo material biolgico (soro) pode ser enviado somente 1 ( um) tubo com no mnimo 2 mL de soro; Brucelose
CPIA NO CONTROLADA
Sorologia Teste de aglutinao bacteriana para a deteco qualitativa e semi-quantitativa de anticorpos do anti-Brucella no soro humano corado pelo Rosa Bengala. Este exame detecta a presena de anticorpos anti-brucella no soro de indivduos que apresentam sintomatologia atual ou pregressa. Seguir orientaes do Protocolo Estadual de Vigilncia e Manejo Clnico de Brucelose Humana, material elaborado pelo Grupo Tcnico da Diretoria de Vigilncia Epidemiolgica de Santa Catarina (DIVE) e Lacen, disponveis nas home page do Lacen e DIVE. Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao seguindo orientaes de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio prpria com informao de diagnstico ou seguimento sorolgico. Citomegalovirus, Infeco pelo Sorologia Deteco de anticorpos IgM e IgG na infeco pelo citomegalvrus. destinado ao diagnstico de casos suspeitos, em doadores de rgos, receptores de transplantes, pacientes imunocomprometidos e no acompanhamento pr-natal. Informar esses dados na requisio. Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao seguindo orientaes de armazenamento e transporte deste manual e acompanhada da requisio especfica. Contagem de linfcitos T CD4+/CD8+/CD45+ No necessrio jejum do paciente, porm sugerimos que seja orientado ao paciente no ingerir alimentos gordurosos antes da coleta, para evitar lipemia da amostra. Coleta de sangue em tubo com anticoagulante EDTA K2 ou K3. Homogeneizar suavemente para evitar hemlise. Manter e transportar a temperatura ambiente (20 a 25C). NO REFRIGERAR. O exame deve ser realizado no prazo mximo de 48 horas aps a coleta, portanto a amostra deve chegar ao Lacen dentro do prazo vivel para processamento. Portanto, as amostras devero chegar ao Lacen em no mximo 40 horas aps a coleta. Caso cheguem

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aps este prazo, sero descartadas. Cada amostra deve estar acompanhada do Laudo Mdico para emisso de BPA-I com todas as informaes requeridas de forma legvel. O mdico solicitante deve ser cadastrado no Sistema de Controle de Exames Laboratoriais SISCEL - do Ministrio da Sade. Para isto, necessrio nmero de CRM e CPF. Dengue Sorologia Deteco do Antgeno NS1 dengue Deteco do anticorpo IgM - dengue Para as amostras de sangue (soro) coletadas com menos de cinco dias de incio de sintomas sero realizadas a deteco do antgeno NS1 (detectvel at o 9 dia de incio dos sintomas). As mesmas sero tambm armazenadas a 80C para realizao do isolamento viral em Laboratrio de Referncia Nacional, caso seja necessrio. Para deteco de anticorpos IgM, a coleta de sangue deve ser realizada a partir do 6 dia do incio dos sintomas (febre). Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ ou lipemia, sob refrigerao seguindo orientaes de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio especfica. Em caso de bito: No mximo 12 horas aps o bito, coletar sangue por puno intracardaca e amostras de fgado, rim, bao e linfonodo por necropsia. Acondicionar este material isoladamente em frascos estreis, devidamente identificados. Manter e transportar - 70 C. Para exame histopatolgico e imunohistoqumica, podem-se coletar fragmentos de tecidos e acondicion-los isoladamente em frascos com formalina ou em blocos de parafina. Estes materiais devem permanecer em temperatura ambiente. Doena de Chagas
CPIA NO CONTROLADA
Exame complementar para diagnstico da Doena de Chagas ou acompanhamento de infeco pregressa. Sorologia ELISA detecta anticorpos totais (IgM e IgG) anti- Tripanossoma cruzi e Imunofluorescncia Indireta - Deteco de anticorpos IgG anti- Tripanossoma cruzi Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao seguindo as orientaes de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio especfica. Doena Diarrica - Rotavrus Deteco do antgeno de rotavrus em fezes lquidas in natura coletadas do 1 at o 4 dia aps incio dos sintomas. Amostras coletadas com 6 dias ou mais no contm quantidades de antgeno suficiente para a realizao de um exame correto, podendo ocorrer exames falso-negativos.

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No coletar amostras em meios que contenham conservantes ou swab retal. Aps realizada a deteco de rotavrus no Lacen, as amostras so encaminhadas para Laboratrio de Referncia para pesquisa de Norovrus e Astrovrus. As amostras devem ser mantidas sob refrigerao e encaminhadas ao LACEN em at 48 horas aps a coleta. Em caso de surtos, coletar trs amostras de cada local (creche, escola ou local trabalho). Doenas Exantemticas Sarampo / Rubola / Sndrome da Rubola Congnita e Eritema Infeccioso (Parvovrus B19) Sorologia Deteco de anticorpos IgM/IgG As amostras de sangue de caso suspeito, contato com caso suspeito, gestante sintomtica, gestante assintomtica (contato com caso suspeito), gestante vacinada inadvertidamente e recm-nascido com suspeita de sndrome da rubola congnita devem ser coletadas sempre que possvel no primeiro atendimento do paciente. Informar esta condio epidemiolgica na requisio. Em pacientes sintomticos, so consideradas amostras oportunas aquelas coletadas entre o 1 ao 28 dia do aparecimento do exantema. Amostras coletadas aps este perodo so consideradas tardias. Mesmo assim devem ser enviadas ao laboratrio. A coleta de segunda amostra ser solicitada pelo LACEN ou DIVE. Esta dever ser coletada entre duas a 3 semanas aps a primeira ( nas amostras oportunas). Enviar requisio prpria do laboratrio, sempre informando a data de incio do exantema, dados vacinais recentes e histrico de viagem. CPIA NO Amostra: Soro lmpido, sem hemlise intensa e/ou lipemia, sob refrigerao, seguindo as orientaes de armazenamento e transporte deste manual. Isolamento viral (enviada ao Laboratrio de Referncia Nacional) Amostras de urina, sangue total e secreo de nasofaringe devem ser coletadas at o 5 dia a partir do aparecimento do exantema; Urina Coletar aps higiene ntima, 15 a 10 mL de urina (de preferncia a 1 urina da manh), desprezando o 1 jato. Coletar o jato mdio em frasco estril e enviar em at 24 a 48 horas sob refrigerao; Sangue Total coletar 4 a 10 mL de sangue em tubo com anticoagulante. Enviar a amostra sob refrigerao em at 24 horas; Secreo de nasofaringe coletar 3 swabs: 2 swabs de secreo com clulas da parede posterior nasal das duas narinas e 1 swab de orofaringe. Os 3 swabs sero colocados em meio de transporte viral fornecido pelo LACEN/SC. Enviar em at 24 horas aps a coleta, mantendo sob refrigerao.
CONTROLADA
Nota: Devem ser priorizadas as seguintes situaes: Casos importados, ocorrncia de surtos, casos com IgM reagente ou indeterminado.

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Sfilis Triagem com teste no treponmico: VDRL ou RPR realizado para o ambulatrio do Hospital Nereu Ramos de Florianpolis em atendimento ao protocolo para acidentes com material biolgico/violncia sexual. Testes Confirmatrios repetio do teste no treponmico e realizao da etapa II e III (testes treponmicos) de acordo com Portaria MS/ n 3.242, de 30 de dezembro de 2011, que dispe sobre o Fluxograma Laboratorial da Sfilis. Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao, seguindo as orientaes de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio especfica. Toxoplasmose Sorologia Deteco de anticorpos IgM/IgG Teste de Avidez dos anticorpos da classe IgG
CPIA NO CONTROLADA
Coleta de sangue (soro) para deteco de anticorpos IgM e IgG recomendada em 8 a 10 dias aps incio dos sintomas. Em alguns casos, ttulos altos de IgM podem permanecer por meses ou anos. Alm da sorologia pelo mtodo ELISA/ELFA, o Lacen realiza o Teste de Avidez os anticorpos da classe IgG para elucidao destes casos. O teste de Avidez de anticorpos da classe IgG um procedimento laboratorial que permite estimar o perodo aproximado em que ocorreu a infeco toxoplsmica. Em gestantes, a avaliao deve levar em conta o tempo gestacional e deve-se correlacionar com os valores obtidos para anticorpos anti-toxoplasma IgM ou IgG em amostras pareadas. O seguimento sorolgico ficar a critrio clnico. Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao, seguindo as orientaes de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio especfica. 6.2.5 Setor de Micologia UO MICOL Em Micologia, fica difcil separar as orientaes de coleta por etiologia, uma vez que normalmente, para uma nica suspeita clnica solicitado anlises de diferentes amostras biolgicas. Por isso, optou-se por separar apenas por Micoses superficiais e Micoses Sistmicas, no sentido de orientar o tcnico quanto procedncia da amostra. Micoses Superficiais a) Pele descontaminar a pele com lcool etlico 70% e esperar total evaporao, antes da coleta; as amostras de leses de pele como escamas, crostas ou cascas devem ser

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colhidas em placa, preferencialmente com uma lmina de bisturi descartvel ou com a borda da lmina de vidro de microscopia, muito limpa; deve-se colher, raspando em vrios pontos da leso, procurando as bordas das leses mais recentes; nos casos em que no h escamas aparentes, procura-se raspar bem o local e retirar o material que for possvel; a amostra biolgica coletada deve ser acondicionada em placas de Petri estreis (Figura 15) ou em pedao de papel escuro esterilizado.
CPIA NO CONTROLADA
Figura 15 Coleta de amostra para exame micolgico
b) Couro Cabeludo descontaminar o local da leso com lcool etlico 70% e esperar total evaporao, antes da coleta; a amostra de leses no couro cabeludo deve ser obtida atravs da raspagem do local; a amostra deve conter tocos de cabelo, o contedo dos folculos tapados e as escamas de pele; os cabelos da rea tambm podem ser puxados com pina (os cabelos infectados so facilmente removveis); a amostra biolgica coletada deve ser acondicionada em placas de Petri estreis (Figura 15) ou em pedao de papel escuro esterilizado. c) Cabelos e Plos descontaminar a pele ou o couro cabeludo com lcool 70% e esperar total evaporao, antes da coleta; se a leso for ao longo do cabelo ou plo, como ndulos, por exemplo, esses devem ser cortados com tesoura; a amostra biolgica coletada deve ser acondicionada em placas de Petri estreis (Figura 15) ou em pedao de papel escuro esterilizado. d) Unha os fragmentos de unhas alteradas podem ser colhidos, raspando-os com o bisturi ou com o auxlio de uma tesoura limpa; material que se deposita embaixo da unha pode ser retirado cuidadosamente com o bisturi, com um palito (tipo de manicure), previamente esterilizado ou outro objeto pontiagudo estril; em casos de paronquia (leses na regio da cutcula), colhem-se as escamas e, se possvel, o pus, com um swab em salina estril;

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se a leso uma mancha esbranquiada em baixo da unha, raspar por cima da unha com o bisturi at chegar na parte com a leso; desprezar este material e raspar todo o contedo da mancha; a amostra biolgica coletada deve ser acondicionada em placas de Petri estreis (Figura 15) ou em pedao de papel escuro esterilizado.
Nota: quando o material da leso seco, reduz a contaminao bacteriana e as amostras descritas acima podem ser estocadas, em placas de petri estreis ou em saquinhos plsticos, por meses, sem perder a viabilidade do fungo dermatfito.
e) Mucosa oral e orofaringe para as infeces de boca, o raspado com lmina de bisturi ou esptula, nas partes afetadas (reas com eritema e/ou placas brancas), melhor do que o swab, se o material for processado imediatamente; para o material de leso de mucosa jugal, papilas linguais ou regio tonsilar, mergulhar o swab estril umedecido em salina estril e enviar o tubo ao laboratrio. f) Leso de nariz e seios paranasais CPIA NO CONTROLADA as leses podem ser raspadas e colocadas em recipiente estril; material necrtico e tecidos so obtidos por bipsia; para as secrees, utilizar swab umedecido em salina estril, fazendo rotao no local. g) Ouvido as infeces fngicas de ouvido so geralmente secas, exceto quanto associadas a infeces bacterianas; a raspagem do material sempre melhor para o diagnstico laboratorial, embora o swab em salina estril tambm possa ser usado. h) Pus e material de abscesso se houver escamas ou crostas na parte superficial da leso, estas podem ser raspadas e colocadas em placas de Petri ou frascos estreis; aspirado do pus e/ou biopsia so mais apropriados para o exame; o pus coletado assepticamente de abscessos no drenados com uma agulha estril em seringa. Aps a coleta, retirar a agulha com uma pina e passar o material para um frasco estril; nas leses ulceradas, caso o material tenha que ser colhido com swab (o que no recomendado), o local deve ser limpo com gaze embebida em salina estril para eliminar os exsudatos superficiais que so altamente contaminados com bactrias para ento inserir o swab at a parte mais profunda da leso, evitando encosta-lo na periferia e na pele adjacente; se algum gro for visvel no pus, este deve ser includo na amostra. i) Olho deve ser solicitado meio de cultura ao laboratrio e o material retirado das reas de ulceraes e supuraes, coletado pelo oftalmologista deve ser inoculado imediatamente no meio de cultura; lgrima e fludos podem ser coletados com pipeta plstica estril (pipeta Pasteur descartvel Figura 16). O swab no adequado para este tipo de material.

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CPIA NO CONTROLADA
Figura 16: Modelos de pipeta Pasteur plstica
j) Secreo Vaginal com auxlio de espculo, coletar o material da leso ou do fundo do saco vaginal com swab estril; enviar o swab umedecido em salina estril ao Lacen.
Notas: 1) para todas as coletas descritas acima, colher todo o material disponvel na leso. Quanto mais material mais viabilidade na visualizao e no crescimento em cultura. 2) todas as vezes que a coleta for com swab, este deve ser umedecido em salina ou gua estril antes da coleta. Aps a coleta, deve permanecer em um frasco estril com salina suficiente para mant-lo mido at o procedimento do exame.
Micoses Sistmicas a) Escarro preferencialmente deve ser colhido por broncoscopia: lavado ou aspirado brnquico; quando no for possvel, o escarro deve ser colhido da mesma maneira como colhido para o exame de tuberculose, no esquecendo da higiene da boca antes da coleta, para diminuir a contaminao pelos saprfitas da cavidade bucal e da faringe.
Nota: o exame de escarro, (direto e cultura), nem sempre satisfatrio e confivel, por ser uma amostra muito contaminada. Quando houver a possibilidade do exame sorolgico, deve-se optar pelo ltimo.
b) Aspirado traqueal e secreo obtida por broncoscopia procedimento realizado por mdico treinado. O material colhido colocado em recipiente estril. c) Aspirado gstrico obtido atravs de sonda nasogstrica pela manh, em jejum; aspirar cerca de 5 a 10 mL de suco gstrico. d) Fluidos pleural, abdominal e sinovial: aspirados ou drenados, so coletados assepticamente em frasco estril contendo heparina estril 1:1000; a quantidade de heparina usada varia de acordo com o volume da amostra (aproximadamente 1 mL por 10 mL de fludo); em casos de lquido abdominal de pacientes de dilise peritoneal, colher sem heparina ou em frasco de hemocultura; e) Urina A amostra biolgica mais apropriada para o diagnstico de micose do trato urinrio obtida por sondagem ou citoscopia. Quando no for possvel, e para evitar contaminao com microrganismos presentes nas reas vizinhas, proceder da seguinte maneira:

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realizar limpeza prvia da regio perineal com gua e sabo; desprezar o primeiro jato de urina da manh e colher 3 a 5 mL de urina em frasco estril.
f) Fezes fazer lavagem prvia da regio anal com gua e sabo; coletar pores de fezes em recipiente estril com tampa de rosca ou swab anal umedecido em salina estril e transportado tambm em salina suficiente para manter o material mido. g) Lquor (LCR Lquido Cfalorraquidiano) procedimento mdico; para exame direto, cultura e prova do ltex so necessrios de 2 a 3mL de lquor.
Nota: no recomendvel que a mesma amostra seja utilizada para os exames bacteriolgicos, micolgicos ou de tuberculose porque pode haver contaminao. O ideal uma alquota da amostra para cada setor. CPIA NO CONTROLADA
h) Sangue (Hemocultura) Tcnica de coleta: lavar as mos com gua e sabo, enxaguar bem, enxugar com papel toalha e calar as luvas; fazer a anti-sepsia rigorosa do local da puno, deixar agir por 1 minuto. Evitar tocar no local da puno; coletar assepticamente no mnimo 5mL de sangue de adulto e 1mL de criana, cuidar para que no haja bolhas de ar na seringa. Coletar um volume de sangue correspondente a aproximadamente 5-10% do volume do meio de cultura; no trocar de agulha antes de injetar o sangue no frasco. Volume de sangue para cada amostra recomendado no mnimo duas amostras de cada paciente, sendo uma do brao direito e outra do esquerdo, ou a critrio mdico. deve ser respeitada a quantidade de sangue de 1:10 em relao ao meio de cultura, isto : 5 mL de sangue para 45 mL de meio de TSB -Trypticase Soy Broth e 1 mL de sangue para 9 mL de TSB (frasco peditrico). Inoculao romper o lacre central dos frascos e fazer a desinfeco na tampa de borracha dos frascos de meio com TSB (frasco de hemocultura) com lcool etlico 70%; inocular o sangue direto da seringa de coleta no frasco de hemocultura. Misturar bem (sem agitar) para evitar coagulao. i) Aspirado de Medula ssea procedimento mdico; aspirado de medula ssea coletado assepticamente em frasco estril contendo heparina estril 1:1000 (0,5 mL de heparina diluda 1:1000); aceita-se com restrio quando coletado em frasco para hemocultura. j) Tecido obtido por bipsia, necropsia e peas operatrias colher assepticamente, utilizando instrumentos estreis; colocar em recipiente estril com salina;

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no colocar nenhum lquido fixador (por exemplo, formalina); encaminhar ao Lacen em temperatura ambiente.
k) Sorologias para as sorologias, as amostras de sangue so coletadas em tubo seco, 5 a 10 mL so suficientes; o soro deve ser separado, congelado e encaminhado sob refrigerao.
Nota: para todos os exames de micologia, necessrio constar na requisio a suspeita clnica para que o laboratrio possa fazer uso dos meios e condies de cultivos mais adequados.
6.2.6 Setor de Tuberculose UO TUBER Escarro espontneo a) Orientao lavar a boca / bochechos; a coleta deve ser realizada em local arejado, ar livre; abrir o pote; forar a tosse: inspirar profundamente; prender a respirao, escarrar no pote.
CPIA NO CONTROLADA
b) Comentrios a 1 amostra coletada na Unidade de Sade no momento da consulta; a 2 amostra coletada na manh seguinte ao despertar; coletar em 2 dias consecutivos; conservar em refrigerao (2a 8C); transportar ao laboratrio ao abrigo da luz solar. Escarro induzido a) Orientao a sala equipada deve ser equipada com cuidados de biossegurana para evitar contaminao do ambiente; acompanhamento de tcnico treinado; no dia anterior deve-se ingerir muito lquido; a nebulizao deve ser feita com soluo salina hipertnica a 3%, durante 5 a 20 minutos; seguir as mesmas instrues do escarro espontneo. b) Comentrios indicado quando o paciente tem pouca secreo ou no consegue expelir; a nebulizao fluidifica a secreo do pulmo e provoca irritao que leva tosse e expulso do escarro; amostra menos viscosa e semelhante saliva; escrever no pote escarro induzido.

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Lavado brnquico, escovado brnquico, lavado bronco-alveolar (LBA), aspirado transtraqueal a) Orientao sob orientao mdica; uso de broncofibroscpio; uso de substncia anestsica letal para micobactria; a sala de coleta deve ter condies de biossegurana para evitar contaminao do ambiente. b) Comentrios CPIA NO procedimento invasivo; CONTROLADA processar imediatamente; esterilizar o broncofibroscpio; evitar a contaminao com o trato respiratrio superior; a coleta da secreo aps o uso do aparelho pode ser recolhida at 2 dias depois. Fragmentos de tecidos pulmonares a) Orientao sob orientao mdica; usar soluo fisiolgica ou gua destilada; no usar formol. b) Comentrios processar imediatamente; evitar o ressecamento. Lavado gstrico a) Orientao jejum de 8 a 10 horas; a coleta deve ser feita logo ao acordar, antes de levantar; em crianas, a coleta deve ser feita antes de ver a me para evitar deglutio pelo estmulo visual; deve ser realizada com sonda nasogstrica fina introduzida pela boca ou nariz; injetar 10 a 15 mL de soluo fisiolgica; aps 30 minutos, fazer lavagem gstrica. b) Comentrios requer hospitalizao; crianas: 40% de positividade com evidncia da doena ao RX; neutralizar o suco gstrico com carbonato de sdio 1mg/1mL de lavado gstrico; a coleta deve ser feita em 2 dias consecutivos. Urina a) Orientao a coleta deve ser feita aps higiene com gua e sabo neutro; volume urinrio: toda urina da 1 mico da manh; aps a coleta, levar imediatamente ao laboratrio.

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b) Comentrios material rico em microbiota associada; no aceitar pool de amostras colhidas em 24 horas; no aceitar volumes inferiores a 40 mL; coletar de 3 a 6 amostras em dias consecutivos. Lquido cefalorraquidiano (LCR) Procedimento mdico (coleta em hospitais). Lquido pleural, Lquido sinovial, Lquido peritoneal
CPIA NO CONTROLADA
Procedimento mdico (coletado em hospitais ou clnicas especializadas) Fragmentos cutneos, sseos e de rgos
Procedimento mdico Sangue e aspirado de medula
Procedimento mdico Pus e secrees
a) Orientao de cavidade fechada: por puno; de cavidade aberta: com swab; de preferncia aspirar ou passar o swab na parte mais profunda da leso. Envio de culturas do Mycobacterium tuberculosis para o LACEN a) os tubos com a cultura do M. tuberculosis devem ser com tampa de rosca, a prova de vazamento; b) para o transporte, este tubo deve ser envolvido com papel absorvente, em quantidade suficiente para absorver o material e proteg-lo em caso de acidente; c) o tubo embalado deve ser colocado dentro de um recipiente de paredes rgidas, inquebrvel a prova de vazamentos, contendo etiqueta com as caractersticas da amostra; d) este recipiente deve ser colocado dentro de outra embalagem - como caixa de trmica para transporte de amostras, que deve conter o rtulo de material infectante ou de risco biolgico juntamente com o nome, telefone e endereo da pessoa que deve ser avisada em caso de acidente com a(s) cultura(s); e) completar o espao da caixa com papel amassado ou polibolha, para evitar o movimento do recipiente contendo a cultura; f) fechar e vedar bem a caixa; g) colocar as requisies correspondentes, devidamente preenchidas, dentro de um saco plstico; h) vedar bem o saco e fix-lo na FACE EXTERNA da tampa ou na lateral da caixa trmica. Nunca coloc-los dentro da caixa. i) identificar com destinatrio e remetente; j) enviar ao laboratrio.

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6.2.7 Setor de Virologia UO VIROL Exames realizados no setor:

CPIA NO CONTROLADA
HBsAg HBeAg Anti-HBs Anti-HBc Total Anti-HBc IgM Anti-HBe Anti-HAV IgG Anti-HAV IgM Anti HCV HBV DNA Quantitativo HCV RNA Quantitativo Genotipagem do HCV Anti-HIV Imunoblot rpido para o HIV-1/2 Western blot para o HIV-1
Marcadores para diagnstico sorolgico das Hepatite A, B e C
Teste Molecular para indicao e monitoramento do tratamento da Hepatite B Testes moleculares para indicao e monitoramento do tratamento da Hepatite C Marcador para o diagnstico sorolgico da infeco pelo HIV Teste confirmatrio da Infeco pelo HIV-1/2 Teste confirmatrio da Infeco pelo HIV-1
HEPATITES VIRAIS SOROLOGIA Anti-HBs, Anti-HBc IgM HBeAg HBsAg Anti-HBe, Anti HBc Total Anti HAV total Anti-HAV IgM Anti-HCV
As seguintes situaes clnicas e epidemiolgicas devem ser consideradas para a realizao do diagnstico sorolgico das hepatites virais: Aminotransferases (transaminases) alteradas; Ictercia aguda e colria; Exposio percutnea ou de mucosa com sangue e/ou secrees de pessoas portadoras ou com suspeita de infeco pelo HBV ou HCV; Contato sexual ou domiciliar com indivduo sabidamente HBsAg reagente; Contato sexual com indivduo sabidamente HCV reagente; Contato com indivduo Anti-HAV IgM reagente; Doadores de sangue e/ou rgos, usurio de hemodilise e ambulatrios de DST.

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Para a realizao do diagnstico sorolgico das hepatites virais so necessrios: a) Preenchimento da requisio de exame para Hepatites Virais ver tem 5.1 deste manual. Assinalar a condio epidemiolgica e/ou clnica do paciente; Cada condio epidemiolgica ou clnica est relacionada com um perfil de marcadores sorolgicos. Por isto, de extrema importncia assinalar apenas uma condio - clnica ou epidemiolgica - para que no haja equvoco na avaliao das fichas e cadastro dos marcadores que sero realizados pelo laboratrio. Identificar o profissional solicitante (assinatura e carimbo).
Nota: As requisies incompletas ou com condies clnicas em desacordo com as preconizadas sero devolvidas e o soro armazenado por 15 dias. Aps este perodo, sero desprezadas.
b) Coleta e preparo da amostra necessrio jejum de 3 a 4 horas antes da coleta; Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na posio vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a 3.000 rpm por 10 minutos; Aps a centrifugao, observar se h hemlise e/ou lipemia. CPIA NO Amostras com hemlise e/ou lipemia sero descartadas; CONTROLADA As amostras no devero ser fracionadas; c) Armazenamento e transporte da amostra Armazenar em geladeira (2 a 8 C) por no mximo 5 dias, ou -20C por no mximo 30 dias; Transportar as amostras em isopor com gelo reciclvel (gelox) juntamente com requisio do exame devidamente preenchida. As amostras no devem ficar em contato direto com o gelo para evitar hemlise. MARCADORES
d) Procedimentos laboratoriais para Hepatites Virais CASO Diagnstico (Aminotransferases alteradas/ictercia/colria)
Monitoramento da Hepatite B aps 6 meses
Contato domiciliar e/ou sexual com portador de hepatite B Contato sexual com portador de hepatite C
Anti HBc Total HBsAg Anti -HBc IgM, Anti- HAV IgM Anti -HCV (anexar BPA-I) HBsAg Anti - HBs Anti Hbe HBeAg Anti- HBc Total Obs.: Caso o Anti-HBc for reagente, sero realizados outros marcadores. Anti-HCV (anexar BPA-I)

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Anti- HBs O teste para verificar eficcia da vacina (Anti-HBs) no realizado, Paciente Anti-Hbc Reagente exceto nos casos de pacientes com (Exame Realizado Em Banco De Sangue) Anti-HBc reagente e Anti-HBs negativo que necessitarem do exame para verificar imunidade; HBsAg Recm nascido (RN) de me portadora de Anti-HBs aos 9 meses e 15 hepatite B meses de idade Acidente percutneo/biossegurana/ hemodilise/ doador e receptor de rgos e sangue/ usurios de drogas injetveis/ transfuso sangunea Anti-HBc Total HBs Ag Anti-HBs Anti-HCV (anexar BPA-I) Anti-HAV IgG Os contatos de Hepatite A devem seguir os mesmos procedimentos para o diagnstico, pois no existe forma crnica na infeco pelo vrus A. Anti-HBc Total HBsAg Anti-HBs Anti-HCV (anexar BPA-I) Diagnstico, indicao tratamento do HCV e monitoramento do HCV RNA QUANTITATIVO (ver testes moleculares) Genotipagem do HCV (ver testes moleculares) HBV DNA QUANTITATIVO (ver testes moleculares)
Susceptibilidade hepatite A
Ambulatrio DST/AIDS/HIV
Indicao e monitoramento do tratamento do HBV
HEPATITES VIRAIS - TESTES MOLECULARES HCV RNA quantitativo HBV DNA quantitativo Genotipagem do HCV
CPIA NO CONTROLADA
1 - HCV RNA quantitativo Para a realizao da carga viral do HCV necessrio: a) preenchimento do Laudo Mdico para emisso do BPA-I - Quantificao de RNA do vrus da Hepatite C: Preencher com letra legvel todos os dados referentes instituio e paciente; Assinalar o motivo pelo qual o exame est sendo solicitado; Preencher o nmero da Notificao; Identificar o mdico solicitante (assinatura e carimbo).

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b) Coleta e preparo da amostra necessrio jejum de 3 a 4 horas antes da coleta; Coletar a amostra em tubo seco (sem anticoagulante) com gel separador e volume de 5mL; No usar HEPARINA como anticoagulante; Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na posio vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a 3.000 rpm por 10 minutos; Aps a centrifugao observar se h hemlise e/ou lipemia. Amostras com hemlise e/ou lipemia sero descartadas; As amostras no devero ser aliquotadas; CPIA NO Nunca congelar as amostras; CONTROLADA Identificar o tubo com nome, exame, origem e data da coleta.
Nota: Para evitar contaminaes, nunca abrir o tubo de coleta. c) Armazenamento e transporte da amostra Aps a centrifugao, as amostras devem ser encaminhadas ao Lacen no prazo mximo de 72 horas. Conserv-las entre 2 e 8 C at o envio ao laboratrio; O transporte das amostras dever ser realizado em caixas trmicas com gelo reciclvel entre 2 e 8C at as 5 feiras de cada semana. d) Procedimentos (Etapas) Laboratoriais para o Diagnstico e Monitoramento do Tratamento da Infeco pelo Vrus da Hepatite C (Portaria n. 221 de 13 de julho de 2011) CASO Diagnstico CONDIES Sorologia Anti-HCV Reagente Preencher o laudo para emisso do BPA-I Resultado de Carga Viral detectado (prtratamento) Preencher o laudo para emisso do BPA-I Anexar o resultado da Carga Viral anterior Preencher o laudo para emisso do BPA-I Preencher o laudo para emisso do BPA-I A coleta dever ser realizada 12 dias aps o acidente percutneo. Preencher o laudo para emisso do BPA-I
Indicao De Tratamento Monitorar Tratamento (12, 24, 48, 72 e 6 meses aps o tratamento) Transmisso Vertical Acidente Percutneo 2 - HBV DNA quantitativo
Para a realizao do HBV DNA Quantitativo necessrio: a) preenchimento da Ficha de Quantificao de cido Nuclico Carga Viral de HBV: Preencher com letra legvel todos os dados referentes instituio e paciente; Assinalar o motivo pelo qual o exame est sendo solicitado;

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Preencher a justificativa do procedimento; Preencher o nmero da Notificao; Preencher a data e hora da coleta; Identificar o mdico solicitante (assinatura e carimbo). CASO CONDIES Dois resultados de HBsAg reagentes com intervalo mnimo de seis meses (para comprovao de infeco crnica) Preencher a Ficha de Quantificao de cido Nuclico Carga viral do HBV Anexar o resultado da carga viral anterior
Indicao de tratamento
Monitorar tratamento a) Coleta e preparo da amostra
Preencher a Ficha de Quantificao de cido Nuclico - Carga viral do HBV
Para cada paciente, coletar 2 tubos de 5 mL com anticoagulante EDTA (tampa roxa). No utilizar Heparina; O sangue total dever ser enviado ao Lacen em at 20 horas aps a coleta e at as 5 feiras de cada semana; Se as amostras de sangue total no puderem chegar ao Lacen em at 20 horas, as mesmas devero ser centrifugadas a 3.000 rpm por 10 minutos para a obteno do plasma; Separar o plasma, utilizando ponteira com filtro estril e acondicionar em 2 criotubos com tampa de rosca estreis, adicionando 2,0 mL de plasma em cada criotubo estril;
CPIA NO CONTROLADA
b) Armazenamento e transporte da amostra
As amostras de sangue total devero ser transportadas em caixas trmicas com gelo reciclvel entre 2 e 8C. As amostras no devem ficar em contato direto com o gelo para evitar hemlise; Para as amostras de plasma acondicionadas em criotubos, acondicion-los em geladeira em temperatura de 2 a 8 C por no mximo 5 dias aps a coleta. Enviar em caixas trmicas com gelo reciclvel entre 2 e 8C. Enviar at as 5 feiras de cada semana. No congelar as amostras.
3 Genotipagem do HCV Para a realizao da Genotipagem do HCV necessrio: a) Preenchimento do Laudo Mdico para Emisso do BPA-I Genotipagem do Vrus da Hepatite C: Preencher com letra legvel todos os dados referentes instituio e paciente; Assinalar o motivo pelo qual o exame est sendo solicitado; Preencher o nmero da Notificao; Identificar o mdico solicitante (assinatura e carimbo).

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b) Coleta e preparo da amostra necessrio jejum de 3 a 4 horas antes da coleta; Coletar a amostra em tubo seco (sem anticoagulante) com gel separador e volume de 5 mL; No usar HEPARINA como anticoagulante; Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na posio vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a 3.000 rpm por 10 minutos; HIV, Infeco pelo Para a realizao do diagnstico sorolgico da infeco pelo HIV necessrio: a) O preenchimento da requisio para exame HIV ver tem 5.1 deste manual Nota: As requisies incompletas sero devolvidas e o soro armazenado por 15 dias. Aps este perodo sero desprezadas. b) Coleta e preparo da amostra necessrio jejum de 3 a 4 horas antes da coleta; Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na posio vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a 3.000 rpm por 10 minutos; Aps a centrifugao observar se h hemlise e/ou lipemia. Amostras com hemlise e/ou lipemia sero descartadas; CPIA NO As amostras no devero ser aliquotadas; CONTROLADA c) Armazenamento e transporte da amostra Armazenar em geladeira (2 a 8 C) por no mximo 5 dias, ou -20C por no mximo 30 dias; Transportar as amostras em caixas trmicas com gelo reciclvel juntamente com a requisio devidamente preenchida. As amostras no devem ficar em contato direto com o gelo para evitar hemlise. 6.3 Orientaes especficas para a coleta e transporte das amostras para laboratrios de Referncia No item a seguir, esto listadas as patologias com as orientaes especficas e detalhadas de coleta, armazenamento e envio de amostras biolgicas que so encaminhadas para Laboratrios de Referncia ou Apoio, principalmente em casos de bitos. As orientaes gerais de coleta e envio esto descritas no DOC MCT 01 - 01(anexo A). A execuo dos exames encaminhados pelo Lacen de responsabilidade dos Laboratrios de Referncia e Apoio, sendo que a relao de exames realizados por estes laboratrios pode sofrer alterao.

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Diante disso, antes da coleta das amostras biolgicas dever ser feito contato prvio com o Lacen para verificar a possibilidade da realizao do exame e a fim de se estabelecer o fluxo de encaminhamento das amostras. Algumas patologias possuem requisies prprias disponveis na home page do Lacen, no seguinte endereo eletrnico: http://lacen.saude.sc.gov.br. Patologia Orientaes especficas para coleta Exame deve ser solicitado por neurologistas/clnicos responsveis pelo acompanhamento dos pacientes. Enviar ficha de notificao. Deve acompanhar a amostra, o Termo de Consentimento Esclarecido (TCE) assinado pelo paciente ou responsvel legal (solicitar no Lacen ou DIVE). Coleta: Sangue: Coletar 5 mL de sangue com anticoagulante EDTA ( tampa roxa). Enviar sob refrigerao ao Lacen imediatamente aps a coleta. No Lacen: manter amostra congelada e enviar ao laboratrio de referncia em gelo seco (no utilizar gelo mido). Lquor: Coletar 1 a 2 mL em tubo estril, acondicionar e enviar sob refrigerao; CPIA NO Amostras Ps-bito: CONTROLADA Encfalo inteiro, fragmentos do crebro (vrias reas do crtex, ncleos da base, tlamo) cerebelo, tronco cerebral, devem ser fixados em formol; Blocos de tecidos as mesmas reas descritas acima includos em parafina; Fragmentos biopsiados devem ser fixados em formol ou includos em parafina. Amostra biolgica: Soro, plasma, sangue total. Coletar 5 mL de sangue total ou 3 mL de soro ou plasma. Coleta: at o 5 dia do incio dos sintomas. Transporte em nitrognio lquido, gelo seco ou gelo reciclvel (dentro de 6 horas no mximo). Dengue, Febre Conservao em freezer 70C ou nitrognio lquido. Amarela ou outros Amostra: Material de necrpsia: sangue do corao, rins, arbovrus fragmentos do corao, fgado, pulmo, bao, fragmentos de crebro (lobo frontal, lobo temporal, ncleos de base, cerebelo), medula Isolamento ssea, medula espinhal. viral em cultura Coleta: coletar em no mximo 8 horas aps o bito; celular Colocar as amostras de cada rgo e fragmentos de cada regio do crebro em tubos separados e devidamente identificados; Enviar e conservar em nitrognio lquido, gelo seco ou gelo reciclvel (dentro de 6 horas no mximo); Conservar em freezer 70C ou em nitrognio lquido. DCJ Doena de CreutzfeldtJakob

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Amostra: Soro ou cogulo, sangue total. Soro: 3mL. Sangue total: 5mL; Coleta: at o 4 dia aps o incio dos sintomas; Tubo criognico transportado em nitrognio lquido ou gelo seco; Conservar em freezer 70C ou em nitrognio lquido. Febre Amarela Amostra ps-bito: material de necropsia - fragmentos de tecido fresco. Coleta: colher amostras em no mximo 8 horas aps o bito. Os fragmentos devem ter de 1-2 cm3 de cada rgo e devem ser colocados em tubos criognicos estreis. ELISA IgM - Soro, plasma ou sangue total Soro ou plasma: 3mL Sangue total: 6mL Coleta: 1 amostra: admisso do paciente no hospital; CPIA NO 2 amostra*: algumas horas aps internao; 3 amostra: duas a 3 semanas aps a 2 amostra. CONTROLADA *Somente quando solicitado pelo laboratrio ELISA IgG - Soro, plasma ou sangue total Comunicantes: informar que se trata de comunicante e o nome do pacientecaso. Amostra: Soro ou plasma: 3 mL Sangue total: 6 mL Coleta: nos primeiros 7 dias a partir do incio dos sintomas. Conservao: sob refrigerao por no mximo 24 horas ou congelar a 20C. Transporte: refrigerado com gelo reciclvel. Hantavirose RT- PCR (exame complementar) Amostra: soro, plasma ou cogulo (coletados em at 7 dias do incio dos sintomas); Em caso de bito (at 8 horas aps): fragmentos de pulmo, rim, bao e fgado (1,5 cm3); Conservao: a - 70C ou em nitrognio lquido; Transporte em caixa adequada para materiais infectantes, contendo gelo seco. Em caso de bito Amostra: sangue intracardaco. Coleta: colher amostras em no mximo 8 horas aps o bito. Fragmento de 1-2 cm de cada rgo em tubo criognico estril. Material de necropsia: fragmentos de tecido fresco (pulmo ou bao), Transportar em nitrognio lquido ou gelo seco. Conservar em Freezer 70C ou nitrognio lquido. IMUNOHISTOQUMICA Amostra: fragmentos de rim, pulmo, bao, linfonodo, corao, pncreas, glndula pituitria, crebro e fgado (1,5 a 2 cm3) Conservao: soluo de formalina tamponada a 10% ou em blocos de parafina. Transporte em temperatura ambiente (NO REFRIGERAR)

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O procedimento de coleta em raspado de mucosa lingual (swab), tecido bulbar de folculos pilosos, obtidos por bipsia de pele da regio cervical deve ser feito por profissional habilitado mediante o uso de EPI.
Nota: Solicita-se que seja feito raspado de mucosa lingual e coleta de folculo piloso antemortem quando possvel ou posmortem, conforme protocolo abaixo:
a) Coleta de Material antemortem: Coleta de Folculo Piloso:
CPIA NO CONTROLADA
As amostras de bipsias de pele da regio da nuca (antemortem ou postmortem) devem ser coletadas com bisturi descartvel. Os bisturis no devem ser reutilizados nem mesmo para coletar diferentes amostras de um mesmo paciente. As bipsias de pele, da regio da nuca (folculo piloso), devem ser acondicionadas isoladas, separadamente das amostras de Sistema Nervoso Central, e enviadas congeladas. Coleta de Saliva (Raspado de Mucosa Lingual):
A saliva deve ser coletada por meio de raspado de mucosa lingual com utilizao de swab estril. Acondicionar o swab em tubo hermeticamente fechado e em temperatura ambiente. Raiva Humana Acondicionar e encaminhar as amostras para laboratrio em caixas isotrmicas distintas. Identificar todas as amostras adequadamente e enviar a ficha de investigao do caso de raiva humana. b) Coleta ps mortem
Coleta de Tecido Nervoso (Crebro, cerebelo e medula):
O rgos di Sistema Nervoso Central (crebro, cerebelo e medula) devero ser coletados com bisturis descartveis, no devendo estes serem reutilizados nem mesmo para coletar diferentes amostras de um mesmo paciente. Manter e enviar as amostras conservadas sob refrigerao em at 24 horas aps a coleta, e congeladas, aps este prazo. Excepcionalmente, pode-se conservar as amostras em soluo salina com glicerina a 50%, em recipientes de paredes rgidas, hermeticamente fechados, com identificao de material de risco biolgico juntamente com cpia da ficha de notificao ou de investigao. No usar formol. A qualidade do resultado laboratorial depender do estado de conservao da amostra. Materiais autolisados interferem nas tcnicas laboratoriais, muitas vezes tornando impossvel a emisso do laudo. Juntamente com as amostras, devem ser enviadas as fichas epidemiolgicas completas, onde devem constar os dados do caso suspeito. Quando enviados dois ou mais fragmentos de tecidos, especificar no pedido e identificar os mesmos.

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Encaminhamento dos resultados dos exames
Todos os clientes cadastrados que enviam amostras biolgicas ao LACEN (vigilncias municipais, ncleos de vigilncias hospitalares, etc) podero acessar o resultado dos exames via on line no seguinte endereo eletrnico: http://lacen.saude.sc.gov.br/. O LACEN estabelece prazos de liberao dos laudos de exames. Estes prazos esto disponveis no DOC MCT 01- 01 (anexo A) Os exames enviados para Laboratrios de Referncia ou Apoio no obedecem ao mesmo prazo de liberao dos exames realizados no LACEN/SC. Estes prazos esto sujeitos ao estabelecido pela unidade que realiza os exames. 7 REFERNCIAS
CPIA NO CONTROLADA
BRASIL. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas tcnicas para o diagnstico das meningites bacterianas. Braslia, DF; Centro de Documentao do Ministrio da Sade, 1986. _____. Ministrio da Sade. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Manual de microbiologia clnica para o controle de infeco em servios de sade. Braslia, 2004. Mdulo VII, p. 01-24. _____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas, mtodos e tcnicas para o diagnstico laboratorial de febre tifide. Braslia, DF, 1986. _____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas, mtodos e tcnicas para isolamento e diagnstico das enterobactrias. Braslia, DF, 1985. _____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Assistncia Sade. Programa Nacional de Controle de Doenas Sexualmente Transmissveis/Aids. Manual para controle das doenas sexualmente transmissveis. Braslia, DF, 1993. _____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Assistncia Sade. Programa Nacional de Controle de Doenas Sexualmente Transmissveis/Aids. Manual de procedimentos bsicos em microbiologia clnica para o controle da infeco hospitalar. Braslia, DF, 2001. _____. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade Bsica. Departamento de Vigilncia Epidemiolgica. Guia de procedimentos tcnicos: baciloscopia em hansenase. Braslia: Editora do Ministrio da Sade, 2010. _____. Ministrio da Sade. Programa Nacional de DST e Aids. Bayer. Roche. bioMeriux. Manual de Carga Viral HIV-1. [S.l.: s.n.], [200-]

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_____. Ministrio da Sade. Secretaria de Polticas de Sade. Coordenao Nacional de DST e Aids. Tcnica para coleta de secrees. 2. ed. Braslia, DF, 1997. _____. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Coordenao Geral do Programa Nacional de Controle da Malria. Manual de treinamento em diagnstico laboratorial de malria. Braslia, DF, 2003. _____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Comisso Nacional de Preveno do Clera. Manual integrado de preveno e controle da clera. Braslia, DF, 1984. _____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Centro de Referncia Professor Hlio Fraga. Manual de baciloscopia da tuberculose. Rio de Janeiro, 1998, 42p, il. _____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Coordenao de Controle de Zoonoses e Animais Peonhentos. Manual de Leptospirose. Braslia, DF, 1995. _____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Guia de Vigilncia Epidemiolgica. 5. ed. Braslia, DF, 2002. vol I e II. _____. Ministrio da Sade. Fundao Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Evandro Chagas. Diagnstico parasitolgico da leishmaniose tegumentar americana. Guia Prtico. 2005. ______.Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Departamento de Vigilncia Epidemiolgica. Manual Nacional de Vigilncia Laboratorial da Tuberculose e outras micobactrias/Ministrio da Sade, Secretaria de Vigilncia em Sade, Departamento de Vigilncia Epidemiolgica Braslia: Ministrio da Sade, 2008. ______. Ministrio da Sade. PORTARIA MS N 3.242, DE 30 DE DEZEMBRO DE 2011 Dispe sobre o Fluxograma Laboratorial da Sfilis. Braslia, DF, 2011. ______. Ministrio da Sade. Portaria GM/MS n. 2.848 DE 06 de Novembro de 2007. Publica a Tabela de Procedimentos, Medicamentos, rteses, Prteses e Materiais Especiais - OPM do Sistema nico de Sade. Braslia, DF, 2007. ______ Ministrio da Sade. SVS/ DEVEP/CGDT/COVEV Coordenao Geral de Laboratrios, Instituto Pasteur Protocolo de Diagnstico Laboratorial da Raiva Humana. Braslia, DF; 2006. ______. Ministrio da Sade. Secretaria de Ateno Sade. Portaria n 719, de 28 de dezembro de 2007. Inclui o campo Raa/Cor, nos Sistemas de Informao Ambulatorial e Hospitalar-(SIA/SIH/SUS). Braslia, DF, 2007. ______Ministrio da Sade Protocolo Clnico e Diretrizes Teraputicas para Hepatite Viral C e Coinfeces. Srie A Normas e Manuais Tcnicos, Braslia, DF, 2011. EVANS, E.C.V.; RICHARDSON, M.D. Medical Mycology: A Practical Aproach. Oxford: Press, 1989.

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LACAZ, C. da Silva; PORTO, E. M; COSTA, J.E. Micologia Mdica. So Paulo: Sarvier, 1991. OPLUSTIL, C. P. et al. Procedimentos Bsicos em Microbiologia Clnica. 3. ed. Ver. E ampl. So Paulo: Sarvier, 2010. SO PAULO (ESTADO). Secretaria de Estado da Sade. Coordenao dos Institutos de Pesquisa. Instituto Adolfo Lutz. Centro de Vigilncia Epidemiolgica Prof. Alexandre Vranjac. Treinamento para coleta de secreo nasofaringe para cultura no diagnstico laboratorial da coqueluche. So Paulo, [2000]. ______. Secretaria de Estado da Sade. Coordenao dos Institutos de Pesquisa. Instituto Adolfo Lutz. Centro de Vigilncia Epidemiolgica Prof. Alexandre Vranjac. Treinamento de difteria. So Paulo, [2000]. ______. Secretaria de Estado da Sade. Coordenao dos Institutos de Pesquisa. Instituto Adolfo Lutz. Descrio: Catlogo de Exames (Arquivo total) Atualizado em: 21 Sep 2007.
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ANEXO A Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte volume: 10 ml de soro. Coletar sangue em tubo sem anticoagulante, deixar a temperatura ambiente para retrao do cogulo, centrifugar e se o tubo no tiver gel separador, aliquotar o soro manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C) fezes (contedo intestinal) para botulismo alimentar e intestinal at 3 dias aps incio dos sintomas se houver constipao intestinal, as fezes podem ser coletadas em at 6 dias at 3 dias aps incio dos sintomas at 3 dias aps incio dos sintomas se houver constipao intestinal, as fezes podem ser coletadas em at 6 dias antes do uso de antibiticos 15 g ou 15 ml da amostra em frasco estril, com tampa rosquevel, sem vazamento manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C) enviar no prazo mximo de 24 horas 15 g ou 15 ml da amostra em frasco estril, com tampa rosquevel, sem vazamento manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C) exsudato da parte mais profunda do ferimento com swab em tubo de ensaio vedado. Se possvel, enviar swab em meio de tioglicolato Tempo crtico p/ chegada no Lacen
Patologia
Exame/ metodologia
Amostra biolgica
Perodo ideal da coleta
Prazo mximo de liberao do exame
sangue ( soro) Investigao da Toxina Botulnica por Bioensaio em Camundongos inoculao intraperitoneal para botulismo alimentar, intestinal e por ferimento
at 8 dias aps incio dos sintomas
enviar no prazo mximo de 24 horas CPIA NO CONTROLADA
BOTULISMO
Sem previso Enviado para Laboratrio de Referncia
Todo caso suspeito deve ser notificado e enviado a Ficha de Investigao Epidemiolgica Sinan
Exame realizado em Laboratrio de Referncia
vmito (lavado gstrico) para botulismo alimentar fezes (contedo intestinal) para botulismo alimentar e intestinal
Cultura Exame realizado em Laboratrio de Referncia
material do ferimento para botulismo por ferimento
enviar no prazo mximo de 30 minutos

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Exame/ metodologia IFI - Imunofluorescncia Indireta Exame realizado em Laboratrio de Referncia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte 2,0 ml de soro CPIA NO CONTROLADA manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C) Tempo crtico p/ chegada no Lacen at 24 h aps a coleta, se amostra refrigerada aps 24 horas da coleta, a amostra deve ser congelada (-20C) at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao ( 2 a 8C) para perodos maiores fracionar o soro e congelar (-20C)
Patologia
Prazo mximo de liberao do exame Sem previso Enviado para Laboratrio de Referncia
sangue (soro)
BARTONELOSE
BRUCELOSE
Reao de soroaglutinao com antgeno bruclico
sangue (soro)
a partir da 2 semana de incio de sintomas, em caso de exposio e acompanhamento de casos positivos aps tratamento : 3 ms, 6 ms,12 ms, 18 ms, 24 ms
coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro: 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo transportar sob refrigerao (2 a 8C) esfregao em lmina de microscopia nova, limpa e desengordurada acondicionar em porta-lmina manter e enviar temperatura ambiente
07 dias
CANCRO MOLE
Microscopia aps colorao pelo mtodo de Gram (para pesquisa de Haemophilus ducreyi) Inibio por hemaglutinao Exame realizado em Laboratrio de Referncia
leso genital
antes do uso de antibitico
imediatamente (coleta no Lacen)
05 dias
sangue (soro) 1 amostra (fase aguda) IgM 2 amostras (1 na fase aguda, 2 aps 15 dias) IgG
CAXUMBA Somente em caso de surtos
quando solicitado pela Vigilncia Epidemiolgica para esclarecimento de surto
2,0 ml de soro manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C) NA

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Exame/ metodologia Sorologia ELISA CISTICERCOSE Exame realizado em Laboratrio de Referncia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte 2,0 ml de soro ou lquor manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C) coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) CITOMEGALOVRUS, pesquisa de Sorologia (ELISA) anticorpos IgM e IgG sangue (soro) a critrio clnico aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro: 3000 rpm 10 minutos descartar as amostras com hemlise ou lipemia excessivas enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo transportar sob refrigerao (2 a 8C) na fase aguda da doena secreo de nasofaringe antes do incio de antibitico ou no mximo at 3 dias aps o incio do tratamento swab alginatado, ultrafino com haste flexvel em meio de transporte Reagan Lowe (agar carvo com antibitico) manter e enviar temperatura ambiente swab em meio de transporte Amies com carvo manter e enviar temperatura ambiente Tempo crtico p/ chegada no Lacen
Patologia
Prazo mximo de liberao do exame Sem previso Enviado para Laboratrio de Referncia
sangue (soro) na suspeita clnica lquor
NA
at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao (2 a 8C) para perodos maiores fracionar soro e congelar (-20C)
15 dias
CPIA NO CONTROLADA
COQUELUCHE
Cultura para pesquisa de Bordetella pertussis
at 24h aps a coleta
17 dias
COLONIZAO ESTREPTOCOCO DO GRUPO B em gestante
Cultura para pesquisa de S. agalactiae
secreo vaginal e raspado anorretal
35-37 semanas gestao
de
coleta no Lacen
09 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Exame/ metodologia Cultura CONJUNTIVITE BACTERIANA Somente em caso de surtos para pesquisa de: - H. influenzae biogrupo aegytius, - S.pneumoniae - S. aureus - S pyogenes quando solicitado pela Vigilncia Epidemiolgica para esclarecimento de surto semear a amostra com swab estril em meio de gar chocolate inclinado (tubo) enviar temperatura ambiente CPIA NO CONTROLADA sorologia: Amostra 1 6 ao 10 dias de incio dos sintomas sangue (soro) Amostra 2 11 ao 30 dia aps incio dos sintomas isolamento viral e deteco do Antgeno NS1: do 1 ao 5 dias do incio dos sintomas (febre) coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro: 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo transportar sob refrigerao (2 a 8C) Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte Tempo crtico p/ chegada no Lacen at 30 minutos ou at 48 horas aps a coleta, quando incubada a 352C por 24 h no local da coleta. Encaminhar imediatamente aps esse perodo. Informar esse dado na requisio at 48 horas aps a coleta (se amostra refrigerada) para perodos maiores, fracionar soro e congelar (-20C) amostra para isolamento viral deve ser enviada imediatamente aps a coleta
Patologia
secreo de conjuntiva
10 dias
DENGUE
Sorologia (ELISA), anticorpos IgM
07 dias
Todo caso suspeito deve ser notificado atravs da ficha de notificao (SINAN)
Isolamento viral Exame realizado em Laboratrio de Referncia Cultura
DIFTERIA
para pesquisa de Corynebacterium diphtheriae
secreo de orofaringe e nasofaringe
swab ultrafino em meio de transporte Amies com carvo para secreo de nasofaringe swab em meio de transporte Amies com carvo para secreo de orofaringe manter e enviar temperatura ambiente
at 24 h aps a coleta
22 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Exame/ metodologia Microscopia aps colorao pelo mtodo de Gram Cultura Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte frasco estril manter e enviar a temperatura ambiente coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro: 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo. transportar sob refrigerao (2 a 8C) em tubo com anticoagulante EDTA 5 ml ( tampa roxa) manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C) 2 a 4 g em frasco coletor rgido de boca larga e tampa rosquevel. manter e enviar temperatura ambiente swab em meio de transporte CaryBlair manter e enviar temperatura ambiente at 72 h aps a coleta Tempo crtico p/ chegada no Lacen
Patologia
DOENA BACTERIANA INVASIVA
lquidos biolgicos estreis (lquido pleural, peritonial e sangue de medula ssea)
30 minutos, sendo o mximo aceitvel em at 2 horas aps a coleta at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao (2 a 8C) para perodos maiores fracionar soro e congelar (-20C).
09 dias
Sorologia (ELISA) Imunofluorescncia indireta IgG IFI
sangue (soro)
na suspeita clnica
15 dias
DOENA DE CHAGAS
CPIA NO CONTROLADA
Microscopia (hemoparasitolgico) para pesquisa de Trypanosoma cruzi DOENAS DIARRICAS BACTERIANAS Doena Transmitida por Alimentos e gua, clera
sangue total
casos agudos com at 30 dias do incio dos sintomas
at 72 h aps a coleta, se amostra refrigerada
05 dias
fezes in natura Coprocultura swab fecal ou swab retal no incio da diarria e antes do uso de antibitico
at 2 hora aps a coleta 15 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Exame/ metodologia Deteco de Antgeno Rotavrus (ELISA) Astrovrus Norovrus Amostra biolgica CPIA NO CONTROLADA fezes lquidas excepcionalmente podero ser enviadas fraldas descartveis 1 ao 4 dia do incio dos sintomas Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte no mnimo 5,0 ml em frasco coletor rgido de boca larga e tampa rosquevel a fralda dever ser forrada com compressas de gaze antes da evacuao. Esta deve ser acondicionada inteira (com as compressas) dentro de saco plstico Tempo crtico p/ chegada no Lacen
Patologia
Prazo mximo de liberao do exame 10 dias
DOENAS DIARRICAS VIRAIS (Rotavrus, Astrovrus, Norovrus)
em temperatura ambiente: at 1 hora aps a coleta refrigerado (2 a 8C): at 48 h aps a coleta
DOENA DE LYME-SIMILE
ELISA Western Blot
sangue (soro)
na suspeita clnica
2,0 ml de soro manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C)
Exame realizado em Laboratrio de Referncia coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro: 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo transportar sob refrigerao (2 a 8C)
ERITEMA INFECCIOSO
Deteco de anticorpos IgM e IgG Anti Parvovrus B19 (ELISA)
sangue (soro)
a partir do 5 dia do exantema
at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao (2 a 8C) para perodos maiores, fracionar o soro e congelar (- 20C)
15 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Cultura para S pyogenes (estreptococo beta- -hemoltico do grupo A) Imunofluorescncia indireta - IFI Exame enviado a Laboratrio de referncia secreo de orofaringe Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte Tempo crtico p/ chegada no Lacen
FARINGITE ESTREPTOCCICA / ESCARLATINA Somente em caso de surtos FEBRE MACULOSA
quando solicitado pela VE para esclarecimento de surto
Swab em meio de transporte Amies com carvo manter e enviar temperatura ambiente 2,0 ml de soro manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C)
at 48h aps a coleta
10 dias
sangue (soro) 02 amostras coletadas com intervalo igual ou maior que 15 dias a partir do 7 dia de incio dos sintomas. CPIA NO CONTROLADA
at 24 h aps a coleta se amostra refrigerada e aps 24 horas a amostra deve ser congelada
sangue total Hemocultura FEBRE TIFIDE pesquisa de Salmonella Typhi swab fecal ou swab retal Coprocultura 3 amostras com intervalo de 3 dias cada uma a partir da 2 at a 5 semana da doena 2 a 3 amostras com intervalo de 15 a 20 minutos entre as coletas at a 2 semana da doena
sangue em meio de cultura lquido caldo TSB ou BHI 1 ml no frasco peditrico ou 5 ml no frasco de adulto transportar temperatura ambiente
at 6 horas OU at 48 horas aps a coleta, quando incubada a 352C por 24 h no local da coleta. Encaminhar imediatamente aps esse perodo. Informar esse dado na requisio at 72 horas aps a coleta
12 dias
swab em meio de transporte CaryBlair manter e enviar temperatura ambiente 2 a 4 g em frasco coletor de boca larga e tampa rosquevel
fezes in natura
manter e enviar temperatura ambiente
at 2 horas aps a coleta

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte Tempo crtico p/ chegada no Lacen
GRIPE Deteco do vrus INFLUENZA A (engloba tambm H1N1pandmico 2009)
Reao em cadeia da polimerase RT - PCR em tempo real
swab combinado: 2 swab de secreo com clulas da parede posterior nasal das 2 narinas e 1 de orofaringe aspirado de secreo de nasofaringe: coletado com frasco coletor acoplado a bomba aspiradora lavado bronco alveolar
at o 3 dia do incio dos sintomas e eventualmente at o 7 dia preferencialmente antes do uso de antiviral
os 3 swab so inseridos no mesmo tubo contendo meio de transporte viral (fornecido pelo Lacen) em caso de aspirado SNF: o meio de transporte aspirado para dentro do frasco coletor e este encaminhado ao Lacen lavado bronco alveolar coleta em hospital , no mnimo 2 ml em meio de tranporte viral transportar sob refrigerao (2 a 8C) (NO CONGELAR) at 24 horas aps a coleta 05 dias
CPIA NO CONTROLADA
GRIPE VIROSES RESPIRATRIAS Programa sentinela de Influenza
Pesquisa do antgeno por IFI Indireta Vrus Influenza AeB Virus Parainfluenza 1, 2,3 Adenovrus Vrus Sincicial Respiratrio
swab combinado: 2 swab de secreo com clulas da parede posterior nasal das 2 narinas e 1 de orofaringe aspirado de secreo de nasofaringe: coletado com frasco coletor acoplado a bomba aspiradora
os 3 swab so inseridos no mesmo tubo contendo meio de transporte viral (fornecido pelo Lacen) na fase aguda, at o 5 dia do incio dos sintomas clnicos em caso de aspirado SNF: o meio de transporte aspirado para dentro do frasco coletor e este encaminhado ao Lacen transportar sob refrigerao (2 a 8C) (NO CONGELAR) at 24 horas aps a coleta 07 dias
S para regio da grande Florianpolis

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte esfregao em lmina de microscopia nova, limpa e desengordurada, acondicionada em porta-lmina swab estril alginatado em meio de transporte Amies com carvo manter e enviar temperatura ambiente frasco coletor estril, de boca larga e tampa rosquevel manter e enviar temperatura ambiente Microscopia aps colorao pelo mtodo de Ziehl-Neelsen para pesquisa de BAAR esfregao padronizado em lmina de microscopia nova, limpa e desengordurada acondicionada em porta-lmina manter e enviar temperatura ambiente sangue total 6 ml soro ou plasma no mnimo 3 ml manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C) manter sob refrigerao (2 a 8C) por, no mximo, 24horas, aps este perodo congelar (-20 C) imediatamente ou at 24 horas aps a coleta Tempo crtico p/ chegada no Lacen imediatamente (coleta no Lacen)
GONORRIA
Microscopia aps colorao pelo mtodo de Gram Cultura para pesquisa de Neisseria gonorrhoeae
secreo uretral, endocervical, anal e orofarngea (excepcionalmente vaginal)
12 dias
1 jato urinrio
CPIA NO CONTROLADA
HANSENASE
raspado intradrmico
na suspeita clnica
07 dias
ELISA IgM e IgG HANTAVIROSE Exame enviado a Laboratrio de referncia
sangue total soro ou plasma
na suspeita clnica
* casos bitos ver condies especficas do manual

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte coletar sangue em tubo 5 ml sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) na suspeita clnica aguardar 30 minutos a temperatura ambiente para retrao do cogulo centrifugar para separao do soro a 3000 rpm 10 minutos descartar as amostras com hemlise ou lipemia enviar no tubo original na posio vertical transportar sob refrigerao (2 a 8C) coletar sangue em tubo 5 ml sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) aguardar 30 minutos a temperatura ambiente para retrao do cogulo centrifugar para separao do soro a 3000 rpm 10 minutos descartar as amostras com hemlise ou lipemia enviar no tubo original na posio vertical transportar sob refrigerao (2 a 8C) Tempo crtico p/ chegada no Lacen
sangue (soro)
HEPATITE VIRAL (tipo A - HAV)
Marcadores sorolgicos anti-HAV Total anti-HAV IgM
at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao (2 a 8C) para perodos maiores (mximo 30 dias) congelar (-20C)
10 dias
CPIA NO CONTROLADA
Marcadores sorolgicos HEPATITE VIRAL (tipo B - HBV) Imunoensaio HBsAg HBeAg Anti-HBs Anti-HBc IgM Anti-HBc Total Anti - HBe na suspeita clnica e/ou monitoramento
at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao (2 a 8C) para perodos maiores (mximo 30 dias) congelar (-20C)
sangue (soro)
10 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte para cada paciente coletar 2 tubos de 5 ml com EDTA (tampa roxa) HBV (DNA Quantitativo) PCR em Tempo Real Enviar BPA- I Quantificao de cido Nuclico Carga Viral HBV transportar as amostra sem contato direto com o gelo reciclvel (2 a 8C) sangue total (plasma) na indicao ou monitoramento do tratamento na impossibilidade da amostra chegar ao Lacen em at 20 horas, as mesmas devero ser centrifugadas a 3.000 rpm - 10 minutos separar o plasma em 2 criotubos estreis e com tampa de rosca, utilizando ponteira estril e com filtro, acondicionar 2,0 ml de plasma para cada criotubo aps separao, os criotubos devero ser refrigerados (2 a 8C) at o envio enviar as amostras com gelo reciclvel (2 a 8C) nunca congelar a amostra 5 ml de sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) HEPATITE VIRAL (tipo C- HCV) Anti-HCV Imunoensaio sangue (soro) na suspeita clnica e/ou monitoramento aguardar 30 minutos a temperatura ambiente para retrao do cogulo centrifugar para separao do soro a 3000 rpm 10 minutos descartar as amostras com hemlise ou lipemia enviar no tubo original na posio vertical transportar sob refrigerao (2 a 8C) at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao (2 a 8C) para perodos maiores (mximo 30 dias) congelar (-20C) Tempo crtico p/ chegada no Lacen
HEPATITE VIRAL (tipo B - HBV)
sangue total: dever ser enviado ao Lacen at 20 horas aps a coleta plasma: dever ser enviado no mximo 5 dias aps a coleta at 5 feira de cada semana. 30 dias
CPIA NO CONTROLADA
10 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte 5 ml sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador No utilizar tubo com heparina aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 3 minutos sangue (soro ) na suspeita clnica e/ou monitoramento centrifugar para separao do soro a 3000 rpm 10 minutos descartar as amostras com hemlise ou lipemia Enviar BPA - I Quantificao do RNA do vrus da Hepatite C CPIA NO CONTROLADA as amostras no devero ser manuseadas ou aliquotadas enviar as amostras com gelo reciclvel (2 a 8C) nunca congelar a amostra 5 ml sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador No utilizar tubo com heparina HEPATITE VIRAL (tipo C- HCV) Genotipagem do HCV sangue (soro ) indicao de tratamento aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 3 minutos centrifugar para separao do soro a 3000 rpm 10 minutos descartar as amostras com hemlise ou lipemia Enviar BPA - I Genotipagem do Vrus da Hep. C as amostras no devero ser manuseadas ou aliquotadas enviar as amostras com gelo reciclvel (2 a 8C) nunca congelar a amostra at 5 feira de cada semana. at 5 feira de cada semana. . Tempo crtico p/ chegada no Lacen
HCV (RNA quantitativo) HEPATITE VIRAL (tipo C- HCV) PCR em Tempo Real
encaminhar no prazo mximo de 72 horas. At o envio conservar entre 2 a 8C 30 dias
encaminhar no prazo mximo de 72 horas. At o envio conservar entre 2 a 8C
30 dias (exame realizado em laboratrio de apoio)

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte coletar sangue em tubo 5 ml sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) aguardar 30 minutos a temperatura ambiente para retrao do cogulo centrifugar para separao do soro a 3000 rpm 10 minutos descartar as amostras com hemlise ou lipemia enviar no tubo original na posio vertical transportar sob refrigerao (2 a 8C) sangue total: em temperatura ambiente (22 a 25C) por no mximo 6 horas sob refrigerao (2 a 8C): mximo em 24 horas aps a coleta plasma: em temperatura ambiente (22 a 25C) por no mximo 6 horas sob refrigerao (2 a 8C): mximo em 5 dias aps a coleta Tempo crtico p/ chegada no Lacen
Sorologia (Imunoensaio) HIV 1 e 2 Diagnstico da infeco por Imunoblot Rpido Western blot (deteco de anticorpos) sangue (soro) a critrio clnico
Teste de Quantificao de Carga Viral do HIV -1
at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao (2 a 8C) para perodos maiores (mximo 30 dias) congelar (-20C) 15 dias
CPIA NO CONTROLADA
sangue total: 2 tubos de 5 ml com EDTA K2 ou K3 - tampa roxa SEM GEL SEPARADOR sangue total ou plasma na indicao ou monitoramento de tratamento em crianas pode ser utilizado tubo peditrico plasma: obter o plasma por centrifugao e acondicionar em 2 criotubos livre de RNAse e DNAse (1000 a 1200 ul em cada criotubo) manter amostras refrigeradas at o momento do envio *os criotubos e ponteiras com filtro so fornecidos pelo Lacen
HIV - 1 Monitoramento da infeco por Genotipagem do HIV -1
20 dias
Enviar BPA- I Quantificao de cido Nuclico Carga Viral do HIV

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte coletar cada amostra em 1 tubo de coleta de 5ml com anticoagulante EDTA K2 ou K3 e identific-las com nome completo sangue total a critrio clnico caso necessrio, pode ser coletado em tubo peditrico (EDTA K2 ou K3) a amostra deve permanecer no tubo original de coleta, em temperatura ambiente (20 a 25C) durante armazenamento e transporte no refrigerar viabilidade da amostra para incio do exame: 48 horas aps coleta Tempo crtico p/ chegada no Lacen
HIV Monitoramento da infeco por
Contagem de Linfcitos T CD4+/CD8+/ CD45+ Citometria de fluxo
prazo mximo de 40 horas aps a coleta 15 dias as amostras sero recebidas no Lacen de 2 a 5 feira
CPIA NO CONTROLADA Enviar BPA- I especfico
INFECO BACTERIANA DE PELE / OUVIDO / BIPSIA
Microscopia aps colorao pelo mtodo de Gram Cultura
leso aberta / abcesso fechado / secreo de ouvido externo
swab estril em meio de transporte Amies com carvo quando solicitado pela Vigilncia Epidemiolgica p/ esclarecimento de surto manter e enviar temperatura ambiente frasco estril com soluo fisiolgica (sem formol) temperatura ambiente
at 24 horas aps a coleta 10 dias
bipsia
Somente em caso de surtos

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte cerca de 30 ml em frasco coletor estril de boca larga, transparente, tampa rosquevel temperatura ambiente: at 30 minutos aps a coleta conservar sob refrigerao (2 a 8C): at 2 horas Cultura cepa bacteriana isolada PCR Exame realizado em laboratrio de referencia CPIA NO CONTROLADA NA semeadura da cepa pura no meio de agar nutriente inclinado, em tubo com tampa rosquevel cepa bacteriana incubada a 352C por 24 h no local do isolamento aps incubao, manter e enviar temperatura ambiente coleta no Lacen Tempo crtico p/ chegada no Lacen
INFECO DO TRATO URINRIO (ITU)
Cultura quantitativa
urina (jato mdio)
07 dias
KPC Pesquisa de K. pneumoniae carbapenemase Somente cepas hospitalares
at 48 horas (24 h de incubao + 24 h para transportar)
Sem previso Enviado para Centro Colaborador
Microscopia (parasitolgico de leso) LEISHMANIOSE TEGUMENTAR AMERICANA
raspado de leso in print na suspeita clnica com exame de Montenegro positivo
em lmina de microscopia nova acondicionada em porta-lmina manter e enviar temperatura ambiente at 72 horas aps a coleta 12 dias
Histopatologia e PCR Exames realizados em laboratrio de referencia
aspirado de leso bipsia em lcool bipsia em formol
bipsia: enviar em frasco vedado, em temperatura ambiente aspirado de leso: manter e enviar sob refrigerao.

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro: 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo CPIA NO CONTROLADA armazenar e transportar sob refrigerao (2 a 8C) ou congelar para perodos maiores que 5 dias coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) Sorologia (ELISA) LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA (LVC) Imunocromatografia de duplo percurso aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro: 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo armazenar e transportar sob refrigerao (2 a 8C) ou congelar para perodos maiores que 5 dias Tempo crtico p/ chegada no Lacen
Imunocromatografia
LEISHMANIOSE VISCERAL HUMANA (LVH)
sangue (soro) Imuno fluorescncia indireta Exame realizado em laboratrio de referencia
na suspeita clnica
03 dias
sangue (soro)
na suspeita clnica
20 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) sangue (soro) Microaglutinao LEPTOSPIROSE CPIA NO CONTROLADA a partir do 7 dia aps o incio dos sintomas aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro: 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C) ou congelar para perodos maiores que 5 dias at o 6 dia do incio dos sintomas para esclarecimento de bito 5 ml em tubo com EDTA transportar sob refrigerao (2 a 8C) Tempo crtico p/ chegada no Lacen
Sorologia (ELISA) IgM
09 dias
PCR Exame realizado em laboratrio de referencia Identificao de leveduras Teste de Sensibilidade a Antifngicos (TSAF)
sangue total
at 72 horas aps a coleta, sob refrigerao (2 a 8C)
LEVEDUROSES Infeco hospitalar ou resistncia ao tratamento
cepa semeada em meio de cultura agar Sabouraud cepa de levedura isolada NA incubar a cepa de levedura isolada entre 25 a 30C por 48 horas enviar temperatura ambiente
imediatamente aps a incubao (repique de 24 a 48h)
22 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte 5 ml em tubo com anticoagulante EDTA transportar sob refrigerao (2 a 8C) imediatamente Tempo crtico p/ chegada no Lacen
Microscopia MALRIA Hemoparasitolgico para pesquisa de Plasmodium spp Cultura (p/ S. aureus) sangue total na fase aguda, a partir do 1 dia do incio dos sintomas
04 dias
secreo de nasofaringe
MANIPULADOR DE ALIMENTOS, pesquisa de portador Somente em caso de surtos de infeco alimentar
quando solicitado pela VE para esclarecimento de surto
swab em meio de transporte Amies com carvo manter e enviar temperatura ambiente 2 a 4 g em frasco coletor rgido de boca larga e tampa rosquevel
at 48h aps a coleta
09 dias
fezes in natura Cultura de fezes (coprocultura) antes do uso de antibitico swab fecal ou swab retal CPIA NO CONTROLADA
at 2 hora aps a coleta 12 dias at 72 h aps a coleta
manter e enviar temperatura ambiente swab em meio de transporte CaryBlair manter e enviar temperatura ambiente coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro: 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo transportar sob refrigerao (2 a 8C)
MONONUCLEOSE
Exame realizado em laboratrio de referencia
sangue (soro)
na suspeita clnica
at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao ( 2 a 8C) para perodos maiores fracionar soro e congelar (- 20C)

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte esfregao em lmina, do lquor centrifugado recm puncionado (at 2 horas da coleta) acondicionar em porta-lmina manter e transportar temperatura ambiente gotejar 5 a 10 gotas de lquor no meio de agar chocolate inclinado incubarr o meio de agar chocolate semeado a 352C por 18 a 24 horas logo aps a coleta transportar o meio de agar chocolate temperatura ambiente somente lquor in natura (3 a 5 ml) manter e enviar temperatura ambiente sangue em meio de cultura lquido caldo TSB ou BHI sangue 1 ml no frasco peditrico ou 5 ml no frasco de adulto incubar o meio lquido a 352C por 18 a 24 horas logo aps a coleta transportar temperatura ambiente Pesquisa de antgenos bacterianos PCR RT 3 a 5 ml de lquor e soro em frascos estreis manter congelado (-20C) e transportar sob refrigerao (2 a 8C) Tempo crtico p/ chegada no Lacen
lquor Microscopia aps colorao pelo mtodo de Gram CPIA NO CONTROLADA
at 48 horas aps a coleta (acompanha o kit de meningite)
lquor
at 48 horas aps a coleta, quando incubado a 352C por 24 h no local da coleta. Encaminhar imediatamente aps esse perodo 12 dias at 2 horas aps a coleta at 30 minutos OU at 48 horas aps a coleta, quando incubado a 352C por 24 h no local da coleta. Encaminhar imediatamente aps esse perodo. Informar esse dado na requisio at 48 horas aps a coleta (acompanha o kit de meningite)
MENINGITE BACTERIANA
Cultura
lquor e sangue (soro)
NA

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Microscopia: exame direto
pele, couro cabeludo, unha, cabelo, plo e, mucosa oral
em placa de Petri estril, placas descartveis de coleta ou em sacos plsticos pequenos e nunca utilizados manter e transportar temperatura ambiente antes do uso de antifngicos
a amostra permanece vivel por muito tempo
MICOSES SUPERFICIAIS
Microscopia aps colorao pelos mtodos de Giemsa e/ou Grocott
30 dias amostra em frasco estril ou swab umedecido em salina estril manter e transportar temperatura ambiente secreo de ouvido, olho, pus, abscesso, leso de nariz e seios paranasais e mucosa de orofaringe at 24 horas aps a coleta
Cultura
CPIA NO CONTROLADA

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte em pote de boca larga, transparente, estril, descartvel, com tampa rosquevel CPIA NO CONTROLADA tecido obtido por bipsia, necropsia e pea operatria lquor, lavado ou aspirado brnquico, lavado gstrico, lquidos corporais (pleural, abdominal, sinovial) aspirado de medula ssea antes do uso de antifngicos manter e transportar sob refrigerao (2 a 8C) em frasco estril com salina (no utilizar formol) manter e transportar temperatura ambiente em frasco estril manter e transportar temperatura ambiente em frasco estril contendo 0,5 ml de heparina diluda 1:1000 manter e transportar temperatura ambiente sangue em meio de cultura lquido caldo TSB ou BHI 1 ml no frasco peditrico ou 5 ml no frasco de adulto transportar temperatura ambiente at 24 horas aps a coleta Tempo crtico p/ chegada no Lacen
escarro
Microscopia: exame direto Microscopia aps colorao pelos mtodos de Giemsa e/ou Grocott Cultura Imunodifuso dupla (IDD) Pesquisa de antgenos (prova de aglutinao em ltex)
MICOSES SISTMICAS
30 dias
at 24 horas aps a coleta at 30 minutos aps a coleta ou 48 horas aps a coleta quando incubado a 35C2C por 24 h no local da coleta at 48 horas aps a coleta
sangue (2 a 3 amostras com intervalo de 15 a 20 minutos entre as coletas)
5 ml em tubo seco sangue (soro) manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C)

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte swab alginatado em meio de transporte Amies com carvo manter e transportar temperatura ambiente 4 a 8 g de fezes em frasco coletor rgido de boca larga e tampa rosquevel. manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C) frasco coletor estril rgido de boca larga e tampa rosquevel lavado brnquico, lavado bronco-alveolar, escarro PNEUMONIA BACTERIANA Cultura antes do uso de antibitico sangue total manter temperatura ambiente (17 a 27C) ou sob refrigerao (2 a 8C) conforme tempo de armazenamento sangue em meio de cultura lquido caldo BHI ou TSB CPIA NO CONTROLADA 1 ml no frasco peditrico ou 5 ml no frasco de adulto enviar temperatura ambiente RAIVA Pesquisa de ttulos protetores para raiva Titulao de anticorpos neutralizantes Exame realizado em laboratrio de referencia 10 a 14 dias aps a ltima dose da vacinao ou aps a administrao de dose de reforo 2,0 ml de soro manter e enviar sob refrigerao (2 a 8C).. se temperatura ambiente: at 2 horas aps a coleta se conservada sob refrigerao at 12 horas aps a coleta at 30 minutos OU 48 horas aps a coleta, quando incubado a 351C por 18-24h no local da coleta at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao ( 2 a 8C) Tempo crtico p/ chegada no Lacen
OFTALMIA GONOCCICA
Cultura p/ pesquisa de N.gonorrhoeae
secreo da conjuntiva
na suspeita clnica, antes do uso de antibitico
PARALISIA FLCIDA AGUDA PFA
Exame realizado em laboratrio de referencia
fezes in natura
at 14 dias aps incio da deficincia motora
Sem Previso at 3 dias aps a coleta Enviado para Laboratrio de Referncia
12 dias
sangue (soro)
Sem Previso Enviado para Laboratrio de Referncia

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia IFD PCR RAIVA HUMANA Exames realizados em laboratrio de referencia Deteco de anticorpos IgM e IgG RUBOLA sangue (soro) Para isolamento viral, seguir mesmas orientaes do sarampo na suspeita clnica Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte swab estril de raspado de mucosa lingual acondicionado em tubo fechado em temperatura ambiente bipsia de pele da regio cervical acondicionada em frasco estril, manter e enviar congelada ( -20C) coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro: 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo transportar sob refrigerao (2 a 8C) coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) Deteco de anticorpos IgM e IgG ELISA sangue (soro) aconselhvel a coleta no 1 at 28 dia do exantema aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro a 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo transportar sob refrigerao (2 a 8C) Tempo crtico p/ chegada no Lacen
Prazo mximo de liberao do exame Sem Previso Enviado para Laboratrio de Referncia
raspado de mucosa lingual, bipsia de pele da regio cervical
na suspeita clnica, o mais precocemente possvel
imediatamente aps a coleta
at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao (2 a 8C) 07 dias para perodos maiores fracionar soro e congelar (-20C).
CPIA NO CONTROLADA
SARAMPO
07 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte coletar 3 amostras de SNF e colocar em meio de transporte viral fornecido pelo Lacen (as 3 amostras coletadas so colocadas em um nico tubo) urina preferencialmente a primeira da manh transportar sob refrigerao (2 a 8C) NO CONGELAR Tempo crtico p/ chegada no Lacen
Prazo mximo de liberao do exame Sem Previso
secreo de naso faringe (SNF) SARAMPO/ RUBOLA Isolamento Viral Exame encaminhado para laboratrio de referncia swab combinado: 2 swab de secreo com clulas da parede posterior nasal das 2 narinas e 1 de orofaringe urina Microscopia em campo escuro Microscopia aps colorao pelo mtodo Fontana Tribondeau SFILIS Teste No Treponmico (triagem) VDRL RPR Testes Treponmicos (confirmatrio) ELISA FTA Abs sangue (soro) na suspeita clnica leso genital at o 5 dia do incio do exantema.
Enviado para Laboratrio de Referncia
CPIA NO CONTROLADA
coletar da leso e depositar entre lmina e lamnula esfregao em lmina de microscopia nova e desengordurada manter e transportar temperatura ambiente coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro a 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo transportar sob refrigerao (2 a 8C) at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao (2 a 8C) 10 dias para perodos maiores fracionar soro e congelar (-20C). imediatamente (coleta no Lacen) 07 dias
na suspeita clnica

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TRACOMA Somente em caso de surtos
Imuno Fluorescncia Direta IFD para pesquisa de Chlamydia trachomatis
raspado da conjuntiva
quando solicitado pela Vigilncia Epidemiolgica p/ esclarecimento de surto
esfregao em lmina padronizada p/ IFD, embalada em papel alumnio acondicionada em porta-lmina
se conservada temperatura ambiente: at 8 horas aps a coleta se conservada sob refrigerao (2 a 8C): at 72 horas aps a coleta
15 dias
Deteco de anticorpos IgM e IgG - ELISA. Deteco de Anticorpos IgM - ELFA. sangue (soro
CPIA NO CONTROLADA coletar sangue em tubo sem anticoagulante com gel separador (tampa amarela) na suspeita clnica aguardar 30 minutos a temperatura ambiente e aps centrifugar para separao do soro: 3000 rpm 10 minutos enviar no tubo original na posio vertical ou fracionar soro para outro tubo transportar sob refrigerao (2 a 8C) at 5 dias aps a coleta, desde que a amostra centrifugada seja mantida sob refrigerao (2 a 8C) para perodos maiores fracionar soro e congelar (-20C) 15 dias
15 dias
TOXOPLASMOSE
Teste de Avidez
a critrio clnico, em caso de gestante com sorologia IgM reagente

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta CPIA NO CONTROLADA Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte 5 a 10 ml em frasco rgido, transparente, de boca larga, tampa rosquevel, descartvel manter e transportar sob refrigerao (2 a 8C) em frasco estril manter e transportar sob refrigerao (2 a 8C) em frasco estril manter e transportar temperatura ambiente e ao abrigo da luz 40 ml em pote rgido, estril, de boca larga, tampa rosquevel, descartvel transportar sob refrigerao (2 a 8C) 40 ml em pote rgido, estril, de boca larga, tampa rosquevel, descartvel transportar sob refrigerao (2 a 8C) at 4 horas aps a coleta at 24 horas aps a coleta Tempo crtico p/ chegada no Lacen
escarro
at 7 dias aps a coleta
Baciloscopia: 05 dias Cultura convencional: at 65 dias Cultura automatizada at 45 dias Teste de sensibilidade Convencional: at 50 dias aps resultado da cultura Teste de sensibilidade automatizado: at 20 dias aps resultado da cultura
Pesquisa de BAAR (Baciloscopia)
aspirado brnquico, lavado brnquico, escovado brnquico, lavado bronco-alveolar lquor,lquido pleural, asctico, sinovial, pericrdico, peritoneal
NA
TUBERCULOSE Cultura
lavado gstrico (paciente deve estar em jejum de 8 a 10 horas)
Teste de Sensibilidade urina

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte 5 ml em tubo com anticoagulante SPS ou heparina ou em frasco de hemocultura manter e transportar temperatura ambiente de cavidade fechada: por puno frasco estril de cavidade aberta: com swab imerso em gua destilada ou salina manter e transportar temperatura ambiente de cavidade fechada: por puno frasco estril de cavidade aberta: com swab imerso em gua destilada ou salina manter e transportar temperatura ambiente Tempo crtico p/ chegada no Lacen
sangue, aspirado de medula ssea
Pesquisa de BAAR Baciloscopia pus ou secrees de cavidades CPIA NO CONTROLADA
at 24 horas aps a coleta os mesmos prazos da pgina anterior
TUBERCULOSE
Cultura NA Teste de Sensibilidade fragmentos cutneos, sseos e rgos (bipsia)
cepa para identificao e teste de sensibilidade
tubo com meio de cultura, vedado com tampa rosquevel manter e transportar temperatura ambiente
NA
Teste de sensibilidade automatizado: at 20 dias

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Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Patologia Exame/ metodologia Amostra biolgica Perodo ideal da coleta Acondicionamento/ volume/ temperatura de armazenamento e transporte frasco c/ caldo nutritivo manter e transportar temperatura ambiente antes do uso de antibitico CPIA NO CONTROLADA coleta no Lacen esfregao em lmina padronizada p/ IFD, embalada em papel alumnio acondicionar em porta-lmina manter e transportar temperatura ambiente swab estril, em tubo com 1,0 ml de salina estril para exame fresco esfregao em lmina de microscopia nova (confeccionar o esfregao no momento da coleta) swab em meio de transporte de Amies com carvo manter e transportar temperatura ambiente Tempo crtico p/ chegada no Lacen
URETRITE E CERVICITE NO GONOCCICA
Cultura para Ureaplasma e Micoplasma genitais Imunofluorescncia Direta IFD para pesquisa de Chlamydia trachomatis Microscopia a fresco e aps colorao pelo mtodo de Gram Cultura
raspado uretral e raspado endocervical
12 dias
VAGINITE E VAGINOSE BACTERIANA
secreo vaginal antes do uso de antibitico
coleta no Lacen
09 dias
NA No se aplica

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FOR RD 4.3 - 03
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Arquivo eletrnico POP RD 4.3.pdf
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Controle de alterao de documentos Codificao: MCT 01 Edio/Reviso: 01/02
Documento: Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas Alterado por: Marlei Pickler Debiasi dos Anjos Rita de Cssia Campos Bertoncini Data: 15/10/2012
HISTRICO DE MUDANAS
N do Captulo N da Pgina Sntese da Mudana Nova edio. Todo o procedimento foi alterado em funo de atualizaes referentes s constantes mudanas de procedimentos de coleta, armazenamento e transporte de amostras biolgicas. Incluso das amostras enviadas para Laboratrios de Referncia e Apoio Incluso de DOC MCT 01 - 01 onde so ordenadas alfabeticamente as patologias com informaes de exame realizado, amostra biolgica, perodo ideal de coleta, acondicionamento, volume, tempo de armazenamento e transporte, tempo crtico para chegada ao Lacen e prazo mximo para liberao de exames.
Todo o documento
todas
Anexo A
01
CPIA NO CONTROLADA
Anlise crtica de documento no alterado Este documento foi analisado criticamente e no houve necessidade de alteraes, ele continua vigente. NO SE APLICA ________________________________ Data/Assinatura do revisor
O campo de identificao da edio/reviso refere-se ao documento que est sendo revisado.

Coleta, Acondicionamento e Transporte de Amostras Biologicas

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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO

MANUAL DE ORIENTAO PARA COLETA, ACONDICIONAMENTO E TRANSPORTE DE AMOSTRAS BIOLGICAS

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EPI EPC BPA-I SINAN VE PCR IFI IFD TSB ACH NA 5

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Envio das amostras biolgicas ao Lacen

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Figura 1: Modelo de caixa para transporte de amostras biolgicas (caixa trmica)

Figura 2: Modelo do frasco com parede rgida

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Figura 3: Modelo de estante para transporte de tubos

Figura 6: : Modelo de frasco para transporte de lminas minas CPIA NO CONTROLADA

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Figura 7: coleta de secreo de nasofaringe

Figura 8: coleta de secreo de orofaringe

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